專利名稱：一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，尤其是涉及一種采用超聲提取和大孔樹(shù)脂吸附提取白楊素苷的方法。
背景技術(shù)：
三葉海棠又名山里紅、山茶果，為薔科植物。三葉海棠具有較強(qiáng)的抗菌、抗炎、抗癌、降血壓、降血脂、利尿等療效作用。三葉海棠葉是一種能顯著增強(qiáng)人體免疫機(jī)能、具較營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的保健茶飲料。三葉海棠葉中含有咖啡堿、茶多酚、黃酮類、氨基酸等多種營(yíng)養(yǎng)成分，其中黃酮類白楊素苷具有抗氧化、抗病毒、抗高血壓、降血糖和抑制芳香酶活性的作用，研究表明白楊素苷具有治療潰瘍性結(jié)腸炎、降血壓作用。特別受人關(guān)注的是其代謝產(chǎn)物具有腫瘤預(yù)防和治療作用。白楊素苷為5，7- 二羥基黃酮葡萄糖苷，溶于堿水、甲醇、乙醇、丙酮，微溶于熱水、 乙酸乙酯、正丁醇，不溶于石油醚、氯仿?，F(xiàn)有提取白楊素苷工藝公開(kāi)較少，一般為有機(jī)試劑提取。如“HPLC法測(cè)定三葉海棠葉中白楊素苷含量”，該文獻(xiàn)采取丙酮超聲提取，干樣上聚酰胺柱乙醇梯度洗脫，濃縮結(jié)晶，丙酮重結(jié)晶。此法采用丙酮提取，溶劑沸點(diǎn)低，對(duì)操作人員和環(huán)境危害嚴(yán)重，干樣上柱， 分離量較小，只適合實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決技術(shù)問(wèn)題是提供一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，該方法無(wú)毒性有機(jī)試劑，對(duì)操作人員無(wú)危害，產(chǎn)品無(wú)溶劑殘留控制，適合工業(yè)化生產(chǎn)。為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取取三葉海棠葉粉碎20-40目，加5-10倍量50-70%乙醇超聲提取2-3次， 得提取液；2)大孔樹(shù)脂吸附將上述提取液減壓回收乙醇濾過(guò)，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗至無(wú)糖色，再用4-6BV40-70%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，得濃縮液；3)萃取上述濃縮液調(diào)至PH8-9，加水飽和正丁醇萃取，保留水相調(diào)節(jié)PH3-5，再加入水飽和正丁醇萃取，收集正丁醇層，減壓濃縮，浸膏加入70-90 %乙醇回流溶解，過(guò)濾，濃縮1/2-1/3體積，放置結(jié)晶；4)重結(jié)晶濾出上述結(jié)晶物，熱水洗滌2-3次，再用乙醇回流溶解結(jié)晶，結(jié)晶物干燥得產(chǎn)品。所述步驟2)中大孔樹(shù)脂可選AB-8、HZ818、SPD-300和LSA-40中的一種。綜上所述本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是采用三葉海棠葉原料易得，白楊素苷含量高，易于純化；超聲提取能耗低、雜質(zhì)少；大孔樹(shù)脂吸附，操作簡(jiǎn)單，處理量大；不同PH正丁醇萃取，除雜效果好，而且正丁醇揮發(fā)性小，比乙酸乙酯安全。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 干燥三葉海棠葉粉碎40目，取lkg，加入10kg50%乙醇超聲提取1小時(shí)，抽濾液體，再加入8kg50%乙醇超聲提取0. 5小時(shí)，合并提取液減壓回收乙醇，濾過(guò)，加入IL AB-8大孔樹(shù)脂柱吸附，上柱流速0. 5L/h，吸附結(jié)束后，水洗至無(wú)糖色，流速控制2L/h，再用 6L40%乙醇洗脫，流速lL/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1.05，加5%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH9，加IOOml水飽和正丁醇萃取3次，保留水相，再鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH3，加入IOOml水飽和正丁醇萃取4次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入70%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/3 體積，放置結(jié)晶12小時(shí)，濾出結(jié)晶物，加入IOOml熱水?dāng)嚢柘礈?次，濾餅用70%乙醇回流飽和溶解，重結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，真空干燥得白楊素苷21. 6g，經(jīng)高效液相檢測(cè)含量93. 2%。實(shí)施例2:干燥三葉海棠葉粉碎20目，取1kg，加入乙醇超聲提取1小時(shí)，抽濾液體， 再加入8kg70%乙醇超聲提取0. 5小時(shí)，合并提取液減壓回收乙醇，濾過(guò)，加入1LHZ818大孔樹(shù)脂柱吸附，上柱流速lL/h，吸附結(jié)束后，水洗至無(wú)糖色，流速控制lL/h，再用5L50%乙醇洗脫，流速1. 5L/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 1，加5%碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH8，加200ml 水飽和正丁醇萃取2次，保留水相，再鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH5，加入IOOml水飽和正丁醇萃取3 次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入90%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/2體積，放置結(jié)晶18小時(shí)，濾出結(jié)晶物，加入IOOml熱水?dāng)嚢柘礈?次，濾餅用80%乙醇回流飽和溶解， 重結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，真空干燥得白楊素苷23. lg，經(jīng)高效液相檢測(cè)含量95. 1%。實(shí)施例3 干燥三葉海棠葉粉碎40目，取1kg，加入10kg50%乙醇超聲提取1小時(shí)，抽濾液體，再加入^^50%乙醇超聲提取0.5小時(shí)，合并提取液減壓回收乙醇，濾過(guò)，加入 1LSPD-300大孔樹(shù)脂柱吸附，上柱流速lL/h，吸附結(jié)束后，水洗至無(wú)糖色，流速控制2L/h，再用4L7%乙醇洗脫，流速lL/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 05，加5%氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié) pH8，加200ml水飽和正丁醇萃取2次，保留水相，再鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH4，加入IOOml水飽和正丁醇萃取4次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入75%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/2 體積，放置結(jié)晶15小時(shí)，濾出結(jié)晶物，加入IOOml熱水?dāng)嚢柘礈?次，濾餅用65%乙醇回流飽和溶解，重結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，真空干燥得白楊素苷28. 8g，經(jīng)高效液相檢測(cè)含量91. 2%。實(shí)施例4 干燥三葉海棠葉粉碎20-40目，取1kg，加入10kg60%乙醇超聲提取1小時(shí)，抽濾液體，再加入iokgeo%乙醇超聲提取ο. 5小時(shí)，合并提取液減壓回收乙醇，濾過(guò)，加入 1LLSA-40大孔樹(shù)脂柱吸附，上柱流速0. 8L/h，吸附結(jié)束后，水洗至無(wú)糖色，流速控制lL/h， 再用5L60%乙醇洗脫，流速lL/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 1，加5%碳酸鈉溶液調(diào)節(jié) pH9，加IOOml水飽和正丁醇萃取3次，保留水相，再鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH3，加入200ml水飽和正丁醇萃取2次，收集正丁醇層減壓濃縮，浸膏加入90%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/3體積，放置結(jié)晶20小時(shí)，濾出結(jié)晶物，加入IOOml熱水?dāng)嚢柘礈?次，濾餅用80%乙醇回流飽和溶解，重結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，真空干燥得白楊素苷24. 2g，經(jīng)高效液相檢測(cè)含量91. 8%。實(shí)施例5 干燥三葉海棠葉粉碎40目，取^g，加入35kg50%乙醇超聲提取1小時(shí)，抽濾液體，再加入乙醇超聲提取0. 5小時(shí)，濾渣再加35kg50%提取依次(濾液下次提取套用)，用合并前兩次提取液減壓回收乙醇，濾過(guò)，加入5L HZ818大孔樹(shù)脂柱吸附，上柱流速 4L/h，吸附結(jié)束后，水洗至無(wú)糖色，流速控制10L/h，再用30L55%乙醇洗脫，流速6L/h，收集洗脫液減壓濃縮至密度1. 05，加5%碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH9，加IL水飽和正丁醇萃取2次，保留水相，再鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH3，加入500ml水飽和正丁醇萃取3次，收集正丁醇層減壓濃縮， 浸膏加入80%乙醇回流溶解，趁熱抽濾，濃縮至1/2體積，放置結(jié)晶15小時(shí)，濾出結(jié)晶物，力口入500ml熱水?dāng)嚢柘礈?次，濾餅用70%乙醇回流飽和溶解，重結(jié)晶，結(jié)晶物濾出，真空干燥得白楊素苷123. 4g，經(jīng)高效液相檢測(cè)含量94. 3%。
權(quán)利要求
1.一種從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取取三葉海棠葉粉碎20-40目，加5-10倍量50-70%乙醇超聲提取2-3次，得提取液；2)大孔樹(shù)脂吸附將上述提取液減壓回收乙醇濾過(guò)，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗至無(wú)糖色，再用4-6BV40-70%乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，得濃縮液；3)萃取上述濃縮液調(diào)至PH8-9，加水飽和正丁醇萃取，保留水相調(diào)節(jié)pH3-5，再加入水飽和正丁醇萃取，收集正丁醇層，減壓濃縮，浸膏加入70-90 %乙醇回流溶解，過(guò)濾，濃縮 1/2-1/3體積，放置結(jié)晶；4)重結(jié)晶濾出上述結(jié)晶物，熱水洗滌2-3次，再用乙醇回流溶解結(jié)晶，結(jié)晶物干燥得女口廣 PFt ο
2.如權(quán)利要求1所述從三葉海棠葉中提取白楊素苷的方法，其特征在于所述步驟2)中大孔樹(shù)脂可選AB-8、HZ818、SPD-300和LSA-40中的一種。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種從三葉海棠葉中提取白楊素的苷方法，工藝方法是以三葉海棠葉為原料，粉碎20-40目，加5-10倍量50-70％乙醇超聲提取2-3次，提取液減壓回收乙醇，濾過(guò)，加入大孔樹(shù)脂柱吸附，水洗至無(wú)糖色，再用4-6BV40-70％乙醇洗脫，收集洗脫液減壓濃縮，濃縮液調(diào)至pH8-9，加水飽和正丁醇萃取，保留水相調(diào)節(jié)pH3-5，再加入水飽和正丁醇萃取，收集正丁醇層，減壓濃縮，浸膏加入70-90％乙醇回流溶解，過(guò)濾，濃縮1/2-1/3體積，放置結(jié)晶，濾出上述結(jié)晶物，熱水洗滌2-3次，再用乙醇回流溶解結(jié)晶，結(jié)晶物干燥得產(chǎn)品。采用本方法生產(chǎn)白楊素苷，工藝簡(jiǎn)單，無(wú)毒害試劑使用，對(duì)環(huán)境友好，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07H17/07GK102464687SQ201010549768
公開(kāi)日2012年5月23日 申請(qǐng)日期2010年11月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年11月19日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶, 楊成東 申請(qǐng)人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司