專利名稱：一種三聚氰胺衍生物及三聚氰胺單克隆抗體的制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及化學合成技術領域，更具體地，本發(fā)明涉及一種三聚氰胺衍生物及三聚氰胺單克隆抗體的制備方法和應用。
背景技術：
三聚氰胺化合物因分子小，結構簡單，直接偶聯(lián)載體蛋白后，不能充分的暴露出小分子的空間結構，不利于淋巴細胞識別該小分子化合物，所以用未經(jīng)改造的三聚氰胺分子直接偶聯(lián)載體蛋白的這種抗原制備的抗體效價低，特異性差，無法滿足檢測試劑盒的研發(fā)的需求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在至少解決上述技術問題之一。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出一種與載體蛋白連接后抗體效價高、特異性強的三聚氰胺衍生物。根據(jù)本發(fā)明實施例的三聚氰胺衍生物具有如下分子結構式
權利要求
1.一種三聚氰胺衍生物，其分子結構式為
2.—種三聚氰胺衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 a)將三聚氰胺溶解于預熱至預定溫度的二甲基酰胺中，加入戊二酸酐反應第一預定時間； b)將反應后溶液冷卻后加入乙醚，產(chǎn)生沉淀； c )過濾所述沉淀，并將過濾后固體進行重結晶，得到三聚氰胺衍生物。
3.根據(jù)權利要求2所述的三聚氰胺衍生物的制備方法，其特征在于，所述預定溫度為40°C 50°C。
4.根據(jù)權利要求I所述的三聚氰胺衍生物的制備方法，其特征在于，所述第一預定時間為2h。
5.根據(jù)權利要求I所述的三聚氰胺衍生物在制備三聚氰胺單克隆抗體中的應用。
6.一種根據(jù)權利要求5所述的三聚氰胺單克隆抗體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟 A)將三聚氰胺衍生物與血藍蛋白(KLH)通過偶聯(lián)劑偶聯(lián)，得到完全抗原； B)將三聚氰胺衍生物與牛血清白蛋白(BSA)通過偶聯(lián)劑偶聯(lián)，得到三聚氰胺-蛋白偶聯(lián)物(二聚氰胺-BSA)； C)將所述完全抗原與弗氏完全佐劑或弗氏不完全佐劑乳化后免疫試驗動物，并在弟四次免疫后的第十天取靜脈血測定抗體效價； D)將試驗動物的脾細胞與骨髓瘤細胞融合，分離篩選單克隆抗體細胞株； E)將篩選的穩(wěn)定的陽性克隆株擴大培養(yǎng)，接種試驗動物，制備單克隆抗體腹水； F)將所述抗體腹水分離上清，用ProteinA親和層析柱分離純化，得到三聚氰胺單克隆抗體。
7.根據(jù)權利要求6所述的三聚氰胺單克隆抗體的制備方法，其特征在于，所述偶聯(lián)劑為碳二亞胺。
8.根據(jù)權利要求I所述的三聚氰胺衍生物在制備用于檢測三聚氰胺的試劑盒中的應用。
9.一種檢測三聚氰胺的酶聯(lián)檢測試劑盒。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種三聚氰胺衍(Melamine)生物及三聚氰胺單克隆抗體的制備方法和應用，所述三聚氰胺衍生物的制備方法包括以下步驟a)將三聚氰胺溶解于預熱至預定溫度的二甲基酰胺中，加入戊二酸酐反應第一預定時間；b)將反應后溶液冷卻后加入乙醚，產(chǎn)生沉淀；c)過濾所述沉淀，并將過濾后固體進行重結晶，得到三聚氰胺衍生物。根據(jù)本發(fā)明實施例的三聚氰胺衍生物，相對于三聚氰胺多出了一個臂狀結構，通過該臂狀結構可以與載體蛋白相連接，連接所得抗原免疫原性好，特異性強，可刺激動物產(chǎn)生特異性的抗體，并且效價高，解決了很難單獨用三聚氰胺化合物制備出有效抗體的問題。
文檔編號C07K16/44GK102942531SQ20121043882
公開日2013年2月27日 申請日期2012年11月6日 優(yōu)先權日2012年11月6日
發(fā)明者鄔曉樂, 姬志娟, 鄔江, 史國營, 張俊龍, 張春玲, 薛金蓮 申請人:北京博奧森生物技術有限公司