專利名稱:一體式t細(xì)胞培養(yǎng)裝置的制造方法
【專利摘要】本實(shí)用新型涉及一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，包括一立式工作臺(tái)、設(shè)置于立式工作臺(tái)上且密閉的保溫箱、容置于保溫箱內(nèi)且密閉的容器，容器內(nèi)容置有一個(gè)以上的磁珠顆粒，每個(gè)磁珠顆粒上附著有抗體；容器的頂部設(shè)有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入口管，容器的底部設(shè)有一用于排液的單向雙出口管；容器外壁上還貼設(shè)有一電磁鐵；容器的側(cè)壁上還分別設(shè)有用于輸入生理鹽水的進(jìn)液管、用于輸入空氣和CO2的混合氣體的進(jìn)氣管和用于輸入培養(yǎng)液的輸液管，進(jìn)液管、進(jìn)氣管和輸液管上均設(shè)有一用于調(diào)節(jié)輸入量的調(diào)節(jié)閥。本實(shí)用新型的有益效果在于：病人與病人之間的細(xì)胞在同一個(gè)空間之內(nèi)互相之間沒(méi)有機(jī)會(huì)接觸和產(chǎn)生可能的交叉污染。
【專利說(shuō)明】
一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本實(shí)用新型涉及T細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域，尤其涉及一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)是一種常見的體外細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，其中涉及外周血淋巴細(xì)胞的分離，一般采用FICOLL梯度離心吸取淋巴細(xì)胞層到一個(gè)培養(yǎng)皿中，或者用吸附⑶3或⑶28抗體的磁珠特異性吸附T淋巴細(xì)胞在磁珠表面，然后用普通培養(yǎng)皿里培養(yǎng)，用吸管吸取淋巴細(xì)胞到一個(gè)培養(yǎng)皿中加入培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，這種培養(yǎng)是在一個(gè)開放的細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)廚(潔凈工作臺(tái))中完成，空間大轉(zhuǎn)移過(guò)程容易受到空氣中的細(xì)菌病毒等微生物的污染，放在37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。在轉(zhuǎn)染時(shí)，需要移出來(lái)放到通風(fēng)廚里面換液加轉(zhuǎn)染液，然后再放回到37°C細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，中間還需要反反復(fù)復(fù)從細(xì)胞培養(yǎng)箱里面拿出來(lái)到潔凈工作臺(tái)，又從潔凈工作臺(tái)到細(xì)胞培養(yǎng)箱中，一直到培養(yǎng)完成。臨床上CART細(xì)胞培養(yǎng)做這樣的操作程序只能一次一個(gè)病人，兩個(gè)病人在同一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)房?jī)?nèi)是不允許的，因?yàn)闊o(wú)法保證兩個(gè)病人的血細(xì)胞培養(yǎng)不互相交叉污染，因此目前臨床級(jí)別的血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)在這種開放培養(yǎng)方式下手續(xù)煩瑣，效率低下，人力物力消耗很大，成本很高，無(wú)法大規(guī)模推廣。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0003]本實(shí)用新型的目的是針對(duì)以上不足之處，提供了一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，成本低，避免交叉感染，并且將細(xì)胞分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增和轉(zhuǎn)染融為一體。
[0004]本實(shí)用新型解決技術(shù)問(wèn)題所采用的方案是:一種一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，包括一立式工作臺(tái)、設(shè)置于立式工作臺(tái)上且密閉的保溫箱、容置于保溫箱內(nèi)且密閉的容器，所述容器內(nèi)容置有一個(gè)以上的磁珠顆粒，每個(gè)磁珠顆粒上附著有用于與外周血中T細(xì)胞或自然殺傷T細(xì)胞結(jié)合的抗體;所述容器的頂部設(shè)有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入口管，所述容器的底部設(shè)有一用于排液的單向雙出口管;所述容器外壁上還貼設(shè)有一電磁鐵，所述電磁鐵與一控制模塊電連;所述容器的側(cè)壁上還分別設(shè)有用于輸入生理鹽水的進(jìn)液管、用于輸入空氣和C02的混合氣體的進(jìn)氣管和用于輸入培養(yǎng)液的輸液管，所述進(jìn)液管、進(jìn)氣管和輸液管上均設(shè)有一用于調(diào)節(jié)輸入量的調(diào)節(jié)閥，每個(gè)調(diào)節(jié)閥均與所述控制模塊電連;所述單向雙入口管、單向雙出口管、進(jìn)液管、進(jìn)氣管和輸液管均與所述容器內(nèi)部相連通。
[0005]進(jìn)一步的，還包括一設(shè)置于立式工作臺(tái)旁側(cè)的輔助工作臺(tái)，所述輔助工作臺(tái)上設(shè)置有用于容置生理鹽水的第一儲(chǔ)液罐、容置有T細(xì)胞培養(yǎng)液的第二儲(chǔ)液罐和混合有空氣和C02氣體的氣體罐，所述第一儲(chǔ)液罐、第二儲(chǔ)液罐和氣體罐分別與進(jìn)液管、輸液管和進(jìn)氣管相連通。
[0006]進(jìn)一步的，所述輔助工作臺(tái)上上設(shè)置有一操作面板，所述調(diào)節(jié)閥并排卡設(shè)于操作面板上，所述操作面板上還是有用于顯示輸入量的顯示模塊，所述顯示模塊與所述控制模塊電連。
[0007]進(jìn)一步的，所述單向雙入口管包括位于單向雙入口管頂端的血液標(biāo)本入口和包裝病毒轉(zhuǎn)染液入口，所述單向雙出口管的底端設(shè)置有第一出口和第二出口，所述第一出口與廢液袋相連通，所述第二出口與輸液袋相連通;所述廢液袋容置有少量防腐劑。
[0008]進(jìn)一步的，所述單向雙入口管的下端和單向雙出口管的上端分別設(shè)有一第一單向閥和第二單向閥，所述第一單向閥和第二單向閥均與控制模塊電連。
[0009]進(jìn)一步的，所述抗體為⑶3單克隆抗體、⑶3多克隆抗體或⑶28抗體。
[0010]進(jìn)一步的，所述保溫箱上設(shè)有五個(gè)分別與所述單向雙入口管、單向雙出口管、進(jìn)液管、進(jìn)氣管和輸液管對(duì)應(yīng)配合穿出的通孔。
[0011]進(jìn)一步的，還包括一用于支撐所述電磁鐵的機(jī)械手，所述機(jī)械手設(shè)置于所述容器下方且經(jīng)一電機(jī)驅(qū)動(dòng)繞所述容器轉(zhuǎn)動(dòng);所述機(jī)械手還經(jīng)一縱向驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)上下移動(dòng)。
[0012]進(jìn)一步的，所述容器的外形為橢圓形或者圓形，所述容器的底面呈水平。
[0013]進(jìn)一步的，所述T細(xì)胞培養(yǎng)裝置放置于一潔凈室內(nèi)，所述潔凈室的入口處自外向內(nèi)依次設(shè)有一更、二更、三更衣服通道以及貨物通道，所述潔凈室還設(shè)置有傳遞窗。
[0014]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型有以下有益效果:打開第一單向閥，血樣本從單向雙入口管內(nèi)注入至容器中，容器里面充滿磁珠，直徑為4.5微米，表面附著⑶3單克隆抗體，與T細(xì)胞發(fā)生結(jié)合反應(yīng)，讓病人血中T細(xì)胞充分與磁珠表面結(jié)合30-40分鐘(輕輕地?fù)u晃)，將電磁鐵把磁珠吸附在培養(yǎng)皿的表面，打開容器底部的第二單向閥，讓未結(jié)合的細(xì)胞緩緩流走，用生理鹽水沖洗，之后將培養(yǎng)液栗入培養(yǎng)皿進(jìn)行培養(yǎng)。本實(shí)用新型的T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，避免了在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中的煩瑣用人工換液，T細(xì)胞在容器之內(nèi)完成所有的細(xì)胞分離、培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染和擴(kuò)增的程序，不但節(jié)省空間，節(jié)省耗材，還節(jié)省人力和物力成本。
【附圖說(shuō)明】

[0015]下面結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型專利進(jìn)一步說(shuō)明。
[0016]圖1為本實(shí)用新型實(shí)施例的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0017]圖中:1-容器;2-磁珠顆粒;3-單向雙入口管;4-單向雙出口管;5-進(jìn)氣管;6-進(jìn)液管;7-輸液管;8-電磁鐵;9-第一單向閥；10-第二單向閥；11-調(diào)節(jié)閥；12-保溫箱；13-立式工作臺(tái)；14-輔助工作臺(tái)；15-第二儲(chǔ)液罐;16-第一儲(chǔ)液罐;17-氣體罐。
【具體實(shí)施方式】
[0018]下面結(jié)合附圖和【具體實(shí)施方式】對(duì)本實(shí)用新型進(jìn)一步說(shuō)明。
[0019]如圖1所示，本實(shí)施例的一種一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，包括一立式工作臺(tái)13、設(shè)置于立式工作臺(tái)13上且密閉的保溫箱12、容置于保溫箱12內(nèi)且密閉的容器I，所述容器I內(nèi)容置有一個(gè)以上的磁珠顆粒2，每個(gè)磁珠顆粒2上附著有用于與外周血中T細(xì)胞或自然殺傷T細(xì)胞結(jié)合的抗體;所述容器I的頂部設(shè)有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入口管3，所述容器I的底部設(shè)有一用于排液的單向雙出口管4;所述容器I外壁上還貼設(shè)有一電磁鐵8，所述電磁鐵8與一控制模塊電連;所述容器I的側(cè)壁上還分別設(shè)有用于輸入生理鹽水的進(jìn)液管6、用于輸入空氣和C02的混合氣體的進(jìn)氣管5和用于輸入培養(yǎng)液的輸液管7，所述進(jìn)液管6、進(jìn)氣管5和輸液管7上均設(shè)有一用于調(diào)節(jié)輸入量的調(diào)節(jié)閥11，每個(gè)調(diào)節(jié)閥11均與所述控制模塊電連；所述單向雙入口管3、單向雙出口管4、進(jìn)液管6、進(jìn)氣管5和輸液管7均與所述容器I內(nèi)部相連通?？諝夂虲02的混合氣體的比例95%: 5%，所述進(jìn)液管6、進(jìn)氣管5和輸液管7的入接口均是無(wú)菌無(wú)毒容易入接且可以自動(dòng)可以控制流入量的栗裝置，通過(guò)調(diào)節(jié)閥11調(diào)節(jié)輸入量，入接口只可出不可進(jìn)以防止外面的東西吸入細(xì)胞培養(yǎng)液和生理鹽水瓶里面去。
[0020]從上述可知，本實(shí)用新型的有益效果在于:病人新抽取的血標(biāo)本經(jīng)過(guò)抗血凝處理緩緩地從單向雙入口管3注入至容器I中，輕輕搖晃讓血中淋巴細(xì)胞充分與磁珠顆粒2混合接觸，T細(xì)胞包括自然殺傷T細(xì)胞由于表面有CD3抗原自然而然與磁珠表面的CD3抗體結(jié)合將T細(xì)胞吸引在磁珠球表面(T細(xì)胞分離)，而血中的非T細(xì)胞成分則用生理鹽水緩緩地沖走，T細(xì)胞就留在一體化的容器I里面，吸附在磁珠表面生長(zhǎng)擴(kuò)增，2-3天之后，T細(xì)胞擴(kuò)增到5倍或者以上時(shí)即可以做下一步轉(zhuǎn)染。通過(guò)密閉的容器I，完成一對(duì)一的T細(xì)胞培養(yǎng)，成本低，而且可以避免交叉感染。
[0021]在本實(shí)施例中，還包括一設(shè)置于立式工作臺(tái)13旁側(cè)的輔助工作臺(tái)14，所述輔助工作臺(tái)14上設(shè)置有用于容置生理鹽水的第一儲(chǔ)液罐16、容置有T細(xì)胞培養(yǎng)液的第二儲(chǔ)液罐15和混合有空氣和C02氣體的氣體罐17，所述第一儲(chǔ)液罐16、第二儲(chǔ)液罐15和氣體罐17分別與進(jìn)液管6、輸液管7和進(jìn)氣管5相連通。
[0022]在本實(shí)施例中，所述輔助工作臺(tái)14上上設(shè)置有一操作面板，所述調(diào)節(jié)閥11并排卡設(shè)于操作面板上，所述操作面板上還是有用于顯示輸入量的顯示模塊，所述顯示模塊與所述控制模塊電連。
[0023]在本實(shí)施例中，所述單向雙入口管3包括位于單向雙入口管3頂端的血液標(biāo)本入口和包裝病毒轉(zhuǎn)染液入口，所述單向雙出口管4的底端設(shè)置有第一出口和第二出口，所述第一出口與廢液袋相連通，所述第二出口與輸液袋相連通;所述廢液袋容置有少量防腐劑。廢液袋里面加入少量防腐劑，以防止細(xì)菌和真菌生長(zhǎng)，房間里面為潔凈環(huán)境，空氣要過(guò)濾，角落不能有死角，要易于消毒。
[0024]在本實(shí)施例中，所述單向雙入口管3的下端和單向雙出口管4的上端分別設(shè)有一第一單向閥9和第二單向閥10，所述第一單向閥9和第二單向閥10均與控制模塊電連。第一單向閥9只進(jìn)不出，在血標(biāo)本輸入時(shí)打開，其余時(shí)間關(guān)閉，防止外部空氣進(jìn)入;第二單向閥10只出不進(jìn)，在排液的過(guò)程中打開，其他時(shí)間關(guān)閉，防止外部空氣進(jìn)入，更好的保證容器I的密閉性。
[0025]在本實(shí)施例中，所述抗體為⑶3單克隆抗體、CD3多克隆抗體或⑶28抗體。⑶28可以同時(shí)與CD3—起粘附在磁珠表面起著刺激T細(xì)胞生長(zhǎng)作用，也可以將CD28融合蛋白加入到培養(yǎng)液中起到刺激細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
[0026]在本實(shí)施例中，所述保溫箱12上設(shè)有五個(gè)分別與所述單向雙入口管3、單向雙出口管4、進(jìn)液管6、進(jìn)氣管5和輸液管7對(duì)應(yīng)配合穿出的通孔。
[0027]在本實(shí)施中，還包括一用于支撐所述電磁鐵8的機(jī)械手，所述機(jī)械手設(shè)置于所述容器下方且經(jīng)一電機(jī)驅(qū)動(dòng)繞所述容器I轉(zhuǎn)動(dòng);所述機(jī)械手還經(jīng)一縱向驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)上下移動(dòng)。所述機(jī)械手可以設(shè)置于保溫箱的下方或周側(cè)，用于搖晃容器，便于T細(xì)胞充分分離。所述縱向驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)可以為縱向設(shè)置的絲桿機(jī)構(gòu)。
[0028]在本實(shí)施例中，所述容器I的外形為橢圓形或者圓形，所述容器I的底面呈水平。
[0029]在本實(shí)施例中，所述T細(xì)胞培養(yǎng)裝置放置于一潔凈室內(nèi)，所述潔凈室的入口處自外向內(nèi)依次設(shè)有一更、二更、三更衣服通道以及貨物通道，所述潔凈室還設(shè)置有傳遞窗。
[0030]綜上所述，本實(shí)用新型提供的一種一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，占用空間小，成本低，可以實(shí)現(xiàn)T細(xì)胞的一體式培養(yǎng)，避免交叉感染。
[0031]上列較佳實(shí)施例，對(duì)本實(shí)用新型的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)進(jìn)行了進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，所應(yīng)理解的是，以上所述僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本實(shí)用新型，凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:包括一立式工作臺(tái)、設(shè)置于立式工作臺(tái)上且密閉的保溫箱、容置于保溫箱內(nèi)且密閉的容器，所述容器內(nèi)容置有一個(gè)以上的磁珠顆粒，每個(gè)磁珠顆粒上附著有用于與外周血中T細(xì)胞或自然殺傷T細(xì)胞結(jié)合的抗體;所述容器的頂部設(shè)有一用于引入血液且呈Y型的單向雙入口管，所述容器的底部設(shè)有一用于排液的單向雙出口管;所述容器外壁上還貼設(shè)有一電磁鐵，所述電磁鐵與一控制模塊電連;所述容器的側(cè)壁上還分別設(shè)有用于輸入生理鹽水的進(jìn)液管、用于輸入空氣和C02的混合氣體的進(jìn)氣管和用于輸入培養(yǎng)液的輸液管，所述進(jìn)液管、進(jìn)氣管和輸液管上均設(shè)有一用于調(diào)節(jié)輸入量的調(diào)節(jié)閥，每個(gè)調(diào)節(jié)閥均與所述控制模塊電連;所述單向雙入口管、單向雙出口管、進(jìn)液管、進(jìn)氣管和輸液管均與所述容器內(nèi)部相連通。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:還包括一設(shè)置于立式工作臺(tái)旁側(cè)的輔助工作臺(tái)，所述輔助工作臺(tái)上設(shè)置有用于容置生理鹽水的第一儲(chǔ)液罐、容置有T細(xì)胞培養(yǎng)液的第二儲(chǔ)液罐和混合有空氣和C02氣體的氣體罐，所述第一儲(chǔ)液罐、第二儲(chǔ)液罐和氣體罐分別與進(jìn)液管、輸液管和進(jìn)氣管相連通。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述輔助工作臺(tái)上設(shè)置有一操作面板，所述調(diào)節(jié)閥并排卡設(shè)于操作面板上，所述操作面板上還是有用于顯示輸入量的顯示模塊，所述顯示模塊與所述控制模塊電連。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述單向雙入口管包括位于單向雙入口管頂端的血液標(biāo)本入口和包裝病毒轉(zhuǎn)染液入口，所述單向雙出口管的底端設(shè)置有第一出口和第二出口，所述第一出口與廢液袋相連通，所述第二出口與輸液袋相連通;所述廢液袋容置有少量防腐劑。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述單向雙入口管的下端和單向雙出口管的上端分別設(shè)有一第一單向閥和第二單向閥，所述第一單向閥和第二單向閥均與控制模塊電連。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述抗體為CD3單克隆抗體、⑶3多克隆抗體或⑶28抗體。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述保溫箱上設(shè)有五個(gè)分別與所述單向雙入口管、單向雙出口管、進(jìn)液管、進(jìn)氣管和輸液管對(duì)應(yīng)配合穿出的通孔。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:還包括一用于支撐所述電磁鐵的機(jī)械手，所述機(jī)械手設(shè)置于所述容器下方且經(jīng)一電機(jī)驅(qū)動(dòng)繞所述容器轉(zhuǎn)動(dòng);所述機(jī)械手還經(jīng)一縱向驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)上下移動(dòng)。9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述容器的外形為橢圓形或者圓形，所述容器的底面呈水平。10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一體式T細(xì)胞培養(yǎng)裝置，其特征在于:所述T細(xì)胞培養(yǎng)裝置放置于一潔凈室內(nèi)，所述潔凈室的入口處自外向內(nèi)依次設(shè)有一更、二更、三更衣服通道以及貨物通道，所述潔凈室還設(shè)置有傳遞窗。
【文檔編號(hào)】C12M1/04GK205710770SQ201620343921
【公開日】2016年11月23日
【申請(qǐng)日】2016年4月22日
【發(fā)明人】林基禎, 倪華, 劉力
【申請(qǐng)人】福州創(chuàng)方醫(yī)藥科技有限公司