專利名稱：一種分離加蘭他敏的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種分離加蘭他敏的方法，尤其是從含石蒜科生物堿的植物提取物 中，將加蘭他敏與其它眾多生物堿分離的方法。背景技術：
加蘭他敏(Galantamine)，又稱雪花蓮胺堿(Galanthamine)，為帶有叔胺的四環(huán) 生物堿，是一種具有可逆作用的膽堿酯酶抑制劑，可廣泛用于老年性癡呆(AD)、重癥肌無 力、腸麻痹和骨髓灰質炎后遺癥等的治療。加蘭他敏常以氫溴酸鹽的形式用于臨床，并于 2003年上市。隨著全球老年人口增多，老年癡呆癥造成的疾病負擔日益增加，加蘭他敏作為 一種效果溫和且不良反應輕微的中樞膽堿酯酶抑制劑，因而重新受到重視。最初從夏雪片蓮的干球莖中提取加蘭他敏，后來在天山雪蓮及同科的水仙屬、石 蒜屬植物中也有發(fā)現(xiàn)。野生資源中以忽地笑(又名黃花石蒜、鐵色箭)、換錦花及鹿蔥等品 種中加蘭他敏含量較高，其中又以忽地笑球莖的含量最高。但近年因無計劃的采挖及栽培 技術落后、種球繁殖數(shù)低等原因致使石蒜的野生資源逐漸減少。目前已有多種得到加蘭他敏的方法，石蒜中含加蘭他敏約0. 1%。，我國技術人員通 過大量實驗，小試、中試，成功地從石蒜中提取單體加蘭他敏，然后加入氫溴酸合成加蘭他 敏氫溴酸鹽，最后用無水乙醇重結晶得到精品的氫溴酸加蘭他敏，所以從植物材料分離加 蘭他敏仍是其大規(guī)模制造的有效替代途徑，但傳統(tǒng)的分離純化方法操作復雜，成本高。專利200910027M3. 3描述的從石蒜鱗莖粗粉加入到(X)2超臨界萃取器中，用 HCl-CHCl3萃取，再通過氧化鋁色譜柱分離，洗脫，收集，濃縮，重結晶，洗滌，干燥。專利 20091023^06. 2提供了對這個方法的改進，以萃取物調(diào)pH9_10，加入乙酸乙酯萃取，無水 硫酸鈉脫水，濾過，析晶來代替色譜柱分離，盡管如此，但超臨界流體(X)2萃取法只是減少粗 提中的雜質，并不能細分各石蒜生物堿成分，如果用超臨界分離純化，工序繁瑣，所用的設 備儀器，使得成本更高。專利03142010. 9描述了用高速逆流色譜法分離石蒜粗提物，雖可避免被載體吸 附、損耗和變性等問題，但只適用于實驗室少量分離?；瘜W合成法(例如Kametani al.，J. Chem. Soc. C, 1971,6,1043-1047 ；Shimizu al.，Heterocycles, 1977,8, 277-282 ；ZL200810020491. 0 ；CN201010129674. 3)雖然可以不依靠植物資源來得到加蘭他敏，但該法合成路線長，同時耗費大量的有機試劑，對環(huán)境造成 污染，得到的只是外消旋體，并且還須拆分來得到左旋對映體，耗時，耗成本。氧化鋁層析或 硅酸鹽層析法，程序繁瑣，耗時長，溶劑消耗大，成本高，且載體會吸附一部分有效成分；堿 濃度梯度法，程序繁瑣，耗時長，溶劑消耗大，成本高；液-液萃取法，純度雖高，但耗時長， 溶劑消耗大，程序繁瑣。制約加蘭他敏進一步開發(fā)利用的關鍵在于從總提取物中分離單一的有效成 份。目前，已報道的鱗莖含總生物堿0.21%，其中石蒜堿(lycorine)占0.1%，其次有 高石蒜堿(homolycorine)、(多花)水仙堿(tazettine)，加蘭他敏占0. 0；35 %，石蒜3胺堿(Iycoramine)、石蒜寧堿(Iycorenine)、偽石蒜堿(pseudolycorine)禾口小星蒜堿 (hippeastrine)，莖的髓部含加蘭他敏、多花水仙堿和微量石蒜胺堿。采用傳統(tǒng)的分離工 藝，去除類似生物堿雜質困難，不適應目前世界各國對加蘭他敏的高質量要求，因此高效 率、高純度、低成本來分離純化加蘭他敏的生產(chǎn)工藝具有深遠的意義。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種利用包結法對石蒜科總生物堿提 取物進行分離的方法。本發(fā)明的研究思路為由于加蘭他敏具有高位阻(不共面的苯基)、以及易形成氫 鍵基團(羥基、氨基)，因而存在著很多特有分子能夠識別加蘭他敏。加蘭他敏顯堿性，可與 L-㈠-二苯甲酰酒石酸結合成鹽，氨基與羧基對接，形成N+-H—0-、O--H-N+這樣的氫鍵 形式。此處L-(-)-二苯甲酰酒石酸與加蘭他敏的分子對接是關鍵，然后進行重新排序，形 成緊密堆積而從溶液中結晶析出。把酒石酸酯化成L- (-) - 二苯甲酰酒石酸，來增大其空間 位阻，從而增強主體分子對客體分子的選擇性。為解決本發(fā)明技術問題，本發(fā)明采用如下技術方案一種分離加蘭他敏的方法，所述方法以含有加蘭他敏的石蒜總生物堿浸膏為原 料，所述的石蒜總生物堿浸膏是由石蒜鱗莖以酸為提取劑經(jīng)浸漉法提取得到的浸膏，所述 的方法為檢測石蒜總生物堿浸膏中加蘭他敏的含量，將石蒜總生物堿浸膏與L-(-)_ 二苯 甲酰酒石酸混合，用75 95%的乙醇作溶劑，在70 100°C下充分反應，得澄清溶液，然后 冷卻至-10 25°C，靜置至析出結晶，過濾得到濾餅和濾液，濾餅用重結晶溶劑A重結晶后， 得到的晶體粗品加堿水溶液，調(diào)PH值為7 9進行分解，再加入CHCl3萃取，取有機層蒸除 溶劑得到加蘭他敏粗品；將加蘭他敏粗品用丙酮溶解，并加入HBr水溶液，過濾得到加蘭他 敏氫溴酸鹽，用重結晶溶劑B重結晶，得到加蘭他敏純品；所述重結晶溶劑A或B各自獨立 為乙醇水溶液、甲醇、無水乙醇或丙酮；所述石蒜總生物堿浸膏中含有的加蘭他敏與L-(-)_ 二苯甲酰酒石酸、HBr水溶液 中HBr的物質的量比為1 1 4 1 2。進一步，所述的方法優(yōu)選為檢測石蒜總生物堿浸膏中加蘭他敏的含量，將石蒜總 生物堿浸膏與L- (-) - 二苯甲酰酒石酸混合，用75%的乙醇作溶劑，在80°C下充分反應，得 澄清溶液，然后冷卻至室溫，靜置至析出結晶，過濾得到濾餅和濾液，濾餅用85 %的乙醇重 結晶后，得到的晶體粗品加10% NaOH水溶液，調(diào)pH值為8進行分解，再加入CHCl3萃取，取 有機層蒸除溶劑得到加蘭他敏粗品；將加蘭他敏粗品用丙酮溶解，并加入HBr水溶液，過濾 得到的加蘭他敏氫溴酸鹽用50%乙醇重結晶，得到加蘭他敏純品。所述方法中，所述石蒜總生物堿浸膏中含有的加蘭他敏與75 95%的乙醇溶劑 的質量之比為1 10 30。所述堿水溶液為NaOH溶液、KOH溶液、碳酸鈉溶液、碳酸鉀溶液、碳酸氫鈉溶液或 碳酸氫鉀溶液，優(yōu)選10% NaOH溶液。所述重結晶溶劑A優(yōu)選50 85 %的乙醇，所述重結晶溶劑B優(yōu)選35 65 %的乙 本發(fā)明所述的石蒜總生物堿浸膏為市售或由石蒜鱗莖以酸為提取劑經(jīng)浸漉法提取得到，通常按照以下方法制得取石蒜鱗莖，不加篩粉碎，裝入滲漉筒中，加入2%。鹽酸， 完全浸沒石蒜鱗莖，隨時添加鹽酸溶液以保證石蒜鱗莖充分浸泡，浸泡8 12小時后開始 收集滲漉液，并不斷補充鹽酸溶液以保證石蒜鱗莖充分浸泡，至滲漉液由黃褐色轉為暗綠 色，停止?jié)B漉。合并所有滲漉液，調(diào)ph至6 7，過濾得到沉淀，即得到石蒜總生物堿浸膏。本發(fā)明所述在70 100°c溫度的條件下充分反應，反應時間一般在30分鐘 1小 時，得到澄清溶液；然后冷卻至-10 25°c，靜置至析出結晶，析晶時間一般在6-8小時。與現(xiàn)有技術相比，本方法基于超分子組裝的基本原理，利用主體分子與客體分子 之間拓撲學上的相匹配，使得顯堿性的加蘭他敏在總生物堿液中選擇性地與L-(-)_ 二苯 甲酰酒石酸形成穩(wěn)定的分子晶體，從而實現(xiàn)高效、迅速的分離作用，其優(yōu)點主要在于a)拆分的效率比較高。由于分子識別的高度選擇性，只需要一次結晶，加蘭他敏的 收率可在80 % -90 %之間，純度在90 % -99 %之間。b)操作簡單，重復性好，實施成本低，污染少，利于工業(yè)放大。具體實施例方式下面以具體實施例來進一步說明本發(fā)明的技術方案，但本發(fā)明的保護范圍不限于 此。石蒜總生物堿浸膏的制備取石蒜鱗莖^g，不加篩粉碎，用2%0 hcl潤濕，裝入預 先墊有脫脂棉的滲漉筒中，邊裝邊倒鹽酸，待石蒜鱗莖裝到滲漉筒的一半時，即停止裝筒。 繼續(xù)加入2%。hc1，直到石蒜鱗莖完全浸沒，反復振搖，隨時添加鹽酸溶液以保證石蒜鱗莖 充分浸泡，浸泡過夜。第2天開始收集滲漉液，并不斷補充鹽酸溶液，至滲漉液由黃褐色轉 為暗綠色，停止?jié)B漉。合并所有滲漉液，調(diào)ph至7，過濾得到沉淀，即得到石蒜總生物堿浸膏 1. 2kgo實施例1將石蒜總生物堿浸膏(含加蘭他敏10 %，其他生物堿20 %，hplc測定)5. og與 0. 6g l-(-)_ 二苯甲酰酒石酸(購于濟南比優(yōu)特化工有限公司)混合，用15.0ml 75%的 乙醇作溶劑，加熱至80°c，加熱30min得澄清溶液。然后將其冷卻至25°c，析出結晶[結 晶 i:ir(kbr， cm-1)3418,3068,3056,2960,1731，1635，1602，1586，1335，1318，1266，1179， 1026,1003,937,890,710,684,650,617ο 1h nmr (dms0-d6) δ 8· 046 (d，1h)，7· 742 (d，1h)， 7. 619 (d, 1h)，6. 85 (ab, 2h, j = 9. 6hz)，6. 15 (d, 1h, j = 7. 9hz)，5. 95 (dd, 1h, j = 7. 9hz, j = 3. 2hz), 5. 922 (d, 1h), 4. 85 (d, 1h, j = 16. ohz)，4. 60 (s，1h)，4. 47 (bs，1h)，4. 35 (d， 1h, j = 16. 0hz)，4. 10 (bs, 1h)，3. 70-3. 90 (s+m, 4h)，3. 50 (d, 1h, j = 12. 8hz)，2. 85 (bs, 3h)，2. 40-2. 00 (m，3h)，1.90 (d，lh，j= 16. ohz)]。過濾，同時回收溶劑及識別試劑、副產(chǎn) 混生物堿濾液。晶體i 0.46g再加入15. 0ml85%的乙醇重結晶，再過濾，同時回收乙醇溶 劑，然后滴加10%的naoh調(diào)ph至8進行分解，加入ioomlchcl3萃取，取有機層蒸除溶劑， 最終得到加蘭他敏粗品0. 44g。將粗品加入15. oml丙酮溶解，并加入0. 7ml40 %的hbr 溶液，過濾得到的加蘭他敏氫溴酸鹽，用10.0ml 50%乙醇重結晶，最后干燥，得到其成品 0. 43g :ir(kbr, cnt1)3520，2582，2522，1618，1510，1418，1286，1048，1020，810，719，613， 428。1HnMR(DMSO-CI6) δ 6. 85(ab,2h, j = 9. 6hz)，6. 15 (d，1η，j = 7. 9hz)，5. 95 (dd，1h，j =7. 9hz, j = 3. 2hz)，4. 85 (d, 1h, j = 16. 0hz)，4. 60 (s, 1h)，4. 47 (bs, 1h)，4. 35 (d, 1h,j = 16. ohz)，4. 10 (bs, 1h)，3. 70-3. 90 (s+m, 4h)，3. 50 (d, 1h, j = 12. 8hz)，2. 85 (bs, 3h)， 2. 40-2. 00 (m, 3h)，1. 90 (d，1h，j = 16. ohz)。采用hplc測定加蘭他敏的含量。色譜條件 色譜柱 mrbaxcwosommx0. 46mm，0.5 μ m)；流動相 v(水)v(甲醇)v(冰乙酸)= 91 8 l;流速lml·min-1;柱溫3(rc;壓力l bar;進樣量lμl;檢測波長280nm。純 度 98.3%，收率 86.0%。實施例2將總生物堿(含加蘭他敏13 %，其他生物堿18 % ) 6. 4g與3. ogl-㈠-二苯甲酰酒 石酸混合，用19.2ml 85%的乙醇作溶劑，加熱至100°c，加熱ih得澄清溶液。然后將其冷 卻至 10°c，析出結晶[結晶 i :ir(kbr, cm-1) 3418, 3068, 3056, 2960,1731，1635，1602，1586， 1335，1318，1266，1179，1026，1003，937，890，710，684，650，617。1HnMR(DMSO-CI6) δ 8. 046 (d， 1h)，7· 742(d，1h)，7· 619(d，1h)，6· 85(ab，2h，j = 9. 6hz) ,6. 15 (d, 1h, j = 7. 9hz)， 5. 95 (dd, 1h, j = 7. 9hz, j = 3. 2hz)，5. 922 (d, 1h)，4. 85 (d, 1h, j = 16. ohz)，4. 60 (s, 1h)， 4. 47 (bs, 1h)，4. 35 (d, 1h, j = 16. ohz)，4. 10 (bs, 1h)，3. 70-3. 90 (s+m, 4h)，3. 50 (d, 1h, j =12. 8hz)，2. 85(bs，3h)，2. 40-2. 00(m，3h)，1. 90(d，1h，j = 16. ohz)]。過濾，同時回收 溶劑及識別試劑、副產(chǎn)混生物堿濾液。晶體i 0. 78g再加入19. 2ml 75%的乙醇重結晶，再 過濾，同時回收乙醇溶劑，然后滴加10%的naoh調(diào)ph至7. 5進行分解，加入ioomlchcl3 萃取，取有機層蒸除溶劑，最終得到加蘭他敏粗品0. 73g。將粗品加入19. 2ml丙酮溶解， 并加入0.6ml 40%的hbr溶液，過濾得到的加蘭他敏氫溴酸鹽，用12.8ml 65%乙醇重結 晶，最后干燥，得到其成品 0. 69g :ir(kbr, cnt1) 3520，2582，2522，1618，1510，1418，1286, 1048,1020,810,719,613,428ο 1H nmr(DMS0_d6) δ 6· 85 (αβ，2η，j = 9. 6ηζ)，6. 15 (d，1η， j = 7. 9ηζ)，5. 95 (dd, 1η, j = 7. 9hz, j = 3. 2ηζ)，4. 85 (d, 1η, j = 16. ohz)，4. 60 (s, 1η)，4.47 (bs, 1η)，4. 35 (d, 1η, j = 16. ohz)，4. 10 (bs, 1η)，3. 70-3. 90 (s+m, 4h)，3. 50 (d, 1h, j = 12. 8hz)，2. 85 (bs, 3h)，2. 40-2. 00 (m, 3h)，1. 90 (d, 1h, j = 16. ohz)。采用 hplc 測定加蘭他 敏的含量。色譜條件色譜柱mrbaxcwosommx 0. 46mm，0.5 μ m)；流動相v (水)v (甲 醇)v(冰乙酸)=91 8 1 ；流速lml.mirt1 ；柱溫30°c;壓力126bar ；進樣量iyl ； 檢測波長觀此！!!。純度98.8%，收率82.9%。實施例3將總生物堿(含加蘭他敏8%，其他生物堿19% )7. 與0.8g l_(-)_二苯甲酰酒 石酸混合，用17ml 95%的乙醇作溶劑，加熱至70°c，加熱50min得澄清溶液。然后將其冷 卻至-10°c，析出結晶[結晶 i :ir(kbr, cm-1) 3418, 3068, 3056, 2960,1731，1635，1602，1586， 1335，1318，1266，1179，1026，1003，937，890，710，684，650，617。1HnMR(DMSO-CI6) δ 8. 046 (d， 1h)，7· 742(d，1h)，7· 619(d，1h)，6· 85(ab，2h，j = 9. 6hz) ,6. 15 (d, 1h, j = 7. 9hz)，5.95 (dd, 1h, j = 7. 9hz, j = 3. 2hz)，5. 922 (d, 1h)，4. 85 (d, 1h, j = 16. ohz)，4. 60 (s, 1h)， 4. 47 (bs, 1h)，4. 35 (d, 1h, j = 16. ohz)，4. 10 (bs, 1h)，3. 70-3. 90 (s+m, 4h)，3. 50 (d, 1h, j =12. 8hz)，2· 85(bs，3h)，2· 40-2. 00 (m, 3h)，1. 90 (d, 1h, j = 16. ohz)]。過濾，同時回收溶 劑及識別試劑、副產(chǎn)混生物堿濾液。晶體i 0.48g再加入21.9ml 55%的乙醇重結晶，再過 濾，同時回收乙醇溶劑，然后滴加10%的naoh調(diào)ph至7進行分解，加入ioomlchcl3萃取， 取有機層蒸除溶劑，最終得到加蘭他敏粗品0. 45g。將粗品加入21. 9ml丙酮溶解，并加入 0.6ml40%的hbr溶液，過濾得到的加蘭他敏氫溴酸鹽，用14.6ml 35%乙醇重結晶，最后干燥，得到其成品 0. 44g :IR(KBr, cm-1) 3520, 2582, 2522,1618，1510，1418，1286，1048，1020， 810，719，613，428。1H NMR(DMS0_d6) δ 6. 85(AB，2H，J = 9. 6Hz)，6· 15 (d, 1H, J = 7. 9Hz)， 5. 95 (dd, 1H, J = 7. 9Hz, J = 3. 2Hz)，4. 85 (d, 1H, J = 16. 0Hz)，4. 60 (s, 1H)，4. 47 (bs, 1H)， 4. 35 (d, 1H, J = 16. 0Hz)，4. 10(bs，1H)，3. 70-3. 90(s+m，4H)，3. 50(d，1H，J = 12. 8Hz)，2.85 (bs, 3H)，2. 40-2. OO (m，3H)，1. 90 (d，1H，J = 16. OHz)。采用 HPLC測定加蘭他敏的含量。 色譜條件色譜柱MrbaxC180. 46謹，0. 5 μ m)；流動相V (水)V (甲醇)V (冰 乙酸)=91 8 1;流速11^.1^11-1;柱溫301;壓力1261^1~;進樣量11^;檢測波長 280nm。純度 99. 3%，收率 75. 3%。實施例4將總生物堿(含加蘭他敏15%，其他生物堿22% )8. 2g與4. 9g L_(-)_ 二苯甲 酰酒石酸混合，用24. 6ml90 %的乙醇作溶劑，加熱至80°C，加熱45min得澄清溶液。然 后將其冷卻至 0°C，析出結晶[結晶 I =IR (KBr, cm-1) 3418, 3068, 3056, 2960,1731,1635, 1602，1586，1335，1318，1266，1179，1026，1003，937，890，710，684，650，617。1HnMR(DMSO-CI6) δ 8. 046 (d, 1H)，7. 742 (d, 1H) ,7. 619 (d, 1H)，6. 85 (AB, 2H, J = 9. 6Hz)，6. 15 (d, 1H, J = 7. 9Hz) ,5. 95 (dd, 1H, J = 7. 9Hz, J = 3. 2Hz)，5. 922 (d，1H)，4. 85 (d，1H，J = 16. OHz)， 4. 60 (s，1H)，4· 47 (bs, 1H)，4· 35 (d, 1Η, J = 16. OHz)，4· 10 (bs, 1Η)，3· 70-3. 90 (s+m, 4Η)，3.50 (d, 1Η, J = 12. 8Ηζ)，2. 85 (bs, 3Η)，2. 40-2. 00 (m, 3Η)，1. 90 (d, 1H, J = 16. OHz)]。過 濾，同時回收溶劑及識別試劑、副產(chǎn)混生物堿濾液。晶體II. 12g再加入M.6ml 85%的乙 醇重結晶，再過濾，同時回收乙醇溶劑，然后滴加10%的NaOH調(diào)pH至9進行分解，加入 IOOmLCHCl3萃取，取有機層蒸除溶劑，最終得到加蘭他敏粗品1. 05g。將粗品加入Μ. 6ml丙 酮溶解，并加入1.5ml 40%的HBr溶液，過濾得到的加蘭他敏氫溴酸鹽，用16.細1 50%乙 醇重結晶，最后干燥，得到其成品 0. 97g :IR(KBr, cm"1) 3520, 2582, 2522,1618,1510,1418, 1286，1048，1020，810，719，613，428。1H NMR(DMS0_d6) δ 6. 85(AB，2H，J = 9. 6Hz)，6· 15 (d, 1H, J = 7. 9Hz)，5. 95 (dd, 1H, J = 7. 9Hz，J = 3. 2Hz)，4. 85 (d, 1H, J = 16. 0Hz)，4. 60 (s, 1H)，4.47 (bs, 1H)，4. 35 (d, 1H, J = 16. OHz)，4. 10 (bs, 1H)，3. 70-3. 90 (s+m, 4H)，3. 50 (d, 1H, J = 12. 8Hz)，2. 85 (bs, 3H)，2. 40-2. 00 (m, 3H)，1. 90 (d, 1H, J = 16. OHz)。采用 HPLC 測定加蘭他 敏的含量。色譜條件色譜柱MrbaxCwOSOmmX 0. 46mm，0.5 μ m)；流動相V (水)V (甲 醇)V(冰乙酸)=91 8 1 ；流速lmL.mirT1 ；柱溫30°C;壓力126bar ；進樣量IyL ； 檢測波長觀此！!!。純度99. 1%，收率78.9%。實施例5將總生物堿(含加蘭他敏12%，其他生物堿20% )9. Ig與3. Og L_(-)_ 二苯甲 酰酒石酸混合，用27.3ml 75%的乙醇作溶劑，加熱至90°C，加熱70min得澄清溶液。然 后將其冷卻至 15°C，析出結晶[結晶 I =IR(KBr, cm-1) 3418, 3068, 3056, 2960,1731,1635, 1602，1586，1335，1318，1266，1179，1026，1003，937，890，710，684，650，617。1HnMR(DMSO-CI6) δ 8. 046 (d, 1H)，7. 742 (d, 1H) ,7. 619 (d, 1H)，6. 85 (AB, 2H, J = 9. 6Hz)，6. 15 (d, 1H, J = 7. 9Hz) ,5. 95 (dd, 1H, J = 7. 9Hz, J = 3. 2Hz)，5. 922 (d，1H)，4. 85 (d，1H，J = 16. OHz)， 4. 60 (s，1H)，4. 47 (bs, 1H)，4. 35 (d, 1H, J = 16. OHz)，4. 10 (bs, 1H)，3. 70-3. 90 (s+m, 4H)， 3. 50 (d, 1H, J = 12. 8Hz)，2. 85 (bs, 3H)，2. 40-2. 00 (m, 3H)，1. 90 (d, 1H, J = 16. OHz)]。過 濾，同時回收溶劑及識別試劑、副產(chǎn)混生物堿濾液。晶體I 1. 04再加入27. 3ml 50%的乙醇重結晶，再過濾，同時回收乙醇溶劑，然后滴加10%的NaOH調(diào)pH至8. 5進行分解，加入 IOOmLCHCl3萃取，取有機層蒸除溶劑，最終得到加蘭他敏粗品0. 98g。將粗品加入27. 3ml 丙酮溶解，并加入1. 5ml40%的HBr溶液，過濾得到的加蘭他敏氫溴酸鹽，用18. 2ml 45%乙 醇重結晶，最后干燥，得到其成品 0. 91g :IR(KBr, cm"1) 3520, 2582, 2522,1618,1510,1418, 1286，1048，1020，810，719，613，428。1H NMR(DMS0_d6) δ 6. 85(AB，2H，J = 9. 6Hz)，6· 15 (d, 1H, J = 7. 9Hz)，5. 95 (dd, 1H, J = 7. 9Hz，J = 3. 2Hz)，4. 85 (d, 1H, J = 16. 0Hz)，4. 60 (s, 1H)， 4. 47 (bs, 1H)，4. 35 (d, 1H, J = 16. OHz)，4. 10 (bs, 1H)，3. 70-3. 90 (s+m, 4H)，3. 50 (d, 1H, J = 12. 8Hz)，2. 85 (bs, 3H)，2. 40-2. 00 (m, 3H)，1. 90 (d, 1H, J = 16. OHz)。采用 HPLC 測定加蘭他 敏的含量。色譜條件色譜柱MrbaxCwOSOmmX 0. 46mm，0.5 μ m)；流動相V (水)V (甲 醇)V(冰乙酸)=91 8 1 ；流速lmL.mirT1 ；柱溫30°C;壓力126bar ；進樣量IyL ； 檢測波長觀此！!!。純度98.9%，收率83. 3%。
權利要求
1.一種分離加蘭他敏的方法，所述方法以含有加蘭他敏的石蒜總生物堿浸膏為原料， 所述的石蒜總生物堿浸膏是由石蒜鱗莖以酸為提取劑經(jīng)浸漉法提取得到的浸膏，其特征 在于所述的方法為檢測石蒜總生物堿浸膏中加蘭他敏的含量，將石蒜總生物堿浸膏與 L-(-)-二苯甲酰酒石酸混合，用75、5%的乙醇作溶劑，在7(T10(TC下充分反應，得澄清溶 液，然后冷卻至_1(T25°C，靜置至析出結晶，過濾得到濾餅和濾液，濾餅用重結晶溶劑A重 結晶后，得到的晶體粗品加堿水溶液，調(diào)PH值為7、進行分解，再加入CHCl3萃取，取有機 層蒸除溶劑得到加蘭他敏粗品；將加蘭他敏粗品用丙酮溶解，并加入HBr水溶液，過濾得到 加蘭他敏氫溴酸鹽，用重結晶溶劑B重結晶，得到加蘭他敏純品；所述重結晶溶劑A或B各 自獨立為乙醇水溶液、甲醇、無水乙醇或丙酮；所述石蒜總生物堿浸膏中含有的加蘭他敏與L-(-)_ 二苯甲酰酒石酸、HBr水溶液中 HBr的物質的量比為1:1 4:1 2。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述的方法為檢測石蒜總生物堿浸膏中加 蘭他敏的含量，將石蒜總生物堿浸膏與L- (-) - 二苯甲酰酒石酸混合，用75%的乙醇作溶劑， 在80°C下充分反應，得澄清溶液，然后冷卻至室溫，靜置至析出結晶，過濾得到濾餅和濾液， 濾餅用85%的乙醇重結晶后，得到的晶體粗品加10%Na0H水溶液，調(diào)pH值為8進行分解，再 加入CHCl3萃取，取有機層蒸除溶劑得到加蘭他敏粗品；將加蘭他敏粗品用丙酮溶解，并加 入HBr水溶液，過濾得到的加蘭他敏氫溴酸鹽用50%乙醇重結晶，得到加蘭他敏純品。
3.如權利要求1或所述的方法，其特征在于所述石蒜總生物堿浸膏中含有的加蘭他敏 與75 95%的乙醇溶劑的質量之比為1:10 30。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述堿水溶液為NaOH溶液、KOH溶液、碳酸鈉 溶液、碳酸鉀溶液、碳酸氫鈉溶液或碳酸氫鉀溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種分離加蘭他敏的方法先檢測石蒜總生物堿浸膏中加蘭他敏的含量，將石蒜總生物堿浸膏與L-(-)-二苯甲酰酒石酸混合，用75~95%的乙醇作溶劑，在70~100℃下充分反應，得澄清溶液，然后冷卻至-10~25℃，靜置至析出結晶，過濾取濾餅用重結晶溶劑A重結晶后，得到的晶體粗品加堿水溶液，調(diào)pH值為7~9進行分解，加入CHCl3萃取，取有機層蒸除溶劑得到加蘭他敏粗品；然后用丙酮溶解，加入HBr水溶液，過濾得到加蘭他敏氫溴酸鹽，用重結晶溶劑B重結晶，得到加蘭他敏純品。本發(fā)明拆分的效率高，只需要一次結晶，加蘭他敏的收率可在80-90%之間，純度在90-99%之間。并且操作簡單，重復性好，實施成本低，污染少，利于工業(yè)放大。
文檔編號C07D491/107GK102050826SQ20101059826
公開日2011年5月11日 申請日期2010年12月21日 優(yōu)先權日2010年12月21日
發(fā)明者王聰, 金志敏 申請人:浙江工業(yè)大學