專利名稱：：kahalalideF及相關(guān)化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及kahalalide化合物、尤其涉及kahalalideF及相關(guān)化合物以及這類化合物的合成途徑，
背景技術(shù)：
：kahalalideF是一種從sarcoglossan軟體動(dòng)物五/"/flrw/asce"j及其食物一綠藻羽藻(^vo/w;ysp.)中分離的生物活性環(huán)狀縮肽(cyclicd印sip鄰tide),kahalalideF最早由Hamann和Scheuer分離出來(lái),參見Ham咖，M.T.;Scheuer，P丄J.Am.Chem.Soc.1993，115,5825-5826。在該出版物中，尚未測(cè)定單個(gè)纈氨酸(3D-Val和2L-Val)和蘇氨酸(L-Thr和D-別(allo)-Thr)的絕對(duì)立體化學(xué)，在一個(gè)新近出版物中，Scheuer等(Goetz,G.;Yoshida，W.Y.;Scheuer,P.J.Tetrahedron1999，55，7739-7746)為5Val和2Thr指定了分子中的位置，因此，依照Scheuer等的kahalalideF結(jié)構(gòu)是同時(shí)，Reinhart教授也指定了5-Val和2-Thr的各個(gè)位置(K丄.Rinehart,私人通信).而對(duì)于2Thr和3Val，他的指定與Scheuer教授的指定一致，對(duì)于最后的2Val卻存在差異，因而，在Rinehart的指定中，側(cè)鏈內(nèi)的兩個(gè)相鄰纈氨酸可被轉(zhuǎn)換，所述結(jié)構(gòu)為式(I):<image>imageseeoriginaldocumentpage11</image>現(xiàn)在該結(jié)構(gòu)已被認(rèn)可并且在本文中再次被證實(shí)，即kahalalideF的正確結(jié)構(gòu)式為式(I).該結(jié)構(gòu)是復(fù)雜的，包含六個(gè)氨基酸作為環(huán)部分，而七個(gè)氨基酸的環(huán)外鏈具有一個(gè)末端?；?雖然還沒有足夠量減慢了臨床試驗(yàn)計(jì)劃，但是kahalalideF(I)是一種極其有效而罕見、來(lái)源于海洋的抗腫瘤藥，其它kahalalide化合物是已知的，例如我們可提到Hamann，M.T.等，丄Og.Oiem.,19%,"kahalalide:來(lái)源于海洋軟體動(dòng)物￡Y>warw/wce似及其藻類食物羽藻(^yo;w》sp.)的生物活性肽，，，第61巻，第6594-6660頁(yè)，除kahalalideF之外，該文章還給出了kahalalideA-E的結(jié)構(gòu)，kahalalideK在JNatProd.1999，62，1169中有報(bào)道，而kahalalideO在〗NatProd2000,63，152中有報(bào)道.這些其它kahalalide化合物的結(jié)構(gòu)見下式:Or4mo一mmMM所述環(huán)狀kahalalide具有一個(gè)氨基酸環(huán)和一個(gè)以酰基封端的側(cè)鏈，kahalalide具有各種各樣的生物活性，特別是抗腫瘤活性和抗結(jié)核病活性。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供天然kahalalide的模擬物。所迷化合物可以在一個(gè)或多個(gè)氨基酸以及所迷?；鶄?cè)鏈的一個(gè)或多個(gè)組分方面不同，相配的是，本發(fā)明模擬物具有與天然存在的母體kahalalide不同的以下特征中的至少一個(gè)特征有1-7個(gè)、尤其是卜3個(gè)、更尤其是1個(gè)或2個(gè)、最尤其是1個(gè)氨基酸與母體化合物的氨基酸不同；在母體化合物的側(cè)鏈統(tǒng)基內(nèi)有l(wèi)-10個(gè)、尤其是l-6個(gè)、更尤其是卜3個(gè)、最尤其是l個(gè)或2個(gè)另外的亞甲基；在母體化合物的側(cè)鏈?；腥笔Р?0個(gè)、尤其是l-6個(gè)、更尤其是卜3個(gè)、最尤其是l個(gè)或2個(gè)亞甲基；在所述母體化合物的側(cè)鏈?；刑砑踊蛉笔Р?個(gè)、尤其是卜3個(gè)、更尤其是1個(gè)或3個(gè)取代基，對(duì)于環(huán)狀kahalalide,所迷氬基酸的添加或缺失可以在所述環(huán)內(nèi)或者在所迷側(cè)鏈內(nèi).本發(fā)明的實(shí)施例是與kahalalideF相關(guān)并且具有下式的化合物Au.7式II其中當(dāng)應(yīng)用時(shí)，Aaa，、Aaa2、Aaa3、Aaa4、Aaa6和Aaa7獨(dú)立地為L(zhǎng)或D構(gòu)型的a-氨基酸；其中R,、R2、R3、R4、Rs、R6、R7備自獨(dú)立地為H或選自烷基、芳基、芳烷基的有機(jī)基團(tuán)及其具有以下基團(tuán)的取代衍生物羥基、巰基、氨基、胍基、囟基；其中Xi獨(dú)立地為O、S或N;其中當(dāng)應(yīng)用時(shí)，R2獨(dú)立地為H或選自烷基和芳烷基的有機(jī)基團(tuán)；其中當(dāng)應(yīng)用時(shí)，Aaas獨(dú)立地為L(zhǎng)或D構(gòu)型的氨基酸；其中Xz獨(dú)立地為選自鏈烯基、烷基、芳基、芳烷基的有機(jī)基團(tuán)及其具有羥基、巰基的取代衍生物，獨(dú)立地為H或選自烷基、芳基、芳烷基的有機(jī)基團(tuán)及其具有以下基團(tuán)的取代衍生物羥基、巰基、氨基、胍基、卣基；其中R8獨(dú)立地具有以下結(jié)構(gòu)式in、I或V:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>式v其中R9、R,o和RM各自獨(dú)立地為H或選自烷基、芳基、芳烷基的有機(jī)基團(tuán)及其具有以下基團(tuán)的取代衍生物羥基、巰基、氨基、胍基、羧基、甲酰胺基、卣基；Rs和R,o可以形成相同環(huán)的部分；當(dāng)應(yīng)用時(shí)，R9可以為其連接的碳提供S構(gòu)型或R構(gòu)型；n為0-6。也可改變M酸的限定，以考慮到脯氛基和類似的氨基酸(包括羥脯氛基).式(HI)、(IV)和(V)可以相互混合，以在一個(gè)以上的這些結(jié)構(gòu)式中得到由重復(fù)單位構(gòu)成的側(cè)鏈，在一種修飾中，六氨基酸環(huán)的環(huán)氨基酸Aaa-6和Aaa-5中的一個(gè)或多個(gè)被缺失，或者在Aaa-6和Aaa-l之間添加氬基酸Aaa-7，以便獲得具有四、五或七環(huán)氨基酸的環(huán)，優(yōu)選六環(huán)氛基酸。本發(fā)明還涉及生成kahalalideF化合物及相關(guān)結(jié)構(gòu)的合成方法，優(yōu)選的實(shí)施方案優(yōu)選的化合物與kahalalideF(I)相關(guān)，其中在式(II)中，Aaa-l是D-別-丁hr-丁hr(X,-0,R，-CH3)，Aaa-2是D-別-Ile-Ile(R3-l-甲基丙基)，Aaa-3是D-Val(R4-異丙基)，Aaa-4是Phe(R5-千基)，Aaa-5是Z-Dhb(X2-OCHCH3，具有Z構(gòu)型)，Aaa-6是L-Val(R6-異丙基)，Aaa-7是D-別-lle-Ile(R7=l-甲基丙基),Rg含有下式(式VI)的六肽衍生物式VI其它優(yōu)選的化合物類似地與其它kahalalide相關(guān)，并且具有與這類化合物一樣的氨基酸和側(cè)鏈，參考所迷kahalalide的已知結(jié)構(gòu)，優(yōu)選本發(fā)明的化合物模擬天然kahalalide,在所述分子中的一個(gè)或多個(gè)位點(diǎn)具有修飾、插入或消除.尤其優(yōu)選的是具有與天然環(huán)狀kahalalide化合物的氨基酸相同、但在側(cè)鏈上不同、尤其是在酰基部分不同的化合物。這類差異可以包括或多或少的亞甲基、通常最多兩個(gè)亞甲基的改變，以及或多或少的取代基、特別是添加卣素例如氟取代基.本文所用的術(shù)語(yǔ)"有機(jī)基團(tuán)"是指分為脂族基、環(huán)基或脂族基和環(huán)基組合(例如芳烷基)的烴基.在本發(fā)明的正文中，術(shù)語(yǔ)"脂族基"是指飽和或不飽和直鏈或支鏈烴，該術(shù)語(yǔ)用來(lái)包括例如烷基、鏈烯基和鏈炔基，術(shù)語(yǔ)"烷基"是指飽和直鏈或支鏈烴基，包括例如甲基、乙基、異丙基、異丁基、叔丁基、庚基、十二烷基、十八烷基、戊基、2-乙基己基、2-甲基丁基、5-甲基己基、9-甲基-3-癸基等，特別是具有一個(gè)支鏈甲基的坑基，所迷烷基適宜較長(zhǎng)，即具有l(wèi)-20個(gè)碳原子、更通常1-15個(gè)或1-10個(gè)碳原子；或者可以較短，即具有卜6個(gè)或1-3個(gè)碳原子.基團(tuán)Ru適于長(zhǎng)碳鏈，一般而言，所有其它烷基最好為短減鏈。術(shù)語(yǔ)"鏈烯基"是指具有一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵的不飽和、直鏈或支鏈烴基，例如乙烯基.所述鏈烯基適宜具有2-8個(gè)或2-4個(gè)碳原子.術(shù)語(yǔ)"鏈炔基"是指具有一個(gè)或多個(gè)碳-碳三鍵的不飽和，直鏈或支鏈烴基，所述鏈炔基適宜具有2-8個(gè)或2-4個(gè)碳原子。術(shù)語(yǔ)"環(huán)基"是指分為脂環(huán)基、芳族基或雜環(huán)基的閉環(huán)烴基。術(shù)語(yǔ)"脂環(huán)基"是指其特性類似于脂族基的環(huán)烴基，適宜具有4-10個(gè)碳原子的單環(huán)或雙環(huán)，術(shù)語(yǔ)"芳族基"或"芳基"是指單環(huán)或多環(huán)芳族烴基，適宜具有5-10個(gè)碳原子的單環(huán)或雙環(huán)，術(shù)語(yǔ)"雜環(huán)基，'是指閉環(huán)烴，其中所述環(huán)內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)原子是除>^以外的元素(例如卜3個(gè)氮、氣、硫中的一個(gè)或多個(gè))，適宜具有4-10個(gè)環(huán)原子的單環(huán)或雙環(huán)。正如本
技術(shù)領(lǐng)域：
眾所周知的，較大程度的取代不僅被耐受，而且通常是可行的，預(yù)先考慮在本發(fā)明化合物上有取代.作為簡(jiǎn)化在本申請(qǐng)中所用的某些術(shù)語(yǔ)的討論和敘迷的工具，術(shù)語(yǔ)"基團(tuán)"和"部分"用以區(qū)分允許取代或可以被取代的化學(xué)種類與不允許或不可以被如此取代的化學(xué)種類.因此，當(dāng)術(shù)語(yǔ)"基團(tuán)"用來(lái)描述化學(xué)取代基時(shí)，所述化學(xué)物質(zhì)包括未取代的基團(tuán)和例如在所迷鏈內(nèi)具有0原子、N原子或s原子的基團(tuán)以及羰基或其它常規(guī)取代。在術(shù)語(yǔ)"部分"用來(lái)描迷化合物或取代基的情況下，僅包括未取代的化學(xué)物質(zhì).例如，短語(yǔ)"烷基基團(tuán)"不僅包括純開鏈飽和烴坑基取^基，例如甲基、乙基、丙基、異丁基等，而且包括帶有本領(lǐng)域已知的其它取代基的烷基取代基，所述其它取代基例如羥基、烷氣基、氨基、羧基、甲酰胺基、由原子、氛基、硝基、烷基橫?；?因此，"烷基基團(tuán)"包括鏈基、卣代烷基、醇類、硫醇類、M、胺類、羥基烷基類、確基烷基類等.目前優(yōu)選卣代烷基，另一方面，短語(yǔ)"烷基部分"限于僅包括純開鏈飽和烴烷基取代基，例如甲基、乙基、丙基、異丁基等等。在本發(fā)明的一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，我們提供一種式(A)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>其中具有相鄰相應(yīng)的-N-和-CO-的Aa1至Aa6中的每個(gè)代表oc或pM酸、最好是ot氨基酸，X為A^的連接基團(tuán)，優(yōu)選選自氨基、羥基或硫輕基，更優(yōu)選羥基，R為任選包括一個(gè)或多個(gè)a或(3氨基酸、最好是a氨基酸的基團(tuán).在一個(gè)變體中，-0>八36^-可以不存在，也可能與^0-八35->1-—起不存在，或者基團(tuán)-CO-Aa7-N-可以插入在八36和Aa1之間，所述氛基酸可以是L構(gòu)型或D構(gòu)型，所迷構(gòu)型最好與kahalaUde化合物、尤其是kahalalideF中的相應(yīng)氨基酸一樣，Aa'至Aa中的一個(gè)或多個(gè)最好對(duì)應(yīng)于天然kahalaUde或其同類物中的相同位置上的氨基酸。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，每個(gè)氨基酸與kahalaUdeF中的相同。因此，優(yōu)選Aa，為D-別-Thr，八32為D-別-Ile，Aa3》D-Val,Aa4為Phe，Aa5為Z-Dhb，八&6為L(zhǎng)-Val,在使用同類物的情況下，合適的同類物具有取代氨基酸，其中顧及所述天然kahalalide(例如kahalalideF)中的相應(yīng)氛基酸的結(jié)構(gòu)，進(jìn)行所述取代。蘇氨酸的取代物包括絲氨酸和其它同系物以及半胱氨酸及同系物.異亮氨酸的取代物包括其它具有非極性基團(tuán)的氨基酸，包括丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和脯氨酸以及類似物和同系物。在該方面，式(A)中的氮原子-N-的顯示不排除環(huán)形成的可能性，例如當(dāng)與脯氨酸一起存在時(shí)。纈氨酸的取代物包括異亮氛酸和其它具有非極性基團(tuán)的氨基酸，包括類似物和同系物，苯丙氨酸的取代物包括色氨酸和酪氨酸。Dhb的取代物包括其它具有這種亞鏈紼基(alkenylidene)取代基的氨基酸，包括具有C3或更大側(cè)鏈的氨基酸以及類似物和同系物，Aa'最好具有下式其中Raa、為攜帶連接基團(tuán)X的側(cè)鏈，側(cè)鏈的實(shí)例包括烷基、芳基和芳烷基，尤其是烷基，更通常是l-4個(gè)、例如2個(gè)碳原子的烷基，優(yōu)選支鏈烷基，連接基團(tuán)X適宜為氣，并且Aa,最好衍生自蘇氨酸，但可以使用硫、M(未取代或用烷基、芳基或芳烷基取代)和其它接頭。基團(tuán)X適宜為Aa"中的唯一極性基團(tuán)，A^可以是外消旋的、L構(gòu)型或D構(gòu)型，但最好為D構(gòu)型.AaS最好具有下式其中Raa2為諸如以下的側(cè)鏈烷基、芳基和芳烷基，尤其是烷基，更通常是1-5個(gè)、例如3個(gè)碳原子的烷基.優(yōu)選支鏈烷基，如在異亮氨酸中.在AaZ中適宜不存在極性取代基。八&2可以是外消旋的、L構(gòu)型或D構(gòu)型，但最好為D構(gòu)型，Aa3最好具有下式其中Raa3為諸如以下的側(cè)鏈烷基、芳基和芳烷基，尤其是烷基，更通常是l-5個(gè)、例如3個(gè)碳原子的烷基.優(yōu)選支鏈烷基，如在纈氨酸中。相配的是在AaS中適宜不存在極性取^J^.Aa可以是外消旋的、L構(gòu)型或D構(gòu)型，但最好為D構(gòu)型.Aa"最好具有下式其中Raa4為諸如以下的側(cè)鏈烷基、芳基和芳烷基，尤其是芳烷基，更通常是7-10個(gè)、例如7個(gè)碳原子的芳烷基.優(yōu)選芐基，如在苯丙氨酸中，在Aa^中適宜不存在極性取代基.八&4可以是外消旋的、L構(gòu)型或D構(gòu)型，但最好為L(zhǎng)構(gòu)型.八35最好具有下式其中Raasa和Raa5b分別選自氫或諸如以下的側(cè)鏈烷基、芳基和芳烷基，尤其是烷基，更通常是l-4個(gè)、例如l個(gè)碳原子的烷基.Raa"最好為氮，得到Z構(gòu)型，如在優(yōu)選的a力-二脫氛-a-氨基丁酸中，在Aa5中適宜不存在極性取代基.AaS可以是外消旋的、L構(gòu)型或D構(gòu)型，但最好為L(zhǎng)構(gòu)型。八36最好具有下式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage21</formula>其中Raa6為諸如以下的側(cè)鏈烷基、芳基和芳烷基，尤其是烷基，更通常是1-5個(gè)、例如3個(gè)碳原子的烷基。優(yōu)選支鏈烷基，如在纈氨酸中，在AaS中適宜不存在極性取代基。八36可以是外消旋的、L構(gòu)型或D構(gòu)型，但最好為L(zhǎng)構(gòu)型，狄酸Aa1至Aa7可以依照式(H)中的基團(tuán)Aaa-l至Aaa-7定義.側(cè)鏈R最好包含5-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D-別-lie或其同類物，包括類似物和同系物，同類物的實(shí)例包括通式(R')nr(氣基酸V的同類物，m+n不為零，其中Rt代表端基，適宜為烷基、鏈烯基、鏈炔基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜烷基、脂環(huán)基或其它端基，-(氨基酸V代表任選的氨基酸鏈，末端烷基適宜具有1-12個(gè)碳原子、更通常具有4-10個(gè)碳原子，并且可以被取代，最好是支鏈坑基.實(shí)例包括丁基、戊基、己基、庚基、辛基和其它帶有1個(gè)或多個(gè)甲基或乙基或更長(zhǎng)側(cè)鏈基團(tuán)的烷基(最好是1-6個(gè)碳原子的烷基，尤其是5-甲基己基)和在遠(yuǎn)離與分子其余部分的連接點(diǎn)之處具有分支的其它烷基。合適的取代基包括鹵素、輕基、烷氣基、氨基、羧基、甲醜胺基、氛基、硝基、坑基橫醜基、烷氣基、烷氣基烷基、芳碁烷基芳基、雜環(huán)基、脂環(huán)基、芳基、芳烷基和其它本文列舉的基團(tuán)。合適時(shí)，這類取代基可以帶有其它取代基，例如甲苯基.目前最優(yōu)選囟素取代基，尤其是1個(gè)或多個(gè)、例如1-3個(gè)氟原子.其它端基可以依照本文給出的指引來(lái)選擇，包括脂環(huán)基、芳烷基、芳基、雜環(huán)基或其它基團(tuán)，可能具有1個(gè)或多個(gè)(尤其是1-3個(gè))取代基。側(cè)鏈R-CO-N-可以在所述氮上具有氫或者具有取代基，例如烷基、芳基或芳烷基，合適的側(cè)鏈同類物利用依照前面給出的原則選擇的取代氨基酸，就所述分子的環(huán)部分中的這些氨基酸而論，選擇異亮氨酸、纈氨酸或蘇氨酸的替代物，并且烏氨酸的替代物包括賴氨酸、組氨酸、精氨酸；脯氨酸的替代物包括丙氨酸和其它非極性氨基酸，例如甘氨酸、異亮氨酸和其它前面列舉的氨基酸，鏈R通常具有0-10個(gè)、更優(yōu)選4-8個(gè)、例如5個(gè)、6個(gè)或7個(gè)、尤其是7個(gè)氛基酸殘基。如果超過(guò)7個(gè)M酸，則超過(guò)的氨基酸最好為天然存在的氣基酸、特別是本文列舉的那些氛基酸.可以使用外消旋的氨基酸或L氨基酸或D氨基酸.優(yōu)選的是如果M酸存在于側(cè)鏈R中，則它們中的一個(gè)或多個(gè)為天然存在的側(cè)鏈已知的構(gòu)型。對(duì)于所述環(huán)六肽，氣基酸殘基為構(gòu)型DLDDLLD。末端烷基適宜具有l(wèi)-12個(gè)碳原子、更通常4-10個(gè)碳原子，并且可以被取代，最好為支鏈烷基，合適的取代基包括鹵素、羥基、烷氧基、氨基、羧基、甲酰胺基、氦基、硝基、烷基磺?；推渌疚牧信e的基團(tuán).目前最優(yōu)選面素取代基，更通常的是，側(cè)鏈R-CO-N-可以依照式(H)化合物(包括具有式(III)、式(IV)和式(V)中限定的氨基酸的混合物的化合物)中的側(cè)鏈Rs-NH-CHR7-C0-NH-定義。雖然參考kahalalideF描迷了優(yōu)選的特征，但是通過(guò)應(yīng)用相同原理來(lái)設(shè)計(jì)其它kahalalide模擬物，可以提供本發(fā)明的其它優(yōu)選化合物。因此，所述氨基酸和側(cè)鏈可以被改變，最好是同時(shí)在極性和非極性基團(tuán)之間保持疏水-親水平衡，本發(fā)明的化合物具有有用的生物活性，包括抗腫瘤活性，因此，本發(fā)明提供治療受癌癥影響的任何哺乳動(dòng)物、特別是人類的方法，所述方法包括給予所述受影響的個(gè)體治療有效量的本發(fā)明化合物或其藥用組合物。本發(fā)明也涉及藥用制劑及其制備方法，所述藥用制劑含有作為有效成分的一種或多種本發(fā)明化合物。藥用組合物的實(shí)例包括具有合適組合物或者口服、局部或胃腸外給藥用的任何固體刑型(片劑、九劑、膠嚢劑、顆粒刑等)或液體劑型(溶液劑、混懸劑或乳刑)，并且它們可以含有所迷純化合物或者與任何栽體或其它藥理學(xué)活性化合物組合，這些組合物當(dāng)胃腸外給予時(shí)可能必須是無(wú)菌的。給予本發(fā)明的化合物或組合物可以通過(guò)任何合適的方法進(jìn)行，例如靜脈內(nèi)輸注、口服制劑、腹膜內(nèi)給予和靜脈內(nèi)給予.我們建議使用輸注的時(shí)間至多24小時(shí)，更優(yōu)選2-12小時(shí)，最優(yōu)選2-6小時(shí)，尤其理想的是進(jìn)行治療的輸注時(shí)間短，而不用在醫(yī)院過(guò)夜，然而可以輸注12-24小時(shí)或者如有需要甚至更長(zhǎng)時(shí)間?？梢砸赃m當(dāng)?shù)拈g隔為例如2-4周來(lái)進(jìn)行輸注?？梢酝ㄟ^(guò)脂質(zhì)體或納米球包囊、以緩釋制劑或通過(guò)其它標(biāo)準(zhǔn)的給藥方式給予含有本發(fā)明化合物的藥用組合物。所迷化合物的準(zhǔn)確刑量可以隨具體的制刑、應(yīng)用^f莢式和待治療的具體部位、宿主和腫瘤而變化，也應(yīng)該考慮其它因素如年齡、體重、性別、飲食、給藥時(shí)間、排泄率、宿主狀況、藥物組合、反應(yīng)敏感性和疾病的嚴(yán)重程度。在最大耐受劑量范圍內(nèi)可以連續(xù)給藥或周期性給藥.本發(fā)明的化合物和組合物可以與其它藥物一起使用，以提供聯(lián)合療法。所迷其它藥物可以構(gòu)成所述組合物的一部分，或者作為獨(dú)立組合物提供，用于在相同或不同時(shí)間給藥.不具體限制其它藥物的身份，合適的候選藥物包括a)具有抗有絲分裂效應(yīng)的藥物、尤其是靶向細(xì)胞骨架元件的藥物，包括微管調(diào)節(jié)劑例如taxane藥物(例如紫杉酚、紫杉醇、taxotere、docetaxel)、鬼臼毒素或長(zhǎng)春花生物堿(長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿)；b)抗代謝藥，例如5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、吉西他濱、噪呤類似物(例如噴司他丁、甲氨噪呤)；e)烷化劑，例如氮芥類(例如環(huán)磷酰胺或異環(huán)磷酰胺)；d)把向DNA的藥物，例如antracycline藥物阿審素、多柔比星、表阿審素(pharmorubicin)、表柔比星(epirubicin);e)靶向拓樸異構(gòu)酶的藥物，例如依托泊苷；1)激素和激素激動(dòng)劑或拮抗刑，例如雌激素、抗雌激素(他莫昔芬及相關(guān)化合物)以及雄激素、氟他胺、亮丙瑞林、戈舍瑞林、環(huán)丙孕酮(cyprotrone)或奧曲肽；g)靶向腫瘤細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的藥物，包括諸如herc印tin的抗體衍生物；h)烷化藥物，例如鉑類藥物(順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、卡鉑(paraplatin》或亞；肖基脲；i)潛在影響腫瘤轉(zhuǎn)移的藥物，例如基質(zhì)金屬蛋白酶抑制刑；j)基因治療和反義藥物；k)抗體療法；1)來(lái)源于海洋的其它生物活性化合物、特別是海鞘素類例如海鞘素743或didemninaplidine;m)類固醉類似物，尤其是地塞米松；n)消炎藥，尤其是地塞米松；和0)止吐藥，尤其是地塞米松.本發(fā)明也延伸至用于治療方法的本發(fā)明化合物，并且延伸至應(yīng)用所迷化合物制備用于治療癌癥的組合物，另外，預(yù)計(jì)本發(fā)明的化合物也具有抗結(jié)核病活性。本發(fā)明也提供制備本發(fā)明化合物(包括kahalalideF)的方法，所迷方法包括在Aa3和Aa4之間環(huán)合.我們發(fā)現(xiàn)在該位置上的環(huán)合為一種優(yōu)良工藝。可以在環(huán)合之前或之后對(duì)所述分子進(jìn)行其它修飾，包括在Aa,上形成側(cè)鏈或延伸側(cè)鏈，和/或在所述氣基酸上去除保護(hù)基和/或修飾取代基.因此，所述方法可以通過(guò)下述方案舉例說(shuō)明<formula>formulaseeoriginaldocumentpage25</formula>H2N其中R，為基團(tuán)R-CCKN-或其前體，并且其中所述M酸中的一個(gè)或多個(gè)可以具有保護(hù)基，并且其中Aa3的-COOH和/或Aa4的-NH2可任選地被保護(hù)、活化或衍生化，采用前體或保護(hù)、活化或衍生化的這類方法其本身完全是常規(guī)的，不需要其它細(xì)節(jié)來(lái)實(shí)施所迷方法?？梢詮脑祥_始以對(duì)映體和立體控制的快速方式、利用固相合成法實(shí)施本發(fā)明的方法，在固相合成法中在全部合成操作期間將進(jìn)行構(gòu)建的分子與不溶性支持體結(jié)合，因而，可以通過(guò)用合適溶劑洗滌所述分子-樹脂而簡(jiǎn)單地去除過(guò)量的試劑和可溶性副產(chǎn)物，0此，可以使用大量過(guò)量的可溶性試劑，以便驅(qū)動(dòng)所迷反應(yīng)在短時(shí)間內(nèi)完成，避免外消旋化(當(dāng)應(yīng)用時(shí))和其它次級(jí)反應(yīng)，所述方法也適合于自動(dòng)化。本發(fā)明合成方法的優(yōu)選實(shí)施方案盡可能示于方案1中，該方案涉及式(II)化合物的生成。<image>imageseeoriginaldocumentpage26</image>如上迷方案1所示，合成kahalalideF(I)和衍生物和類似物的優(yōu)選方法基于固相方法，參見例如Lloyd-Williams,P,等，C/je/m'cfl/爿p/roac/iesf/ie5y""ej/jo/尸e/7"'(ie5fVofe/"j,CRCPress,BocaRaton(FL)，簡(jiǎn).方案1的方法包括下列序貫步驟(a)將Fmoc-氨基酸(Aaa3)加到含有超強(qiáng)酸不穩(wěn)定性柄或接頭(例如氯三苯甲基、聚烷氣基千基等)的固相支持體(例如聚苯乙烯、接枝到聚苯乙烯上的聚乙烯等)上，形成酯鍵；(b)采用Fmoc"Bu策略用三個(gè)氨基酸(Aaa2、Aaa,、Aaa7)延伸所述肽鏈，對(duì)于I，X,-OH并且在不進(jìn)行保護(hù)的條件下引入。當(dāng)X,-NH2時(shí)，在Alloc保護(hù)下引入；(c)采用Alloc/氾u策略摻入(Aaa6);(d)采用Fmoc/氾u策略用其余的氨基酸和R,rCOOH通過(guò)Aaa7延伸所述肽鏈；(e-l)采用AIloc/氾u策略用兩個(gè)氨基酸[Aaas(OH，H)、Aaa4通過(guò)Aaa6延伸所述肽鏈，與Aaa5連接的OH未被保護(hù)；(e-2)在固相內(nèi)脫水，得到具有Aaas的肽；或者(e'-l)摻入二肽Alloc-Aaa4-Aaa5-OH，所迷二肽已在溶液中混合并脫水；(f)當(dāng)所述肽仍錨定至固相支持體時(shí)去除Aaa4的AIloc基團(tuán)；(g)當(dāng)應(yīng)用時(shí)，從所述固相支持體切下側(cè)鏈被保護(hù)的肽；(h)在溶液中使肽環(huán)化；(i)去除TFA不穩(wěn)定的側(cè)鏈保護(hù)基.應(yīng)該認(rèn)識(shí)到，保護(hù)基的具體選擇并不嚴(yán)格，其它選擇可以廣泛利用。例如Bzl型基團(tuán)可以代替tBu/Boc;Boc可以替代Fmoc;Fmoc可以替代Alloc;Wang樹脂可以替代氯三苯甲基，所述方法優(yōu)選實(shí)施方案的詳細(xì)描迷本發(fā)明的優(yōu)選方法示于方案1中，如其中所示，以及如下文實(shí)施例中更加詳細(xì)的討論，該方法如下進(jìn)行最好在DIEA存在下，將Fmoc-Aaa3-OH摻到氯三苯甲基-聚苯乙烯樹脂中，參見Barlos，K.;Gatos,D.;Schafer，W.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1991,30,590-593，保持取代水平約為0.15-0.5mmol/g.應(yīng)用較高加栽量使終產(chǎn)物中存在末端肽，參見Chiva,C，；Vilaseca,M;Giralt，E.;Albericio,F.J.Pept.Sci.1999，5,131-140.用哌啶-DMF(2:8,v/v)(1x1min,3x5min,1x10min)去除Fmoc基團(tuán)，在DMF中將Fmoc-、AJloc-Aaa-OH和Rl卜COOH(5當(dāng)量)與HATU-DIEA(5:10)偶聯(lián)90分鐘，參見Carpino,L.A.;El-Faham,A,;Minor,C.A.;Albericio，F(xiàn).J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1994，201-203.偶聯(lián)后，進(jìn)行茚三酮試驗(yàn)，如果為陽(yáng)性，則以相同條件重復(fù)所迷偶聯(lián)反應(yīng)，否則所述過(guò)程繼續(xù)往下進(jìn)行，在脫保護(hù)、偶聯(lián)之間洗滌，再采用每次10ml溶刑/g樹脂，用DMF(5x0,5min)和CH2C12(5x0.5min)進(jìn)行脫保護(hù)步驟。用等摩爾量的DIPCDI和0.7當(dāng)量的DMAP,當(dāng)XI-O時(shí)摻入Alloc-Aaa6-OH(7當(dāng)量)達(dá)2小時(shí)。將該偶聯(lián)步驟重復(fù)兩次，在PhSiH3(10當(dāng)量)存在下，在Ar氛圍下，用Pd(PPh3)4(0.1當(dāng)量)去除Alloc基團(tuán)，參見G6mez-Martinez，P.;Thieriet，N.;AJbericio,F.;Guib6，F(xiàn).J.Chem.Soc.PerkinI1999，2871-2874。在CuC1(60當(dāng)量)存在下，在CH2C12-DMF(10:2)中，在固相中用EDC(水溶性碳二亞胺，100當(dāng)量)進(jìn)行脫水6天。EDC/CuCl已經(jīng)用于在溶液中使乳鏈菌肽片段內(nèi)的Thr殘基脫水，F(xiàn)ukase,K.;Kitazawa，M.;Sano,A.;Shimbo，K.;Horimoto，S.;Fujita,H.;Kubo，A,;Wakamiya，T.;Shibe，A.Bull.Chem.Soc.Jpn.1992，65，2227-2240,將在溶液中用Alloc-Aaa4-OH和H-Aaa5(OH，H)-O氾u與EDC制備、脫水后用TFA處理的二肽Alloc-Aaa4-Aaa5.OH(5當(dāng)量)與HATU-DIEA(5:10)偶聯(lián)16小時(shí)，然后再偶聯(lián)3小時(shí)，其它基于HOBt的偶聯(lián)試刑諸如HBTU或DIPCDI-HOBt的應(yīng)用已導(dǎo)致所迷二肽的不完全摻入。用TFA-CH2Cl2(l:99)完成從所迷樹脂切下被保護(hù)的肽(5x30sec)。在CH2C12-DMF中，用DIPCDI-HOBt(3:3當(dāng)量)進(jìn)行環(huán)化步驟達(dá)2小時(shí)。也可以使用其它方法，例如DMF中的PyBOP/DIEA(3:6當(dāng)量)。用TFA-H20(95:5)進(jìn)行最后的脫保護(hù)達(dá)1小時(shí)，具體實(shí)施例方式縮寫氛基酸所用的縮寫以及肽的命名采用IUPAC-IUB生物化學(xué)命名委員會(huì)的規(guī)則，參見J.說(shuō)o/.O柳，1972,247,977.983.使用下面的其它縮寫4-AcBut-OH，4-乙酸基丁酸；AcButBut-OH，4-(4-乙酰氣基丁酰fL^)-丁酸；ACH,a-氛基-4-羥基肉桂酸；Alloc,烯丙氣基羰基；Boc,叔丁氣羰基；NBu，叔丁基；But-OH，丁酸；Cl-TrtCl-樹脂，2-氯三苯甲基氦-樹脂；D叩，2，3-二氨基丙酸；4-DiMeABut-OH,二甲基-4-氨基丁酸；3,3-DiMeBut-OH，3,3-二甲基丁酸;DHB，2,5-二輕基苯甲酸；Z-Dhb,a力-二脫氬-a-氨基丁酸；D正A,M^-二異丙基乙胺；DMF,//,//-二甲基甲酰胺；EDC,l-乙基-3-(3'-二甲基M丙基)碳二亞胺鹽酸鹽；Etg，6基甘氨酸；ESMS,電噴霧質(zhì)傳法；FABMS,快速原子轟擊質(zhì)譜法；Fmoc，9-芴基甲氣羰基；HATU，六氟合磷氮酸A4(二甲基氨基)-l^-l,2,3-三唑并-4，5-6]吡啶小基-亞甲基l-N-甲基甲銨N-氣化物；HBTU，六氟合磷氬酸W-[(l/Z-苯并三唑小基)(二甲基氨基)亞甲基-N-2-甲基甲銨N-氣化物；2-Hedo-OH,2,4-己二烯酸；H印-OH,庚酸；HOAc，乙酸，HOAt,l-羥基-7-氮雜苯并三唑(3-羥基-3//-1，2,3-三唑并-[4，54吡咬)；HOBt,l-羥基苯并三唑；IBirt-OH，異丁酸；3-MeBut-OH，3-甲基丁酸；5-MeHex-OH，5-甲基己酸；MeOH,甲醇；4-MePen-OH，4-甲基戊酸；NMM，//-曱基嗎啉；4-HOBut,4-羥基丁酸；(b-OH)Phe-OH，b-輕基苯丙氨酸；Lit-OH，石膽酸；Pal,棕櫚酸；D-Phe-OH，a力-二脫氬苯丙氨酸；PyAOP，轔六氟合砩氬酸7-氮雜苯并三唑-l-基-W-l^-三(吡咯烷基)；PyBOP，六氟合磷氬酸苯并三唑-l-基-W-氣基-三(吡咯坑基)轔；SPS,固相合成；TFA，三氣乙酸；Tico-OH,二十四烷酸，氨基酸符號(hào)表示L-構(gòu)型，除非另有說(shuō)明.所有的溶刑比為體積/體積，除非另有說(shuō)明。通用方法，Cl-TrtCl-樹脂、被護(hù)Fmoc-氨基酸衍生物、HOBt、PyBOP、HATU均得自PerSeptiveBiosystems(Framingham,MA)，Bachem(Bubendorf，瑞士)，NovaBiochem(Laufdfingen,瑞士)，Alloc-氨基酸基本上依照Dangles等所述(參見Dangles,O.;Guib6,F.;Balavoine，G.;Lavielle，S,;Marquet.A.J.Org,Chem.1987,52,4984-4993)進(jìn)行制備，和5-MeHex-OH通過(guò)丙二酸合成制備。DIEA、DIPCDI、EDC、哌啶、TFA得自AIdrich(Milwaukee,WI).DMF和CH2C12得自SDS(Peypin，法國(guó))。乙腈(HPLC級(jí))得自Scharlau(Barcelona,西班牙)。所有的商業(yè)試刑和溶劑除DMF和CH2C12外均照原樣使用，DMF和CH2Cl2用氮?dú)獯禋?，以去除揮發(fā)性雜質(zhì)(DMF)，然后經(jīng)活化的4A分子篩(Merck,Darmstadt,德國(guó))(DMF)或CaCl2(CH2Cl2)保存待用，溶液反應(yīng)在圓底燒瓶中進(jìn)行.有機(jī)溶劑萃取液經(jīng)無(wú)水^l酸鎂干燥，然后減壓和〈40'C下去除溶劑。固相合成在裝有聚乙烯多孔圓盤的聚丙烯注射器(20，10ml)中進(jìn)行，溶劑和可溶性試劑通過(guò)抽吸去除。用哌啶-DMF(2:8,v/v)(1x1min,3x5min，lxl0min)去除Fmoc基團(tuán)。在脫保護(hù)、偶聯(lián)之間洗滌，再采用每次10ml溶刑/g樹脂，用DMF(5x0.5min)和CH2C12(5x0.5min)進(jìn)行脫保護(hù)步驟.肽合成轉(zhuǎn)變和洗滌在25'C下進(jìn)行.在固相上進(jìn)行的合成通過(guò)在用TFA-H20(9:1)切割60分鐘后獲得的中間體的HPLC控制，一等份(約10mg)的肽基-樹脂HPLC柱子[KromasilC18(條件A-F)/CK條件G，H)]反相柱，4.6x250mm,10mm)得自AkzoNobel(Bohum,瑞典)，分析型HPLC在Shimadzu儀器上進(jìn)行，所述儀器包括兩個(gè)溶刑傳遞泵(LC-6A型)、自動(dòng)注射器(SIL-6B型)、可變波長(zhǎng)檢測(cè)器(SPD-6A型)、系統(tǒng)控制器(SCL-6B型)和繪圖儀(C-R6A型)，UV檢測(cè)在220nm下進(jìn)行，H20(+0.45%TFA)中線性梯度的CH3CN(+0.036%TFA)以1.0ml/min流速洗脫(條件A)30分鐘內(nèi)從1:9至10:0;(條件B)30分鐘內(nèi)從3:7至10:0;(條件C)30分鐘內(nèi)從1:19至19:1;(條件D)30分鐘內(nèi)從45:55至90:10;(條件E)30分鐘內(nèi)從45:55至6:4;(條件F)等度1:1;(條件G)30分鐘內(nèi)從3:至1:0;(條件H)30分鐘內(nèi)從1:1至1:0,肽樣品的MALDI-TOF-和ES-MS分析采用CHCA或DHB基體在PerSeptiveBiosystemsVoyagerDERP中以及在MicromassVG-quattro分光計(jì)中進(jìn)行。肽-樹脂樣品在12NHCN丙酸(1:1)水溶液中在155'C下水解i-3小時(shí)，然后不含肽的樣品在6NHC1水溶液中在155'C下水解1小時(shí).隨后在BeckmanSystem6300自動(dòng)分析儀中進(jìn)行氨基酸分析，'H-NMR(500MHz,200MHz)和13C-NMR(50MHz)波傳法在BrukerDMX-500(11.7T)和VarianGemini200(4.7T)中進(jìn)行。化學(xué)位移(d)以自TMS向低場(chǎng)位移的百萬(wàn)分之幾表示。偶合常數(shù)以赫茲表示。kahalaKdeF(I)實(shí)施例1H-D-Val-O-TrtCl-樹脂，將Cl-TrtCl-樹脂(lg，1.35mmol/g)置于20ml裝有聚乙烯濾片的聚丙烯注射器中。然后用CH2C12(5x0.5min)洗滌，然后加入Fmoc-D-Val-OH(92mg，0.27mmol，0.2當(dāng)量)和D正A(471ml,2.7mmol，2當(dāng)量)的CH2C12(2.5ml)溶液，將混合物攪拌1小時(shí)。攪拌15分鐘后，通過(guò)加入MeOH(800ml)終止反應(yīng)，F(xiàn)moc-D-Val-O-TrtCl-樹脂進(jìn)行以下洗涂/處理用CH2C12(3x0.5min)、DMF(3x0.5min)、哌啶-CH2C12-DMF(1:9.5:9.5,1x10min)、哌啶-DMF(l:4，1x15min)、DMF(5x0.5min)、異丙醇(2x1min)、DMF(5x0.5min)、MeOH(2x1min),然后經(jīng)真空干燥，通過(guò)AAA計(jì)算的栽荷為0.15mmol/g,實(shí)施例2Fmoc-D-別-Ile-D-別-Thr(Val-Alloc)-D-別-Ile-D-Val-O-TrtCM對(duì)脂，在DMF(2.5ml)中，用HATU(285mg，0.75mmol，5當(dāng)量)和DIEA(261mg，1.5mmol,10當(dāng)量)，將Fmoc-D-別-Ile-OH(265mg，0.75mmol,5當(dāng)量)、Fmoc-D-別-Thr-OH(游離羥基)(256mg,0.75mmol,5當(dāng)量)和Fmoc-D-別-Ile-OH(265mg，0.75mmol，5當(dāng)量)依次加到以上獲得的H-D-Val-O-TrtCl-樹脂中。在所有情況下，在偶聯(lián)90分鐘后，茚三酮3試驗(yàn)均為陰性.如通用方法中所述去除Fmoc基團(tuán)并進(jìn)行洗滌.在DMAP(12.8mg，0.105mmol，0.7當(dāng)量)存在下，將Alloc-VaMDH(211mg，1.05mmol，7當(dāng)量)與DIPCDI(163mg,1.05mmol，7當(dāng)量)偶聯(lián)。該偶聯(lián)步驟在相同條件下重復(fù)兩次，一等份的肽基-樹脂用TFA-H20(9:1)處理60分鐘，蒸發(fā)后獲得的粗產(chǎn)物經(jīng)HPLC(條件A，t25.9min)顯示純度〉98%,ESMS,C45H63N5Ou的計(jì)算值849.5.實(shí)測(cè)值w々850.M+H+,實(shí)施例35-MeHex-D-Val-Thr(fBu)-Val-D-Val-D-Pro-Orn(Boc)-D-另'J-Ile-D-別-Thr(Val-Alloc)-D-別-He-D-Val-O-TrtCl-樹脂.去除Fmoc基團(tuán)后，在DMF(2.5ml)中用HATU(285mg,0.75mmol,5當(dāng)量)和DIEA(261mg，1.5mmol，10當(dāng)量)，將Fmoc-Om(Boc)-OH(341mg，0.75mmol,5當(dāng)量)、Fmoc-D-Pro-OH(253mg，0,75mmol，5當(dāng)量)、Fmoc-D-Val-OH(255mg,0.75mmol，5當(dāng)量)、Fmoc-Val-OH(255mg,0.75mmol，5當(dāng)量)、Fmoc-Thr(氾u)-OH(298mg，0.75咖ol,5當(dāng)量)、Fmoc-D-Val-OH(255mg,0.75mmol，5當(dāng)量)和5-MeHex-OH(98mg，0.75mmol,5當(dāng)量)依次加到上迷肽基-樹脂(實(shí)施例2)中，在所有情況下，在偶聯(lián)90分鐘后，茚三酮試驗(yàn)或氯醌(摻入D-Val后)試驗(yàn)均為陰性，如通用方法中所述去除Fmoc基團(tuán)，并進(jìn)行洗滌.一等份的肽基-樹脂用TFA-H20(9:1)處理60分鐘，蒸發(fā)后獲得的粗產(chǎn)物經(jīng)HPLC(條件B,^17.2min)顯示純度〉82。/。，ESMS，C66H"6N12017的計(jì)算值1,348.9.實(shí)測(cè)值m々1,350.0[M+H+.實(shí)施例45-MeHex-D-Val-Thr(fBu)-Val-D-Val-D-Pro-Orn(Boc)-D-另>-Ile-D-別-Thr(Val-Thr-Phe-Alloc)-D-別-Ile-D-Val-O-TrtCl-樹脂.在PhSiH3(1851.5mmol，10當(dāng)量)存在下，在Ar氛圍下，用Pd(PPh3)4(17.3mg，0.015鵬ol,0.1當(dāng)量)去除Alloc基團(tuán)，在DMF(2.5ml)中，用HATU(285mg，0.75咖ol,5當(dāng)量)和D正A(261mg，1.5mmol，10當(dāng)量)將Fmoc-Thr-OH(游離羥基)(256mg，0.75mmol，5當(dāng)量)和Alloc-Phe-OH(187mg，0.75mmol，5當(dāng)量)依次加到上迷肽基-樹脂(實(shí)施例3)中，在所有情況下，在偶聯(lián)90分鐘后，茚三胸試驗(yàn)都為陰性。如通用方法中所述去除Fmoc基團(tuán)并進(jìn)行洗滌.一等份的肽基-樹脂用TFA-H20(9:1)處理60分鐘，蒸發(fā)后獲得的粗產(chǎn)物經(jīng)HPLC顯示經(jīng)HPLC(條件B，t17.8min)的純度>70%。ESMS，C79H132N1402q的計(jì)算值1,597.0。實(shí)測(cè)值w々1,598.2[M+H]+。實(shí)施例55-MeHex-D-Val-Thr(>Bu)-Val-D-Val-D-Pro-Om(Boc)-D-另'J-Ile-D-別-Thr(Val-Z-Dhb-Phe-H)-D-別-Ile-D-Val-O-TrtCi-樹脂(通過(guò)在固相中脫水)。上迷肽基-樹脂(實(shí)施例4)用EDC(2.88g，15mmol，100當(dāng)量)、CuCl(891mg，9mmol，60當(dāng)量)和CH2C12-DMF(10:2)(12ml)處理6天。在用DMF、CH2Cl2和DMF充分洗涂后，在PhSiH3(1851.5mmol,10當(dāng)量)存在下，在Ar氛圍下，用Pd(PPh3)4(17,3mg,0.015咖ol，0.1當(dāng)量)去除Alloc基團(tuán)，通過(guò)AAA計(jì)算的終荷栽為0.Ummol/g(92%總收率)。一等份的肽基-樹脂用TFA-H20(9:1)處理60分鐘，蒸發(fā)后獲得的粗產(chǎn)物經(jīng)HPLC(條件B，&17.2min)顯示純度>70%.ESMS，C75H126N140n的計(jì)算值1,495.0'實(shí)測(cè)值w々1,496.0[M+H]+,實(shí)施例65-MeHex-D-Val-Thr(fBu)-Val-D-Val-D-Pro-Orn(Boc)-D-另'J-Ile-D-別-Thr(Val-Z-Dhb-Phe-H).D-別-Ile-D-Val-OH,用TFA-CH2C12(1:99)(5x30sec)從所述樹脂(0.5g,55.9pmol)切下被保護(hù)的肽，將合并的濾液減壓蒸發(fā)至干，然后凍干，得到80.2mg(48.5nmol,87%收率)題述化合物，根據(jù)HPLC(條件B,25.7min)檢查的純度>70%.ESMS,(:84&42>^0,9的計(jì)算值1,651,1,實(shí)測(cè)值附々1,652.M+H+。實(shí)施例7kahalalideF(I).將被保護(hù)的肽(實(shí)施例6)(40.0mg,24,ol)溶于DMF(25ml)中，然后加入PyBOP(37.8mg,73^mo1，3當(dāng)量)和DIEA(25ml，145pmol,6當(dāng)量)。將混合物攪拌l小時(shí)，然后在減壓下通過(guò)蒸發(fā)去除溶劑。將被保護(hù)的環(huán)肽溶于TFA-H20(19:1，5ml)中，將混合物攪拌1小時(shí).在減壓下通過(guò)蒸發(fā)去除溶劑，然后加入H20(5ml),凍干.該粗產(chǎn)物通過(guò)中壓層析(VydacCi815-20pm，300A，240x24mm)、在5小時(shí)(各300ml120ml/h純化，在220nm檢測(cè)，得到題述產(chǎn)物(5.0mg，3.4,1，14%收率).MALDI-TOF-MS,C75H124N14016的計(jì)算值:1,477.9,實(shí)測(cè)值w々1,478.M+H〗+，1,500.6[M+Na〗十，1,516.M+K〗+,該產(chǎn)物通過(guò)HPLC[條件D(tR12.5min),E(t尺17.4min)和F(t"12.1min)]與真正的kahalalideF樣品一起共洗脫。所述化合物的，H-NMR(500MHz,d、DMSO)語(yǔ)與天然產(chǎn)物相同(表l中所示數(shù)據(jù))，表l<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>實(shí)施例7bis5-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。在實(shí)施例7的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間題述產(chǎn)物作為副產(chǎn)物獲得，該產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tw17.4min，條件B)和ESMS表征，0751^241\114016的計(jì)算值1,477.9.實(shí)測(cè)值w々1,501,3[M+Na+,1,517.3[M+K]+.kahalalideF(I)實(shí)施例8AUoc-Phe-Thr-O出u。將H-Thr-O出u.HCl(3.1g,15mmol，1.3當(dāng)量)溶于01202(30ml)中，然后加入DIEA(2,9ml,17mmol，.5當(dāng)量)，將混合物攪拌30分鐘，然后加入Alloc-Phe-OH(2.8g，11mmol,1當(dāng)量)和EDC(2.8g，15mmol，1.3當(dāng)量)的CH2Cl2(35ml)溶液，將反應(yīng)物攪拌18小時(shí)，有機(jī)反應(yīng)混合物用H20(3x25ml)洗涂，干燥(硫酸鎂)并真空濃縮。所得油狀物(4.12g)經(jīng)快速層析[CHCl3-MeOH-HOAc(9:l:0.2)純化，得到題述產(chǎn)物(3.25g,8mmol，71%收率)，該產(chǎn)物經(jīng)分析型HPLC表征(tw20.9min，純度>98%;條件C);ESMS,C21H30N2O6的計(jì)算值406.2,實(shí)測(cè)值w/2408.0[M+H+;'H-NMR(200MHz,CDC13):7.1-7.3(5H,m，Ar);6.89(1H，d,J=8.8Hz,NH);5.7-5.9(1H，m，CH烯丙基)；5,56(1H,d,J=8.0Hz,OH);5.2-5.3(2H,m，CH2g陽(yáng)烯丙基)；4.52(2H，d,J=5.4Hz，CH2a-烯丙基)；4.45(1H,dd，J-8,4Hz,2.8Hz,a-CHThr);4.22(1H，dq，J-6.2Hz，J=3.0Hz，b-CHThr);3.0-3.2(2H,m,b-CH2Phe);1.47(9H，s,氾u);1.15(3H，d，J-6.6Hz，g-CH3Thr);13C-NMR(50固z，CDC13):172.2(CO),169.5(CO);156.0(CO);136.1(Cq,Ar);132.5(CH,烯丙基)；129.3(CH,Ar);128.5(CH，Ar);126.9(CH，Ar);117.7(CH2，烯丙基)；82.7(Cq，氾u);68.5(b-CHThr);65.9(CH2,烯丙基)；58.0(a-CHThr);56,2(a-CHPhe);38.3(b-CH2Phe);28,0(CH3，氾u);20.8(g-CH3Thr)'實(shí)施例9Alloc-Phe-Z-Dhb-O氾u.在氮?dú)庀聦lloc-Phe-Thr-O氾u(3.25g，8.0mmol)、EDC(9.90g,52mmol,6.5當(dāng)量)和CuCI(2.14g，22mmol,2.7當(dāng)量)溶于。恥12-無(wú)水DMF(65ml，12:1)中，然后將混合物在氮?dú)庀聰嚢?天.真空去除有機(jī)溶劑，然后將殘余物溶于飽和EDTA溶液(100ml)中，將其用EtOAc(3x50ml)萃取，合并的有機(jī)溶液用鹽水(3x60ml)洗涂，經(jīng)硫酸鎂干燥，真空濃縮，得到淺黃色固體(2.8g),經(jīng)快速層析CHCl3-MeOH-HOAc(9:1:0.1)純化后，得到題述產(chǎn)物(2.6g，6.7mmol，84。/o收率),該產(chǎn)物經(jīng)分析型HPLC表征(tw23.1min，純度>95%;條件C);ESMS,(:2^281\1205的計(jì)算值388.2,實(shí)測(cè)值w々389.6〖M+H+;'H-NMR(200MHz,CDC13):7.2-7.4(5H，m，Ar);6.69(1H，q，J=7.4Hz,CHDhb);5.8-6.0(1H,m'CH烯丙基)；5,2-5.3(2H，m,CH2g-烯丙基)；4.5-4.6(2H,m，a-CH2烯丙基)；3.1-3.3(2H，m，b-CH2Phe);1,67(3H，d,J-7.2Hz，CH3Dhb);1.47(9H，s，出u);"C-NMR(50MHz,CDC13):168.9(CO),163,1(CO);156,0(CO);136,0(Cq，Ar);132.6，132.3(CH，烯丙基;b-CHDhb);129.3(CH，Ar);128.7(CH,Ar);127.0(CH,Ar);U7.9(CH2,烯丙基)；81.7(Cq,氾u);66.0(CH2，烯丙基)；56.3(a-CH，Phe);38-2(b-CH2Phe);28,0(CH3，14.7(CH3Dhb),實(shí)施例10Alloc-Phe-Z-Dhb-OH,將Alloc-Phe-Z-Dhb-O氾u(2,6g,6.7mmol)溶于TFA-CH2ClrH20(90:8:2，5,5ml)中，然后將混合物攪拌3小時(shí)，真空濃縮有機(jī)反應(yīng)物，得到題迷產(chǎn)物(2,2g，6.6mmol，99%收率)，該產(chǎn)物經(jīng)分析型HPLC表征(t17.0min，純度〉95%;條件C);ESMS，C,7H2oN205的計(jì)算值332.1,實(shí)測(cè)值w々333.7[M+Hj+;,H-NMR(200MHz,CD3OD):7.2-7.3(5H,m，Ar);6.84(1H,q,J=7.2Hz，CHDhb);5.8-6.0(1H，m,CH烯丙基)；5.1-5.3(2H，m,CH2g-烯丙基)；4.4-4.5(2H，m，a-CH2烯丙基)；3,2-3.3(1H，m,b-CH2Phe);2.8-30(1H,m，b-CH2Phe);1.66(3H，d,J-7.4Hz，CH3Dhb);13C.NMR(50MHz,CD3OD):173.1(CO);138.5(Cq,Ar);136.7，134.1(CH,烯丙基；b-CHDhb);130,3(CH，Ar);129.4(CH，Ar);127.7(CH，Ar);117.4(CH2,烯丙基)；66.6(CH2，烯丙基)；57.8(a-CH，Phe);39.1(b-CH2Phe);14.1(CH3Dhb),實(shí)施例115-MeHex-D-Val-Thr(u)-Val-D-Val.D-Pro-Orn(Boc)-D-另'j-Ile-D-別-Thr(Val-Alloc)-D-別-Ile-D-Val-O-TrtCl-樹脂，將CKTrtCl-樹脂(0.45g,1,35mmol/g)置于10ml裝有聚乙烯濾片的聚丙烯注射器中，根據(jù)與實(shí)施例-3所迷的相同方法獲得肽基-樹脂，只是所述第一種氨基酸(Fmoc-D-Val-OH)與樹脂的偶聯(lián)使用0.3當(dāng)量，而不是0.2當(dāng)量，通過(guò)AAA計(jì)算的初始栽荷為0.29mmol/g.—旦所迷氨基酸被偶聯(lián)，則將一等份的肽基-樹脂用TFA-H20(9:1)處理60分鐘，蒸發(fā)后獲得的粗產(chǎn)物經(jīng)HPLC(條件B,t/17.3min)顯示純度〉800/。。ESMS，C66HmN、20n的計(jì)算值1,348.9.實(shí)測(cè)值w/z1,350.1[M+H]+。實(shí)施例U5-MeHex-D-Val-Thr(fBu)-Val-D-Val-D-Pro-Om(Boc)-D-另^-Ile-D-別-Thr(Val-Z-Dhb-Phe-Alloc)-D-別-Ile-D-Val-O-TrtCl-樹脂(通過(guò)摻入二肽).在PhSiH"161^，Ummol,10當(dāng)量)存在下，在Ar氛圍下，將所述肽基-樹脂用Pd(PPh3)4(15.1mg，0.013mmol,0.1當(dāng)量)處理，以去除AJloc基團(tuán)，將Alloc-Phe-Z-Dhb-OH(217mg，0.65鵬ol,5當(dāng)量)和HATU(249mg,0.65mmol，5當(dāng)量)溶于DMF(1.25ml),并且加入到肽基-樹脂中，然后加入DIEA(228^1,1,3mmol，10當(dāng)量)，將混合物攪拌過(guò)夜.洗滌后，當(dāng)茚三酮試驗(yàn)為陰性時(shí)，所迷偶聯(lián)用相同量的試刑重復(fù)3小時(shí).用DMF和CH2Cl2洗涂后，一等份的肽基-樹脂用TFA-H20(9:1)處理60分鐘，蒸發(fā)后獲得的粗產(chǎn)物經(jīng)HPLC(條件B,tR18.3min)顯示純度〉80%,MALDI-TOF-MS,C79H,30N14O19的計(jì)算值1,579.0,實(shí)測(cè)值w々1,580.3[M+H]+,1,602.2[M+Na+，1,618.2[M+K]+,實(shí)施例135-MeHex-D-Val-ThrOBu)-Val-D-Val-D-Pro-Om(Boc)-D-另>-Ile-D-別-Thr(Val-Z-Dhb-Phe-H)-D-別-Ile-D-Val-OH,在PhSiH3(161^U，Ummoi,IO當(dāng)量)存在下，在Ar氛圍下，用Pd(PPh3)4(15.1mg，0.013mmol,0,1當(dāng)量)去除肽基-樹脂(實(shí)施例12)中的Alloc基團(tuán).通過(guò)AAA計(jì)算的終栽荷為0.16mmol/g(79。/?？偸章?，通過(guò)TFA-CH2Cl2(l:99)從所述樹脂(235mg，37.5mmol)切下被保護(hù)的肽(5x30sec),將合并的濾液減壓蒸發(fā)至干，然后凍干，得到40.5mg(24.5mmol，65%)題迷化合物，通過(guò)HPLC(條件B，&24.3min)檢查的純度>80%,MALD1-T0F-MS，C84H142N14019的計(jì)算值:1，65U,實(shí)效寸值w々1,674.8[M+Na)+，1,690.8[M+K+,實(shí)施例14kahalalideF(I),將被保護(hù)的肽(實(shí)施例13)(38.5mg，23mnol)溶于DMF(25ml)中，然后加入PyBOP(36.4mg，70Mmol，3當(dāng)量)和DIEA(24ml，140拜ol，6當(dāng)量).將混合物攪拌l小時(shí)，然后在減壓下通過(guò)蒸發(fā)去除溶刑，將被保護(hù)的環(huán)肽溶于TFA-H20(19:1,5ml)，然后將混合物攪拌1小時(shí)，在減壓下通過(guò)蒸發(fā)去除溶刑，然后加入&0(5ml)并凍千。如實(shí)施例7所述將粗產(chǎn)物純化，得到題述產(chǎn)物(3.6mg，2.4Mmol，10%收率)，該產(chǎn)物與實(shí)施例7中獲得的產(chǎn)物相5-MeHex-D-Val-Thr-D-Val-Val.D-Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)(Goetz，G.等1999，第55巻，第7739-7746頁(yè)給出的kahalalideF結(jié)構(gòu))實(shí)施例155-MeHex-D-Val-Thr-D-Val-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)(通過(guò)在固相中脫水)，進(jìn)行如實(shí)施例卜7所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，將Fmoc-Va-OH摻入到D-Pro-肽基-樹脂中，然后在去除Fmoc基團(tuán)后，再摻入Fmoc-D-Val-OH.通過(guò)AAA計(jì)算的終栽荷為0,106mmo/g(87%總收率)。切割收率為83%,獲得4.7mg題述化合物，在環(huán)化、脫保護(hù)和純化步驟中它代表13%總收率。該產(chǎn)物在HPLC中洗脫的時(shí)間比真正的kahalalideF樣品遲0.8-1.9分鐘[條件D(tR13.3min對(duì)12.5min)，條件E(tfl18.8min對(duì)17.4min)，條件F(t/14,0min對(duì)12.1min)。MALDI-TOF-MS，C75Hi24Ni4016的計(jì)算值1,477.9。實(shí)測(cè)值w々1,478.7[M+H+,1,500.7[M+Na+，1,516.6[M+K+,所述化合物的W-NMR(500MHz,d6-DMSO)譜(表II和表III)與真正的kahalalideF樣品獲得的波語(yǔ)不同，最大的差異為獲得的合成化合物，顯示出兩種構(gòu)象，這是由于L-Val-D-Pro殘基之間的順式-反式平衡所致，這在既沒有在天然產(chǎn)物中觀測(cè)到，也沒有在實(shí)施例7獲得的異構(gòu)體中觀測(cè)到.表H(主要反式異構(gòu)體)<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>表hi(次要順式異構(gòu)體)殘基N-HHaHP其它(Z)-Dhb9.63(s)6,33(q).28(d,J-6,5Hz，Y-CH3)D善Ile18.76(d)4.301.711.33,0.76(y-CH2，Y-CH3,5-CH3)L-Phe8.78(d，J=5.5Hz)4.432.93(m)7.20(1HAr，m)7.28(4HAr,m;)D-別-Thr8.58(d,J=9,0Hz)4.534.95(m)1.00(y-CH3)L-Val38.06(d，J-8.5Hz)4.111.810.71(y-CH3),0.60(Y-CH3)L-Orn8.37(d，〗=9.0Hz)4.621.52(2H)1.64OCH2)，2.78(bs，S-CH2)，7.66(s-NH,)D善Ile28.09(d，J=9.0Hz)4.421.640.77(5-CH3或d-CH3和丫-CH3)D-Val57.904.221.950.85(2"/-CH3)L-Thr7.88(d)4.233.994.93(OH),1.02(Y-CH3)D-Val27.63(d,J-8.5Hz)4.452.180.77(y-CH3)，0.62(y-CH3)D-Val47.49(d，J-9,0Hz)4.341.940.79C/-CH3),0.73(Y-CH3)L-Val16.72(d)3.84U80.62(2y-CH3)D-Pro4.932.06，1.89，1.75((3-CH2，y-CH2),3.3(m，S-CH2)5-MeHex2.08(1H)2.151(1H)1.48(P-CH2，S-CH),1.11(Y-CH2)，0.82(2s-CH3)42實(shí)施例1Sbis5-MeHex-D-Val-Thr-D-Val-Val-D-Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-Val-Phe-Z-Dhb-Val),在實(shí)施例15的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間題述產(chǎn)物作為副產(chǎn)物獲得。該產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t/j17.6min,條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C75Hi24N140，6的計(jì)算值1,477,9,實(shí)測(cè)值w々1,479.3[M+H+,1,501.2[M+Na+，1,517.M+K+.實(shí)施例165-MeHex-D-Val-Thr-D-Val-Val-D-Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)(通過(guò)摻入二舦)。進(jìn)行如實(shí)施例8-14所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例14的步驟中，將Fmoc-Val-OH摻入到D-Pro-肽基-樹脂中，然后在去除Fmoc基團(tuán)后，再摻入Fmoc-D-Val-OH.通過(guò)AAA計(jì)算的終栽荷為0,16mmol/g(79。/?？偸章?。切割效率為78%,獲得3.4mg題述化合物，在環(huán)化、脫保護(hù)和純化步驟中它代表10%總收率。經(jīng)純化的產(chǎn)物與實(shí)施例15中獲得的產(chǎn)物相同。Hamann等的kahalalideB[5-MeHex-Tyr-環(huán)(D-Ser-Phe-D-Leu-Pro-Thr.Gly)j實(shí)施例17H-Thr(氾u)-O-TrtCl-樹脂。將Cl-TrtCl-樹脂(0.5g，U5mmol/g)置于10ml裝有聚乙紼濾片的聚丙烯注射器中，然后用CH2C12(5x0.5min)洗滌樹脂，加入Fmoc-Thr(氾u)-OH(54mg，0.135mmol，0.2當(dāng)量)和D正A(235ml,1.35mmol，2當(dāng)量)的CH2C12(1.25ml)溶液，將混合物攪拌1小時(shí)。在挽拌15分鐘后，通過(guò)加入MeOH(400ml)終止反應(yīng)，F(xiàn)moc-Thr(出u)-O-TrtCl-樹脂進(jìn)行以下洗滌/處理CH2Cl2(3x0.5min)、DMF(3x0.5min)、哌啶-CH2Cl2-DMF(1:9.5:9.5,1x10min)、哌啶-DMF(1:4，1x15min)、DMF(5x0.5min)、異丙醉(2x1min)、DMF(5x0.5min)、MeOH(2x1min),然后真空干燥，通過(guò)AAA計(jì)算的栽荷為0,15mmol/g。實(shí)施例185-MeHex-Tyr-D-Ser(Gly-H)-Phe-D-Leu-Pro-Thr-OH,在DMF(1.25ml)中,用DIPCDI(82^U,0.53mmol,7當(dāng)量)和HOBt(81mg，0,53mmol,7當(dāng)量)，將Fmoc-Pro-OH(178mg，0.53mmol,7當(dāng)量)、Fmoc-D-Leu-OH(187mg，0.53mmol,7當(dāng)量)、Fmoc-Phe-OH(204mg,0.53mmol，7當(dāng)量)、Fmoc-D-Ser-OH(游離幾基)(173mg，0，53mmol，7當(dāng)量)、Fmoc-Tyr(氾u)-OH(243mg,0.53mmol，7當(dāng)量)和5-MeHex-OH(69mg，0.53mmol，7當(dāng)量)依次加到以上獲得的H-Thr(氾u)-O-TrtCl-樹脂中。在除D-Ser外的所有情況下，在偶聯(lián)90分鐘后，節(jié)三酮試驗(yàn)都為陰性.在DIEA(184pl，1.06mmol,14當(dāng)量)存在下，將Fmoc-D-Ser-OH(173mg，0.53mmol，7當(dāng)量)與HATU(201mg，0.53mmol,7當(dāng)量)在DMF中再偶聯(lián)90分鐘，如通用方法所述去除Fmoc基團(tuán)并進(jìn)行洗滌，在DMAP(8.3mg，68nmol，0.9當(dāng)量)存在下，將Boc-Gly-OH(119mg,0.68mmol,9當(dāng)量)與DIPCDI(105nl,0.68mmol，9當(dāng)量)偶聯(lián)2.5小時(shí)，用新鮮試劑將該偶聯(lián)重復(fù)1.5小時(shí)。終荷栽為0.10mmol/g,表示77%合成收率，用TFA-H20(92:8)從所迷樹脂(525mg,54Mmol)切下未保護(hù)的肽達(dá)2小時(shí)。將合并的濾液減壓蒸發(fā)至干，加入？120(5ml),將溶液凍干，得到43.0mg(48.0闊01，89%收率)題迷化合物，經(jīng)HPLC(條件A，trt18.5min)檢查的純度〉85。/。，ESMS，C45H65N7012的計(jì)算值895.5。實(shí)測(cè)值w/z896.6[M+H+,44實(shí)施例19kahalalideB5-MeHex-Tyr-環(huán)(D-Ser-Phe-D-Uu-Pro-Thr-Gly)。將未保護(hù)的肽(實(shí)施例18)(40.5mg,45,01)溶于DMF(48ml)中，然后加入PyBOP(70mg，0.135mmol,3當(dāng)量)和DIEA(47ml,0.271mmol,6當(dāng)量)。將混合物攪拌2小時(shí)，然后在減壓下通過(guò)蒸發(fā)去除溶劑，加入H20(5ml),將溶液凍干。該粗產(chǎn)物通過(guò)中壓層析(VydacC,s15-20^m，300A,240x24咖)、在5小時(shí)內(nèi)用線性梯度20°/。-60%乙腈(+0.05%TFA)的水(+0.05。/。TFA)溶液以120ml/h純化(每種溶劑各300ml)，于220nm檢測(cè)，得到題述產(chǎn)物(8.7mg，9.9,ol,22%收率)。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(條件A，&21.6min)和MALDI-TOF-MS表征，C45H63N70"的計(jì)算值877.5,實(shí)測(cè)值w/z878.7[M+H+,900.6[M+Na]+,916,5[M+K]+,AAA:Gly1,02(1)，Thr0.95(1)，Phe0.99(1),Ser1.00(1),Pro1.20(1)，Leu1.00(l)，Tyr0.87(1).實(shí)施例205-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Va卜Phe-Etg-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例l-4和實(shí)施例6-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例4的步驟中，用Fmoc-Etg-OH代替Fmoc-Thr-OH。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tw16.8min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C7sH，26NwO，6的計(jì)算值1,479.0,實(shí)測(cè)值w/z1,480.2[M+H]+，1,502.M+Naj+，1,518.0M+Kj+.實(shí)施例20b5-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-D-Etg-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例l-4和實(shí)施例6-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例4的步驟中，用Fmoc-D-Etg-OH代替Fmoc-Thr-OH,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR17.0min,條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C"H,26N"0,6的計(jì)算值1,479.0.實(shí)測(cè)值m/z1,501.0[M+Na〗+，1,517.9M+K)+,實(shí)施例20c5-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-D-Thr-Va，)，從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例l-4和實(shí)施例6-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例4的步驟中，用Fmoc-D-Thr(出u)-OH代替Fmoc-Thr(出u)-OH.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tft19.9min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C"Hu6NwOn的計(jì)算值1,494.9,實(shí)測(cè)值w々1,517.M+Na]+，1,533.M+K+,實(shí)施例20d5-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-D-別-Thr.Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例卜4和實(shí)施例6-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例4的步驟中，用Fmoc-D-別-Thr-OH代替Fmoc-Thr(氾u)-OH.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR18.0min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C75HmN、40n的計(jì)算值1,494.9.實(shí)測(cè)值w/z1,496.M+H]+,1,518.6[M+Na+，1,534.6[M+K]+,實(shí)施例20e5-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-He-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-D-Phe-Val),如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法從200mg樹脂開始，與實(shí)施例4唯一不同的是，用Fmoc-D/L-(b-OH)Phe-OH代替Fmoc-Thr-OH.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR22.2min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C8qH126N14016的計(jì)算值1,538.95,實(shí)測(cè)值w々1，540.M+H十，1,562.4[M+Na]+,1,578.M+K〗+,實(shí)施例215.MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-另、〗-lie-環(huán)(D-Dpa-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是,在實(shí)施例2的步驟中，用Fmoc-D-Dpa(Alloc)-OH代替Fmoc-D-別-Thr-OH，并且在摻入Alloc-Val-OH之前(與其余被保護(hù)的氛基酸一樣將其摻入)，如上所述去除Dpa中的Alloc基團(tuán)，產(chǎn)物經(jīng)HPLC和ESMS表征，C74H123N15015的計(jì)算值1,461.9。實(shí)測(cè)值w々1,463.3[M+H+.實(shí)施例22But-D-Val-Thr-Va卜D-Val-D-Pro-Oni-D-另,J-He-環(huán)(D-另Q-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用But-OH代替5-MeHex,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(ti14.7min，條件B)和MALD1-TOF-MS表征，C72H118N、40，6的計(jì)算值1,435.9.實(shí)測(cè)值w/H,459.6fM+Na)+,1,475.6[M+K+。實(shí)施例22bisBut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-另'J-lie-環(huán)(D-另'J-Thr-D-別-Ile-Val-Phe-Z-Dhb-Val),在實(shí)施例22的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tw16.0min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C72HmNMO)6的計(jì)算值1,435.9.實(shí)測(cè)值m々1,459,M+Na]+，1,475.M+K+。實(shí)施例233-MeBut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val).從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例卜7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用3-MeBut-OH代替5-MeHex,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t15.9min,條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C73H)2oN,40，6的計(jì)算值1,449.9。實(shí)測(cè)值w/z1,473.2[M+Na+，1,489.2[M+K+。實(shí)施例23Ws3-MeBut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別曙Ile-D-Val畫Phe-Z-Dhb-Val),在實(shí)施例23的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t17.0min，條件B)和ESMS表征，C73H,2oN"0,6的計(jì)算值1,449.9。實(shí)測(cè)值附々1,473,M+Na+，1,489.M+K+.實(shí)施例243，3-DiMeBut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-He-環(huán)(D-別-Thr-D-別-lle-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所迷的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用3，3-鹿eBut-OH代替5-MeHex.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tfl16.3min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C74HmN)40、6的計(jì)算值1,463.9.實(shí)測(cè)值m/z1,487.4[M+Naj+，1,503.6[M+K+'48實(shí)施例24bis3，3-DiMeBut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-He-環(huán)(D-別-Thr-D.別-Ile-Val-Phe-Z-Dhb-Val),在實(shí)施例24的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t/17.6min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C74HmN,40,6的計(jì)算值1,463.9.實(shí)測(cè)值w/z1,487.3〖M+Na)+,1,503.M+K+.實(shí)施例2S4-MePen-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D曙Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所迷的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用4-MePen-OH代替5-MeHex.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t尺16.5min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C74Hi22N，40，6的計(jì)算值1,463.9'實(shí)測(cè)值w/z1,487.M+Na+，1,503.M+Kj+。實(shí)施例25bis4-MePen-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。在實(shí)施例25的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR17.8min,條件B)和MALDI-TOF-MS表征，(:74&22>^4016的計(jì)算值1,463.9,實(shí)測(cè)值'.附/z1,487.8M+Na]+,1,503.M+K+。實(shí)施例26Hep-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-另、J-He-環(huán)(D-另'J-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用H印-OH代替5-MeHex。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tftl7.5min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C75Hi24N,4016的計(jì)算值1，477.9.實(shí)測(cè)值加々1,501.M+Na]+,1,517.5[M+K+,實(shí)施例26bisH叩-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-另'J-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-Val-Phe-Z響Dhb-Val),在實(shí)施例26的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物，產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR18.9min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C7sH,24N，40、6的計(jì)算值1,477.9.實(shí)測(cè)值附/z1,501,6[M+Na]+,1,517.M+K+,實(shí)施例27Pal誦D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-另'J-lie-環(huán)(D-另'J-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe.Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用Pal-OH代替5-MeHex.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR22.1min,條件G)和MALDI-TOF-MS表征，CMH142N14016的計(jì)算值1,603.1.實(shí)測(cè)值w/z1,626.9M+Na+，1,642.9[M+K+,實(shí)施例27bisPal-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro.Orn-D-另、J-He-環(huán)(D-另、J-Thr-D-別-Ile-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。在實(shí)施例27的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間作為副產(chǎn)物min，條件G)和MALDI-TOF-MS表征，C84H"2N、40!6的計(jì)算值1,603.1,實(shí)測(cè)值附/z1,626.8[M+Na〗+,1.642.8[M+K+。實(shí)施例27a4-DiMeABut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-別-He-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb誦Val).從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中>用4-DiMeABut-OH代替5-MeHex。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t/12.0min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C74HmN、sO,6的計(jì)算值1,477,9,實(shí)測(cè)值w/z1,478.M+H+,1,500.6[M+Na+，1,516.6[M+K+,實(shí)施例27b2-Hedo-D-Val-Thr-Val-D-Val-D.Pro-Om-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val).從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所迷的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用2-Hedo-OH代替5-MeHex。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(twl5.8min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C74HmN140,6的計(jì)算值1,458.9,實(shí)測(cè)值w/z1,460.0[M+Hj+，1,482.0M+Na+,1.497.9IM+K)十'實(shí)施例27c4-AcBut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-lle-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所迷的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用4-AcBut-OH代替5-MeHex,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tfl18.2min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，(:741120>414018的計(jì)算值1,492.9。實(shí)測(cè)值w々1,493.7[M+H〗+,1,515.8[M+Na]+,1,531,7[M+K)+,實(shí)施例27d4-HOBut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile.D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用4-HOBut-OH代替5-MeHex,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR16.6min,條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C72HmN"0,7的計(jì)算值1,450.9,實(shí)測(cè)值w々1,451.6[M+H+,1,473.6[M+Na]+,1，489.6[M+K+,實(shí)施例27eAc-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-另'J-lie-環(huán)(D-另U-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)'從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用HOAc代替5-MeHex,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t尺17.0min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C7oH出N,40！6的計(jì)算值1,406.9,實(shí)測(cè)值w々1,407,8[M+H)+，1,429.8M+Na]+。實(shí)施例27fTFA-D-Val-Thr-Va卜D-Val-D-Pro-Oni-D-另>-lie-環(huán)(D-另^-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。在實(shí)施例27e的制備(在環(huán)化步驟期間的三氟乙酰化(trifluoroacetylion))期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t/14,7min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C7oHmF3N14016的計(jì)算值1,460.8,實(shí)測(cè)值m々1,462,0[M+H+，1，484.1[M+Na]+，1,500.0M+Kf.實(shí)施例27g52AcButBut-D-Val-Thr-Va!-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-He-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用AcButBut-OH代替5-MeHex,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t14.1min,條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C78H,26N"02。的計(jì)算值1,578.9,實(shí)測(cè)值w/z1,581.2[M+Hj+,1,602.M+Nar,1,618.2[M+K+,實(shí)施例27hIBut-D-別-Ile-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-別-Ile-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所述的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用Fmoc-D-別-Ile-OH代替5-MeHex，去除Fmoc基團(tuán)，然后用IBut-OH?；a(chǎn)物經(jīng)HPLC(tfl15.3min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C78H129N15017的計(jì)算值1,548.0。實(shí)測(cè)值w/z1,548,8M+H+，1,570,8[M+Na]+,1,586.8IM+K]+,實(shí)施例27iLit-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-另、J-He-環(huán)(D-另'J-Thr.D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所迷的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用Lit-OH代替5-MeHex.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR13.1min，條件H)和MALDI-TOF-MS表征，C92H、50N"O17的計(jì)算值1,723.1。實(shí)測(cè)值/々1,724.6[M+H]+,1,746.6[M+Na]+，1,761.5[M+K]+,實(shí)施例27jTFA-Ut-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。在實(shí)施例27i的制備(在環(huán)化步驟期間的三氟乙酰化)期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tfl17.1min，條件H)和MALDI-TOF-MS表征，C94H159F3N14018的計(jì)算值:1,819.1,實(shí)測(cè)值w/z1,820.6[M+H+,1,842.M+Na〗+，1,858.6[M+K+,實(shí)施例27kTlco-D-Val-Thr-Val-D-Va卜D-Pro-Orn-D-另'J-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所迷的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，用TIco-OH代替5-MeHex。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t/16.8min，條件H)和ES-MS表征，C92H158N,4016的計(jì)算值1,715.2,實(shí)測(cè)值w々858.M+H+/2,1,171.8,H+,實(shí)施例28H-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Orn-D-另'J-lie-環(huán)(D-另"-Thr-D-別-lle-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),從200mg樹脂開始，進(jìn)行如實(shí)施例1-7中所逸的實(shí)驗(yàn)方法，唯一不同的是，在實(shí)施例3的步驟中，不摻入5-MeHex，并且用Fmoc-D-Val-OH代替Fmoc-D-Val-OH。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(tR11.6min，條件B)和MALD1-T0F-MS表征，C6sH"2N、40)5的計(jì)算值1,364,8,實(shí)測(cè)值w々1,388.M+Na+，1,404.3fM+K+,實(shí)施例28bisH-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-Pro-Om-D-另U-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。在實(shí)施例28的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期間作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t;12.9min，條件B)和MALDl-TOF-MS表征，0:68&121^4015的計(jì)算值1,364.8'實(shí)測(cè)值w/z1,388.4[M+Na〗+，1,404.M+K+,實(shí)施例295-MeHex-D-Val-Thr-Val-D.Val-D-Pro-D-另,J-lie-環(huán)(D-另'J-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),實(shí)驗(yàn)方法基本上如實(shí)施例卜7中所述，但依照方案2,55<image>imageseeoriginaldocumentpage56</image>合成從200mg樹脂開始，但不摻入Fmoc-Orn(Boc)-OH。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t;23.9min，條件A)和MALDI-TOF-MS表征，C7oHmN、20"的計(jì)算值1,362.9.實(shí)測(cè)值w/z1,386.4[M+Naf,1,402.4[M+K]+。實(shí)施例2外is5-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-VaI-D-Pro-D-另'j-lie-環(huán)(D-另U-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),在實(shí)施例29的制備(在環(huán)化步驟期間的外消旋化)期問作為副產(chǎn)物獲得的產(chǎn)物.產(chǎn)物經(jīng)HPLC和MALDI-TOF-MS表征，實(shí)施例305-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-Val-D-別-He-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),實(shí)驗(yàn)方法基本上如實(shí)施例1-7中所迷，但依照方案2,合成從200mg樹脂開始，但不摻入Fmoc-Orn(Boc)-OH和Fmoc-D-Pro-OH.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t20.3min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，CmH^NhC^的計(jì)算值1,265.8,實(shí)測(cè)值w々1,288.M+Na+，1,304.M+K+,實(shí)施例315-MeHex-D-Val-Thr-Val-D-別-lie-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)。實(shí)驗(yàn)方法基本上如實(shí)施例1-7中所述，但依照方案2。合成從200mg樹脂開始，但不摻入Fmoc-Orn(Boc)-OH、Fmoc-D-Pro-OH和Fmoc-D-Val-OH,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t尺20.0min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C6oH98N,。0,3的計(jì)算值1,166.7,實(shí)測(cè)值w々1,190.9M+Na+，1,206.9M+K+。實(shí)施例325-MeHex-D-Val-Thr-D'另'J-lie-環(huán)(D-另'J-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),實(shí)驗(yàn)方法基本上如實(shí)施例1-7中所迷，但依照方案2。合成從200mg樹脂開始，但不摻入Fmoc-Om(Boc)-OH、Fmoc-D-Pro-OH、Fmoc-D-Val-OH和Fmoc-Val-OH,產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t/24,6min，條件A)和MALDI-TOF-MS表征，C55H89N9012的計(jì)算值1,067.7。實(shí)測(cè)值附々1,068.7[M+H)+，1,090.M十Na]+,1,106,M+Kf。實(shí)施例335-MeHex-D-Val-D-別-He-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),實(shí)驗(yàn)方法基本上如實(shí)施例1-7中所述，但依照方案2.合成從200mg樹脂開始，但不摻入Fmoc-Om(Boc)-OH、Fmoc-D-Pro-OH、Fmoc-D-Val-OH、Fmoc-Val-OH和Fmoc-Thr(氾u)-OH.產(chǎn)物經(jīng)HPLC(^19.8min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C51H82N8O10的計(jì)算值966,6,實(shí)測(cè)值w々990.7[M+Na)+,1007.2[M+K+.實(shí)施例345-MeHex-D-別-Ile-環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb攀Val).實(shí)驗(yàn)方法基本上如實(shí)施例1-7中所迷，但依照方案2,合成從200mg樹脂開始，但不摻入Fmoc-Orn(Boc)-OH、Fmoc-D-Pro-OH、Fmoc-D-Val-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Thr(氾u)-OH和Fmoc-D-Val-OH。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(k22.0min，條件B)和MALDI-TOF-MS表征，C46H73N709的計(jì)算值:867.6,實(shí)測(cè)值w々8卯.M他+,906,M+K]+。實(shí)施例3S5-MeHex-環(huán)(D-別.Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val),實(shí)驗(yàn)方法基本上如實(shí)施例1-7中所述，但依照方案2,合成從200mg樹脂開始，但不摻入Fmoc-D-別-Ile-OH、Fmoc-Om(Boc)-OH、Fmoc-D-Pro-OH、Fmoc-D-Val-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Thr(氾u)-OH和Fmoc-D-Val-OH。產(chǎn)物經(jīng)HPLC(t/17.1min，條件B)和ESMS表征，C40H62N6O8的計(jì)算值754.5,實(shí)測(cè)值m/z755.M+Hj十，777.M+Na]+,793.7[M+K]+,生物活性按照Berjeron等，BiochemandBiophRes.Comm.,1984，121，3，848-854的方法獲得的下表中的結(jié)果，證明了本發(fā)明化合物的生物活性。所迷細(xì)胞系為P388，鼠淋巴瘤；A549,人肺癌；HT-29,人結(jié)腸癌；MEL-28,人黑素瘤；DU-145,人前列腺癌，表kahalalideF同類物化合物環(huán)鏈"分子量27j環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)末端TFA-Lit-182027i壞(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)末端石膽耽(Lit)172427環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)末端棕櫚酰Palm圃27bis環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-VaJ-Phe-Z-Dhb-Val)末端棕櫚酰Palm27g環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb.Val)末端4-(4-乙耽H基丁醜氣基)-丁跣(AcButBut-)157927h環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Z-Dhb-Va，)IBut-D-別-Ile-D-Vai-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D-別-Ile-154820e壞(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Va，-Phe-D-Phe-Val)-D-Phe:a，b-二脫氛-笨丙氨酸5-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D-別-Ile-153920c環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-Thr-Val)5-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Orn-D.別-lie-149527c環(huán)(D-別-Thr-D-別-lle-D-Val-Phe-Z-Dhb-Val)末端4-乙跣氣基丁酖基(4-AcBut)149320環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-L-Etg-Val)5-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-D-Val-D-Pro-L-Om-D-別-He-M7920b環(huán)(D-別-Thr-D-別-Ile-D-Val-Phe-D-Etg-Val)5-MeHex-D-Val-L-Thr-L-Val-DVal-D-Pro-L-Orn-D-別-Ile-147959<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>**當(dāng)鏈有指定末端時(shí)化合物的鏈與化合物7中的相同，但具有5-MeHex的指定取代，表kahalalideF同類物的細(xì)胞毒性衍生物的IC50(微摩爾)值<table>tableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table>參考文獻(xiàn)Ham咖，M.T.;Scheuer，P丄丄C/ie附.Soc.1993,"kahalalideF:一種從sarcogloss油軟體動(dòng)物￡7>^0w/escem1及緣藻S^yo/w/jsp.中分離的生物活性縮肽(KahalalideF:aBioactiveDepsipeptidefromtheSacoglossanMollusk￡7戸'"rey^sce似andtheGreenAlga^yo戸'jsp,)"，第115巻，第5825-5826頁(yè)，Ham咖，M.T.等,丄Org.C/iew.1996."kahalalide:來(lái)源于海洋軟體動(dòng)物￡7>tf/Grrw/wce"j及其藻類食物丑o^/w/'jsp.的生物活性肽(Kahalalides:BioactivepeptidesfromMarineMolluskfi"(ywarw/ejce/wanditsAJgalDiet5狎^sp.)"，第61巻，第6594-6660頁(yè)。Garcia-Rocha，M.等，Ca"cer厶e".,1996."抗腫瘤化合物kahalalideF作用于細(xì)胞溶酶體(TheAntitumoralCompoundKahalalideFActsonCellLysosomes)"，第99巻，第43-50頁(yè)，H咖咖，M.T,等，丄Og.C/jew,1998."kahalalide:來(lái)源于海洋軟體動(dòng)物￡7>w'arw/esce"s及其藻類食物B"o;w/ssp.的生物活't生肽(Kahalalides:BioactivePeptidesfromMarineMollusk￡7yj/。rw/ejcewanditsAlgalDiet5狎j"sp.)"，第63巻，第485頁(yè)(J,CTiew.1996,第61巻，第6594-6660頁(yè)的修訂本)，Lloyd-Williams,P.等，C/ew/ca/v4pp脂c/esSy"f/je^o/尸e/"^y朋of尸膽/"j.CRCPress,Boca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