專利名稱：治療或預(yù)防大腸桿菌導(dǎo)致的經(jīng)口感染的組合物和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本公開涉及組合物，包括藥物組合物(例如抗生素組合物)，以及使用該組合物治療或預(yù)防人及其他動物中大腸桿菌感染的方法。本公開也涉及組合物(例如滅菌劑、消毒劑、防腐劑和洗滌劑)，以及使用該組合物根除或減少表面(包括無生命和生物表面(例如， 皮膚、傷口))上大腸桿菌的存在的方法，和/或使用該組合物減弱大腸桿菌的感染性以預(yù)防和/或減少大腸桿菌感染傳播的方法。
背景技術(shù)：
大腸桿菌(Escherichia coli (Ε. coli)是一類可以引起嚴重的人類疾病的細菌。 雖然存在許多種類的大腸桿菌，但只有某些類型引起食源性疾病。成百上千種無害的大腸桿菌菌株可以廣泛存在于自然界，包括人類和其他溫血動物的腸道。但是，致病株是腸道和泌尿生殖道感染的常見原因。1982年，美國科學(xué)家鑒定了第一種有害的食源性大腸桿菌。在美國發(fā)現(xiàn)的最常見的致病食源性大腸桿菌稱為0157 H7。牛是大腸桿菌0157 H7的主要來源，但這些細菌也可以在其他家養(yǎng)和野生哺乳動物中發(fā)現(xiàn)。大腸桿菌血清型0157:H7是大腸桿菌的罕見品種， 其產(chǎn)生大量的一種或多種相關(guān)的、造成嚴重損害的腸道內(nèi)層的強效毒素。有害的大腸桿菌的一些不同菌株可引起腹瀉病。特別危險類型的大腸桿菌(如大腸桿菌0157:H7)產(chǎn)生一種或多種稱為志賀毒素的毒素(毒物)。志賀毒素會嚴重損害腸和腎臟里層。這些類型的細菌被稱為產(chǎn)生志賀毒素的大腸桿菌(STEC)。STEC經(jīng)常造成出血性腹瀉，可導(dǎo)致兒童或免疫系統(tǒng)較弱的人腎衰竭。STEC也被稱為vero細胞毒素大腸桿菌(VTEC)或腸出血性大腸桿菌(EHEC)；這些都是一般指同一類型細菌。在北美最常見的 STEC是大腸桿菌0157:H7 (通常簡稱為大腸桿菌0157，或甚至只是“0157” )。產(chǎn)腸毒素的大腸桿菌(ETEC)，其產(chǎn)生不同的毒素，可引起腹瀉。這些菌株通常會導(dǎo)致所謂的旅游者腹瀉，因為它們通常在發(fā)展中國家污染食物和水。致腸病性大腸桿菌 (EPEC)引起持續(xù)性腹瀉(持續(xù)2周或更長時間)，并在發(fā)展中國家更為常見，它們可以通過受污染的水或接觸受感染的動物而傳染給人類。其他類型的大腸桿菌包括026:H11和 0111:H8，也已在美國發(fā)現(xiàn)，并會導(dǎo)致人的疾病。大腸桿菌感染的特點是嚴重腹部絞痛(腹痛)和起初是水樣但會變得非常血樣的腹瀉。偶爾發(fā)生嘔吐。發(fā)熱可以是低程度或沒有。這種疾病通常是自限性，平均持續(xù)時間為8天。有些人只表現(xiàn)水樣腹瀉。
通過從腹瀉糞便分離血清型0157:H7大腸桿菌或其他產(chǎn)生vero毒素的大腸桿菌來診斷出血性結(jié)腸炎?？蛇x擇地，可以對糞便直接測試vero毒素的存在?？梢酝ㄟ^從相關(guān)牽連的食物分離相同血清型的大腸桿菌獲得確認。除了大腸桿菌0157，許多其他類型(稱為血清群)的STEC致病。這些其他類型有時被稱為“非0157 STEC0大腸桿菌血清群026、0111和0103是最常見的導(dǎo)致美國人疾病的非0157血清群。任何年齡的人可以受STEC感染。幼兒和老年人比其他人更容易出現(xiàn)嚴重疾病和溶血尿毒綜合癥(HUQ，但即使是健康的年齡較大的兒童和年輕人也可以發(fā)展為重病。STEC 感染的每個人的癥狀不同，但常常包括嚴重胃痙攣、腹瀉(通常血樣)和嘔吐。診斷患有STEC感染的人群的大約5至10%發(fā)展為潛在威脅生命的稱為溶血性尿毒癥綜合癥(HUQ的并發(fā)癥。個體發(fā)展為HUS的跡象包括減少排尿次數(shù)、感覺很疲憊、在臉頰和下眼瞼內(nèi)沒有血色。患有HUS的個體應(yīng)住院治療，因為他們的腎臟可能會停止工作，并且他們有可能發(fā)展其他嚴重問題?；加蠬US的大多數(shù)人在幾周內(nèi)恢復(fù)，但一些受到永久性損害或死亡。STEC存在于反芻動物(包括牛、山羊、綿羊、鹿和麋鹿)的腸中。人類疾病的主要來源是牛。引起人類疾病的STEC —般不會使動物生病。其他種類的動物(包括豬和禽類) 有時從環(huán)境中獲得STEC并可能攜帶或傳播它。

發(fā)明內(nèi)容
本公開涉及使用藥物組合物預(yù)防和/或治療大腸桿菌感染，包括耐抗生素和致病性強的大腸桿菌感染(例如，STEC、ETEC或EPEC)，所述藥物組合物包含一種或多種分解食物組分的消化酶，例如胰腺或其他消化道酶(例如，豬胰酶)或者源自植物、真菌或微生物的酶。如本文所使用，藥物組合物可用于人或獸醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥。因此，該藥物組合物可用于人或其他哺乳動物群(例如，豬、馬、母牛、綿羊、山羊、猴子、大鼠、小鼠、貓、狗)或禽群(例如，鴨、鵝、雞、火雞)的預(yù)防性和/或治療性治療。該藥物組合物可單獨使用，和/或與其他抗菌藥或抗生素(例如，抗大腸桿菌)療法結(jié)合使用，和/或與其他感染后治療試劑或抗生素試劑結(jié)合使用以治療大腸桿菌感染。本公開還提供含有一種或多種消化酶的殺菌和/或抑菌組合物，用作殺菌劑、消毒劑、洗滌劑和防腐劑，例如用于醫(yī)院、療養(yǎng)院、托兒所、日托所、學(xué)校、工作環(huán)境、飲食服務(wù)機構(gòu)、公共交通和休息室機構(gòu)中，以降低、減弱和/或消滅這些機構(gòu)中存在的大腸桿菌。用所述組合物處理的表面可以是大的(例如，手術(shù)室臺、門、交換臺、通風(fēng)系統(tǒng))或小的(例如，醫(yī)療器材、門把手)；無生命或非生物的(桌子)或活組織(手，例如，用于洗手的洗滌劑；傷口，例如，外科傷口或由事故/外傷引起的傷口)。因此，所述組合物可用于處理表面，以減少或根除上面的大腸桿菌，或減弱或減少大腸桿菌的感染性，因此預(yù)防或減少大腸桿菌的傳播。因此，本公開的一個目的是提供用于治療或預(yù)防禽或哺乳動物中大腸桿菌感染的方法，包括將治療有效量的含有一種或多種消化酶的藥物組合物施用于禽或哺乳動物。在一些實施方式中，一種或多種消化酶包含一種或多種選自下組的酶蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、蔗糖酶、麥芽糖酶、木瓜蛋白酶和脂肪酶。在一些實施方式中，一種或多種消化酶包含一種或多種胰酶。一種或多種消化酶獨立地源自動物來源、微生物來源、植物來源、真菌來源，或者是合成制備的。在一些實施方式中，動物來源是豬胰腺。在一些實施方式中，藥物組合物包含至少一種淀粉酶、含有胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶的混合物以及至少一種脂肪酶。在一些實施方式中，藥物組合物包含至少一種蛋白酶和至少一種脂肪酶，且其中總蛋白酶與總脂肪酶的比率(以USP單位計)為約1 1到約 20 1。在一些實施方式中，該藥物組合物是選自下組的劑型丸劑、片劑、膠囊、囊片 (caplet)、散劑、霜劑、洗液、氣霧劑、乳劑、粉劑、液體、凝膠及其任何組合。在一些實施方式中，該藥物組合物配制成用于口服施用、或用于局部施用、或用于鼻內(nèi)施用或用于經(jīng)粘膜施用。本公開還提供用于治療顯示大腸桿菌感染的一種或多種癥狀的哺乳動物或禽的方法，包括將治療有效量的含有一種或多種消化酶的組合物施用于哺乳動物或禽。本公開還提供用于治療腹瀉的方法，包括將含有一種或多種消化酶的藥物組合物施用于個體。本公開還提供用于為表面消毒或殺菌以減少其上大腸桿菌數(shù)量或根除其上大腸桿菌的方法，包括將含有一種或多種消化酶的組合物應(yīng)用于所述表面。所述表面可以是活的表面(例如，皮膚、傷口)或無生命或非生物表面(例如，醫(yī)療器材、食品)。本公開還提供用于減少哺乳動物或禽的皮膚區(qū)域、組織或傷口上存在的大腸桿菌的數(shù)量的方法，包括將含有一種或多種消化酶的組合物施用于皮膚區(qū)域、組織或傷口。本公開還提供含有一種或多種消化酶的殺菌劑，其中所述殺菌劑對于金黃色葡萄球菌或大腸桿菌的苯酚系數(shù)為> 1到約20。本公開還提供含有一種或多種消化酶的抗生素，其中所述抗生素對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌。類似地，本公開提供含有一種或多種消化酶的洗滌劑，其中所述洗滌劑對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌。本公開還提供含有一種或多種消化酶的防腐劑，其中所述防腐劑對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌。類似地，本公開還提供含有一種或多種消化酶的殺菌劑，其中所述殺菌劑對于大腸桿菌的殺菌和/或抑菌。本發(fā)明的一個或多個實施方式的細節(jié)在以下附圖
和說明書中闡明。本文公開的任何參考文獻，例如專利、專利申請、說明書、書籍、論文或科技出版物，以引用方式全部合并。 本發(fā)明的其他特征、目的和優(yōu)點將從說明書、附圖以及權(quán)利要求書中變得清楚。
具體實施例方式
術(shù)語“施用，，指將組合物或藥物組合物劑量給予脊椎動物或無脊椎動物(包括哺乳動物、禽、魚或兩棲動物)的方法，其中該方法經(jīng)由任何途徑，例如，呼吸道內(nèi)、鼻、局部、 口、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、經(jīng)粘膜、面頰、直腸、陰道或舌下。優(yōu)選的施用方法可根據(jù)各種因素改變，例如，藥物組合物的組分、疾病位置、所涉及疾病以及疾病的嚴重性。
術(shù)語“哺乳動物”以其通常的生物學(xué)意義使用。因此，其特別包括人、牛、馬、狗和貓，而且包括許多其他物種。術(shù)語“藥學(xué)可接受的載體”或“藥學(xué)可接受的賦形劑”包括任何和所有溶劑、分散介質(zhì)、涂層、等滲劑和延遲吸收劑等。用于藥物活性物質(zhì)的這種介質(zhì)和試劑的使用是本領(lǐng)域公知的。除了與活性成分不相容的任何介質(zhì)或試劑，可考慮其在治療組合物中的使用。也可以在該組合物中加入補充的活性成分，例如抗生素、抗真菌劑、抗微生物藥。另外，可包括例如本領(lǐng)域常用的各種輔劑。這些和其他這樣的化合物在文獻例如Merck Index,Merck & Company, Rahway, NJ中有描述。在藥物組合物中包含各種組分的考慮例如在Gilman等人 (編著)(2006) ；Goodman and Gilman' s :The Pharmacological Basis of Therapeutics, 第 11 版，The McGraw-Hill Companies 中有描述。本文使用的“受試者”或“患者”或“個體”指人或非人類哺乳動物，例如狗、貓、小鼠、大鼠、母牛、綿羊、豬、山羊、非人類靈長類動物或禽，例如雞，以及任何其他脊椎動物或無脊椎動物?！爸委熡行Я俊被颉八帉W(xué)有效量”通常指足以實現(xiàn)預(yù)期效果的量，其可根據(jù)疾病病癥的性質(zhì)和嚴重性、受試者的性質(zhì)和組合物的效力而改變?？梢岳斫?，對于預(yù)防活動性疾病， 可使用和治療活動性疾病不同的濃度。該劑量還可以取決于患者的身高、體重、性別、年齡和病史。治療學(xué)效果在某種程度上緩解疾病的一種或多種癥狀，并包括治愈疾病?！爸斡?指消除活動性疾病的癥狀。然而，疾病的某些長期或持久影響甚至可以在獲得治愈后存在 (例如組織損傷)。本文使用的“治療”、指為治療學(xué)目的施用藥物組合物。術(shù)語“治療性治療”指治療已患有疾病的患者，從而引起治療有益的效果，例如改善已有癥狀、預(yù)防另外癥狀、改善或預(yù)防癥狀的根本代謝原因、延遲或預(yù)防疾病的進一步發(fā)展和/或減少將要發(fā)展或預(yù)期要發(fā)展的癥狀的嚴重性。本公開提供含有一種或多種消化酶的組合物以及使用該組合物治療和/或預(yù)防大腸桿菌(包括耐抗生素形式的大腸桿菌，和致病性強的形式，例如STEC、ETEC或EPEC) 感染的方法。本公開也提供含有一種或多種消化酶的組合物以及使用該組合物作為防腐劑、洗滌劑、殺菌劑和消毒劑(例如，作為殺菌和/或抑菌組合物)的方法，來根除或減弱大腸桿菌和/或減少其感染性。本文描述的組合物含有一種或多種消化酶，假定所述一種或多種消化酶協(xié)助減少、削弱或根除大腸桿菌，從而預(yù)防大腸桿菌感染或治療大腸桿菌感染 (例如，改善或改進癥狀或者縮短感染時程)。組合物本文描述的組合物可包含一種或多種消化酶。不希望受理論束縛，據(jù)信組合物中的消化酶可降解大腸桿菌的細胞壁、細胞膜和/或蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致抑菌和/或殺菌活性。 該組合物顯示抗金黃色葡萄球菌和大腸桿菌而不抗腸道沙門菌(S.enterica)的物種特異性殺菌/抑菌活性，可能說明兩種生物體的易損性源自存在于兩種生物體中的相似的蛋白序列的蛋白水解性降解。本文描述的消化酶是可以分解一種或多種食物組分(例如，蛋白、脂肪、碳水化合物)的酶。所述消化酶可以是動物來源的酶(例如，胰腺或其他消化道酶)、或植物_、真菌-或微生物來源的酶，或可以是合成制備的。許多消化酶是市售的，或可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法從其他來源分離或純化。也可使用標準試驗評估所述酶的酶活性。所述消化酶可以以任何種類酶的組合和任何酶來源的組合而使用。在一些實施方式中，一種或多種消化酶包含一種或多種選自下組的酶蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、蔗糖酶、麥芽糖酶、木瓜蛋白酶(例如來自木瓜)、菠蘿蛋白酶(例如來自菠蘿)、水解酶和脂肪酶。在一些實施方式中，一種或多種消化酶包含一種或多種胰酶。在一些實施方式中，組合物含有一種或多種蛋白酶、一種或多種脂肪酶和一種或多種淀粉酶。在一些實施方式中，一種或多種蛋白酶包含胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶。在一些實施方式中，本文描述的組合物基本上由或者由一種或多種消化酶組成。在某些實施方式中，組合物含有至少一種淀粉酶、至少兩種蛋白酶和至少一種脂肪酶。在某些實施方式中，組合物還可含有一種或多種水解酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、木瓜(papaya)、纖維素酶、胰酶、蔗糖酶和麥芽糖酶。如所指出，一種或多種消化酶可以源自于動物來源。在一些實施方式中，所述動物來源是豬，例如豬胰腺。豬胰酶提取物和配方是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的并且是市售的或可使用已知方法制備。例如，胰酶組合物可從kientific Protein Laboratories (稱為PEC) 購買。例如，可以通過生產(chǎn)和/或加工方法或通過向組合物選擇性加入外源性酶、活化劑或抑制劑來調(diào)節(jié)胰酶組合物或本文的任何組合物，以改變本文所包含的一種或多種消化酶的量，例如脂肪酶、淀粉酶或蛋白酶含量。在某些情況下，可能需要蛋白酶活性相對高于脂肪酶。因此，在一些實施方式中， 組合物含有至少一種蛋白酶和至少一種脂肪酶，其中總蛋白酶與總脂肪酶(以USP單位計) 的比率范圍為約 1 1 到約 20 1，包括 1 1、2 1、3 1、4 1、5 1、6 1、7 1、 8 1、9 UlO Ull 1、12 1、13 1、14 1、15 1、16 1、17 1、18 1、 19 1和20 1，以及范圍內(nèi)的所有數(shù)值。在一些實施方式中，蛋白酶與脂肪酶的比率范圍為約 4 1 到約 10 1，包括 4 1、5 1、6 1、7 1、8 1、9 1 和 10 1，以及范圍內(nèi)的所有數(shù)值。在某些情況下，改變給定組合物中的特定酶活性的量可能是有用的?？赏ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的各種方法，例如通過增大特定酶的量、或通過調(diào)節(jié)所述組合物的組分，例如，通過使用穩(wěn)定劑、抑制劑和活化劑，來調(diào)節(jié)一種或多種消化酶的活性。在一些實施方式中，本文描述的組合物包含一種或多種蛋白酶，所述蛋白酶的活性為每mg組合物約0. 05到約400USP單位，或該范圍之間的任意值(例如，每mg 0. 1,0. 2,0. 25,0. 5、1、2、5、10、15、20、 25、30、35、40、45、50、55、60、65、75、100、150、200、250、300、350USP 單位)。在一些實施方式中，本文描述的組合物包含一種或多種脂肪酶，所述脂肪酶的活性為每mg組合物約0. 005 到約50單位，或該范圍之間的任意值(例如，每mg 0. 01,0. 02,0. 025,0. 03,0. 04,0. 05、 0.06,0.08,0.1,0.2,0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、22、25、28、30、35、38、 40、45USP單位)。在一些實施方式中，本文描述的組合物包含一種或多種淀粉酶，所述淀粉酶的活性為每mg組合物約0. 05到約400USP單位，或該范圍之間的任意值(例如，每 mg 0.1,0.2,0.25,0.5、1、2、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、75、100、150、200、 250、300、350USP單位)。在一些實施方式中，本文描述的組合物包含上述活性范圍的一種或多種蛋白酶、上述活性范圍的一種或多種脂肪酶和上述活性范圍的一種或多種淀粉酶。 一個示例的實施方式包括活性范圍為約150-250USP單位/mg的一種或多種蛋白酶、活性范圍為約20-40USP單位/mg的一種或多種脂肪酶和活性范圍為約200-300USP單位/mg的一種或多種淀粉酶。在一些實施方式中，配制組合物以穩(wěn)定一種或多種消化酶，例如，保護所述酶的酶活性。穩(wěn)定化技術(shù)可限制或抑制組合物中一種或多種酶的自動降解并幫助維持酶活性、增加保質(zhì)期并有助于組合物活性對于溫度、濕度和儲藏條件改變的耐受性。例如，在一些實施方式中，組合物中的一種或多種酶被包封，例如，脂質(zhì)包封。在其他應(yīng)用中，可以利用賦形劑、PH、酶抑制劑等的變化以幫助酶穩(wěn)定。適當?shù)姆€(wěn)定化技術(shù)取決于該組合物的預(yù)定應(yīng)用 (例如，抗生素相對于洗滌劑)、施用途徑、組合物形式、遞送的預(yù)定位置/預(yù)定活性及其他因素，且可由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。某些有用的酶活性穩(wěn)定劑包括在溶液中提供游離鈣的來源的化合物，例如鈣鹽； 烷基醇或支鏈醇類，例如乙醇和異丙醇；烷醇胺類，例如三乙醇胺；酸類，例如有機酸類；以及石油餾分的混合物。在某些實施方式中，酶活性穩(wěn)定劑可以是選自下組的組合物(1)已知有效穩(wěn)定液體水溶液中的酶的組合物，包括酶穩(wěn)定化合物和系統(tǒng)，( 選擇的“膠束抑制劑”，以及 (1)和( 的混合物。在一些實施方式中，活性穩(wěn)定劑是適當濃度的硼陰離子。在一些情況下，活性穩(wěn)定劑在多元醇中被溶劑化，且可以與酶穩(wěn)定增效劑或形成酶穩(wěn)定系統(tǒng)的輔劑組合。優(yōu)選的“膠束抑制劑”包括已知改變和抑制膠束形成的物質(zhì)，可選自水可混溶的溶劑，例如C1-C6烷醇類、C1-C6 二醇類、C2-C24烷撐二醇醚類、烷撐二醇烷基醚類及其混合物。特別優(yōu)選的膠束抑制劑是改變膠束形成的二(丙二醇)甲醚(“DPM”)及其類似物?！懊阜€(wěn)定系統(tǒng)”的一個例子是硼化合物(例如硼酸)，過去已經(jīng)單獨使用硼化合物， 或者硼化合物與選定的其他輔劑和/或增效劑(例如多官能氨基化合物、抗氧化劑等)組合使用，來保護儲存狀態(tài)和多種產(chǎn)品中的蛋白水解酶及其他酶?？蛇x擇活性穩(wěn)定劑，以基本上最小化配方中消化酶的最低抑菌濃度(“MIC”)。MIC 是在給定時期(例如M小時)內(nèi)成功抑制培養(yǎng)基中細菌生長的殺生物劑的最低濃度的測量。MIC測試的細節(jié)參見〃 Bailey & Scott' Diagnostic Microbiology'，8th edition, 1990的177頁中。在一些實施方式中，本文描述的組合物可被各種天然或合成的涂層包覆，例如，以提供酶的定時釋放，以提供香味或掩味，或以穩(wěn)定所述酶。含有一種或多種用于本文描述的方法和組合物的消化酶的涂層的酶制劑，包括脂質(zhì)涂層或脂質(zhì)包封的酶組合物在2009年4 月13日提交的美國序列號12/386,051中公開，該文獻以引用方式全部合并于此。這種涂層制劑可以提供所需特征，包括增加的儲存穩(wěn)定性、減少的粉末或固體制劑的氣霧化、掩蔽氣味和味道、酶穩(wěn)定和酶的延遲或定時釋放。本文描述的組合物含有的其他添加劑可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定，且基于許多特征，包括預(yù)定應(yīng)用例如人和獸醫(yī)學(xué)應(yīng)用；所需的釋放曲線；所需的藥物代謝動力學(xué)；安全性；穩(wěn)定性和物理特性(氣味、顏色、味道、傾瀉性、氣霧化)。適當制劑成分、賦形劑、粘合劑、填充劑、食用香料、著色劑等可由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過已知方法確定和評估。用于人或者獸醫(yī)使用的藥物組合物和抗生素本文描述的組合物可以配制成藥物組合物，例如，可以包含前述的和一種或多種藥學(xué)可接受的載體或賦形劑一起配制的組合物。所述藥物組合物用于治療或預(yù)防人和其他動物例如哺乳動物(例如，母牛、馬、豬、綿羊、山羊、猴子、貓、狗、小鼠、大鼠)和禽(雞、火雞、鴨、鵝)中的大腸桿菌感染。本發(fā)明中，用于治療大腸桿菌感染的藥物組合物也可稱為抗生素或抗生素組合物。大腸桿菌(包括致病性強的和耐受形式)對本文描述的抗生素組合物的敏感性可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法測定。一種快速的方法使用浸漬有特定量抗生素組合物的市售的濾紙盤。將這些濾紙盤置于用待測試的大腸桿菌培養(yǎng)基劃線的瓊脂板表面上，觀察板的生長抑制區(qū)。液體培養(yǎng)基稀釋敏感性試驗包括制備含有在液體培養(yǎng)基中的連續(xù)稀釋的組合物的試管，然后將待測試的生物體接種入試管中。適當?shù)姆跤诤?，抑制細菌生長的最低濃度報告為最低抑菌濃度(MIC)。大腸桿菌對本文描述的抗生素的抗性或敏感性可基于臨床結(jié)果測定，S卩，將抗生素施用于被生物體感染的受試者是否能成功治愈該受試者。或者，為促進使用體外試驗結(jié)果鑒定抗生素抗性或敏感性，臨床實驗室標準的國家委員會(NCCLQ具有抗生素敏感性的配方標準，其將臨床結(jié)果與抗生素的最低抑菌濃度的體外測定相關(guān)。本發(fā)明藥物組合物可以通過用作類似用途的試劑的任何可接受的施用方式施用， 包括但不限于，經(jīng)口、皮下、靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)、局部、透皮、經(jīng)粘膜、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)、肺內(nèi)、陰道、直腸或眼內(nèi)。例如，經(jīng)口、經(jīng)粘膜、局部和腸胃外施用通常用于治療大腸桿菌感染適應(yīng)癥。在藥物組合物中，有效濃度的一種或多種消化酶與適當?shù)乃幬镔x形劑或載體混合。組合物中的消化酶的濃度一經(jīng)施用能遞送有效量的組合物，所述量用于有效減少或根除大腸桿菌、和/或治療或改善與大腸桿菌感染有關(guān)的一種或多種癥狀?？股亟M合物可配制成單劑量施用。為配制組合物，將重量分數(shù)的消化酶以有效濃度溶解、懸浮、分散在選定載體中或與選定載體混合，該濃度使得減少或根除細菌、緩解所治療的病癥或改善一種或多種癥狀。消化酶以足以發(fā)揮治療有效作用、且不引起待治療患者的不良副作用的量包括在藥學(xué)可接受的載體中。治療有效濃度可通過體外和體內(nèi)測試消化酶而根據(jù)經(jīng)驗確定，然后由其推算到人用劑量。藥物組合物中的消化酶濃度取決于酶的吸收、失活和排泄速率、酶的物理化學(xué)特性、劑量表、劑型和施用量以及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他因素。藥物組合物可立刻施用，或分成許多小劑量以間隔的時間施用。應(yīng)理解，治療的精確劑量和持續(xù)時間隨待治療的疾病變化，且可以通過使用已知的測試方法或由外推法從體內(nèi)或者體外試驗數(shù)據(jù)根據(jù)經(jīng)驗確定。需注意，濃度和劑量值也可以隨待緩解的病癥的嚴重性改變。還應(yīng)理解，對于特定受試者而言，應(yīng)該在一定時間內(nèi)根據(jù)個人需要和施用組合物或指導(dǎo)組合物施用的人的專業(yè)判斷調(diào)整具體的劑量方案，且應(yīng)理解本文所列濃度范圍僅是示例性的而非限制要求保護的組合物的范圍或?qū)嵺`。一旦混合或加入消化酶，所得混合物可以是溶液、懸浮液、凝膠、粉末、乳劑等。所得混合物的形式取決于許多因素，包括預(yù)定施用方式和選定的載體或介質(zhì)中消化酶的溶解度。用于藥學(xué)應(yīng)用的組合物可作為晶體或非晶型產(chǎn)品施用。藥學(xué)可接受的組合物包括固體、半固體、液體、凝膠、粉末和氣霧劑劑型，例如，片劑、膠囊、囊片、散劑、粉劑、液體、懸浮液、乳劑、凝膠、栓劑、氣霧劑等。例如，它們可通過由例如沉淀、結(jié)晶、凍干、噴霧干燥或蒸
10發(fā)干燥的方法作為薄膜獲得。微波或射頻干燥可用于該目的。組合物也可以以持續(xù)釋放或控制釋放的劑型施用，包括長效注射劑、滲透泵、丸劑、口服劑型上的特殊涂層(例如腸溶衣)、透皮作用(包括電遷移)貼劑等，用于以預(yù)定速率延長和/或定時、脈沖式施用。在一些實施方式中，以適于精確劑量的單次施用的單位劑型提供所述組合物。組合物可以單獨施用，或更普遍地，與常規(guī)藥物載體、賦形劑等組合施用。本文使用的術(shù)語“賦形劑”用來描述除了用于組合物的化合物(酶)以外的任何成分。藥學(xué)可接受的賦形劑包括但不限于，離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂；自乳化藥物遞送系統(tǒng) (SEDDS)，例如琥珀酸d-α-生育酚聚乙二醇1000酯；用于藥物劑型的表面活性劑，例如吐溫或其他類似的聚合物遞送基質(zhì)；血清蛋白，例如人血清白蛋白；緩沖劑物質(zhì)，例如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)，例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態(tài)氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯基吡咯烷酮、纖維素基物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧化丙烯-嵌段聚合物和羊毛脂。環(huán)糊精例如α-、β-和γ-環(huán)糊精，或化學(xué)改性的衍生物例如羥基烷基環(huán)糊精，包括2-和3-羥丙基-β -環(huán)糊精，或其他溶解的衍生物也可有利地用于增加本文描述的組合物的遞送。用于制備這種劑型的實際方法是已知的，或?qū)Ρ绢I(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，例如參見 Remington :The Science and Practice of Pharmacy,第 21 版 (Lippincott Williams & Wilkins. 2005)。在一種優(yōu)選的實施方式中，組合物將采取單位劑型例如丸劑或片劑，因此除了包含活性成分，組合物可包含稀釋劑，例如乳糖、蔗糖、磷酸二鈣等；潤滑劑，例如硬脂酸鎂等； 和粘合劑，例如淀粉、阿拉伯膠、聚乙烯吡咯烷酮、明膠、纖維素、纖維素衍生物等。在另一種固體劑型中，將粉末、溶液或懸浮液(例如，在碳酸異丙烯酯、植物油或甘油三酯中)包封在明膠膠囊中。也可考慮兩種或多種成分被物理分離的單位劑型，例如，含有酶顆粒和其他成分顆粒的膠囊；雙層片劑；雙室膠囊等。液體藥學(xué)可施用組合物例如可以通過將一種或多種消化酶和任選的藥物輔劑溶解、分散在載體中(例如，水、鹽水、含水葡萄糖、甘油、乙二醇、乙醇等)以形成溶液或懸浮液來制備。如果需要，藥物組合物也可含有少量無毒輔劑物質(zhì)，例如潤濕劑、乳化劑、增溶劑、PH緩沖劑等(例如，乙酸鈉、檸檬酸鈉、環(huán)糊精衍生物、失水山梨糖醇單月桂酸酯、醋酸三乙醇胺、油酸三乙醇胺等)。注射劑可以以常用形式，作為液體溶液或懸浮液、作為乳劑， 或以適于在注射之前溶解或懸浮在液體中的固體形式制備。根據(jù)酶的物理化學(xué)性質(zhì)、所需溶出速率、成本考慮及其他標準，固體組合物可以多種不同類型的劑型提供。在一種實施方式中，固體組合物是單一單元。這意味著藥物的一個單元劑量包括在單一、物理形狀為固體形式或制品中。換言之，固體組合物是粘著的，其與其中單元不粘著的多單元劑型相反。可用作用于固體組合物劑型的單一單元的例子包括片劑，例如壓制片、膜樣單元、 箔樣單元、薄片、凍干基質(zhì)單元等。在一種實施方式中，固體組合物是高度多孔凍干形式。這種凍干劑，有時也稱為薄片或凍干片，由于其迅速崩解是特別有用的，這也使得活性化合物迅速溶出。另一方面，對于某些應(yīng)用，固體組合物也可作為多單元劑型而形成。多單元的例子是粉劑、散劑、顆粒劑、微粒劑、微囊劑、丸劑、珠、凍干粉劑等。在一種實施方式中，固體組合物是凍干粉劑。這種分散的凍干系統(tǒng)包含大量粉末微粒，由于使用凍干法形成粉末，各微粒具有不規(guī)則、多孔顯微結(jié)構(gòu)，粉末可以通過該結(jié)構(gòu)非?？焖俚匚账?，導(dǎo)致快速溶出。在另一種實施方式中，固體組合物是散劑。另一種類型的能夠?qū)崿F(xiàn)快速藥物溶出的多微粒系統(tǒng)是來自涂覆有組合物成分 (例如，酶)的水可溶解賦形劑的粉末、顆?；蛲鑴┫到y(tǒng)，使得酶位于單個微粒的外表面。在該類系統(tǒng)中，水可溶解的低分子量的賦形劑用于制備這種涂層微粒的核心，其可以隨后再涂覆有含有酶和優(yōu)選一種或多種其他賦形劑的涂層組合物，所述賦形劑為例如粘合劑、致孔劑、糖、糖醇、膜形成聚合物、增塑劑或用于藥物涂層組合物的其他賦形劑。用于治療或預(yù)防大腸桿菌感染的適當劑量取決于患者(物種、年齡、體重、健康狀態(tài))、疾病的嚴重性、存在的大腸桿菌菌株、制劑類型(例如，液體或膏劑)及本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他因素。應(yīng)注意，濃度和劑量值可隨著待緩減的病癥的嚴重性而改變。還應(yīng)理解，對于特定受試者而言，應(yīng)該在一定時間內(nèi)根據(jù)個人需要和施用組合物或指導(dǎo)組合物施用的人的專業(yè)判斷調(diào)整具體的劑量方案。在一些實施方式中，藥物組合物每劑量含有活性為約10，000到約60，000U. S. P， 包括 10，000、15，000,20,000,25, 000,30, 000,35, 000,40, 000,45, 000,50, 000,55, 000 和 60，000U. S. P以及該范圍之間的所有值的淀粉酶；活性為約10，000到約70，000U. S. P， 包括 10，000,15,000,20,000,25,000,30,000,35,000,40,000,45,000,50,000,55,000、 60，000,65, 000和70，000U. S. P ；以及該范圍之間的所有值的蛋白酶，和活性為約4，000到約 30，000U. S. P，包括 4，000,5, 000、10，000、15，000,20, 000,25, 000 和 30，000U. S. P 以及該范圍之間的所有值的脂肪酶。藥物組合物可包括一種或多種約2到約5mg，包括2.0、2.5、 3. 0,3. 5,4. 0,4. 5和5. Omg以及該范圍之間的所有值的胰凝乳蛋白酶；約60到約IOOmg, 包括50、65、70、75、80、85、90、95和IOOmg以及該范圍之間的所有值的胰蛋白酶；約3，000 到約 10，000USP 單位，包括 3，000,4, 000,5, 000,6, 000,7, 000,8, 000,9, 000 和 10，000USP 以及該范圍之間的所有值的木瓜蛋白酶；以及約30到約60mg，包括30、35、40、45、50、55和 60mg以及該范圍之間的所有值的木瓜。組合物的特定劑型的其他配方提供于下。1、口服施用的組合物口服藥物劑型是固體、凝膠或液體。固體劑型是片劑、膠囊、顆粒和散裝粉末。口服片劑類型包括壓制片、咀嚼錠劑和可以包腸溶衣、糖衣或薄膜衣的片劑。膠囊可以是硬或軟明膠膠囊，而顆粒和粉末可以以非泡騰或泡騰形式結(jié)合本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他成分來提供。a、口服施用的固體組合物在某些實施方式中，制劑是固體劑型，在一種實施方式中，制劑是膠囊或片劑。片劑、丸劑、膠囊、錠劑等可包含一種或多種以下成分或類似性質(zhì)的化合物粘合劑；潤滑劑； 稀釋劑；助流劑；崩解劑；著色劑；甜味劑；芳香劑；潤濕劑；腸溶衣；和薄膜包衣。粘合劑的例子包括微晶纖維素、黃芪膠、葡萄糖溶液、阿拉伯膠漿、凝膠溶液、糖漿、聚乙烯吡咯烷酮、 聚維酮(povidone)、交聚維酮(crospovidone)、蔗糖和淀粉糊。潤滑劑包括滑石、淀粉、硬脂酸鎂或硬脂酸鈣、石松粉和硬脂酸。稀釋劑包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、高嶺土、鹽、甘露醇和磷酸二鈣。助流劑包括但不限于膠體二氧化硅。崩解劑包括交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、淀粉羥基乙酸鈉、藻酸、玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、膨潤土、甲基纖維素、瓊脂和羧甲基纖維素。著色劑包括例如任何批準的水溶性FD和C染料及其混合物；和懸浮在水化氧化鋁中的水不溶性 FD和C染料。甜味劑包括蔗糖、乳糖、甘露醇和人工甜味劑例如糖精，和許多噴霧干燥的香料。芳香劑包括從植物例如果實中提取的天然香料，和產(chǎn)生愉快感覺的化合物的合成混合物，例如但不限于薄荷和水楊酸甲酯。潤濕劑包括單硬脂酸丙二醇酯、失水山梨糖醇單油酸酯、單月桂酸二甘醇酯和聚氧乙烯月桂醚。腸溶衣包括脂肪酸、脂肪、蠟、蟲膠、氨合蟲膠和苯二甲酸醋酸纖維素。薄膜包衣包括羥乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙二醇4000和苯二甲酸醋酸纖維素。消化酶可以以保護其免受胃的酸性環(huán)境破壞的組合物來提供。例如，組合物可配制在腸溶衣中，所述腸溶衣可保持組合物在胃中的完整性并在腸內(nèi)釋放消化酶。組合物也可以與抗酸劑或其他這樣的成分一起配制。當劑量單位形式是膠囊時，除了包含上述類型材料外，它可以包含液體載體，例如脂肪油。另外，劑量單位形式可以包含改變所述劑量單位物理形式的多種其他材料，例如， 糖衣及其他腸溶劑。消化酶也可作為酏劑、懸浮液、糖漿、薄片、散劑、口香糖等的組分來施用。除包含活性消化酶外，糖漿可以包含作為甜味劑的蔗糖和某些防腐劑、染料、著色劑和香料。消化酶也可與不損害所需作用的其他活性材料混合，或與補充所需作用的材料混合，例如抗酸劑、吐阻滯劑和利尿劑?？梢园^高濃度的消化酶，直至約98%重量。在所有實施方式中，片劑和膠囊制劑可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)涂層，以改變或維持消化酶的溶出。因此，例如，它們可以包有常用的腸可消化的涂層，例如苯基水楊酸酯、蠟和苯二甲酸醋酸纖維素。b、用于口服施用的液體組合物液體口服劑型包括水溶液、乳劑、懸浮液、溶液和/或由非泡騰顆粒重構(gòu)的懸浮液和由泡騰顆粒重構(gòu)的泡騰制劑。例如，水溶液包括酏劑和糖漿。乳劑是水包油或油包水的。酏劑是透明、加甜的水醇制劑。用于酏劑的藥學(xué)可接受的載體包括溶劑。糖漿是糖例如蔗糖的濃縮水溶液，且可以包含防腐劑。乳劑是兩相系統(tǒng)，其中一種液體以小滴形式分散遍布另一種液體中。用于乳劑的藥學(xué)可接受載體是非水液體、乳化劑和防腐劑。懸浮液使用藥學(xué)可接受的懸浮劑和防腐劑。用于重構(gòu)成液體口服劑型的非泡騰顆粒的藥學(xué)可接受的物質(zhì)包括稀釋劑、甜味劑和潤濕劑。用于重構(gòu)成液體口服劑型的泡騰顆粒的藥學(xué)可接受的物質(zhì)包括有機酸類和二氧化碳源。著色劑和芳香劑用于所有上述劑型。溶劑包括甘油、山梨醇、乙醇和糖漿。防腐劑的例子包括甘油、對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯、苯甲酸、苯甲酸鈉和醇。用于乳劑的非水性液體的例子包括礦物油和棉花子油。乳化劑的例子包括凝膠、阿拉伯樹膠、黃芪膠、膨潤土和表面活性劑，例如聚氧乙烯失水山梨醇單油酸酯。懸浮劑包括羧甲基纖維素鈉、果膠、黃芪膠、Veegum和阿拉伯樹膠。 甜味劑包括蔗糖、糖漿、甘油和人工甜味劑例如糖精。潤濕劑包括單硬脂酸丙二醇酯、失水山梨糖醇單油酸酯、二甘醇單月桂酸酯和聚氧乙烯月桂基醚。有機酸包括檸檬酸和酒石酸。 二氧化碳源包括碳酸氫鈉和碳酸鈉。著色劑包括任何批準檢定的水溶性FD和C染料及其混合物。芳香劑包括從植物例如這種果實種提取的天然芳香劑，和生成愉快味覺的化合物的合成混合物。
在一種實施方式中，對于固體劑型，例如碳酸異丙烯酯、植物油或甘油三酯的溶液或懸浮液包封在明膠膠囊中。這種溶液及其制備和包封在美國專利4，328，245,4, 409，239 和4，410，545中公開。對于液體劑型，例如聚乙二醇的溶液可以用足量的藥學(xué)可接受的液體載體例如水稀釋，以對于施用容易地測量。或者，液體或半固體口服制劑可以按照如下方法制備將消化酶溶解或分散在植物油、二醇類、甘油三酯類、丙二醇酯類(例如，碳酸異丙烯酯)及其他這種載體中，并將這些溶液或懸浮液包封入硬或軟的明膠膠囊殼中。其他有用的制劑包括美國專利RE^，819 和4，358，603中所說明的那些制劑。簡言之，這種制劑包括但不限于制劑，其含有本文提供的消化酶、二烷基化單-或聚-烷撐二醇(包括但不限于，1，2- 二甲氧基甲烷、二甘醇二甲醚、三甘醇二甲醚、四甘醇二甲醚、聚乙二醇-350- 二甲醚、聚乙二醇-550- 二甲醚、聚乙二醇-750- 二甲醚，其中350、550和750指聚乙二醇的大概平均分子量)以及一種或多種抗氧化劑，例如丁基化羥基甲苯(BHT)、丁基化羥基苯甲醚(BHA)、沒食子酸丙酯、維生素E、 氫醌、羥基香豆素、乙醇胺、卵磷脂、腦磷脂、抗壞血酸、蘋果酸、山梨醇、磷酸、硫代二丙酸及其酯和二硫代氨基甲酸酯。其他制劑包括但不限于包括藥學(xué)可接受的縮醛的水性醇溶液。用于這些制劑的醇是任何藥學(xué)可接受的水可混溶溶劑，其具有一個或多個羥基，包括但不限于丙二醇和乙醇。縮醛類包括但不限于低級烷基醛的二(低級烷基)縮醛，例如乙醛縮二乙醇。2、注射劑、溶液和乳劑在一種實施方式中，本發(fā)明還考慮以通過皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi)注射為特征的腸胃外施用?？蓪⒆⑸鋭┲苽涑沙Ｒ?guī)形式液體溶液或懸浮液、乳劑或在注射之前適于形成液體溶液或懸浮液的固體形式。所述注射劑、溶液和乳劑也包含一種或多種賦形劑。適當?shù)馁x形劑例如是水、鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇。另外，如果需要，待施用的藥物組合物也可以包含少量無毒輔劑物質(zhì)，例如潤濕劑或乳化劑、PH緩沖劑、穩(wěn)定劑、增溶劑及其他這種試劑，例如乙酸鈉、失水山梨糖醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺和環(huán)糊精。本發(fā)明也考慮植入緩釋或延續(xù)釋放系統(tǒng)，使得保持劑量的恒定水平(例如參見美國專利3，710，795)。簡言之，將本發(fā)明提供的消化酶分散在固體內(nèi)部基質(zhì)中，例如，聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、增塑的或未增塑的聚氯乙烯、增塑的尼龍、增塑的聚乙二醇對苯二甲酸酯、天然橡膠、聚異戊二烯、聚異丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-乙烯基乙酸酯共聚物、硅氧橡膠、聚二甲硅氧烷、硅氧烷碳酸酯共聚物(silicone carbonate copolymer)、親水聚合物，例如丙烯酸和甲基丙烯酸的酯的水凝膠、膠原蛋白、交聯(lián)聚乙烯醇和交聯(lián)的部分水解的聚醋酸乙烯酯，其被外面的高分子膜包圍，例如聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙烯基乙酸酯共聚物、硅橡膠、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡膠、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯與醋酸乙烯酯、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯的共聚物、離子交聯(lián)聚合物聚對苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡膠氯醇橡膠、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/醋酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物，其不能溶解在體液中。消化酶以控制釋放速度擴散通過外面的高分子膜。這種胃腸外組合物所含的消化酶的百分比高度取決于其特性，以及消化酶或其混合物的活性和受試者的需要。組合物的腸胃外施用包括靜脈內(nèi)、皮下和肌內(nèi)施用。用于腸胃外施用的制劑包括用于注射的滅菌溶液、滅菌干燥的可溶性產(chǎn)物，例如僅在使用前與溶劑混合的凍干粉，包括皮下注射片劑、用于注射的滅菌懸浮液、僅在使用前與介質(zhì)混合的滅菌干燥不溶性產(chǎn)物和滅菌乳劑。所述溶液可以是水性或非水性的。如果靜脈內(nèi)施用，適當?shù)妮d體包括生理鹽水或磷酸鹽緩沖鹽水(PBQ，以及含有增稠劑和增溶劑(例如葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物)的溶液。用于胃腸外制劑的藥學(xué)可接受的載體包括水性介質(zhì)、非水性介質(zhì)、抗微生物劑、等滲劑、緩沖劑、抗氧化劑、局部麻醉劑、懸浮劑和分散劑、乳化劑、螯合劑及其他藥學(xué)可接受的物質(zhì)。水性介質(zhì)的例子包括氯化鈉注射劑、Ringers注射劑、等滲葡萄糖注射劑、無菌水注射劑、葡萄糖和乳化Ringers注射劑。非水性胃腸外介質(zhì)包括植物來源的非揮發(fā)油、棉花子油、玉米油、芝麻油和花生油。抑菌或抑制真菌濃度的抗微生物劑必須加入以多劑量容器包裝的胃腸外制劑中，所述容器包括苯酚或甲酚、水銀劑、苯甲醇、三氯叔丁醇、對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯、乙基汞硫代水楊酸鈉、殺藻銨和氯化芐乙氧銨。等滲劑包括氯化鈉和葡萄糖。緩沖劑包括磷酸鹽和檸檬酸鹽?？寡趸瘎┌蛩釟溻c。局部麻醉劑包括鹽酸普魯卡因。懸浮劑和分散劑包括羧甲基纖維素鈉、羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化劑包括聚山梨酸酯80(TWEEN 80)。金屬離子的螯合劑包括EDTA。對于水溶性介質(zhì)而言，藥物載體也包括乙醇、聚乙二醇和丙二醇；對于PH調(diào)節(jié)而言，藥物載體也包括氫氧化鈉、鹽酸、檸檬酸或乳酸。單位劑量胃腸外制劑包裝在安瓿、小瓶或帶有針頭的注射器中。用于腸胃外施用的所有制劑必須是滅菌的，如本領(lǐng)域已知并實施的。說明性地，含有消化酶的滅菌水溶液的靜脈內(nèi)或動脈內(nèi)滴注是有效的施用方式。 另一種實施方式是含有消化酶的滅菌水性或油性溶液或懸浮液，其可根據(jù)需要注射以產(chǎn)生所需藥理學(xué)效果。注射劑設(shè)計成局部和全身施用。對于待治療組織，在一種實施方式中，配制治療有效劑量以含有至少約0. 1 % w/w直至約90 % w/w或更多濃度，在某些實施方式中超過1 % w/w的消化酶。消化酶可以懸浮成微粉化或其他適當形式，或可以衍生以生成溶解度更大的活性產(chǎn)物。所得混合物的形式取決于許多因素，包括預(yù)定的施用方式和在選定載體或介質(zhì)中的消化酶的溶解度。有效濃度足以改善病癥的癥狀，并可由經(jīng)驗確定。3、凍干粉劑本文所關(guān)注的也包括凍干粉劑，其可重構(gòu)成溶液、乳劑及其他混合物而施用。它們也可以重構(gòu)和配制成固體或凝膠。滅菌凍干粉通過將本文提供的消化酶溶解在適當?shù)娜軇┲兄瞥?。溶劑可以包含改善粉末或由粉末制得的重?gòu)溶液的穩(wěn)定性或其他藥理學(xué)成分的賦形劑?？墒褂玫馁x形劑包括但不限于葡萄糖、山梨醇、果糖、玉米糖漿、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其他適當試劑。溶劑也可以包含緩沖劑，例如檸檬酸鹽、磷酸鈉或磷酸鉀或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他這類緩沖劑，在一種實施方式中，PH約為中性。隨后溶液無菌過濾，接著在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標準條件下的凍干提供所需制劑。在一種實施方式中，所得溶液分裝入小瓶中用于凍干。各小瓶包含單一劑量或多劑量的消化酶。凍干粉劑可以在適當?shù)臈l件下，例如在約 4°C到室溫下保存。
用注射用水重構(gòu)所述凍干粉劑提供用于腸胃外施用制劑。對于重構(gòu)，將凍干粉加入無菌水或其他適當?shù)妮d體中。精確量取決于選定的消化酶。這種量可由經(jīng)驗確定。4、局部施用可以如所述制備局部混合物用于局部和全身施用。所得混合物可以是溶液、懸浮液、乳劑等，且可以配制成霜劑、凝膠、膏劑、乳劑、粉劑、溶液、酏劑、洗液、懸浮液、酊劑、糊劑、泡沫、氣霧劑、沖洗劑、噴霧劑、栓劑、繃帶、真皮貼劑或適于局部施用的任何其他制劑。消化酶可配制成氣霧劑用于局部應(yīng)用，例如通過吸入(例如參見美國專利 4，044，126,4, 414，209和4，364，923，其描述了遞送用于治療炎性疾病特別是哮喘的類固醇的氣霧劑)。用于施用至呼吸道的這些制劑可以是氣霧劑或用于噴霧器的溶液形式，或作為用于吹入的微細粉，單獨使用或與惰性載體(例如乳糖)組合。在這種情況下，在一種實施方式中，該制劑微粒的直徑小于50微米，在一種實施方式中，該制劑微粒的直徑小于10 微米。消化酶可以配制成局部應(yīng)用，例如以凝膠、霜劑和洗液形式局部施用到皮膚和粘膜(例如眼睛)，以及用于施用到眼睛或用于腦池內(nèi)或脊柱內(nèi)施用?？紤]局部施用用于透皮遞送，也用于施用至眼睛或粘膜，或用于吸入療法。也可以單獨或與其他藥學(xué)可接受的賦形劑組合施用消化酶的鼻溶液。這些溶液，特別是用于眼科的溶液，可以用適當?shù)柠}配制成0. 01 % -10 %的等滲溶液，PH約5-7?？梢栽谶m當?shù)姆勰┗|(zhì)例如滑石、乳糖、淀粉等的幫助下形成粉劑。溶液可以用水性或非水性基質(zhì)配制，也可包含一種或多種分散劑、懸浮劑、增溶劑等。使用分子量和濃度水平能有效形成消化酶的水性或非水性溶液或懸浮液的粘稠溶液或膠態(tài)凝膠的聚合物制備局部凝膠?？梢灾苽渚植磕z的聚合物包括聚磷酸酯類、聚乙二醇類、高分子量聚乳酸類、羥丙基纖維素類、殼聚糖、聚苯乙烯磺酸鹽類等。例如，在水性或油性基質(zhì)中加入適當?shù)脑龀韯?、膠凝劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、分散劑、 懸浮劑或相容性調(diào)節(jié)劑等來配制膏劑、霜劑和洗液?；|(zhì)包括水、醇或油，例如液體石蠟、礦物油或植物油，例如花生油或蓖麻油?？筛鶕?jù)基質(zhì)的性質(zhì)使用的增稠劑包括軟石蠟、硬脂酸鋁、鯨蠟硬脂醇、丙二醇、聚乙二醇類、聚磷酸酯類、聚乳酸類、羥乙基纖維素類、羥基丙基纖維素類、纖維素膠、丙烯酸酯聚合物類、親水性膠凝劑、殼聚糖、聚苯乙烯磺酸鹽、礦脂、羊毛脂、氫化羊毛脂、蜂蠟等。膏劑、糊劑、霜劑、凝膠和洗液也可包含賦形劑，例如動物和植物脂肪、油、蠟、石蠟、淀粉、黃芪膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、硅氧烷、膨潤土、硅酸、滑石、氧化鋅及其混合物。粉劑和噴霧劑也可包含賦形劑，例如硅酸、氫氧化鋁、硅酸鈣和聚酰胺粉末或這些物質(zhì)的混合物。溶液、懸浮液或分散劑可以通過通常用于制備局部施用氣霧劑的任何已知方法轉(zhuǎn)變?yōu)闅忪F劑或噴霧劑。通常，這種方法包括壓縮或提供壓縮通常與惰性載氣一起的溶液、 懸浮液或分散體容器的手段，并通過小孔傳遞壓縮氣體。噴霧劑和氣霧劑也可以含有常用推進劑，例如，氯氟烴或易揮發(fā)的未取代烴，例如丁烷和丙烷。賦形劑包括以制劑總重量的直至約10重量％的水平存在的促進皮膚吸收的化合物，例如二甲亞砜(DMSO)、脂肪酸偏甘油酯等。脂肪酸偏甘油酯的例子包括但不限于可從 SASOL North America, Inc. of Houston, Tex 獲得的 IMWITOR 742 和 IMWIT0R 308。局部制劑也可以任選包含改善化妝可接受性的惰性成分，包括但不限于濕潤劑、表面活性劑、香料、著色劑、潤膚劑、填充劑等。局部組合物也可以包括其他抗菌素劑，例子包括桿菌肽、新霉素、多粘菌素、β -內(nèi)酰胺，包括青霉素、甲氧西林、拉氧頭孢和頭孢菌素，例如頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢孟多酯鈉、頭孢唑啉、頭孢克肟、頭孢美唑、頭孢尼西、頭孢哌酮、頭孢雷特、cefotanme、頭孢噻肟、頭孢替坦、頭孢西丁、頭孢泊肟酯、頭孢他啶、頭孢唑肟、頭孢曲松、頭孢曲松、頭孢呋辛、 頭孢氨芐、頭孢菌素C、頭孢菌素C鈉鹽、頭孢噻吩、頭孢噻吩鈉鹽、頭孢噻吩二水合物、頭孢匹林、頭孢拉定、頭孢呋辛酯、氯碳頭孢等。基本上任何當局部施用時有效的抗感染/抗生素試劑都能使用。因此，用于治療活動性感染和去除皮膚病原體群的本發(fā)明方法包括單獨或結(jié)合應(yīng)用消化酶，不結(jié)合其他抗感染劑或結(jié)合至少一種其他抗感染劑的方法?？赏ㄟ^撒粉末、噴氣霧劑或用患者或保健供給者的指尖或其他常規(guī)敷物例如藥簽或擦將膏劑、霜劑、洗液、溶液或凝膠薄膜涂抹在皮膚的所需區(qū)域直接施用局部組合物。該產(chǎn)品可以首先施用到皮膚上然后用指尖或敷藥器涂抹，或施用到指尖然后涂抹在皮膚上。 組合物也可以任選首先涂在局部敷藥器(例如綁帶、藥簽、潮濕的機織或非機織擦等)的表面上，然后將其施用于皮膚的部分，以接受組合物。本發(fā)明的局部組合物可用基礎(chǔ)制劑制備，所述基礎(chǔ)制劑所使用的組分、其量、制備方法對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言基本上是常用的，所有這些不需要進一步描述。本發(fā)明的局部組合物也可以基于乳劑配方制備成霜劑或洗液，除了特別適于含有消化酶的制劑的良好的皮膚相容性和傷口愈合性之外，所述乳劑配方還具有至今未被認識的殺菌活性。如上所述，本發(fā)明不局限于局部霜劑或洗液劑?；诔Ｓ脟婌F劑、輕霧劑、氣霧劑、 洗液、霜劑、水和非水溶液或液體、油、凝膠、膏劑、糊劑、軟膏劑、乳劑和懸浮液的局部制劑可包含一定量的消化酶，以及任選總濃度為約0. 125重量％到約10重量％或更多的一種或多種其他的抗感染劑，再次認識到，最佳劑量可以僅相差0. 05重量％，以使典型的霜劑和洗液實施方式包含該范圍內(nèi)的每0. 05重量％濃度增量。本發(fā)明的局部組合物用于治療皮膚感染和傷口感染，例如表面?zhèn)诤痛┩競凇?適于治療的傷口包括皮膚磨損傷口、皮膚或表面切割、褥瘡、燒傷和外科手術(shù)傷口。本發(fā)明的局部組合物也可用于去除大腸桿菌群，以預(yù)防二次感染，包括在外科手術(shù)或?qū)Ч懿迦胫暗念A(yù)處理。粘膜遞送制劑可以包含本文描述的消化酶，其與適當?shù)挠糜谡衬みf送的載體或介質(zhì)結(jié)合或協(xié)同施用。如本文所使用，術(shù)語“載體”指藥學(xué)可接受的固體或液體填充劑、稀釋劑或包封材料。含水液體載體可包含藥學(xué)可接受的添加劑，例如酸化劑、堿化劑、抗菌防腐劑、抗氧化劑、緩沖劑、螯合劑、絡(luò)合劑、增溶劑、濕潤劑、溶劑、懸浮劑和/或增粘劑、張度劑、潤濕劑或其他生物相容材料。上述種類成分的列表可在美國Wiarmacopeia National formulary，1900，第1857-1859頁中找到?？勺鳛樗帉W(xué)可接受載體的材料的一些例子是糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；粉末狀黃芪膠；麥芽；明膠；滑石；賦形劑，例如可可脂和栓劑蠟；油，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和豆油；二醇類，例如丙二醇；多元醇類，例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯類，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；藻酸；無熱原水；等滲鹽水；Ringer溶液；乙醇和磷酸鹽緩沖液，以及其他用于藥物制劑的無毒相容物質(zhì)。潤濕劑、乳化劑和潤滑劑例如十二烷基硫酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、包衣劑、甜味劑、芳香劑和香料、防腐劑和抗氧化劑也可以按照配方設(shè)計師的要求存在于所述組合物中。藥學(xué)可接受的抗氧化劑的例子包括水溶性的抗氧化劑，例如抗壞血酸、鹽酸半胱氨酸、亞硫酸氫鈉、 焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉等；油溶性抗氧化劑，例如棕櫚酸抗壞血酸酯、丁基化的羥基苯甲醚 (BHA)、丁基化的羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚等；和金屬螯合劑，例如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等?？膳c載體材料組合以制備單一劑型的消化酶的量將根據(jù)特定施用方式改變。粘膜制劑對于藥學(xué)使用通常是無菌、無微粒和穩(wěn)定的。如本發(fā)明所使用，術(shù)語“無微粒”指滿足USP規(guī)定對于小體積胃腸外溶液的要求的制劑。術(shù)語“穩(wěn)定的”指滿足關(guān)于同一性、強度、質(zhì)量和純度的所有化學(xué)和物理規(guī)定的制劑，所述規(guī)定根據(jù)由適當?shù)恼芾頇C構(gòu)闡明的良好藥品生產(chǎn)規(guī)范制定。在粘膜遞送組合物中，可使用多種遞送促進劑，其增加消化酶遞送入或透過粘膜表面。如本文所使用，“粘膜遞送促進劑”包括增加消化酶或其他生物活性化合物的(例如， 從制劑遞送介質(zhì))釋放或溶解度、擴散速率、滲透能力和時機、攝入、停留時間、穩(wěn)定性、有效半衰期、峰值或持續(xù)濃度水平、清除率及其他所需的粘膜遞送特征(例如，在遞送位點測得，或在選定的活性靶標位點例如血流或中樞神經(jīng)系統(tǒng)測得)。因此，粘膜遞送的增加可通過多種機制的任何一種發(fā)生，例如通過增加擴散、轉(zhuǎn)運、消化酶的持續(xù)性或穩(wěn)定性、增加膜流動性、調(diào)節(jié)鈣及其他離子的有效性或作用(所述離子調(diào)節(jié)胞內(nèi)或胞間滲透)、溶解粘膜成分(例如，脂質(zhì))、改變粘膜組織中非蛋白和蛋白巰基水平、增加通過粘膜表面的水流量、調(diào)節(jié)上皮交界性生理機能、減少覆蓋粘膜上皮的粘液的粘性、減少粘膜纖毛清除率及其他機制。盡管吸收促進機制可根據(jù)本發(fā)明不同的鼻內(nèi)遞送促進劑而改變，但是關(guān)于這點， 有用的試劑將基本上不會不利影響粘膜組織，且根據(jù)特定消化酶或其他活性或遞送促進劑的物理化學(xué)特性選擇。關(guān)于這點，增加粘膜組織的穿透性或滲透性的遞送促進劑通常導(dǎo)致粘膜的保護性滲透屏障層的一些變化。對于這種在本發(fā)明中有價值的遞送促進劑而言，通常要求粘膜的滲透性的任何明顯變化在適于藥物遞送所需持續(xù)時間的時間框內(nèi)是可逆的。 而且，應(yīng)該沒有真正的蓄積毒性，長期使用的粘膜的屏障性質(zhì)也沒有任何誘導(dǎo)的持續(xù)的有害變化。在一些實施方式中，用于和本文描述的消化酶協(xié)同施用或組合配方的吸收促進劑選自小的親水性分子，包括但不限于，二甲亞砜(DMSO)、二甲基甲酰胺、乙醇、丙二醇和 2-吡咯烷酮?；蛘撸L鏈親水脂分子，例如，十二烷基甲基亞砜、氮酮、十二烷基硫酸鈉、油酸和膽汁鹽可用于提高消化酶的粘膜滲透性。在其他方面，表面活性劑(例如，聚山梨酸酯)用作輔助化合物、處理劑或制劑添加劑，以提高鼻內(nèi)遞送消化酶。這些滲透促進劑通常在包含排列在鼻粘膜的上皮細胞的脂質(zhì)雙分子層的分子的極性頭基或親水性尾區(qū)相互作用(Barry, Pharmacology of the Skin,第 1 卷，第 121-137 頁，Shroot 等編著，Karger, Basel，1987 ；和 Barry，J. controlled Release 6:85-97,1987)。在這些位點的相互作用可能具有破壞脂質(zhì)分子組裝、增加雙分子層的流動性和促進消化酶轉(zhuǎn)運通過粘膜屏障的效果。這些滲透促進劑和極性頭基的相互作用也可以引起或允許相鄰雙分子層的親水性區(qū)域吸收更多水且互相分開，因此打開細胞旁側(cè)通道以轉(zhuǎn)運消化酶。除這些效果外，某些促進劑可能對鼻粘膜含水區(qū)域的體積性質(zhì)具有直接效果。如果以足夠高濃度存在于遞送環(huán)境中 (例如，通過預(yù)施用或與治療學(xué)制劑結(jié)合)，促進劑例如DMS0、聚乙二醇和乙醇可以進入粘膜水相中并改變其溶解性，因此促進消化酶與介質(zhì)分開，進入粘膜。用于本發(fā)明協(xié)同施用和處理方法和組合制劑的其他的粘膜遞送促進劑包括但不限于混合膠束；烯胺；氧化氮供體(例如，S-亞硝基-N-乙?；?DL-青霉胺、NORU N0R4, 其優(yōu)選與NO凈化劑例如羧基-PITO或雙氯芬酸鈉共同施用)；水楊酸鈉；乙酰乙酸甘油酯 (例如，甘油基-1，3- 二乙酰乙酸酯或1，2-亞異丙基丙三醇-3-乙酰乙酸酯)；及其他對粘膜遞送生理性相容的釋放-擴散劑或上皮內(nèi)或跨上皮的滲透促進劑。其他吸收促進劑選自多種促進消化酶的粘膜遞送、穩(wěn)定性、活性或跨上皮滲透性的載體、基質(zhì)和賦形劑。這些尤其包括環(huán)糊精和β-環(huán)糊精衍生物(例如，2-羥丙基-β-環(huán)糊精和七(2，6-二-0_甲基-β -環(huán)糊精)。任選與一種或多種活性成分結(jié)合，并進一步任選以油酯性基質(zhì)配制的這些化合物提高本發(fā)明粘膜制劑的生物利用率。然而，其他適用于粘膜遞送的吸收促進劑包括中鏈脂肪酸，包括甘油一酸酯和甘油二酯(例如，癸酸鈉-椰子油提取物、Capmul)和甘油三酯(例如，淀粉糊精，Estaran^99、Miglyol 810)。粘膜治療和預(yù)防組合物可以補充有任何適當?shù)拇龠M消化酶吸收、擴散或滲透通過粘膜屏障的滲透促進劑。滲透促進劑可以是任何藥學(xué)可接受的促進劑。因此，在本發(fā)明更詳細的方面，組合物包含一種或多種滲透促進劑，選自水楊酸鈉和水楊酸衍生物(例如，乙酰水楊酸鹽、水楊酸膽堿、水楊醛胺)；氨基酸及其鹽(例如單氨基羧酸，例如甘氨酸、丙氨酸、苯基丙氨酸、脯氨酸、羥脯氨酸；羥基氨基酸，例如絲氨酸；酸性氨基酸，例如天冬氨酸、 谷氨酸；和堿性氨基酸，例如賴氨酸——包括它們的堿金屬鹽或堿土金屬鹽)；和N-乙酰氨基酸(N-乙酰丙氨酸、N-乙酰苯丙氨酸、N-乙酰絲氨酸、N-乙酰甘氨酸、N-乙酰賴氨酸、 N-乙酰谷氨酸、N-乙酰脯氨酸、N-乙酰羥脯氨酸等)及其鹽(堿金屬鹽和堿土金屬鹽)。 本發(fā)明方法和組合物還提供滲透促進劑，其是通常用作乳化劑的物質(zhì)(例如油基磷酸鈉、 月桂基磷酸鈉、月桂基硫酸鈉、肉豆蔻基硫酸鈉、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯烷基酯等)、己酸、乳酸、蘋果酸和檸檬酸及其堿金屬鹽、吡咯烷酮羧酸、烷基吡咯烷酮羧酸酯、N-烷基吡咯烷酮、脯氨酸?；サ取?、其他施用途徑的組合物本發(fā)明也考慮其他施用途徑，例如透皮貼劑，包括離子電滲和電泳裝置和直腸施用。包括離子電滲和電泳裝置的透皮貼劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。例如，這種貼劑在美國專利 6，267，983,6, 261，595,6, 256，533,6, 167，301,6, 024，975,6, 010715、 5，985，317,5, 983，134,5, 948，433 和 5，860，957 中公開。例如，用于直腸施用的藥物劑型是用于全身效應(yīng)的直腸栓劑、膠囊和片劑。本文使用的直腸栓劑指插入直腸的固體，其在體溫下熔融或軟化，釋放一種或多種藥理活性或治療活性成分。用于直腸栓劑的藥學(xué)可接受物質(zhì)是提高熔點的基質(zhì)或介質(zhì)和試劑?；|(zhì)的例子包括可可脂(可可豆油)、甘油-明膠、聚乙二醇商品(聚乙二醇)和脂肪酸的甘油一酯、 甘油二酯和甘油三酯的適當混合物。可以使用多種基質(zhì)的混合。提高栓劑熔點的試劑包括鯨蠟和蠟。直腸栓劑可通過壓縮法或模塑法制備。在一種實施方式中，直腸栓劑的重量為約2到3克。使用相同的藥學(xué)可接受物質(zhì)并通過對于口服施用制劑的相同方法制備用于直腸施用的片劑和膠囊。6、持續(xù)釋放制劑本發(fā)明還提供持續(xù)釋放制劑，以將消化酶遞送至所需靶標?？梢岳斫?，在某一時間段內(nèi)如所需要地保持消化酶水平，且該水平可由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地確定。這種持續(xù)和/或定時釋放制劑可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的遞送裝置的持續(xù)釋放手段制備，如美國專利 3，845，770,3, 916，899,3, 536，809,3, 598，123,4, 008，719,4, 710，384,5, 674，533、 5，059，595,5, 591，767,5, 120，548,5, 073，543,5, 639，476,5, 354，556 和 5，733，566 所描述，這些文獻各自以引用方式合并于此。這些藥物組合物使用例如羥丙甲纖維素、其他聚合物基質(zhì)、凝膠、透性膜、滲透系統(tǒng)、多層涂層、微粒、脂質(zhì)體、微球體等可用于提供緩釋或持續(xù)釋放一種或多種消化酶。可以容易地選擇本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的適當?shù)某掷m(xù)釋放制劑，包括本文描述的那些，以和本文提供的藥物組合物一起使用。因此，本發(fā)明考慮適于持續(xù)釋放的適于口服的單一單位劑型，例如但不限于片劑、膠囊、囊形片(gelcap)、囊片、粉劑等。在一種實施方式中，所述持續(xù)制劑包含活性化合物，例如但不限于微晶纖維素、麥芽糖糊精、乙基纖維素和硬脂酸鎂。如上所述，本發(fā)明考慮所有用于包封的已知方法，只要其與所公開的消化酶的性質(zhì)相容。所述持續(xù)釋放制劑通過用不同厚度的緩慢可溶性聚合物涂層本文提供的藥物組合物的微粒或顆粒而包封，或通過微囊化包封。在一種實施方式中， 所述持續(xù)釋放制劑用不同厚度(例如約1微米到200微米)的涂層材料包封，所述涂層材料允許藥物組合物在施用至哺乳動物后約48小時到約72小時內(nèi)溶出。在另一種實施方式中，所述涂層材料是批準的食品添加劑。在另一種實施方式中，所述持續(xù)釋放制劑是基質(zhì)溶出裝置，其通過將藥物和緩慢可溶性聚合物載體壓入片劑而制備。在一種實施方式中，涂層微粒的尺寸范圍為約0. 1到約300微米，如美國專利4，710，384和5，354，556所公開，所述文獻以引用方式全部合并于此。每一微粒是微基質(zhì)形式，其中活性成分均勻分布在聚合物中。本發(fā)明提供的消化酶可配制成持續(xù)和/或定時釋放制劑。所有的持續(xù)釋放藥物產(chǎn)品具有改善由其非持續(xù)對應(yīng)物實現(xiàn)的藥物療效的共同目標。理想地，使用醫(yī)療上最佳設(shè)計的持續(xù)釋放制劑的特征在于使用最少消化酶以治愈或控制病癥。持續(xù)釋放制劑的優(yōu)點可包括1)組合物活性延長，幻劑量頻率減少，和幻病人順應(yīng)性增加。另外，持續(xù)釋放制劑可用于影響作用開始的時間或其他特征，例如組合物的血液水平，并因此可以影響副作用的發(fā)生。本發(fā)明提供的持續(xù)釋放制劑設(shè)計成首先釋放一定量的治療組合物，以迅速產(chǎn)生所需治療效果，然后逐漸并持續(xù)釋放其余量的組合物，以在延長時期內(nèi)維持這種治療效果水平。為了在身體內(nèi)保持這種恒定水平，該治療組合物必須以替換從身體中代謝并排泄的組合物的速度從劑型中釋放?；钚猿煞值某掷m(xù)釋放可通過多種誘導(dǎo)物刺激，例如pH、溫度、酶、水或其他生理條件或化合物。可適當?shù)嘏渲朴糜诳诜┯玫闹苿?，以獲得消化酶的控制釋放。在一種實施方式中，消化酶配制成獨立微粒的控制釋放粉劑，其可容易地配制成液體形式。持續(xù)釋放粉劑包
20括含有活性成分和任選的具有至少一種無毒聚合物的賦形劑的微粒。粉劑可以分散或懸浮在液體介質(zhì)中，并在一段有效時間內(nèi)保持其持續(xù)釋放特征。 這些分散體或懸浮液具有化學(xué)穩(wěn)定性和溶出速率穩(wěn)定性。粉劑可以包括含有聚合物的賦形劑，所述聚合物可以是可溶的、不可溶的、滲透性的、非滲透性的或可生物降解的。該聚合物可以是聚合物或共聚物。該聚合物可以是天然或合成聚合物。天然聚合物包括多肽(例如，玉米蛋白)、聚糖(例如，纖維素)和藻酸。典型的合成聚合物包括但不限于美國專利 5，354，556的第3欄第33-45行描述的那些，該文獻以引用方式全部合并。特別適當?shù)木酆衔锇ǖ幌抻诿绹鴮＠?，354，556的第3欄第46行到第4欄第8行描述的那些，該文獻以引用方式全部合并。本發(fā)明提供的持續(xù)釋放組合物可以配制用于腸胃外施用，例如，通過肌肉注射劑或?qū)τ谄は陆M織和多種體腔的植入物和透皮裝置。在一種實施方式中，肌肉注射劑配制成水或油懸浮液。在水懸浮液中，持續(xù)釋放效果部分歸因于消化酶在絡(luò)合作用下的溶解度降低或溶解速率降低。油懸浮液和溶液采取類似方法，其中消化酶的釋放速率由消化酶和油分離并進入環(huán)繞的水介質(zhì)確定。僅僅油溶性且具有所需分離特征的消化酶是適當?shù)?。可用于肌肉注射的油包括但不限于芝麻油、橄欖油、花生油、玉米油、杏仁油、豆油、棉籽油和蓖麻油。和其他藥物組合物共施用藥物組合物可單獨使用，和/或與其他治療或抗菌(例如，抗大腸桿菌)療法結(jié)合使用。例如，可以向患者施用其他的治療劑，例如抗炎藥或麻醉劑，以解決大腸桿菌感染的其他方面(例如，疼痛，組織損傷)或患者可能面臨的其他疾病。在其他實施方式中，可以向患者施用本文描述的藥物組合物，和一種或多種其他抗生素。所述一種或多種其他抗生素可以有效抗大腸桿菌或其他細菌，或抗這二者(例如，如果患者患有多種感染)，且可以和本發(fā)明藥物組合物是相同或不同形式(例如，一種可以是液體，一種可以是局部抗生素)。 抗生素的主要分類是(1) β -內(nèi)酰胺，包括青霉素類、頭孢菌素和單酰胺環(huán)類；(2)氨基糖苷類，例如，慶大霉素、妥布拉霉素、乙基西梭霉素和氨基羥丁基卡那霉素；C3)四環(huán)素類；(4) 磺胺類和三甲氧芐二氨嘧啶；(5)氟喹諾酮類，例如環(huán)丙沙星、氟哌酸和氟嗪酸；(6)萬古霉素；(7)大環(huán)內(nèi)酯類，其包括例如，紅霉素、阿奇霉素和克拉霉素；和(8)其他抗生素，例如， 多粘菌素、氯霉素和林可酰胺類。在一些實施方式中，其他抗生素可以是內(nèi)酰胺抗生素(例如，青霉素或青霉素衍生物、頭孢菌素、單環(huán)內(nèi)酰胺、青核素、類青核素、氧青霉烷酸、碳青霉烯或碳青霉烷、頭孢烯、碳頭孢烯、氧頭孢烯、單環(huán)內(nèi)酰胺)。在一些實施方式中，其他抗生素可以是內(nèi)酰胺酶抑制劑。在一些實施方式中，其他抗生素可以是氨基糖甙類抗生素。在一些實施方式中，其他抗生素選自青霉素或青霉素衍生物、苯唑青霉素、羥氨芐青霉素、萘夫西林、氯唑青霉素、甲氧西林、替莫西林、氨芐青霉素、羥氨芐青霉素/克拉維酸(co-amoxiclav)、阿洛西林、羧芐青霉素、羧噻吩青霉素、美洛西林、哌拉西林、頭孢氨芐、頭孢噻吩、頭孢唑啉、頭孢克洛、頭孢呋辛、頭孢孟多、頭孢替坦、頭孢西丁、頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢泊肟、頭孢他啶、 頭孢吡肟、頭孢匹羅、萬古霉素、替考拉寧、特拉萬星、博來霉素、雷莫拉寧、decaplanin、奧利萬星、達巴萬星。本文描述的抗生素組合物和其他抗生素可以單獨施用或在單一劑型中施用。如果單獨施用，它們可以以任何順序和相關(guān)頻率施用。殺菌劑和消毒劑含有本文描述的一種或多種消化酶的組合物也可用作殺菌劑和消毒劑，例如，通過根除、減弱或減少這種場所內(nèi)的大腸桿菌來為無生命對象和(非限制性的)醫(yī)院、保健中心、家和社區(qū)裝置的表面消毒。殺菌劑是應(yīng)用于非生物對象從而破壞微生物的抗微生物劑。 殺菌劑應(yīng)該通常和破壞體內(nèi)微生物的抗生素不同，也和破壞活組織上的微生物的防腐劑不同。消毒劑是將微生物數(shù)目降低到安全水平的殺菌劑。消毒劑的一種定義描述為必須能夠殺死99. 999% (稱為減少5個數(shù)量級)的特定細菌測試群體的消毒劑，且在30秒內(nèi)完成。 消毒劑和殺菌劑的主要區(qū)別是在特定使用稀釋度下，殺菌劑必須比消毒劑具有更高的病原菌殺滅能力。在如上所述的多個實施方式中，本文描述的殺菌劑或消毒劑可以包括一種或多種消化酶，且可以任選包括其他活性和非活性成分，包括穩(wěn)定劑(例如，酶穩(wěn)定劑)、本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他殺菌劑、制劑賦形劑、著色劑、香料等。本領(lǐng)域技術(shù)人員可選擇其他包括在殺菌劑中的活性或非活性成分。其他殺菌劑的例子包括活性氯源(即，次氯酸鹽類、氯胺類、二氯異氰脲酸酯、三氯異氰脲酸酯、濕氯、二氧化氯等)；活性氧源(過氧化物，例如過乙酸、過硫酸鉀、高硼酸鈉、過碳酸鈉和過氧化氫合尿素)；碘和碘遞體溶液(碘聚維酮(聚維酮-碘，BetadinehLugol溶液、碘酒、碘化非離子型表面活性劑)；濃縮的醇類(主要是乙醇、1-丙醇(也稱為正丙醇)、和2-丙醇(稱為異丙醇)及其混合物；和2-苯氧乙醇和 1-和2-苯氧丙醇)；苯酚物質(zhì)(例如苯酚(也稱為“石炭酸”)、甲酚(與液體鉀皂結(jié)合稱為“Lysole”)、鹵化(氯化、溴化)的苯酚，例如六氯酚、三氯生、三氯苯酚、三溴苯酚、五氯苯酚、Dibromol及其鹽)；陽離子表面活性劑，例如一些季銨陽離子(例如殺藻銨、十六烷基三甲基溴化銨或十六烷基三甲基氯化銨、十二烷基二甲基氯化銨、氯化十六烷吡啶、氯化芐乙氧銨)及其他；非季鹽化合物，例如雙氯苯雙胍己烷、glucoprotamine、二鹽酸奧替尼啶； 強氧化劑，例如臭氧和高錳酸鹽溶液；重金屬及其鹽，例如膠狀銀、硝酸銀、氯化汞、苯汞鹽、 硫酸銅和氧化銅-氯化物；濃縮強酸(磷酸、硝酸、硫酸、氨基硫酸、甲苯磺酸)和堿(氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣)，例如pH < 1或> 13，尤其在高溫(高于60°C )下。在一些情況下，本文所述的殺菌劑基本上由一種或多種消化酶組成。在一些情況下，殺菌劑基本上由一種或多種消化酶組成，且不含其他殺菌劑。含有本文描述的一種或多種消化酶的殺菌劑組合物可以和其他成分結(jié)合以形成多種殺菌劑產(chǎn)品，包括但不限于手用清潔劑、嗽口水、手術(shù)刷、身體噴灑、手用消毒劑凝膠和泡沫、殺菌擦和類似的個人護理產(chǎn)品。其他類型的產(chǎn)品包括殺菌泡沫、霜劑、摩絲等，以及含有有機或無機填充劑材料的組合物，例如乳劑、洗液、霜劑、糊劑等。組合物也可用作硬表面的抗菌洗滌劑，例如，醫(yī)院、飲食服務(wù)區(qū)域和肉類加工廠的水槽和工作臺面。殺菌組合物也可用作殺菌氣霧和殺菌輕霧。本發(fā)明的消化酶組合物可制成稀釋的備用組合物，或制成在使用前稀釋的濃縮物。根據(jù)產(chǎn)品性質(zhì)，使用殺菌劑的多種產(chǎn)品也可以包括香精。例如，可使用松香或檸檬香味，以用于廚房清潔擦，因為其和清潔度的結(jié)合吸引許多消費者。另外，出于類似或其他理由，凝膠或氣霧劑也可芳香化。在一種實施方式中，殺菌劑組合物可用于制備殺菌擦。殺菌擦可用于清潔多種硬的及其他表面，包括，例如，人手和皮膚、醫(yī)療器械和裝置、工作臺面、地板、墻和窗。擦可由多種織物制成?？椢锒x為包括布和紙，以及機織和非機織材料。機織或非機織織物可由適當?shù)牟牧侠缛嗽旖z、尼龍或棉及其組合制成。非機織織物的例子在美國專利3，786，615、 4，395，妨4和4，199，322中描述，所述文獻以引用方式合并于此。織物或紙可以以本領(lǐng)域已知的任何方法用殺菌溶液浸漬。所述擦可以本領(lǐng)域已知的任何方式包裝，包括單獨的氣泡包裝或包裝式或堆疊式多包裝。在另一種實施方式中，含有一種或多種消化酶的殺菌劑組合物可配制成凝膠或明膠消毒組合物。除殺菌劑組合物之外，該凝膠消毒劑可以包括增稠劑或膠凝劑，其中“增稠劑”和“膠凝劑”可互換使用。如本文所使用，術(shù)語“凝膠”或“明膠”消毒組合物指粘度為約1，000厘泊到約100，000厘泊，或2，000厘泊到50，000厘泊的殺菌劑液體物質(zhì)。在另一種實施方式中，這些范圍不是限制性的。例如，手用凝膠的粘度可以比用于工業(yè)清洗或殺菌目的的凝膠小很多。膠凝劑或增稠劑的例子包括但不限于天然膠，例如瓜爾膠和瓜爾膠衍生物、合成聚合物、粘土、油、蠟、蘆薈凝膠、丙烯酸鹽均聚物、丙烯酸酯共聚物、卡波姆、纖維素、纖維素衍生物、褐藻膠、褐藻膠衍生物、水不可溶C8-C20醇、角叉菜膠、火成二氧化硅 (fumed silica)及其混合物等。膠凝劑可以以明膠組合物的約0. 1重量％到50重量％的量存在于明膠消毒組合物中。在另一種實施方式中，膠凝劑以明膠組合物的0. 25重量％到 10重量％的量存在。膠凝劑的量可以取決于多種因素，包括膠凝劑種類和凝膠所需粘度。 明膠消毒劑可用于多種應(yīng)用，包括人皮膚消毒，例如，凝膠手用消毒劑和硬表面消毒劑。在一種具體實施方式
中，殺菌劑組合物可和天然蘆薈凝膠混合以形成殺菌蘆薈制劑。這種制劑可應(yīng)用于燒傷、皮膚感染及其他刺激現(xiàn)象。蘆薈可作為增稠劑，或者根據(jù)殺菌凝膠所需粘度，也可以包括另一種上述增稠劑或膠凝劑。在另一種實施方式中，含有一種或多種消化酶的殺菌劑組合物可以配制成殺菌泡沫或泡沫組合物。殺菌泡沫或泡沫組合物包括殺菌劑組合物和發(fā)泡劑?？筛鶕?jù)所得殺菌劑泡沫的所需應(yīng)用和特征使用本領(lǐng)域已知的任何發(fā)泡劑。如同殺菌劑組合物，本發(fā)明的殺菌泡沫可用于人(例如洗手)和工業(yè)應(yīng)用。在另一種實施方式中，含有一種或多種消化酶的殺菌劑組合物可以配制成殺菌氣霧劑或煙霧劑。霧化，也稱為熱霧化，是殺菌劑成煙霧狀散開的過程。殺菌劑的氣霧劑微粒在一段時間內(nèi)懸浮在空氣中，以消毒空氣本身和表面，包括建筑物的難達到部分，例如通風(fēng)孔。殺菌劑的霧化微粒的粒徑可以為約5 μ m到約200 μ m。在另一種實施方式中，霧化微粒的粒徑可以為約20 μ m到約150 μ m。用于評估特定組合物的殺菌能力的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。通常，殺菌劑的相對效果可通過將其殺菌能力與已知殺菌劑相比而測定。苯酚是一種已知的殺菌劑標準，相應(yīng)的等級系統(tǒng)稱為“苯酚系數(shù)”。在標準的微生物，例如大腸桿菌或金黃色葡萄球菌上比較待測試的殺菌劑和苯酚。效果比苯酚更好的殺菌劑的系數(shù)> 1。效果低于苯酚的殺菌劑的系數(shù)< 1。為計算苯酚系數(shù)，化合物在10分鐘但并非在5分鐘內(nèi)殺死測試生物的測試化合物的濃度除以在相同條件下殺死生物的苯酚濃度?？梢栽诖嬖跇藴柿康奶砑拥挠袡C物的情況下或不存在有機物的情況下測定苯酚系數(shù)。一種具體的苯酚系數(shù)試驗使用 Rideal-Walker法。美國農(nóng)業(yè)部也具有給出美國農(nóng)業(yè)部系數(shù)的方法。其他方法對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是已知的。本文描述的殺菌劑對于金黃色葡萄球菌的苯酚系數(shù)可以> 1，例如，大于1.05、1. 1,1. 2,1. 3,1. 4,1. 5,1. 75,2,2. 25,2. 5,2. 75,3,3. 5、4、4· 5、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18
或者更高。在一些情況下，苯酚系數(shù)為約2到約20，例如，約4到約10、約2到約6、約6到約12或約10到約15。本文描述的殺菌劑對于大腸桿菌的苯酚系數(shù)可以> 1，例如，大于1.05、1. 1、1.2、 1. 3,1. 4,1. 5,1. 75,2,2. 25,2. 5,2. 75,3,3. 5、4、4· 5、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18。在一些情況下，苯酚系數(shù)為約2到約20，例如，約4到約10、約2到約6、約6到約12或約10到約 15。本文描述的殺菌劑或消毒劑可以是大腸桿菌的殺菌劑和/或抑菌劑。在一些實施方式中，本文描述的殺菌劑或消毒劑可以是對于STEC、ETEC或EPEC或任2種或全部3種的殺菌劑和/或抑菌劑。洗滌劑本文描述的含有一種或多種消化酶的殺菌劑組合物也可配制成洗滌劑。洗滌劑是用于幫助清潔的材料。洗滌劑可以在適于保持其殺菌能力的制劑中包含上述的一種或多種消化酶，且可以包含任選的活性或非活性成分，例如酶穩(wěn)定劑、其他殺菌劑、漂白劑、肥皂、 表面活性劑、著色劑和香料、研磨劑、PH調(diào)節(jié)劑、酸、堿或腐蝕性化合物、水軟化劑、氧化劑、 懸浮劑、織物軟化劑、發(fā)泡劑或消泡劑、粘度調(diào)節(jié)劑、腐蝕抑制劑和熒光增白劑。本文描述的洗滌劑可以是大腸桿菌的抑菌劑和/或殺菌劑，在一些實施方式中，可以是對于STEC、ETEC 或EPEC或任2種或全部3種的抑菌劑和/或殺菌劑。含有一種或多種消化酶的洗滌劑組合物，特別是用于和水一起使用的那些，可以包括其他組分，例如用以“切開”(溶解)油脂并潤濕表面的表面活性劑，用于沖洗的研磨劑，用于調(diào)節(jié)PH或影響性能或穩(wěn)定性的物質(zhì)，用于除垢的酸或者用于分解有機化合物的腐蝕劑，用于抵消“硬”離子的作用的水軟化劑，用于漂白、殺菌并分解有機化合物的氧化劑 (氧化劑)、保持污垢懸浮的非表面活性劑材料，用于消化染色劑中的蛋白、脂肪或碳水化合物或用于改變織物感覺的酶，改變清潔表面活性劑的泡沫性或用于穩(wěn)定或抵消泡沫的組分，用于增加或減少溶液粘性的組分，或用于保持溶液、用作水溶液或者凝膠的洗滌劑中的其他成分的組分，影響待清潔物品或使用前或使用期間洗滌劑本身的美觀性的組分，例如熒光增白劑、織物軟化劑、著色劑和香料，用于抵消使用洗滌劑的設(shè)備損害的腐蝕抑制劑， 當洗滌劑用裸手使用于無生命對象或用于清潔皮膚時減少皮膚傷害或?qū)ζつw有益的成分， 以及用于阻止其他組分變質(zhì)的防腐劑。所述洗滌劑組合物可以為任何方便的干燥形式，例如，棒、片、粉末、顆?；驖{糊。 它也可以是液體洗滌劑?？梢允褂贸Ｒ?guī)穩(wěn)定劑使本發(fā)明洗滌劑組合物的消化酶穩(wěn)定，例如多元醇，例如丙二醇或甘油、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物，例如芳香族硼酸酯或苯基硼酸衍生物，例如4-甲酸基苯基硼酸，且該組合物可以如例如WO 92/19709和WO 92/19708所述的配制。防腐劑含有一種或多種消化酶的組合物的多種實施方式也可用作防腐劑，例如，以減少、 根除或減弱皮膚或其他活組織上的大腸桿菌。防腐劑是抗微生物物質(zhì)，其施用于活組織/ 皮膚從而減少感染、膿毒癥或腐敗的可能性。通常它們與破壞體內(nèi)細菌的抗生素不同，也與破壞非生物物體上發(fā)現(xiàn)的微生物的殺菌劑不同。一些防腐劑是真正的殺菌劑，能夠破壞微生物(殺菌)，而其他防腐劑是抑菌劑，僅預(yù)防或抑制其生長。本文描述的防腐劑可特別用于醫(yī)院或者保健機構(gòu)，例如，用于洗手、洗臉或洗身體的制劑中；作為外科治療前后使用的防腐劑；以及作為用于清潔和治療傷口，例如創(chuàng)傷或手術(shù)傷口的防腐劑。在社區(qū)機構(gòu)中，防腐劑用于關(guān)注社區(qū)獲得性感染的任何機構(gòu)中，例如， 托兒機構(gòu)、大的研究所、學(xué)校等。防腐劑也可用于家庭機構(gòu)，用于洗手、洗臉或洗身體的制劑中，或用于治療傷口。在上述多種實施方式中，防腐劑可以包括一種或多種消化酶，并可以任選包括一種或多種活性或非活性成分，例如本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他防腐劑、穩(wěn)定劑(例如，酶穩(wěn)定劑)、著色劑、香料及其他賦形劑。包含一種或多種消化酶的防腐劑的例子包括醇類(例如，乙醇、1-和2-丙醇或其混合物)、季銨化合物(殺藻銨、十六烷基三甲基溴化銨、氯化十六烷吡啶和氯化芐乙氧銨)、硼酸、雙氯苯雙胍己烷葡萄糖酸鹽、過氧化物(例如，過氧化氫、過氧化苯甲酰)；碘和碘遞體溶液(例如，聚維酮-碘)、二鹽酸奧替尼啶、苯酚(石炭酸)和酚衍生物化合物、氯化鈉、次氯酸鈉和次氯酸鈣。本文描述的防腐劑可以對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌，在一些實施方式中，可以對于STEC、ETEC或EPEC或任2種或全部3種殺菌和/或抑菌。在一種實施方式中，防腐劑組合物含有一種或多種消化酶以及任選的一種或多種抗炎劑、止痛劑或者麻醉劑。抗炎劑可以包括留體或非留體抗炎化合物。在一種實施方式中，防腐劑組合物包括一種或多種留體化合物。在一種實施方式中，防腐劑組合物可以包含非留體抗炎藥抗炎劑。適當?shù)姆晴摅w抗炎藥的非限定性例子包括阿斯匹林(Anacin、Ascriptin、 Bayer> Buffering Ecotrin> Excedrin)、月旦 M 禾口水楊酸 美(GMT、Tricosal、Trilisate) > 水楊酸膽堿(Artliropan)、塞來昔布(Celebrex)、雙氯芬酸鉀(Cataflam)、雙氯滅痛 (Voltaren、Voltaren XR)、雙氯滅痛和迷索前列醇(Arthrotec)、雙氟尼酸(Dolobid)、依托度酸(Lodine、Lodine XL)、非諾洛芬鈣(Nalfon)、氟比洛芬(Ansaid)、布洛芬(Advil、 Motrin、Motrin IB、Nuprin)、吲哚美辛(Indocin、Indocin SR)、酮洛芬(Actron、Orudis、 Orudis KT、Oruvai 1)、7jC 楊酸鎂(Arthritab、Bayer Select、Doan ' s Pills、Magan、 Mobidin、Mobogesic)、甲氯滅酸鈉(Meclomen)、甲滅酸(Ponstel)、美洛昔康(Mobic)、萘丁美酮(Relafen)、萘普生(Naprosyn、Naprelan)、萘普生鈉(Aleve、Anaprox)、奧沙普秦 (Daypro)、吡羅昔康(Feldene)、羅非昔布(Vioxx)、雙水楊酯(Amigesic、Anaflex 750、 Disalcid,Marthritic,Mono-Gesic,Salflex,Salsitab)、水楊酸鈉、舒林酸(Clinoril)、托美丁鈉(Tolectin)、伐地考昔(Bextra)，或其組合。止痛劑的非限定性例子包括乙酰水楊酸、可待因、布洛芬、撲熱息痛或茶樹油。麻醉劑的非限定性例子包括利多卡因、丙胺卡因或苯佐卡因。測試候選防腐劑組合物的典型方法在下文提供。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，測試防腐劑組合物的其他方法是本領(lǐng)域已知的，也適于測試候選防腐劑組合物。測定候選防腐劑組合物殺死或抑制微生物細胞(例如大腸桿菌)的能力的體外方法是本領(lǐng)域已知的。通常，這些方法包括將感興趣的細胞的培養(yǎng)基與多種濃度的候選防腐劑組合物接觸，并監(jiān)測細胞培養(yǎng)基相對于未經(jīng)處理的對照培養(yǎng)基的生長。如果需要，這種測試也可以包括含有與已知抗微生物劑接觸的細胞的第二對照培養(yǎng)基。
例如，候選防腐劑組合物抑制微生物細胞生長的能力可通過測定防腐劑組合物的最低抑菌濃度(MIC)容易地確定。MIC定義為在預(yù)定范圍內(nèi)抑制生物生長的最低濃度。例如，MIC100值定義為完全抑制生物生長的最低濃度，而MIC9tl值定義為抑制90%生長的最低濃度，MIC5tl值定義為抑制50%生長的最低濃度。MIC值有時以范圍表示，例如，防腐劑組合物的MIC·可表示為沒有觀察到生長的濃度，或表示為沒有觀察到生長的濃度和緊隨的稀釋濃度之間的范圍。候選防腐劑組合物的抗細菌MIC可使用液體培養(yǎng)基大量或微量稀釋試驗測定 (參見 Amsterdam, D. (1996) “ Susceptibility testing of antimicrobials in liquid media,“第 52-111 頁.In Loman, V.,編著 Antibiotics in Laboratory Medicine,第 4 版.Williams and ffilkins,Baltimore,MD) 0標準化的抗細菌易感性試驗由臨床實驗室標準的國家委員會(NCCLS)的NCCLS，2000 ；文件M7-A58提供。在典型的液體培養(yǎng)基微量稀釋法中，在無菌、覆蓋的96孔微量滴定板的培養(yǎng)基中稀釋候選防腐劑組合物。在無菌培養(yǎng)基中稀釋培養(yǎng)過夜的單一菌落，以至于接種后，微量滴定板中的各孔包含適當數(shù)目的菌落形成單位(CFU)AnI (通常約為^dO5CFUAil)。也包含只是作為各板的陰性對照的培養(yǎng)基(不含細菌)，且通常包含已知抗生素作為陽性對照。隨后接種的微量滴定板在適當溫度下孵化(例如，35°C-37°C孵化16-48小時)。然后通過外觀檢驗和/或在595nm或600nm使用微板讀數(shù)計測定吸光率或光密度(OD)測定各孔的混濁度，并將其作為細菌生長程度的指示?？刮⑸镄Ч部梢员硎緸樵陬A(yù)定時間內(nèi)通過單一濃度的候選防腐劑組合物處理后給定微生物生長的抑制百分比(％)。例如，在進行更多的深度測試例如MIC測定或者體內(nèi)試驗之前，該方法提供評估防腐劑組合物抑制微生物生長的能力的快速方法。任何殺菌劑、洗滌劑、消毒劑和防腐劑組合物殺死或者抑制大腸桿菌生長的能力可使用本領(lǐng)域已知方法測試，包括上面描述的各種方法。用于測試組合物抗特定細菌的方法和方案例如可在 Official Methods of Analysis of the A0AC，第 15 版，Arlington Virginia 22201, USA(Association of Official Analytical Chemists(AOAC), Inc.1990)，Designation :E 1054-91 " Practices for Evaluation Inactivators of Antimicrobial Agents Used in Disinfectant, Sanitizer, Antiseptic, or Preserved Products " (American Society for Testing and Materials (ASTM),1991)中找 至lj。如本領(lǐng)域已知的，可使用 Draft European Standard, prEN 12054， “ Chemical Disinfectants and Antiseptics-Products for Hygienic and Surgical Handrub and Handwash-Bactericidal Activity-Test Method and Requirements (1995)“描述的方法的改進進行體外時間-殺死評估。可使用的其他方法包括對數(shù)減少試驗、增殖試驗、AOAC用途稀釋試驗或抑制試驗區(qū)域。其他方法描述在以下實施例中。試劑盒本發(fā)明也提供試劑盒。通常，試劑盒包含本文描述的一種或多種組合物。在某些實施方式中，試劑盒可包含一種或多種遞送或施用系統(tǒng)，例如，用于遞送或施用上述組合物， 和/或試劑盒的用法說明(例如，用于治療患者的說明書；用于消毒表面的說明書)。在另一種實施方式中，試劑盒可包含本文描述的組合物和標簽，例如，指示患有大腸桿菌感染的患者需要施用的量的標簽，或如何使用作為殺菌劑、消毒劑、洗滌劑或者防腐劑的組合物的標簽。使用方法上述藥物組合物(例如抗生素組合物)可用于治療或預(yù)防動物(例如哺乳動物和禽)中的大腸桿菌感染。特別是，藥物組合物可用于改善這種感染的一種或多種癥狀和副作用和/或減少或根除引起感染的大腸桿菌。藥物組合物可以是上述任何適當?shù)膭┬?。在某些實施方式中，本文所述抗生素組合物用于治療感染的傷口或損傷，例如，由外傷或者外科手術(shù)引起的傷口。這種使用可以減少具有感染傷口的患者的疤痕并促進傷口愈合。配制成藥學(xué)用途的組合物也可以預(yù)防性使用，例如，用作防腐劑。這種組合物在手術(shù)切口及其他傷口的預(yù)防性治療中有著特別的用途，用于預(yù)防大腸桿菌感染。本文提供的消化酶可用于治療與大腸桿菌細菌感染或涉及大腸桿菌細菌的感染有關(guān)的疾病和紊亂。某些實施方式包括與醫(yī)療裝置或者植入物有關(guān)的感染，例如導(dǎo)管、移植物、修復(fù)心臟瓣膜、人造關(guān)節(jié)等。在一些實施方式中，含有一種或多種消化酶的組合物可以在制備裝置前或制備裝置后但在插入裝置前涂覆在醫(yī)療裝置上。外科傷口，特別是與外來物質(zhì)有關(guān)的傷口，例如縫合，也可用本發(fā)明提供的組合物治療。所有醫(yī)院感染的多達71%發(fā)生在手術(shù)患者中，其中40%感染在手術(shù)位置。盡管努力防止感染，據(jù)估計，在美國每年有500，000到920，000的手術(shù)傷口感染使大約2300萬進行的手術(shù)過程復(fù)雜化。單獨的消化酶或與抗生素、麻醉藥或抗炎藥結(jié)合的消化酶可作為膏劑、霜劑或液體施用于傷口位置，或作為液體在傷口閉合之前和期間施用于傷口。閉合后，含有一種或多種消化酶的組合物可以在換敷料時施用。對于感染的傷口，可以局部和/或全身施用所述組合物。在骨髓炎急性發(fā)作初期，骨的維管聯(lián)結(jié)被延伸入周圍組織的感染所危害。壞死和局部缺血的組織內(nèi)，甚至在強烈的宿主反應(yīng)、外科手術(shù)和/或抗生素療法后，細菌難以根除。主要導(dǎo)致感染的生物是SA和大腸桿菌。消化酶可單獨或和其他抗生素結(jié)合全身施用。治療可持續(xù)2-6周?？梢赃B續(xù)滴注或日間多次施用抗生素。含有一種或多種消化酶的組合物可用作抗生素-浸漬粘固劑或用作抗生素涂層珠，用于關(guān)節(jié)替換程序。本發(fā)明還提供免疫受損宿主的膿毒癥的治療和預(yù)防。由于和器官或骨髓移植有關(guān)的化療誘導(dǎo)的粒細胞減少和免疫抑制引起的免疫受損患者的感染的治療是非常有挑戰(zhàn)性的。中性粒細胞減少的患者對細菌感染特別敏感，如果懷疑感染的話，因此抗生素療法應(yīng)該迅速開始以覆蓋可能的病原體?？赡芤鹆＜毎麥p少患者感染的生物是SA和大腸桿菌。單獨的消化酶組合物或與抗生素結(jié)合的消化酶組合物優(yōu)選經(jīng)口或全身持續(xù)施用 2-6周。消化酶可以持續(xù)滴注或日間多次施用。本文描述的殺菌劑、消毒劑和洗滌劑組合物可以適當?shù)牧亢头绞接糜诜巧锉砻?，以減少或根除這種表面上的大腸桿菌，并因此減少或預(yù)防大腸桿菌傳播和/或感染性。 治療濃度、時機和頻率是由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定的參數(shù)。任何表面可以用所述組合物消毒，包括用于醫(yī)院或健康護理機構(gòu)的各種醫(yī)療裝置。如本文所使用，“醫(yī)療裝置”指用于患者的任何裝置，例如植入物或假體。這種裝置包括但不限于合成的脈管移植物、血液監(jiān)控裝置、人造心臟瓣膜、解剖刀、小刀、剪刀、抹刀、擴展器、夾、鑷子、金屬鏡、牽引器、縫線、手術(shù)網(wǎng)、鑿子、鉆頭、水平線、粗銼、鋸子、夾板、卡鉗、夾具、鉗子、鉤子、柳葉刀、針、套管、刮匙、壓低器、擴張器、起子、咬合架、抽出器、探針、U形釘、 閥、導(dǎo)管、支架、造管、碗狀物、托盤、海綿、圈套器、匙、注射器、起搏器、螺釘、盤子和釘?？梢韵緫岩删哂写竽c桿菌的其他社區(qū)和醫(yī)院或健康護理表面，包括大或小表面 (地板、桌子、交換臺、床、通風(fēng)系統(tǒng)、浴盆、門把手、柜臺、飲食服務(wù)表面等)。該組合物也可用于洗手或洗身體，例如，在進入社區(qū)機構(gòu)、醫(yī)院場所或浴室的位點。本文提供的組合物可以以常用殺菌劑的使用方式或在不需要微生物的任何位置使用。例如，它們可在醫(yī)療器材涂層、織物涂層中用作表面殺菌劑，以抑制細菌生長或擊退蚊子，例如在飛機上或在社區(qū)或醫(yī)院機構(gòu)，在水凈化系統(tǒng)中用作空氣凈化過濾器，作為洗發(fā)劑和肥皂組分，作為食品防腐齊 、化妝品防腐齊 、作為介質(zhì)防腐劑，用于除草劑或殺蟲劑中， 例如用于硅酮密封層中，作為建筑材料組分，和用于動物產(chǎn)品處理，例如固化動物皮革或用于屠宰場。為這些目的，通常所述單獨使用或和其他殺菌劑或洗滌劑一起使用的消化酶包括在所述組合物中并用適當?shù)姆笏幤魇┯?。它們也可以在制備期間加入或浸入材料中，例如空氣過濾器中，或者應(yīng)用于材料或目標。例如，在一些實施方式中，本文描述的組合物可例如在制備材料期間或隨后與材料混合。另外，組合物可在制備材料期間或隨后應(yīng)用于材料表面。如本文所使用，術(shù)語“適當?shù)牟牧稀敝赶缚梢詰?yīng)用或結(jié)合在其上或其中的任何材料，因此在該材料中/上結(jié)合抗微生物活性。例如，可用紗網(wǎng)內(nèi)或紗網(wǎng)上含有一種或多種消化酶的組合物制備繃帶上的紗網(wǎng)墊，和/或含有一種或多種消化酶的膏劑可用于紗網(wǎng)，因此在紗布上結(jié)合抗微生物活性。 可使用消化酶的適當材料的例子包括但不限于食物、液體、醫(yī)療裝置(例如手術(shù)器械)、 珠、薄膜、單絲、非機織織物、海綿、布、針織物、短纖維、管、中空纖維、人造器官、導(dǎo)管、縫線、 膜、繃帶和紗網(wǎng)。消化酶可用于或混合入適于醫(yī)療、健康、食品安全或環(huán)境清潔活動的許多其他類型材料中。獸醫(yī)應(yīng)用藥物或殺菌劑/消毒劑、洗滌劑或防腐劑形式的本文描述的組合物也可用于各種獸醫(yī)應(yīng)用。例如，許多哺乳動物，包括狗、貓和母牛，可以感染有大腸桿菌或作為細菌攜帶者。因此，本發(fā)明組合物可用于治療感染有或懷疑攜帶大腸桿菌的動物，以治療感染或預(yù)防傳播給其他動物，包括人。殺菌劑和洗滌劑組合物可用于處理與動物接觸的動物居住小區(qū)和設(shè)備，而防腐劑和抗生素制劑可用于處理動物，以預(yù)防或治療感染。例如，本文提供的消化酶可用于預(yù)防和治療乳腺炎，特別是乳牛乳腺炎，盡管使用本文提供的消化酶可治療任何乳腺炎。乳牛乳腺炎是乳房內(nèi)細菌感染、機械性創(chuàng)傷或化學(xué)性創(chuàng)傷導(dǎo)致的乳腺炎癥。據(jù)認為，傳染性乳腺炎主要由金黃色葡萄球菌和無乳鏈球菌引起。環(huán)境乳腺炎可由多種不同細菌引起，包括但不限于肺炎克雷伯菌(!(.pneumoniae)、 大腸桿菌(E. coli)、產(chǎn)酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)、產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)、乳房鏈球菌(Streptococcal uberis)、牛鏈球菌(Streptococcal bovis)禾口停乳鏈球菌(Streptococcal dysgalactia)。在一些實施方式中，預(yù)防牛乳腺炎可以包括每日用含有一種或多種消化酶的溶液浸漬奶頭。在一些實施方式中，含有一種或多種消化酶的溶液還可以包括一種或多種其他抗生素。當感染確實發(fā)生時，可以進行乳房內(nèi)滴注一種或多種消化酶。如上，其他抗生素也可以和所述消化酶聯(lián)合施用。通常，消化酶經(jīng)由乳房內(nèi)注射施用；然而，有效劑量可通過腸道外、透皮、通過植入以及浸漬施用。在一些實施方式中，牛乳腺炎可以通過將有效量的一種或多種消化酶施用于母牛而治療。施用可以是預(yù)防性施用，即牧群中的所有牛都用消化酶組合物治療，或當單個母牛發(fā)生感染時進行施用。金黃色葡萄球菌(本文也稱為SA)和大腸桿菌的引入可以發(fā)生在制備牛肉、家禽、 魚和豬肉產(chǎn)品期間。因此，在一些實施方式中，可通過將一種或多種消化酶施用于動物(例如，母牛、雞、火雞、魚或豬)以減少動物腸內(nèi)大腸桿菌或SA菌的存在從而減少感染。可通過任何可用的方法包括注射和通過將一種或多種消化酶引入飼料來進行施用。在一些實施方式中，將一種或多種消化酶施用于動物可用于預(yù)防或減少SA菌或大腸桿菌從動物傳播到其他動物或人。消化酶施用可通過本領(lǐng)域已知的任何可用的方法完成。食品應(yīng)用本發(fā)明還提供預(yù)防牛肉、家禽、魚和豬肉的SA或大腸桿菌感染的方法。牛肉處理過程是污染的共同點在屠宰過程期間，腸或皮上的排泄物材料的內(nèi)容物可以與肉混合，因此使得細菌在溫暖的濕度條件下繁殖。如果感染部分隨后被研磨，細菌離開切口表面到研磨塊內(nèi)。另外，在制備牛肉末中，來自多頭牛的肉通常一起研磨，使得單一動物的污染感染全部批次的牛肉末。因此，在一些實施方式中，可通過將一種或多種消化酶施用于母牛以減少母牛腸中細菌的存在從而減少感染。可通過任何可用的方法包括注射和通過將一種或多種消化酶弓I入飼料來進行施用。在另一種實施方式中，減少屠宰和研磨期間肉的污染可通過利用含有本文提供的一種或多種消化酶的噴霧來提供。例如，這種噴霧可用于殺菌屠宰和研磨裝置，或用于殺菌磨碎肉本身。上面描述的方法還可以用于屠宰和制備家禽、魚和豬肉產(chǎn)品期間(例如，通過在屠宰前將一種或多種消化酶施用于家禽、魚和/或豬)。大腸桿菌和SA菌也可以通過未洗的水果和蔬菜傳播。因此，本發(fā)明也提供使用含有本文提供的一種或多種消化酶的溶液、洗滌劑、氣霧劑、煙霧、凝膠或粉末洗滌新鮮水果和蔬菜的方法。產(chǎn)品洗滌劑是用于沖洗產(chǎn)品表面的溶液，通常與產(chǎn)品接觸約30秒到約5分鐘。產(chǎn)品浸泡劑是產(chǎn)品在其中沉浸約30秒到約30分鐘的溶液。然而，除非有區(qū)別，這些術(shù)語和溶液可互換使用。應(yīng)理解，產(chǎn)品被洗滌或浸泡的溫度將影響減少或滅活其上的細菌所需的持續(xù)時間，較暖的溫度導(dǎo)致較短的處理所需時間。本文描述的洗滌或浸泡溶液可用于減少水果、蔬菜、生切肉產(chǎn)品、魚、貝、消費者水平(家庭)、商業(yè)食品制備環(huán)境、榨汁前的水果和/或蔬菜、批發(fā)或零售操作、和/或收獲、屠宰加工廠或屠宰場、漁船等水平上的細菌數(shù)目，特別是細菌性病原體的數(shù)目。本發(fā)明方法特別用于滅活新鮮水果和蔬菜表面上的大腸桿菌。評估活性的方法可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法評估本文描述的組合物的各種活性。例如，可使用標準酶活性測定評估酶活性。也可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的上述方法評估所述組合物的最低抑菌濃度(MIC)。其他試驗，包括苯酚系數(shù)，也是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。也參見以下實施例。實施例
示例的液體組合物可以用各種稀釋劑(水、鹽水、磷酸鹽緩沖溶液、PH穩(wěn)定溶液)和任選的其他活性或非活性添加劑(酶穩(wěn)定系統(tǒng)、緩沖劑、著色劑、消毒劑、洗滌劑、殺菌劑、防腐劑)稀釋含有約200USP單位/mg的蛋白酶、約40USP單位/mg的脂肪酶和約250USP單位/mg的淀粉酶的干燥胰酶組合物，以形成用于本文描述用途的示例液體組合物。在一些實施方式中，干燥酶組合物可以以干燥酶組合物的mg與總稀釋劑的ml的比率為Img酶組合物Iml總稀釋劑到Img酶組合物10，OOOml總稀釋劑的范圍稀釋，或以該范圍內(nèi)的任何值稀釋，例如 1 2、1 3、1 4、1 5、1 6、1 7、1 8、1 9、1 10、1 20、1 50、1 100、 1 200、1 500、1 1000、1 5000 或 1 10,000。示例的固體組合物含有約200USP單位/mg的蛋白酶、約40USP單位/mg的脂肪酶和約250USP單位/mg的淀粉酶的干燥胰酶組合物可與多種活性或非活性干燥成分和添加劑(例如，干燥洗滌劑、殺菌劑、防腐劑和消毒劑，例如乙氧基化硫酸烷基酯、SDS、月桂基硫酸鈉、十二烷基苯、4-十二烷基苯磺酸鈉、酶穩(wěn)定系統(tǒng)、賦形劑、著色劑)混合，以形成示例固體組合物。在一些實施方式中，干燥酶組合物可以以Img酶組合物Img總添加劑到Img酶組合物10，OOOmg總添加劑的比率范圍與添加劑混合，或以該范圍內(nèi)的任何值混合，例如 1 2、1 3、1 4、1 5、1 6、1 7、1 8、1 9、1 10、1 20、1 50、1 100、 1 200、1 500、1 1000、1 5000 或 1 10,000。示例的局部制劑含有約200USP單位/mg的蛋白酶、約40USP單位/mg的脂肪酶和約250USP單位/mg的淀粉酶的干燥胰酶組合物可與多種適合于局部藥物制劑的載體以約Img酶組合物Img載體到Img酶組合物約200mg載體的比率混合，或以該范圍內(nèi)的任何比率(例如，1 2、1 4、1 5、1 10、1 20、1 30、1 40、1 50、1 75、1 100,1 150) 混合。例如，在一種實施方式中，使用1 25的比率，所述載體是礦脂。細菌極限測試-評估殺菌性和抑菌性本發(fā)明人在對含有約200USP單位/mg的蛋白酶活性、約40USP單位/mg的脂肪酶活性和250USP單位/mg的淀粉酶活性的干燥豬胰酶組合物進行細菌極限測試過程中意外發(fā)現(xiàn)，在各種稀釋的該材料的存在下，大腸桿菌不生長。從"加料"有大腸桿菌的陽性對照中回收的大腸桿菌CFU也相應(yīng)地很低到不存在。未包封和脂質(zhì)包封(占組合物重量的20% 的豆油)形式的干燥組合物的稀釋細菌極限測試證明來自添加已知數(shù)目的大腸桿菌CFU的陽性對照的細菌極低到?jīng)]有回收。這種回收方法期間沒有回收表明該組合物的抑菌和/或殺菌性。材料和方法樣品材料未包封的從豬(野豬)中分離的豬胰酶濃縮物(UPEC)由商業(yè)供應(yīng)商 (Scientific Protein Labs)生產(chǎn)，含有約200U/mg的蛋白酶活性、40U脂肪酶活性/mg 和250U的淀粉酶活性/mg。使用改進的流化床法和完全氫化的高純化的有機油(完全氫化的豆油)，用有機油以最終微粒的約20重量％涂覆酶微粒，獲得該材料的脂質(zhì)包封形式 (ePEC)。方法ePEC和uPEC均進行標準微生物分析，用于檢測微生物。使用按照USP法的微生物極限測試，兩種組合物均沒有顯示任何明顯污染。另外，兩種樣品對于沙門氏菌屬的種和大腸桿菌是陰性/10g。簡言之，用于檢驗試驗組合物的微生物適合性的程序(即，估計存活微生物和免除特異生物的總數(shù))在USP，第61章，“Microbial Limit Tests.“中概述。USP61概述了預(yù)備性測試，在其期間測定測試參數(shù)，其中測試組合物本身不再抑制存活生物的繁殖。USP1227("確認")也提供了確認回收方法的指導(dǎo)。進行用于評估需總氧微生物計數(shù)、大腸桿菌和沙門氏菌屬的種的方法。總需氧微生物計數(shù)測試稀釋物的制備以1 10、1 50,1 100和1 200在
含有4%聚山梨酸酯20和0. 5%卵磷脂的胰蛋白酶的大豆液體培養(yǎng)基中制備ePEC和uPEC 的成批稀釋物。然后將成批試驗樣品稀釋物分成單獨的IOml等分部分，然后用適當微生物 (金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌(P. aeruginosa)、大腸桿菌、腸道沙門氏菌)的少量菌落形成單位(CFU < 100/ml)接種。用適當?shù)墓腆w培養(yǎng)基(瓊脂)一式兩份涂片1毫米接種等分部分。以和測試樣品類似的方式制備、接種和涂片陽性對照。用無菌試劑制備、接種陰性對照，以和測試樣品類似的方式涂片。在30°C到35°C孵化板二天。在周期結(jié)束時計算回收率。 接種生物的回收率必須是陽性對照的至少70%，以顯示測試組合物不抑制生長。氯化三苯基四氮唑鐺用于計數(shù)板。對于沙門氏菌屬的種的測試用<=100CFU的腸道沙門氏菌接種用含有4%聚山梨酸酯20和0. 5%卵磷脂的乳糖液體培養(yǎng)基制備的稀釋物。接種的稀釋物在30°C到35°C 孵化M小時，然后將Iml轉(zhuǎn)移到亞硒酸鹽胱氨酸和連四硫酸鹽液體培養(yǎng)基(Tetrahionate broth)中。所選液體培養(yǎng)基在30°C到35°C孵化18小時，然后劃到亮綠、亞硫酸鉍、木糖、賴氨酸和去氧膽酸鹽瓊脂中。所選瓊脂板在30°C到35°C孵化M小時。觀察板的沙門氏菌屬的種的特征菌落。一旦觀察到，使用API 20e生化鑒定試驗確認典型菌落是沙門氏菌屬的種。對于大腸桿菌的測試用<=100CFU的大腸桿菌接種用含有4%聚山梨酸酯20 和0. 5%卵磷脂的乳糖液體培養(yǎng)基制備的稀釋物。接種的稀釋物在30°C到35°C孵化M小時，然后劃到MacKonkey瓊脂中。觀察板的大腸桿菌特征菌落。一旦觀察到，使用API 20e 生化鑒定試驗確認典型菌落是大腸桿菌。結(jié)果總需氧計數(shù)使用無涂層的PEC(uPEC)的試驗結(jié)果顯示于下表1。如所顯示，對于 1 50,1 100和1 200的稀釋度，金黃色葡萄球菌的回收百分率是0%，證實uPEC對金黃色葡萄球菌的殺菌和/或抑細菌作用。表1
3權(quán)利要求
1.用于治療或預(yù)防禽或哺乳動物中大腸桿菌感染的方法，包括將治療有效量的含有一種或多種消化酶的藥物組合物施用于禽或哺乳動物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述一種或多種消化酶包含一種或多種選自下組的酶蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶、蔗糖酶、麥芽糖酶、木瓜蛋白酶和脂肪酶。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述一種或多種消化酶包含一種或多種胰酶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述一種或多種消化酶包含豬酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中所述蛋白酶包含胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述一種或多種消化酶獨立來源于動物來源、微生物來源、植物來源、真菌來源，或者是合成制備的。
7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述哺乳動物是豬、馬、母牛、狗、貓、猴子、大鼠、小鼠、 綿羊、山羊或人，或者所述禽是雞、鴨、火雞或鵝。
8.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中所述動物來源是豬胰腺。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述藥物組合物包含至少一種淀粉酶、含有胰凝乳蛋白酶和胰蛋白酶的混合物以及至少一種脂肪酶。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述藥物組合物包含至少一種蛋白酶和至少一種脂肪酶，且其中總蛋白酶與總脂肪酶的比率(以USP單位計)為約1 1到約20 1。
11.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中蛋白酶與脂肪酶的所述比率為約4 1到約10 1。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述藥物組合物是選自下組的劑型丸劑、片劑、膠囊、囊片、散劑、霜劑、洗液、氣霧劑、乳劑、粉劑、液體、凝膠及其任何組合。
13.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述藥物組合物配制成用于口服施用。
14.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述藥物組合物配制成用于局部施用。
15.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述藥物組合物對于STEC有效。
16.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述藥物組合物對于ETEC或EPEC有效。
17.用于治療顯示大腸桿菌感染的一種或多種癥狀的哺乳動物或禽的方法，包括將治療有效量的含有一種或多種消化酶的組合物施用于哺乳動物或禽。
18.根據(jù)權(quán)利要求1或17的方法，還包括將β-內(nèi)酰胺抗生素施用于哺乳動物或禽。
19.用于治療個體腹瀉的方法，包括將含有一種或多種消化酶的藥物組合物施用于所述個體。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其中所述個體經(jīng)診斷患有大腸桿菌感染。
21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其中所述大腸桿菌是STEC。
22.用于為表面消毒或殺菌以減少其上大腸桿菌數(shù)量或根除其上大腸桿菌的方法，包括將含有一種或多種消化酶的組合物應(yīng)用于所述表面。
23.根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中所述表面是非生物或無生命表面。
24.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中所述表面位于醫(yī)療器材上。
25.根據(jù)權(quán)利要求23的方法，其中所述表面是食物。
26.用于減少哺乳動物或禽的皮膚區(qū)域、組織或傷口上存在的大腸桿菌的數(shù)量的方法， 包括將含有一種或多種消化酶的組合物施用于皮膚區(qū)域、組織或傷口。
27.含有一種或多種消化酶的殺菌劑，其中所述殺菌劑對于金黃色葡萄球菌或大腸桿菌的苯酚系數(shù)為> 1到約20。
28.含有一種或多種消化酶的抗生素，其中所述抗生素對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌。
29.含有一種或多種消化酶的洗滌劑，其中所述洗滌劑對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌。
30.含有一種或多種消化酶的防腐劑，其中所述防腐劑對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌。
31.含有一種或多種消化酶的殺菌劑，其中所述殺菌劑對于大腸桿菌殺菌和/或抑菌。
全文摘要
提供用于治療或預(yù)防大腸桿菌感染的組合物和方法。所述組合物可以配制成藥物組合物或配制成殺菌劑、消毒劑、洗滌劑或防腐劑，并可用于根除或減少大腸桿菌群體并因此治療或預(yù)防大腸桿菌感染。所述組合物包含一種或多種消化酶，例如，一種或多種蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。也提供所述組合物的使用方法。
文檔編號C07K17/00GK102272162SQ201080004044
公開日2011年12月7日 申請日期2010年1月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年1月6日
發(fā)明者J·J·法倫, J·M·法倫, M·黑爾 申請人:柯爾馬克有限責任公司