固相合成布舍瑞林的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種固相合成布舍瑞林的方法，由乙胺基載體樹脂和Fmoc-Pro-OH出發(fā)，得到Fmoc-Pro-EtNH-supporting?Resin，然后依次偶聯(lián)布舍瑞林的其它的保護(hù)氨基酸，裂解去除supporting?Resin，得到全保護(hù)肽，全保護(hù)肽經(jīng)氫化脫保護(hù)、純化，得到布舍瑞林。本發(fā)明所述的方法，省去了多肽乙胺基化的步驟，在簡(jiǎn)化產(chǎn)品合成工藝的操作方面，提供工藝穩(wěn)定性方面，提供產(chǎn)品總體收率，降低成本方面都有較大突破。因此本發(fā)明的是提供一種高收率、低成本、反應(yīng)條件溫和、環(huán)境污染小、有利于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的布舍瑞林固相合成方法。
【專利說明】固相合成布舍瑞林的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種布舍瑞林的合成方法，尤其涉及一種純度高、高收率的合成布舍瑞林的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]布舍瑞林(Buserelin)是一種水溶性多肽類藥物，為下丘腦分泌的天然促性腺激素釋放激素(GnRH/LHRH)類似物，可促進(jìn)黃體生成激素LH、促卵胞生成激素FSH和性激素分泌增加，藥理效應(yīng)為LHRH的20-170倍，長期給予布舍瑞林可以抑制絨促性素的生成，并抑制卵巢和睪丸類固醇的生成。布舍瑞林的主要臨床應(yīng)用包括姑息治療激素依賴的前列腺癌(D期)、乳腺癌、無需手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜異位癥等疾病的治療。
[0003]布舍瑞林結(jié)構(gòu)為Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser (tBU) -Leu-Arg-Pro-NH-Et,現(xiàn)有的合成布舍瑞林的方法主要有兩種:
[0004]第一種是片段縮合法，即將布舍瑞林拆分成幾個(gè)片段(如兩個(gè))分別合成，所合成的各個(gè)裸肽片段在液相條件下進(jìn)行偶聯(lián)，如CN101735308A公開的4+5片段合成方法，先合成五片段 Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-OH 和四片段 D-Ser (tBU) -Leu-Arg-Pro-NHEt,然后縮合得到布舍瑞林。這種片段縮合方法的缺陷非常明顯，工藝操作繁瑣；更重要的是，片段偶聯(lián)過程中，多肽發(fā)生消旋反應(yīng)的現(xiàn)象比較嚴(yán)重；另外且最終收率較低。
[0005]第二種是全序列部分保護(hù)合成方法，即在固相合成過程中，對(duì)部分氨基酸側(cè)鏈進(jìn)行保護(hù)，并最終在液相中實(shí)現(xiàn)乙氨基化，此工藝雖然實(shí)現(xiàn)在固相載體上的全序列合成，但是由于采用的是部分保護(hù)，所以合成過程中引入的雜質(zhì)較多，出產(chǎn)品的質(zhì)量很差，純化過程中較難分離，很難得到高質(zhì)量的產(chǎn)品，且綜合收率不高。
`[0006]CN101935339A公開了一種全保護(hù)合成布舍瑞林的方法，固相合成布舍瑞林后，裂解去除樹脂，然后將全保護(hù)肽經(jīng)過乙氨基化、裂解脫除保護(hù)基的步驟得到布舍瑞林，該方法無論是乙氨基化過程，在冰水浴條件下進(jìn)行，不適于工業(yè)化操作。W02008/044890公開了一種合成布舍瑞林的方法，分別合成 Pro-NH-Et 和 Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser (tBU) -Leu-Arg-OH，然后偶聯(lián)、去除保護(hù)基獲得布舍瑞林；該方法先通過氨基酸偶聯(lián)獲得肽鏈，之后先脫除樹脂，然后再偶聯(lián)氨基酸Pro-NH-Et，實(shí)際操作過程中，工藝變化非常繁瑣。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中合成布舍瑞林的方法產(chǎn)率低、純度低、和操作繁瑣的問題，本發(fā)明提供了一種新的合成布舍瑞林的方法。
[0008]本發(fā)明提供了一種固相合成布舍瑞林的方法，步驟包括:
[0009]步驟I,提供如結(jié)構(gòu)式(I)乙胺基載體樹脂EtNH-Supporting Resin ；
[0010]
【權(quán)利要求】
1.一種固相合成布舍瑞林的方法，其特征在于，步驟包括: 步驟I，提供如結(jié)構(gòu)式(I)乙胺基載體樹脂EtNH-Supporting Resin ；
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙胺基載體樹脂EtNH-SupportingResin中的polymer為聚苯乙烯。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述乙胺基載體樹脂EtNH-Supporting Res in制備方法為:將氨基鈉NH2Na溶液加入到溶脹的載體樹脂中，5-40°C反應(yīng)2-12h，反應(yīng)后的樹脂洗滌后與碘乙烷5-30°C反應(yīng)2_12h。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2中偶聯(lián)Fmoc-PiO-OH反應(yīng)，在縮合劑存在下進(jìn)行，所述縮合劑選自碳二亞胺類縮合劑、鎗鹽類縮合劑、有機(jī)磷類縮合劑、以及其它任意能夠用于促進(jìn)羧酸與胺縮合的縮合劑中的任意一種或幾種的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2中偶聯(lián)Fmoc-Pro-OH反應(yīng)中，反應(yīng)溫度為10-50°C。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟2中偶聯(lián)Fmoc-Pro-OH反應(yīng)中，F(xiàn)moc-Pro-OH與乙胺基載體樹脂摩爾比為(1-10): I。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、4-6中任意一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟2得到的NH2-Pro-EtHN-Supporting Resin, Pro 取代度為 0.6-0.9mmol/g。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟6的氫化反應(yīng)，步驟5中酸條件為三氟乙酸存在條件下。
9.一種用于固相合成布舍瑞林的載體樹脂，其特征在于，所述載體樹脂為結(jié)構(gòu)式(I)所示的乙胺基載體樹脂
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的用于固相合成布舍瑞林的載體樹脂，其特征在于，所述載體樹脂中，乙胺基取代度為0.8-`1.0mmol/go
【文檔編號(hào)】C08F212/08GK103554229SQ201310557778
【公開日】2014年2月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月11日
【發(fā)明者】沙樂, 崔貞亮, 孫慕懿, 顧聲隆, 胡成良 申請(qǐng)人:寧波市三生藥業(yè)有限公司