專(zhuān)利名稱(chēng)：一種制備一枝蒿酮酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一枝蒿酮酸的提取純化技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種采用超臨界流體萃取和柱 層析富集純化技術(shù)提取制備高純度一枝蒿酮酸的方法。一枝蒿為菊科植物巖蒿Artemisia rupestris L.的全草，又名新疆一枝蒿、鹿角 蒿。產(chǎn)于新疆維吾爾自治區(qū)境內(nèi)的天山及阿爾泰山山脈，是維吾爾族常用藥物，具有祛風(fēng)解 表，健胃消積，活血解毒的功效，主治風(fēng)寒感冒，食積，跌打瘀腫。毒蛇咬傷，蕁麻疹?，F(xiàn)代藥 理研究表明，其具有抑制平滑肌收縮、抗腫瘤、消除自由及作用、抗過(guò)敏反應(yīng)以及保肝作用。 已有以新疆一枝蒿為主要成分的復(fù)方藥品用于臨床(如由新疆西域藥業(yè)有限公司開(kāi)發(fā)的 復(fù)方一枝蒿顆粒，批準(zhǔn)文號(hào)國(guó)藥準(zhǔn)字Z20(^6711，臨床上用于解表祛風(fēng)、涼血解毒以及用 于治療病毒性感冒、咽喉腫痛等疾病)。一枝蒿中主要含有揮發(fā)油、倍半萜類(lèi)、苷類(lèi)、黃酮類(lèi)、 生物堿、多糖、氨基酸以及多肽類(lèi)等化合物。其中一枝蒿酮酸(Rupestonic acid)是從一枝 蒿中分離出的一種含多官能團(tuán)的單體倍半萜，在一枝蒿中含量較高，可作為指標(biāo)性成分用 于對(duì)一枝蒿藥材及其相關(guān)制劑的質(zhì)量控制。中國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?00410084818. 2采用乙型肝 炎病毒DNA克隆轉(zhuǎn)染的人肝癌細(xì)胞(Hep-G2)的2. 2. 15系，觀察所試藥物一枝蒿酮酸再不 同濃度下對(duì)2. 2. 15細(xì)胞分泌HbsAg、HbeAg和HBV-DNA的影響，結(jié)果顯示在三批實(shí)驗(yàn)中一 枝蒿酮酸所試的4個(gè)劑量對(duì)2. 2. 15細(xì)胞分泌HbsAg均有明顯的抑制作用，與對(duì)照組比較有 顯著性差異(P <0.01)；并通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)灌胃給藥80、160、320mg/kg，qd，5_7d，明顯降低 CCL1致肝損傷小鼠的血清GPT和GOT的含量，顯著降低D-氨基半乳糖氨鹽酸鹽致急性肝損 傷小鼠的血清GPT、GOT及ALP含量，并能降低小鼠免疫性肝損傷小鼠的血清GPT的含量。一枝蒿酮酸的結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行(1)以干燥的一枝蒿為原料，經(jīng)酸醇浸潤(rùn)、微波提取、壓濾，濃縮干燥得干燥物；(2)將干燥物至于超臨界(X)2萃取釜中，乙醇作夾帶劑，萃取1-4小時(shí)，收集萃取物；(3)將萃取物經(jīng)柱層析一次洗脫純化，再回收試劑，重結(jié)晶獲得純度大于98%的一枝 蒿酮酸。
2.如權(quán)利要求1所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟(1)中所述的原料 為一枝蒿的干燥花或葉。
3.如權(quán)利要求1所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟(1)中所述的酸醇 為含酸2-5%的醇溶液；酸可選磷酸、硫酸、鹽酸以及酒石酸、檸檬酸等；所述醇為甲醇或乙 醇溶液，體積百分比濃度為70 % -90 %。
4.如權(quán)利要求1所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟(1)中所述酸醇加 入量以浸沒(méi)原料面為度，微波提取功率為200-700W，輻射頻率選用M50MHz，輻射時(shí)間為 2-5分鐘，間歇輻射，保持水溫低于60°C。
5.如權(quán)利要求1所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟O)中所述超臨界 CO2萃取方法的萃取壓力為20-50Mpa，萃取溫度為30-50°C，CO2流速為5_20L/h，解析壓力 為4-8Mpa，解析溫度為40-58°C。
6.如權(quán)利要求1所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟(3)中所述柱層析 填料為大孔樹(shù)脂或硅膠，選用樹(shù)脂為DlOl或AB-8，選用硅膠時(shí)硅膠目數(shù)為150-300目。
7.如權(quán)利要求6所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟(3)采用大孔樹(shù)脂 柱時(shí)，所述大孔樹(shù)脂柱層析法純化，是將一枝蒿萃取物過(guò)大孔樹(shù)脂柱，以乙醇水溶液為洗脫 劑洗脫，先用體積比為10-20%的乙醇水溶液洗脫雜質(zhì)，再用體積比為50-90%的乙醇水溶 液洗脫。
8.如權(quán)利要求6所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟(3)采用硅膠柱時(shí)， 所述硅膠柱層析法純化，是將一枝蒿萃取物過(guò)硅膠層析柱，以石油醚-氯仿(9 1-1 9)、 石油醚-丙酮(8 2-2 8)或乙酸乙酯-丙酮(19 1-1 19)混合溶劑洗脫。
9.如權(quán)利要求1所述的制備一枝蒿酮酸的方法，其特征在于步驟(3)中所述重結(jié)晶 溶劑為吡啶丙酮混合溶劑，體積比為3 1。
全文摘要
本發(fā)明提供一種制備一枝蒿酮酸的方法。制備方法包括步驟將一枝蒿的干燥全草粉碎，微波提取、壓濾，干燥，將干燥物再提取、分離富集、純化，結(jié)晶干燥即得成品。本發(fā)明采用超臨界流體萃取，繼以柱層析分離純化得到高純度一枝蒿酮酸，具有高得率、運(yùn)行成本低和綠色環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07C59/82GK102040511SQ201010293219
公開(kāi)日2011年5月4日 申請(qǐng)日期2010年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月27日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司