專利名稱：一種阿克替苷的分離制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及天然藥物的分離，具體地說是一種通過膜分離和制備型高效液相色譜技術(shù)從阿拉伯婆婆納地上部分分離阿克替苷的制備方法。
背景技術(shù)：
阿拉伯婆婆納(Veronica persica Poir.)為玄參科草本植物，生于田間、路旁，是華東地區(qū)早春常見雜草，也為常見入侵植物，資源豐富。植物的全草可供藥用，可治療風(fēng)濕痹痛，腎虛腰痛，外瘧等癥。阿拉伯婆婆納地上部分含有阿拉伯婆婆納苷、阿克替苷、衛(wèi)矛醇等活性成分。阿克替苷為苯丙素類成分，可溶于醇類有機試劑，溶于水，極性大?，F(xiàn)代藥理研究表明阿克替苷具有多種生活性抗氧化、抗病毒、保肝、抗腫瘤轉(zhuǎn)移、抗炎、降血脂、抗菌、神經(jīng)保護(hù)、降血壓和心血管保護(hù)等。孫衛(wèi)東等通過研究發(fā)現(xiàn)阿克替苷能促進(jìn)細(xì)胞凋亡，對超微結(jié)構(gòu)有明顯的改善作用，能夠抑制前列增生。目前尚未見阿克替苷工業(yè)分離制備方法的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種環(huán)保無污染、產(chǎn)品純度高，可以大規(guī)模生產(chǎn)的阿克替苷的分離制備方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用技術(shù)方案為 一種阿克替苷的分離制備方法，其特征在于
(1)提取稱取阿拉伯婆婆納干燥地上部分，加入8-12倍沸水浸提3次，每次l-2h，合并浸提液；
(2)大孔樹脂柱層析將浸提液上樣于非極性大孔樹脂柱，分別用蒸餾水和45-65%乙醇洗脫，收集洗脫液；
(3)膜分離將洗脫液濃縮除去乙醇，經(jīng)過高速離心機離心得到清液，通過孔徑0.10微米的微濾氧化銻陶瓷膜過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；
(4)制備型高效液相色譜分離以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以甲醇一7K 為流動相，梯度洗脫，紫外在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得阿克替苷。步驟(4)中所述甲醇一水體積比為10-55%。步驟(4)中所述紫外在線監(jiān)測波長為227nm。本發(fā)明具有以下優(yōu)點
(1)所得產(chǎn)品純度高。本發(fā)明采用了先進(jìn)的制備型高效液相色譜分離技術(shù)，具有高分離能力，可以保證產(chǎn)品純度達(dá)到98%以上。(2)有機殘留少。本發(fā)明摒棄了傳統(tǒng)的溶劑萃取、硅膠柱層析等工藝，采用了水提和膜分離等無需使用有機溶劑的方法。
(3)環(huán)保無污染。本發(fā)明制備過程中使用的有機溶劑均可回收循環(huán)利用，不產(chǎn)生影響環(huán)境的廢水。(4)能夠?qū)崿F(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。
具體實施例方式實施例1
阿拉伯婆婆納干燥地上部分粉碎，稱取0. ^g，加入10倍沸水浸提3次，每次1.證，過濾，合并浸提液，浸提液上樣于DlOl型大孔樹脂柱，分別用蒸餾水和65%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮除去乙醇，經(jīng)過高速離心機離心得到清液，通過孔徑0. 10微米的微濾氧化銻陶瓷膜過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；
以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以10-55%甲醇一水為流動相，梯度洗脫，將膜分離組分用IOml無水甲醇溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測，波長為227nm，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得阿克替苷。實施例2
阿拉伯婆婆納干燥地上部分粉碎，稱取1kg，加入12倍沸水浸提3次，每次2h，過濾， 合并浸提液，浸提液上樣于DlOl型大孔樹脂柱，分別用蒸餾水和45%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮除去乙醇，經(jīng)過高速離心機離心得到清液，通過孔徑0. 10微米的微濾氧化銻陶瓷膜過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；
以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以10-55%甲醇一水為流動相，梯度洗脫，將膜分離組分用IOml無水甲醇溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測，波長為227nm，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得阿克替苷。實施例3
阿拉伯婆婆納干燥地上部分粉碎，稱取^g，加入12倍沸水浸提3次，每次lh，過濾， 合并浸提液，浸提液上樣于DlOl型大孔樹脂柱，分別用蒸餾水和50%乙醇洗脫，收集醇洗脫液，濃縮除去乙醇，經(jīng)過高速離心機離心得到清液，通過孔徑0. 10微米的微濾氧化銻陶瓷膜過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；
以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以10-55%甲醇一水為流動相，梯度洗脫，將膜分離組分用IOml無水甲醇溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測，波長為227nm，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得阿克替苷。
權(quán)利要求
1.一種阿克替苷的分離制備方法，其特征在于(1)提取稱取阿拉伯婆婆納干燥地上部分，加入8-12倍沸水浸提3次，每次l_2h，合并浸提液；(2)大孔樹脂柱層析將浸提液上樣于非極性大孔樹脂柱，分別用蒸餾水和45-65%乙醇洗脫，收集洗脫液；(3)膜分離將洗脫液濃縮除去乙醇，經(jīng)過高速離心機離心得到清液，通過孔徑0.10微米的微濾氧化銻陶瓷膜過濾，濾液再經(jīng)過截留分子量為1000的中空纖維膜分離，得到透過液，濃縮干燥即得到膜分離組分；(4)制備型高效液相色譜分離以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以甲醇一7K 為流動相，梯度洗脫，紫外在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，濃縮冷凍干燥即得阿克替苷。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述阿克替苷的分離制備方法，其特征在于步驟(4)中所述甲醇一水體積比為10-55%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述阿克替苷的分離制備方法，其特征在于步驟(4)中所述紫外在線監(jiān)測波長為227nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及天然藥物的分離，具體地說是一種阿克替苷的分離制備方法，將阿拉伯婆婆納地上部分粉碎后，沸水浸提3次，每次1-2h，合并浸提液，通過大孔樹脂柱層析，乙醇水洗脫，收集液濃縮回收乙醇，濃縮液進(jìn)過高速離心機過濾，濾液通過膜分離機分離，得到組分再經(jīng)高效工業(yè)色譜柱分離制備，以水—醇體系梯度洗脫，合并富含阿克替苷的洗脫液，濃縮冷凍干燥即得阿克替苷。本發(fā)明產(chǎn)品純度高，工藝穩(wěn)定，特別適用于從阿拉伯婆婆納中分離制備高純度的阿克替苷化合物。
文檔編號C07H15/18GK102391327SQ20111021005
公開日2012年3月28日 申請日期2011年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月26日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司