本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)資源利用技術(shù)領(lǐng)域。涉及一種從油茶籽仁中提取油茶籽油與油茶皂素及與油茶籽粕飼料的方法。
背景技術(shù)：
油茶籽(Oil-Camellia seed)是中國特有的木本油料。主產(chǎn)于湖南、江西、廣西等省區(qū)，全國常年產(chǎn)油茶籽60—80萬噸。油茶籽含油量為18%—35%，油茶籽油中油酸含量在74%—85%之間，高于橄欖油，未精煉的油茶籽油中含有豐富的類胡蘿卜素、油茶皂甙、茶多酚、角鯊烯及油溶性維生素等功能性成分。油茶籽中含有6%—11%蛋白質(zhì)，其中必需氨基酸含量豐富，可作為飼料蛋白。油茶籽中還含有10%—15%油茶皂素。油茶皂素是一種天然的非離子表面活性劑，易溶于熱水和乙醇。廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、日化、農(nóng)藥等行業(yè)。因此，油茶籽為有極高利用價值的自然資源。
目前，我國油茶籽的加工普遍采用高溫蒸炒與壓榨-有機溶劑浸出的提取模式，所提取的油茶籽油根據(jù)毛油的質(zhì)量與對成品油的質(zhì)量要求，采取物理與化學(xué)方法對其進行不同程度的精煉，以獲得不同等級的油茶籽油產(chǎn)品。從油茶籽到油茶籽油的加工步驟是：
1）整粒油茶籽（帶殼）經(jīng)粉碎、蒸炒與壓榨提取油茶籽油，其過程中溫度在110℃—140℃，我國絕大部份的油茶籽是在農(nóng)村產(chǎn)地的小型油茶籽加工廠完成，僅少部分在規(guī)模較大的油茶籽加工企業(yè)中完成。采用這一種方法提取的油茶籽油相對來說對油中的營養(yǎng)成份有一定的破壞作用，但大部分的功能性成份會隨著壓榨過程進入了油茶籽油中，油的質(zhì)量也比較好，只要進行適度的精煉就可以成為合格的食用油茶籽油，并能基本保持油茶籽油特有的清香味。而且這種加工方法工藝簡單、投資比較少，比較適合于產(chǎn)地小企業(yè)。目前在農(nóng)村市場銷售的散裝油茶籽油一般是采用這種生產(chǎn)工藝。這種方法的缺點是餅粕中殘油率高達5%—7%，高溫高壓使茶籽蛋白質(zhì)變性嚴重，降低了蛋白質(zhì)的應(yīng)用價值，同時在壓榨過程中某些功能性成份發(fā)生了降解與聚合，使其提取難度增加，利用價值降低。另外，在高溫條件下帶殼制油容易產(chǎn)生強致癌物3-4苯并芘，成為目前油茶籽油食用安全的最大隱患。
2）利用土榨或機榨油茶籽餅提取油茶籽油：具有溶劑浸出能力的加工廠將農(nóng)村分散壓榨的油茶籽餅收購過來，集中用6號溶劑提取油茶籽餅中的殘油，可以將其中的殘油降低至2%左右，其特點是充分利用了油茶籽油資源，生產(chǎn)效率比較高。但是所獲得的毛油中含有有機溶劑殘留成份和較多的其他非油成份，而且從農(nóng)村分散收購的壓榨油茶籽餅，在貯存與運輸過程中容易發(fā)生霉變而產(chǎn)生有害物質(zhì)，這些物質(zhì)也會隨著浸出過程進入到毛茶油中，因此浸出茶油必需進行嚴格的精煉后才能食用。毛茶油在精煉過后雖然可以提高油的質(zhì)量，但會造成油的損失，浪費寶貴的油茶籽油資源，也會去掉大部分溶于油中的功能性成份，大大降低了油茶籽油的營養(yǎng)價值與保健功能。另外，浸出油茶籽粕含殼量高達50%以上，并含有15%左右的油茶皂素，嚴重影響了動物的消化功能與適口性，因此不能直接作為飼料使用，故造成大量優(yōu)質(zhì)植物蛋白的浪費。由于油茶皂素具有殺菌作用，可破壞土壤微生物環(huán)境，而使作物不能吸收營養(yǎng)成份而死亡，故不能直接用作肥料，只能作為飼養(yǎng)對蝦的清塘劑。因此，傳統(tǒng)的“高溫蒸炒與壓榨-有機溶劑浸出-物理與化學(xué)精煉”的油茶籽加工模式既不能獲得高品質(zhì)的原生態(tài)、高營養(yǎng)的油茶籽油，也不能充分利用油茶籽中的茶籽蛋白與油茶皂素等優(yōu)質(zhì)資源。
水代法與水酶法提取油茶籽油是近20年來發(fā)展的、以水為提取介質(zhì)，或者以水為主輔以酶的作用從油茶籽仁漿中提取油茶籽油的技術(shù)。兩法的提取過程條件溫和，可直接獲得高品質(zhì)原生態(tài)油茶籽油，但由于表面活性劑油茶皂素的存在，在提取過程中如果條件控制不好可引起油的乳化，會對油的提取率有一定的影響，另外提取過程中產(chǎn)生了大量的水相即工藝水，其中含有如蛋白質(zhì)、油茶皂素、多糖、黃酮等功能成分，直接排放會對環(huán)境造成污染，如果進行處理成本較高，尤其是其中所含的4%左右的油茶皂素，進入污水處理廠可以破壞生化反應(yīng)池中的微生物種群，降低水處理的效果，特別是對油茶皂素的降解作用不明顯，往往在污水處理廠內(nèi)與排水口出現(xiàn)白色的泡沫，不同程度地制約了水代法與水酶法技術(shù)在油茶籽加工中的應(yīng)用。
如何利用水代法與水酶法提取油茶籽油，同時又能夠充分提取出油茶籽仁漿中的油茶皂素，使油茶籽粕中最終油茶皂素含量降低到不影響畜禽適口性的水平；采用何種方法將油茶皂素、多糖、黃酮等成分從工藝水中分離出，使工藝水得以循環(huán)使用，實現(xiàn)提取過程中無廢水排放，成為水代法與水酶法提取油茶籽油必需解決的技術(shù)難題。
目前，已經(jīng)報道有關(guān)從油茶籽提取油脂和油茶皂素的研究有：張衛(wèi)國(CN101569329)提出先用乙醇從油茶籽料中提取油茶皂素，然后采用水酶法從回收了乙醇的茶籽殘渣中提取油茶籽油，此方法雖然提取出了油茶皂素，但未提及水酶法提油茶籽油過程中產(chǎn)生的大量工藝水的處理方法。
劉倩茹, 李愛科, 欒霞, 王瑛瑤, 馬榕等人（CN101906350A）提出粉碎研磨后的油茶籽仁與水的質(zhì)量體積比為1kg∶2—8L，控制體系溫度為30℃—60℃；調(diào)節(jié)pH值3.5—8.0，加入油茶籽仁重量0.1％—2％的果膠酶，酶解2-5小時；離心分離得到清油、液相及殘渣三相，液相經(jīng)噴霧干燥得到含有皂甙及糖類的活性物質(zhì)。該方法不僅設(shè)備投資大、能耗高，而且果膠酶的耗量較大。
楊瑞金，張文斌，李強，華霄，趙偉等人（CN102250681A）將粉碎的油茶籽仁與3—6重量份水和0.4—0.8重量份醇溶液混合成體積百分濃度10 %—25 %的混合物，在 40—70℃與pH7—pH10的條件下提取0.5—2h，然后離心分離得到油相、水相和殘渣相；殘渣相用5—10重量份水在溫度40—70℃的條件下浸提0.5—3h后，離心分離得到水相和渣相,按此方法重復(fù)浸提渣相2—4次。然后將所有水相合并，再加絮凝劑KAl(SO4)2·12Η2O沉淀除雜質(zhì),然后將水相濃縮后，加入3-5體積乙醇溶液進行沉淀，離心分離所得的液相，經(jīng)回收乙醇并脫水干燥得到粗茶皂素。該方法中醇水液直接提取油茶籽油會明顯影響油茶籽油的清香味，這一點對于居住在油茶籽產(chǎn)區(qū)、喜歡油茶籽油獨特風(fēng)味的消費者尤其重要。由于乙醇溶液對油茶籽仁中油溶性功能成份有一定的溶解性，會使其中部分功能成份進入水相，而在油中的溶解量降低，最終造成油茶籽油中的功能性營養(yǎng)成分降低。另外，液相的濃縮與干燥需要消耗較多的能源。
王金元，費學(xué)謙，羅凡，陳焱等在（中國油脂，2012 Vol. 37 No. 4）中提出本研究以油茶籽水酶法提油之后的水相為原料，經(jīng)殼聚糖絮凝、氧化鈣沉淀、碳酸氫銨釋放這幾個環(huán)節(jié)最終得到油茶皂素。油茶皂素純度為80.25%。雖然此工藝在一定程度上解決了油茶皂素的濃縮問題，但工藝復(fù)雜，處理后的水相中存在少量的鈣離子，會影響水酶法油茶籽油的質(zhì)量，達不到水相循環(huán)利用的目的。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種從油茶籽仁中提取油茶籽油和油茶皂素，并獲得油茶籽粕飼料的方法。
為了達到上述目的，本發(fā)明提供的技術(shù)方案為：
所述從油茶籽仁中提取油茶籽油與油茶皂素及油茶籽粕飼料的方法包括如下步驟：
（1）將油茶籽仁研磨成漿，向油茶籽仁漿中加水，加水量為油茶籽仁重量的1.5-5倍，優(yōu)選為1.5-3倍，更優(yōu)選為1.9-2.2倍，更優(yōu)選為1.9倍。在30-90℃，優(yōu)選為70-90℃，更優(yōu)選為80-90℃條件下提取1.5-3.5h，優(yōu)選為3h，離心分離后得到粗茶籽油、工藝水和A濕渣；
（2）用醇水液在50-75℃條件下浸提A濕渣0.5-3h，分離得到A醇水液和B濕渣；
（3）將步驟（2）所得的B濕渣在50-75℃條件下用醇水液浸提0.5-3h，分離得到B醇水液和C濕渣；將B醇水液返回至A濕渣用作提取A濕渣的醇水液，并重復(fù)步驟（2）；
（4）將C濕渣加入體積百分比濃度為70%-95%的乙醇，乙醇加入量為C濕渣體積的2—5倍，在50—75℃條件下提取0.5—3.0h，壓濾分離得到C醇水液和D濕渣；將C醇水液返回至B濕渣用作提取B濕渣的醇水液，并重復(fù)步驟（3）；
（5）將D濕渣在溫度60—90℃與真空度0.07—0.099 MPa的條件下進行蒸發(fā)回收乙醇，并脫水干燥，獲得蛋白質(zhì)含量在10%—14%，優(yōu)選為12%的油茶籽粕飼料；
（6）將步驟（1）所得工藝水與步驟（2）所得A醇水液混合后，在50—75℃條件下醇沉1—4h，然后進行離心分離，得到E濕渣、A液相和油相；A液相為不含機械雜質(zhì)，除去了蛋白質(zhì)、淀粉、糊精等成份，而富含油茶皂素的清液；將E濕渣返回A濕渣并重復(fù)步驟（2）；將油相脫醇后加入粗茶籽油中，去雜脫水后得到純天然的原生態(tài)油茶籽油，得油率在93%—95％；
（7）將A液相于-18~0℃，優(yōu)選為-10~14℃，更優(yōu)選為-12℃條件下冷卻2—48h，優(yōu)選為24h，油茶皂素在冷的醇水溶液中溶解度降低，隨著低溫的持續(xù)，油茶皂素會結(jié)晶析出，由此分離出固相（油茶皂素）與B液相；固相在70—90℃，優(yōu)選為80℃,真空度0.07—0.099 MPa條件下脫醇并干燥后得到粗茶皂素（含油茶皂素60%）；
（8）將B液相在溫度50—65℃、優(yōu)選為60—65℃，真空度0.07—0.099 MPa，優(yōu)選為真空度0.08—0.099 MPa條件下蒸發(fā)去除乙醇后回收，用作步驟（1）中加入到油茶籽仁漿的水（即為除掉了大部分油茶皂素、黃酮與多糖等成份，可以用于提取油茶籽油的再生水）；也就是說，回收的水按照步驟（1）所需要的總加水量要求補充部分新鮮軟水到再生水中，成為步驟（1）中的提取用水，實現(xiàn)提取過程中水的循環(huán)使用，無廢水排放。
另外，步驟（1）中用水提取油茶籽油時還可加入酶制劑，酶制劑的加入量為茶油籽仁漿重量的0.06%—0.5%，加入酶制劑時，提取溫度可以是30—90℃。所述的酶制劑為蛋白質(zhì)酶、纖維素酶、淀粉酶、果膠酶中的至少一種。所述油茶籽仁漿細度為20—50μm，優(yōu)選為20—30μm。
上述的醇水液即為乙醇溶液。
本發(fā)明中原料為油茶籽仁經(jīng)脫殼與研磨后細度達到20μm—50μm的油茶籽仁漿，由于油茶籽仁漿中絕大部分細胞壁及細胞膜已被破壞，其中所包裹的解脂酶被釋放出來，會迅速作用于甘油三酯，將其降解為游離脂肪酸與甘油，使所提取的粗油酸價升高，嚴重的需要再對毛油進行堿煉脫酸處理，必然會導(dǎo)致油脂得率下降，因此要迅速加入熱水（包括再生水），在一定溫度條件下提取，再進行離心分離，分別得到粗茶籽油、工藝水和A濕渣。在本發(fā)明步驟（1）中所述的水指軟水與部分再生水所組成的液體。水的添加量直接影響油的提取效果，加水量過少，提取液粘度大，流動性差，分離效果差，清油得率低；加水過多則容易發(fā)生乳化，清油得率亦低，并且加水多會導(dǎo)致步驟（5）的醇沉效果差，本發(fā)明根據(jù)仁漿中含油量加入水的比例為油茶籽仁漿的1.5—5倍，優(yōu)選為1.5—3倍，更優(yōu)選為1.9—2.2倍，更優(yōu)選為1.9倍。
本發(fā)明中步驟（1）為了更好地破壞油茶籽細胞或者改善提取過程的物理性能，可選擇加入0.06%—0.5%的酶制劑，所述的酶制劑是蛋白質(zhì)酶、纖維素酶、淀粉酶、果膠酶或者由多種酶所組成的混合酶。加入酶制劑時可在30—90℃條件下提取，不添加酶制劑時則優(yōu)選在70—90℃條件下提取。
本發(fā)明中步驟（1）提取過程中溫度對提取效果影響較大。溫度過低會造成乳化現(xiàn)象，而且液相粘度比較高影響油、水、渣三相的分離效果，清油得率低；但溫度過高會造成油脂的氧化和粗油色澤的加深。本發(fā)明所述的優(yōu)選條件是提取溫度為80℃—85℃，提取時間為3.0—3.5 h。在本發(fā)明中所述水提取時所使用的設(shè)備是在食品、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域所通常使用的帶有調(diào)速裝置的各種提取罐，在本發(fā)明中使用上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。本發(fā)明方法進行離心分離時所使用的離心機是二相或三相沉降（螺旋卸料）式離心機以及碟式離心機，在本發(fā)明中，所述的沉降離心機離心分離的轉(zhuǎn)速為2000—4500轉(zhuǎn)/分，碟式離心機的轉(zhuǎn)速為5000—11000轉(zhuǎn)/分。本發(fā)明中所使用的離心機如上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)的離心機，轉(zhuǎn)速4000轉(zhuǎn)/分；四川岷山機械廠生產(chǎn)的牛奶分離器，轉(zhuǎn)速11000轉(zhuǎn)/分等。所述在步驟A）得到的毛油的處理方法是，在毛油中加入熱水?dāng)嚢柘礈?，然后采用碟式離心機分離去雜，真空脫水得到油茶籽油成品。
步驟（2）中所使用的提取設(shè)備是目前市場上銷售的封密式防爆型提取罐，以防止乙醇揮發(fā)，增加損耗，避免安全事故發(fā)生。在這個步驟中所使用的離心分離設(shè)備是在食品、制藥、化工上所通常使用的密閉型設(shè)備。以防止離心機在高速運行時乙醇的揮發(fā)。
步驟（3）中所使用的提取設(shè)備是市場上銷售的封密式防爆型提取罐。在這個步驟所使用的離心分離設(shè)備是通常使用在食品、制藥、化工行業(yè)的密閉型離心機，或者封密型壓濾機。在本發(fā)明中所用的壓濾設(shè)備是上海信步科技有限公司銷售的實驗室小型壓濾器。
步驟（4）所述壓濾分離方法與步驟（3）相同，均為密封防爆型壓濾機。所述的從步驟（2）至步驟（4）采用逆相浸出原則，不僅節(jié)省了乙醇用量，也使步驟（2）得到更高含量的油茶皂素液。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：
1.本發(fā)明方法中,在步驟（1）采用了水提法提取油茶籽仁中大部分油茶籽油，約占總得油的98%，這樣既保證了所提油茶籽油的風(fēng)味不被破壞，維生素E、類胡蘿卜素、角鯊烯脂溶性功能性成份不會進入水相，仍保留在油茶籽油中，同時又提取出了仁漿中的水溶性油茶皂素。
2.本發(fā)明方法中,在步驟（2）到步驟（4）全部采用乙醇溶液作為提取液，并采用逆向提取方式用從低到高濃度的乙醇液提取殘渣中的油茶皂素。殘渣為油茶籽粕飼料。由于油茶皂素在含水乙醇中的溶解度高于水溶液，因此可以顯著提高油茶皂素的提取效率，有利于迅速降低濕渣中油茶皂素的含量。
3.本發(fā)明方法中，在步驟（5）利用從步驟（2）分離所得的油茶皂素醇水液，作為醇沉劑加入步驟（1）分離所得到的油茶皂素液中，降低了淀粉、糊精、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)在溶液中的溶解性能，使其中的雜質(zhì)沉淀被去除，而得到澄清液。實際上在步驟（2）中所用的從步驟（3）分離得到的油茶皂素醇水液，既是步驟（2）的提取用液，又是步驟（5）的醇沉劑，這樣不僅減少提取液的用量，節(jié)省了提取液的處理成本，也增加了分離液中油茶皂素的總量。
4.本發(fā)明方法中在步驟（6）中，將步驟（5）所分離得到的澄清液通過冷卻到0℃以下，使油茶皂素等成分，因溶解度下降而沉淀析出，并通過過濾或者離心方法分離得到較高濃度的油茶皂素漿和醇水液，既富集了油茶皂素，又為獲得更高純度的油茶皂素和進一步綜合利用其中的成份創(chuàng)造了條件。與傳統(tǒng)的方法比較，不僅大大節(jié)省了處理成本。也使為醇水液的再生循環(huán)使用創(chuàng)造了條件。
5.本發(fā)明方法中在步驟（7）中，將在步驟（6）中分離得到的醇水液通過減壓回收乙醇，得到可用于下輪提取油茶籽油所使用的再生水，真正實現(xiàn)了提取過程無廢水排放的目的。
總之，本發(fā)明方法先用水相提取油茶籽油，然后用逆向提取方式用從低到高濃度的乙醇液提取殘渣中的油茶皂素與黃酮等成分。剩余殘渣為油茶籽粕飼料。本發(fā)明方法的提油率可以達到93%—95％，粗油茶皂素的純度達到60％以上，并且可以根據(jù)需要繼續(xù)提高其含量。油茶籽油不僅能保持其特有的清香味，而且油茶籽仁中的維生素E、類胡蘿卜素、角鯊烯等脂溶性成份能被充分地保留在油茶籽油中。本發(fā)明所使用的乙醇為食品級，安全無毒，可回收重復(fù)利用，而且所用的提取水可再生循環(huán)使用，沒有污水的排放，具有非常廣泛的生產(chǎn)應(yīng)用前景。
具體實施方式
實施例1
所述從油茶籽仁中提取油茶籽油與油茶皂素及油茶籽粕飼料的方法包括如下步驟：
（1）將油茶籽仁研磨成漿，向油茶籽仁漿中加水，加水量為油茶籽仁重量的1.5—5倍，優(yōu)選為1.5—3倍，更優(yōu)選為1.9—2.2倍，更優(yōu)選為1.9倍，在70—90℃，更優(yōu)選為80—90℃條件下提取1.5—3.5h，優(yōu)選為3h，離心分離后得到粗茶籽油、工藝水和A濕渣；
（2）用醇水液在50—73℃條件下浸提A濕渣0.5—3h，分離得到A醇水液和B濕渣；
（3）將步驟（2）所得的B濕渣在50—75℃條件下用醇水液浸提0.5—3h，分離得到B醇水液和C濕渣；將B醇水液返回至A濕渣用作提取A濕渣的醇水液，并重復(fù)步驟（2）；
（4）將C濕渣加入體積百分比濃度為70%—95%的乙醇，乙醇加入量為C濕渣體積的2—5倍，在50—75℃條件下提取0.5—3.0h，壓濾分離得到C醇水液和D濕渣；將C醇水液返回至B濕渣用作提取B濕渣的醇水液，并重復(fù)步驟（3）；
（5）將D濕渣在溫度60—90℃與真空度0.07—0.099 MPa的條件下進行蒸發(fā)回收乙醇，并脫水干燥，獲得油茶皂素含量低于2%、蛋白質(zhì)含在10%—14%，優(yōu)選為12%的油茶籽粕，用作飼料；
（6）將步驟（1）所得工藝水與步驟（2）所得A醇水液混合后，在60—73℃條件下醇沉1—4h，然后進行離心分離，得到E濕渣、A液相和油相；A液相為不含機械雜質(zhì)，除去了蛋白質(zhì)、淀粉、糊精等成份，而富含油茶皂素、多糖、黃酮等成分的清液；將E濕渣返回A濕渣并重復(fù)步驟（2）；將油相脫醇后加入粗茶籽油中，去雜脫水后得到純天然的原生態(tài)油茶籽油，得油率在93%—95％；
（7）將A液相于-18~0℃，優(yōu)選為-14—-10℃，更優(yōu)選為-12℃條件下冷卻2—48h，優(yōu)選為24h，油茶皂素在冷的醇水溶液中溶解度降低，隨著低溫的持續(xù)，油茶皂素會結(jié)晶析出，由此分離出固相（油茶皂素等）與B液相；固相在70—90℃，優(yōu)選為80℃,真空度0.07—0.099 MPa條件下脫醇并干燥后得到粗茶皂素21.0g/100g仁漿。油茶皂素含量62%。
（8）將B液相在溫度50—65℃、優(yōu)選為60—65℃，真空度0.07—0.099 MPa，優(yōu)選為真空度0.08—0.099 MPa條件下蒸發(fā)去除乙醇后回收，用作步驟（1）中提取油茶籽仁漿的水（即為除掉了大部分油茶皂素等成份，可以用于提取油茶籽油的再生水）；也就是說，回收的水按照步驟（1）所需要的總加水量要求補充部分新鮮軟水到再生水中，成為步驟（1）中的提取用水實現(xiàn)提取過程水的循環(huán)使用，無廢水排放。
上述的醇水液即為乙醇溶液。
實施效果：油茶籽仁漿含油率48.50%，實施上述方法后，從每100g仁漿中提取油茶籽油45.72g，油茶籽油提取率94.26%；油茶籽粕飼料23.12g，其中蛋白質(zhì)含量11.67%； 粗茶皂素21.46 g，其中油茶皂素含量63.51%。
實施例2
所述從油茶籽仁中提取油茶籽油與油茶皂素及油茶籽粕飼料的方法包括如下步驟：
（1）將油茶籽仁研磨成漿，向油茶籽仁漿中加水和酶制劑，加水量為油茶籽仁重量的1.5—5倍，優(yōu)選為1.5—3倍，更優(yōu)選為1.9—2.2倍，更優(yōu)選為1.9倍，酶制劑的加入量為茶油籽仁漿重量的0.06—0.5%，在30—90℃條件下提取1.5—3.5h，優(yōu)選為3h，離心分離后得到粗茶籽油、工藝水和A濕渣；
（2）用醇水液在50—75℃條件下浸提A濕渣0.5—3h，分離得到A醇水液和B濕渣；
（3）將步驟（2）所得的B濕渣在50—75℃條件下用醇水液浸提0.5—3h，分離得到B醇水液和C濕渣；將B醇水液返回至A濕渣用作提取A濕渣的醇水液，并重復(fù)步驟（2）；
（4）將C濕渣加入體積百分比濃度為70%—95%的乙醇，乙醇加入量為C濕渣體積的2—5倍，在50—75℃條件下提取0.5—3.0h，壓濾分離得到C醇水液和D濕渣；將C醇水液返回至B濕渣用作提取B濕渣的醇水液，并重復(fù)步驟（3）；
（5）將D濕渣在溫度60—90℃與真空度0.07—0.099 MPa的條件下進行蒸發(fā)回收乙醇，并脫水干燥，獲得油茶皂素含量低于2%、蛋白質(zhì)含在10—14%，優(yōu)選為12%的油茶籽粕，用作飼料；
（6）將步驟（1）所得工藝水與步驟（2）所得A醇水液混合后，在60—75℃條件下醇沉1—4h，然后進行離心分離，得到E濕渣、A液相和油相；A液相為不含機械雜質(zhì)，除去了蛋白質(zhì)、淀粉、糊精等成份，而富含油茶皂素等成分的清液；將E濕渣返回A濕渣并重復(fù)步驟（2）；將油相脫醇后加入粗茶籽油中，去雜脫水后得到純天然的原生態(tài)油茶籽油，得油率在93%—95％；
（7）將A液相于-18—0℃，優(yōu)選為-10—14℃，更優(yōu)選為-12℃條件下冷卻2—48h，優(yōu)選為24h，油茶皂素在冷的醇水溶液中溶解度降低，隨著低溫的持續(xù)，油茶皂素會結(jié)晶析出，由此分離出固相（油茶皂素、多糖、黃酮混合物）與B液相；固相在70—90℃，優(yōu)選為80℃, 在真空度0.07—0.099 MPa條件下脫醇并干燥后得到粗茶皂素。
（8）將B液相在溫度50—65℃、優(yōu)選為60—65℃，真空度0.07—0.099 MPa，優(yōu)選為真空度0.08—0.099 MPa條件下蒸發(fā)去除乙醇后回收，用作步驟（1）中提取油茶籽仁漿的水（即為除掉了大部分油茶皂素等成份，可以用于提取油茶籽油的再生水）；也就是說，回收的水按照步驟（1）所需要的總加水量要求補充部分新鮮軟水到再生水中，成為步驟（1）中的提取用水實現(xiàn)提取過程水的循環(huán)使用，無廢水排放。
所述的酶制劑為蛋白質(zhì)酶、纖維素酶、淀粉酶、果膠酶中的至少一種或多種的復(fù)合物。所述油茶籽仁漿細度為20—50μm，優(yōu)選為20—30μm。
上述的醇水液即為乙醇溶液。
實施效果：油茶籽仁漿含油率48.50%，采用實施上述方法后，從每100g仁漿中提取油茶籽油46.21g，油茶籽油提取率95.28%，油茶籽粕飼料22.35g，其中蛋白質(zhì)含量12.03%得粗茶皂素22.36g，其中油茶皂素含量62.67%。