本發(fā)明涉及醫(yī)藥化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基}-L-谷氨酸二水合物新晶型及其制備方法和制藥用途。
背景技術(shù)：
：N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物(式I，即培美曲塞二酸)，具備如下結(jié)構(gòu)：N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基}-L-谷氨酸二水合物(I)是抗葉酸代謝物，通過(guò)還原型葉酸載體、α葉酸受體及雙質(zhì)子葉酸載體進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在體內(nèi)由葉酸聚谷氨酸合酶催化快速生成聚谷氨酸培美曲塞；相對(duì)于單體，更穩(wěn)定及對(duì)靶酶有更好的親和性，N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物，主要作用機(jī)制為抑制胸苷酸合成酶、二氫葉酸還原酶和甘氨酰胺核苷酸轉(zhuǎn)甲酰酶，干擾胸腺嘧啶和嘌呤的合成，從而達(dá)到抑制腫瘤的作用。N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基}-L-谷氨酸的二鈉鹽用于一線治療惡性胸膜間皮瘤和一線、二線治療非小細(xì)胞肺癌，已在美國(guó)、歐盟、加拿大、中國(guó)等過(guò)上市，在其他 抗癌領(lǐng)域的臨床研究也正在進(jìn)行中，值得期待。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道，藥物的多晶型已經(jīng)成為藥物研究過(guò)程和藥品成品質(zhì)量控制及檢測(cè)過(guò)程中必不可少的重要組成部分。對(duì)藥物多晶型的研究有助于新藥化合物生物活性的選擇，有助于提高生物利用度，增進(jìn)臨床療效，有助于藥物給藥途徑的選擇與設(shè)計(jì)，以及藥物制劑工藝參數(shù)的確定，從而提高藥品生產(chǎn)質(zhì)量。同一藥物晶型不同，生物利用度可能差異顯著。同一種藥物，某些晶型可能比其他晶型具備更高的生物活性。培美曲塞二酸是制備培美曲塞二鈉的前體，培美曲塞二酸的質(zhì)量很關(guān)鍵，很多人對(duì)培美曲塞二酸的晶型進(jìn)行了研究。專利US20080045711報(bào)道了二水晶型FormA(含水量7.8％～8.8％)、一水晶型FormB(含水量2.6％～3.8％)、二甲亞砜溶劑混合晶型FormC(含水量約2.3％)、二甲基甲酰胺溶劑混合晶型FormD(含水量1.5％～3.6％)和FormE(含水量約2.5％)、無(wú)水晶型FormF(含水量0.2％～0.3％)和FormG(含水量0.6％～0.9％)。專利CN101684121A報(bào)道了三種培美曲塞二酸水合物晶型FormH(含水量5％～10％)、FormI(含水量5％～10％)和FormJ(含水量5％～10％)。專利US20080045711中公開的培美曲塞二酸FromC、FromD和FromE結(jié)合的溶劑沸點(diǎn)較高，在制備培美曲塞二鈉的過(guò)程中難去取除，不利于產(chǎn)品的質(zhì)量；FromA和FromB雖然克服了前面晶型的不足，但FromA的制備收率較低，無(wú)實(shí)用性；FromB制備時(shí)間較長(zhǎng)，僅析晶就需耗時(shí)18小時(shí)，不利于生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)性；專利CN101684121A報(bào)道的培美曲塞二酸晶型中FormH的制備收率較低(約60％)，且含水量高達(dá)75％，不利于過(guò)濾，干燥較困難；FormI和FormJ制備過(guò)程中晶體粘稠，難于分離，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。為了克服培美曲塞二酸現(xiàn)有晶型技術(shù)的不足，為了獲得一種生物 活性更高，更適合于工業(yè)化生產(chǎn)的培美曲塞二酸新晶型，我們對(duì)培美曲塞二酸晶型進(jìn)一步研究，旨在獲得培美曲塞二酸新二水合物晶型，產(chǎn)率高，純度高，易于分離，制備方法簡(jiǎn)易，實(shí)用性強(qiáng)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于解決上述技術(shù)問(wèn)題，提供N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基}-L-谷氨酸二水合物的一種新晶型，本發(fā)明將其命名為晶型X。本發(fā)明所述晶型X的晶型XRPD圖譜中至少包含2θ±0.20°為：5.7，11.5，12.3，18.4，20.3，27.6，28.1的衍射峰。優(yōu)選的，所述晶型X的XRPD圖譜中至少包含2θ±0.20°為：5.7，11.5，12.3，13.7，17.3，18.4，20.3，24.7，26.8，27.6，28.1，31.5的衍射峰。優(yōu)選的，所述晶型X的XRPD圖譜如圖1所示。本發(fā)明所述的N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型的差熱分析結(jié)果表明，在110℃～140℃出現(xiàn)三個(gè)弱的吸熱熔融峰以及在約254.7℃出現(xiàn)一個(gè)吸熱熔融峰。本發(fā)明所述的N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型的熱重分析結(jié)果表明，在120℃失重7.08％。本發(fā)明所述的N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型，其特征在于，所述晶型的含水量范圍為7.0％～11.0％。本發(fā)明的另一目的在于提供N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型的制備方法，包括如下步驟：①將N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二芐酯加入堿性水溶液中攪拌反應(yīng)；②將N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙 基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二芐酯的反應(yīng)液過(guò)濾，加入有機(jī)溶劑，調(diào)節(jié)PH，析晶；③將N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基}-L-谷氨酸的析晶體系加熱攪拌后，冷卻；④過(guò)濾晶體得到目標(biāo)晶型。優(yōu)選的，所述有機(jī)溶劑選自乙腈、無(wú)水甲醇、無(wú)水乙醇、異丙醇、丙酮，其中優(yōu)選無(wú)水乙醇；所述堿選自無(wú)機(jī)堿，所述無(wú)機(jī)堿選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸鉀，優(yōu)選氫氧化鈉。優(yōu)選的，酸性條件析晶調(diào)節(jié)pH為1～6，其中優(yōu)選2～3。優(yōu)選的，析晶體系加熱攪拌溫度一般為45～75℃，其中優(yōu)選55～65℃。優(yōu)選的，冷卻攪拌溫度為-10～40℃，其中優(yōu)選20～30℃。X晶型制備方法中“調(diào)節(jié)pH”使通過(guò)加酸來(lái)實(shí)現(xiàn)的，用來(lái)調(diào)節(jié)pH的酸有鹽酸、乙酸、甲酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸氫鈉、硫酸氫鈉、磷酸二氫鈉、草酸、甲磺酸等，其中優(yōu)選鹽酸。本發(fā)明的另一目的在于提供了N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型用來(lái)制備培美曲塞二酸藥物上可接受的鹽的用途。該用途包括用上述X晶型與相應(yīng)的堿反應(yīng)，得到培美曲塞二酸藥物上可接受的鹽包括，鈉鹽、鉀鹽、胺鹽，其中優(yōu)選鈉鹽。本發(fā)明所提供的培美曲塞二酸新晶型X，不具有引濕性，穩(wěn)定性好，不需要苛刻的儲(chǔ)存條件，常溫儲(chǔ)存即可；再者，本發(fā)明的晶型X形態(tài)好，顆粒較大，易于過(guò)濾；另外，晶型X靜電效應(yīng)小，易于包裝、儲(chǔ)存和轉(zhuǎn)移。另一方面，本發(fā)明制備的晶型X收率高、純度好，無(wú)需二次精制，可以顯著提升藥品的質(zhì)量，制備方法簡(jiǎn)易，實(shí)用性強(qiáng)，非常適合工業(yè)化生產(chǎn)。附圖說(shuō)明圖1是本發(fā)明N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型的XRPD圖譜。圖2是本發(fā)明N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型的DSC圖譜。圖3是本發(fā)明N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二水合物新晶型的TGA圖譜。具體實(shí)施方式為體現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)方案及其所取得的效果，下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并非局限于具體實(shí)施例。實(shí)施例一：將N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二芐酯10.0g，加入200mlNaOH水溶液中(2mol/L),加熱到50℃，攪拌反應(yīng)4小時(shí)，過(guò)濾。濾液加入250ml無(wú)水乙醇，用稀鹽酸調(diào)節(jié)PH至2～3，析出大量固體。將析晶體系加熱到55～65℃，攪拌1小時(shí)，冷卻，過(guò)濾，干燥，得到6.9g晶型X，摩爾收率96％。經(jīng)檢測(cè)驗(yàn)證，其X射線粉末衍射圖譜如圖1所示，其DSC圖譜、TGA圖譜與圖2和圖3吻合，證明了所得晶型為晶型X。將本實(shí)施例所得晶體從析晶體系析出后進(jìn)行過(guò)濾的過(guò)程中，濾液成線流下，整個(gè)過(guò)程未出現(xiàn)堵塞現(xiàn)象，一分鐘內(nèi)過(guò)濾至干，濾過(guò)后的晶體晶型較好，呈顆粒狀，使用刮刀很容易將其從濾紙轉(zhuǎn)移出后，刮刀和濾紙幾乎不殘留該晶體。干燥后的晶體將其從塑料包裝袋轉(zhuǎn)移至燒杯中，未發(fā)生聚集或分散現(xiàn)象，空氣中無(wú)粉塵彌漫，包裝袋幾乎無(wú)殘留晶體，說(shuō)明本發(fā)明晶型X靜電效應(yīng)小，轉(zhuǎn)移和稱量時(shí)可以減少與皮膚的接觸，這對(duì)于像培美曲塞二酸這種活性非常高的化合物是非常重要的，利于勞動(dòng)保護(hù)和安全生產(chǎn)。實(shí)施例二：將N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二芐酯10.0g，加入200mlNaOH水溶液中(2mol/L),加熱到50℃，攪拌反應(yīng)4小時(shí)，過(guò)濾。濾液加入250ml丙酮，用稀硫酸調(diào)節(jié)PH至2～3，析出大量固體。將析晶體系加熱到55～65℃，攪拌 1小時(shí)，冷卻，過(guò)濾，干燥，得到6.7g晶型X，摩爾收率93％。經(jīng)檢測(cè)驗(yàn)證，其X射線粉末衍射圖譜如圖1所示，其DSC圖譜、TGA圖譜與圖2和圖3吻合，證明了所得晶型為晶型X。實(shí)施例三：將N-{4-[2-(2-氨基-4,7-二氫-4-氧-1H-吡咯[2,3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲?；鶀-L-谷氨酸二芐酯10.0g，加入200mlNaOH水溶液中(2mol/L),加熱到50℃，攪拌反應(yīng)4小時(shí)，過(guò)濾。濾液加入250ml無(wú)水甲醇，用乙酸調(diào)節(jié)PH至2～3，析出大量固體。將析晶體系加熱到55～65℃，攪拌1小時(shí)，冷卻，過(guò)濾，干燥，得到6.7g晶型X，摩爾收率93％。經(jīng)檢測(cè)驗(yàn)證，其X射線粉末衍射圖譜如圖1所示，其DSC圖譜、TGA圖譜與圖2和圖3吻合，證明了所得晶型為晶型X。實(shí)驗(yàn)例一：穩(wěn)定性考察對(duì)本發(fā)明實(shí)施例一的方法制備的新晶型進(jìn)行了影響因素實(shí)驗(yàn)和穩(wěn)定性考察實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，本發(fā)明的新晶型晶型X有很高的穩(wěn)定性，能夠提高藥物及制劑的質(zhì)量穩(wěn)定性，詳見下表：表1不同影響因素條件下放置三個(gè)月前后樣品晶型數(shù)據(jù)研究結(jié)果結(jié)論：樣品在高溫(60℃)、光照(4500lx)及高濕(25℃，RH90％)三個(gè)月后進(jìn)行X-射線粉末衍射檢測(cè)晶型均未發(fā)生改變，含水量也無(wú)明顯變化，說(shuō)明其晶型穩(wěn)定好,在高溫、高濕、光照等條件下不會(huì)發(fā)生含水量增加或減少的問(wèn)題。表2兩批樣品加速穩(wěn)定性放置6個(gè)月、長(zhǎng)期穩(wěn)定性放置12個(gè)月晶型檢測(cè)結(jié)果在包裝形式下，兩批樣品在5℃加速條件下放置6個(gè)月，以及在-20℃長(zhǎng)期條件下放置12個(gè)月，X-射線粉末衍射結(jié)果顯示該晶型和含水量未發(fā)生改變，表明晶型無(wú)引濕性、穩(wěn)定性好。實(shí)驗(yàn)例二：有關(guān)物質(zhì)考察按照本發(fā)明實(shí)施例一的方法連續(xù)三批制備新晶型并進(jìn)行了有關(guān)物質(zhì)考察，詳見下表：表3不同批次樣品有關(guān)物質(zhì)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)純度最大單雜總雜一批99.7690.0710.231二批99.8330.0780.167三批99.8090.0400.190結(jié)果表明，三批樣品的純度均在99.7％以上，相比于培美曲塞二鈉的進(jìn)口質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，最大單雜和總雜顯著降低，說(shuō)明該晶型X脫雜性質(zhì)好，且精制效果佳，晶型X純度高，工藝穩(wěn)定可靠，能夠提高藥物及制劑的質(zhì)量。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3