專(zhuān)利名稱(chēng)：：抗il-17a抗體的制作方法抗IL-17A抗體發(fā)明領(lǐng)域一般地講，本發(fā)明涉及IL-17A特異性結(jié)合化合物，例如抗體，及其用途。更具體而言，本發(fā)明涉及識(shí)別人IL-17A并調(diào)節(jié)其活性的嵌合抗體和人源化抗體，所述活性尤其為在炎性、自身免疫性和增生性病癥中的活性。
背景技術(shù)：
：免疫系統(tǒng)用于保護(hù)個(gè)體免遭感染性物質(zhì)如細(xì)菌、多細(xì)胞生物和病毒的侵襲，以及保護(hù)個(gè)體免于癌癥侵襲。該系統(tǒng)包括幾種類(lèi)型的淋巴樣細(xì)胞和髓樣細(xì)胞，例如單核細(xì)胞、巨謹(jǐn)細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞(DC)、嗜酸性粒細(xì)胞、T細(xì)胞、B細(xì)胞和嗜中性粒細(xì)胞。這些淋巴樣細(xì)胞和髓樣細(xì)胞經(jīng)常產(chǎn)生稱(chēng)為細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白。免疫應(yīng)答包括炎癥，即，免疫細(xì)胞全身性地或在身體的特定部位中累積。免疫細(xì)胞響應(yīng)于感染性物質(zhì)或外來(lái)物質(zhì)分泌細(xì)胞因子，細(xì)胞因子又調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞增殖、發(fā)育、分化或遷移。免疫應(yīng)答可以產(chǎn)生病理性后果，例如，當(dāng)它涉及過(guò)度炎癥時(shí)，如在自身免疫性病癥中(參見(jiàn)例如Abbas等(編輯)(2000)Ce〃w/ar朋t/Mo/ecw/ar/m腦wo/ogv,W.B.SaundersCo.,Philadelphia,PA;Oppenheim和Feldmann(編輯)(2001)QytoA:/"e/^/erewce，AcademicPress,SanDiego,CA;vonAndrian和Mackay(2000)臉wMet/.343:1020-1034;Davidson和Diamond(2001)Mec/.345:340-350)。白介素-17A(IL-17A;也稱(chēng)為細(xì)胞因子T-淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原8(CTLA8)，IL-17)是在抗原識(shí)別后由記憶T細(xì)胞產(chǎn)生的同型二聚化細(xì)胞因子。白介素-23(IL-23)促進(jìn)這類(lèi)T細(xì)胞的發(fā)育。McKenzie等(2006)7>e"A/www"o/.27(1):17-23;Langrish等(2005)Exp.Met/.201(2):233-40。IL-17A通過(guò)兩個(gè)受體IL-17RA和IL-17RC用于誘導(dǎo)多種涉及嗜中性粒細(xì)胞生物學(xué)、炎癥和器官破壞的分子的產(chǎn)生。該細(xì)胞因子與組織壞死因子(TNF)和/或白介素1P(IL-1(3)協(xié)同增效，以促進(jìn)更加促炎的環(huán)境。業(yè)已提出，用抗體或抗體的抗原結(jié)合片段拮抗IL-17A的活性以治療多種炎性、免疫性和增殖性病癥，包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎骨質(zhì)疏松癥、炎性纖維化(例如硬皮病、肺纖維化和硬化)、齒齦炎、牙周炎或其它炎性牙周病、炎性腸病(例如克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和炎性腸病)、哮喘(包括變應(yīng)性哮喘)、變態(tài)反應(yīng)、慢性阻塞性肺病(COPD)、多發(fā)性硬化、銀屑病和癌癥。(參見(jiàn)例如US2003/0166862、WO2005/108616、WO2005/051422和WO2006/013107)。使用抗體作為體內(nèi)治療劑的最值得注意的限制是抗體的免疫原性。因?yàn)榇蠖鄶?shù)單克隆抗體衍生自嚙齒動(dòng)物，所以在人中重復(fù)使用導(dǎo)致產(chǎn)生針對(duì)治療性抗體的免疫應(yīng)答，例如人抗小鼠抗體或HAMA。此類(lèi)免疫應(yīng)答導(dǎo)致最低限度的療效損失和最大限度的潛在致命性過(guò)敏反應(yīng)。減少?lài)X動(dòng)物抗體免疫原性的最初努力涉及其中小鼠可變區(qū)(Fv)與人恒定區(qū)融合的嵌合抗體的產(chǎn)生。Liu等(1987)尸rac.A^/.爿cadS".[/&484:3439-43。然而，用人可變區(qū)和小鼠恒定區(qū)的雜合體注射的小鼠產(chǎn)生針對(duì)人可變區(qū)的強(qiáng)烈抗抗體應(yīng)答，提示在此類(lèi)嵌合抗體中保留完整的嚙齒動(dòng)物Fv區(qū)仍可在患者中產(chǎn)生不需要的免疫原性。一般認(rèn)為，可變結(jié)構(gòu)域的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)環(huán)包括抗體分子的結(jié)合部位。因此，已嘗試將嚙齒動(dòng)物CDR環(huán)嫁接到人構(gòu)架上(即人源化)，以進(jìn)一步最小化嚙齒動(dòng)物序列。Jones等(1986)淑,321:522;Verhoeyen等(1988)Sc/ewce239:1534。然而，CDR環(huán)交換仍不能一致地產(chǎn)生具有與來(lái)源抗體相同的結(jié)合性質(zhì)的抗體。人源化抗體中的構(gòu)架殘基(FR)—涉及CDR環(huán)支持的殘基的變化也經(jīng)常是保持抗原結(jié)合親和力所需的。Kabat等(1991)J./附mw"o/.147:1709。盡管已報(bào)道在許多人源化抗體構(gòu)建體中使用CDR嫁接和保留構(gòu)架殘基，但難以預(yù)測(cè)特定序列是否將產(chǎn)生具有所需結(jié)合性質(zhì)且有時(shí)具有生物學(xué)性質(zhì)的抗體。參見(jiàn)例如Queen等(1989)Prac.v4cadSc,."&486:10029，Gorman等(1991)尸rac.Ato/./4cadSc/."&488:4181,和Hodgson(1991)5/o&c/朋/ogv(AT)9:421-5。而且，大多數(shù)先前研究使用不同的人序列用于動(dòng)物輕鏈和重鏈可變序列，從而使得此類(lèi)研究的預(yù)言性受到懷疑。已使用已知抗體的序列，或者更一般地，使用具有已知X射線晶體結(jié)構(gòu)的抗體如抗體NEW和KOL的序列。參見(jiàn)例如Jones等，出處同上；Verhoeyen等，出處同上；和Gorman等，出處同上。已報(bào)道了一些人源化構(gòu)建體的確切序列信息。需要IL-17A拮抗劑，例如抗IL-17A單克隆抗體，以用于治療人病癥，例如炎癥、自身免疫性疾病和增殖性疾病。這類(lèi)拮抗劑優(yōu)選在人類(lèi)患者中表現(xiàn)出低免疫原性，使得可以重復(fù)給予，而沒(méi)有不利的免疫應(yīng)答。發(fā)明概述本發(fā)明涉及具有一種或多種所需特性的抗人IL-17A抗體，所述特性包括在人類(lèi)患者中的高結(jié)合親和力、中和活性、良好的藥代動(dòng)力學(xué)和低抗原性。本發(fā)明還涉及在疾病治療中使用本發(fā)明的抗體。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供結(jié)合化合物，例如抗體分子或其結(jié)合片段，其結(jié)合人IL-17A,并抑制人IL-17A的活性。在某些實(shí)施方案中，結(jié)合化合物包含至少1個(gè)抗體輕鏈可變(VL)結(jié)構(gòu)域和至少1個(gè)抗體重鏈可變(VH)結(jié)構(gòu)域，或者這些結(jié)構(gòu)域的結(jié)合片段，其中VL結(jié)構(gòu)域包含至少指定數(shù)目(aspecifiednumber)的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR),其具有選自SEQIDNO:U-13的序列，VH結(jié)構(gòu)域包含至少指定數(shù)目的CDR,其具有選自SEQIDNO:14-20的序列，其中所述指定數(shù)目為l、2或3。指定數(shù)目的CDR可以與任何給定結(jié)合化合物的輕鏈和重鏈可變結(jié)構(gòu)域相同或不同。在又一個(gè)實(shí)施方案中，VH結(jié)構(gòu)域CDR選自SEQIDNO:14、17和20。在再一個(gè)實(shí)施方案中，Vh結(jié)枸域CDR選自SEQIDNO:14、16和19。在又一個(gè)實(shí)施方案中，Vl和VH結(jié)構(gòu)域的序列分別為SEQIDNO:5和6的序列。在某些實(shí)施方案中，IL-17A結(jié)合化合物抑制人IL-17A的活性。在其它實(shí)施方案中，結(jié)合化合物包含至少1個(gè)Vt結(jié)構(gòu)域和至少1個(gè)VH結(jié)構(gòu)域，或者這些結(jié)構(gòu)域的結(jié)合片段，其中VJ吉構(gòu)域包含1、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:26-28的序列的CDR，VH結(jié)構(gòu)域包含1、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:29-31的序列的CDR。在又一個(gè)實(shí)施方案中，Vl和VH結(jié)構(gòu)域的序列分別為SEQIDNO:22和23的序列。在又一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合化合物具有與ATCC保藏號(hào)為PTA-7739(大鼠30C10,以菌抹JL7-30C10.C3于2006年7月20日)的雜交瘤產(chǎn)生的抗體相同的CDR。在又一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合化合物包含至少1個(gè)Vl結(jié)枸域和至少1個(gè)Vh結(jié)枸域，或者這些結(jié)構(gòu)域的結(jié)合片段，其中Vt結(jié)構(gòu)域包含1、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:48-50的序列的CDR，VH結(jié)構(gòu)域包含l、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:51-53的序列的CDR。在又一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合化合物包含至少1個(gè)VL結(jié)構(gòu)域和至少1個(gè)Vh結(jié)枸域，或者這些結(jié)構(gòu)域的結(jié)合片段，其中Vl結(jié)枸域包含1、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:34-36的序列的CDR，VH結(jié)構(gòu)域包含1、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:37-39的序列的CDR，或者VL結(jié)構(gòu)域包含1、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:56-58的序列的CDR,Vh結(jié)枸域包含1、2或3個(gè)具有選自SEQIDNO:59-61的序列的CDR。在多個(gè)其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供結(jié)合人IL-17A的結(jié)合化合物，其具有分別與SEQIDNO:5和6的序列具有至少95%、90%、85%、80%、75%或50%的序列同源性的Vl和VH結(jié)構(gòu)域。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明的結(jié)合化合物包含VL和VH結(jié)構(gòu)域，其相對(duì)于SEQIDNO:5和6的序列分別具有至多0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10個(gè)以上的保守氛基酸取代。在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的結(jié)合化合物為具有輕鏈和重鏈的抗體，其相對(duì)于SEQIDNO:2和4的序列分別具有至多0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10個(gè)以上的保守M酸取代。在一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合化合物為抗體或其結(jié)合片段，例如抗體片段選自Fab、Fab，、Fab，-SH、Fv、scFv、F(ab，)2和雙體。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的結(jié)合化合物為抗體hul6C10，其含有具有成熟形式的SEQIDNO:2的序列(殘基l-220)的輕鏈，以及具有成熟形式的SEQIDNO:4的序歹'〗(殘基l-454)的重鏈。在又一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合中的hul6C10，于2006年6月28日保藏)產(chǎn)生的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的結(jié)合化合物包含重鏈恒定區(qū)，例如人恒定區(qū)，例如yl、丫2、丫3或y4人重鏈恒定區(qū)或其變體。在又一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合化合物包含輕鏈恒定區(qū)，例如人輕鏈恒定區(qū)，例如入或K人輕鏈區(qū)或其變體。在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及分離的核酸，例如DNA，其編碼本發(fā)明的結(jié)合化合物，例如結(jié)合人IL-17A的抗體(或其結(jié)合片段)。在一個(gè)實(shí)施方案中，分離的核酸編碼結(jié)合化合物，所述化合物含有至少1個(gè)抗體輕鏈可變(vl)結(jié)構(gòu)域和至少1個(gè)抗體重鏈可變(vh)結(jié)構(gòu)域，或者這些結(jié)構(gòu)域的結(jié)合片段，其中VL結(jié)構(gòu)域包含至少指定數(shù)目的、具有選自SEQIDNO:11-13的序列的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR),Vh結(jié)枸域包含至少指定數(shù)目的、具有選自SEQIDNO:14-20的序列的CDR，其中所述指定數(shù)目為1、2或3。在又一個(gè)實(shí)施方案中，分離的核酸分別編碼SEQIDNO:5和6的輕鏈和重鏈可變區(qū)序列中的一個(gè)或兩個(gè)。在再一個(gè)實(shí)施方案中，分離的核酸編碼抗體16C10,所述抗體含有具有成熟形式的SEQIDNO:2的序列的輕鏈和具有成熟形式的SEQIDNO:4的序列的重鏈。在某些實(shí)施方案中，分離的核酸包含SEQIDNO:l或SEQIDNO:62的核苷酸58-717，在其它實(shí)施方案中，分離的核酸包含SEQIDNO:3或SEQIDNO:63的核苷酸58-1419。在又一個(gè)實(shí)施方案中，分離的核酸包含SEQIDNO:l的序列和SEQIDNO:3的序列。在又一個(gè)實(shí)施方案中，ii分離的核酸包含SEQIDNO:62的序列和SEQIDNO:63的序列。在某些實(shí)施方案中，分離的核酸編碼在單個(gè)核酸分子上的輕鏈和重鏈這二者，在其它實(shí)施方案中，編碼在兩個(gè)或更多個(gè)單獨(dú)的核酸分子上的輕鏈和重鏈。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及含有本發(fā)明的分離核酸的表達(dá)載體，其中在用所述載體轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞時(shí)所述核酸與宿主細(xì)胞識(shí)別的控制序列有效連接。在一個(gè)實(shí)施方案中，表達(dá)栽體具有ATCC保藏號(hào)PTA-7576(在質(zhì)粒pAIL17AVl中的hul6C10，于2006年6月28日保藏)。在又一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含本發(fā)明的表達(dá)載體的宿主細(xì)胞。本發(fā)明進(jìn)一步涉及生產(chǎn)本發(fā)明的結(jié)合化合物的方法，包括在培養(yǎng)基中培養(yǎng)具有編碼結(jié)合化合物的表達(dá)載體的宿主細(xì)胞，并由宿主細(xì)胞或培養(yǎng)基分離結(jié)合化合物。本發(fā)明還涉及結(jié)合化合物，例如抗體或其結(jié)合片段，其結(jié)合人IL-17A上與抗體16C10、4C3、30C10、12E6、23E12或1D10相同的表位；例如，能夠交叉阻斷本發(fā)明的這些抗體中的任一種結(jié)合的抗體，或者在由人IL-17A的氨基酸殘基74-85(SEQIDNO.:40)限定的表位中結(jié)合的抗體。本發(fā)明還涉及高親和力的人IL-17A結(jié)合化合物，例如其抗體或結(jié)合片段，例如以1000、500、100、50、20、10、5、2pM以下(即較高親和力)的平衡解離常數(shù)(Kd)結(jié)合的結(jié)合化合物。本發(fā)明還涉及在生物學(xué)活性測(cè)定檢測(cè)時(shí)具有有效生物學(xué)活性的結(jié)合化合物，例如5000、2000、1000、500pM的IC50，在所述測(cè)定中，IL-17A刺激以1000pM(lnM)的濃度實(shí)現(xiàn)，例如IL-17A刺激的正常人真皮成纖維細(xì)胞、包皮成纖維細(xì)胞或滑膜細(xì)胞的IL-6生產(chǎn)。本發(fā)明還涉及在生物學(xué)活性測(cè)定檢測(cè)時(shí)具有1000、500、200、100、50pM以下的ICso的結(jié)合化合物，在所述測(cè)定中，IL-17A刺激以100pM的濃度實(shí)現(xiàn)，例如Ba/F3-hlL-17Rc-mGCSFR增殖測(cè)定。一般來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及當(dāng)IL-17A濃度為例如5、10、50、100、500或1000pM以上時(shí)能夠在生物學(xué)測(cè)定中以IL-17A濃度的IOX、5X、2X、IX及低至0.5X范圍的濃度抑制人IL-17A活性的結(jié)合化合物。本發(fā)明還涉及這樣的結(jié)合化合物其在給予小鼠而產(chǎn)生50、40、30、20jig/ml以下的結(jié)合化合物血清濃度時(shí)，能夠?qū)L-17A誘導(dǎo)的向肺的嗜中性粒細(xì)胞募集降低50%以上。在一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合化合物以比其對(duì)人IL-17A的親和力低不超過(guò)5、10或20倍的親和力(Kd)結(jié)合獼猴(cynomolgusmonkey)IL-17A。在又一個(gè)實(shí)施方案中，結(jié)合化合物以比其對(duì)小鼠或大鼠IL-17A的親和力高100、500、1000或2000倍的親和力(Kd)結(jié)合人IL-17A。本發(fā)明還涉及用本發(fā)明的人IL-17A結(jié)合化合物治療需要治療的患者(包括人類(lèi)患者)的方法。這些患者可能患有炎性或自身免疫性疾病，例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、銀屑病、多發(fā)性硬化、慢性阻塞性肺病、嚢腫性纖維化、系統(tǒng)性硬皮病、同種異體移植排斥、自身免疫性心肌炎或腹膜粘連。這些治療方法可進(jìn)一步包括給予一種或多種另外的治療劑，例如免疫抑制劑或抗炎劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者已被診斷為患有IL-17A介導(dǎo)的疾病。在又一個(gè)實(shí)施方案中，患者已被診斷為患有類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。在又一個(gè)實(shí)施方案中，患者已被診斷為患有多發(fā)性硬化。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療方法，其包括給予治療有效量的抗人IL-17A抗體或結(jié)合片段連同一種或多種其它治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，其它治療劑為抗人IL-23抗體或其結(jié)合片段。在多個(gè)實(shí)施方案中，在給予抗人IL-17A抗體或片段之前、同時(shí)或之后給予抗人IL-23抗體或片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗IL-17A和抗IL-23抗體在不良免疫事件的急性期當(dāng)中在有限的時(shí)間內(nèi)一起給予，此后中止用抗IL-17A抗體治療，但繼續(xù)用抗IL-23抗體治療。在其它實(shí)施方案中，所述一種或多種其它藥物或者治療劑包括IL-ip、IL-6或TGF-P的拮抗劑，例如抗IL-6或抗TGF-p抗體，或者這些拮抗劑的組合。本發(fā)明還涉及本發(fā)明的結(jié)合化合物的組合物和制劑，其含有結(jié)合化合物和藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑，并可選地含有一種或多種免疫抑制劑或抗炎劑。附圖簡(jiǎn)述圖1A顯示了依據(jù)本發(fā)明的幾種抗人IL-17A抗體的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的比對(duì)。大鼠16C10VL=SEQIDNO:7;人16C10VL=SEQIDNO:5;大鼠4C3VL=SEQIDNO:21;人4C3VL=SEQIDNO:5;大鼠23E12VL=SEQIDNO:45;大鼠30C10VL=SEQIDNO:24;人30C10VL=SEQIDNO:22;大鼠12E6VL=SEQIDNO:32;大鼠1D10VL=SEQIDNO:54。CDR被標(biāo)示出來(lái)(并在表3提供)。編號(hào)依據(jù)Kabat等(1991)"SequencesofProteinsofImmunologicalInterest",美國(guó)健康和人類(lèi)服務(wù)部，NIHPub.91-3242,第5版，本文稱(chēng)為"Kabat等(1991)"。圖IB顯示了依據(jù)本發(fā)明的幾種抗人IL-17A抗體的重鏈可變結(jié)構(gòu)域的比對(duì)。大鼠16C10VH-SEQIDNO:8;人16C10VH=SEQIDNO:6;大鼠4C3VH-SEQIDNO:8;人4C3VH=SEQIDNO:6;大鼠23E12VH=SEQIDNO:47;大鼠30C10VH=SEQIDNO:25;人30C10VH=SEQIDNO:23;大鼠12E6VH=SEQIDNO:33;大鼠1D10VH=SEQIDNO:55。CDR被標(biāo)示出來(lái)(并在表4提供)。編號(hào)依據(jù)Kabat等(簡(jiǎn))。圖2A顯示了依據(jù)本發(fā)明的人源化抗-IL-17A抗體16C10的輕鏈的氨基酸序列(SEQIDNO:2的成熟形式，即殘基1-220)。CDR被標(biāo)示出來(lái)。圖2B顯示了依據(jù)本發(fā)明的人源化抗-IL-17A抗體16C10的重鏈的氨基酸序列(SEQIDNO:4的成熟形式，即殘基1-454)。CDR被標(biāo)示出來(lái)。圖3A-3D顯示了抗-IL-17A抗體治療對(duì)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎CIA小鼠模型的病理作用。治療包括給予抗-IL-17A抗體1D10(28、7和2mg/kg)和給予同種型對(duì)照(7mg/kg)。圖3A提供了隨抗體治療而變化的目測(cè)疾病嚴(yán)重性評(píng)分(DSS),其是目測(cè)的腳爪腫脹和發(fā)紅的檢測(cè)。評(píng)分為0-腳爪外觀與對(duì)照(未治療的)腳爪相同；1=給定腳爪上的一個(gè)腳趾發(fā)炎；2=給定腳爪的兩個(gè)腳趾或腳掌發(fā)炎；3=給定腳爪的腳掌和腳趾發(fā)炎。圖3B提供了隨抗體治療而變化的軟骨損傷(根據(jù)組織病理學(xué))。評(píng)分為0=正常；l-最小；2=輕微；3=中等；4=嚴(yán)重。圖3C提供了隨抗體治療而變化的骨侵蝕(根據(jù)組織病理學(xué))。評(píng)分為0=正常；1=最?。?=輕微；3=中等；4=嚴(yán)重。圖3D提供了在目測(cè)DSS中被評(píng)分為2或3的CIA小鼠的腳爪(即高度發(fā)炎的腳爪)的骨侵蝕(根據(jù)組織病理學(xué))。rlgGl是同種型對(duì)照抗體。評(píng)分為0=正常；1=最小；2=輕微；3=中等；4=嚴(yán)重。圖4提供了隨多種本發(fā)明的抗人IL-17A抗體(1D10、16C10、4C3)和同種型對(duì)照的血清濃度變化的在已用人IL-17A鼻內(nèi)治療的小鼠的%BAL嗜中性粒細(xì)胞(肺的嗜中性粒細(xì)胞募集的檢測(cè))。實(shí)心三角形代表無(wú)任何添加的抗IL-17A抗體的對(duì)照實(shí)驗(yàn)，最左側(cè)的數(shù)據(jù)點(diǎn)(空心三角形)為未受刺激的對(duì)照。圖5A顯示了編碼人源化抗-IL-17A抗體16C10的輕鏈的核苷酸序列(SEQIDNO:62)。圖5B顯示了編碼人源化抗-IL-17A抗體16C10的重鏈的核苷酸序列(SEQIDNO:63)。發(fā)明詳述I.定義為了更容易理解本發(fā)明，以下具體定義了某些技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)。除非在本文件中的它處另有明確定義，否則本文使用的所有其它技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)都具有本發(fā)明所屬領(lǐng)域的一般技術(shù)人員通常理解的含義。如本文(包括附加權(quán)利要求)所使用的，單詞的單數(shù)形式如"一個(gè)"、"一種"和"該"包括其相應(yīng)的復(fù)數(shù)含義，除非上下文另有明確說(shuō)明。除非上下文另有說(shuō)明或明確說(shuō)明，否則"活化，，、"刺激"和"處理"在應(yīng)用于細(xì)胞或受體時(shí)，可以具有相同含義，例如用配體活化、刺激或處理細(xì)胞或受體。"配體"包括天然配體和合成配體，例如細(xì)胞因子、細(xì)胞因子變體、類(lèi)似物、突變蛋白質(zhì)和衍生自抗體的結(jié)合化合物。"配體"還包括小分子，例如細(xì)胞因子的肽^t擬物和抗體的肽模擬物。"活化"可以指由內(nèi)部機(jī)制以及由外部因素或環(huán)境因素調(diào)節(jié)的細(xì)胞活化。例如，細(xì)胞、組織、器官或生物的"應(yīng)答"包括生物化學(xué)或生理學(xué)行為的變化，例如在生物區(qū)室內(nèi)的濃度、密度、附著或遷移，基因表達(dá)速率，或分化狀態(tài)，其中所述變化與活化、刺激或處理相關(guān)，或與內(nèi)部機(jī)制如遺傳編程相關(guān)。分子的"活性"可以描述或指分子與配體或受體的結(jié)合，催化活性；刺激基因表達(dá)或細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、分化或成熟的能力；抗原活性，其它分子活性的調(diào)節(jié)等。分子的"活性"還可以指調(diào)節(jié)或維持細(xì)胞間相互作用如附著的活性，或維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)例如細(xì)胞膜或細(xì)胞骨架的活性。"活性"還可以指比活性，例如[催化活性]/[mg蛋白]，或[免疫活性]/[mg蛋白]、生物區(qū)室中的濃度等。"活性"可以指調(diào)節(jié)先天或獲得性免疫系統(tǒng)的組分。"增殖活性，，包括對(duì)于例如正常細(xì)胞分裂以及癌癥、腫瘤、發(fā)育異常、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)移或血管發(fā)生可促進(jìn)、必需或特異性相關(guān)的活性。"給予"和"處理"當(dāng)應(yīng)用于動(dòng)物、人、實(shí)驗(yàn)受試者、細(xì)胞、組織、器官或生物流體時(shí)，是指外源性藥物、治療劑、診斷劑或組合物與動(dòng)物、人、受試者、細(xì)胞、組織、器官或生物流體的接觸。"給予"和"處理，，可以指例如治療、藥物代謝動(dòng)力學(xué)、診斷、研究和實(shí)驗(yàn)方法。細(xì)胞的處理包括試劑與細(xì)胞的接觸，以及試劑與流體的接觸，其中所述流體與細(xì)胞接觸。"給予"和"處理"還意指通過(guò)試劑、診斷、結(jié)合組合物或通過(guò)另一種細(xì)胞體外和離體處理例如細(xì)胞。"處理"當(dāng)應(yīng)用于人、獸醫(yī)學(xué)或研究受試者時(shí)，是指治療處理、預(yù)防或預(yù)防性措施，研究和診斷應(yīng)用。"處理"在應(yīng)用于人、獸醫(yī)學(xué)或研究受試者或者細(xì)胞、組織或器官時(shí)，包括IL-17A激動(dòng)劑或IL-17A拮抗劑與人或動(dòng)物受試者、細(xì)胞、組織、生理區(qū)室或生理流體的接觸。"細(xì)胞的處理"還包括其中IL-17A激動(dòng)劑或IL-17A拮抗劑例如在流體相或膠體相中接觸IL-17A受體的情況，而且包括其中激動(dòng)劑或拮抗劑不接觸細(xì)胞或受體的情況。"治療，，意指給予患者內(nèi)用或外用治療劑，諸如包含本發(fā)明的任一種結(jié)合化合物的組合物，所述患者具有一種或多種疾病癥狀，而已知所述治療劑對(duì)這些癥狀具有治療作用。通常，在受治療患者或群體中以有效緩解一種或多種疾病癥狀的量給予治療劑，無(wú)論是通過(guò)誘導(dǎo)這類(lèi)癥狀退化還是抑制這類(lèi)癥狀發(fā)展到任何臨床可測(cè)量的程度。有效緩解任何具體疾病癥狀的治療劑的量(也稱(chēng)作"治療有效量")可根據(jù)多種因素變化，例如患者的疾病狀態(tài)、年齡和體重，以及藥物在患者產(chǎn)生需要療效的能力。通過(guò)醫(yī)生或其它專(zhuān)業(yè)衛(wèi)生保健人士通常用于評(píng)價(jià)該癥狀的嚴(yán)重性或進(jìn)展?fàn)顩r的任何臨床檢測(cè)方法，可評(píng)價(jià)疾病癥狀是否已被減輕。盡管本發(fā)明的實(shí)施方案(例如治療方法或制品)在緩解每個(gè)患者的目標(biāo)疾病癥狀方面可能無(wú)效，但是根據(jù)本領(lǐng)域已知的任何統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)方法如Studentt檢驗(yàn)、卡方檢驗(yàn)、依據(jù)Mann和Whitney的U檢驗(yàn)、Kruskal-Wallis檢驗(yàn)(H檢驗(yàn))、Jonckheere-Terpstra檢驗(yàn)和Wilcoxon檢驗(yàn)確定，其在統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著數(shù)目的患者中應(yīng)當(dāng)減輕目標(biāo)疾病癥狀。本文指出了人IL-17A蛋白的4種變體。i)本文使用的術(shù)語(yǔ)"人IL-17A，，和"天然人IL-17A"("huIL-17A"和"humlL-17A")是指人IL-17A蛋白登錄號(hào)NP—002181和AAT22064的成熟形式(即殘基24-155)，及其天然變體和多態(tài)性。ii)本文使用的術(shù)語(yǔ)"rhlL-17A"是指天然人IL-17A的重組衍生物，其中兩個(gè)另外的氨基酸(LE)附在天然人IL-17A的成熟形式的N-末端。為方便起見(jiàn)，采用該命名法指示多17種形式的IL-17A，可能與文獻(xiàn)中的用法不匹配。iii)本文使用的術(shù)語(yǔ)"FLAG-huIL-17A"是指附加N-末端FLAG⑧肽標(biāo)簽的天然人IL-17A的變體。在某些實(shí)驗(yàn)中，F(xiàn)LAG-huIL-17A被生物素化。iv)在本文中指出的R&DSystems人IL-17A是人IL-17A蛋白登錄號(hào)NP—002181和AAT22064的殘基20-155,其具有另外的N-末端曱硫氨酸。表1是本文提及的IL-17A分子的變體N-末端的匯總。表1人IL-17A的變體形式<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>除非另有說(shuō)明，否則在本文所述實(shí)驗(yàn)中使用的、使用腺病毒載體產(chǎn)生的任何IL-17A均為rhlL-17A。術(shù)語(yǔ)"IL-17A"—般是指天然或重組的人IL-17A,以及人IL-17A的非人同源物。除非另有指示，否則使用IL-17A的同二聚體的分子量(例如對(duì)于人IL-17A為30kDa)計(jì)算IL-17A的摩爾濃度。本文所用的術(shù)語(yǔ)"抗體"是指表現(xiàn)出所需生物學(xué)活性的任何形式的抗體。因此，它以最廣義使用，具體地說(shuō)，包括但不限于單克隆抗體(包括全長(zhǎng)單克隆抗體)、多克隆抗體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)。本文所用的術(shù)語(yǔ)抗體的"IL-17A結(jié)合片段"或"結(jié)合片段"("親本抗體")包括抗體的片段或衍生物，通常包括親本抗體的至少部分抗原結(jié)合區(qū)或可變區(qū)(例如一個(gè)或多個(gè)CDR),其保留親本抗體的至少某些結(jié)合特異性?？贵w結(jié)合片段的實(shí)例包括但不限于Fab、Fab'、F(ab')2和Fv片段；雙體；線性抗體；單鏈抗體分子，例如sc-Fv;和由抗體片段形成的多特異性抗體。通常，當(dāng)結(jié)合片段或衍生物的IL-17A結(jié)合活性基于摩爾表示時(shí)，結(jié)合片段或衍生物保留該活性的至少10%。優(yōu)選地，結(jié)合片段或衍生物保留親本抗體的IL-17A結(jié)合活性的至少20%、50%、70%、80%、90%、95%或100%以上。還預(yù)期IL-17A結(jié)抗體的"保守變體")。術(shù)語(yǔ)"結(jié)合化合物"是指抗體及其結(jié)合片段這--^者。"Fab片段"包含一條輕鏈和CHl及一條重鏈的可變區(qū)。Fab分子的重鏈不能與另一個(gè)重鏈分子形成二硫鍵。"Fc"區(qū)包含含有抗體的CH1與CH2結(jié)構(gòu)域的兩個(gè)重鏈片段。兩個(gè)重鏈片段通過(guò)兩個(gè)以上的二碌b鍵和通過(guò)CH3結(jié)構(gòu)域的疏水作用保持在一起。"Fab'片段"包含一條輕鏈和含有Vh結(jié)枸域與CH1結(jié)構(gòu)域的一條重鏈的部分，還包含在CHl與CH2結(jié)構(gòu)域之間的區(qū)域，以致于可在兩個(gè)Fab'片段的兩條重鏈之間形成鏈間二斬"定，以形成F(ab')2分子。"F(ab')2片段"包含兩條輕鏈和含有CH1與Ch2結(jié)構(gòu)域之間的部分恒定區(qū)的兩條重鏈，以致于在兩條重鏈之間形成鏈間二硫鍵。因此，F(xiàn)(ab')2片段由通過(guò)兩條重鏈之間的二硫鍵保持在一起的兩個(gè)Fab'片段組成。"Fv區(qū)，，包含來(lái)自重鏈和輕鏈這兩者的可變區(qū)，但沒(méi)有恒定區(qū)。術(shù)語(yǔ)"單鏈Fv"或"scFv抗體"是指包含抗體的Vh和Vl結(jié)枸域的抗體片段，其中這些結(jié)構(gòu)域存在于單條多肽鏈上。一般地，F(xiàn)v多肽還包含在Vh和VL結(jié)構(gòu)域之間的多肽接頭，其使scFv能夠形成抗原結(jié)合所需的結(jié)構(gòu)。關(guān)于scFv的綜述，參見(jiàn)Pluckthun(1994)THEPharmacologyofMonoclonalAntibodies，第113巻，Rosenburg和Moore編輯，Springer-Verlag,NewYork,第269-315頁(yè)。另參見(jiàn)國(guó)際專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)WO88/01649和美國(guó)專(zhuān)利第4,946，778和5,260,203號(hào)。"域抗體"為僅含有重鏈可變區(qū)或輕鏈可變區(qū)的免疫功能性免疫球蛋白片段。在一些實(shí)例中，兩個(gè)或更多個(gè)VH區(qū)與肽接頭共價(jià)連接，產(chǎn)生二價(jià)域抗體。二價(jià)域抗體段的兩個(gè)VH區(qū)可靶向相同的或不同的抗原。"二價(jià)抗體"包含2個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。在一些情況下，2個(gè)結(jié)合部位具有相同抗原特異性。然而，二價(jià)抗體可以是雙特異性的(參見(jiàn)下文)。除非另有說(shuō)明，否則本文使用的"抗-IL-17A"抗體是指針對(duì)人IL-17A或其變體(例如huIL-17A、rhlL-17A、FLAG-huIL-17A和R&DIL-17A)或其任何抗原性片段產(chǎn)生的抗體。本文使用的術(shù)語(yǔ)"單克隆抗體"是指得自基本上均質(zhì)抗體群體的抗體，即，除了可以以小量存在的可能天然發(fā)生的突變以外，構(gòu)成群體的個(gè)體抗體是相同的。單克隆抗體是高度特異性的，針對(duì)單個(gè)抗原表位。相比之下，常規(guī)(多克隆)抗體制劑一般包括針對(duì)不同表位(或?qū)ζ涮禺愋?的許多抗體。修飾詞"單克隆"指得自基本上均質(zhì)的抗體群體的抗體特征，并且不應(yīng)^皮解釋為需要通過(guò)任何具體方法生產(chǎn)抗體。例如，依照本發(fā)明使用的單克隆抗體可以通過(guò)首先由Kohler等(1975)Mm^e256:495描述的雜交瘤方法制備，或可以通過(guò)重組DNA法(參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,816,567)制備。"單克隆抗體，，還可以使用例如Clackson等(1991)Atow^352:624-628和Marks等(1991)丄Mo/.Ao/.222:581-597中描述的技術(shù)從噬菌體抗體文庫(kù)中分離。另參見(jiàn)Presta(2005)爿〃wgyC//'"./wwwwo/.116:731。本文的單克隆抗體具體包括"嵌合"抗體(免疫球蛋白)，其中重鏈和/或輕鏈的部分與源于特定物種或?qū)儆谔囟贵w類(lèi)或亞類(lèi)的抗體的相應(yīng)序列相同或同源，而一條或多條鏈的其余部分與源于另一物種或?qū)儆诹硪豢贵w類(lèi)或亞類(lèi)的抗體的相應(yīng)序列相同或同源，以及此種類(lèi)抗體的片段，只要它們具有所需生物學(xué)活性(美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4，816,567;和Morrison等，(1984)尸racA^/.爿cad"&481:6851-6855)。本文使用的"嵌合抗體"為具有第一抗體的可變結(jié)構(gòu)域和第二抗體的恒定結(jié)構(gòu)域的抗體，其中第一抗體和第二抗體來(lái)自不同物種。通常，可變結(jié)構(gòu)域得自實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抗體("親本抗體")，例如嚙齒動(dòng)物，恒定結(jié)構(gòu)域序列得自人抗體，以便產(chǎn)生的嵌合抗體相比于親本嚙齒動(dòng)物抗體不大可能對(duì)人類(lèi)個(gè)體引起不利的免疫應(yīng)答。本文的單克隆抗體還包括駱駝源化單結(jié)構(gòu)域抗體。參見(jiàn)例如Muyldermans等(2001)7>e"A5/oc/e附.Sc/.26:230;Reichmaim等(1999)丄/m/mmo/.M"/o必231:25;WO94/04678;WO94/25591;美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,005,079，所述參考文獻(xiàn)在此整體引入作為參考。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含修飾的2個(gè)vh結(jié)構(gòu)域以至于形成單結(jié)構(gòu)域抗體的單結(jié)構(gòu)域抗體。本文使用的術(shù)語(yǔ)"雙體(diabody)"是指具有2個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)的小抗體片段，所述片段在相同多肽鏈中包含與輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(vl)連接的重鏈可變結(jié)構(gòu)域(vh)(vh-vl或Vl-Vh)。通過(guò)使用太短而不允許相同鏈上的2個(gè)結(jié)構(gòu)域之間配對(duì)的接頭，迫使結(jié)構(gòu)域與另一條鏈的互補(bǔ)結(jié)構(gòu)域配對(duì)，并產(chǎn)生2個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。在例如EP404,097;WO93/11161;和Holliger等(1993)尸wc.A^/.Sc,'.V&490:6444-6448中更充分地描述了雙體。關(guān)于工程改造的抗體變體的綜述，一般參見(jiàn)Holliger和Hudson(2005)Ato.&'okc/mo/.23:1126-1136。本文使用的術(shù)語(yǔ)"人源化抗體"是指包含來(lái)自人以及非人(例如鼠、大鼠)抗體的序列的抗體形式。一般而言，人源化抗體將包含基本上所有的至少1個(gè)且通常是2個(gè)可變結(jié)構(gòu)域，其中所有的或基本上所有的高變環(huán)均對(duì)應(yīng)于非人免疫球蛋白的那些，所有的或基本上所有的構(gòu)架(FR)區(qū)都是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗體可選地包含至少部分人免疫球蛋白恒定區(qū)(Fc)。本發(fā)明的抗體還包括具有修飾的(或阻斷的)Fc區(qū)以提供改變的效應(yīng)子功能的抗體。參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,624，821;WO2003/086310;WO2005/120571;WO2006/0057702。此種修飾可用于增強(qiáng)或抑制免疫系統(tǒng)的各種反應(yīng)，在診斷和治療中具有可能有益的作用。Fc區(qū)的改變包括氨基酸變化(置換、缺失和插入)、糖基化或去糖基化和添加多個(gè)Fc。Fc的變化還可以改變治療抗體的抗體半衰期，使給藥頻率較少，并因此增加了方便性和減少了材料使用。參見(jiàn)Presta(2005)A/wgyC//".//wmwo/.116:731在734-35。術(shù)語(yǔ)"全人抗體"是指只包含人免疫球蛋白序列的抗體。如果全人抗體在小鼠、小鼠細(xì)胞或衍生自小鼠細(xì)胞的雜交瘤中生產(chǎn)，那么全人抗體可以包含小鼠碳水化合物鏈。類(lèi)似地，"小鼠抗體"是指只包含小鼠免疫球蛋白序列的抗體。或者，如果全人抗體在大鼠、大鼠細(xì)胞或衍生自大鼠細(xì)胞的雜交瘤中生產(chǎn)，那么全人抗體可以包含大鼠碳水化合物鏈。類(lèi)似地，"大鼠抗體"是指只包含大鼠免疫球蛋白序列的抗體。本文使用的術(shù)語(yǔ)"高變區(qū)"是指負(fù)責(zé)抗原結(jié)合的抗體氨基酸殘基。高變區(qū)包含來(lái)自"互補(bǔ)決定區(qū)"或"CDR"的氨基酸殘基(即輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中的殘基24-34(CDRLl)、50-56(CDRL2)和89-97(CDRL3)，和重鏈可變結(jié)構(gòu)域中的殘基31-35(CDRH1)、50-65(CDRH2)和9S102(CDRH3);Kabat等(1991)SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda，Md.)和/或來(lái)自"高變環(huán)"的那些殘基(即輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中的殘基26-32(CDRLl)、50-52(CDRL2)和91-96(CDRL3)，和重鏈可變結(jié)構(gòu)域中的26-32(CDRH1)、53-55(CDRH2)和96-101(CDRH3);Chothia和Lesk(1987)丄Mo/.5/o/.196:901-917)。本文使用的術(shù)語(yǔ)"構(gòu)架"或"FR"殘基是指除本文定義為CDR殘基的高變區(qū)殘基外的那些可變結(jié)構(gòu)域殘基。"結(jié)合物質(zhì)"是指能夠與靶結(jié)合的分子、小分子、大分子、抗體或其片段或類(lèi)似物、或可溶性受體。"結(jié)合物質(zhì)"還可以指能夠與靶結(jié)合的分子復(fù)合物，例如非共價(jià)復(fù)合物、電離分子以及共價(jià)或非共價(jià)修飾的分子，例如通過(guò)磷酸化、乙?；?、交聯(lián)、環(huán)化或有限分裂修飾的分子。"結(jié)合物質(zhì)"還可以指能夠組合穩(wěn)定劑、賦形劑、鹽、緩沖液、溶劑或添加劑結(jié)合靶的分子。"結(jié)合"可以定義為結(jié)合物質(zhì)與靶的結(jié)合，其中在結(jié)合物質(zhì)可以溶解或懸浮于溶液中的情況下，所述結(jié)22合導(dǎo)致結(jié)合物質(zhì)的正常布朗運(yùn)動(dòng)減少。"保守修飾的變體"或"保守置換或取代"是指用具有類(lèi)似特征(例如電荷、側(cè)鏈大小、疏水性/親水性、主鏈構(gòu)象和剛性等)的其它氨基酸置換蛋白中的氨基酸，使得可頻繁進(jìn)行改變而不改變蛋白的生物學(xué)活性。本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉，一般而言，多肽的非必需區(qū)域中的單個(gè)氨基酸置換基本上不改變生物學(xué)活性(參見(jiàn)例如Watson等(1987)A/o/ecw/aro/TheBenjamin/CummingsPub.Co.，第224頁(yè)，(第4版))。另外，結(jié)構(gòu)或功能類(lèi)似的氨基酸的置換不大可能破壞生物學(xué)活性。本發(fā)明的結(jié)合化合物的多個(gè)實(shí)施方案包含的多肽鏈所具有的序列在與本文公開(kāi)的特定氨基酸序列如SEQIDNO:2、4、5或6相比時(shí)，含有至多O(無(wú)改變)、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20個(gè)以上的保守氨基酸置換。本文使用的表述"至多X個(gè)"保守氨基酸置換包括0個(gè)置換和直到X個(gè)并包括X個(gè)置換的任何數(shù)目的置換。此種示例性置換優(yōu)選依照如下表2中所示的那些來(lái)進(jìn)行表2示例性的保守氨基酸置換原始?xì)埢Ｊ刂脫QAh(A)Gly;SerArg(R)Lys;HisAsn(N)Gin;HisAsp(D)Glu;AsnCys(C)Ser;AlaGin(Q)AsnGlu(E)Asp;GinGly(G)AlaHis(H)Asn;Gin"e(I)Leu;ValLeu(L)He;Val原始?xì)埢Ｊ刂脫QLys(K)Arg;HisMet(M)Leu;lie;TyrPhe(F)Tyr;Met;EeuPro(P)AlaSer(S)ThrThr(T)SerTrp(W)Tyr;PheTyr(Y)Tip;PheVal(V)lie;Leu整個(gè)說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中使用的術(shù)語(yǔ)"基本上由......組成"或其變形表示包括所有所述元件或元件組，并且任選包括與所述元件類(lèi)似或不同性質(zhì)的其它元件，所述其它元件非顯著改變指定給藥方案、方法或組合物的基本性質(zhì)或新性質(zhì)。作為非限制性例子，基本上由所提及的氨基酸序列組成的結(jié)合化合物還可以包括一種或多種氨基酸，其不顯著影響結(jié)合化合物的性質(zhì)。"有效量"包含足以改善或預(yù)防醫(yī)學(xué)病癥的癥狀或病征的量。有效量還意指足以允許或促進(jìn)診斷的量。用于特定患者或獸醫(yī)學(xué)受試者的有效量可依據(jù)以下因素而變化如待治療的病癥、患者的總體健康情況、給藥的方法途徑和劑量以及副作用嚴(yán)重性(參見(jiàn)例如頒發(fā)給Netti等的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,888,530)。有效量可以是避免顯著副作用或毒性作用的最大劑量或給藥方案。效果將導(dǎo)致診斷測(cè)量或參數(shù)改善至少5%、通常至少10%、更通常至少20%、最通常至少30%、優(yōu)選至少40%、更優(yōu)選至少50%、最優(yōu)選至少60%、理想地至少70%、更理想地至少80%和最理想地至少90。/。，其中100%被定義為由正常受試者顯示的診斷參數(shù)(參見(jiàn)例如Maynard等(1996)/1Z/a"必ooAo/S(9尸s/orGoodC//mca/尸rac"ce,InterpharmPress,BocaRaton，F(xiàn)L;Dent(2001)GoodLa60rato/7朋t/GoodC7/m'ca/尸rac"ce,UrchPubl.,London,UK)。"外源性"指根據(jù)背景在生物、細(xì)胞或人體外產(chǎn)生的物質(zhì)。"內(nèi)源性"指根據(jù)背景在細(xì)胞、生物或人體內(nèi)產(chǎn)生的物質(zhì)。"同源性"是指兩個(gè)多核普酸序列之間或兩個(gè)多肽序列之間的序列相似性。當(dāng)兩個(gè)比較序列中的位置均被相同堿基或氨基酸單體亞基占據(jù)時(shí)，例如如果兩個(gè)DNA分子的每一個(gè)的位置都^f皮腺噪呤占據(jù)時(shí)，那么所述分子在該位置是同源的。兩個(gè)序列之間的同源性百分率是兩個(gè)序列共有的匹配或同源位置數(shù)除以比較的位置數(shù)x100的函數(shù)。例如，在序列最佳比對(duì)時(shí)，如果兩個(gè)序列中的10個(gè)位置有6個(gè)匹配或同源，那么兩個(gè)序列為60%同源。一般而言，當(dāng)比對(duì)兩個(gè)序列而得到最大的同源性百分率時(shí)進(jìn)行比較。"免疫病癥"或"免疫障礙"包括例如病理性炎癥、炎性病癥和自身免疫性病癥或疾病。"免疫病癥"還指感染、持續(xù)感染和增生性病癥，例如癌癥、腫瘤和血管發(fā)生，包括抗免疫系統(tǒng)根除的感染、腫瘤和癌癥。"癌性病癥"包括例如癌癥、癌細(xì)力包、腫瘤、血管發(fā)生和癌變前病癥，例如發(fā)育異常。"炎性障礙"意指這樣的障礙或病理疾病其中所述病理整體或部分起因于例如免疫系統(tǒng)細(xì)胞的數(shù)目變化、遷移率變化或活化變化。免疫系統(tǒng)的細(xì)胞包括例如T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞或巨噬細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞(APC)、樹(shù)突細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、NK細(xì)胞、NKT細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞或與免疫學(xué)特異性相關(guān)的任何其它細(xì)胞，例如生產(chǎn)細(xì)胞因子的內(nèi)皮或上皮細(xì)胞。"分離的結(jié)合化合物"是指結(jié)合化合物的純化狀態(tài)，在本文背景下是指基本上沒(méi)有其它生物分子(例如核酸、蛋白、脂質(zhì)、碳水化合物)或其它材料(例如細(xì)胞碎片和生長(zhǎng)培養(yǎng)基)的分子。一般而言，術(shù)語(yǔ)"分離的，，無(wú)意指完全沒(méi)有這些材料或沒(méi)有水、緩沖液或鹽，除非它們以顯著干擾本文所述的結(jié)合化合物的實(shí)驗(yàn)或治療用途的量存在。"分離的核酸分子"是指基因組DNA或RNA、mRNA、cDNA或它們的合成來(lái)源或某些組合，它們不與所述分離的多核苷酸天然存在其中的全部或部分多核苷酸結(jié)合，或者它們連接至與其天然不連接的多核苷酸。對(duì)于本文公開(kāi)內(nèi)容的用途，應(yīng)當(dāng)理解的是，"包含或含有"特定核苷酸序列的"核酸分子"不包含完整染色體。"含有"特定核酸序列的分離的核酸分子除了包含特定序列之外，還可以包含至多IO個(gè)乃至至多20個(gè)以上的其它蛋白或其部分的編碼序列，或者可以包含有效連接的調(diào)節(jié)序列，其控制所提及的核酸序列的編碼區(qū)的表達(dá)，和/或可以包含載體序列。表述"控制序列，，是指在特定宿主生物中表達(dá)有效連接的編碼序列所必需的DNA序列。適合于原核生物的控制序列例如包括啟動(dòng)子、任選的操縱子序列和核糖體結(jié)合位點(diǎn)。已知真核細(xì)胞利用啟動(dòng)子、多腺苷酸化信號(hào)和增強(qiáng)子。當(dāng)將核酸置于與另一個(gè)核酸序列的功能性關(guān)系之中時(shí)，它是"有效連接的，，。例如，如果前序列或分泌前導(dǎo)序列的DNA被表達(dá)為參與多肽分泌的前蛋白，則該DNA與多肽的DNA有效連接；如果啟動(dòng)子或增強(qiáng)子影響序列的轉(zhuǎn)錄，則其與編碼序列有效連接；或者如果核糖體結(jié)合位點(diǎn)的位置使得利于翻譯，則其與編碼序列有效連接。一般地，"有效連接的"意指被連接的DNA序列是鄰接的，并且對(duì)分泌前導(dǎo)序列而言，是鄰接的并在閱讀相(readingphase)中。然而，增強(qiáng)子不必是鄰接的。通過(guò)在方便的限制位點(diǎn)上連接來(lái)實(shí)現(xiàn)相連。如果此種位點(diǎn)不存在，那么依照常規(guī)實(shí)踐使用合成寡核苷酸連接物或接頭。本文使用的表述"細(xì)胞"、"細(xì)胞系，，和"細(xì)胞培養(yǎng)物"可互換使用，并且所有這類(lèi)名稱(chēng)都包括后代。因此，單詞"轉(zhuǎn)化體"和"轉(zhuǎn)化細(xì)胞"包括原代受試細(xì)胞和由其衍生的培養(yǎng)物，而不考慮轉(zhuǎn)移數(shù)目。還應(yīng)當(dāng)理解的是，由于故意或非有意的突變，所有后代在DNA含量方面不可能精確相同。包括具有與最初轉(zhuǎn)化細(xì)胞中篩選的相同的功能或生物學(xué)活性的突變后代。在意指不同名稱(chēng)的情況下，其由上下文清楚可見(jiàn)。本文使用的"聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)"或"PCR"是指其中微量的特定26部分的核酸、RNA和/或DNA如在例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,683,195中所述擴(kuò)增的程序或技術(shù)。一般來(lái)說(shuō)，需要獲得來(lái)自目標(biāo)區(qū)域末端或之外的序列信息，使得可以設(shè)計(jì)寡核苷酸引物；這些引物在序列方面與待擴(kuò)增模板的對(duì)應(yīng)鏈相同或相似。2個(gè)引物的5'末端核苷酸可以與擴(kuò)增材料的末端一致。PCR可用于擴(kuò)增特定的RNA序列、來(lái)自總基因組DNA的特定DNA序列和由總細(xì)胞RNA轉(zhuǎn)錄的cDNA、噬菌體或質(zhì)粒序列等。一般參見(jiàn)Mullis等(1987)Co/dS/7〃"g//。Mor^w/.^w"m.51:263;Erlich編輯，(1989)PCRTECHNOLOGY(StocktonPress,N.Y.)。本文使用的PCR被視為用于擴(kuò)增核酸測(cè)試樣品的核酸聚合酶反應(yīng)法的一個(gè)實(shí)例，但不是唯一的實(shí)例，所述方法包括使用作為引物的已知核酸和核酸聚合酶，以擴(kuò)增或產(chǎn)生核酸的特定部分。本文使用的術(shù)語(yǔ)"種系序列"是指未重排的免疫球蛋白DNA序列的序列。可使用任何合適來(lái)源的未重排的免疫球蛋白。"抑制劑"和"拮抗劑"或"活化劑"和"激動(dòng)劑"分別是指例如用于活化例如配體、受體、輔因子、基因、細(xì)胞、組織或器官的抑制或活化分子。例如基因、受體、配體或細(xì)胞的調(diào)節(jié)劑是改變基因、受體、配體或細(xì)胞的活性的分子，其中活性在其調(diào)節(jié)性質(zhì)方面可被活化、抑制或改變。調(diào)節(jié)劑可以單獨(dú)起作用，或者其可以使用輔因子，例如蛋白質(zhì)、金屬離子或小分子。抑制劑是減少、阻斷、阻止、延遲活化、滅活、脫敏或下調(diào)例如基因、蛋白、配體、受體或細(xì)胞的化合物?；罨瘎┦窃黾?、活化、促進(jìn)、增強(qiáng)活化、敏化或上調(diào)例如基因、蛋白、配體、受體或細(xì)胞的化合物。抑制劑也可以被定義為減少、阻斷或滅活組成型活性的化合物。"激動(dòng)劑"是與靶相互作用以引起或促進(jìn)耙活化增加的化合物。"拮抗劑"是對(duì)抗激動(dòng)劑的作用的化合物。拮抗劑阻止、減少、抑制或中和激動(dòng)劑的活性。拮抗劑還可以阻止、抑制或減少靶例如靶受體的組成型活性，即便在沒(méi)有已確認(rèn)的激動(dòng)劑的情況下。為了檢查抑制程度，例如，包含給定的例如蛋白質(zhì)、基因、細(xì)胞或生物的樣品或測(cè)定用潛在的活化劑或抑制劑處理，并且與不使用抑制劑的對(duì)照樣品比較。對(duì)照樣品，即不用拮抗劑處理的樣品，被指定100%的相對(duì)活性值。當(dāng)相對(duì)于對(duì)照的活性值為約90%以下、典型地85%以下、更典型地80%以下、最典型地75%以下、一般地70%以下、更一般地65%以下、最一般地60%以下、典型地55%以下、通常50%以下、更通常45%以下、最通常40%以下、優(yōu)選35%以下、更優(yōu)選30%以下、再更優(yōu)選25%以下和最優(yōu)選小于25%時(shí)，實(shí)現(xiàn)抑制。當(dāng)相對(duì)于對(duì)照的活性值為約110%、一般至少120%、更一般至少140%、更一般至少160%、通常至少180%、更通常至少2倍、最通常至少2.5倍、經(jīng)常至少5倍、更經(jīng)常至少10倍、優(yōu)選至少20倍、更優(yōu)選至少40倍和最優(yōu)選高于40倍時(shí)，實(shí)現(xiàn)活化?；罨蛞种频慕K點(diǎn)可以如下進(jìn)行監(jiān)測(cè)。例如細(xì)月包、生理學(xué)流體、組織、器官和動(dòng)物或人受試者的活化、抑制和對(duì)處理的應(yīng)答可以通過(guò)終點(diǎn)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。終點(diǎn)可以包括預(yù)定量或百分比的例如炎癥、致癌性或細(xì)胞脫?；蚍置诘臉?biāo)記，例如細(xì)胞因子、有毒氧或蛋白酶的釋放。終點(diǎn)可以包括例如預(yù)定量的離子流或運(yùn)輸；細(xì)胞遷移；細(xì)胞粘附；細(xì)胞增殖；轉(zhuǎn)移潛力；細(xì)胞分化；和表型變化，例如，涉及炎癥、凋亡、轉(zhuǎn)化、細(xì)胞周期或轉(zhuǎn)移的基因表達(dá)的變化(參見(jiàn)例如Knight(2000)」"".C//rt.LW.Sc/.30:145-158;Hood和Cheresh(2002)A^rt^eCa"cw2:91-100;Timme等，(2003)Cwr.Z>wg7^ge"4:251-261;Robbins和Itzkowitz(2002)MW/爿w.86:1467-1495;Grady和Markowitz(2002)Jwww.Gewo/m'csGewW.3:101-128;Bauer等，(2001)G//a36:235-243;St肌imirovic和Satoh(2000)Sra/"尸加/o/.10:113-126)。抑制終點(diǎn)一般是對(duì)照的75%以下、優(yōu)選對(duì)照的50%以下、更優(yōu)選對(duì)照的25%以下和最優(yōu)選對(duì)照的10%以下。一^:地，活化終點(diǎn)為對(duì)照的至少150%、優(yōu)選對(duì)照的至少2倍、更優(yōu)選對(duì)照的至少4倍和最優(yōu)選對(duì)照的至少10倍。28"配體"是指例如可以充當(dāng)受體的激動(dòng)劑或拮抗劑的小分子、肽、多肽和膜相關(guān)或膜結(jié)合分子或其復(fù)合物。"配體"還包括不是激動(dòng)劑或拮抗劑但可以結(jié)合受體的試劑。此外，"配體"包括這樣的膜結(jié)合配體其已例如通過(guò)化學(xué)方法或重組方法變成可溶形式的膜結(jié)合配體。按照慣例，當(dāng)配體在第一種細(xì)胞上為膜結(jié)合的時(shí)，受體通常存在于第二種細(xì)胞上。第二種細(xì)胞可以具有與第一種細(xì)胞相同或不同的特性。配體或受體可以是完全胞內(nèi)的，即，它可以位于胞質(zhì)、核或一些其它胞內(nèi)區(qū)室中。配體或受體可以改變其定位，例如從胞內(nèi)區(qū)室至質(zhì)膜的外表面。配體和受體的復(fù)合物被稱(chēng)為"配體受體復(fù)合物"。當(dāng)配體和受體涉及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑時(shí)，配體存在于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的上游位置，而受體存在于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的下游位置。"小分子"被定義為分子量小于10kD、通常小于2kD、優(yōu)選小于1kD和最優(yōu)選小于約500Da的分子。小分子包括但不限于無(wú)機(jī)分子、有機(jī)分子、含無(wú)機(jī)組分的有機(jī)分子、含放射性原子的分子、合成分子、肽模擬物和抗體模擬物。作為治療劑，小分子可以比大分子更能透過(guò)細(xì)胞、對(duì)降解更不易感和更不易于引發(fā)免疫應(yīng)答。小分子，例如抗體和細(xì)胞因子的肽模擬物，以及小分子毒素，已被描述(參見(jiàn)例如Casset等，(2003)5/oc/2ew.S/op/^.Cowww".307:198-205;Muyldermans(2001),Ao^c/wo/.74:277-302;Li(2000)//說(shuō)S/o^c/wo/.18:1251-1256;Apostolopoulos等，(2002)Cmr.9:411-420;Monfardini等，(2002)尸torm.D化8:2185陽(yáng)2199;Domingues等，(1999)M7f.^rw".說(shuō)o/.6:652-656;Sato和Sone(2003)5/oc/2ew./.371:603-608;頒發(fā)給Stewart等的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6,326,482)。"特異性地"或"選擇性地"結(jié)合在指配體/受體、抗體/抗原或其它結(jié)合對(duì)時(shí)，指決定蛋白質(zhì)和其它生物產(chǎn)品的異質(zhì)群體中的蛋白質(zhì)存在情況的結(jié)合反應(yīng)。因此，在指定條件下，指定配體與特定受體結(jié)合，并且不以顯著量與樣品中存在的其它蛋白質(zhì)結(jié)合。預(yù)期方法的抗體或衍生自抗體的抗原結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合化合物與其抗原或抗原的變體或突變蛋白質(zhì)結(jié)合，親和力高達(dá)任何其它抗原的親和力的至少2倍、優(yōu)選至少10倍、更優(yōu)選至少20倍和最優(yōu)選至少100倍。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，抗體將具有大于約109M"的親和力，例如通過(guò)Scatchard分析(Munsen等(1980)爿wa/聲.107:220-239)測(cè)定。本文使用的術(shù)語(yǔ)"免疫調(diào)節(jié)劑"指抑制或調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的天然或合成試劑。免疫應(yīng)答可以是體液或細(xì)胞應(yīng)答。免疫調(diào)節(jié)劑包括免疫抑制劑或抗炎劑。本文使用的"免疫抑制劑"、"免疫抑制藥物"或"免疫抑制物"是在免疫抑制治療中用于抑制或阻止免疫系統(tǒng)活性的治療劑。在臨床上，它們用于阻止移植的器官和組織(例如骨髓、心臟、腎、肝)的排斥，和/或用于自身免疫性疾病或最可能是自身免疫起源的疾病(例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、重癥肌無(wú)力、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、潰瘍性結(jié)腸炎、多發(fā)性硬化)治療中。免疫抑制藥物可以分類(lèi)為糖皮質(zhì)激素；細(xì)胞抑制劑；抗體(生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑)；作用于免疫親和素的藥物；其它藥物，包括在增生性病癥治療中使用的已知化療劑。特別地，對(duì)于多發(fā)性硬化，本發(fā)明的抗體可以與稱(chēng)為克帕松(c叩axone)的新類(lèi)型髓鞘質(zhì)結(jié)合蛋白樣治療劑聯(lián)合給予。"抗炎劑"或"消炎藥"是指類(lèi)固醇或非類(lèi)固醇類(lèi)治療劑這二者。類(lèi)固醇也稱(chēng)為皮質(zhì)類(lèi)固醇，是極其類(lèi)似皮質(zhì)醇的藥物，皮質(zhì)醇是由腎上腺天然生產(chǎn)的激素。類(lèi)固醇用作某些炎性病癥的主要治療，例如系統(tǒng)性脈管炎(血管炎癥)；和肌炎(肌肉炎癥)。類(lèi)固醇還可以選擇性地用于治療炎性病癥，例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(在身體兩側(cè)上的關(guān)節(jié)中發(fā)生的慢性炎癥性關(guān)節(jié)炎)；系統(tǒng)性紅斑狼瘡(由異常免疫系統(tǒng)功能引起的全身性疾病)；Sj6gren氏綜合征(引起眼睛千澀和口干的慢性病癥)。非類(lèi)固醇消炎藥通?？s寫(xiě)為NSAID，是具有止痛、退熱和抗炎作用的藥物，它們減少疼痛、發(fā)熱和炎癥。術(shù)語(yǔ)"非類(lèi)固醇"用于區(qū)別這些藥物與類(lèi)固醇，所述藥物(在廣泛范圍的其它作用中)具有類(lèi)似的類(lèi)二十烷酸抑制、抗炎作用。NSAID—般被指示用于下列病癥的癥狀緩解類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；骨關(guān)節(jié)炎；炎性關(guān)節(jié)病(例如強(qiáng)直性脊柱炎、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、Reiter氏綜合征)；急性痛風(fēng)；痛經(jīng)；轉(zhuǎn)移性骨痛；頭痛和偏頭痛；手術(shù)后疼痛；歸因于炎癥和組織損傷的輕度至中度疼痛；發(fā)熱；和腎絞痛。NSAID包括水楊酸類(lèi)、芳基鏈烷酸類(lèi)、2-芳基丙酸類(lèi)(profens)、N-芳基鄰氨基苯甲酸類(lèi)(滅酸類(lèi))、昔康類(lèi)(oxicams)、昔布類(lèi)(coxibs)和磺酰苯胺類(lèi)(sulphonanilides)。改變病情的抗風(fēng)濕藥(DMARD)經(jīng)常可與NSAID組合給予。經(jīng)常處方的DMARD包括幾化氯喹/氯*、曱氨蝶呤、金療法、柳氮磺胺吡咬和咪唑^琉噪t令。II.人IL-17A特異性抗體本發(fā)明提供工程改造的抗-IL-17A抗體及其治療多種炎性疾病、免疫性疾病和增殖性疾病的用途，所述疾病包括類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、骨關(guān)節(jié)炎、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎骨質(zhì)疏松癥、炎性纖維化(例如硬皮病、肺纖維化和硬化)、炎性腸病(例如克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和炎性腸病)、哮喘(包括變應(yīng)性哞喘)、變態(tài)反應(yīng)、COPD、多發(fā)性硬化、纟艮屑病和癌癥。任何適于產(chǎn)生單克隆抗體的方法都可用于產(chǎn)生本發(fā)明的抗-IL-17A抗體。例如，可以用連接或未連接(例如天然存在的)形式的IL-17A同二聚體或其片段免疫受體動(dòng)物?？梢允褂萌魏魏线m的免疫接種方法。這類(lèi)方法可以包括佐劑、其它免疫刺激劑、重復(fù)加強(qiáng)免疫接種以及使用一種或多種免疫"t妄種途徑。任何合適形式的IL-17A都可以用作免疫原(抗原)，用于產(chǎn)生對(duì)IL-17A特異性的非人抗體，可篩選所述抗體的生物學(xué)活性。激發(fā)免疫原可以為全長(zhǎng)的成熟人IL-17A,包括連接的天然同二聚體，或其含單個(gè)表位或多個(gè)表位的肽。免疫原可以單獨(dú)使用，或者與本領(lǐng)域已知的一種或多種免疫原性增強(qiáng)劑組合使用。免疫原可以由天然來(lái)源純化，或者在遺傳修飾的細(xì)胞中產(chǎn)生。編碼免疫原的DNA在來(lái)源上可以是基因組的或非基因組的(例如cDNA)?？梢允褂眠m合的遺傳栽體表達(dá)編碼免疫原的DNA，所迷載體包括但不限于腺病毒載體、腺相關(guān)病毒載體、桿狀病毒載體、質(zhì)粒和非病毒載體，例如陽(yáng)離子脂質(zhì)。任何合適的方法都可以用于激發(fā)具有所需生物學(xué)性質(zhì)的抗體應(yīng)答，例如抑制IL-17A與其受體結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，在哺乳動(dòng)物宿主例如小鼠、嚙齒動(dòng)物、靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物、人等中產(chǎn)生抗體。用于制備單克隆抗體的技術(shù)描述可見(jiàn)于例如Stites等(編輯)BasicandClinicalImmunology(第4版)LangeMedicalPublications,LosAltos,CA,以及其中引用的參考文獻(xiàn)；Harlow和Lane(1988)Antibodies:ALaboratoryManualCSHPress;Goding(1986)MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice(第2版)AcademicPress,NewYork,NY。因此，單克隆抗體可以通過(guò)本領(lǐng)域研究人員熟悉的多種技術(shù)獲得。一般地，來(lái)自用所需抗原免疫的動(dòng)物的脾細(xì)胞通常通過(guò)與骨髓瘤細(xì)胞融合而永生化。參見(jiàn)Kohler和Milstein(1976)J./mwwwo/.6:511-519。永生化的替代方法包括用EB病毒、癌基因或逆轉(zhuǎn)錄酶病毒或本領(lǐng)域已知的其它方法轉(zhuǎn)化。參見(jiàn)例如Doyle等(編輯)(1994和周期增刊)CellandTissueCulture:LaboratoryProcedures,JohnWileyandSons,NewYork,NY。篩選產(chǎn)生于單一永生化細(xì)胞的集落，用于生產(chǎn)對(duì)抗原具有所需特異性和親和力的抗體。這類(lèi)細(xì)胞生產(chǎn)的單克隆抗體的得率可以通過(guò)各種技術(shù)得到提高，包括注射入脊稚動(dòng)物宿主的腹膜腔內(nèi)。其它合適的技術(shù)涉及在噬菌體或相似栽體中選擇抗體文庫(kù)。參見(jiàn)例如Huse等，Sc,e"ce246:1275-1281(1989);和Ward等，淑臟341:544-546(1989)。本發(fā)明的抗體可以不經(jīng)修飾使用，例如作為親本嚙齒動(dòng)物抗體，或者修飾使用，以利于其在人類(lèi)患者中作為治療劑的用途，例如嵌合或人源化抗體。在某些實(shí)施方案中，用提供可檢測(cè)信號(hào)的物質(zhì)共價(jià)或非共價(jià)標(biāo)記抗體。多種多樣的標(biāo)記和綴合技術(shù)是已知的，并且在科學(xué)文獻(xiàn)和專(zhuān)利文獻(xiàn)中廣泛報(bào)道。合適的標(biāo)記包括放射性32核素、酶、底物、輔因子、抑制劑、熒光部分、化學(xué)發(fā)光部分、磁性顆粒等。教導(dǎo)此類(lèi)標(biāo)記使用的專(zhuān)利包括美國(guó)專(zhuān)利號(hào)3,817,837;3,850,752;3，939，350;3,996,345;4,277,437;4,275,149;和4,366,241。另夕卜，可以生產(chǎn)重組免疫球蛋白，參見(jiàn)Cabilly的美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,816,567;和Queen等(1989)尸rac.A^7ZcadSc/."&486:10029-10033;或可以在轉(zhuǎn)基因小鼠中制備，參見(jiàn)Mendez等(1997)A^wre15:146-156;還參見(jiàn)Abgenix和Medarextechnologies。針對(duì)IL-17A的預(yù)定片段的抗體可以通過(guò)用IL-17A的預(yù)定片段與載體蛋白質(zhì)的綴合物免疫接種動(dòng)物來(lái)產(chǎn)生。單克隆抗體由分泌所需抗體的細(xì)胞制備?？珊Y選這些抗體與正?；蛉毕菪虸L-17A的結(jié)合。這些單克隆抗體通常將以至少約1^M、更通常至少約300、30、10或3nM、優(yōu)選至少約300、100、30、10、3或lpM的Kd結(jié)合。因?yàn)镵d值和親和性逆相關(guān)，所以提到以給定Kd"或以下"結(jié)合是指以和所提及的數(shù)值至少一樣高的親和力結(jié)合，即，以至少和所提及值至少一樣低的Kd結(jié)合。結(jié)合親和力可通過(guò)ELISA測(cè)定(參見(jiàn)下文的實(shí)施例5-6)，或者通過(guò)BiaccH^表面等離子體共振分光光譜法、KinExA或ECL法(參見(jiàn)下文的實(shí)施例7)測(cè)定。合適的非人抗體還可以使用下文實(shí)施例8-11和16-17中描述的生物學(xué)測(cè)定進(jìn)行鑒定。生產(chǎn)本發(fā)明的抗人IL-17A抗體的示例性方法描述于實(shí)施例2。III.IL-17A特異性抗體的人源化任何合適的非人抗體都可以用作本發(fā)明的抗-IL-17A抗體的高變區(qū)的來(lái)源。非人抗體的來(lái)源包括但不限于嚙齒動(dòng)物(例如小鼠、大鼠)、兔形目動(dòng)物(包括兔)、牛和非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。人源化抗體大概是這樣的人免疫球蛋白(受體抗體)其中受體的高變區(qū)殘基被來(lái)自具有所需特異性和親和力的非人物種(供體抗體)的高變區(qū)殘基替換，所述非人物種例如為小鼠、大鼠、兔或非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。而且，人源化抗體可以包含在受體抗體或供體抗體中不存在的殘基，例如進(jìn)行修飾，以進(jìn)所需生物學(xué)活性的抗體性能。關(guān)于進(jìn)一步的細(xì)節(jié)，參見(jiàn)Jones等(1986)Mm^e321:522-525;Reichmann等(1988)Atowre332:323-329;和Presta(1992)Cw廳.(9/.^n/".祝o/.2:593-596。重組改造和生產(chǎn)抗體的方法例如已由Boss等(美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,816,397)、Cabilly等(美國(guó)專(zhuān)利號(hào)4,816,567)、Law等(歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)發(fā)明者E·P·鮑曼,L·G·普雷斯塔申請(qǐng)人:先靈公司