專利名稱：同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種分離、測定鹽酸帕洛諾司瓊光學(xué)異構(gòu)體的方法，尤其是涉及一種同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法。
背景技術(shù)：
鹽酸帕洛諾司瓊(Palonosetron)是一種高選擇性的5-HT受體拮抗劑(結(jié)構(gòu)式見下圖，C19H24N2O · HCL)，可阻斷嘔吐反射中樞外周神經(jīng)元的突觸前5-HT受體的興奮，減少嘔吐和惡心的發(fā)生率，目前該藥已在臨床使用。結(jié)構(gòu)式為鹽酸帕洛諾司瓊發(fā)揮其藥理學(xué)效應(yīng)的為SS構(gòu)型，其異構(gòu)體RR、RS、SR無生物學(xué)作用。而在制備工藝及樣品保藏中，對其異構(gòu)體監(jiān)測非常重要，從而了解對主成分形成干擾。 因此，建立簡單快速的四種異構(gòu)體的檢測質(zhì)量分析方法，非常有必要。就目前文獻看，劉小東對鹽酸帕洛諾司瓊注射液的研究中，采用高效液相色譜法分析，但該分析方法僅僅用于主成分的含量測定及有關(guān)物質(zhì)，無法測定異構(gòu)體的含量，更難以體現(xiàn)四種異構(gòu)體的含量。參見[《藥學(xué)及臨床研究》，2007，15 (5) :366-368，劉小東著“注射用鹽酸帕洛諾司瓊的制備、質(zhì)量控制及穩(wěn)定性考察”]；江生用高效液相色譜法測定鹽酸帕洛諾司瓊異構(gòu)體，運用鹽酸帕洛諾司瓊的校正因子，并以該校正因子計算鹽酸帕洛諾司瓊中異構(gòu)體的含量。從文獻中，可以看出來，該分析方法，只是測定了兩種異構(gòu)體的分析方法，而沒有體現(xiàn)出來四種異構(gòu)體，也很難確切反映另外幾種異構(gòu)體的質(zhì)量控制。參見[《中國藥業(yè)》，2008，17 (17) 14-15，江生著“校正因子法測定鹽酸帕洛諾司瓊異構(gòu)體的含量”]。 柏江濤在中國專利申請[申請?zhí)?00710074410.0]中公開了一種分離了四種異構(gòu)體的方法，有很大進步，但在實際試驗操作中，本方法是采用調(diào)節(jié)兩次溫度，即進樣兩次，且分離相對復(fù)雜，煩瑣，且每次出來色譜峰均為3種成分，非4種成分，沒有達到一次分離的效果。綜合以上看，一方面，鹽酸帕洛諾司瓊四種異構(gòu)體的分離測定非常重要，另一方面，建立同時測定，方法簡單方便，一次就能滿足目的的色譜條件非常重要，而就目前文獻看，尚無報道一次達到色譜分離的分析方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法。用高效液相色譜方法，經(jīng)反復(fù)優(yōu)化，達到同時分離目的及測定意義。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法，四種光學(xué)異構(gòu)體分別為S. S、S. R、R. S、R. R ；其特征在于它包括采用高效液相色譜法對鹽酸帕洛諾司瓊光學(xué)異構(gòu)體進行拆分；其中包括OD-H手性色譜柱，流動相為乙腈異丙醇二乙胺；三者體積比為82 92 18 8 0. 1 0. 2，柱溫為30 40 "C。進一步的，所述的OD-H手性色譜柱，流動相為乙腈異丙醇二乙胺；優(yōu)選三者體積比為85 15 0. 1。 所述的柱溫優(yōu)選為40°C。所述高效液相色譜法中流速為0. 3 1. 2ml/min。所述高效液相色譜法中檢測波長為220nm。手性色譜柱(Chiral HPLC Columns)是由具有光學(xué)活性的單體，固定在硅膠或其它聚合物上制成手性固定相(Chiral Stationary Phases)；采用上述技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，通過引入手性環(huán)境使在對映體構(gòu)體間呈現(xiàn)物理特征的差異，從而達到光學(xué)異構(gòu)體拆分的目的；在手性拆分中，溫度的影響是很顯著的，確定手性分析方法過程中要確定最優(yōu)柱溫，將手性正相柱的的溫度調(diào)節(jié)好，一次進樣，分離度均大于1.8，滿足色譜分離的要求， 能將對鹽酸帕洛諾司瓊的四個異構(gòu)體進行拆分，對鹽酸帕洛諾司瓊進行嚴(yán)格的質(zhì)量控制， 更好地發(fā)揮其藥理學(xué)效應(yīng)。按以上分析方法，能非常巧妙地對鹽酸帕洛諾司瓊的四個異構(gòu)體進行拆分，分離度均大于1.8，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足色譜分離的要求(見附圖)。下面結(jié)合附圖和具體實施方式
對本發(fā)明作進一步詳細(xì)說明，根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)知識和慣用手段做出各種替換和變更，均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。


圖1為鹽酸帕洛諾司瓊四種異構(gòu)體色譜分離圖。四種色譜峰依次為R. R、S. R、R. S、 S. S ο
具體實施例方式實施例，同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體1.儀器與試劑1.1儀器與試劑儀器Agilent IlOOseries高效液相色譜儀，色譜級乙腈、異丙醇(Merck公司)， 二乙胺(分析純)。試劑厶1 、1^、1 .1 型異構(gòu)體(自制或市場采購)，鹽酸帕洛諾司瓊原料(深圳海王藥業(yè)有限公司提供，批號20080601，20080602，20080603)。1. 2色譜條件色譜柱CHIRALPAKOD-H 5 μ m 4. 6 X 250mm 手性色譜柱(DAICEL 公司生產(chǎn))流動相乙腈異丙醇二乙胺(三者體積比82 92 18 8 0. 1 0. 2 ； 并優(yōu)選 85 15 0. 1)
流速0.3 1. 2ml/min (優(yōu)選 1. Oml/min)，進樣量5μ 1。柱溫30 40°C (優(yōu)選 40°C )。2.溶液的制備供試品溶液精密稱取鹽酸帕洛諾司原料25mg，置25ml量瓶中，加流動相適量使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得。對照溶液精密量取供試品溶液1ml，置IOOml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。系統(tǒng)適用性溶液精密量取鹽酸帕洛諾司瓊原料與S. R、R. S、R. R型異構(gòu)體適量， 用流動相溶解并稀釋成含鹽酸帕洛諾司瓊原料(S. S)和R. R型異構(gòu)體分別為 ομ g/ml、含 S. R、R. S型異構(gòu)體分別為5 μ g/ml的溶液。3.方法驗證3. 1方法的專屬性考察3. 1. 1分離度試驗取系統(tǒng)適用性溶液5 μ 1，注入高效液相色譜儀，記錄譜圖，出峰順序為R. R、S. R、 S. S、R. S，相鄰峰之間的分離度符合要求，均大于1. 8 (見附圖1)。3. 1.2 檢測限將系統(tǒng)適用性溶液稀釋至異構(gòu)體峰的信噪比3 < S/N < 5，溶液中SR和RS的濃度為 0. 18 μ g/ml。3.2樣品測定對鹽酸帕洛諾司瓊?cè)线M行檢測，結(jié)果本品中S. R、R. S、R. R型異構(gòu)體均未檢出，但很明顯，四種異構(gòu)體達到巧妙地分離，多次驗證了分析方法的合理性和可靠性。
權(quán)利要求
1.一種同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法，四種光學(xué)異構(gòu)體分別為 S. S、S. R、R. S、R. R ；其特征在于它包括采用高效液相色譜法對鹽酸帕洛諾司瓊光學(xué)異構(gòu)體進行拆分；其中包括OD-H手性色譜柱，流動相為乙腈異丙醇二乙胺；三者體積比為 82 92 18 8 0. 1 0. 2，柱溫為 30 40°C。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法，其特征在于所述的OD-H手性色譜柱，流動相為乙腈異丙醇二乙胺；三者體積比為 85 15 0.1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法，其特征在于所述的柱溫為40°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法，其特征在于所述高效液相色譜法中流速為0. 3 1. 2ml/min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法，其特征在于所述高效液相色譜法中檢測波長為220nm。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種同時測定鹽酸帕洛諾司瓊四種光學(xué)異構(gòu)體的方法，四種光學(xué)異構(gòu)體分別為S.S、S.R、R.S、R.R；其特征在于它包括采用高效液相色譜法對鹽酸帕洛諾司瓊光學(xué)異構(gòu)體進行拆分；其中包括OD-H手性色譜柱，流動相為乙腈∶異丙醇∶二乙胺；三者體積比為82～92∶18～8∶0.1～0.2，柱溫為30～40℃。所述高效液相色譜法中流速為0.3～1.2ml/min。所述高效液相色譜法中檢測波長為220nm。該方法簡單、方便實用。能快速達到同時測定分離測定四種光學(xué)異構(gòu)體的目的，為鹽酸帕洛諾司瓊原料及制劑的質(zhì)量控制提供依據(jù)，更便于該新藥質(zhì)控。
文檔編號C07B57/00GK102207494SQ201010142389
公開日2011年10月5日 申請日期2010年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2010年3月31日
發(fā)明者嚴(yán)啟新, 唐田, 李勇, 李姿, 陳萍, 高媛 申請人:深圳海王藥業(yè)有限公司