專利名稱：用來改進(jìn)色譜介質(zhì)性能的接枝法的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用來對聚合物配體進(jìn)行接枝的改進(jìn)方法。本發(fā)明還涉及對用來將聚合物配體接枝到用于蛋白質(zhì)分離的基材上的方法的改進(jìn)，結(jié)果形成具有改進(jìn)的蛋白質(zhì)結(jié)合量、改進(jìn)的純化工藝操作窗口和樹脂選擇性的基材，本發(fā)明還涉及所述基材的制備和使用。
背景技術(shù)：
在現(xiàn)代醫(yī)療保健中，由活性有機(jī)體制得的治療用蛋白質(zhì)起日益重要的作用。這些蛋白質(zhì)提供了很多優(yōu)于常規(guī)藥物的優(yōu)點(diǎn)，包括對疾病靶向的專一性和功效的提高。哺乳動(dòng)物的免疫系統(tǒng)使用很多蛋白質(zhì)來控制和消除疾病威脅。隨著基因和蛋白質(zhì)工程的發(fā)展，使得人們能夠開發(fā)出許多“設(shè)計(jì)的”或者重組蛋白質(zhì)的治療法。這些治療法可基于單獨(dú)的蛋白質(zhì)，化學(xué)修飾的蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)片段或蛋白質(zhì)結(jié)合體。這些治療蛋白質(zhì)的一個(gè)子類，單克隆抗體(MAb)在醫(yī)療保健和診斷方面有很廣的應(yīng)用。在這些生物藥物的生產(chǎn)中，人們廣泛地采用色譜分離。隨著工業(yè)日趨成熟，采用新穎的/先進(jìn)的技術(shù)和方法來提高分離作用，將使得生物治療制造商能夠?qū)⑦@些藥物以更低的價(jià)格提供給更多患者。用來純化蛋白質(zhì)的常用色譜法包括親合色譜法，生物親合色譜法，離子交換色譜法，反相色譜法，疏水相互作用色譜法，親水相互作用色譜法，尺寸排阻色譜法和混合模式色譜法(上述種類的組合)等。這些種類的色譜操作中的每一種操作的應(yīng)用和效率取決于溶質(zhì)分子與色譜系統(tǒng)的固定相(色譜介質(zhì))之間的表面-表面相互作用的選擇性，所述溶質(zhì)分子和固定相各自都與液體流動(dòng)相發(fā)生相互作用。很多種固定相色譜載體材料可以在市場上購得。要將產(chǎn)品與雜質(zhì)成功分離的關(guān)鍵通常取決于以下因素的正確組合固定相，基礎(chǔ)基質(zhì)及配體性質(zhì)(配體種類，配體密度，孔結(jié)構(gòu)，配體分布，材料組成)，以及流動(dòng)相或者溶液性質(zhì)(緩沖劑種類，PH值和電導(dǎo)率)?；A(chǔ)基質(zhì)和配體的具體設(shè)計(jì)得到了一種色譜介質(zhì)， 該色譜介質(zhì)的特征為一些關(guān)鍵特性，包括蛋白質(zhì)結(jié)合量或通過量，選擇性，床滲透性和化學(xué)穩(wěn)定性。純化方法包括主要結(jié)合產(chǎn)品(結(jié)合和洗脫)，主要結(jié)合雜質(zhì)(流過)以及上述情況的結(jié)合(所謂的弱分配等)。在設(shè)計(jì)這些技術(shù)的時(shí)候，關(guān)鍵是控制上述色譜介質(zhì)的性質(zhì)，以便能夠進(jìn)行和確?？煽康姆蛛x，以得到純化的蛋白質(zhì)產(chǎn)品。可以在很多種基材或基礎(chǔ)基質(zhì)上完成蛋白質(zhì)分離。用于樹脂或珠粒結(jié)構(gòu)的常用材料包括多糖(瓊脂糖，纖維素)，合成聚合物(聚苯乙烯，聚甲基丙烯酸酯，和聚丙烯酰胺) 以及陶瓷材料，例如二氧化硅、氧化鋯和孔受控的玻璃。這些材料通過“擴(kuò)散孔”吸附蛋白質(zhì)，所述擴(kuò)散孔的孔徑通常約為200A至3,000A,遠(yuǎn)小于通常約> 5 μ m的“對流孔”。膜和整體材料也常用于色譜，特別是用于流通應(yīng)用。常規(guī)的膜組合物包括合成聚合物，例如聚偏二氟乙烯，聚乙烯，聚醚砜，尼龍和多糖，例如纖維素。人們已經(jīng)由以下聚合物開發(fā)出了整體料聚苯乙烯、多糖、聚甲基丙烯酸酯和和許多其他合成聚合物。膜和整體型色譜與珠粒的區(qū)別在于，用于膜和整體型色譜的這些材料將蛋白質(zhì)吸附在相同的“對流孔”中，所述對流孔控制薄膜和整體型材料的滲透性。常用的薄膜和整體型對流孔的孔徑約為0. 6-10微米。可以通過各種很好開發(fā)的技術(shù)實(shí)現(xiàn)向這些基材添加配體。使用配體“觸手劑(tentacle) ”或“延伸劑”改進(jìn)蛋白質(zhì)結(jié)合量和改進(jìn)樹脂選擇性的做法包括例如通過接枝將配體放在與基礎(chǔ)基質(zhì)連接的聚合物鏈上，所述配體從基礎(chǔ)基質(zhì)的表面延伸出來。配體延伸劑通常產(chǎn)生更大的結(jié)合量，這是因?yàn)檠由靹┰黾恿伺潴w可利用性，使得目標(biāo)分子的結(jié)合超過了表面上單層吸附的結(jié)合。人們已經(jīng)開發(fā)出了兩種用來接枝聚合物配體的標(biāo)準(zhǔn)方法，用于在基材上形成表面延伸劑，所述基材是例如用于分離蛋白質(zhì)等的色譜法中的那些1)通過表面基團(tuán)由載體接枝單體(“由……接枝單體”)，幻通過活性基團(tuán)將預(yù)先形成的聚合物接枝到載體上(“將聚合物接枝到……上”)。采用自由基聚合反應(yīng)由材料接枝單體是一種很好開發(fā)的技術(shù)。一般來說，所述反應(yīng)可以由表面材料引發(fā)，或者由溶液中的引發(fā)劑引發(fā)?？梢酝ㄟ^暴露于活性環(huán)境，例如輻射、金屬氧化或通過吸附的引發(fā)性物質(zhì)，在表面產(chǎn)生自由基，從而實(shí)現(xiàn)由表面引發(fā)自由基聚合。但是，這些“由……接枝單體”方法需要受到嚴(yán)格控制的溶液條件和/或特別的設(shè)備，使得它們實(shí)施復(fù)雜且耗時(shí)。Ruixin Wang等在“對PGMA/A1203的制備的研究及其對環(huán)氧樹脂沖擊強(qiáng)度的影響 (Studies on Preparation of PGMA/A1203 and its Effect on Impact Strength of Epoxy Resin) "Journal of Applied Polymer Science，第 113 卷，41-48 (2009)中揭示了一種用來將聚合物接枝到載體上的方法。該公開文獻(xiàn)揭示了一種使用過氧化物基團(tuán)作為引發(fā)劑， 將聚甲基丙烯酸縮水甘油酯(PGMA)接枝在氧化鋁表面上，從而形成改性的Al2O3的方法。 該方法的第一步包括用SOCl2對Al2O3上的羥基進(jìn)行氯化。然后用叔丁基過氧化氫對氯基進(jìn)行處理，形成固定的過氧化物分子。在另外的步驟中，所述共價(jià)鍵合的過氧化物基團(tuán)引發(fā) Al2O3表面上的GMA的接枝聚合。GMAAl2O3顆粒用來使得環(huán)氧樹脂具有強(qiáng)度。Wang沒有揭示聚合物底物以及涉及該聚合物基材的應(yīng)用。通過向材料表面添加配體，提供了改進(jìn)的蛋白質(zhì)結(jié)合量以及樹脂選擇性所需的潛在的改變。但是，隨著蛋白質(zhì)分離的要求變得更高，對開發(fā)出新的技術(shù)和方法以形成新穎的聚合結(jié)構(gòu)變得更苛刻。因此，最好是開發(fā)用于蛋白質(zhì)分離的聚合基材，其具有改進(jìn)的蛋白質(zhì)結(jié)合量和改良的樹脂選擇性。根據(jù)以上的對可以用于蛋白質(zhì)分離、具有改進(jìn)的蛋白質(zhì)結(jié)合量和樹脂選擇性的新聚合物基材的需求，我們開發(fā)出了一種用來將聚合物配體接枝到聚合物基材上的新方法。

發(fā)明內(nèi)容
根據(jù)本發(fā)明，提供了一種制備用于色譜法的吸附劑材料的方法，該方法包括(i)提供包含官能團(tuán)的聚合物基材，(ii)將自由基配體與所述官能團(tuán)共價(jià)連接，形成表面活性基團(tuán)，(iii)通過自由基使所述表面活性基團(tuán)與乙烯基單體反應(yīng)，形成聚合物配體。在本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了一種用于色譜法的吸附劑材料，其包括固定到在聚合基材上的聚合物配體，其中所述聚合物基材包括官能團(tuán)，所述官能團(tuán)與自由基配體共價(jià)連接，形成表面活性基團(tuán)，和通過自由基使所述表面活性基團(tuán)與乙烯基單體反應(yīng)，形成聚合物配體。本發(fā)明至少部分地提供了一種用來將聚合物配體接枝在聚合物基材上的新方法， 該方法包括自由基接枝到容易產(chǎn)生自由基的表面活性基團(tuán)上。
具體實(shí)施例方式在本發(fā)明中，通過將表面活性基團(tuán)共價(jià)連接到聚合物基材表面的官能團(tuán)上，對聚合物基材進(jìn)行改性。在所述連接之后，用乙烯基單體進(jìn)行自由基反應(yīng)，形成聚合物配體。該實(shí)施方式的例子包括但不限于用叔丁基過氧化氫(tBHP)或過乙酸對包含環(huán)氧化物的基材進(jìn)行官能化，然后用氯化(3-丙烯酰氨基丙基)_三甲基銨(AMPTAC)對過氧化物改性的基材進(jìn)行官能化。應(yīng)理解，本文所述的所有范圍都包括其中包含的所有子范圍。例如，范圍"1-10" 包括最小值1和最大值10之間(包括端值)的任意和全部的子范圍，也就是說，在等于或大于最小值(1)和等于或小于最大值(10)之間的任意和全部的子范圍，例如5. 5-10。在對本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)描述之前，對一些術(shù)語進(jìn)行定義。這些術(shù)語的使用不會對本發(fā)明的范圍構(gòu)成限制，僅僅用來幫助描述本發(fā)明。如本文中所用，單數(shù)形式的“一個(gè)”、“一種”和“該”包括復(fù)數(shù)的被提及事物，除非文中另有明確說明。可用于本發(fā)明的“聚合物基材，，或“基礎(chǔ)基質(zhì)，，或“基材，，包括但不限于任何用共價(jià)鍵合的自由基引發(fā)劑改性的聚合物材料。適合用于聚合物基材的結(jié)構(gòu)包括膜、顆粒、表面和整體料。可以用于本發(fā)明的用于基材或基礎(chǔ)基質(zhì)的合適材料包括多糖、合成聚合物、瓊脂糖、纖維素、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚苯乙烯、以及上述材料的雜化物或其組合。可以用于本發(fā)明的“官能團(tuán)”的例子包括但不限于能夠與分子反應(yīng)形成表面活性基團(tuán)的親電基團(tuán)，例如環(huán)氧化物，烷基鹵化物，活化醇，活化酯。所述聚合物基材上的官能團(tuán)用自由基配體官能化，形成官能化的聚合物。這些官能化的聚合物用來將各種聚合物配體共價(jià)鍵合到所述基材上。如本文中所用，術(shù)語“自由基配體”是任何能夠與官能團(tuán)反應(yīng)形成表面活性基團(tuán)的基團(tuán)。這些自由基配體包括但不限于過氧化物，例如叔丁基過氧化氫，枯烯過氧化氫；過氧乙酸酯類，例如過乙酸，氯代過苯甲酸；過硫酸鹽，例如過硫酸銨，過硫酸鈉，過二硫酸鉀，偶氮化合物等。如本文中所用，“表面活性基團(tuán)”表示聚合物基材上的固定的可聚合基團(tuán)。在一些實(shí)施方式中，通過加熱或氧化還原反應(yīng)，由表面活性基團(tuán)產(chǎn)生自由基。如本文中所用，“聚合物配體”表示共價(jià)固定在聚合物基材上的聚合物。本發(fā)明的聚合物配體通過乙烯基單體自由基聚合到聚合物基材上而形成。適于本發(fā)明的乙烯基單體的例子包括但不限于甲基丙烯酸酯、丙烯酸酯、甲基丙烯酰胺和丙烯酰胺，以及它們的組合。所述單體包括但不限于丙烯酸，2-丙烯酰氨基-2-甲基-1-丙磺酸， 氯化-3-(甲基丙烯酰氨基)丙基]三甲基銨，2-丙烯酰氨基-乙醇酸，衣康酸或乙基乙烯基酮，甲基丙烯酸縮水甘油酯，N, N-二甲基丙烯酰胺，丙烯酰胺，甲基丙烯酸羥丙酯，N-苯基丙烯酰胺，羥乙基丙烯酰胺，以及它們的組合。可以用于本發(fā)明的聚合物配體的例子包括但不限于含有以下基團(tuán)的聚合物離子交換基團(tuán)，疏水相互作用基團(tuán)，親水相互作用基團(tuán)，親硫相互作用基團(tuán)，金屬親合性基團(tuán)，親合性基團(tuán)，生物親合性基團(tuán)，以及混合模式的基團(tuán)(上述的組合)?？捎糜诒景l(fā)明的合適配體的例子包括但不限于強(qiáng)陽離子交換基團(tuán)，例如磺丙基，磺酸；強(qiáng)陰離子交換基團(tuán)，例如氯化三甲基銨；弱陽離子交換基團(tuán)，例如羧酸；弱陰離子交換基團(tuán)，例如N，N-二乙基氨基或 DEAE ；疏水相互作用基團(tuán)，例如苯基，丁基，丙基，己基；以及親合性基團(tuán)，例如蛋白質(zhì)A，蛋白質(zhì)G，以及蛋白質(zhì)L和能夠進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為另一個(gè)官能團(tuán)的非官能單體或中間單體(例如甲基丙烯酸縮水甘油酯，其轉(zhuǎn)化為親合性配體)，以及它們的混合物。還考慮在聚合物配體形成配合物過程中，可以向反應(yīng)混合物加入其它的引發(fā)劑。 例如，可以向反應(yīng)混合物加入過硫酸鹽、偶氮化合物和/或過氧化物引發(fā)劑。在此化學(xué)方面的一些實(shí)施方式中，在聚合物配體形成配合物的過程中加入鏈轉(zhuǎn)移劑可能是適當(dāng)?shù)摹：线m的鏈轉(zhuǎn)移劑包括例如鹵代甲烷，二硫化物，硫醇和金屬配合物。另外的合適的鏈轉(zhuǎn)移劑包括各種包含至少一個(gè)可容易奪取的氫原子的其它化合物，以及它們的混合物。鏈轉(zhuǎn)移劑可以一次或多次加入，或者以線性或非線性的方式連續(xù)加入，可以在大部分或整個(gè)反應(yīng)期間加入，或者在反應(yīng)期間的有限部分的過程中加入?？梢詫⒔宦?lián)劑、支化劑和非官能單體連接在聚合物配體上，用來控制聚合物配體的形態(tài)或相互作用。但是，在聚合物配體上的這些交聯(lián)劑或支化劑含量很低，優(yōu)選< 5%，更優(yōu)選< 1%。合適的交聯(lián)劑或支化劑包括但不限于單體，例如二甲基丙烯酸乙二醇酯，二乙烯基苯，三甲基丙烯酸三甲基丙酯和亞甲基二丙烯酰胺，或者多官能鏈轉(zhuǎn)移劑。測試方法BSA量的測量溶液1 (50mM Tris/HCl, pH 8. 8)的制備將12. 1克三(羥甲基)氨基甲烷(費(fèi)舍爾科學(xué)公司(Fisher Scientific))加入 2升的容量瓶中。使用0. OlN的HCl溶液(費(fèi)舍爾科學(xué)公司)將容量瓶加注至2升的標(biāo)度。 給容量瓶蓋上蓋子，對瓶內(nèi)物料進(jìn)行振搖。使該溶液靜置5分鐘，再次核查溶液的體積。再另外加入HC1，將體積調(diào)節(jié)到2升的標(biāo)度。測得pH值為8. 8士0.05。給溶液貼上標(biāo)簽，于 4°C冷藏。溶液2的制備2毫克/毫升BSA (來自牛血清的白蛋白，希格瑪-艾爾德里奇公司(Sigma-Aldrich))溶液將0. 806克BSA稱量到玻璃瓶中，加入403克溶液1。對該瓶內(nèi)物料進(jìn)行溫和的混合以使其溶解。溶液靜置0. 5小時(shí)，以確保BSA完全溶解。BSA 量攝取(uptake)步驟將1毫升去離子水緩慢加入色譜柱以防夾雜空氣。將實(shí)施例3或4的漿液溶液加入所述柱子中。對柱子中1毫升的樹脂進(jìn)行測量。慢慢施加真空，除去樹脂上方的除1-2 厘米之外的所有溶液。當(dāng)樹脂水平落至低于1毫升標(biāo)記以下的時(shí)候，在施加額外的真空的條件下，加入更多的樹脂漿液。所述樹脂珠粒從不接觸空氣。填充的1毫升樹脂用大約10 毫升的去離子水淋洗，以置換漿液溶液，并使液體排掉，直至水面高于填充床1-2厘米。然后填充的1毫升的樹脂用10毫升的溶液1沖洗。用真空將溶液1從柱子中除去，抽空氣通過柱子1分鐘。將包含濕餅的一次性的柱子從歧管取出。用刮勺將來自柱子的濕餅轉(zhuǎn)移到8盎司的玻璃瓶中，加入200毫升溶液2 毫克 /毫升BSA sin.)。將玻璃瓶中的樣品溫和振搖18小時(shí)。18小時(shí)之后，將樣品從振蕩器取出，使樹脂沉淀15分鐘。攝取結(jié)合量的測定在培養(yǎng)18小時(shí)之后，測量過濾后的上清液BSA溶液在278納米的紫外吸光度， 來測定BSA結(jié)合量。用裝有溶液1的小池測量紫外分光光度計(jì)的零點(diǎn)。測量所有的樣品、標(biāo)準(zhǔn)溶液和對照樣品⑴kpharose 快速流動(dòng)離子交換樹脂，GE醫(yī)療保健公司(GE Healthcare))在278納米的吸光度。BSA結(jié)合量的計(jì)算記錄樣品和對照樣品的未結(jié)合BSA的值⑴瓊脂糖FF)。用下式來確定結(jié)合量式 1BSA量=WOO-(樣品毫克/毫升X 200)] X 1毫升=毫克BSA/毫升樹脂實(shí)施例實(shí)施例1 用叔丁基過氧化氫(tBHP)對包含過氧化物的珠粒進(jìn)行官能化。所有的材料都從供應(yīng)商獲得后，未經(jīng)處理直接使用。將按照類似于美國專利公開第US 2007-0066761A1號的實(shí)施例25所述的方法制備的15克包含環(huán)氧化物的珠粒(60微米的聚GMA-GlyDMA珠粒，甲基丙烯酸縮水甘油酯 (GMA)和甘油-1，3-二甲基丙烯酸酯(GlyDMA))以濕餅的形式加入裝有機(jī)械攪拌器的三頸圓底燒瓶中，然后加入18毫升水，形成漿液。將叔丁基過氧化氫(tBHP，希格瑪-艾爾德里奇公司)和三乙胺(Et3N)(希格瑪-艾爾德里奇公司)加入該漿液中，該反應(yīng)混合物在N2 氣氛下，在室溫?cái)嚢柽^夜。過濾珠粒，用水淋洗。所得的材料以在水中的漿液的形式儲存。實(shí)施例2 用過乙酸對含環(huán)氧基團(tuán)的珠粒進(jìn)行官能化將25克實(shí)施例1的含環(huán)氧化物的珠粒(GMA/GLYDMA共聚物)的濕餅放入裝有特氟隆攪拌槳葉的250毫升反應(yīng)燒瓶中，將高架式攪拌器設(shè)定在145RPM。向該反應(yīng)器加入30 克 Milli Q 水，0. 5 克 4-羥基 tempo，(Aldrich 批號 77997KJ)，0. 08 克三丁基胺，(Aldrich 批號A0256662)和1. 8克37%的過乙酸。在1小時(shí)時(shí)間內(nèi)將該反應(yīng)器加熱至50°C，然后在 50°C保持18小時(shí)。冷卻至室溫，在350毫升的多孔玻璃漏斗中分離珠粒，用1升Milli Q 水淋洗。BSA量為162毫克/毫升。實(shí)施例3 用氯化(3-丙烯酰氨基丙基)-三甲基銨(AMPTAC)對過氧化物改性的珠粒進(jìn)行官能化。將10克過氧化物改性的珠粒(實(shí)施例1制得)，13. 6克AMPTAC (希格瑪-艾爾德里奇公司(Sigma-Aldrich))和10毫升水加入裝有機(jī)械攪拌器的三頸圓底燒瓶中。該溶液用N2吹掃15分鐘。將該反應(yīng)混合物加熱至85°〇，在隊(duì)氣氛下攪拌過夜。過濾珠粒，用水淋洗。所得的材料以在水中的漿液的形式儲存。實(shí)施例4 用氯化(3-丙烯酰氨基丙基)-三甲基銨(AMPTAC)對過氧酯改性的珠粒進(jìn)行官能化。將25克實(shí)施例2的珠粒濕餅的產(chǎn)物放入裝有特氟隆攪槳葉的250毫升反應(yīng)燒瓶中，將高架式攪拌器設(shè)定在145RPM。在攪拌下，向反應(yīng)燒瓶加入6克75%的氯化(3-丙烯酰氨基丙基)三甲基銨(Aldrich批號02523MH)。然后向該反應(yīng)器加入0. 12克過硫酸銨 (Aldrich批號A(^64270)和13. 6克Milli Q水。讓該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。在1 小時(shí)內(nèi)將反應(yīng)器加熱至80°C，然后反應(yīng)器在80°C保持5小時(shí)。冷卻至50°C，向反應(yīng)器緩慢加入56毫升NaOH(在5分鐘內(nèi))。在50°C保持1小時(shí)。然后將反應(yīng)器冷卻至室溫。在350 毫升的多孔玻璃漏斗中分離珠粒，用3升Milli Q水淋洗。BSA量為74毫克/毫升。
權(quán)利要求
1.一種制備用于色譜法的吸附劑材料的方法，該方法包括(i)提供包含官能團(tuán)的聚合物基材，(ii)將自由基配體與所述官能團(tuán)共價(jià)連接，形成表面活性基團(tuán)，(iii)通過自由基使所述表面活性基團(tuán)與乙烯基單體反應(yīng)，形成聚合物配體。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙烯基單體選自甲基丙烯酸酯、丙烯酸酯、甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺、以及它們的組合，所述單體包括但不限于丙烯酸，2-丙烯酰氨基-2-甲基-1-丙磺酸，氯化[-3-(甲基丙烯酰氨基)丙基]三甲基銨，2-丙烯酰氨基-乙醇酸，衣康酸或乙基乙烯基酮，甲基丙烯酸縮水甘油酯，N, N-二甲基丙烯酰胺，丙烯酰胺，甲基丙烯酸羥丙酯，N-苯基丙烯酰胺，羥乙基丙烯酰胺，以及它們的組合。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述聚合物配體選自強(qiáng)陽離子交換基團(tuán)， 強(qiáng)陰離子交換基團(tuán)，弱陽離子交換基團(tuán)，弱陰離子交換基團(tuán)，疏水相互作用基團(tuán)，親合性基團(tuán)，能夠進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為另一種官能團(tuán)的非官能單體和中間單體，以及它們的混合物。
4.一種用于色譜法的吸附劑材料，其包含固定到聚合基材上的聚合物配體，其中所述聚合物基材包括官能團(tuán)，所述官能團(tuán)與自由基配體共價(jià)連接，形成表面活性基團(tuán)，和通過自由基使所述表面活性基團(tuán)與乙烯基單體反應(yīng)，形成聚合物配體。
全文摘要
用來改進(jìn)色譜介質(zhì)性能的接枝法。本發(fā)明涉及對將聚合物配體接枝到用于蛋白質(zhì)分離的基材上的方法的改進(jìn)，結(jié)果形成具有改進(jìn)的蛋白質(zhì)結(jié)合量、改進(jìn)的純化工藝操作窗口和樹脂選擇性的基材，本發(fā)明還涉及所述基材的制備和使用。
文檔編號C08F8/06GK102382266SQ201110222489
公開日2012年3月21日 申請日期2011年7月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月28日
發(fā)明者J·J·邁克納, M·J·迪茲 申請人:羅門哈斯公司