專利名稱：一種提取純化榆綠木脂素a的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種提取純化榆綠木脂素A的方法。
背景技術(shù)：
榆綠木脂素A (Anolignan A),分子式為C19H18O4,分子量為310. 35,為類白色無定形粉末，是從使君子科(Combretaceae)披針形偷綠木變種Jflogei1S1SW1S acuminata (Roxb. exDC. )Guill. &Pers. var. Ianceolata Wall, ex C. B. Clarke 的莖分離出的一種木脂素類化合物。藥理研究表明，榆綠木脂素A具有抑制HIV-I逆轉(zhuǎn)錄酶活性，IC50為60. 4μ g/ml。目前尚未檢索到榆綠木脂素A的制備方法報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種提取純化榆綠木脂素A的方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案
一種提取純化榆綠木脂素A的方法，其特征在于包括以下步驟以披針形榆綠木變種的莖為原料，粉碎，用60-95%乙醇浸泡2-8h，然后超聲提取，將提取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用中性氧化鎂拌樣上柱，石油醚-丙酮進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑，經(jīng)制備型液相色譜分離，即可獲得榆綠木脂素A。所述硅藻土與活性炭的混合物中硅藻土與活性炭的質(zhì)量比為1:1。所述氧化鎂目數(shù)為100-200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5_7bar，柱徑高比為1:6-10。所述石油醚-丙酮體積比為17-2: I。所述制備液相色譜分離，以甲醇-水為流動相，甲醇體積百分比為68-75%，流速為15-100ml/mino本發(fā)明采用超聲提取、柱層析及制備液相色譜分離純化，具有生產(chǎn)過程簡單，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
以披針形榆綠木變種的莖為原料，稱取2kg，粉碎，用4倍量95%乙醇浸泡8h，然后超聲提取I. 5h，超聲功率為55KHz，將提取液加入硅藻土與活性炭按質(zhì)量比1:1的混合物，加入量為提取液的3% (w/v)，充分?jǐn)嚢韬筮^濾，濾液濃縮至浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:6)，用石油醚-丙酮按體積比17-2:1進(jìn)行梯度洗脫，收集目標(biāo)洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；將粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制備型高效液相色譜分離，制備柱以C18為柱填料，以72%甲醇水溶液為流動相，控制流速為15ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為226nm，收集目標(biāo)流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到榆綠木脂素A產(chǎn)品，含量為96. 6%。實(shí)施例2:
以披針形榆綠木變種的莖為原料，稱取2kg，粉碎，用60%乙醇浸泡2h，然后超聲提取2h，超聲功率為50KHz，將提取液加入硅藻土與活性炭按質(zhì)量比1:1的混合物，加入量為提取液的3% (w/v)，充分?jǐn)嚢韬筮^濾，濾液濃縮至浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為5bar，柱徑高比為1:10)，用石油醚-丙酮按體積比17-2:1進(jìn)行梯度洗脫，收集目標(biāo)洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；將粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制備型高效液相色譜分離，制備柱以C18為柱填料，以75%甲醇水溶液為流動相，控制流速為100ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為226nm，收集目標(biāo)流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到榆綠木脂素A產(chǎn)品，含量為97. 6%。實(shí)施例3
以披針形榆綠木變種的莖為原料，稱取5kg，粉碎，用75%乙醇浸泡5h，然后超聲提取2h，超聲功率為40KHz，將提取液加入硅藻土與活性炭按質(zhì)量比1:1的混合物，加入量為提取液的3% (w/v)，充分?jǐn)嚢韬筮^濾，濾液濃縮至浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為6bar，柱徑高比為1:7)，用石油醚-丙酮按體積比17-2:1進(jìn)行梯度洗脫，收集目標(biāo)洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；將粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制備型高效液相色譜分離，制備柱以C18為柱填料，以68%甲醇水溶液為流動相，控制流速為45ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為226nm，收集目標(biāo)流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到榆綠木脂素A產(chǎn)品，含量為98. 2%。實(shí)施例4:
以披針形榆綠木變種的莖為原料，稱取5kg，粉碎，用80%乙醇浸泡5h，然后超聲提取lh，超聲功率為60KHz，將提取液加入硅藻土與活性炭按質(zhì)量比1:1的混合物，加入量為提取液的3% (w/v)，充分?jǐn)嚢韬筮^濾，濾液濃縮至浸膏，將浸膏用少量中性氧化鎂混合拌樣，低溫烘干，上樣至100-200目的中性氧化鎂低壓柱(柱壓為7bar，柱徑高比為1:8)，用石油醚-丙酮按體積比17-2:1進(jìn)行梯度洗脫，收集目標(biāo)洗脫液，濃縮、干燥，得粗品；將粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制備型高效液相色譜分離，制備柱以C18為柱填料，以70%甲醇水溶液為流動相，控制流速為55ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為226nm，收集目標(biāo)流分，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮干燥，得到榆綠木脂素A產(chǎn)品，含量為98. 9%。權(quán)利要求
1.一種提取純化榆綠木脂素A的方法，其特征在于包括以下步驟以披針形榆綠木變種的莖為原料，粉碎，用60-95%こ醇浸泡2-8h，然后超聲提取，將提取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用中性氧化鎂拌樣上柱，石油醚-丙酮進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑，經(jīng)制備型液相色譜分離，即可獲得榆綠木脂素A。
2.如權(quán)利要求I所述的ー種提取純化榆綠木脂素A的方法，其特征在于所述硅藻土與活性炭的混合物中硅藻土與活性炭的質(zhì)量比為1:1。
3.如權(quán)利要求I所述的ー種提取純化榆綠木脂素A的方法，其特征在于所述氧化鎂目數(shù)為100-200目，氧化鎂柱為中低壓柱，柱壓為5-7bar，柱徑高比為1:6-10。
4.如權(quán)利要求I所述的ー種提取純化榆綠木脂素A的方法，其特征在于所述石油醚-丙酮體積比為17-2:1。
5.如權(quán)利要求I所述的ー種提取純化榆綠木脂素A的方法，其特征在于所述制備液相色譜分離，以甲醇-水為流動相，甲醇體積百分比為68-75%，流速為15-100ml/min。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提取純化榆綠木脂素A的方法，該方法是將原料粉碎，用60-95%乙醇浸泡2-8h，然后超聲提取，將提取液加入硅藻土與活性炭的混合物，過濾，濾液濃縮至浸膏，用中性氧化鎂拌樣上柱，石油醚-丙酮進(jìn)行梯度洗脫，收集洗脫液減壓回收試劑，經(jīng)制備型液相色譜分離，即可獲得榆綠木脂素A。本發(fā)明操作簡單、制備量大、得率高、產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D317/54GK102659750SQ20121012281
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月25日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司