本發(fā)明屬于植物活性成分提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及新資源食品金花茶成分的提取技術(shù)，特別涉及到金花茶功能活性成分的提取方法。

背景技術(shù)：

金花茶[Camellia nitidissima Chi]屬山茶科(Theaceae)山茶屬(Camellia)金花茶組植物(Camellia Section Chrysantha Chang)，是山茶花家族中唯一具有金黃色花瓣的品種，被譽(yù)為“茶族皇后”、“植物界大熊貓”等，已被列為國(guó)家一級(jí)、世界二級(jí)珍稀保護(hù)植物，并于2010年被我國(guó)衛(wèi)生部第9號(hào)公告列為新資源食品。金花茶花和葉為廣西壯族民間傳統(tǒng)用藥，具有較高的藥用價(jià)值，《廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)》記載，金花茶的性味為微苦，澀，平，功能與主治為清熱解毒、利尿消腫，用于咽喉炎、痢疾、腎炎、高血壓、月經(jīng)不調(diào)等。金花茶葉中含有多種有效藥用成分，藥理學(xué)研究證明具有抗菌消炎，抗氧化，抗腫瘤，降血脂，降血糖，抗過(guò)敏，抗焦慮抑郁等功能，其中金花茶多糖是一種研究較多的天然活性成分，其在藥物方面的應(yīng)用具有較好的應(yīng)用前景，因此活性成分的提取分離成為一項(xiàng)技術(shù)難題。

近些年來(lái)，許多國(guó)內(nèi)外學(xué)者不斷對(duì)植物有效活性成分提取的工藝進(jìn)行摸索和優(yōu)化，一些新的提取和分離技術(shù)不斷的涌現(xiàn)出現(xiàn)，如微波、超聲波、超臨界等，雖然這些新技術(shù)比傳統(tǒng)技術(shù)有顯著的進(jìn)步，但有效成分水溶性差、利用度低的問(wèn)題還沒(méi)有從根本上得到解決，而且有些技術(shù)由于設(shè)備特殊，也僅限于實(shí)驗(yàn)室研究，而不能應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)實(shí)踐?？梢?jiàn)，提取技術(shù)的不完善一直是制約著植物有效活性成分更深入研究以及開(kāi)發(fā)和應(yīng)用的關(guān)鍵問(wèn)題。因此，提高有效成分的提取效率，降低成本，提高技術(shù)成熟度從而達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)的新技術(shù)的開(kāi)發(fā)迫在眉睫。微切助互作方式作為近年來(lái)高效提取動(dòng)植物活性成分的新方法，其基本原理是：動(dòng)植物原料顆粒團(tuán)經(jīng)過(guò)微切變細(xì)胞破碎，細(xì)胞表面產(chǎn)生新鮮切面，助劑與有效成分之間發(fā)生基團(tuán)或分子間的相互吸附或作用，改變有效成分的微觀性能，表面能增加，比表面積增大，吸附性和極性增加，通過(guò)微切助互作方式處理后得到的微切助粉在水中的溶解性大大提高。發(fā)明專(zhuān)利：一種用于植物有效成分提取方法，授權(quán)專(zhuān)利號(hào)：ZL200510130852.3，其主要的技術(shù)方案是將被提取的植物原料粉碎，向植物粗粉中添加0.5-20％固體堿、固體酸、蔗糖或鹽類(lèi)化合物粉末的化學(xué)助劑，以及脆性或銳性的惰性材料一起進(jìn)行處理，選用水或乙醇溶解處理產(chǎn)物，分離收集可溶性組份獲得有效成分。因此，植物活性成分提取效率低，消耗時(shí)間長(zhǎng)等是亟待解決的問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供金花茶葉多糖提取新技術(shù)即超聲輔助微切助互作方式提取金花茶多糖，目的是提供一種從金花茶中提高多糖溶出度的新方法。該技術(shù)綜合利用超聲技術(shù)與微切助互作方式的有效結(jié)合提高金花茶提取物提取率及多糖含量，減少有機(jī)溶劑的消耗量，改善存在的環(huán)境污染問(wèn)題。

具體的，本發(fā)明所述采用微切助互作方式提高金花茶提取物多糖溶出的方法，以金花茶葉為原料，包括以下步驟：

(1)取金花茶鮮葉，洗凈，微波高溫殺青，真空條件干燥，接著將干燥后的金花茶葉粉碎，過(guò)60～200目篩，得金花茶葉粉；

(2)將金花茶葉粉和物理助劑按質(zhì)量百分比1％～4％放入振動(dòng)磨中進(jìn)行研磨10min，得微切助粉；

(3)將微切助粉和水按料液比1g:15ml充分混合，在頻率為40KHz、功率為100W、溫度為70℃的超聲波作用下超聲提取30min，過(guò)濾提取液，收集得濾液；

(4)將濾液通過(guò)真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，回收提取劑-水，得到金花茶葉水提取物干粉；

(5)將金花茶葉干粉配制成一定濃度的待測(cè)溶液，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，采用苯酚-硫酸比色法對(duì)提取物中多糖含量進(jìn)行檢測(cè)。

本發(fā)明作為金花茶多糖提取新技術(shù)，能夠有效提取金花茶提取物及多糖含量，20g原材料能得到提取物3.65g～3.95g，與傳統(tǒng)提取方法相比提高1.93倍，多糖含量達(dá)到130.52mg/g～150.67mg/g，與傳統(tǒng)提取方法相比提高2.55倍。利用超聲輔助提取，由原來(lái)的浸泡24h縮短為30min，大大減少多糖溶出時(shí)間，節(jié)省操作時(shí)間，提高提取效率。微切助互作方式的使用，使得多糖的溶出度提高且有效保護(hù)多糖的完整性，大大提高了多糖的提取率。本發(fā)明工藝作簡(jiǎn)單，節(jié)省成本，更有利于工業(yè)化。

附圖說(shuō)明

圖1是不同粉碎處理的金花茶葉顆粒粒徑分布圖。

圖2A是60目篩金花茶葉顆粒掃描電鏡圖。

圖2B是200目篩金花茶葉顆粒掃描電鏡圖。

圖2C是微切處理金花茶葉顆粒掃描電鏡圖。

圖2D是微切助處理金花茶葉顆粒掃描電鏡圖。

圖3是不同粉碎處理金花茶葉提取物提取率圖。

圖4A是葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)圖。

圖4B是不同粉碎處理金花茶葉提取物中多糖含量圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合技術(shù)方案和附圖1-4B詳細(xì)敘述本發(fā)明的具體實(shí)施例。

實(shí)施例1

采用微切助互作方式提高金花茶提取物多糖溶出度的方法，以金花茶葉為原料，包括以下步驟：

(1)取金花茶鮮葉，洗凈，微波高溫殺青，真空條件干燥，接著將干燥后的金花茶葉粉碎，過(guò)60目篩，得金花茶葉粉；

(2)取金花茶葉60目粉20g，按料液比1g:15ml加300mL水充分混合，在頻率為40KHz、功率為100W、溫度為70℃的超聲波作用下超聲提取30min，過(guò)濾提取液，收集得濾液；

(4)將濾液通過(guò)真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，回收提取劑-水，得到金花茶葉水提取物干粉；

(5)將金花茶葉干粉配制成一定濃度的待測(cè)溶液，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，采用苯酚-硫酸比色法對(duì)提取物中多糖含量進(jìn)行檢測(cè)。

實(shí)施例2

采用微切助互作方式提高金花茶提取物多糖溶出度的方法，以金花茶葉為原料，包括以下步驟：

(1)取金花茶鮮葉，洗凈，微波高溫殺青，真空條件干燥，接著將干燥后的金花茶葉粉碎，過(guò)200目篩，得金花茶葉粉；

(2)取金花茶葉200目粉20g，按料液比1g:15ml加300mL水充分混合，在頻率為40KHz、功率為100W、溫度為70℃的超聲波作用下超聲提取30min，過(guò)濾提取液，收集得濾液；

(4)將濾液通過(guò)真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，回收提取劑-水，得到金花茶葉水提取物干粉；

(5)將金花茶葉干粉配制成一定濃度的待測(cè)溶液，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，采用苯酚-硫酸比色法對(duì)提取物中多糖含量進(jìn)行檢測(cè)。

實(shí)施例3

采用微切助互作方式提高金花茶提取物多糖溶出度的方法，以金花茶葉為原料，包括以下步驟：

(1)取金花茶鮮葉，洗凈，微波高溫殺青，真空條件干燥，接著將干燥后的金花茶葉粉碎，過(guò)60目篩，得金花茶葉粉；

(2)取金花茶葉粉60目粉500g，放入振動(dòng)磨中進(jìn)行研磨10min，得微切粉；

(3)取金花茶葉微切粉20g，按料液比1g:15ml加300mL水充分混合，在頻率為40KHz、功率為100W、溫度為70℃的超聲波作用下超聲提取30min，過(guò)濾提取液，收集得濾液；

(4)將濾液通過(guò)真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，回收提取劑-水，得到金花茶葉水提取物干粉；

(5)將金花茶葉干粉配制成一定濃度的待測(cè)溶液，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，采用苯酚-硫酸比色法對(duì)提取物中多糖含量進(jìn)行檢測(cè)。

實(shí)施例4

采用微切助互作方式提高金花茶提取物多糖溶出度的方法，以金花茶葉為原料，包括以下步驟：

(1)取金花茶鮮葉，洗凈，微波高溫殺青，真空條件干燥，接著將干燥后的金花茶葉粉碎，過(guò)60目篩，得金花茶葉粉；

(2)取金花茶葉粉60目粉500g，按質(zhì)量百分比2％加入物理助劑5g，放入振動(dòng)磨中進(jìn)行研磨10min，得微切助粉；

(3)取金花茶葉微切助粉20g，按料液比1g:15ml加300mL水充分混合，在頻率為40KHz、功率為100W、溫度為70℃的超聲波作用下超聲提取30min，過(guò)濾提取液，收集得濾液；

(4)將濾液通過(guò)真空冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥，回收提取劑-水，得到金花茶葉水提取物干粉；

(5)將金花茶葉干粉配制成一定濃度的待測(cè)溶液，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品，采用苯酚-硫酸比色法對(duì)提取物中多糖含量進(jìn)行檢測(cè)。