專利名稱：一種中生菌素原藥的制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明屬于微生物源生物殺菌劑領域，具體涉及中生菌素原藥的制備方法。
背景技術(shù)：
中生菌素有效成分為鏈絲菌素(streptothricins),該有效成分是由Waksman等于1942年從淡紫灰鏈霉菌(Streptomyces Iavendulae)中分離到的一類廣譜抗生素。中生菌素各組分的結(jié)構(gòu)中均包含一分子古洛糖胺、一分子鏈里定內(nèi)酰胺和數(shù)量不等的β_賴氨酸，對多種細菌和真菌具有強烈的抑制效果，屬蛋白質(zhì)合成抑制劑，其抑菌活性與結(jié)構(gòu)中所含賴氨酸的數(shù)目呈正相關(guān)，即賴氨酸數(shù)量越多，抑菌活性越強。秦嶺鏈霉菌(Streptomycesqinlingensis.sp.nov.)是國內(nèi)報道的另一株中生菌素產(chǎn)生菌,其在“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”的保藏號為CGMCC N0.1381。另外中生菌素也可能由其它微生物菌種發(fā)酵得到。目前福建生產(chǎn)的原藥是先過濾，然后濃縮濾液，最后再把濾渣加進去，噴霧干燥這樣就沒有去除有機雜質(zhì)，導致加工成可濕性粉劑的濕潤時間超過常規(guī)的90秒，且因含有有機雜質(zhì)，產(chǎn)品容易吸潮，不易保存，儲存期間分解率10%。文獻報道的3%可溶性粉劑是直接噴霧干燥的濾液，然后進行的制劑加工，只能加工3%左右低含量產(chǎn)品，且產(chǎn)品吸潮很厲害，不能加工成高含量產(chǎn)品。因此，從中生菌素發(fā)酵液中制備中生菌素原藥，尚未見高效、精提，且可作為加工各種類型制劑原料的制備方法的報道。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種中生菌素原藥的制備方法，該方法精度和收率均高，所制備原藥可作為加工各種類型制劑的原料。本發(fā)明提供一種中生菌素原藥的制備方法，所述方法包括步驟:(I)調(diào)整中生菌素發(fā)酵液的PH值至2-7，(2)采用板框或陶瓷膜過濾所述pH中生菌素發(fā)酵液至重量百分比含量在0.1 %-10%, (3)以溫度50°C _100°C在噴干塔內(nèi)對所述含量的發(fā)酵液進行噴霧干燥。進一步，所述步驟(2)控制所述過濾液的pH值為3.0, (3)以溫度85°C在噴干塔內(nèi)對所述含量發(fā)酵液進行噴霧干燥。根據(jù)發(fā)明人的反復試驗證明，在溫度較低時，尤其是溫度低于65°C時，物料會粘附在塔內(nèi)，不能順利排出，無法連續(xù)生產(chǎn)；溫度在65°C _85°C時，產(chǎn)品收率不斷提高；而溫度超過95°C時，由于溫度過高,反而會造成產(chǎn)品高溫烘烤分解,收率再次降低。溫度為85°C時，收率最高，為90%，且水分含量小于3%，符合農(nóng)藥對水分的要求。進一步，所述步驟(2)按重量比濃縮發(fā)酵濾液:載體=I: 0.0001-0.1加入載體，漿葉轉(zhuǎn)速10-120r/min制漿。進一步，所述載體為白炭黑、高齡土、膨潤土、硅藻土、凹凸棒土、輕質(zhì)碳酸鈣、滑石粉、陶土、葉蠟石、蒙脫石、黏土、 伊利石、云母粉、珍珠巖、方解石中的一種或多種的組合。由于原藥中含有載體，流動性良好，有利于產(chǎn)品順利從噴霧干燥塔內(nèi)排出，減少了粘壁，保證了噴霧干燥過程順利進行；產(chǎn)品吸潮性降低，有利于產(chǎn)品保存和后續(xù)制劑加工過程。進一步，所述步驟⑵板框濾液按照以下分步驟進行樹脂過濾濃縮:A.含量為0.1% -1%、pH為3-3.5的發(fā)酵濾液，用陽離子交換樹脂吸附至飽和，B.用體積比大于1.5倍樹脂量的水洗去未發(fā)生離子交換的殘留液和雜質(zhì)，C.用體積比3-7倍樹脂量的0.1-1.5mol/L濃度的陽離子洗脫液，以0.5-3倍樹脂量/小時的流速洗脫。進一步，所述陽離子交換樹脂骨架選用聚苯乙烯系或聚丙烯酸(酯)系樹脂。進一步，所述陽離子洗脫液是無機鹽水溶液、無機酸水溶液或無機堿水溶液，洗脫劑的陽離子組成是H+、K+、Na+、NH4+等無機離子中的一種或幾種。進一步，所述洗脫液采用孔徑0.001微米-0.01微米納濾膜過濾或負壓真空濃縮，至含量在1% -12%。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于:1.首次提出收率高、易于操作的中生菌素原藥的精提方法。2.本發(fā)明方法精提純度廣品純度最聞可達45.3%。3.過濾后，去除了有機雜質(zhì)，添加了惰性載體，提高了后續(xù)制劑加工性能。4.提純后的原藥可以加工成性能優(yōu)異的農(nóng)藥制劑，比如加工成3%可濕性粉劑濕潤時間小于40秒，兩年常溫儲存更加穩(wěn)定的農(nóng)藥制劑(比如加工成3%可濕性粉劑兩年常溫儲存分解率小于8%，優(yōu)于傳統(tǒng)方法的1`0% )。5.樹脂過濾提純所得原藥，由于去除了雜質(zhì)，為全水溶性，既可以加工成固體制劑也可以加工成液體制劑，產(chǎn)品可以加工高含量和系列混配制劑，進行系列化開發(fā)?？朔艘酝a(chǎn)品只能加工成低含量可濕性粉劑的缺陷。
具體實施例方式實施例1:采用33%工業(yè)鹽酸調(diào)整中生菌素發(fā)酵液pH值為3，采用板框過濾，過濾液PH值控制在3.0，濃縮至含量在10%，在濃縮液中加入0.01 %白炭黑組合制漿，制漿時漿葉轉(zhuǎn)速50r/min。在85°C噴霧干燥。制得含載體原藥含量為14%，水分含量為1.8%，為均勻的灰褐色粉末，適合加工成農(nóng)藥固體制劑。實施例2:采用90%以上草酸調(diào)整中生菌素發(fā)酵液pH值在6，采用孔徑為0.05um陶瓷膜過濾，過濾液pH值控制在3.0，濃縮至含量在I %。當濾液pH值在3.0以上時，用33%工業(yè)鹽酸或者90%以上草酸調(diào)整。在濃縮液中加入10%硅藻土制漿，制漿時漿葉轉(zhuǎn)速100r/min。在85°C噴霧干燥。制得含載體原藥含量為14.6%，水分含量為2.1%，為均勻的灰褐色粉末，適合加工成農(nóng)藥固體制劑。實施例3:采用33%工業(yè)鹽酸調(diào)整生菌素發(fā)酵液pH值在3，采用孔徑在0.05um陶瓷膜過濾，至含量在0.1%。過濾液pH值控制在3.0，當濾液pH值在3.0以上時，用33%工業(yè)鹽酸或者90%以上草酸調(diào)整。在濃縮液中加入10%方解石制漿，制漿時漿葉轉(zhuǎn)速在80r/min之間。噴霧干燥時，塔內(nèi)溫度(出風溫度)控制在85°C。收率最高，為95%，水分含量
2.3%。實施例4(I)采用pH值3.5中生菌素溶液(當濾液pH值在3.5以上時，用33%工業(yè)鹽酸調(diào)整)，采用板框過濾。(2)板框濾液含量為1%，采用001X4(氫型)聚苯乙烯系樹脂吸附，吸附流速為1.2樹脂體積/小時。(3)吸附完成的樹脂，采用3倍樹脂體積的清水洗滌，洗滌速度為I倍樹脂體積/小時，洗滌至透光率大于85%。(4)洗滌后的樹脂采用氨水進行洗脫，洗下有效成分，氨水濃度0.5mol/L，流速為2倍樹脂體積/小時。(5)洗脫液中生菌素含量低于4%，采用真空薄膜濃縮機進行濃縮，濃縮至含量12%，濃縮時溫度控制在60°C ；(6)噴霧干燥時，塔內(nèi)溫度(出風溫度)控制在85°C。中生菌素干燥收率最高，為94%,水分含量1.7%,水不溶物小于0.1 % ,產(chǎn)品含量45.3%,遠遠高于目前市場銷售的12%母粉。由于去除了雜質(zhì)，為全水溶性，既可以加工成固體制劑也可以加工成液體制劑。實施例5(I)采用pH值為2的中生菌素溶液(當濾液pH值在2以上時，用33%工業(yè)鹽酸調(diào)整)，采用板框過濾。(2)板框濾液含量為0.5%，采用001X4(氫型)聚苯乙烯系樹脂吸附，吸附流速為1.2樹脂體積/小時。(3)吸附完成的樹脂，采用7倍樹脂體積的清水洗滌，洗滌速度為0.1倍樹脂體積/小時，洗滌至透光率大于85%。(4)洗滌后的樹脂采用氨水進行洗脫，洗下有效成分，氨水濃度0.5mol/L，流速為3倍樹脂體積/小時。(5)洗脫液中生菌素含量低于4%，采用孔徑0.001微米濾膜過濾(有濃縮和脫鹽作用)，濃縮至含量10%。(7)噴霧干燥時，塔內(nèi)溫度(出風溫度)控制在85°C。中生菌素干燥收率最高，為94.4%,且水分含量小于3%,水不溶物小于0.1 % ,產(chǎn)品含量45.7%,遠遠高于目前市場銷售的12%母粉。實施例6(I)采用pH值3.5中生菌素溶液(當濾液pH值在3.5以上時，用33%工業(yè)鹽酸調(diào)整)，采用板框過濾。(2)板框濾液含量為1%，采用001X4(氫型)聚苯乙烯系樹脂吸附，吸附流速為
1.2樹脂體積/小時。(3)吸附完成的樹脂，采用3倍樹脂體積的清水洗滌，洗滌速度為I倍樹脂體積/小時，洗滌至透光率大于85%。(4)洗滌后的樹脂采用氨水進行洗脫，洗下有效成分，氨水濃度0.5mol/L，流速為2倍樹脂體積/小時。(5)洗脫液中生菌素含量低于4%，采用孔徑0.01納米濾膜過濾(有濃縮和除鹽作用)，濃縮至含量6%。(8)噴霧干燥時，塔內(nèi)溫度( 出風溫度)控制在85°C。中生菌素干燥收率最高，為96%,且水分含量小于1.4%,水不溶物小于0.1 % ,產(chǎn)品含量45.4%,遠遠高于目前市場銷售的12%母粉。試驗例1:純度試驗:對上述實施例1-6所得中生菌素原藥純度測定結(jié)果中生菌素原藥純度的測定:
權(quán)利要求
1.一種中生菌素原藥的制備方法，其特征在于，所述方法包括步驟:(1)調(diào)整中生菌素發(fā)酵液的PH值至2-7，(2)采用板框或陶瓷膜過濾所述pH中生菌素發(fā)酵液至重量百分比含量在0.1% -10%, (3)以溫度50°C -100°C在噴干塔內(nèi)對所述含量的發(fā)酵液進行噴霧干燥。
2.按照權(quán)利要求1所述的中生菌素原藥制備方法，其特征在于，所述步驟(2)控制所述過濾液的pH值為3.0, (3)以溫度85°C在噴干塔內(nèi)對所述含量發(fā)酵液進行噴霧干燥。
3.按照權(quán)利要求1所述的中生菌素原藥制備方法，其特征在于，按重量比濃縮發(fā)酵濾液:載體=I: 0.0001-0.1加入載體，漿葉轉(zhuǎn)速10-120r/min制漿。
4.按照權(quán)利要求3所述的中生菌素原藥制備方法，其特征在于，所述載體為白炭黑、高齡土、膨潤土、硅藻土、凹凸棒土、輕質(zhì)碳酸鈣、滑石粉、陶土、葉蠟石、蒙脫石、黏土、伊利石、云母粉、珍珠巖、方解石中的一種或多種的組合。
5.按照權(quán)利要求3所述的中生菌素原藥制備方法，其特征在于，所述步驟(2)板框濾液按照以下分步驟進行樹脂過濾濃縮:A.含量為0.1% -1%且pH為3-3.5的發(fā)酵濾液，用陽離子交換樹脂吸附至飽和，B.用體積比大于1.5倍樹脂量的水洗去未發(fā)生離子交換的殘留液和雜質(zhì)，C.用體積比3-7倍樹脂量的0.1-1.5mol/L濃度的陽離子洗脫液，以0.5-3倍樹脂量/小時的流速洗脫。
6.按照權(quán)利要求5所述的 中生菌素原藥制備方法，其特征在于，所述陽離子交換樹脂骨架為聚苯乙烯系或聚丙烯酸(酯)系樹脂。
7.按照權(quán)利要求5所述的中生菌素原藥制備方法，其特征在于，所述陽離子洗脫液是無機鹽水溶液、無機酸水溶液或無機堿水溶液。
8.按照權(quán)利要求5所述的中生菌素原藥制備方法，其特征在于，所述洗脫液采用孔徑.0.001微米-0.01微米納濾膜過濾或負壓真空濃縮，至含量在1% -12%。
全文摘要
本發(fā)明提供一種中生菌素原藥的制備方法，所述方法包括步驟(1)調(diào)整中生菌素發(fā)酵液的pH值至2-7，(2)采用板框或陶瓷膜過濾所述pH中生菌素發(fā)酵液至重量百分比含量在0.1％-10％，(3)以溫度50℃-100℃在噴干塔內(nèi)對所述含量的發(fā)酵液進行噴霧干燥。板框濾液還可進行樹脂過濾濃縮至更高精度和含量。本發(fā)明關(guān)于中生菌素原藥的精提方法尚未見報道。本發(fā)明方法收率可高達90％，精提純度最高可達45.3％。所制備原藥可作為加工各種類型制劑的原料。
文檔編號C07H1/06GK103087126SQ20131003499
公開日2013年5月8日 申請日期2013年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月30日
發(fā)明者楊宏勃 申請人:楊宏勃