專利名稱：：方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及通過(guò)利用酶降解固醇糖苷(sterylglycoside)來(lái)降低油或脂(fat)(包括生物燃料底物，如生物柴油底物)和/或生物燃料(包括生物柴油)中的固醇糖苷的量的方法。本發(fā)明還涉及通過(guò)本發(fā)明的方法產(chǎn)生的油或脂(包括生物燃料底物，例如生物柴油底物)或生物燃料(包括生物柴油)。
背景技術(shù)：
：最近對(duì)能源安全和全球變暖的擔(dān)憂使得生物燃料作為可再生能源的應(yīng)用越來(lái)越受到關(guān)注。生物柴油已經(jīng)產(chǎn)生15-20年，并且直至最近仍主要在歐洲大多由菜籽油生產(chǎn)。近年，美國(guó)生物柴油的生產(chǎn)顯著增加。隨著美國(guó)生物柴油生產(chǎn)的擴(kuò)大，越來(lái)越多量的大豆油(和/或含有不同量(有時(shí)為較少量)固醇糖苷的其它油)被用作生產(chǎn)生物柴油的原料。最近意識(shí)到由含有固醇糖苷的油制備的生物柴油和生物柴油混合物(biodieselblend)可能帶來(lái)問題。例如，生物燃料中存在的固醇糖苷可能引起生物燃料中產(chǎn)生沉淀，這是不期望的，因?yàn)樵摮恋砜赡芤馂V器堵塞和/或?qū)е氯紵撋锶剂系陌l(fā)動(dòng)機(jī)停止。沉淀可以是固醇糖苷沉淀或者也可以是固醇糖苷與生物燃料中的其它成分組合的沉淀。已經(jīng)提出，固醇糖苷沉淀可加重生物燃料中其它成分的沉淀和/或聚集。固醇糖苷在貯存過(guò)程中經(jīng)過(guò)數(shù)周可沉淀。因此，雖然新生產(chǎn)的生物柴油可以滿足質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，但在貯存數(shù)周后生物柴油可能不能夠通過(guò)濾器測(cè)試。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在生物燃料(包括生物柴油)的生產(chǎn)過(guò)程中不易除去固醇糖苷。生物柴油生產(chǎn)商已經(jīng)試圖通過(guò)額外的過(guò)濾步驟或通過(guò)離心克服這些難題。W02007/076163涉及利用特定的過(guò)濾方法除去固醇糖苷。具體而言，W02007/076163公開了通過(guò)添加吸附劑、助濾劑、硼酸、皂(soap)、蔗糖、糖(sugar)、葡萄糖、氯化鈉、檸檬酸、硅酸鎂、粘土、硅藻土、卵磷脂、顆粒粘土、顆粒葡萄糖、顆粒糖、蛋白、組織化植物蛋白、碳、纖維素、包含硼酸的溶液、硅水凝膠及其組合來(lái)除去生物柴油中的固醇糖苷的方法，這些物質(zhì)聲稱能夠除去生物柴油中的固醇糖苷。這種方法的一個(gè)缺點(diǎn)是該方法引入了可能費(fèi)錢和/或耗時(shí)的額外的過(guò)濾步驟。通過(guò)過(guò)濾或離心除去固醇糖苷的另一個(gè)缺點(diǎn)是在能夠從油中除去固醇糖苷之前可能必需等待固醇糖苷沉淀和/或聚集。本發(fā)明旨在克服與生物燃料中存在的固醇糖苷相關(guān)的難題。發(fā)明概述本發(fā)明的各方面體現(xiàn)于權(quán)利要求以及以下描述中。令人驚奇地，發(fā)現(xiàn)通過(guò)使用能夠水解固醇糖苷和/或?；檀继擒罩械奶擒真I的酶能夠除去油或脂(例如生物燃料底物，如生物柴油底物)中的固醇糖苷，特別地，所述酶可以為本文定義的糖苷酶，例如β-葡糖苷酶和/或淀粉葡糖苷酶。4發(fā)明詳述本發(fā)明第一方面提供了降低油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料中的固醇糖苷的量(或除去固醇糖苷)的方法，所述方法包括將一種或多種酶和包含固醇糖苷的油或脂混合；從而使所述一種或多種酶降解所述固醇糖苷。本發(fā)明第二方面提供了一種或多種酶在油或脂(例如生物燃料底物)中用于降低固醇糖苷的量(或除去固醇糖苷)的應(yīng)用。本發(fā)明第三方面提供了通過(guò)本發(fā)明的方法可獲得的(優(yōu)選獲得的)一種或多種油或脂(例如生物燃料底物)或生物燃料。本發(fā)明第四方面提供了一種或多種油或脂(例如生物燃料底物)或生物燃料，其中所述油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料的固醇糖苷的量與沒有經(jīng)過(guò)本發(fā)明的酶處理的相當(dāng)?shù)?comparable)油或脂相比降低。本發(fā)明另一方面提供了用于生產(chǎn)生物燃料的酶組合物，所述酶組合物包含一種或多種能夠水解固醇糖苷和/或?；檀继擒罩械奶擒真I的酶，合適地，所述酶組合物包含一種或多種葡糖苷酶，合適地，所述酶組合物包含一種或多種β-葡糖苷酶，合適地，所述酶組合物包含一種或多種淀粉葡糖苷酶。合適地，在本發(fā)明方法和/或應(yīng)用中使用的一種或多種酶可以為以下酶中的一種或多種能夠進(jìn)行糖苷鍵裂解的酶，尤其是能夠進(jìn)行固醇糖苷和/或?；檀继擒罩械奶擒真I的裂解的酶，能夠進(jìn)行以下反應(yīng)的酶；糖苷酶(Ε.C.3.2.1.X)，如β-葡糖苷酶、淀粉葡糖苷酶(Ε.C.3.2.1.3)。合適地，用于本發(fā)明的一種或多種酶可以為以下酶中的一種或多種能夠水解固醇糖苷和/或?；檀继擒罩械奶擒真I的酶。合適地，用于本發(fā)明的一種或多種酶可以為以下酶中的一種或多種葡糖苷酶，如β-葡糖苷酶或淀粉葡糖苷酶或具有淀粉葡糖苷酶活性的另外的酶。在一個(gè)實(shí)施方式中，適合用在本發(fā)明中的酶可以為果膠酶GrindamylCa150(可獲自DaniscoA/S)。不期望受理論約束，認(rèn)為GrindamylCa150是除了果膠酶活性之外還具有多種副活性的酶制劑。這些副活性之一可以為葡糖苷酶活性。不期望受理論約束，認(rèn)為就是這種β-葡糖苷酶副活性使所述酶組合物GrindamylCa150能夠水解固醇糖苷和/或酰化固醇糖苷中的糖苷鍵。適合本發(fā)明使用的酶可以為淀粉葡糖苷酶AMG8000(可獲自DaniscoA/S)。β-谷固醇(豆固-5-烯-3β-醇)在一個(gè)實(shí)施方式中，淀粉葡糖苷酶或能夠進(jìn)行固醇糖苷和/或?；檀继擒罩械奶擒真I的裂解的酶與油或脂肪(例如生物燃料底物)、水和能夠進(jìn)行油或醇的酯交換的酶混合ο在一個(gè)實(shí)施方式中，合適的油或脂(例如生物燃料底物)可以為生物柴油底物(即適合形成生物柴油的油或脂)。在一個(gè)實(shí)施方式中，合適的油或脂可以為生物燃料底物(如生物柴油底物)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，合適的油或脂可以為食品工業(yè)中使用的油或脂。在再一個(gè)實(shí)施方式中，可以將從中除去固醇糖苷和/或固醇糖苷含量降低的油或脂用作生物燃料底物和/或可以將其用在食品工業(yè)中。在一個(gè)實(shí)施方式中，油或脂(例如生物燃料底物，如生物柴油底物)可以為植物油或植物脂。在再一個(gè)實(shí)施方式中，油或脂(例如生物燃料底物，如生物柴油底物)可以為包含固醇糖苷的油或脂(合適地為植物油或植物脂)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，油或脂(例如生物燃料底物，如生物柴油底物)可以為選自以下組成的組的植物油菜籽油、芥花籽油(canolaoil)、大豆油、米糠油、棕櫚油、玉米油、棉籽油、向日葵油、紅花油、旱金蓮籽油(nasturtiumseedoil)、芥菜籽油、橄欖油、芝麻油、花生油、巴巴蘇堅(jiān)果油(babassunutoil)、蓖麻油、棕櫚仁油、低芥子酸菜籽油、羽扇豆油(lupinoil)、麻風(fēng)樹油、椰子油、亞麻籽油、月見草油、霍霍巴油、非洲酪脂樹堅(jiān)果油(sheanutoil)或亞麻薺油。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選油或脂(例如生物燃料底物，如生物柴油底物)可以為選自以下組成的組的植物油菜籽油、芥花籽油、大豆油、米糠油、棕櫚油、玉米油、棉籽油和向日葵油。在一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，生物燃料可以為生物柴油。在一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，所述方法可以進(jìn)一步包括脫膠步驟，例如水-脫膠步馬聚ο本發(fā)明使用的“水-脫膠步驟”通常可以通過(guò)將0.5-3%w/w的熱水和溫(60-900C)原油(crudeoil)混合而進(jìn)行。通常的處理時(shí)間為30-60分鐘。所述水-脫膠步驟除去當(dāng)水合時(shí)在油中變得不溶的磷脂和粘膠。所述水合磷脂和膠可以通過(guò)沉淀、過(guò)濾或離心(離心為最常用的操作)而從油中分離。所述水-脫膠步驟的主要目的是從油中分離水合磷脂。在本發(fā)明中上述將熱水混合在油中廣義應(yīng)理解為根據(jù)本領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)的水-脫膠方法將含水溶液混入油中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法可以進(jìn)一步包括酶促脫膠步驟在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法可以包括其中將水加入到油或脂(如生物燃料底物)中的酶促脫膠步驟。合適地，在酶促脫膠步驟過(guò)程中加入的水量可以為油重量的約0.1%-約5%(通常為約2%w/w酶/油)。合適地，在脫膠步驟(例如水脫膠步驟和/或酶促脫膠步驟)之前、過(guò)程中和/或之后利用本發(fā)明的一種或多種酶減少固醇糖苷的量。換而言之，所述一種或多種酶(如葡糖苷酶，如淀粉葡糖苷酶)與油或脂(如生物燃料底物)的混合發(fā)生在脫膠步驟(例如水脫膠步驟和/或酶促脫膠步驟)之前、過(guò)程中和/或之后。6在再一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法可以包括酯交換步驟。在一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，所述方法可以進(jìn)一步包括離心步驟。合適地，在離心步驟之前、過(guò)程中和/或之后利用本發(fā)明的一種或多種酶減少固醇糖苷的量。換而言之，所述一種或多種酶(如葡糖苷酶，如淀粉葡糖苷酶)與油或脂(如生物燃料底物)的混合發(fā)生在離心之前、過(guò)程中和/或之后。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述方法可以在約30°C_70°C進(jìn)行，合適地在約40°C_60°C進(jìn)行，合適地在約45°C-55°C進(jìn)行，合適地在約50°C進(jìn)行。合適地，所述方法可以在原油(粗油)上進(jìn)行。合適地，所述方法可以在將油或脂(例如生物燃料底物，如生物柴油底物)加工成生物燃料(或生物柴油)的過(guò)程中，在油或脂(例如生物燃料底物，如生物柴油底物)上進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，可以在油的精煉過(guò)程中將一種或多種酶與油(優(yōu)選植物油，如生物燃料底物)混合。當(dāng)油或脂(例如生物燃料底物)經(jīng)歷脫膠步驟時(shí)，可以在將水加入到油或脂(例如生物燃料底物)中的脫膠步驟的過(guò)程中加入酶。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以在酶促脫膠步驟的過(guò)程中加入所述酶。當(dāng)油或脂(例如生物燃料底物)經(jīng)歷酯交換步驟(可以利用催化油和甲醇之間的酯交換的酶進(jìn)行該步驟)時(shí)，還可以在酶促酯交換步驟過(guò)程中將本發(fā)明的酶加入到油或脂中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，可以將一種或多種酶和水與油或脂(優(yōu)選植物油，如生物燃料底物)混合。在另一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，可以在油進(jìn)行酶促脫膠步驟的同時(shí)將一種或多種酶與所述油或脂(優(yōu)選植物油，如生物燃料底物)混合，合適地，在所述酶促脫膠步驟中將水加入到油或脂(例如生物燃料底物)中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，可以在油或脂進(jìn)行酯交換(優(yōu)選酶促酯交換)步驟的同時(shí)將一種或多種酶與所述油或脂(優(yōu)選植物油，如生物燃料底物)混合。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選與未經(jīng)處理的油或脂(例如生物燃料底物)(即相同的油或脂(如生物燃料底物)但未經(jīng)本發(fā)明方法處理)相比，通過(guò)本發(fā)明的方法可獲得(優(yōu)選獲得)的油或脂(例如生物燃料底物)所含的固醇糖苷較少。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選與未經(jīng)處理的生物燃料(例如生物柴油)(即相同生物燃料但未經(jīng)本發(fā)明方法處理)相比，通過(guò)本發(fā)明的方法可獲得(優(yōu)選獲得)的生物燃料(例如生物柴油)所含的固醇糖苷較少。不期望受理論約束，本發(fā)明使用的酶可以通過(guò)水解固醇糖苷以形成游離的固醇和糖或?；?取決于固醇糖苷是否被?；?而除去固醇糖苷。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明可以包括除去油或脂中形成的任何游離固醇的步驟。例如，可以在進(jìn)一步加工油或脂的過(guò)程中、之前或之后除去游離固醇。當(dāng)油或脂用在食品工業(yè)中時(shí)，這可能尤其有益。合適地，本發(fā)明的方法和應(yīng)用除去油或脂(例如生物燃料底物)中的至少20%、50^^80%的固醇糖苷。7測(cè)定油或脂(例如生物燃料底物)或生物燃料中的固醇糖苷的量可以通過(guò)任何常規(guī)方法測(cè)定油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料中的固醇糖苷的量?？梢酝ㄟ^(guò)，例如Phillipsetal.(2005),JournalofFoodLipids,12(2),124-140中描述的固相提取法和氣相色譜法測(cè)定油或脂中的固醇糖苷量。可以利用標(biāo)準(zhǔn)的濾器堵塞試驗(yàn)，如D2068"StandardTestMethodforFilterBlockingTendencyofDistillateFuelOils”中的ASTM法測(cè)定生物柴油的質(zhì)量。當(dāng)使用所述標(biāo)準(zhǔn)濾器阻塞試驗(yàn)測(cè)定時(shí)，根據(jù)本發(fā)明除去固醇糖苷的生物柴油的質(zhì)量好于相當(dāng)?shù)膶?duì)照生物柴油(與本發(fā)明的相同，只是不經(jīng)歷本發(fā)明的方法)。當(dāng)指油或脂(例如生物燃料底物)中和/或生物燃料中的固醇糖苷量“減少”或“降低”時(shí)，術(shù)語(yǔ)“減少”或“降低”表示與相當(dāng)?shù)挠突蛑?例如生物燃料底物)或生物燃料(除了沒有加入本發(fā)明的酶外，其與所請(qǐng)求保護(hù)的生物燃料底物或生物燃料相同)相比。優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明提供了用于除去油和脂(尤其是用作生物燃料底物或在食品工業(yè)中使用的油或脂)和/或生物燃料(如生物柴油)中的固醇糖苷的簡(jiǎn)便且成本合算的方法。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是可以在固醇糖苷沉淀前除去油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料(如生物柴油)中的固醇糖苷。本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是可以在加工過(guò)程中除去油或脂(例如生物燃料底物)中的固醇糖苷。本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是無(wú)需為了除去油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料(如生物柴油)中的固醇糖苷而進(jìn)行離心或過(guò)濾步驟。本發(fā)明的再一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是其是有效除去油或脂(例如生物燃料底物和/或食物油或脂)和/或生物燃料中的固醇糖苷的方法。本發(fā)明的再一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是不需要用于除去油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料(如生物柴油)中的固醇糖苷的專門的或昂貴的離心或過(guò)濾設(shè)備。本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是產(chǎn)生的生物燃料(尤其是生物柴油)即使在貯存(如貯存數(shù)周)后仍能夠通過(guò)“濾器阻塞試驗(yàn)”。固醇糖苷固醇糖苷由與一個(gè)固醇分子的羥基相連的一個(gè)碳水化合物單元組成。所述固醇部分可以為菜油固醇、豆固醇、谷固醇、菜子固醇和二氫谷固醇。所述糖部分可以由葡萄糖，木糖，甚至是阿拉伯糖(Graminae)組成。當(dāng)所述糖部分為葡萄糖時(shí)，固醇糖苷可以指固醇葡糖苷(sterylglucoside)0在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)固醇糖苷意在涵蓋固醇葡糖苷。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述固醇糖苷為固醇葡糖苷。所述糖部分可以通過(guò)糖苷鍵與固醇部分連接。所述糖部分可以在碳6位置被?；９檀继擒找怎；臀歹；问教烊淮嬖谟谟秃椭?尤其是植物油和脂)中。當(dāng)為酰化形式時(shí)，其極易溶于油。在本發(fā)明中，術(shù)語(yǔ)“固醇糖苷”表示?；臀歹；墓檀继擒諆烧?。類似地，本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“固醇葡糖苷”表示?；臀歹；墓檀计咸擒諆烧?。在用于將油或脂(例如生物燃料底物)轉(zhuǎn)化成生物燃料(例如生物柴油)的步驟的過(guò)程中，?；檀继擒毡晦D(zhuǎn)化成未?；檀继擒眨歹；檀继擒盏娜埸c(diǎn)高且較不易溶于生物柴油或柴油燃料混合物中。固醇糖苷(例如固醇葡糖苷)能夠沉淀，以在燃料中形成分散的細(xì)固體顆粒，該細(xì)固體顆粒通過(guò)簡(jiǎn)單加熱不能通過(guò)堵塞的燃料濾器。這些顆粒還可促進(jìn)其它燃料組分的結(jié)晶，這可惡化冷結(jié)晶組分(如單甘油酯)的問題。固醇糖苷可以在任何溫度下(不僅僅在冷溫度下)形成聚集物。固醇糖苷在生物燃料中的水平即使很低(例如10-90ppm)也可以形成聚集物。固醇糖苷具有約240°C的高熔點(diǎn)，因此不能簡(jiǎn)單地通過(guò)熔解除去包含固醇糖苷的聚集物。植物原油中固醇糖苷的量是可變的。大豆原油中固醇糖苷的量高于通常用于制造生物燃料的其它一些油，如菜籽油、玉米油、棉油或向日葵油。僅作為示例，將不同植物油中存在的固醇糖苷的水平示于下表植物油固醇糖苷的水平(ppm)大豆油2300玉米油500向曰葵油300生物燃料在本發(fā)明中將生物燃料(還可以指農(nóng)作物燃料(agrofuel或agrifuel))寬泛地定義為包含或源自最近死亡的生物材料(最常見的是植物)的固體、液體或氣體燃料。這使其與源自死亡時(shí)間很長(zhǎng)的生物材料的石油燃料不同。理論上，可以由任意(生物)碳源產(chǎn)生生物燃料。目前最常見的是捕獲太陽(yáng)能的光合植物。多種不同的植物和源自植物的物質(zhì)都可用于生產(chǎn)生物燃料。全球都在使用生物燃料，且生物燃料工業(yè)正在歐洲、亞洲和美洲擴(kuò)大。最常使用的生物燃料為用于汽車運(yùn)輸?shù)囊后w燃料?？稍偕锶剂系氖褂媒档土藢?duì)石油的依賴性，并增強(qiáng)了能源安全。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，本發(fā)明教導(dǎo)的生物燃料為液體燃料。所述生物燃料優(yōu)選用于運(yùn)輸?shù)囊后w生物燃料。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，所述生物燃料為生物柴油。油或脂合適地，油或脂可以為植物油或脂或經(jīng)加工的植物油或脂。合適地，用于本發(fā)明的油或脂(優(yōu)選植物油或脂)可以為包含固醇糖苷的任意油或脂(優(yōu)選植物油或脂)。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述油或脂為包含至少IOppm固醇糖苷的油或脂。用于本發(fā)明的植物油或脂可以選自由以下組成的組中的一種或多種菜籽油、芥花籽油、大豆油、米糠油、棕櫚油、玉米油、棉籽油、向日葵油、紅花油、旱金蓮籽油、芥菜籽油、橄欖油、芝麻油、花生油、巴巴蘇堅(jiān)果油、蓖麻油、棕櫚仁油、低芥子酸菜籽油、羽扇豆油、麻風(fēng)樹油、椰子油、亞麻籽油、月見草油、霍霍巴油、非洲酪脂樹堅(jiān)果油或亞麻薺油。用于本發(fā)明的植物油或脂可以選自由以下組成的組中的一種或多種菜籽油、大豆油(也稱為豆油)、向日葵油、芥花籽油、棕櫚油、米糠油、棉油和玉米油。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，所述植物油為大豆油。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，所述油可以為源自藻類的油。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述油或脂(優(yōu)選植物油或脂)適合用于生產(chǎn)生物燃料，如生物柴油，并由此被分別認(rèn)為是“生物燃料底物”或“生物柴油底物”。在一些實(shí)施方式中，所述油或脂可以為動(dòng)物脂和/或油。所述油或脂可以為原油或者可以為經(jīng)加工的油。本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“經(jīng)加工的油”表示已經(jīng)經(jīng)過(guò)一些形式的加工(例如精煉、漂白、脫膠、酯交換和/或除臭)的油。在一些實(shí)施方式中，所述油或脂可以為氫化油、油或脂衍生物，或者油或脂的一部分。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，所述油或脂為原油(優(yōu)選為植物原油)和/或經(jīng)加工的油(優(yōu)選經(jīng)加工的植物油)。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，所述油或脂用于生產(chǎn)生物燃料，并由此被認(rèn)為是生物燃料底物，合適地為生物柴油底物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述油或脂可用于生產(chǎn)用于食品工業(yè)的食用油或脂，在這種情況下，所述油或脂被認(rèn)為是可食用的油或脂。生物燃料底物本發(fā)明使用的生物燃料底物表示可以被轉(zhuǎn)化成生物燃料(優(yōu)選液體生物燃料)的任何物質(zhì)。合適地，所述生物燃料底物為最近死亡的生物物質(zhì)，最常見的為植物。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，所述生物燃料底物為油或脂。生物柴油生物柴油與常規(guī)的石油柴油類似，但其由植物或動(dòng)物脂和油產(chǎn)生。目前生物柴油越來(lái)越受歡迎，原因是其被作為對(duì)環(huán)境的損害可能比化石燃料小的可再生的碳中性燃料。生物柴油可以被用作用于柴油發(fā)動(dòng)機(jī)的石油柴油的替代燃料，并且通常被用作石油柴油的添加物。純生物柴油被分類為B100，但其經(jīng)常與石油柴油混合，由此含20%生物柴油的柴油為B20。多數(shù)生物柴油通常在催化劑的存在下，由三甘油酯(如油和/或脂)和醇的酯交換產(chǎn)生，從而形成酯和甘油。所述催化劑通常為氫氧化鈉或氫氧化鉀。由于甲醇和乙醇是商業(yè)生物柴油生產(chǎn)中最常用的醇，商業(yè)生產(chǎn)的多數(shù)生物柴油都包含脂肪酸的甲酯或乙酯。生物柴油為生物燃料，并且其化學(xué)名稱為脂肪酸甲(或乙)酯(FAME)。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述生物柴油可以為由混合有石油柴油的植物和/或動(dòng)物脂或油生產(chǎn)的生物柴油。在一個(gè)實(shí)施方式中，優(yōu)選地，本發(fā)明所指的所述生物燃料為生物柴油。食物在一個(gè)實(shí)施方式中，所述油或脂可以被用作食物，或用在食物的制備中。在本發(fā)明10中使用的術(shù)語(yǔ)“食物”具有寬泛的含義且涵蓋人用食物和動(dòng)物用食物(即飼料)。在優(yōu)選方面，所述食物用于人消費(fèi)。所述食物可以為溶液或固體的形式，這取決于應(yīng)用和/或使用的形式和/或施用的形式?！矫妫鶕?jù)本發(fā)明制備的油或脂可以用于選自以下一種或多種的食品中蛋，基于蛋的產(chǎn)品，包括但不限于蛋黃醬、沙拉調(diào)料、沙司、冰淇淋、改良的蛋黃和由其制造的產(chǎn)品；焙烤食品，包括面包、蛋糕、甜面團(tuán)產(chǎn)品(sweetdoughproduct)、疊層面團(tuán)產(chǎn)品(laminateddough)、液態(tài)奶蛋糊、松餅、炸面圈、餅干、薄脆餅干和曲奇餅；糖果，包括巧克力、冰糖、焦糖、halawa、口香糖(包括不含糖的口香糖和加糖變甜的口香糖，泡泡糖、軟泡泡糖、橡皮糖和布丁；冷凍產(chǎn)品，包括果汁冰糕，優(yōu)選冷凍乳制品，包括冰淇淋和牛奶凍；乳制品，包括干酪、黃油、乳、咖啡奶精、生奶油、乳蛋糕乳脂、乳飲料和酸乳酪；幕斯、攪打植物奶油(whippedvegetablecream)；食用油和脂、攪打起泡和不起泡的產(chǎn)品、水包油乳液、油包水乳液、人造黃油、起酥油和涂抹食品(spreads)，包括低脂和超低脂涂抹食品；調(diào)味品、蛋黃醬、蘸醬、基于奶油的沙司、基于奶油的湯、飲料、調(diào)味乳液和沙司。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述油或脂可以為食用油或脂、攪打起泡和不起泡的產(chǎn)品、水包油乳液、油包水乳液、人造黃油、起酥油和涂抹食品(spreads)，包括低脂和超低脂涂抹食PΡΠO食品組分可以將本發(fā)明的組合物用作食品組分。本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“食物組分”包括可以加入到食品中或者為食品的制品。本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)食品組分還指能夠以低水平用在需要乳化、凝膠化、組織化(texturising)、穩(wěn)定化、懸浮、成膜和結(jié)構(gòu)化、保持多汁并改善口感的多種產(chǎn)品中的制品。所述食品組分可以是液體或固體的形式，這取決于應(yīng)用和/或使用的形式和/或施用的形式。本發(fā)明的酶本發(fā)明的酶是指能夠切斷固醇糖苷和/或酰化固醇糖苷的糖苷鍵的酶。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述酶可以被稱為“糖苷酶”。本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“糖苷酶”可以指能夠裂解固醇糖苷和/或酰化固醇糖苷的糖苷鍵的酶，優(yōu)選在以下教導(dǎo)的測(cè)試條件下(使用固醇糖苷和/或酰化固醇糖苷底物)能夠切斷固醇糖苷和/或?；檀继擒盏奶擒真I的酶。如果在以下教導(dǎo)的測(cè)試條件下，糖苷酶水解固醇糖苷底物中的固醇糖苷，則糖苷酶被認(rèn)為是適合本發(fā)明使用的酶((如糖苷酶)。禾艮據(jù)本發(fā)日月測(cè)丨定Sl是否裂解固酉享_苷禾Π/或酰化固酉苷鍵的實(shí)驗(yàn)利用以下步驟制備固醇糖苷底物(可以為?；幕蛭歹；?在7ml微量玻璃瓶(dramglass)中稱量1.Omg固醇糖苷；加入10μ199%的乙醇；加入200μ150mMHEPES緩沖液，pH7；加入含0.4%TritonXlOO的300μ1IOmMHEPES緩沖液。通過(guò)在40°C攪動(dòng)30分鐘分散固醇糖苷。利用感興趣的酶按照以下方法處理5Χ100μ1固醇糖苷底物樣品。表1樣品號(hào)12_固醇糖苷底物μ100100/Kμ110感興趣的酶μ10將100μ1固醇糖苷底物轉(zhuǎn)移到Eppendorf試管中并置于40°C的振蕩孵箱中。加入酶或水，并將反應(yīng)混合物在40°C溫育16小時(shí)。利用Iml氯仿萃取反應(yīng)混合物。分離氯仿相并在氮?dú)饬飨抡舾?。將樣品重新溶解?00μ1氯仿甲醇O1)中，然后通過(guò)HPTLC分析(按照實(shí)施例1中的教導(dǎo))。為了證明固醇的形成，還可以利用植物固醇為對(duì)照物，通過(guò)GLC(按照實(shí)施例1中的教導(dǎo))分析樣品。利用感興趣的酶處理固醇糖苷時(shí)由固醇糖苷形成的游離固醇證實(shí)了所述酶能夠裂解固醇糖苷和/或酰化固醇糖苷的糖苷鍵，并且能夠用在本發(fā)明中。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，所述酶能夠裂解(或者可以裂解)固醇葡糖苷和/或酰化固醇葡糖苷的糖苷鍵。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述酶可以為“葡糖苷酶”。本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“葡糖苷酶”可以表示優(yōu)選在以下教導(dǎo)的試驗(yàn)條件下，能夠裂解固醇葡糖苷和/或?；檀计咸擒罩械奶擒真I的酶。禾艮據(jù)本發(fā)日月測(cè)丨定Sl是否裂解固醇苷禾Π/或?；逃舷砥蟔苷苷鍵的實(shí)利用以下步驟制備固醇葡糖苷底物(其可以為酰化的或未?；?，例如來(lái)自Matreya,Pennsylvania的固醇葡糖苷98%在7ml微量玻璃瓶(dramglass)中稱量1.Omg固醇葡糖苷；加入10μ199%的乙醇；加入200μ150mMHEPES緩沖液，pH7；加入含0.4%TritonX100的300μ1IOmMHEPES緩沖液。通過(guò)在40°C攪拌30分鐘分散固醇葡糖苷。利用感興趣的酶按照以下方法處理5Χ100μ1固醇葡糖苷底物的樣品。表1樣品號(hào)12_固醇葡糖苷底物μ100100/Kμ110感興趣的酶μ10將100μ1固醇葡糖苷底物轉(zhuǎn)移到Eppendorf試管中并置于40°C的振蕩孵箱中。加入酶或水，并將反應(yīng)混合物在40°C溫育16小時(shí)。利用Iml氯仿萃取反應(yīng)混合物。分離氯仿相并在氮?dú)饬飨抡舾伞?2將樣品重新溶解在200μ1氯仿甲醇O1)中，然后通過(guò)HPTLC分析(按照實(shí)施例1中的教導(dǎo))。為了證實(shí)固醇的形成，還可以利用植物固醇為對(duì)照物，通過(guò)GLC(按照實(shí)施例1中的教導(dǎo))分析樣品。利用感興趣的酶處理固醇葡糖苷時(shí)由固醇葡糖苷形成的游離固醇證實(shí)了所述酶能夠裂解固醇葡糖苷和/或?；檀计咸擒盏奶擒真I，并且能夠用在本發(fā)明中。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明使用的“糖苷酶”包括“葡糖苷酶”。本發(fā)明使用的術(shù)語(yǔ)“葡糖苷酶”表示能夠進(jìn)行以下反應(yīng)(其中固醇葡糖苷為?；蛭歹；男问?的酶在一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，所述酶可以為葡糖苷酶。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述酶可以為糖苷酶(如葡糖苷酶)或淀粉葡糖苷酶。在一個(gè)實(shí)施方式中，用于本發(fā)明的酶可以為β-糖苷酶(如β-葡糖苷酶)。合適地，如果所述酶為β-糖苷酶(如β-葡糖苷酶)，則所述酶可以為以下酶中的一種或多種固醇基-β-葡糖苷酶(Ε.C.3.2.1.104)；1，3-β-葡糖苷酶(Ε.C.3.2.1.58)和/或葡聚糖1，4β-葡糖苷酶(Ε.C.3.2.1.74)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述糖苷酶為淀粉葡糖苷酶(Ε.C.3.2.1.3(根據(jù)國(guó)際生物化學(xué)和分子生物學(xué)聯(lián)盟命名委員會(huì)在1992年酶的命名和分類會(huì)議上的建議的酶命名法))。淀粉葡糖苷酶(EC.3.2.1.3)是高果糖玉米糖漿(HFCS)制造商使用的一種重要的工業(yè)用酶。在本發(fā)明中，淀粉葡糖苷酶還可以指葡聚糖1，4-α-葡糖苷。用于本發(fā)明的酶可以水解液化淀粉中的1，4-α鍵和1，6_α鍵和/或β-鍵。在利用例如淀粉葡糖苷酶水解的過(guò)程中，以逐步的方式將葡萄糖單元從底物分子的非還原末端除去。水解速度取決于鍵的類型以及鏈長(zhǎng)度，即水解1，4_α鍵比水解1，6_α鍵容易，并且麥芽三糖和麥芽糖的斷裂速度小于更長(zhǎng)鏈的寡糖。作為用于本發(fā)明的酶的主要活性或副活性，其可以裂解固醇糖苷的糖苷鍵。用于本發(fā)明的一個(gè)合適的酶可以為真菌的淀粉葡糖苷酶，如可獲自(獲自)真菌黑曲霉(Aspergillusniger)菌株的淀粉葡糖苷酶。適合本發(fā)明應(yīng)用的酶可以為天然存在的(和任選分離的)酶或經(jīng)過(guò)基因修飾的酶。糖苷酶(或適合本發(fā)明應(yīng)用的酶)的最佳pH可以為約3.0-約7.0，優(yōu)選約4.0-7.0，最佳溫度為約55°C-約80°C，合適地為約75°C。β-谷固醇(豆固-5-烯-30-醇)在一個(gè)實(shí)施方式中，合適的淀粉葡糖苷酶可以為AMG8000(可獲自DaniscoA/S-Denmark)0一些酶組合物(例如果膠酶組合物固體GrindamylCal50)可以具有糖苷酶活性(即能夠裂解固醇糖苷的糖苷鍵)。此類酶組合物的糖苷酶活性可以為副活性(次于主要(在此處為果膠酶)活性的活性)。因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，具有糖苷酶活性(即能夠裂解固醇糖苷的糖苷鍵)的酶可以為果膠酶組合物。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述具有糖苷酶活性的果膠酶可以為GrindamylCa150。所述用于本發(fā)明的酶(例如葡糖苷酶)可以以每千克油約0.Img-約50mg酶蛋白的劑量用于本發(fā)明，優(yōu)選以每千克油約Img-約IOmg酶蛋白的劑量用于本發(fā)明。脫膠食用油精煉的目的是除去影響質(zhì)量(例如味道、氣味和外觀)和耐儲(chǔ)性的不期望的雜質(zhì)。由于所述雜質(zhì)(游離脂肪酸、金屬離子、顏色化合物、香料、膠等)的多樣性，通常采用一系列的化學(xué)和物理性質(zhì)的工藝進(jìn)行精煉。傳統(tǒng)使用兩種工藝用于油的脫膠，即物理脫膠工藝和化學(xué)脫膠工藝。在所謂的化學(xué)精煉中，通過(guò)利用大大過(guò)量的NaOH進(jìn)行初始處理除去幾乎所有的游離脂肪酸量。同時(shí)，磷脂的含量也降低至通常低于IOppm的磷水平。隨后對(duì)油進(jìn)行漂白和除臭。所謂的物理精煉通常由水脫膠步驟和隨后的酸脫膠、中和、漂白、汽提(以除去游離脂肪酸和除臭)組成。與在物理精煉過(guò)程中使用酸脫膠不同，開發(fā)了使用酶促脫膠。所述酶促脫膠步驟是基于使用胰磷脂酶而開發(fā)的。由于該酶是不潔凈的(non-kosher)，因此磷脂酶最終被微生物磷脂酶Al(LecitaseUltra-Novozymes,Denmark)代替(OilMillGazetteer,Vol111July2005pp2_4)。所述酶促步驟與所述化學(xué)或物理脫膠步驟相比具有幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)，包括節(jié)省成本、產(chǎn)率高和對(duì)環(huán)境更加友好。所述酶促油脫膠步驟基于向已進(jìn)行水脫膠的油中添加磷脂酶。在W02006/008508中教導(dǎo)了脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶在食用油的酶促脫膠中的應(yīng)用。WO2006/008508教導(dǎo)了向水脫膠的油中添加脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶或者向原油中添加脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶而無(wú)需使油經(jīng)歷水脫膠步驟?！八撃z的油”通常可以通過(guò)常規(guī)的“水脫膠步驟”而獲得，該步驟包括將1-2%w/w的熱軟水和溫(70°C-90°C)原油(A0CS對(duì)脂和油的加工的介紹-表8-脫膠步驟-http//www,aocs.orR/meetinRs/education/mod3sample.pdf)。經(jīng)驗(yàn)規(guī)貝Ij是向原油中力口入的水量通常約等于原油中的磷脂量。通常的處理時(shí)間為30-60分鐘。所述水脫膠步驟除去了在水合時(shí)在油中變得不溶的磷脂和粘膠。所述水合磷脂和膠可以通過(guò)沉淀、過(guò)濾或離心(離心為更常用的操作)而從油中分離。所述水-脫膠步驟的主要目的是從油中分離水合磷脂。上述將熱水混合在油中在本發(fā)明中應(yīng)被廣義理解為根據(jù)本領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)的水-脫膠方法將含水溶液混合入油中。傳統(tǒng)的水脫膠步驟中將磷脂的主要部分去除在重的膠相中。在水脫膠步驟結(jié)束時(shí)，將油相與膠相分離。膠相雖然可以進(jìn)一步加工成商品，但其主要被視為油精煉的副產(chǎn)品(bi-product)0具有商業(yè)重要性的是油相。然而，由于磷脂可以為良好的乳化劑，因此在水脫膠過(guò)程中不可避免地?fù)p失一些油。本發(fā)明(例如添加一種或多種酶以除去固醇糖苷)可以與脫膠(例如化學(xué)脫膠、水脫膠或酶促脫膠)組合使用。為除去固醇糖苷所添加的所述一種或多種酶可以在脫膠步驟前、過(guò)程中或之后加入。與其它酶的組合合適地，本發(fā)明使用的酶(例如糖苷酶)可以與另外的酶組合使用。在一個(gè)實(shí)施方式中，合適地，本發(fā)明使用的酶(例如糖苷酶)可以與以下酶中的一種或多種組合使用具有脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶活性的酶(E.C.2.3.1.4；具有糖脂酶(glycolipase)活性的酶(E.C.3.1.1.26)，具有磷脂酶A2活性的酶(E.C.3.1.1.4)，具有磷脂酶Al活性的酶(E.C.3.1.1.32)。合適地，具有這些活性的酶是本領(lǐng)域熟知的，例如包括以下脂肪酶磷脂酶AlLECITASEULTRA(NovozymesA/S,Denmark)，磷脂酶A2(例如磷脂酶A2，來(lái)自Biocatalysts的LIP0M0D22L,來(lái)自Genencor的LIP0MAX和LysoMaxPLA2)，LIPOLASE(NovozymesA/S,Denmark)。在一些實(shí)施方式中，將用于本發(fā)明的酶(例如糖苷酶)和脂質(zhì)?；D(zhuǎn)移酶和/或磷脂酶(如磷脂酶Al、磷脂酶A2、磷脂酶B、磷脂酶C和/或磷脂酶D)組合可能是有益的。分離一方面，本發(fā)明使用的酶為回收的/分離的酶。因此，所述酶可以是分離的形式。術(shù)語(yǔ)“分離的”表示序列或蛋白至少基本不含至少一種其它組分，其中所述序列或蛋白與所述其它組分本質(zhì)上天然相關(guān)且天然存在。純化一方面，本發(fā)明使用的酶可以為純化的形式。術(shù)語(yǔ)“純化的”表示所述序列處于相對(duì)純的狀態(tài)，例如至少約51%的純度，或者至少約75%，或者至少約80%，或者至少約90%的純度，或者至少約95%的純度或者至少約98%的純度。下文將僅以示例的方式參考以下附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行描述。圖1表示與1)水、2)GrindamylCa150,3)AMG8000(DaniscoA/S)—起溫育的固醇糖苷(SG)的HPTLC結(jié)果。實(shí)施例1利用酶除去/降解固醇糖苷材料固醇葡糖苷，98%，來(lái)自Matreya，Pennsylvania。酶果膠酶GrindamylCal50(貨號(hào)1222616)淀粉葡糖苷酶AMG8000(貨號(hào)1205013)HPTLC點(diǎn)樣器(Applicator)CAMAG點(diǎn)樣器AST4。HPTLC板20XIOcm(Merckno.1.05641)使用前通過(guò)將色譜板在烤箱中于160°C干燥20-30分鐘活化色譜板。點(diǎn)樣使用AST4點(diǎn)樣器將8.0μ1溶解在氯仿甲醇O1)的萃取脂質(zhì)加到HPTLC板上。還向HPTLC板上加入0.1μ1、0·3μ1、0·5μ1、0·8μ1、1.5μ1已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)組分的標(biāo)準(zhǔn)溶液。運(yùn)行緩沖液1:Ρ-醚甲基叔丁醚(MTBE)乙酸(50501)點(diǎn)樣/洗脫時(shí)間12分鐘運(yùn)行緩沖液4氯仿甲醇水(65254)展開7cm，利用自動(dòng)展開室ADC2。衍生化液體(Derivatizationfluid)含6%乙酸銅的16%H3PO4洗脫后，將色譜板在烤箱于160°C干燥10分鐘，冷卻并浸入顯色液體中，然后在160°C再干燥5分鐘。通過(guò)視覺評(píng)價(jià)色譜板。GLC分析PerkinElmerAutosystem9000毛細(xì)管氣相色譜儀，其配備有WCOT熔凝硅石柱12.5mX0.25mmIDXO.1μ膜厚度5%苯甲基硅酮(phenyl-methyl-silicone)(CPSil8CB來(lái)自Chrompack)。載氣氦注射器PSSI冷分流注射(最初溫度50°C加熱到385°C)，體積1.0μ1檢測(cè)器FID:395°C爐程序(自2003年10月30日開始使用)123爐溫度，V.90280350等溫線，時(shí)間，分鐘.1010溫度比，°C/min.154樣品制備將萃取的樣品溶解于含有0.5mg/ml內(nèi)標(biāo)十七烷的0.5ml庚烷吡啶(21)中。將300μ1的樣品溶液移到鉗口瓶(crimpvial)中，添加300μIMSTFA(N-甲基N-三甲基甲硅烷基三氟乙酰胺(N-Methyl-N-trimethylsilyl-trifluoraceamid))，60°C反應(yīng)20分鐘。計(jì)算通過(guò)純化的參考物質(zhì)確定固醇的反應(yīng)因子。方法和結(jié)果利用以下步驟制備固醇葡糖苷底物在7ml微量玻璃瓶中稱量1.Omg固醇葡糖苷；加入10μ199%的乙醇；加入200μ150mMHEPES緩沖液，pH7；加入含0.4%TritonX100的300μ1IOmMHEPES緩沖液。通過(guò)在40°C攪拌30分鐘分散固醇葡糖苷。利用表1列出的多種酶按照以下方法處理5X100μ1固醇葡糖苷底物的樣品。表116樣品號(hào)_固醇葡糖苷底物水GrindamylCa150AMG8000，10%，在水中μμ1100100100μ110將100μ1固醇葡糖苷底物轉(zhuǎn)移到Eppendorf試管中并置于40°C的振蕩孵箱中。加入酶或水，并將反應(yīng)混合物在40°C溫育16小時(shí)。利用Iml氯仿萃取反應(yīng)混合物。分離氯仿相并在氮?dú)饬飨抡舾?。將樣品重新溶解?00μ1氯仿甲醇O1)中，然后通過(guò)HPTLC分析。TLC板的圖示于圖1。圖1的TLC色譜表明，果膠酶(GrindamylCa150)和淀粉葡糖苷酶(AMG8000)能夠產(chǎn)生保留時(shí)間與固醇相等的組分，這表明這些酶將固醇葡糖苷降解。為了證實(shí)固醇的形成，還利用植物固醇為對(duì)照物質(zhì)通過(guò)GLC對(duì)樣品進(jìn)行分析。GLC分析證實(shí)了游離固醇的形成，結(jié)果示于表2。表2固醇的GLC分析(基于固醇葡糖苷的量的百分?jǐn)?shù))樣品號(hào)酶處理固醇(％)GLC分析結(jié)果(表幻證實(shí)了利用果膠酶或淀粉葡糖苷酶處理固醇葡糖苷時(shí)由固醇葡糖苷形成游離固醇。上面說(shuō)明書中提及的所有公開的內(nèi)容包含在本文中作為參考。在不偏離本發(fā)明的范圍和精神的前提下，本發(fā)明方法和系統(tǒng)的不同修飾和改變對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是清楚的。盡管根據(jù)優(yōu)選的具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但是應(yīng)理解，本發(fā)明權(quán)利要求保護(hù)的范圍不應(yīng)該過(guò)度限于這些特殊的具體實(shí)施方案。事實(shí)上，對(duì)于生物化學(xué)領(lǐng)域和生物工程學(xué)領(lǐng)域或相關(guān)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員是顯而易見的實(shí)現(xiàn)發(fā)明的所述方式的各種修飾都意圖包含在權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.降低油或脂和/或生物燃料中的固醇糖苷的量的方法，所述方法包括將一種或多種酶和包含固醇糖苷的油或脂混合；從而使所述一種或多種酶降解所述固醇糖苷。2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述一種或多種酶包括糖苷酶。3.如權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，所述一種或多種酶包括淀粉葡糖苷酶和/或β-葡糖苷酶。4.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述油為植物油。5.如權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述油選自菜籽油、芥花籽油、大豆油、米糠油、棕櫚油、玉米油、棉籽油、向日葵油、紅花油、旱金蓮籽油、芥菜籽油、橄欖油、芝麻油、花生油、巴巴蘇堅(jiān)果油、蓖麻油、棕櫚仁油、低芥子酸菜籽油、羽扇豆油、麻風(fēng)樹油、椰子油、亞麻籽油、月見草油、霍霍巴油、非洲酪脂樹堅(jiān)果油或亞麻薺油。6.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述生物燃料為生物柴油。7.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法進(jìn)一步包括脫膠(優(yōu)選酶促脫膠)步驟。8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述固醇糖苷在所述脫膠步驟之前、過(guò)程中或之后被降解。9.如權(quán)利要求7或8所述的方法，其中，在脫膠步驟過(guò)程中將所述一種或多種酶與所述油或脂混合。10.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法進(jìn)一步包括酯交換(優(yōu)選酶促酯交換)步驟。11.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述方法進(jìn)一步包括離心步驟。12.—種或多種酶在油或脂中用于降低固醇糖苷的量的應(yīng)用。13.如權(quán)利要求12所述的應(yīng)用，其中，至少除去所述油或脂中的20%、50%、80%的固醇糖苷。14.如權(quán)利要求12或13所述的應(yīng)用，其中，所述一種或多種酶包括糖苷酶。15.如權(quán)利要求12-14中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中，所述一種或多種酶包括淀粉葡糖苷酶和/或β-葡糖苷酶。16.如權(quán)利要求11-14中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中，所述油為植物油。17.如權(quán)利要求16所述的應(yīng)用，其中，所述油為大豆油。18.如權(quán)利要求12-17中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用，其中，所述生物燃料為生物柴油。19.通過(guò)權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)所述的方法或者權(quán)利要求12-18中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用可獲得(優(yōu)選獲得)的油或脂或生物燃料。20.油或脂或生物燃料，其中，所述油或脂和/或生物燃料與沒有經(jīng)過(guò)根據(jù)權(quán)利要求1-21中任一項(xiàng)所述的方法或者權(quán)利要求12-18中任一項(xiàng)所述的應(yīng)用的酶處理的相當(dāng)?shù)挠突蛑?或生物燃料相比，具有降低的固醇糖苷量。21.包含一種或多種糖苷酶的酶組合物，其用于生產(chǎn)生物燃料。22.參考實(shí)施例和附圖基本如本文定義的方法。23.參考實(shí)施例和附圖基本如由本文定義的應(yīng)用。24.參考實(shí)施例和附圖基本如本文定義的油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料。25.酶組合物，其包含一種或多種參考實(shí)施例和附圖基本如本文定義的以下酶能夠水解固醇糖苷中糖苷鍵的酶、糖苷酶、β-葡糖苷酶或淀粉葡糖苷酶。全文摘要本發(fā)明涉及降低油或脂(例如生物燃料底物)和/或生物燃料中的固醇糖苷的量的方法，所述方法包括將一種或多種酶和包含固醇糖苷的油或脂混合；從而使所述一種或多種酶降解所述固醇糖苷。所述一種或多種酶優(yōu)選是能夠水解固醇糖苷中的糖苷鍵的酶。合適地，所述酶可以為糖苷酶和/或β-葡糖苷酶和/或淀粉葡糖苷酶。文檔編號(hào)C07J17/00GK102083995SQ200980125292公開日2011年6月1日申請(qǐng)日期2009年7月8日優(yōu)先權(quán)日2008年7月9日發(fā)明者約恩·博爾奇·瑟申請(qǐng)人:丹尼斯科公司