專利名稱：超臨界萃取當(dāng)歸中藁本內(nèi)酯的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及超臨界CO2流體技術(shù)萃取當(dāng)歸藥材中藁本內(nèi)酯的提取工藝。
背景技術(shù)：
藁本內(nèi)酯(Ligustilide)是我國(guó)傳統(tǒng)常用中藥當(dāng)歸、川芎揮發(fā)油中的主要有效成分，分別占當(dāng)歸、川彎揮發(fā)油的35%及58%，是評(píng)價(jià)當(dāng)歸、川彎等中藥材質(zhì)量的重要指標(biāo)。藁本內(nèi)酯對(duì)子宮具有抑制作用。在大鼠正常未孕子宮及經(jīng)縮宮素處理的離體子宮實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)藁本內(nèi)酯可劑量依賴性及時(shí)間依從性地抑制子宮平滑肌的收縮功能，提示藁本內(nèi)酯具顯著的抗子宮平滑肌痙攣?zhàn)饔?，即治療痛?jīng)作用。實(shí)驗(yàn)表明，藁本內(nèi)酯對(duì)兔離體子宮，無(wú)論早孕或未孕均有明顯抑制作用，表現(xiàn)為張力下降，節(jié)律變慢，收縮力減弱，幾分鐘后完全松弛，作用時(shí)間持久。但藁本內(nèi)酯在高溫狀態(tài)下不穩(wěn)定，易發(fā)生分解和易構(gòu)化?，F(xiàn)在常用的提取方法如有機(jī)溶劑提取法和水蒸氣蒸餾法。但這些方法各有缺陷，如有機(jī)溶劑提取法，雖然能夠保持較高含量的藁本內(nèi)酯，但易產(chǎn)生溶劑殘留。而水蒸氣蒸餾法因要維持提取溶劑的溫度在IOO0C,易使藁本內(nèi)酯遭到破壞且造成當(dāng)歸中其他低沸點(diǎn)成分的散失。本發(fā)明即針對(duì)上述之不足，提供一種能夠保持較高含量藁本內(nèi)酯，同時(shí)避免低沸點(diǎn)成分散失的提取工藝。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝。

本發(fā)明通過(guò)采用超臨界CO2流體技術(shù)進(jìn)行藁本內(nèi)酯的萃取，使操作在較低溫度下進(jìn)行，避免藁本內(nèi)酯在加熱過(guò)程中的破壞。超臨界CO2萃取的主要影響因素為萃取壓力和萃取溫度以及CCV流量，本發(fā)明上述因素進(jìn)行了考察，得到優(yōu)化工藝包括以下步驟1.粉碎當(dāng)歸藥材，過(guò)40-60目篩；2.將過(guò)篩后的當(dāng)歸藥材粉末填入超臨界CO2萃取罐；3.調(diào)整CO2流量為20-25m3/h，萃取壓力15_25MPa，萃取溫度25_35°C;調(diào)整解析壓力4-8MPa，解析溫度15-20°C ；4.采用無(wú)水乙醇作為夾帶劑，其用量占加料量的2-10% ；5.動(dòng)態(tài)萃取 15_45min ；6.收集萃取物，真空揮干無(wú)水乙醇；所得淡黃色透明油狀物即為富含藁本內(nèi)酯的提取物。對(duì)得到的藁本內(nèi)酯進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下性狀黃棕色的澄清液體，有特異香氣，在甲醇、乙腈、石油醚中易溶。相對(duì)密度按中國(guó)藥典附錄VII A法測(cè)定，測(cè)得藁本內(nèi)酯相對(duì)密度為0.933-0. 974。
折光率按中國(guó)藥典附錄VII F法測(cè)定，測(cè)得藁本內(nèi)酯折光率為1.324-1.421。藁本內(nèi)酯含量檢測(cè)采用HPLC檢測(cè)法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-水(80 20)為流動(dòng)相，洗脫30分鐘；檢測(cè)波長(zhǎng)為350nm，理論塔板數(shù)以藁本內(nèi)酯計(jì)應(yīng)不低于8000。檢測(cè)結(jié)果為藁本內(nèi)酯在上述方法得到的藁本內(nèi)酯中的重量百分比為55% 60%。上述藁本內(nèi)酯可與藥學(xué)上可接受的輔助添加劑成分混合后，按相應(yīng)的常規(guī)藥物制劑方法，可制備為任意藥學(xué)上適合的藥用組合物，所述組合物包括所述藁本內(nèi)酯和藥學(xué)上可接受的適宜賦形劑，所述藥用組合物中藁本內(nèi)酯與賦形劑的重量比例為1:1至1: 30。這種組合物可用于痛經(jīng)的治療。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1取干燥當(dāng)歸藥材500g，粉碎過(guò)40目篩，將過(guò)篩后的當(dāng)歸藥材粉末填入超臨界CO2萃取罐；調(diào)整CO2流量為20m3/h，萃取壓力20MPa，萃取溫度35°C ;調(diào)整解析壓力4MPa，解析溫度20°C ;采用無(wú)水乙醇作為夾帶劑，其用量占加料量的5% ;動(dòng)態(tài)萃取30min。收集萃取物，真空揮干無(wú)水乙醇；所得。對(duì)所得的萃取物進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下性狀黃棕色的澄清液體，有特異香氣，在甲醇、乙腈、石油醚中易溶。相對(duì)密度按中國(guó)藥典附錄VII A法測(cè)定，測(cè)得藁本內(nèi)酯相對(duì)密度為0. 933。折光率按中國(guó)藥典附錄VII F法測(cè)定，測(cè)得藁本內(nèi)酯折光率為1. 324。藁本內(nèi)酯含量檢測(cè)按前述HPLC檢測(cè)法，藁本內(nèi)酯在藁本內(nèi)酯中的重量百分比為55%。實(shí)施例2取干燥當(dāng)歸藥材500g，粉碎過(guò)60目篩，將過(guò)篩后的當(dāng)歸藥材粉末填入超臨界CO2萃取罐；調(diào)整CO2流量為25m3/h，萃取壓力25MPa，萃取溫度30°C ;調(diào)整解析壓力6MPa，解析溫度15°C ;采用無(wú)水乙醇作為夾帶劑，其用量占加料量的10% ;動(dòng)態(tài)萃取15min。收集萃取物，真空揮干無(wú)水乙醇；即得。對(duì)得到的藁本內(nèi)酯進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下性狀黃棕色的澄清液體，有特異香氣，在甲醇、乙腈、石油醚中易溶。相對(duì)密度按中國(guó)藥典附錄VII A法測(cè)定，測(cè)得藁本內(nèi)酯相對(duì)密度為0. 974。折光率按中國(guó)藥典附錄VII F法測(cè)定，測(cè)得藁本內(nèi)酯折光率為1.421。藁本內(nèi)酯含量檢測(cè)按前述HPLC檢測(cè)法，藁本內(nèi)酯在藁本內(nèi)酯中的重量百分比為60%。實(shí)施例3取昆明種小鼠110只，早古各半，體重18 22g，稱重標(biāo)記后隨機(jī)分為11組，每組10只，陰性對(duì)照組以生理鹽水0. 2ml/只灌胃給藥；給藥組以實(shí)施例1提取得到的藁本內(nèi)酯以吐溫-80乳化后灌胃給藥,劑量 分別為720mg/kg/d、480mg/kg/d、240mg/kg/d,連續(xù)3天。最后一次給藥后lh，腹腔注射0. 6%醋酸溶液0. 2ml/只，觀察并記錄注射醋酸溶液后各組小鼠30min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)(腹部收縮內(nèi)凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)的次數(shù)。
對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，給藥組與陰性組比較用t檢驗(yàn)。結(jié)果表明，藁本內(nèi)酯各劑量組與陰性組比較P < 0. 05，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。
權(quán)利要求
1.從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，包括以下步驟 (1)粉碎當(dāng)歸藥材，過(guò)40-60目篩； (2)將過(guò)篩后的當(dāng)歸藥材粉末填入超臨界CO2萃取罐； (3)調(diào)整CCV流量為20-25m3/h，萃取壓力15_25MPa，萃取溫度25_35°C;調(diào)整解析壓力4-8MPa，解析溫度 15-20°C ； (4)采用無(wú)水乙醇作為夾帶劑，其用量占加料量的2-10%； (5)動(dòng)態(tài)萃取15_45min； (6)收集萃取物，真空揮干無(wú)水乙醇；所得淡黃色透明油狀物即所為富含藁本內(nèi)酯的提取物。
2.如權(quán)利要求1所述的從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，所述CO2流量為 20m3/h。
3.如權(quán)利要求1所述的從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，所述萃取壓力為2OMPa。
4.如權(quán)利要求1所述的從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，所述萃取溫度為35°C。
5.如權(quán)利要求1所述的從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，解析壓力4_6MPa0
6.如權(quán)利要求1所述的從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，解析溫度20。。。
7.如權(quán)利要求1所述的從當(dāng)歸中提取藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，所述無(wú)水乙醇作為夾帶劑的用量占加料量的5%。
全文摘要
本發(fā)明提供一種當(dāng)歸中藁本內(nèi)酯的提取工藝，其特征在于，包括以下步驟(1)粉碎當(dāng)歸藥材，過(guò)40-60目篩；(2)將過(guò)篩后的當(dāng)歸藥材粉末填入超臨界CO2萃取罐；(3)調(diào)整CO2流量為20-25m3/h，萃取壓力15-25MPa，萃取溫度25-35℃；調(diào)整解析壓力4-8MPa，解析溫度15-20℃；(4)采用無(wú)水乙醇作為夾帶劑，其用量占加料量的2-10％；(5)動(dòng)態(tài)萃取15-45min；(6)收集萃取物，真空揮干無(wú)水乙醇；所得淡黃色透明油狀物即為富含藁本內(nèi)酯的提取物。
文檔編號(hào)C07D307/88GK103058969SQ20111032143
公開日2013年4月24日 申請(qǐng)日期2011年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月20日
發(fā)明者丁杰 申請(qǐng)人:上海天龍藥業(yè)有限公司