專利名稱：一種分離純化草胡椒素b的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種分離純化草胡椒素B的方法。
背景技術(shù)：
草胡椒屬又稱為椒草屬(Peperomia Ruiz et Pav.)是胡椒科(piperaceae)第二大屬。據(jù)《中華本草》記載，草胡椒屬草藥多性涼，具有清熱消腫、祛瘀散結(jié)、祛風(fēng)除濕及愈傷止血等功效,主治關(guān)節(jié)炎、腫瘤、跌打損傷和支氣管炎等。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)草胡椒素B (peperominB，式I)具有較好的抑制腫瘤的活性，可從草胡椒屬多種植物如石蟬草(Peperomiadindygulensis Miq.)中分離得到。
權(quán)利要求
1.一種分離純化如式I草胡椒素B的方法，其特征在于包括下列步驟:將含草胡椒素B的水提液上樣至大孔吸附樹脂，以乙醇和水作為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，收集含草胡椒素B的洗脫液，即可；
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的含有草胡椒素B的植物原料為草胡椒、豆瓣綠、山草椒和毛豆瓣綠中的一種或多種。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的含草胡椒素B的水提液的比重范圍為 1.002-1.020。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的水提液由下列方法制得:將含有草胡椒素B的植物原料用水在回流條件下進(jìn)行提取，合并提取液，抽濾，即可。
5.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于:所述的水的用量為含有草胡椒素B的植物原料的12 16倍量(質(zhì)量倍數(shù))；所述的提取次數(shù)為3 5次；所述的提取時(shí)間為每次0.5 Ih ;所述的抽濾為減壓抽濾；所述的抽濾的次數(shù)為I 2次。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的上樣的方法為濕法上樣。
7.如權(quán)利要求6所述的方法`，其特征在于:所述的濕法上樣按如下步驟操作:將含草胡椒素B的水提液，直接上樣；所述的上樣的速度為I 3BV/h。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的弱極性大孔吸附樹脂為DS401或HPD722 ;所述的非極性大孔吸附樹脂為DM130、HPD100、HPD200或HPD300。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的大孔吸附樹脂與含草胡椒素B的水提液的體積比為1: 20 30，其中，含草胡椒素B的水提液中草胡椒素B的含量為4mg/L。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的大孔吸附樹脂柱的徑長(zhǎng)比為1: 8 1: 12。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的梯度洗脫的步驟為先用蒸餾水洗脫大孔吸附樹脂至近無色，再用50% 95%的乙醇水溶液依次進(jìn)行梯度洗脫，所述的百分含量均為體積百分含量。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于:所述的梯度洗脫的步驟為先用蒸餾水洗脫大孔吸附樹脂至近無色，再用50%的乙醇水溶液、70%的乙醇水溶液和95%的乙醇水溶液依次進(jìn)行梯度洗脫；其中，所述的蒸餾水的洗脫速度為I 3BV/h ;所述的50%的乙醇水溶液、70%的乙醇水溶液和95%的乙醇水溶液的洗脫速度分別為3 6BV/h ;所述的50%的乙醇水溶液、70%的乙醇水溶液和95%的乙醇水溶液的用量分別為6 IOBV ;所述的百分含量均為體積百分含量。
13.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:所述的草胡椒素B的洗脫液還經(jīng)過下列處理步驟:將含草胡椒素B的洗脫液濃縮并干燥得草胡椒素B粗品。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于:所述的草胡椒素B粗品還經(jīng)過正相硅膠柱分離；所述的正相硅膠柱分離包括下列步驟:將草胡椒素B粗品上樣，用洗脫劑洗脫，收集只含有草胡椒素B的組份，即可。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其特征在于:所述的上樣的方法為干法上樣；所述的草胡椒素B粗品經(jīng)過下列處理步驟:將草胡椒素B粗品溶于溶劑中，硅膠拌樣，蒸干溶劑，即可；所述的溶劑為含水約10% 30%的乙醇水溶液(體積百分含量)；所述的草胡椒素B粗品與硅膠柱中硅膠的質(zhì)量比為1: 80 1: 120。
16.如權(quán)利要求14所述的方法，其特征在于:所述的正相硅膠柱的徑長(zhǎng)比為1: 8 I: 12;所述的洗脫劑為體積比為1: 2 1: 3的丙酮和正己烷；所述的洗脫方法為等度洗脫；所述的等度洗 脫的洗脫速度為lBV/h ;所述的收集方式為以1/3 1/5BV等份收集。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種分離純化草胡椒素B(peperomin B，式1)的方法，其包括下列步驟將含草胡椒素B的水提液上樣至大孔吸附樹脂，以乙醇和水作為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，收集含草胡椒素B的洗脫液，即可；所述的大孔吸附樹脂為弱極性或非極性大孔吸附樹脂；所述的梯度洗脫的洗脫劑的濃度范圍為純蒸餾水至95％乙醇水溶液(體積百分?jǐn)?shù))。本發(fā)明的方法，分離速度快、產(chǎn)品純度高、對(duì)環(huán)境污染小、生產(chǎn)成本低，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。式文檔編號(hào)C07D407/06GK103102347SQ20111035290
公開日2013年5月15日 申請(qǐng)日期2011年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月9日
發(fā)明者楊國(guó)紅, 李桂秀, 楊義芳, 林夢(mèng)感, 秦雪梅, 吳春珍 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院, 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)研究總院