本發(fā)明涉及一種中藥提取方法，具體涉及一種高純度黃連堿的提取方法。屬于中藥提取技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

黃連堿是中藥黃連的特征性成分，是一種淺黃色針狀結(jié)晶(乙醇)，極略微溶于水，微溶于乙醇。黃連堿有抗微生物活性，其抗卡爾酵母菌的效力比小檗堿、巴馬汀以及非洲防己堿都強(qiáng)，其還有殺蟲(chóng)活性，誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞分化，對(duì)胃粘膜有保護(hù)作用，抗癌作用，平滑肌松弛作用以及抗腎炎作用等等。臨床實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，高純度的黃連堿安全性更高，一般的黃連堿粗品有可能導(dǎo)致肝功升高等安全性問(wèn)題。

但是現(xiàn)有的黃連堿提取工藝技術(shù)復(fù)雜，所得黃連堿的純度也不理想。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種高純度黃連堿的提取方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

一種高純度黃連堿的提取方法，具體步驟如下：

(1)將預(yù)處理的黃連加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升溫至35～45℃，浸泡處理12～24小時(shí)，黃連與硫酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：8～10mL；

(2)升溫至50～80℃，保溫提取2～3小時(shí)，提取2～3次，合并提取液，第一次過(guò)濾，所得第一濾液用氫氧化鈣調(diào)節(jié)至pH＝5～6，再進(jìn)行第二次過(guò)濾，得第二濾液和第二濾渣，后者用水洗滌2～3次，得第二洗滌液，并將第二洗滌液與第二濾液合并，減壓濃縮至原體積的1/10～1/15，得濃縮液；

(3)向濃縮液中加入0.2mol/L的鹽酸以及5～10g/mL的氯化鈉溶液，10～20℃放置50～80小時(shí)，第三次過(guò)濾，得第三濾液和第三濾渣，后者用水洗滌2～3次，得第三洗滌液，并將第三洗滌液和第三濾液合并；

(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和15～20w.t.％硫酸鉀溶液，充分?jǐn)嚢韬螅?0～20℃放置50～100小時(shí)，第四次過(guò)濾，得第四濾液和第四濾渣，后者用水洗滌2～3次，即為黃連堿粗品；

(5)將黃連堿粗品溶于體積比為1：2～3：0.4～0.6的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流20～30分鐘，然后降溫至-5～-8℃，靜置析晶，過(guò)濾，洗滌，干燥，即得高純度黃連堿，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：5～8mL。

優(yōu)選的，步驟(1)中黃連的預(yù)處理包括除去泥沙、粉碎或者切絲。

優(yōu)選的，步驟(5)中靜置析晶的時(shí)間為5～8小時(shí)。

優(yōu)選的，步驟(5)中的干燥條件為60～80℃干燥12～24小時(shí)。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明先將黃連于硫酸溶液中加熱浸泡處理，然后繼續(xù)升溫提取，經(jīng)過(guò)第一次過(guò)濾和第二次過(guò)濾，加入鹽酸以及氯化鈉溶液，處理一段時(shí)間后再進(jìn)行第三次過(guò)濾，接著用硫酸溶液和硫酸鉀溶液將黃連堿沉淀出來(lái)，最后用乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液進(jìn)行重結(jié)晶提純，可以高收率得到高純度的黃連堿。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步的闡述，應(yīng)該說(shuō)明的是，下述說(shuō)明僅是為了解釋本發(fā)明，并不對(duì)其內(nèi)容進(jìn)行限定。

實(shí)施例1：

一種高純度黃連堿的提取方法，具體步驟如下：

(1)黃連除去泥沙、粉碎或者切絲，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升溫至35℃，浸泡處理12小時(shí)，黃連與硫酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：8mL；

(2)升溫至50℃，保溫提取2小時(shí)，提取2次，合并提取液，第一次過(guò)濾，所得第一濾液用氫氧化鈣調(diào)節(jié)至pH＝5，再進(jìn)行第二次過(guò)濾，得第二濾液和第二濾渣，后者用水洗滌2次，得第二洗滌液，并將第二洗滌液與第二濾液合并，減壓濃縮至原體積的1/10，得濃縮液；

(3)向濃縮液中加入0.2mol/L的鹽酸以及5g/mL的氯化鈉溶液，10℃放置50小時(shí)，第三次過(guò)濾，得第三濾液和第三濾渣，后者用水洗滌2次，得第三洗滌液，并將第三洗滌液和第三濾液合并；

(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和15w.t.％硫酸鉀溶液，充分?jǐn)嚢韬螅?0℃放置50小時(shí)，第四次過(guò)濾，得第四濾液和第四濾渣，后者用水洗滌2次，即為黃連堿粗品；

(5)將黃連堿粗品溶于體積比為1：2：0.4的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流20分鐘，然后降溫至-5℃，靜置析晶5小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，60℃干燥12小時(shí)，即得高純度黃連堿，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：5mL。

實(shí)施例2：

一種高純度黃連堿的提取方法，具體步驟如下：

(1)黃連除去泥沙、粉碎或者切絲，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升溫至45℃，浸泡處理24小時(shí)，黃連與硫酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：10mL；

(2)升溫至80℃，保溫提取3小時(shí)，提取3次，合并提取液，第一次過(guò)濾，所得第一濾液用氫氧化鈣調(diào)節(jié)至pH＝6，再進(jìn)行第二次過(guò)濾，得第二濾液和第二濾渣，后者用水洗滌3次，得第二洗滌液，并將第二洗滌液與第二濾液合并，減壓濃縮至原體積的1/15，得濃縮液；

(3)向濃縮液中加入0.2mol/L的鹽酸以及10g/mL的氯化鈉溶液，20℃放置80小時(shí)，第三次過(guò)濾，得第三濾液和第三濾渣，后者用水洗滌3次，得第三洗滌液，并將第三洗滌液和第三濾液合并；

(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和20w.t.％硫酸鉀溶液，充分?jǐn)嚢韬螅?0℃放置100小時(shí)，第四次過(guò)濾，得第四濾液和第四濾渣，后者用水洗滌3次，即為黃連堿粗品；

(5)將黃連堿粗品溶于體積比為1：3：0.6的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流30分鐘，然后降溫至-8℃，靜置析晶8小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，80℃干燥24小時(shí)，即得高純度黃連堿，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：8mL。

實(shí)施例3：

一種高純度黃連堿的提取方法，具體步驟如下：

(1)黃連除去泥沙、粉碎或者切絲，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升溫至35℃，浸泡處理24小時(shí)，黃連與硫酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：8mL；

(2)升溫至80℃，保溫提取2小時(shí)，提取3次，合并提取液，第一次過(guò)濾，所得第一濾液用氫氧化鈣調(diào)節(jié)至pH＝5，再進(jìn)行第二次過(guò)濾，得第二濾液和第二濾渣，后者用水洗滌3次，得第二洗滌液，并將第二洗滌液與第二濾液合并，減壓濃縮至原體積的1/10，得濃縮液；

(3)向濃縮液中加入0.2mol/L的鹽酸以及10g/mL的氯化鈉溶液，10℃放置80小時(shí)，第三次過(guò)濾，得第三濾液和第三濾渣，后者用水洗滌2次，得第三洗滌液，并將第三洗滌液和第三濾液合并；

(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和20w.t.％硫酸鉀溶液，充分?jǐn)嚢韬螅?0℃放置100小時(shí)，第四次過(guò)濾，得第四濾液和第四濾渣，后者用水洗滌2次，即為黃連堿粗品；

(5)將黃連堿粗品溶于體積比為1：3：0.4的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流30分鐘，然后降溫至-5℃，靜置析晶8小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，60℃干燥24小時(shí)，即得高純度黃連堿，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：5mL。

實(shí)施例4：

一種高純度黃連堿的提取方法，具體步驟如下：

(1)黃連除去泥沙、粉碎或者切絲，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升溫至45℃，浸泡處理12小時(shí)，黃連與硫酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：10mL；

(2)升溫至50℃，保溫提取3小時(shí)，提取2次，合并提取液，第一次過(guò)濾，所得第一濾液用氫氧化鈣調(diào)節(jié)至pH＝6，再進(jìn)行第二次過(guò)濾，得第二濾液和第二濾渣，后者用水洗滌2次，得第二洗滌液，并將第二洗滌液與第二濾液合并，減壓濃縮至原體積的1/15，得濃縮液；

(3)向濃縮液中加入0.2mol/L的鹽酸以及5g/mL的氯化鈉溶液，20℃放置50小時(shí)，第三次過(guò)濾，得第三濾液和第三濾渣，后者用水洗滌3次，得第三洗滌液，并將第三洗滌液和第三濾液合并；

(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和15w.t.％硫酸鉀溶液，充分?jǐn)嚢韬螅?0℃放置50小時(shí)，第四次過(guò)濾，得第四濾液和第四濾渣，后者用水洗滌3次，即為黃連堿粗品；

(5)將黃連堿粗品溶于體積比為1：2：0.6的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流20分鐘，然后降溫至-8℃，靜置析晶5小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，80℃干燥12小時(shí)，即得高純度黃連堿，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：8mL。

實(shí)施例5：

一種高純度黃連堿的提取方法，具體步驟如下：

(1)黃連除去泥沙、粉碎或者切絲，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，升溫至40℃，浸泡處理18小時(shí)，黃連與硫酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：9mL；

(2)升溫至60℃，保溫提取2.5小時(shí)，提取2次，合并提取液，第一次過(guò)濾，所得第一濾液用氫氧化鈣調(diào)節(jié)至pH＝5，再進(jìn)行第二次過(guò)濾，得第二濾液和第二濾渣，后者用水洗滌2次，得第二洗滌液，并將第二洗滌液與第二濾液合并，減壓濃縮至原體積的1/12，得濃縮液；

(3)向濃縮液中加入0.2mol/L的鹽酸以及8g/mL的氯化鈉溶液，15℃放置60小時(shí)，第三次過(guò)濾，得第三濾液和第三濾渣，后者用水洗滌2次，得第三洗滌液，并將第三洗滌液和第三濾液合并；

(4)加入0.1mol/L硫酸溶液和18w.t.％硫酸鉀溶液，充分?jǐn)嚢韬螅?5℃放置80小時(shí)，第四次過(guò)濾，得第四濾液和第四濾渣，后者用水洗滌3次，即為黃連堿粗品；

(5)將黃連堿粗品溶于體積比為1：2.5：0.5的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流25分鐘，然后降溫至-6℃，靜置析晶6小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，70℃干燥18小時(shí)，即得高純度黃連堿，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：6mL。

對(duì)比例1

一種黃連堿的提取方法，步驟(5)的方法是：將黃連堿粗品溶于體積比為1：2.5的乙醇-水混合溶液中，加熱回流25分鐘，然后降溫至-6℃，靜置析晶6小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，70℃干燥18小時(shí)，即得，其中，黃連堿粗品與乙醇-水混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：6mL。其余同實(shí)施例5。

對(duì)比例2

一種黃連堿的提取方法，步驟(5)的方法是：將黃連堿粗品溶于體積比為1：2.5：1的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流25分鐘，然后降溫至-6℃，靜置析晶6小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，70℃干燥18小時(shí)，即得，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：6mL。其余同實(shí)施例5。

對(duì)比例3

一種黃連堿的提取方法，步驟(5)的方法是：將黃連堿粗品溶于體積比為1：2.5：0.4的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中，加熱回流25分鐘，然后降溫至-6℃，靜置析晶6小時(shí)，過(guò)濾，洗滌，70℃干燥18小時(shí)，即得，其中，黃連堿粗品與乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液的質(zhì)量體積比為1g：6mL。其余同實(shí)施例5。

對(duì)比例4

一種黃連堿的提取方法，步驟(1)的方法是：黃連除去泥沙、粉碎或者切絲，加入提取釜中，然后加入0.1mol/L硫酸溶液，浸泡處理18小時(shí)，黃連與硫酸溶液的質(zhì)量體積比為1g：9mL。其余同實(shí)施例5。

試驗(yàn)例

通過(guò)HPLC檢測(cè)實(shí)施例1～5以及對(duì)比例1～4最終所得黃連堿產(chǎn)品中黃連堿的實(shí)際含量，即產(chǎn)品純度，并計(jì)算黃連堿收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1.黃連堿產(chǎn)品純度

從表1可以看出，實(shí)施例1～5的黃連堿收率高，產(chǎn)品中黃連堿含量也高，而對(duì)比例1使用了乙醇-水混合溶液進(jìn)行重結(jié)晶，對(duì)比例2和對(duì)比例3使用的乙醇-水-乙酸乙酯混合溶液中乙酸乙酯的含量分別偏高或偏低，所得產(chǎn)品的純度明顯偏低，說(shuō)明本發(fā)明使用的重結(jié)晶溶劑提純效果更佳；對(duì)比例4直接用硫酸溶液浸泡(不加熱)，所得產(chǎn)品的收率明顯偏低，說(shuō)明有效成分提取不充分。

上述雖然對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行了描述，但并非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，在本發(fā)明的技術(shù)方案的基礎(chǔ)上，本領(lǐng)域技術(shù)人員不需要付出創(chuàng)造性勞動(dòng)即可做出的各種修改或變形仍在本發(fā)明的保護(hù)范圍以?xún)?nèi)。