專利名稱：一種處理蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠和蘆薈皮膠的方法及其產(chǎn)品蘆薈多糖的制作方法
(一)技術(shù)領(lǐng)域 本發(fā)明涉及一種處理蘆薈凝膠的方法，具體講是一種借助酶解反應(yīng)(enzymolysis)來破壞蘆薈凝膠的粘度，再借助真空濃縮技術(shù)實(shí)現(xiàn)快速從蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠和蘆薈皮膠中提取蘆薈多糖產(chǎn)品及其用該方法制備的其他蘆薈生物活性產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
蘆薈葉片中含有多種有效成份，如高活性蘆薈多糖、蘆薈蒽醌衍生物、蘆薈β-谷甾醇、蘆薈胡蘿卜苷等幾十種蘆薈生物活性物質(zhì)，它們具有調(diào)節(jié)和刺激人體免疫系統(tǒng)的作用，因而，它廣泛地用于人體的防病、治病，主要用于消炎、抗病毒、抗腫瘤、通便、促進(jìn)傷口的愈合等。它能促進(jìn)人體皮膚的再生和人體皮膚保濕。因此廣泛地用于化妝品中。蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)在醫(yī)藥界和化妝品界有著廣泛用途，一直受到人們的重視。自上世紀(jì)80年代初以來，世界上許多蘆薈專家對蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)進(jìn)行卓有成效的研究，包括從蘆薈葉片中提取蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)的研究；蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)用于醫(yī)藥和化妝品的研究等。在提取蘆薈凝膠多糖方法的研究方面，最有成效的是美國加州的卡林頓實(shí)驗(yàn)室(Carrington lab inc.)。80年代末，該實(shí)驗(yàn)室提出用酒精沉淀法提取蘆薈多糖。用這方法所提取的蘆薈多糖存在著成本高，蘆薈多糖制品的復(fù)水性差等缺點(diǎn)。90年代末，該實(shí)驗(yàn)室公司又提出用微孔膜過濾、超級(jí)膜過濾、柱層析、滲析、高速離心(10萬轉(zhuǎn)至15萬轉(zhuǎn))，伽馬射線輻射來提取蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)。從而提高了所提取多糖的純度和多糖的復(fù)水性。卡林頓實(shí)驗(yàn)室采用過濾膜分離技術(shù)提取蘆薈凝膠多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)所依據(jù)的原理是蘆薈多糖分子量分布和蘆薈凝膠中其它蘆薈生物活性物質(zhì)的分子量分布，選用特定膜孔對凝膠進(jìn)行過濾，濾除其它蘆薈生物活性物質(zhì)。少量其它蘆薈生物活性物質(zhì)滯留在含多糖的濃縮膠中，由于蘆薈凝膠的粘性太大，必須采用超高速離心機(jī)才能有效地除去蘆薈濃縮液中的其它蘆薈生物活性物質(zhì)。最后對離心清液進(jìn)行冷凍干燥制成蘆薈多糖凍干粉。美國Westminster CO.的發(fā)明人Qiu Zhihua提出向216升的蘆薈品種為vera的蘆薈凝膠中加入0.5克至2.5克的纖維素酶，在溫度為25度反應(yīng)2～2.5小時(shí)的條件下，進(jìn)行酶解反應(yīng)，分解蘆薈凝膠中的纖維素，方便了提取蘆薈多糖。但該方法僅用于提取美國蘆薈vera品鐘的蘆薈凝膠中分子量為50000以上的蘆薈多糖。(見CN patent1034313A、CN patent 86104468、U.S patent 5902796、U.S patent 6133440、U.S patent 6001572、U.S patent 6117847、U.S patent6271214、US patent 6436679、US patent 6423328)。但是，由于蘆薈凝膠的粘性大，采用卡林頓實(shí)驗(yàn)室的提取工藝難于將這些有用成份彼此分離或難于在含有幾十種蘆薈生物活性物質(zhì)的復(fù)雜蘆薈凝膠中，把蘆薈多糖進(jìn)行工業(yè)化的提取、純化，即使采用該技術(shù)進(jìn)行工業(yè)化提取蘆薈多糖及其它生物活性物質(zhì)，其設(shè)備投資十分昂貴，生產(chǎn)成本很高，操作復(fù)雜，蘆薈多糖的回收率低，而且難于實(shí)現(xiàn)蘆薈多糖的大工業(yè)生產(chǎn)。由于在中國所生產(chǎn)的蘆薈葉片中含少量果膠和少量葡聚糖等雜質(zhì)多糖，因此，Westminster CO.的提取蘆薈多糖方法不適用于從中國所生產(chǎn)的蘆薈包括中國蘆薈中提取蘆薈多糖的加工工藝，也不適用于從蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠中提取蘆薈多糖。
在處理蘆薈凝膠的方法中，我國已有二種破壞蘆薈凝膠粘性的方法，其一、中國專利號(hào)CN1173354A、CN1059810C所提供的方法，該方法提出向蘆薈凝膠中加入量達(dá)到0.1～3.0％(1000～30000克/噸)的果膠酶，酶解反應(yīng)條件是PH3～5，常溫反應(yīng)2～20天、在40～50℃，滅菌30～50分鐘。由于蘆薈凝膠中最重要的生物活性成分是蘆薈多糖，它是由20個(gè)甘露糖與1個(gè)半乳糖的大約比例聚合的聚合多糖，而果膠酶是半乳聚糖的分解酶，用如此大量果膠酶處理蘆薈凝膠，經(jīng)酶解反應(yīng)之后，其結(jié)果必然使高分子量的具有很強(qiáng)生物活性的蘆薈多糖將被分解為沒有生物活性的小分子低聚糖(分子量小于8000的蘆薈多糖沒有生物活性)和單糖。因此，雖然該方法能明顯降低蘆薈凝膠的粘性，但在蘆薈多糖提取工藝中沒有意義。其二、中國專利號(hào)CN1216232A所提供的方法，該處理蘆薈凝膠的方法是在酸性條件下(PH3.2～4.2)，在蘆薈凝膠中含有H2O2的情形下，高溫70℃～90℃處理蘆薈凝膠約3小時(shí)，其結(jié)果是蘆薈凝膠在這樣高溫下，其中的蘆薈多糖會(huì)被氧化為低聚糖醛，使蘆薈多糖失去生物活性。第二種方法也失去了從蘆薈凝膠中提取蘆薈多糖的意義。因此，這二種方法不能用于蘆薈多糖的制備工藝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種處理蘆薈凝膠，蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠的方法及其從已處理的蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠中提取蘆薈多糖的工藝，該工藝能提取分子量為5000以上的蘆薈多糖，該工藝既能破壞蘆薈凝膠的粘性又方便了蘆薈多糖的制備，最大限度地保護(hù)蘆薈多糖的結(jié)構(gòu)不變，即蘆薈凝膠中蘆薈多糖的生物活性不變，并且生產(chǎn)蘆薈多糖所需的設(shè)備投資少，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，純度提高，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化。本發(fā)明的原理是采用向蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠中加入酸性蛋白酶、多活性β-葡聚糖酶Ultraflo L、復(fù)合果膠酶viscozyrae L，并控制酶解反應(yīng)，防止在真空濃縮時(shí)產(chǎn)生泡沫，影響真空濃縮的操作。酶解反應(yīng)能使粗蘆薈凝膠、粗蘆薈全葉凝膠和粗蘆薈皮膠的粘度從500mpa.s～20mpa.s下降至10mpa.s～2mpa.s左右，與水的粘度1.45mpa.s相近。同時(shí)把蛋白質(zhì)分解為小分子多肽和氨基酸，把β-葡聚糖分解為葡萄糖，把果膠分解為半乳糖，把葡萄糖甙分解為葡萄糖和甙元等雜多糖的酶分解反應(yīng)產(chǎn)物。在酶解反應(yīng)后，再用升降膜薄膜真空濃縮技術(shù)對低粘性的蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠進(jìn)行真空濃縮，在濃縮期間由于濃縮管壁成膜時(shí)瞬間(幾秒鐘至幾十秒鐘)的高溫，能把各種酶的活性殺死，從而達(dá)到滅酶的效果，然后對濃縮液冷卻，再進(jìn)行旋流分離，除去大部分固體副產(chǎn)物，制備不同濃縮倍數(shù)的蘆薈濃縮清液，蘆薈濃縮液經(jīng)活性炭脫色后，滅菌包裝制成不同濃縮倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品，對已脫色的蘆薈濃縮清液進(jìn)行冷凍干燥，制成蘆薈凍干粉產(chǎn)品。對已脫色的蘆薈濃縮清液中的蘆薈多糖進(jìn)行乙?；幚恚m時(shí)補(bǔ)充蘆薈多糖分子中的乙?；瑥亩岣吡颂J薈多糖的生物活性。再用乙醇、丙酮溶劑對蘆薈濃縮清液進(jìn)行洗滌，洗去殘留于蘆薈濃縮清液中的其它蘆薈生物活性物質(zhì)(包括氨基酸、多肽、低聚糖、單糖等)，獲得蘆薈多糖濃縮清液。最后，對該蘆薈濃縮清液進(jìn)行冷凍干燥，制成了初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品。
將上述制備初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝同過濾膜分離技術(shù)聯(lián)合使用制備純度高的二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品及其它蘆薈生物活性物質(zhì)。首先，對粗蘆薈凝膠、粗蘆薈全葉凝膠和粗蘆薈皮膠進(jìn)行酶解反應(yīng)，升降膜薄膜真空濃縮，再進(jìn)行旋流分離和離心分離除去固體濕料副產(chǎn)物，獲得液態(tài)初級(jí)蘆薈濃縮液。然后用無離子水稀釋，經(jīng)微濾膜、超濾膜組成的過濾膜分離系統(tǒng)進(jìn)一步對蘆薈凝膠清液進(jìn)行過濾濃縮，直到蘆薈濃縮清液中含固量達(dá)到4％左右，再進(jìn)行固液分離，獲得固體濕料副產(chǎn)物和蘆薈濃縮清液產(chǎn)品，再對蘆薈濃縮清液中的蘆薈多糖進(jìn)行乙?；幚?。然后用乙醇、丙酮洗滌蘆薈濃縮清液。最后，對經(jīng)乙?；鸵掖?、丙酮洗滌過的蘆薈濃縮清液進(jìn)行冷凍真空干燥，獲得高活性二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品。
將上述制備初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝同過濾膜分離技術(shù)、柱層析技術(shù)聯(lián)合操作，進(jìn)一步提高蘆薈多糖的純度，制備一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品。首先，對粗蘆薈凝膠、粗蘆薈全葉凝膠和粗蘆薈皮膠進(jìn)行酶解反應(yīng)、真空濃縮、旋流分離、過濾膜分離濃縮，再同柱層析技術(shù)聯(lián)合操作，采用大孔樹脂柱與凝膠色譜柱串聯(lián)柱層析，然后對柱層析得到的洗脫液進(jìn)行超濾膜濃縮，洗去乙酸鈉等雜質(zhì)，獲得蘆薈濃縮清液。再對蘆薈濃縮清液中的蘆薈多糖進(jìn)行乙?；詈髮σ阴；奶J薈濃縮清液進(jìn)行冷凍干燥，制備一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品。
本發(fā)明提供的處理蘆薈凝膠的方法包括向蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠中加入多活性β-葡聚糖酶Uitrafio L、酸性蛋白酶、復(fù)合果膠酶Viscozyme L進(jìn)行酶解處理。
本發(fā)明提供的處理蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠的方法，在下述條件下進(jìn)行酶解反應(yīng)酸性蛋白酶加入量5～20克/噸；多活性β-葡聚糖酶加入量6～30克/噸；復(fù)合果膠酶viscozyme L加入量3-15克/噸溫度20～60℃；時(shí)間1～10小時(shí)；PH3.0～5.5。
本發(fā)明提供的處理蘆薈凝膠的方法，酶解反應(yīng)優(yōu)選在下述條件下進(jìn)行酸性蛋白酶加入量9～15克/噸；多活性β-葡聚糖酶加入量10～25克/噸；復(fù)合果膠酶viscozyme L加入量3-10克/噸；溫度30～50℃；時(shí)間2～5小時(shí)；PH4.0～5.0。
本發(fā)明提供的處理蘆薈凝膠、蘆會(huì)全葉凝膠、蘆薈皮膠的方法，優(yōu)選的是對經(jīng)酶解反應(yīng)的蘆薈凝膠進(jìn)行固液分離、真空濃縮和第二次固液分離，獲得初級(jí)蘆薈品。
本發(fā)明提供的處理蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠的方法，優(yōu)選的是對經(jīng)第二次分離所獲得的初級(jí)液形蘆薈品進(jìn)行由三道膜組成的過濾膜分離系統(tǒng)的進(jìn)行分離濃縮，所說的三道膜一、二、三道膜分別為110～300KDa、10～100KDa、2～8KDa，獲得二級(jí)蘆薈品。
本發(fā)明提供的處理蘆薈凝膠的方法，優(yōu)選的是對經(jīng)由三道膜組成的過濾膜分離系統(tǒng)處理的二級(jí)液形蘆薈品進(jìn)行柱層析處理，所說的層析柱為大孔樹脂柱、或瓊脂糖柱、或聚丙烯酰胺柱、或Superrose柱，層析液PH為4.5～5.0的0.05～0.5mol的乙酸—乙酸鈉溶液，獲得一級(jí)蘆薈品。
經(jīng)酶解反應(yīng)后的蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠和蘆薈皮膠，由于粘性大大降低，極大地方便了從這些蘆薈凝膠中提取蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)，還適用從蘆薈全葉凝膠和蘆薈皮膠中提取蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)。首先蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠的雜質(zhì)含量高于蘆薈凝膠，在對這兩種凝膠進(jìn)行酶分解反應(yīng)提取蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)的加工操作時(shí)，必須增加酶的用量，增加用乙醇和丙酮洗滌蘆薈濃縮清液的次數(shù)，所制備的蘆薈多糖的純度低一些，初級(jí)產(chǎn)品純度約40％，二級(jí)產(chǎn)品純度約65％，一級(jí)產(chǎn)品純度約95％。其次，蘆薈凝膠的多糖分子量分布大于蘆薈皮膠，約1個(gè)數(shù)量級(jí)。而蘆薈凝膠多糖的分子量分布穩(wěn)定，皮膠中的蘆薈多糖分子量分布會(huì)受氣候、環(huán)境的變化而波動(dòng)。但這三種凝膠提取蘆薈多糖的加工工藝流程相同。本文下述蘆薈凝膠作為蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠這三種凝膠的簡稱。


圖1酶解反應(yīng)處理蘆薈凝膠和一次循環(huán)制備初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝流程示意1說明酶解反應(yīng)處理蘆薈凝膠和一次循環(huán)制備初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝流程示意圖。
向蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠加入酶制劑進(jìn)行酶解反應(yīng)，破壞蘆薈凝膠的粘性，再進(jìn)行固液分離、真空濃縮，制成蘆薈濃縮液，蘆薈濃縮液經(jīng)冷凍干燥，制成未脫色蘆薈凍干粉產(chǎn)品，對蘆薈濃縮液進(jìn)行固液分離，即先旋流分離，再對旋流分離所獲得的濃漿進(jìn)行離心分離，旋流分離和離心分離所獲得的蘆薈濃縮清液合并，獲得不同倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品，對濃縮清液經(jīng)乙酰后再用乙醇、丙酮洗滌，然后經(jīng)凍干機(jī)冷凍干燥制成初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品。固液分離還獲得固體濕料副產(chǎn)物。
本工藝流程可以獲得如下產(chǎn)品或副產(chǎn)物1.蘆薈凍干粉產(chǎn)品；2.不同濃縮倍數(shù)的蘆薈濃縮液產(chǎn)品；3.初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品；4.固體濕料副產(chǎn)物。
圖2酶解反應(yīng)處理蘆薈凝膠和一次循環(huán)制備二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝流程示意2說明酶解反應(yīng)處理蘆薈凝膠和一次循環(huán)制備二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝流程示意圖。
對蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠加入酶制劑，進(jìn)行酶解反應(yīng)，再進(jìn)行固液分離，然后進(jìn)行真空濃縮，制成蘆薈濃縮液，對蘆薈濃縮液進(jìn)行固液分離，再對獲得的蘆薈凝膠濃縮清液進(jìn)行微濾、超濾三道過濾膜過濾濃縮，濃縮之后的蘆薈濃縮液進(jìn)行固液分離，獲得蘆薈濃縮清液產(chǎn)品，蘆薈濃縮清液經(jīng)乙酰化后，再用乙醇、丙酮洗滌，然后用凍干機(jī)冷凍干燥，制成二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品。固液分離還獲得固體濕料副產(chǎn)物，過濾膜分離還獲得液體副產(chǎn)物。
本工藝流程可以獲得如下產(chǎn)品或副產(chǎn)物1.二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品；2.不同濃縮倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品；3.固體濕料副產(chǎn)物；4.過濾膜分離的液體副產(chǎn)物。
圖3酶解反應(yīng)處理蘆薈凝膠和一次循環(huán)制備一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝流程示意3說明酶解反應(yīng)處理蘆薈凝膠和一次循環(huán)制備一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品工藝流程示意圖。
向蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠加入酶制劑，進(jìn)行酶解反應(yīng)、固液分離，再進(jìn)行真空濃縮和固液分離，再對獲得的蘆薈凝膠濃縮清液進(jìn)行微濾、超濾三道過濾膜濃縮；濃縮之后的蘆薈濃縮液再進(jìn)行固液分離；對蘆薈濃縮清液再進(jìn)行柱層析，柱層析透過液經(jīng)2KDa過濾膜膜濾濃縮，再進(jìn)行乙?；幚砗?，濃縮清液經(jīng)凍干機(jī)冷凍干燥，制成一級(jí)蘆薈多糖凍干粉產(chǎn)品。并且，固液分離還獲得固體濕料副產(chǎn)物，過濾膜分離還獲得液體副產(chǎn)物。本工藝流程可以獲得如下產(chǎn)品或副產(chǎn)物1.一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品；2.固體濕料副產(chǎn)物；3.過濾膜分離的液體副產(chǎn)物具體實(shí)施方式
下面用經(jīng)酶解反應(yīng)處理的蘆薈凝膠做原料制備純度級(jí)別不同的蘆薈多糖產(chǎn)品的具體實(shí)施例子來說明本發(fā)明方法的具體實(shí)施方式
和獲得的有益效果。
一、初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品的制備工藝實(shí)施例一將酶解反應(yīng)、升降膜薄膜真空濃縮技術(shù)從蘆薈凝膠中提取并制備蘆薈多糖及其它蘆薈生物活性物質(zhì)，工藝流程包括下列步驟步驟1低溫制備粗蘆薈凝膠夏日晴天從大田采收蘆薈老葉，立即用清水洗凈，雙氧水消毒，并立即送入-10℃～0的冷庫中存放6～12小時(shí)，使葉溫降低，達(dá)到0℃，然后刮去邊刺、頂尖，去皮刮膠，把膠條放入膠體磨中鉸碎，鉸碎均勻后的蘆薈粗膠經(jīng)壓榨機(jī)榨汁，制成粗蘆薈凝膠。不去皮的葉片制成粗蘆薈全葉凝膠，去凝膠后的葉皮制成粗蘆薈皮膠。
步驟2對粗蘆薈凝膠進(jìn)行酶解反應(yīng)向粗蘆薈凝膠中加入多活性β-葡聚糖酶Ultraflo L制劑20克/噸，酸性蛋白酶15克/噸，復(fù)合果膠酶viscozyme L 5克/噸，并對蘆薈凝膠加溫至40℃～50℃，保溫酶解反應(yīng)3小時(shí)，然后把該粗蘆薈凝膠泵到旋流分離機(jī)的儲(chǔ)桶中。
步驟3用旋流分離機(jī)和離心分離機(jī)對粗蘆薈凝膠進(jìn)行固液分離從旋流分離機(jī)的儲(chǔ)桶中將粗蘆薈凝膠泵入到旋流分離機(jī)中進(jìn)行固液分離，清液出口流出的蘆薈凝膠清液泵入濃縮清液儲(chǔ)桶中，旋流分離機(jī)的下口放出固體物濃漿，再用離心分離機(jī)對固體物濃漿進(jìn)行固液分離，獲得離心的蘆薈清液和固體濕料副產(chǎn)物。離心蘆薈清液泵入清液儲(chǔ)桶中與旋流分離的蘆薈清液合并。同時(shí)獲得固體濕料副產(chǎn)物，并存放在離心分離機(jī)的固體濕料副產(chǎn)物儲(chǔ)桶中。上述蘆薈清液即蘆薈凝膠清液。
步驟4對蘆薈凝膠進(jìn)行升降膜薄膜真空濃縮，濃縮溫度為55℃～65℃，真空度為-0.096Mpa～-0.098Mpa。把獲得的蘆薈凝膠濃縮清液并入濃縮清液儲(chǔ)桶中冷卻至室溫。
步驟5對蘆薈凝膠濃縮液進(jìn)行固液分離，按步驟3進(jìn)行操作，獲得蘆薈凝膠濃縮清液和固體濕料副產(chǎn)物。
步驟6步驟4、步驟5的操作反復(fù)多次，直到把步驟3所獲得的蘆薈凝膠清液濃縮至50倍蘆薈濃縮清液，向蘆薈凝膠清液中加入7％至12％的活性炭進(jìn)行脫色。然后包裝，滅菌，制成不同濃縮倍數(shù)的脫色蘆薈凝膠濃縮清液產(chǎn)品。把脫色蘆薈凝膠濃縮清液進(jìn)行冷凍干燥制成脫色蘆薈凍干粉產(chǎn)品步驟750倍蘆薈濃縮清液中蘆薈多糖的乙?；幚怼?br> 向50倍脫色的蘆薈濃縮清液中緩慢滴加占濃縮清液總重量的1/40的乙酸酐，泵流攪拌常溫反應(yīng)12小時(shí)。
步驟8對被乙?；?0倍蘆薈凝膠濃縮清液先用乙醇洗滌二次，再用丙酮洗滌一次。
步驟9洗凈后的蘆薈濃縮清液經(jīng)冷凍干燥機(jī)凍干制成初級(jí)蘆薈多糖凍干粉。
步驟10初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品的質(zhì)量鑒定按中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2488-2000或QB/T2489-2000的方法對初級(jí)蘆薈凝膠多糖產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量檢測。其產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)如下水分含量3.0％，多糖含量53％，蘆薈素含量205mg/kg，汞、鉛、砷等未檢出。
經(jīng)藥物評估中心鑒定，沒有致敏因子和毒性。
*不同倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)和蘆薈凍干粉產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)完全符合中華人民*共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2488-2000或者QB/T2489-2000所列級(jí)別的質(zhì)量要求，本文未列出。
*蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠的蘆薈多糖質(zhì)量指標(biāo)未列出表1制備初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品實(shí)施例
*制備工藝同實(shí)施例一相同。
*上述實(shí)施例中復(fù)合果膠酶viscozyme L加入量5克/噸。
*不同倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)和蘆薈凍干粉產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)完全符合中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2488-2000或者QB/T2489 2000所列級(jí)別的質(zhì)量要求，本文未列出。由于獲得的固體濕料副產(chǎn)物可以用做生產(chǎn)其他蘆薈制品的原料，因此本文未列出固體濕料副產(chǎn)物的質(zhì)量指標(biāo)。
二、二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品的制備工藝實(shí)施例七將酶解反應(yīng)、升降膜薄膜真空濃縮和過濾膜分離技術(shù)聯(lián)合操作從蘆薈凝膠中提取蘆薈多糖，制備二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品，工藝流程包括下列步驟步驟1按實(shí)施例一的步驟1、步驟2、步驟3、步驟4、步驟5、步驟6制備50倍的蘆薈濃縮清液，用無離子水對50倍蘆薈濃縮清液進(jìn)行稀釋，獲得2倍的蘆薈濃縮清液。
步驟2過濾膜分離系統(tǒng)的構(gòu)成由200KDa微濾膜構(gòu)成第一道膜，50KDa超濾膜構(gòu)成第二，8K超濾膜構(gòu)成第三道膜。2倍蘆薈濃縮清液經(jīng)第一道膜濾，把2倍蘆薈濃縮清液分為兩部分，一部分被第一道膜截流循環(huán)濃縮至含固量4％的濃縮液。另一部分透過第一道膜進(jìn)入第二道膜，第二道膜濾濃縮第一道膜濾透過液，截流循環(huán)濃縮至含固量4％的濃縮液。
第三道膜濃縮第二道膜濾透過液，截流循環(huán)濃縮至含固量4％的濃縮液，第三道膜濾透過液是液體副產(chǎn)物。
步驟3對過濾膜分離獲得的蘆薈濃縮液的固液分離。對經(jīng)過三道過濾膜濃縮的蘆薈濃縮液分別進(jìn)行旋流分離和離心分離，獲得蘆薈濃縮清液和固體濕料副產(chǎn)物。
步驟4對過濾膜分離后蘆薈濃縮清液中的蘆薈多糖進(jìn)行乙?；幚怼０巡襟E3中獲得的蘆薈濃縮清液合并，含固量約4％。向蘆薈濃縮清液中緩慢滴加占濃縮清液總重量1/40的乙酸酐，泵流攪拌常溫反應(yīng)12小時(shí)。
步驟5乙?；奶J薈凝膠濃縮清液先用乙醇洗滌二次，再用丙酮洗滌一次。
步驟6洗凈后的蘆薈濃縮清液經(jīng)冷凍干燥機(jī)凍干制成二級(jí)蘆薈多糖凍干粉。
步驟7二級(jí)蘆薈凝膠多糖產(chǎn)品的質(zhì)量鑒定。
按中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2488-2000或QB/T2489-2000的方法對二級(jí)蘆薈凝膠多糖產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量檢測。其產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)如下外觀白色鱗片狀固體或帶輕微紅色的鱗片狀固體，水分2.5％，多糖含量70％，蘆薈素65mg/kg，汞、鉛、砷均未被檢出。
經(jīng)藥物評估，沒有毒性和致敏因子。
*不同倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)和蘆薈凍干粉產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)完全符合中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2488-2000或者QB/T2489-2000所列級(jí)別的質(zhì)量要求，本文未列出。由于獲得的液體副產(chǎn)物、固體濕料副產(chǎn)物可以用做生產(chǎn)其他蘆薈制品的原料，因此本文未列出液體副產(chǎn)物、固體濕料副產(chǎn)物的質(zhì)量指標(biāo)。
*蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠所制成的產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)未列出。
表2制備二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品實(shí)施例
*制備工藝與實(shí)施例七相同。
*不同倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)和蘆薈凍干粉產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)完全符合中華人民共和國輕工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2488-2000或者QB/T2489-2000所列級(jí)別的質(zhì)量要求，本文未列出。由于獲得的液體副產(chǎn)物、固體濕料副產(chǎn)物可以用做生產(chǎn)其他蘆薈制品的原料，因此本文未列出液體副產(chǎn)物、固體濕料副產(chǎn)物的質(zhì)量指標(biāo)。
三、一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品的制備工藝實(shí)施例十六將酶解反應(yīng)、真空濃縮、過濾膜分離技術(shù)和柱層析技術(shù)聯(lián)合操作從蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠和蘆薈皮膠中提取蘆薈多糖，制備一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品，工藝流程包括下列步驟步驟1經(jīng)酶解反應(yīng)，真空濃縮的50倍蘆薈濃縮清液的制備按實(shí)施例一的步驟1、步驟2步驟3、步驟4、步驟5、步驟6進(jìn)行操作。
步驟2蘆薈凝膠濃縮清液再進(jìn)行過濾膜分離濃縮，獲得含固量4％的蘆薈凝膠濃縮清液，按實(shí)施例七的步驟2、步驟3操作。
步驟3把含固量4％的過濾膜濃縮清液用PH＝4.5的乙酸—乙酸鈉0.1mol溶液進(jìn)行稀釋一倍，制備柱層析液。
步驟4大孔樹脂層析柱與Superrose層析柱(或者瓊脂糖層析柱)串聯(lián)，進(jìn)行柱層析。
步驟5流動(dòng)相為乙酸—乙酸鈉0.1mol、PH＝4.5。
步驟6洗脫液的濃縮。使用2KDa超濾膜濃縮至含固量4％的濃縮清液。
步驟7對柱層析洗脫液并經(jīng)過濾膜濃縮的清液中蘆薈多糖進(jìn)行乙?；幚怼０磳?shí)施例一的步驟7操作。
步驟8把已被乙?；奶J薈濃縮清液進(jìn)行真空冷凍干燥，制成一級(jí)蘆薈多糖凍干粉產(chǎn)品。
步驟9一級(jí)蘆薈凝膠多糖產(chǎn)品的質(zhì)量鑒定。
按中華人民共和國輕工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)QB/T2488-2000或QB/T2489-2000的方法對一級(jí)蘆薈凝膠多糖產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量檢測。其產(chǎn)品質(zhì)量指標(biāo)如下外觀白色鱗片狀固體，
含水量2％，多糖含量98％，蘆薈素含量1.2mg/kg。
無汞、鉛、砷等有毒物質(zhì)，無致敏因子。
表3制備一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品實(shí)施例
*制備工藝同實(shí)施例十六相同。
*上表所列產(chǎn)品質(zhì)量檢測方法按步驟9執(zhí)行。
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權(quán)利要求
1.一種處理蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠和蘆薈皮膠的方法，其特征在于該方法包括向蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠中加入β-葡聚糖酶、酸性蛋白酶和果膠酶，進(jìn)行酶解反應(yīng)的工藝步驟。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于酶解反應(yīng)的條件是酸性蛋白酶加入量5～20克/噸；β-葡聚糖酶加入量6～30克/噸；果膠酶加入量1～15克/噸；溫度安20～60℃；時(shí)間1～10小時(shí)；PH3.0～5.5。
3根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于優(yōu)選的酶解反應(yīng)條件是酸性蛋白酶加入量9～15克/噸；β-葡聚糖酶加入量10～25克/噸；果膠酶加入量2～10克/噸；溫度30～50℃；時(shí)間2～4小時(shí)；PH4.0～5.0。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其特征在于對經(jīng)酶解反應(yīng)的蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠進(jìn)行固液分離、真空濃縮和第二次固液分離，獲得初級(jí)蘆薈品。
5.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其特征在于對經(jīng)酶解反應(yīng)的蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠、蘆薈皮膠進(jìn)行固液分離，真空濃縮和第二次固液分離，獲得初級(jí)蘆薈品。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5的方法，其特征在于所說的真空濃縮為升降膜薄膜真空濃縮。
7.根據(jù)權(quán)利要求4或5的方法，其特征在于所說得固液分離為旋流分離或離心分離，優(yōu)選的是旋流分離，或者二者組合的固液分離系統(tǒng)。
8.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其特征在于對所獲得的初級(jí)液形蘆薈品進(jìn)行由三道膜組成的過濾膜分離系統(tǒng)的膜過濾濃縮，所說三道膜的一、二、三膜分別為110～300KDa、10～100KDa、2～8KDa，獲得二級(jí)蘆薈品。
9.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其特征在于對所獲得的初級(jí)液形蘆薈品進(jìn)行由三道膜組成的過濾膜分離系統(tǒng)的膜過濾濃縮，所說三道膜的一、二、三膜分別為110～300KDa、10～100KDa、2～8KD。獲得二級(jí)蘆薈品。
10.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其特征在于對所獲得的初級(jí)或二級(jí)液形蘆薈品進(jìn)行柱層析，所說的層析柱為大孔樹脂柱和瓊脂糖柱；或聚丙烯酸胺柱；或Superrose柱，可以采用單柱層析，或者大孔樹脂柱分別與其余三種柱中的一種做成串聯(lián)層析柱，層析液PH為4.5～5.0的0.05～0.5mol的乙酸—乙酸鈉溶液，獲得一級(jí)蘆薈品，對蘆薈品進(jìn)行冷凍干，獲得一級(jí)蘆薈品。
11.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其特征在于對所獲得的初級(jí)或二級(jí)液形蘆薈品進(jìn)行柱層析，所說的層析柱為大孔樹脂柱、或瓊脂糖柱、或聚丙烯酸胺柱，或Superrose柱，采用單柱層析，或者大孔樹脂柱分別與其余三種柱中的一種做成串聯(lián)層析柱，柱層析液的PH為4.5～5.0的0.05～0.5mol的乙酸—乙酸鈉溶液，獲得一級(jí)蘆薈品。
12.上述任一項(xiàng)權(quán)利要求中的方法制得蘆薈制品。
全文摘要
一種酶分解處理蘆薈凝膠的方法及其從蘆薈凝膠、蘆薈全葉凝膠和蘆薈皮膠中快速提取蘆薈多糖產(chǎn)品和其它蘆薈生物活性物質(zhì)，該方法包括；對高粘性粗蘆薈凝膠、粗蘆薈全葉凝膠、粗蘆薈皮膠進(jìn)行酶解反應(yīng)、真空濃縮、固液分離，生產(chǎn)不同濃縮倍數(shù)的蘆薈濃縮清液產(chǎn)品，對蘆薈濃縮液進(jìn)行冷凍干燥制備蘆薈凍干粉；對蘆薈濃縮清液進(jìn)行乙?；幚砗?，再用乙醇、丙酮洗滌，然后冷凍干燥，制成初級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品；經(jīng)酶解反應(yīng)、真空濃縮后的蘆薈濃縮清液再進(jìn)行過濾膜分離濃縮、固液分離、乙醇和丙酮洗滌、冷凍干燥制成二級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品；對過濾膜分離的濃縮產(chǎn)物再用凝膠色譜柱進(jìn)行柱層析提純、然后冷凍干燥制成一級(jí)蘆薈多糖產(chǎn)品。另外，固液分離還獲得固體濕料副產(chǎn)物，過濾膜分離還獲得液體副產(chǎn)物。本處理蘆薈粗品的方法能大大地降低蘆薈凝膠的粘性，方便地從蘆薈粗品中實(shí)現(xiàn)工業(yè)化提取蘆薈多糖等制品。
文檔編號(hào)C08B37/00GK1488364SQ02131099
公開日2004年4月14日 申請日期2002年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2002年10月9日
發(fā)明者徐新宇 申請人:徐新宇, 倪仕模, 卓寶琳