專利名稱:一種t細胞培養(yǎng)器的制造方法
【專利摘要】本實用新型涉及一種T細胞培養(yǎng)器，包括一密閉的容器，所述容器內(nèi)容置有一個以上的磁珠顆粒，每個磁珠顆粒上附著有用于與外周血中T細胞和自然殺傷T細胞結合的抗體；所述容器的頂部設有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入管，所述容器的底部設有一用于排液的單向雙出口管；所述容器外壁上還貼設有一電磁鐵，所述電磁鐵與一控制模塊電連；所述單向雙入口管和單向雙出口管均與所述容器內(nèi)部相連通。本實用新型的有益效果在于：病人標本從一個輸液管進去之后就與外界隔離開來了，等到培養(yǎng)程序完成之后從另外一個出口收集，病人與病人之間的細胞在同一個空間之內(nèi)互相之間沒有機會接觸和產(chǎn)生可能的交叉污染。
【專利說明】
一種T細胞培養(yǎng)器
技術領域
[0001 ]本實用新型涉及T細胞培養(yǎng)領域，尤其涉及一種T細胞培養(yǎng)器。
【背景技術】
[0002]外周血淋巴細胞培養(yǎng)是一種常見的體外細胞培養(yǎng)技術，其中涉及外周血淋巴細胞的分離，一般采用FICOLL梯度離心吸取淋巴細胞層到一個培養(yǎng)皿中，或者用吸附⑶3或⑶28抗體的磁珠特異性吸附T淋巴細胞在磁珠表面，然后用普通培養(yǎng)皿里培養(yǎng)，用吸管吸取淋巴細胞到一個培養(yǎng)皿中加入培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)是在一個開放的細胞培養(yǎng)通風廚(潔凈工作臺)中完成，空間大轉移過程容易受到空氣中的細菌病毒等微生物的污染，放在37°C細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在轉染時，需要移出來放到通風廚里面換液加轉染液，然后再放回到37°C細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，中間還需要反反復復從細胞培養(yǎng)箱里面拿出來到潔凈工作臺，又從潔凈工作臺到細胞培養(yǎng)箱中，一直到培養(yǎng)完成。臨床上CART細胞培養(yǎng)做這樣的操作程序只能一次一個病人，兩個病人在同一個細胞培養(yǎng)房內(nèi)是不允許的，因為無法保證兩個病人的血細胞培養(yǎng)不互相交叉污染，因此目前臨床級別的血淋巴細胞培養(yǎng)在這種開放培養(yǎng)方式下手續(xù)煩瑣，效率低下，人力物力消耗很大，成本很高，無法大規(guī)模推廣。
【實用新型內(nèi)容】
[0003]本實用新型的目的是針對以上不足之處，提供了一種T細胞培養(yǎng)器，成本低，避免交叉感染。
[0004]本實用新型解決技術問題所采用的方案是:一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:包括一密閉的容器，所述容器內(nèi)容置有一個以上的磁珠顆粒，每個磁珠顆粒上附著有用于與外周血中T細胞或自然殺傷T細胞結合的抗體;所述容器的頂部設有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入口管，所述容器的底部設有一用于排液的單向雙出口管;所述容器外壁上還貼設有一電磁鐵，所述電磁鐵與一控制模塊電連;所述單向雙入口管和單向雙出口管均與所述容器內(nèi)部相連通。
[0005]進一步的，所述單向雙入口管包括位于單向雙入口管頂端的血液標本入口和包裝病毒轉染液入口，所述單向雙出口管的底端設置有第一出口和第二出口，所述第一出口與廢液袋相連通，所述第二出口與輸液袋相連通;所述廢液袋容置有少量防腐劑。
[0006]進一步的，所述單向雙入口管的下端和單向雙出口管的上端分別設有一第一單向閥和第二單向閥，所述第一單向閥和第二單向閥均與控制模塊電連。
[0007]進一步的，所述抗體為⑶3單克隆抗體、⑶3多克隆抗體或⑶28抗體。
[0008]進一步的，所述容器的側壁上還分別設有用于輸入生理鹽水的進液管、用于輸入空氣和C02的混合氣體的進氣管和用于輸入培養(yǎng)液的輸液管，所述進液管、進氣管和輸液管上均設有一用于調(diào)節(jié)輸入量的調(diào)節(jié)閥，每個調(diào)節(jié)閥均與所述控制模塊電連;所述進液管、進氣管和輸液管與所述容器內(nèi)部相連通。
[0009]進一步的，所述容器容置于一37°C的密閉保溫箱內(nèi)，所述密閉保溫箱上設有五個分別與所述單向雙入口管、單向雙出口管、進液管、進氣管和輸液管對應配合穿出的通孔。
[0010]進一步的，還包括一用于支撐所述電磁鐵的機械手，所述機械手設置于所述容器下方且經(jīng)一電機驅(qū)動繞所述容器轉動;所述機械手還經(jīng)一縱向驅(qū)動機構上下移動。
[0011]與現(xiàn)有技術相比，本實用新型有以下有益效果:打開第一單向閥，血樣本從單向雙入口管內(nèi)注入至容器中，容器里面充滿磁珠，直徑為4.5微米，表面附著⑶3單克隆抗體，與T細胞發(fā)生結合反應，讓病人血中T細胞充分與磁珠表面結合30-40分鐘(輕輕地搖晃)，將電磁鐵把磁珠吸附在容器的表面，打開容器底部的第二單向閥，讓未結合的細胞緩緩流走，用生理鹽水沖洗，之后將培養(yǎng)液栗入培養(yǎng)皿進行培養(yǎng)。
【附圖說明】

[0012]下面結合附圖對本實用新型專利進一步說明。
[0013]圖1為本發(fā)明實施例的結構示意圖。
[0014]圖2為發(fā)明實施例帶有保溫箱的結構示意圖。
[0015]圖中:1-容器;2-磁珠顆粒;3-單向雙入口管;4-單向雙出口管;5-進氣管;6-進液管;7-輸液管;8-電磁鐵;9-第一單向閥；10-第二單向閥；11-調(diào)節(jié)閥；12-保溫箱。
【具體實施方式】
[0016]下面結合附圖和【具體實施方式】對本實用新型進一步說明。
[0017]如圖1-2所示，本實施例的一種T細胞培養(yǎng)器，包括一密閉的容器I，所述容器I內(nèi)容置有一個以上的磁珠顆粒2，每個磁珠顆粒2上附著有用于與外周血中T細胞或自然殺傷T細胞結合的抗體;所述容器I的頂部設有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入口管3，所述容器I的底部設有一用于排液的單向雙出口管4;所述容器I外壁上還貼設有一電磁鐵8，所述電磁鐵8與一控制模塊電連;所述單向雙入口管2和單向雙出口管4均與所述容器I內(nèi)部相連通。
[0018]從上述可知，本實用新型的有益效果在于:病人新抽取的血標本經(jīng)過抗血凝處理緩緩地從單向雙入口管3注入至容器I中，輕輕搖晃讓血中淋巴細胞充分與磁珠混合接觸，T細胞包括自然殺傷T細胞由于表面有CD3抗原自然而然與磁珠表面的CD3抗體結合將T細胞吸引在磁珠球表面(T細胞分離)，而血中的非T細胞成分則用生理鹽水緩緩地沖走，T細胞就留在一體化的容器I里面，吸附在磁珠表面生長擴增，2-3天之后，T細胞擴增到5倍或者以上時即可以做下一步轉染。通過密閉的容器I，完成一對一的T細胞培養(yǎng)，成本低，而且可以避免交叉感染。
[0019]在本實施例中，所述單向雙入口管3包括位于單向雙入口管3頂端的血液標本入口和包裝病毒轉染液入口，所述單向雙出口管4的底端設置有第一出口和第二出口，所述第一出口與廢液袋相連通，所述第二出口與輸液袋相連通;所述廢液袋容置有少量防腐劑。廢液袋里面加入少量防腐劑，以防止細菌和真菌生長，房間里面為潔凈環(huán)境，空氣要過濾，角落不能有死角，要易于消毒。
[0020]在本實施例中，所述單向雙入管的下端和單向雙出口管4的上端分別設有一第一單向閥9和第二單向閥10，所述第一單向閥9和第二單向閥10均與控制模塊電連。第一單向閥9只進不出，在血標本輸入時打開，其余時間關閉，防止外部空氣進入;第二單向閥10只出不進，在排液的過程中打開，其他時間關閉，防止外部空氣進入，更好的保證容器I的密閉性。
[0021]在本實施例中，所述抗體為⑶3單克隆抗體、CD3多克隆抗體或⑶28抗體。⑶28可以同時與CD3—起粘附在磁珠表面起著刺激T細胞生長作用，也可以將CD28融合蛋白加入到培養(yǎng)液中起到刺激細胞生長的作用。
[0022]在本實施例中，所述容器I的側壁上還分別設有用于輸入生理鹽水的進液管6、用于輸入空氣和C02的混合氣體的進氣管5和用于輸入培養(yǎng)液的輸液管7，所述進液管6、進氣管5和輸液管7上均設有一用于調(diào)節(jié)輸入量的調(diào)節(jié)閥11，每個調(diào)節(jié)閥11均與所述控制模塊電連;所述進液管6、進氣管5和輸液管7與所述容器I內(nèi)相連通。空氣和C02的混合氣體的比例95%:5%，所述進液管6、進氣管5和輸液管7的入接口均是無菌無毒容易入接且可以自動可以控制流入量的栗裝置，通過調(diào)節(jié)閥11調(diào)節(jié)輸入量，入接口只可出不可進以防止外面的東西吸入細胞培養(yǎng)液和生理鹽水瓶里面去。
[0023]在本實施例中，所述容器I容置于一37°C的密閉保溫箱12內(nèi)，所述密閉保溫箱12上設有五個分別與所述單向雙入口管3、單向雙出口管4、進液管6、進氣管5和輸液管7對應配合穿出的通孔。
[0024]在本實施例中，還包括一用于支撐所述電磁鐵8的機械手，所述機械手設置于所述容器I下方且經(jīng)一電機驅(qū)動繞所述容器轉動;所述機械手還經(jīng)一縱向驅(qū)動機構上下移動。所述機械手可以設置于保溫箱12的下方或周側，用于搖晃容器，便于T細胞充分分離。所述縱向驅(qū)動機構可以為縱向設置的絲桿機構。
[0025]綜上所述，本實用新型提供的一種T細胞培養(yǎng)器，占用空間小，成本低，可以實現(xiàn)T細胞的一體式培養(yǎng)，避免交叉感染。
[0026]上列較佳實施例，對本實用新型的目的、技術方案和優(yōu)點進行了進一步詳細說明，所應理解的是，以上所述僅為本實用新型的較佳實施例而已，并不用以限制本實用新型，凡在本實用新型的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本實用新型的保護范圍之內(nèi)。
【主權項】
1.一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:包括一密閉的容器，所述容器內(nèi)容置有一個以上的磁珠顆粒，每個磁珠顆粒上附著有用于與外周血中T細胞或自然殺傷T細胞結合的抗體;所述容器的頂部設有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入口管，所述容器的底部設有一用于排液的單向雙出口管;所述容器外壁上還貼設有一電磁鐵，所述電磁鐵與一控制模塊電連；所述單向雙入口管和單向雙出口管均與所述容器內(nèi)部相連通。2.根據(jù)權利要求1所述的一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:所述單向雙入口管包括位于單向雙入口管頂端的血液標本入口和包裝病毒轉染液入口，所述單向雙出口管的底端設置有第一出口和第二出口，所述第一出口與廢液袋相連通，所述第二出口與輸液袋相連通;所述廢液袋容置有少量防腐劑。3.根據(jù)權利要求2所述的一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:所述單向雙入口管的下端和單向雙出口管的上端分別設有一第一單向閥和第二單向閥，所述第一單向閥和第二單向閥均與控制模塊電連。4.根據(jù)權利要求1所述的一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:所述抗體為CD3單克隆抗體、⑶3多克隆抗體或⑶28抗體。5.根據(jù)權利要求1所述的一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:所述容器的側壁上還分別設有用于輸入生理鹽水的進液管、用于輸入空氣和C02的混合氣體的進氣管和用于輸入培養(yǎng)液的輸液管，所述進液管、進氣管和輸液管上均設有一用于調(diào)節(jié)輸入量的調(diào)節(jié)閥，每個調(diào)節(jié)閥均與所述控制模塊電連;所述進液管、進氣管和輸液管與所述容器內(nèi)部相連通。6.根據(jù)權利要求5所述的一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:所述容器容置于一37 °C的密閉保溫箱內(nèi)，所述密閉保溫箱上設有五個分別與所述單向雙入口管、單向雙出口管、進液管、進氣管和輸液管對應配合穿出的通孔。7.根據(jù)權利要求6所述的一種T細胞培養(yǎng)器，其特征在于:還包括一用于支撐所述電磁鐵的機械手，所述機械手設置于所述容器下方且經(jīng)一電機驅(qū)動繞所述容器轉動;所述機械手還經(jīng)一縱向驅(qū)動機構上下移動。
【文檔編號】C12M1/36GK205710771SQ201620343924
【公開日】2016年11月23日
【申請日】2016年4月22日
【發(fā)明人】林基禎, 倪華, 劉力
【申請人】福州創(chuàng)方醫(yī)藥科技有限公司