專利名稱：一種海洋魚類魚骨的綜合利用工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及水產(chǎn)動物加工副產(chǎn)物來源的海洋活性物質(zhì)制備領(lǐng)域，特別涉及ー種海洋魚類魚骨的綜合利用エ藝。
背景技術(shù)：
硫酸軟骨素(Chondroitin Sulfate, CS)是ー類糖胺聚糖,它是由D-葡糖醒酸和N-こ酰-D-氨基半乳糖以1，3糖苷鍵結(jié)合的雙糖為基本単位聚合而成的大分子多糖。CS資源豐富，廣泛存在于人和動物的骨骼、軟骨、肌腱、韌帶等組織中。CS作為ー種藥物，主要用來治療關(guān)節(jié)炎和冠心病，對神經(jīng)痛、偏頭痛、動脈粥樣硬化等也有一定療效。硫酸軟骨素傳統(tǒng)上主要從豬、牛、羊等畜類軟骨組織中提取獲得，來源和エ藝較為單ー。膠原蛋白是動物來源最豐富的蛋白，大概占動物總蛋白的30%。廣泛存在于脊椎動 物的皮、骨、軟骨、韌帶、肌腱、血管、牙齒、角膜及其它器官。膠原蛋白在皮革、化妝品、食品、膜エ業(yè)、制藥業(yè)、生物醫(yī)學(xué)材料等方面應(yīng)用廣泛。牛和豬的皮、骨頭通常是膠原蛋白的主要來源，然而，牛海綿狀腦病(BSE)、傳染性海綿狀腦病(TSE)和ロ蹄疫(FMD)的爆發(fā)使得人們對陸生動物來源的膠原蛋白及其衍生產(chǎn)品的安全性產(chǎn)生恐慌。另外，由于宗教因素，從豬來源提取的膠原蛋白作為食物的組分，其應(yīng)用受到限制。因此尋找可替代的新的來源的膠原蛋白就顯得非常迫切。水產(chǎn)品加工副產(chǎn)物約有30%為魚皮和魚骨，其中魚骨含有較為豐富的膠原蛋白和硫酸軟骨素，利用這些副產(chǎn)物來提取膠原蛋白和硫酸軟骨素，不僅能提高水產(chǎn)品的附加值，充分有效地利用生物資源，而且還能減少由于不經(jīng)處理就直接丟棄造成的環(huán)境污染。CN1563098A的發(fā)明公開了ー種制備硫酸軟骨素的方法，該方法包括以下步驟A、將卡拉膠分解為分子量為1-4萬，優(yōu)選2-3萬的卡拉膠寡糖；B、將魷魚骨用15%到飽和的強(qiáng)堿液處理，然后用酸中和，收集膠體；C、將步驟A制得的卡拉膠寡糖、步驟B制得的膠體和氨基葡萄糖在酸性條件下反應(yīng)，再純化，獲得硫酸軟骨素。該方法利用海洋魚類加工副產(chǎn)物魚骨(魷魚骨)單一地提取硫酸軟骨素，但未綜合利用海洋魚類魚骨，并且硫酸軟骨素提取效率不高，エ藝較為復(fù)雜。因此，開發(fā)綜合利用海洋魚類魚骨的エ藝顯得非常迫切。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，提供ー種簡便、快速、提取率高的海洋魚類魚骨綜合利用エ藝，達(dá)到硫酸軟骨素和膠原蛋白聯(lián)產(chǎn)目的。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是
ー種海洋魚類魚骨的綜合利用エ藝，所述的綜合利用エ藝包括如下步驟
(O原料處理將新鮮海洋魚類魚骨上的殘肉剔凈，在40-50°C熱水中清洗干凈；用40_50°C熱水清洗便于清洗魚骨表面的脂肪；
(2)魚骨粉碎在步驟(I)處理得到的魚骨中加入NaOH溶液，同時加入NaCl溶液，用粉碎機(jī)將魚骨粉碎，形成粉碎液；加入NaOH溶液用于水解硫酸軟骨素，加入氯化鈉，以使硫酸軟骨素等糖胺聚糖與蛋白分離；魚骨粉碎能更好、更高效地提取硫酸軟骨素，魚骨粉碎標(biāo)準(zhǔn)在20-30目；
(3)硫酸軟骨素提取將步驟(2)處理得到的粉碎液，在50-58°C下攪拌浸提6-8h，過濾，所得濾渣在相同條件下再提取一次并過濾，合并兩次過濾的濾液得浸提濾液，同時收集第二次過濾得到的濾渣用于進(jìn)一歩提取膠原蛋白；攪拌浸提，這樣更利于硫酸軟骨素的提取，提高提取率，進(jìn)行二次提取，使得魚骨能夠充分的提取利用，提高硫酸軟骨素產(chǎn)率，増加經(jīng)濟(jì)效益；50-58°C下提取，溫度過高會破壞硫酸軟骨素和膠原蛋白的結(jié)構(gòu)，溫度過低提取效率太低；
(4)濾液酶解除蛋白將步驟(3)所得浸提濾液用3-4!1101/1的鹽酸調(diào)？!1至7.0-7.5，加入浸提濾液重量O. 5%-1%的中性蛋白酶，在45-55°C下保溫攪拌2-3 h得酶解液；控制pH至7. 0-7. 5，適合酶解，提高硫酸軟骨素的純度和產(chǎn)率；0. 5%-1%的中性蛋白酶酶解，能去除混合在硫酸軟骨素中的雜蛋白，得到較高純度的硫酸軟骨素； (5)高溫滅酶活將步驟(4)所得酶解液加熱至95-100°C，保溫5-10min滅酶活；
(6)硫酸軟骨素沉淀攪拌條件下向步驟(5)處理得到的酶解液中加無水こ醇至體系中こ醇體積分?jǐn)?shù)為60-65%，在0-4°C靜置18-24 h，離心15-20 min收集沉淀，沉淀用無水こ醇洗滌，真空冷凍干燥得硫酸軟骨素產(chǎn)品；
(7)濾渣去除脂肪向步驟(3)第二次過濾得到的濾渣以重量比1:20-30的比例加入質(zhì)量濃度10%-15%的丁醇溶液，攪拌條件下浸泡18-24 h，浸泡結(jié)束后用蒸餾水沖洗除盡丁醇；攪拌條件下浸泡有利于脂肪的溶出，以去除脂肪，去除脂肪利于膠原蛋白提取，提高膠原蛋白的產(chǎn)率；
(8)膠原蛋白提取向步驟(7)處理所得濾渣以重量比1:10-15的比例加入蒸餾水，調(diào)節(jié)pH至7. 0-7. 5，加入濾渣重量1%-2%的中性蛋白酶，在45-55°C下保溫攪拌4_5 h得酶解液，然后將酶解液加熱至95-100°C保溫5-10min滅酶活；
(9)膠原蛋白鹽析將步驟(8)處理得到的酶解液在溫度0-4°C下離心15-20min，收集上清液，向上清液中緩慢加入NaCl鹽析，在溫度0-4°C下，攪拌過夜得鹽析液；加入NaCl鹽析NaCl要研磨粉碎后加入，這樣鹽析效果好，NaCl的粒度在100-200目；攪拌過夜，指攪拌時間在12小時以上；
(10)膠原蛋白收集將步驟(9)處理得到的鹽析液在0-4°C下離心15-20min，去除上清液，所得沉淀物為膠原蛋白粗品；
(11)膠原蛋白透析和凍干向步驟(10)所得膠原蛋白粗品中加入濃度O.3-0. 5 mol/L的醋酸溶液復(fù)溶,然后先使用濃度O. 1-0. 2 mol/L的醋酸溶液作為透析外液進(jìn)行透析24-36 h，再使用蒸餾水作為透析外液透析24-36 h，冷凍干燥后即得膠原蛋白成品。加入濃度O. 3-0. 5 mol/L的醋酸溶液復(fù)溶，濃度O. 3-0. 5 mol/L的醋酸溶液加入量為溶解膠原蛋白粗品的量為標(biāo)準(zhǔn)，復(fù)溶目的是為了進(jìn)ー步除去小分子雜蛋白，提高膠原蛋白提取的純度。透析外液每4小時更換一次，透析效果更好。本發(fā)明能夠簡便、快速、高效的從海洋魚類魚骨中提取活性物質(zhì)，達(dá)到硫酸軟骨素和膠原蛋白聯(lián)產(chǎn)目的，提高了魚骨的利用效益，増加了經(jīng)濟(jì)效益。作為優(yōu)選，步驟(I)所述的海洋魚類魚骨選自A或B方案
A、海洋軟骨魚的魚骨鯊科、鰩科、魟科、鲼科和銀鮫科魚類的魚骨中的ー種；B、部分含有軟骨的硬骨魚類的魚骨鮫錬魚、鰻魚中的ー種。本發(fā)明魚骨的原料優(yōu)選鮫錬魚、鯊科魚類、魟科魚類的魚骨中的ー種。鯊科、鰩科、魟科、鲼科和銀鮫科魚類，如姥鯊(鯊科)、華鰩(鰩科)、中國魟(魟科)、鳶鲼(鲼科)、黑線銀鮫(銀鮫科)。作為優(yōu)選，步驟(2)中所述的NaOH溶液加入量為步驟(I)處理得到的魚骨重量的10%-15%，Na0H溶液的濃度為O. 5-1. O mol/L。控制NaOH溶液的加入量和濃度，以利于硫酸軟骨素的提取，提聞提取率。作為優(yōu)選，步驟(2)中所述的NaCl溶液加入量為步驟(I)處理得到的魚骨重量的200%-300%，NaCl溶液的質(zhì)量濃度為10%_15%。作為優(yōu)選，步驟(3)中所述的過濾采用150-200目的濾布過濾。 作為優(yōu)選，步驟(9)中NaCl的加入量為至上清液中NaCl的濃度為O. 8-1. 2mol/L?？刂芅aCl的濃度為O. 8-1. 2mol/L，鹽析效果好，利于膠原蛋白的提取。作為優(yōu)選，步驟(6)所述的離心的離心カ為6000_8000Xg。利于分離。作為優(yōu)選，步驟(9)所述的離心的離心カ為3000_4000Xg。利于分離。作為優(yōu)選，步驟(10)所述的離心的離心カ為5000_6000Xg。利于分離。本發(fā)明的有益效果是能夠簡便、快速、高效的從海洋魚類魚骨中提取活性物質(zhì)，達(dá)到硫酸軟骨素和膠原蛋白聯(lián)產(chǎn)目的，提高了魚骨的利用效益，増加了經(jīng)濟(jì)效益。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)ー步的具體說明。實(shí)施例I
(O原料處理將新鮮鮫錬魚魚骨上的殘肉剔凈，在40°c熱水中清洗干凈；
(2)魚骨粉碎在步驟(I)處理得到的魚骨中加入占魚骨重量15%的NaOH溶液，NaOH溶液的濃度為O. 5mol/L,同時加入魚骨重量200%的NaCl溶液，NaCl溶液的質(zhì)量濃度為15% ；用粉碎機(jī)將魚骨粉碎，形成粉碎液；
(3)硫酸軟骨素提取將步驟(2)處理得到的粉碎液，在50°C下攪拌浸提8h，150目的濾布過濾，所得濾渣在相同條件下再提取一次并過濾，合并兩次過濾的濾液得浸提濾液，同時收集第二次過濾得到的濾渣用于進(jìn)一歩提取膠原蛋白；
(4)濾液酶解除蛋白將步驟(3)所得浸提濾液用3mol/L的鹽酸調(diào)pH至7.0，加入浸提濾液重量1%的中性蛋白酶，在45°C下保溫攪拌3 h得酶解液；
(5)高溫滅酶活將步驟(4)所得酶解液加熱至95°C，保溫10min滅酶活；
(6)硫酸軟骨素沉淀攪拌條件下向步驟(5)處理得到的酶解液中加無水こ醇至體系中こ醇體積分?jǐn)?shù)為60%，在0°C靜置18h，在離心カ為6000 Xg下，離心20 min收集沉淀，沉淀用無水こ醇洗滌2次，真空冷凍干燥得硫酸軟骨素產(chǎn)品；
(7)濾渣去除脂肪向步驟(3)第二次過濾得到的濾渣以重量比1:20的比例加入質(zhì)量濃度15%的丁醇溶液，攪拌條件下浸泡18h，浸泡結(jié)束后用蒸餾水沖洗除盡丁醇；
(8)膠原蛋白提取向步驟(7)處理所得濾渣以重量比1:10的比例加入蒸餾水，調(diào)節(jié)pH至7. 0，加入濾渣重量2%的中性蛋白酶，在45°C下保溫攪拌5 h得酶解液，然后將酶解液加熱至95°C保溫IOmin滅酶活；(9)膠原蛋白鹽析將步驟(8)處理得到的酶解液在溫度(TC下，離心カ為4000Xg下離心15 min，收集上清液，向上清液中緩慢加入NaCl鹽析，NaCl的加入量為至上清液中NaCl的濃度為O. 8mol/L，在溫度4°C下，攪拌過夜得鹽析液；
(10)膠原蛋白收集將步驟(9)處理得到的鹽析液在0°C下，離心カ為6000Xg下離心15 min，去除上清液，所得沉淀物為膠原蛋白粗品；
(11)膠原蛋白透析和凍干向步驟(10)所得膠原蛋白粗品中加入濃度O.3 mol/L的醋酸溶液復(fù)溶，然后先使用濃度O. lmol/L的醋酸溶液作為透析外液進(jìn)行透析36 h，再使用蒸餾水作為透析外液透析24h，冷凍干燥后即得膠原蛋白成品。實(shí)施例2
(O原料處理將新鮮鰩魚魚骨上的殘肉剔凈，在50°C熱水中清洗干凈；
(2)魚骨粉碎在步驟(I)處理得到的魚骨中加入占魚骨重量10%的NaOH溶液，NaOH溶液的濃度為I. O mol/L,同時加入魚骨重量300%的NaCl溶液，NaCl溶液的質(zhì)量濃度為10%;用粉碎機(jī)將魚骨粉碎，形成粉碎液；
(3)硫酸軟骨素提取將步驟(2)處理得到的粉碎液，在58°C下攪拌浸提6h，200目的濾布過濾，所得濾渣在相同條件下再提取一次并過濾，合并兩次過濾的濾液得浸提濾液，同時收集第二次過濾得到的濾渣用于進(jìn)一歩提取膠原蛋白；
(4)濾液酶解除蛋白將步驟(3)所得浸提濾液用4mol/L的鹽酸調(diào)pH至7. 5，加入浸提濾液重量0. 5%的中性蛋白酶，在55°C下保溫攪拌2h得酶解液；
(5)高溫滅酶活將步驟(4)所得酶解液加熱至100°C，保溫5min滅酶活；
(6)硫酸軟骨素沉淀攪拌條件下向步驟(5)處理得到的酶解液中加無水こ醇至體系中こ醇體積分?jǐn)?shù)為65%，在4°C靜置24 h，在離心カ為8000 X g下，離心15 min收集沉淀，沉淀用無水こ醇洗滌2次，真空冷凍干燥得硫酸軟骨素產(chǎn)品；
(7)濾渣去除脂肪向步驟(3)第二次過濾得到的濾渣以重量比1:30的比例加入質(zhì)量濃度10%的丁醇溶液，攪拌條件下浸泡24 h，浸泡結(jié)束后用蒸餾水沖洗除盡丁醇；
(8)膠原蛋白提取向步驟(7)處理所得濾渣以重量比1:15的比例加入蒸餾水，調(diào)節(jié)PH至7. 5，加入濾渣重量1%的中性蛋白酶，在55°C下保溫攪拌4h得酶解液，然后將酶解液加熱至100°C保溫5min滅酶活；
(9)膠原蛋白鹽析將步驟(8)處理得到的酶解液在溫度4°C下，離心カ為3000Xg下離心20 min，收集上清液，向上清液中緩慢加入NaCl鹽析，NaCl的加入量為至上清液中NaCl的濃度為I. 2mol/L，在溫度0°C下，攪拌過夜得鹽析液；
(10)膠原蛋白收集將步驟(9)處理得到的鹽析液在4°C下，離心カ為5000Xg下離心20 min，去除上清液，所得沉淀物為膠原蛋白粗品；
(11)膠原蛋白透析和凍干向步驟(10)所得膠原蛋白粗品中加入濃度0.5mol/L的醋酸溶液復(fù)溶，然后先使用濃度0. 2 mol/L的醋酸溶液作為透析外液進(jìn)行透析24h，再使用蒸餾水作為透析外液透析36 h，冷凍干燥后即得膠原蛋白成品。實(shí)施例3
(O原料處理將新鮮中國魟魚骨上的殘肉剔凈，在45°C熱水中清洗干凈；
(2)魚骨粉碎在步驟(I)處理得到的魚骨中加入占魚骨重量12%的NaOH溶液，NaOH溶液的濃度為0. 8 mol/L，同時加入魚骨重量250%的NaCl溶液，NaCl溶液的質(zhì)量濃度為12% ;用粉碎機(jī)將魚骨粉碎，形成粉碎液；
(3)硫酸軟骨素提取將步驟(2)處理得到的粉碎液，在55°C下攪拌浸提7h，180目的濾布過濾，所得濾渣在相同條件下再提取一次并過濾，合并兩次過濾的濾液得浸提濾液，同時收集第二次過濾得到的濾渣用于進(jìn)一歩提取膠原蛋白；
(4)濾液酶解除蛋白將步驟(3)所得浸提濾液用3.5 mol/L的鹽酸調(diào)pH至7. 2，加入浸提濾液重量O. 8%的中性蛋白酶，在50°C下保溫攪拌2. 5 h得酶解液；
(5)高溫滅酶活將步驟(4)所得酶解液加熱至100°C，保溫8min滅酶活；
(6)硫酸軟骨素沉淀攪拌條件下向步驟(5)處理得到的酶解液中加無水こ醇至體系中こ醇體積分?jǐn)?shù)為62%，在2°C靜置20 h，在離心カ為7000 X g下，離心18 min收集沉淀，沉淀用無水こ醇洗滌2次，真空冷凍干燥得硫酸軟骨素產(chǎn)品；
(7)濾渣去除脂肪向步驟(3)第二次過濾得到的濾渣以重量比1:25的比例加入質(zhì)量 濃度12%的丁醇溶液，攪拌條件下浸泡20 h，浸泡結(jié)束后用蒸餾水沖洗除盡丁醇；
(8)膠原蛋白提取向步驟(7)處理所得濾渣以重量比1:12的比例加入蒸餾水，調(diào)節(jié)pH至7. 2，加入濾渣重量I. 5%的中性蛋白酶，在50°C下保溫攪拌4. 5 h得酶解液，然后將酶解液加熱至100°C保溫8min滅酶活；
(9)膠原蛋白鹽析將步驟(8)處理得到的酶解液在溫度4°C下，離心カ為3500Xg下離心18 min，收集上清液，向上清液中緩慢加入NaCl鹽析，NaCl的加入量為至上清液中NaCl的濃度為I. Omol/L，在溫度2°C下，攪拌過夜得鹽析液；
(10)膠原蛋白收集將步驟(9)處理得到的鹽析液在2°C下，離心カ為5500Xg下離心18 min，去除上清液，所得沉淀物為膠原蛋白粗品；
(11)膠原蛋白透析和凍干向步驟(10)所得膠原蛋白粗品中加入濃度O.4 mol/L的醋酸溶液復(fù)溶，然后先使用濃度O. 15 mol/L的醋酸溶液作為透析外液進(jìn)行透析30 h，再使用蒸餾水作為透析外液透析30 h，冷凍干燥后即得膠原蛋白成品。本發(fā)明提取的硫酸軟骨素產(chǎn)品為白色粉末，得率為4. 5%-6. 7% (魚骨干品重量計)，純度為92. 0%-97. 4%。對提取的硫酸軟骨素的理化性質(zhì)研究表明，其水分含量為8. 5%-10· 5%，氮含量為2. 7%-3· 2%，氨基己糖含量為30. 1%_32· 6%，葡萄糖醛酸含量為30. 8%-34. 5%。提取出的硫酸軟骨素產(chǎn)品電泳實(shí)驗(yàn)顯示為單點(diǎn)，表明其為單ー糖胺聚糖。本發(fā)明提取的膠原蛋白產(chǎn)品為白色粉末，無腥味，得率為14. 3%-17. 8% (魚骨干品重量計)，純度為94. 2-98. 3%。對提取的膠原蛋白的理化性質(zhì)研究表明，其水分含量為7. 3%-9. 7%，熱變性溫度35. 7-42. 7 V，甘氨酸含量占所有氨基酸總數(shù)的36. 4%_42. 7%，亞氨酸含量為18. 9% -23. 4%，電泳顯示提取的膠原蛋白為典型的I型膠原蛋白。以上所述的實(shí)施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。
權(quán)利要求
1.ー種海洋魚類魚骨的綜合利用エ藝，其特征在于所述的綜合利用エ藝包括如下步驟 (O原料處理將新鮮海洋魚類魚骨上的殘肉剔凈，在40-50°C熱水中清洗干凈； (2)魚骨粉碎在步驟(I)處理得到的魚骨中加入NaOH溶液，同時加入NaCl溶液，用粉碎機(jī)將魚骨粉碎，形成粉碎液； (3)硫酸軟骨素提取將步驟(2)處理得到的粉碎液，在50-58°C下攪拌浸提6-8h，過濾，所得濾渣在相同條件下再提取一次并過濾，合并兩次過濾的濾液得浸提濾液，同時收集第二次過濾得到的濾渣用于進(jìn)一歩提取膠原蛋白； (4)濾液酶解除蛋白將步驟(3)所得浸提濾液用3-4mol/L的鹽酸調(diào)pH至7. 0-7. 5，加入浸提濾液重量O. 5%-1%的中性蛋白酶，在45-55°C下保溫攪拌2-3 h得酶解液； (5)高溫滅酶活將步驟(4)所得酶解液加熱至95-100°C，保溫5-10min滅酶活； (6)硫酸軟骨素沉淀攪拌條件下向步驟(5)處理得到的酶解液中加無水こ醇至體系中こ醇體積分?jǐn)?shù)為60-65%，在0-4°C靜置18-24 h，離心15-20 min收集沉淀，沉淀用無水こ醇洗滌，真空冷凍干燥得硫酸軟骨素產(chǎn)品； (7)濾渣去除脂肪向步驟(3)第二次過濾得到的濾渣以重量比1:20-30的比例加入質(zhì)量濃度10%-15%的丁醇溶液，攪拌條件下浸泡18-24 h，浸泡結(jié)束后用蒸餾水沖洗除盡丁醇； (8)膠原蛋白提取向步驟(7)處理所得濾渣以重量比1:10-15的比例加入蒸餾水，調(diào)節(jié)pH至7. 0-7. 5，加入濾渣重量1%-2%的中性蛋白酶，在45-55°C下保溫攪拌4_5 h得酶解液，然后將酶解液加熱至95-100°C保溫5-10min滅酶活； (9)膠原蛋白鹽析將步驟(8)處理得到的酶解液在溫度0-4°C下離心15-20min，收集上清液，向上清液中緩慢加入NaCl鹽析，在溫度0-4°C下，攪拌過夜得鹽析液； (10)膠原蛋白收集將步驟(9)處理得到的鹽析液在0-4°C下離心15-20min，去除上清液，所得沉淀物為膠原蛋白粗品； (11)膠原蛋白透析和凍干向步驟(10)所得膠原蛋白粗品中加入濃度O.3-0.5 mol/L的醋酸溶液復(fù)溶，然后先使用濃度O. 1-0.2 mol/L的醋酸溶液作為透析外液進(jìn)行透析24-36h，再使用蒸餾水作為透析外液透析24-36 h，冷凍干燥后即得膠原蛋白成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種海洋魚類魚骨的綜合利用エ藝，其特征在于步驟(I)所述的海洋魚類魚骨選自A或B方案 A、海洋軟骨魚的魚骨鯊科、鰩科、魟科、鲼科和銀鮫科魚類的魚骨中的ー種； B、部分含有軟骨的硬骨魚類的魚骨鮫錬魚、鰻魚中的ー種。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的ー種海洋魚類魚骨的綜合利用エ藝，其特征在于步驟(2)中所述的NaOH溶液加入量為步驟(I)處理得到的魚骨重量的10%-15%，NaOH溶液的濃度為 O. 5-1. O mol/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的ー種海洋魚類魚骨的綜合利用エ藝，其特征在于步驟(2)中所述的NaCl溶液加入量為步驟(I)處理得到的魚骨重量的200%-300%，NaCl溶液的質(zhì)量濃度為10%-15%。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的ー種海洋魚類魚骨的綜合利用エ藝，其特征在于步驟(3)中所述的過濾采用150-200目的濾布過濾。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種海洋魚類魚骨的綜合利用工藝，其特征在于步驟(9)中NaCl的加入量為至上清液中NaCl的濃度為O. 8-1. 2mol/L。
7.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種海洋魚類魚骨的綜合利用工藝，其特征在于步驟(6)所述的離心的離心力為6000-8000Xg。
8.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種海洋魚類魚骨的綜合利用工藝，其特征在于步驟(9)所述的離心的離心力為3000-4000Xg。
9.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種海洋魚類魚骨的綜合利用工藝，其特征在于步驟(10)所述的離心的離心力為5000-6000Xg。
全文摘要
本發(fā)明涉及水產(chǎn)動物加工副產(chǎn)物來源的海洋活性物質(zhì)制備領(lǐng)域，目的在于提供一種簡便、快速、提取率高的海洋魚類魚骨的綜合利用工藝。本發(fā)明包括原料處理、魚骨粉碎、硫酸軟骨素提取、濾液酶解除蛋白、高溫滅酶活、硫酸軟骨素沉淀、濾渣去除脂肪、膠原蛋白提取、膠原蛋白鹽析、膠原蛋白收集和膠原蛋白透析和凍干等工藝步驟。本發(fā)明簡便、快速、提取率高，達(dá)到硫酸軟骨素和膠原蛋白聯(lián)產(chǎn)目的。
文檔編號C07K1/14GK102690370SQ201110427728
公開日2012年9月26日 申請日期2011年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月20日
發(fā)明者付萬冬, 周宇芳, 廖妙飛, 鄭斌, 鐘明杰 申請人:浙江省海洋開發(fā)研究院