專利名稱：聚乙二醇修飾的甾醇共聚物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一類聚乙二醇(PEG)修飾的甾醇共聚物以及該共聚物作為輔料方面的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
聚乙二醇(PEG)為環(huán)氧乙烷和水縮聚而成的混合物，其分子量范圍為200-20000。
聚乙二醇(PEG)是最常用的一種修飾劑，其毒性小、無抗原性、具有良好的兩親性，且生物相容性已獲FDA認可。常用來修飾磷脂酰膽堿以及脂肪酸作為制備乳劑或脂質(zhì)體的輔料；也用聚乙二醇修飾蛋白類(亦稱蛋白的PEG化)包括PEG與蛋白質(zhì)與多肽類藥物的物理結(jié)合物和化學(xué)修飾物，藥物的聚乙二醇化給藥物帶來的優(yōu)點包括增加溶解度、降低免疫原性和消除速度、增加蛋白藥物的治療指數(shù)以及擴大臨床應(yīng)用等。
甾醇是一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物，人體和動物內(nèi)最重要的甾醇類化合物包括膽固醇、7-脫氫膽固醇、麥角固醇、維生素D3、維生素D2等。
檢索與本發(fā)明相關(guān)的專利和文獻，發(fā)現(xiàn)發(fā)明專利00110157.9公開了一種聚乙二醇和膽固醇用丁二酸以酯鍵相連的化合物，我們研究發(fā)現(xiàn)該化合物注射具有很強的溶血性，基本不能作為注射用輔料。
本發(fā)明經(jīng)過大量研究發(fā)現(xiàn)聚乙二醇(PEG)和甾醇通過小分子的化合物以醚鍵連接，具有優(yōu)良的表面活性作用，其載藥能力大大提高，同時實現(xiàn)了藥物在體內(nèi)的緩慢釋放。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是將PEG通過小分子的化合物以醚鍵接枝于甾醇(ChOL)合成共聚物(PGC)，該共聚物(PGC)可以作為表面活性劑用來制備水溶液分散體比如納米乳劑，脂質(zhì)體；也可以作為載體成分之一用來制備能分散于水的膠束、固體脂質(zhì)納米?；蚣{米粒；還可以作為長循環(huán)納米、溫度或PH敏感性納米載體成分之一；也可以作為高級化妝品的輔料，作為化妝品的輔料，具有非常優(yōu)良的保濕效果，也可以用于皮下注射消除皺紋。
其結(jié)構(gòu)為R1-PEG-R2-ChOL，結(jié)構(gòu)式如下
其中ChOL包括膽固醇、7-脫氫膽固醇、麥角固醇、維生素D3及維生素D2中的一種，具體結(jié)構(gòu)式如下 維生素D3 維生素D2 7-脫氫膽固醇 麥角固醇其中PEG分子量范圍為200-20000，其中R1的作用可以包括以下一種或幾種調(diào)節(jié)親水性和親脂性，水溶性和脂溶性等；R2的作用包括調(diào)節(jié)極性和溶解性?？梢愿鶕?jù)不同的目的進行不同的結(jié)構(gòu)修飾；R2可以是直鏈或支鏈烷、烯、炔類，如-CH2-，-CH2CH2CH2-，-CH2CH(CH2CH2)nCH2-，-CH＝CHCH2-，-CH2C＝CH-等等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)；R2結(jié)構(gòu)中也可以帶有其他的官能團，其中包括酮、醚、酯、胺、酰胺類，如-CH2OCH2-，-CH2COCH2-，-CH2O(CH2CH2)nCH2-，-CH2COOCH2-，-CH2C(CH3)2-CH2-(CH2)n-、-CH2CH2NH CH2-等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)。
其中n為整數(shù)，范圍為2-30基本合成路線如下
例舉以下合成方案合成方案1當R2＝-CH2(CH2)6CH2-(直鏈烷烴)時，即M1為1，8-辛二醇將M1 1mol加入反應(yīng)瓶中，攪拌下加入二氯亞砜(3mol)，然后加熱回流3小時，稍冷，減壓蒸餾，蒸出多余的二氯亞砜，然后冷卻，將反應(yīng)液倒入200ml冰水，用二氯甲烷300mL分三次萃取。5％碳酸鈉100ml洗兩次，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得淡黃色油狀物M2。
將膽固醇1mol溶于500mlDMF中，室溫攪拌冷水浴加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入M2 2.0mol攪拌，然后80度反應(yīng)3小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得產(chǎn)品M3。
將PEG 1mol溶入300mlDMF中，室溫攪拌下加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入0.8molM3，攪拌，然后80度反應(yīng)3小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，以甲醇柱層析得淺黃色粘稠狀固體，結(jié)構(gòu)式如下
合成方案2當R2＝-CH2C(CH3)2(CH2)5CH2-時(支鏈烷烴)，即M1為2，2-二甲基-1，8-辛二醇，將M1 1mol加入反應(yīng)瓶中，攪拌下加入二氯亞砜(3mol)，然后加熱回流4小時，稍冷，減壓蒸餾，蒸出多余的二氯亞砜，然后冷卻，將反應(yīng)液倒入200ml冰水，用二氯甲烷300mL分三次萃取。5％碳酸鈉100ml洗兩次，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得淡黃色油狀物M2。
將膽固醇1mol溶于500mlDMF中，室溫攪拌冷水浴加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入M2 2.0mol攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得產(chǎn)品M3。
將PEG 1mol溶入300mlDMF中，室溫攪拌下加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入0.8mol M3，攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，以甲醇柱層析得淺黃色粘稠狀固體，結(jié)構(gòu)式如下 合成方案3當R2＝-CH2CH2COCH2CH2-時(酮)，即M1為2，2-二甲基-3-羰基-1，5-戊二醇，將M1 1mol加入反應(yīng)瓶中，攪拌下加入二氯亞砜(3mol)，然后加熱回流3小時，稍冷，減壓蒸餾，蒸出多余的二氯亞砜，然后冷卻，將反應(yīng)液倒入200ml冰水，用二氯甲烷300mL分三次萃取。5％碳酸鈉100ml洗兩次，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得淡黃色油狀物M2。
將膽固醇1mol溶于500mlDMF中，室溫攪拌冷水浴加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入M2 2.0mol攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得產(chǎn)品M3。
將PEG 1mol溶入300mlDMF中，室溫攪拌下加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入0.8mol M3，攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，以甲醇柱層析得淺黃色粘稠狀固體，結(jié)構(gòu)式如下 合成方案4當R2＝-CH2CH2CH(NH2)CH2CH2-時(胺)，即M1為2，2-二甲基-3-胺基-1，5-戊二醇，將M1 1mol加入反應(yīng)瓶中，攪拌下加入二氯亞砜(3mol)，然后加熱回流3小時，稍冷，減壓蒸餾，蒸出多余的二氯亞砜，然后冷卻，將反應(yīng)液倒入200ml冰水，用二氯甲烷300mL分三次萃取。5％碳酸鈉100ml洗兩次，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得淡黃色油狀物M2。
將膽固醇1mol溶于500mlDMF中，室溫攪拌冷水浴加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入M2 2.0mol攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得產(chǎn)品M3。
將PEG 1mol溶入300mlDMF中，室溫攪拌下加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入0.8mol M3，攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，以甲醇柱層析得淺黃色粘稠狀固體，結(jié)構(gòu)式如下 合成方案5當R2＝-CH2CH2CONHCH2CH2-時(酰胺)，將M1 1mol加入反應(yīng)瓶中，攪拌下加入二氯亞砜(3mol)，然后加熱回流3小時，稍冷，減壓蒸餾，蒸出多余的二氯亞砜，然后冷卻，將反應(yīng)液倒入200ml冰水，用二氯甲烷300mL分三次萃取。5％碳酸鈉100ml洗兩次，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得淡黃色油狀物M2。
將膽固醇1mol溶于500mlDMF中，室溫攪拌冷水浴加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入M2 2.0mol攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得產(chǎn)品M3。
將PEG 1mol溶入300mlDMF中，室溫攪拌下加入1.2mol氫化鈉，攪拌1小時，然后加入0.8mol M3，攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，以甲醇柱層析得淺黃色粘稠狀固體，結(jié)構(gòu)式如下 合成方案6當R2＝-CH2CH2OCH2CH2-時(醚)，將M1 1mol加入反應(yīng)瓶中，攪拌下加入二氯亞砜(3mol)，然后加熱回流5小時，稍冷，減壓蒸餾，蒸出多余的二氯亞砜，然后冷卻，將反應(yīng)液倒入200ml冰水，用二氯甲烷300mL分三次萃取。5％碳酸鈉100ml洗兩次，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得淡黃色油狀物M2。
將膽固醇1mol溶于500mlDMF中，室溫攪拌冷水浴加入1.2mol氫化鈉，攪拌2小時，然后加入M2 2.0mol攪拌，然后80度反應(yīng)4小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得產(chǎn)品M3。
將PEG 1mol溶入300mlDMF中，室溫攪拌下加入1.2mol氫化鈉，攪拌2小時，然后加入0.8mol M3，攪拌，然后80度反應(yīng)5小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，以甲醇柱層析得淺黃色粘稠狀固體，結(jié)構(gòu)式如下 合成方案7當R2＝-CH2CH2CH(COOC2H5)CH2CH2-時(酯)，將M1 1mol加入反應(yīng)瓶中，攪拌下加入二氯亞砜(3mol)，然后加熱回流5小時，稍冷，減壓蒸餾，蒸出多余的二氯亞砜，然后冷卻，將反應(yīng)液倒入200ml冰水，用二氯甲烷300mL分三次萃取。5％碳酸鈉100ml洗兩次，飽和氯化鈉洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得淡黃色油狀物M2。
將膽固醇1mol溶于500mlDMF中，室溫攪拌冷水浴加入1.2mol氫化鈉，攪拌2小時，然后加入M2 2.0mol攪拌，然后80度反應(yīng)5小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，得產(chǎn)品M3。
將PEG 1mol溶入300mlDMF中，室溫攪拌下加入1.2mol氫化鈉，攪拌2小時，然后加入0.8mol M3，攪拌，然后80度反應(yīng)5小時，TLC點樣反應(yīng)完全，然后冷卻，倒入800ml冰水中，用二氯甲烷1000ml分三次萃取，合并有機層，然后水洗三次，飽和氯化鈉洗一次，有機層無水硫酸鈉干燥，過濾，回收溶劑至盡，以甲醇柱層析得淺黃色粘稠狀固體，結(jié)構(gòu)式如下 R1可以是-H，也可以接直鏈或支鏈烷、烯、炔類，如-CH3，-CH2CH2CH3，-CH2CH(CH2CH2)nCH3，-CH＝CHCH3，-CH2C＝CH2等等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)；R1也可以是直鏈或支鏈醇、酮、醚、酯、酸及其鹽、胺、酰胺類，如-CH2OH，-CH2COCH3，-CH2O(CH2CH2)nCH3，-CH2COOH，-CH2CH2NH2等等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)；其中n為整數(shù)，范圍為2-12例舉合成R1的方法如下在PEG的另外一端用醚鍵接上甲基，其合成方法是取0.5mmol/L以上合成的產(chǎn)物溶于5-10ml水中，加入0.4-1mmol的硫酸二甲酯，冰浴下攪拌，緩慢滴加1mol/L氫氧化鈉溶液2ml，反應(yīng)12h，TLC跟蹤反應(yīng)進程，反應(yīng)結(jié)束后滴加硫酸調(diào)節(jié)pH2.0，抽濾，獲得固體用硅膠柱層析重結(jié)晶，即得本發(fā)明的2-甲基PEG膽固醇脂肪酸(氨基脂肪酸)醚。
在PEG的另外一端用酯鍵連接上甲基、乙基等小分子脂肪酸，其合成方法是取1mmol/L以上合成的產(chǎn)物溶于5ml-10ml乙腈中，加入400-600mgDCC，再緩慢滴加0.0012mol冰醋酸，然后滴加2-4ml鹽酸，加熱回流6-10小時，TLC跟蹤反應(yīng)進程。待反應(yīng)結(jié)束后，加入20ml-40ml水，用等倍量的乙酸乙酯萃取，共2次，分離乙酸乙酯層，飽和食鹽水洗滌2次，用無水硫酸鈉干燥，蒸干，反復(fù)重結(jié)晶即得本發(fā)明的2-脂肪酸酯化的PEG膽固醇脂肪酸(氨基脂肪酸)醚。
本發(fā)明PEG接枝修飾的甾醇共聚物的應(yīng)用，可以作為疏水藥物的載體，比如與疏水藥物組合成納米乳劑，脂質(zhì)體以及能分散于水的膠束或納米粒，其中藥物占總固體物的0.001-30％，粒徑分布在10～1000nm；也可以作為高級化妝品的輔料，作為化妝品的輔料，具有非常優(yōu)良的保濕效果，也可以用于皮下注射消除皺紋。
可以使用本發(fā)明PEG接枝修飾的共聚物的藥物包括但不限于以下疏水藥物抗菌藥，抗病毒藥，抗真菌藥，抗炎物質(zhì)，冠脈擴張藥，腦血管擴張劑，血管收縮劑，擬精神藥物，抗腫瘤藥物，興奮劑，抗組胺藥物、抗高血壓藥物，血管收縮藥，抗偏頭痛藥物、抗血栓藥、抗心律失常藥，維生素，止泄藥，鎮(zhèn)痛藥，神經(jīng)肌肉藥，作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的試劑以及溶解性很差的蛋白、多肽、肽等生物藥。比如紫杉醇、多稀紫杉醇、布洛芬、阿霉素系列、替尼泊苷、依托泊苷、道諾霉素、絲裂霉素、甲氨蝶呤、絲裂霉素C、茚甲新、環(huán)孢菌素、前列地爾、丙泊酚、尼莫地平、異長春花堿、羥基喜樹堿、阿糖胞苷、雷替曲塞、克拉霉素、伏立康唑、伊曲康唑、兩性霉素B、卡泊、順泊、奧沙利泊、奈達泊等。
本發(fā)明PEG接枝修飾的共聚物與藥物制成的制劑，其給藥途徑可以口服、注射、經(jīng)皮或粘膜給藥，現(xiàn)將制備方法介紹如下一、本發(fā)明PEG接枝修飾的共聚物(PGC)，其與疏水藥物組合制備成納米乳劑的方法如下1、本發(fā)明的注射用亞納米乳制劑，其制備方法如下a)將藥物溶于適量溶劑中，加入脂肪酸甘油酯、甘油三酯、脂肪酸、PGC和磷脂，加熱熔融制成油相，除去揮發(fā)性溶劑，甘油適量溶于適量水(PH10-11)中，于50～90℃高速攪拌制成水相，油水兩相混合于50～90℃高速攪拌制成初乳劑，調(diào)節(jié)PH值4.5～8.0。
b)取上述(a)中初乳劑，注射用水定容至處方量，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機中，反復(fù)乳化。至乳滴平均粒徑≤0.5微米。
C)取上述(b)的乳劑過濾后，充氮氣灌裝，滅菌既得。
2、本發(fā)明PEG接枝修飾的共聚物(PGC)制成的納米乳制劑，其制備方法如下a)將藥物用適量溶劑溶解，加入PGC，加熱熔融，再加入處方量的水(PH10-11)，充分攪拌，加入適量助表面活性劑(乙醇或丙二醇)得澄明或半澄明溶液，調(diào)節(jié)PH值4.0～9.0。
b)取上述(a)的微乳制劑除菌過濾后，充氮氣灌裝，滅菌既得。
口服乳劑中還可以含芳香劑和防腐劑，其中芳香劑包括橘子香精、香蕉香精、草莓香精、奶油香精中的一種或幾種，防腐劑包括尼泊金酯類、苯甲酸類中的一種或幾種。
二、本發(fā)明PEG接枝修飾的共聚物(PGC)，其與疏水藥物組合制備成膠束的制備方法如下a)將疏水藥物和PEG接枝修飾的共聚物、適量穩(wěn)定劑如聚乳酸與聚乙二醇的嵌段共聚物或聚氧乙烯-聚氨基酸共聚物用適量溶劑溶解，減壓蒸去溶劑，加入處方量的水溶液，攪拌均勻，高速攪拌至乳滴平均粒徑≤0.5微米。
b)取上述的乳劑過濾后，充氮氣灌裝，滅菌既得。
三、本發(fā)明PEG接枝修飾的共聚物(PGC)，其與疏水藥物組合制備成脂質(zhì)體的方法如下a)將藥物和PEG接枝修飾的共聚物加入適量處方量的卵磷脂用適量溶劑溶解，減壓蒸去溶劑，加入處方量的磷酸緩沖鹽溶液，充分攪拌，形成多室脂質(zhì)體。
b)取上述(a)中的多室脂質(zhì)體，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機中，反復(fù)乳化。至乳滴平均粒徑≤0.5微米。
C)取上述(b)的乳劑過濾后，充氮氣灌裝，滅菌既得。
四、本發(fā)明PEG接枝修飾的共聚物(PGC)，其與疏水藥物組合制備成鈉米粒的方法如下a)將處方量的單硬脂酸甘油脂、脂肪酸、卵磷脂、PEG膽固醇酯及藥物加熱熔融，加入處方量的注射用水(PH10-11)和甘露醇攪拌制成初乳，調(diào)節(jié)PH值4.5～8.0，再用高壓均質(zhì)機對初乳體系進行循環(huán)高壓均質(zhì)乳化至粒度符合規(guī)定。
b)上述乳劑過濾后，加入適量凍干保護劑低分子右旋糖苷，冷凍干燥充氮氣壓蓋既得。
具體實施例實施例一(亞納米乳劑型)組方1紫杉醇0.01％～3.0％、共溶劑0.01％～5.0％、磷脂0.5％～6.0％、PGC0.1％～5.0％、甘油三酯5％～30％、甘油1.0％～6.0％、油酸1.0％～6.0％，注射用水添至100ml。
稱取紫杉醇100-500mg溶于適量共溶劑(無水乙醇)1中，溶入15g甘油三酯和0.1-5g油酸中，于50℃～80℃高速攪拌使混合均勻，制成油相；蒸發(fā)除去乙醇；稱取蛋黃卵磷脂1.0g、PGC1.0g、甘油3g，加入處方量的水于50℃～80℃高速攪拌使充分分散，制成水相。油水兩相混合，于50℃～80℃高速攪拌制成初乳劑。取初乳劑，注射用水定容至處方量，調(diào)節(jié)PH值為5.0～7.0，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機中，反復(fù)乳化至乳滴平均粒徑≤0.5微米，除菌過濾，充氮氣灌裝，滅菌既得。
實施例二(納米微乳劑型)組方1阿霉素0.01％～2.0％、阿霉素共溶劑0.01％～5.0％、PGC0.1％～5.0％、助表面活性劑(無水乙醇、丙二醇)適量，注射用水添至100ml。
稱取阿霉素100-500mg溶于阿霉素共溶劑(無水乙醇)中，加入PGC2.0g、丙二醇1.0g及適量水于20℃-80℃攪拌使混合均勻，不斷攪拌，加適量無水乙醇滴定至呈半透明溶液，調(diào)節(jié)PH值為5.0～7.0，除菌過濾充氮氣灌裝，滅菌既得。
實施例三(膠束)組方1尼莫地平0.01％～2.0％、尼莫地平共溶劑0.01％～5.0％、PGC0.1％～5.0％、聚氧乙烯-聚氨基酸共聚物適量，注射用水添至100ml。
尼莫地平、PGC和聚氧乙烯-聚氨基酸共聚物用適量溶劑溶解，減壓蒸去溶劑，加入處方量的水溶液，攪拌均勻，高速攪拌至乳滴平均粒徑≤0.5微米，乳劑過濾后，充氮氣灌裝，滅菌既得。
實施例四(脂質(zhì)體)組方1異長春花堿0.01％～2.0％、PGC0.1％～5.0％、卵磷脂2.0％～6.0％，甘露醇5.0％～15.0％注射用水添至100ml。
稱取異長春花堿50-100mg、PGC2.0g、卵磷脂4.0g溶于溶于適量有機溶劑中，減壓蒸去溶劑，加入處方量的溶有甘露醇的磷酸緩沖鹽溶液，充分攪拌，形成多室脂質(zhì)體，轉(zhuǎn)移至高壓乳勻機中，反復(fù)乳化至乳滴平均粒徑≤0.5微米，乳劑過濾后，充氮氣灌裝，滅菌既得。
實施例五(固體脂質(zhì)納米粒)組方1羥基喜樹堿0.01％～2.0％、PGC0.1％～5.0％、單硬脂酸甘油酯1.0％～6.0％、脂肪酸1.0％～6.0％、卵磷脂2.0％～6.0％、甘露醇2.0％～6.0％，注射用水添至30ml。
a)將處方量的單硬脂酸甘油酯2.0g、脂肪酸1.0g、卵磷脂1.0g、PGC2.0g及羥基喜樹堿100mg加熱熔融，加入處方量的注射用水(PH10-11)和甘露醇5.0g攪拌制成初乳，調(diào)節(jié)PH值4.5～8.0，再用高壓均質(zhì)機對初乳體系進行循環(huán)高壓均質(zhì)乳化至粒度符合規(guī)定。
b)上述乳劑加入適量凍干保護劑低分子右旋糖苷，過濾后，冷凍干燥，充氮氣壓蓋既得。
實施例六(口服自乳化載藥系統(tǒng))組方1醋酸甲地孕酮0.1％～10.0％、PGC2.0％～10.0％、癸酸20.0％～40.0％、Fluronic F685.0％～20.0％、聚氧乙烯蓖麻油10.0％～20.0％。
將處方量的醋酸甲地孕酮、PGC、癸酸、Fluronic F68、聚氧乙烯蓖麻油反復(fù)研磨混合均勻，加熱熔融既得口服自乳化載藥體系統(tǒng)。
將該系統(tǒng)按照常規(guī)方法可以稀釋成口服乳液，也可壓制成軟膠囊或罐裝成液體硬膠囊。
實施例七(血管刺激性試驗)試驗藥物按照實施例(一、二、四、五)提供方法制備，羥基喜樹堿注射液，從市場購得，試驗時用0.9％氯化鈉注射液配制成5％溶液。
試驗動物健康家兔，體重2.3～2.4kg。
試驗方法取健康家兔10只，雌雄各半。按體重及性別分為0.9％氯化鈉注射液對照組、羥基喜樹堿注射液組和實施例(一、二、四、五)組，每組2只，于家兔左耳耳緣按臨床給藥濃度靜脈滴注10ml/kg，滴注速度1ml/分，每日1次，連續(xù)7日。對照組同法靜脈滴注0.9％氯化鈉注射液。除每次給藥時及給藥后觀察給藥局部表現(xiàn)外，于末次靜脈滴注后剪下藥側(cè)耳廓，常規(guī)固定后，在距靜脈滴注入針近心端1cm處，每隔1cm切取0.5cm寬標本，共取3塊標本。切片染色，進行鏡下病理觀察，結(jié)果見下表血管刺激性試驗

備注“++”嚴重、“+”少許、“-”無以上試驗結(jié)果表明，本發(fā)明制備的制劑具有刺激性小的優(yōu)點。
實施例8(PGC用于制備伏立康唑納米制劑的初步藥代動力學(xué)研究)健康SD大鼠12只，雌雄各半，體重220g左右，隨機分為2組，自由進食與飲水。一組以36mg/kg的劑量經(jīng)大鼠尾靜脈緩慢注射給予采用PGC作為輔料的伏立康唑納米制劑制劑溶液(給藥體積9mL/kg)；另一組以36mg/kg的劑量經(jīng)大鼠尾靜脈緩慢注射給予未采用PGC作為輔料的按高壓乳勻法制備的伏立康唑亞納米制劑制劑(給藥體積9mL/kg)。分別于藥前及給藥后5，10，30，60min，2，4，6，8，10，12，24h采集血漿，依法測定。
大鼠靜脈注射給予兩種伏立康唑制劑36mg/kg后伏立康唑的平均血藥濃度-時間曲線見

圖1，其中PGC代表采用PGC作為輔料的伏立康唑納米制劑制劑，Normal代表未采用PGC作為輔料制備的伏立康唑亞納米制劑。
由圖可知采用PGC作為輔料的伏立康唑納米制劑制劑給藥后，血漿藥物濃度緩慢下降，24h后仍能檢測到伏立康唑的存在，表明本制劑具有一定的緩釋特征，如采用靜脈滴注方式，可達到一天給藥一次緩慢釋放的效果，從而減少了給藥次數(shù)，增加了病人的順應(yīng)性；而未采用PGC作為輔料的按高壓乳勻法制備的伏立康唑亞納米制劑制劑給藥后，血漿濃度快速下降，12h已經(jīng)接近定量限的濃度，基本檢測不到伏立康唑，表明其藥代動力學(xué)性質(zhì)較差。
結(jié)論伏立康唑具有較大的分子空間結(jié)構(gòu)，3個大的環(huán)狀結(jié)構(gòu)，因而很難被完全包封于納米級的磷脂小球中而不泄漏或析出。而本公司采用新型輔料PGC則能有效包裹藥物，包封率高達98％以上，取得良好效果。并且制劑性狀為白色半透明液體，有藍色乳光，性狀良好。通過藥代動力學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，采用新型輔料PGC制備納米制劑具有較好的藥動學(xué)特征，藥物在動物體內(nèi)延緩消除，達到較長的循環(huán)起效時間，緩釋效果明顯。
總之，采用PGC制備的納米制劑經(jīng)評價在各方面均優(yōu)于普通的乳劑和注射液、凍干粉針，具有廣闊的開發(fā)前景和無可比擬的市場競爭力。
權(quán)利要求
1.一類聚乙二醇修飾的甾醇共聚物，其特征在于結(jié)構(gòu)式為 其中ChOL代表一種甾醇類化合物；R1可以是-H，也可以接直鏈或支鏈烷、烯、炔類，如-CH3、-CH2CH2CH3、-CH2CH(CH2CH2)nCH3、-CH＝CHCH3、-CH2C＝CH2等等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)；R1也可以是直鏈或支鏈醇、酮、醚、酯、酸及其鹽、胺、酰胺類，如-CH2OH、-CH2COCH3、-CH2O(CH2CH2)nCH3、-CH2COOH、-CH2CH2NH2-COCH3等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)；R2可以是直鏈或支鏈烷、烯、炔類，如-CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2C(CH3)2-CH2-(CH2)n-、-CH2CH(CH2CH2)nCH2-、-CH＝CHCH2-、-CH2C＝CH-等等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)；R2結(jié)構(gòu)中也可以帶有其他的官能團，其中包括酮、醚、酯、胺、酰胺類，如-CH2OCH2-、-CH2COCH2-、-CH2O(CH2CH2)nCH2-、-CH2COOCH2-、-CH2CH2NH CH2-等等，包括但不局限于以上結(jié)構(gòu)；其中ChOL與R2和PEG均以醚鍵相連接；其中n為整數(shù)，范圍為2-30。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的共聚物，其中甾醇包括膽固醇、7-脫氫膽固醇、麥角固醇、維生素D3及維生素D2中的一種；
3.根據(jù)權(quán)利要求1的共聚物，其中R1的作用可以包括以下一種或幾種調(diào)節(jié)親水性和親脂性，水溶性和脂溶性等；R2的作用包括調(diào)節(jié)極性和溶解性；可以根據(jù)不同的目的進行不同的結(jié)構(gòu)修飾；
4.根據(jù)權(quán)利要求1的聚乙二醇(PEG)為環(huán)氧乙烷和水縮聚而成的混合物，其分子量范圍為200-20000。
5.根據(jù)權(quán)利要求2中的甾醇，其特征在于優(yōu)選膽固醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1中的R1，其特征在于優(yōu)選-H、-CH3或-COCH3。
7.根據(jù)權(quán)利要求1中的R2，其特征在于優(yōu)選直鏈或支鏈烷，-CH2(CH2)nCH2-，-CH2C(CH3)2-CH2-(CH2)n-，其中n在2-12之間。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的共聚物，聚乙二醇與甾醇之間通過R2用醚鍵相連，基本合成路線為R2與二氯亞砜反應(yīng)生成氯化物，再與甾醇反應(yīng)得到R2-O-ChOL，然后與PEG形成醚；合成過程中二氯亞砜為鹵化劑，氫化鈉為堿，中和反應(yīng)生成的HCl，此處堿不局限于NaH，還包括其他的有機或無機堿，如甲醇鈉、碳酸鉀、氫氧化鈉、三乙胺和吡啶等。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的共聚物的應(yīng)用，可以作為疏水藥物的載體，也可以作為高級化妝品的輔料，也可以用于皮下注射消除皺紋。
全文摘要
本發(fā)明是將PEG通過小分子的化合物以醚鍵接枝于甾醇(ChOL)合成共聚物(PGC)，該共聚物(PGC)可以作為表面活性劑用來制備水溶液分散體比如納米乳劑，脂質(zhì)體；也可以作為載體成分之一用來制備能分散于水的膠束、固體脂質(zhì)納米?；蚣{米粒；還可以作為長循環(huán)納米、溫度或pH敏感性納米載體成分之一；也可以作為高級化妝品的輔料；也可以用于皮下注射消除皺紋。
文檔編號C08G65/06GK1962683SQ200610168130
公開日2007年5月16日 申請日期2006年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月18日
發(fā)明者張文芳 申請人:張文芳