專利名稱:鉀通道抑制劑的制作方法
鉀通道抑制劑
背景技術(shù):
本發(fā)明廣泛涉及用作鉀離子通道抑制劑的化合物。這類化合物可以
用作治療和預(yù)防心臟心律不齊等等的Kv 1.5拮抗劑。
心房纖維性顫動(AF)是臨床實踐中最常見的持續(xù)性心臟心律不齊,
并且有可能隨著人口的老齡化而更加普遍。雖然AF很少是致命性的,
但它能夠損害心臟功能并且導(dǎo)致并發(fā)癥,例如發(fā)生充血性心臟衰竭、血
栓栓塞或心室纖維性顫動。
目前,已經(jīng)開發(fā)出用于治療心室和心房/室上心律不齊的有效的抗心
律失常藥。惡性心室心律不齊是對生命有直接威脅的并且需要急診救
護(hù)。心室心律不齊的藥物治療包括Ia類(例如普魯卡因胺,奎尼定),Ic
類(例如哌氟酰胺,心律平)和m類(安律酮)藥物,它們造成顯著的致心
律失常危險。這些I類和III類藥物表現(xiàn)出將AF轉(zhuǎn)換成竇性心律并且防 止AF的復(fù)發(fā)(Mounsey, JP, DiMarco, JP, Circulation, 102: 2665-2670), 但是造成不可接受的潛在致命的心室致心律失常危險,因此可能提高死 亡率(Pratt, CM, Moye, LA, Am J.Cardiol., 65: 20B國29B, 1990; Waldo 等,Lancet, 348: 7-12, 1996; Torp-Pedersen等,Expert Opin. Invest. Drugs, 9: 2695-2704, 2000)。這些發(fā)現(xiàn)證明開發(fā)用于治療心房心律不齊更安全 更有效藥物的明確沒有得到滿足的醫(yī)療需求。III類抗心律不齊藥物引起 APD選擇性延長,不顯著抑制心臟傳導(dǎo)或收縮功能。對心房纖維性顫動 臨床試驗證實的僅有選擇性III類藥物是多非利特(dofetilide),它通過阻 斷l(xiāng)Kr介導(dǎo)其抗心律不齊作用,快速激活人心房和心室中均發(fā)現(xiàn)的IK成 分(Mo廳ey, JP, DiMarco, JP, Circulation, 102: 2665-2670)。因為1& 阻斷劑增加心房和心室中APD和不應(yīng)性而不影響傳導(dǎo)本身,理論上它 們代表用于治療心律不齊例如AF的潛在地有效的藥物(Torp-Pedersen 等,ExpertOpin. Invest. Drugs, 9: 2695-2704, 2000)。然而,這些藥物 增加低心臟速率時致心律不齊的危險的嚴(yán)重傾向。
在人心房中特異性發(fā)現(xiàn)了超速延遲整流器K+流,IKur,但是在心室
中沒有發(fā)現(xiàn)。人心房中l(wèi)Kur的分子相關(guān)物是鉀通道,記作KV1.5。 Ikw被
確信對人心房極化恢復(fù)有顯著貢獻(xiàn)。因此,阻斷Kvl.5的化合物--IKur的特異性抑制劑通過阻滯人心房再極化而不引起心室再極化的延遲以 延長不應(yīng)性來克服其他化合物的缺點(diǎn),心室再極化的延遲是去極化之后
致心律失常獲得和用當(dāng)前III類藥物治療期間發(fā)現(xiàn)的獲得性長QT綜合征 的基礎(chǔ)。顯現(xiàn)這些性質(zhì)的Kvl.5阻斷劑已經(jīng)被描述過(Peukert等,J. Med. Chem., 46: 486-498, 2003; Knobloch等,Naunyn-Schmedieberg,s Arch. Pharmacol. 366: 482-287, 2002; Merck & Co., Inc.WO0224655, 2002)。 本發(fā)明中所描述的化合物為Kvl.5拮抗劑。
發(fā)明概述
本發(fā)明涉及結(jié)構(gòu)通式I的拮抗Kvl.5鉀通道的化合物:
<formula>formula see original document page 7</formula>本發(fā)明的化合物用于治療和預(yù)防心臟心律不齊等等。含有式I的化 合物和藥物載體的藥物制劑也在本發(fā)明范圍內(nèi)。r1、 R2和R3獨(dú)立地選自
1)氫,
2)卣素,
3)船2,
4)cn,
5)cr4=c(r4)2,
6)c三cr4,
7)(cr52)nor4,
8)(cr52)nn(r4)2,
9)(cr52)nc(0)r4,
10)(cr52)nc(0)or4,
11)(cr52)nr4,
12)(cr52)ns(0)mr4,
13)(cr52)ns(0)mn(r4)2,
14)os(0)mr4,
15)n(r4)c(0)r4,
16)n(r4)s(0)mr4,
17)(cr52)nn(r<6>)r4,
18)(cr52)nn(r4)(cr52)nc(0)n(r4)2,
19)(cr52)nn(r4)(cr52)nc(0)or4
20)n(r4)(cr52)nr4,
21 )n(r4)(cr52)nn(r4)2,
22)(cr52)nc(0)n(r4)2,
23)(cr52)nc(0)nh(cr52)nr4,
24)(cr52)nc(0)nhc(r4)2(cr52)nn(r4)2,
25)c(0)nh(cr52)(cr53),
26)s(0)mr》
27)n(r4)(R5);
r4,在其出現(xiàn)的每個例子中,獨(dú)立地選自 1) 氫,
2 )未被取代的或取代的crc6烷基,
3 ) 未被取代的或取代的C3-Ci。環(huán)烷基, 4) 未被取代的或取代的芳基,5) 未被取代的或取代的雜環(huán)基,
6) cf3,
7 )未被取代的或取代的c2-c6鏈烯基,和
8 )未被取代的或取代的c2-c6炔基,
或在r4被連接至被r4雙取代的氮原子的情況下,每個r4獨(dú)立地選 自CrQ烷基,且氮原子與每個尺4一起形成環(huán); r5,在其出現(xiàn)的每個例子中,獨(dú)立地選自
1) 氫,
2) d-C6烷基,
3) 囟素,
4) 芳基,
5) 雜環(huán)基,
6) C3-d。環(huán)烷基,
7) or4,和
8) ch2or4,
所述烷基、芳基、雜環(huán)基和環(huán)烷基是未被取代的或被至少一個選自 W的取代基所取代的; r6,在其中它出現(xiàn)的每個例子中,獨(dú)立地選自
1)氫,
2)未被取代的或取代的CVC6烷基,
3)囟素,
4)or5,
5)cf3,
6)未被取代的或取代的芳基,
7)未被取代的或取代的C3-do環(huán)烷基,
8)未被取代的或取代的雜環(huán)基,
9)s(0)mn(r4)2,
10)c(o)or4,
11)c(o)r4,
12)cn,
13)c(0)n(r4)2,
14)n(r4)c(o)r4,15)N(R4)C(0)OR4,
16)N(R4)C(0)N(R4)2,
17)OC(0)N(R4)2,
18)S(0)mR4,
19)OS(0)mR4,
20)N02,
21 )N(R4)2;
22)SC(O)R4,
23)N(R4)S(0)mR>
24)S(0)mR5;
其中W獨(dú)立地選自上面所定義的組; m獨(dú)立地選自0, 1和2;和 n獨(dú)立地選自0, 1, 2, 3, 4, 5和6。
在式I的化合物或它的藥學(xué)可接受鹽的一實施方式中,W選自氬和 卣素。該實施方式的優(yōu)選的組由氫和氟組成。在該子集之內(nèi),所有其它 變量如最初所定義。
在式1的化合物或它的藥學(xué)可接受鹽的另一實施方式中,112選自氳、 卣素和CF3。該實施方式的優(yōu)選的組由氬、C1和CF3組成。在該子集之 內(nèi),所有其它變量如最初所定義。
在式I的化合物或它的藥學(xué)可接受鹽的另一實施方式中,R 選自氬 和卣素。該實施方式的優(yōu)選的組由氬和Cl組成。在該子集之內(nèi),所有 其它變量如最初所定義。
本發(fā)明的另一實施方式所包括的化合物選自
1 l-[2-(3,5-二氯苯基)p比啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇
2 2,2-二吡啶-3-基-1-{2-[3-(三氟甲基)苯基]吡啶-3-基}乙醇
2 l-[2-(3,5-二氯苯基)p比啶-3-基]-2-(2-氟代吡啶-3-基)-2-吡啶-3-基乙醇 4 l-[2-(2-氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇 》l-[2-(2,5-二氯苯基)p比啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇 6 l-[2-(2,3-二氯苯基)p比啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇 上面所列的化合物的結(jié)構(gòu)如下所示本發(fā)明的化合物可具有手性中心,例如, 一個手性中心(提供兩種
立體異構(gòu)體,(R)和(S)),或兩個手性中心(提供多達(dá)四種立體異 構(gòu)體,(R,R) , (S,S) , (R,S)和(S,R))。本發(fā)明包括所有的光 學(xué)異構(gòu)體和它們的混合物。除非另有特別說明,參照一種異構(gòu)體適用于
任何可能的異構(gòu)體。只要沒有特別說明異構(gòu)體的成分,包括所有可能的 異構(gòu)體。
式I所定義的化合物的互變異構(gòu)體同樣包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。 例如,包括羰基-CH2C(0)-基(酮式)的化合物可經(jīng)過互變形成羥基-chk:(oh)-基(烯醇式)。酮式和烯醇式均包括在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。
另外,具有碳-碳雙鍵的化合物可以存在Z-型和E-型,化合物的所 有異構(gòu)形式包括在本發(fā)明中。
本發(fā)明的化合物可以以阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的形態(tài)存在,例如,手性內(nèi)旋異 構(gòu)體。本發(fā)明包括外消旋的和解析的阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體。下面的圖解一般性地 表示了可以以阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的形態(tài)存在的化合物(Z)以及其兩種可能的 阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(A)和(B)。該圖解同樣表示了每種阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體(A)和 (B)的費(fèi)歇爾投影(Fischer projection)。在該圖解中,W具有與提出 式I時的相同定義,Rp,是在112或W定義范圍內(nèi)的取代基,而Rp是在 R2或R3定義范圍內(nèi)的非氫取代基。在下面所述的對于Kv1.5的一項或多項測定中,上面列出的化合物 是有活性的。
本發(fā)明的另一個實施方式是治療或預(yù)防哺乳動物病癥的方法,所述 治療或預(yù)防通過Kvl.5抑制作用而完成或促進(jìn),包括施用有效抑制Kv1.5 的量的式I化合物。
優(yōu)選的實施方式是治療或預(yù)防哺乳動物心臟心律不齊,例如心房纖 維性顫動、心房樸動、心房心律不齊和室上性心動過速的方法,包括施 用治療有效量的式I的化合物。
另 一個優(yōu)選的實施方式是預(yù)防血栓栓塞事件,例如中風(fēng)的方法。 另 一個優(yōu)選的實施方式是預(yù)防充血性心臟衰竭的方法。 另一個優(yōu)選的實施方式是對患有心房纖維性顫動的患者誘導(dǎo)正常 靜脈竇節(jié)律狀態(tài)的方法,其中所述誘導(dǎo)的節(jié)律符合對于和患者相似大小 和年齡特征的個體認(rèn)為是正常的節(jié)律,所述方法包括使用本發(fā)明的化合
物治療患者。
另一個優(yōu)選的實施方式是對患者治療心動過速(即,心率快,例如每 分鐘跳100次)的方法,包括與權(quán)利要求1的化合物聯(lián)合使用抗心動過速 裝置(例如去纖顫器或起搏器)治療患者。
本發(fā)明還包括含有藥學(xué)可接受載體和式I的化合物或者其藥學(xué)可接受晶體形式或水合物的藥物制劑。優(yōu)選的實施方式是另外含有第二種藥 物的式I的化合物的藥物組合物。
簡寫表
AAS原子吸收光鐠
AF心房纖顫
ACE血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶
CHO中國倉鼠卵巢
DAST(二乙基氨基)硫三氟化物
DMSO二曱亞砜
dppfl,l,- (二苯基膦基)二茂鐵
EDTA乙二胺四乙酸
EGTA亞乙基雙(氧基亞乙基次氮基)四乙酸
FAAS火焰原子吸收光譜
FBS胎牛血清
HBSSH肌k,s平衡鹽液
HEPESN-2-羥乙基哌噪-:^,-2-乙磺酸
HF-Pyr氫氟吡啶
HPLC高壓液相色譜法
LDA二異丙基胺化鋰
LYS溶解產(chǎn)物
MS質(zhì)譜
NaOtBu叔丁基氧化鈉
NMR核磁共振
NSAID非甾族類抗炎藥
PBS磷酸鹽緩沖鹽水
Pd2dba3三(二亞千基丙酮)二鈀(0)
RMS均方根偏差
RT室溫
SUP上清液
TBAF氟化四丁基銨
TBDMSC1叔丁基二甲基曱硅烷基氯化物TBSC1 叔丁基二曱基曱硅烷基氯化物
THF 四氫呋喃
除非另作說明,這里使用的〃烷基〃意在包括支鏈和直鏈飽和脂肪烴 基,包括所有的異構(gòu)體,具有特定數(shù)目的碳原子。說明書自始至終使用 了對于烷基常規(guī)使用的縮寫,例如甲基可以"Me"或CH3代表,乙基可 以"Et,,或CH2CH3代表,丙基可以"Pr"或CH2CH2CH3代表,丁基可以 "Bu"或CH2CH2CH2CH3代表,等等。例如"C^烷基"(或"d-C6烷基"), 意思是具有指定數(shù)目碳原子的直鏈或支鏈烷基,包括所有異構(gòu)體。d-6 烷基包括所有的己基和戊基異構(gòu)體以及正-,異-,仲-和叔-丁基,正-和 異丙基,乙基和曱基。"d-4烷基"指正-,異-,仲-和#又-丁基,正-和異 丙基,乙基和甲基。術(shù)語"烷氧基"表示通過氧橋連接的指定數(shù)目碳原子 的直鏈或支鏈烷基。
術(shù)語"鏈烯基"包括包含通過一雙鍵連接的至少兩個碳原子的直鏈 或支鏈不飽和烴基。乙烯基例如由"CH2 CH2 ,,或者由"H 2 C = CH 2 "表 示。例如"C2.5鏈烯基"(或"CVC5鏈烯基")意思是具有2-5個碳原子的直 鏈或支鏈鏈烯基,且包括所有的戊烯基異構(gòu)體以及l(fā)-丁烯基,2-丁烯基, 3-丁烯基,l-丙烯基,2-丙烯基和乙烯基(或次乙基)。類似的術(shù)語如"〇2-3 鏈烯基"有著類似含義。
術(shù)語"炔基"包括包含通過三鍵連接的至少兩個碳原子的直鏈或支 鏈不飽和烴基。乙炔基例如由"CHCH"或者由"HC三CH"表示。例如"C2-5 炔基"(或"CVC5炔基")意思是具有2-5個碳原子的直鏈或支鏈炔基,且 包括所有的戊炔基異構(gòu)體以及l(fā)-丁炔基,2-丁炔基,3-丁炔基,1-丙炔 基,2-丙炔基和乙炔基(ethynyl)(或acetylenyl)。類似的術(shù)語如"(:2-3炔 基"有著類似含義。
除非另外特別說明為僅"未被取代的"或僅"取代的",烷基、鏈烯基 和炔基是未被取代的或者在每一個碳原子上被1-3個下面的取代基取 代卣素,d誦C2。烷基,CF3 , NH2,誦NH(C廣C6烷基),國N(C廣C6烷 基)2, N02 ,氧代,CN, N3 , -OH, -0((^-(:6烷基),C3-d。環(huán)烷基, C2-C6鏈烯基,C2-C6炔基,(Co-C6烷基)S(0)o-2-, (Cq-C6烷基)S(0)o-2(Co -C6烷基)-,(C。-C6烷基)C(O)NH-, H2N-C(NH)- , -O(d-C6烷基)CFs , (C0-C6烷基)C(O)-, (C。-C6烷基)OC(0)-, (CQ-C6烷基)0(d-C6烷基)畫,(C0-C6烷基)C(0)L2(QrC6烷基)-,(CG-C6烷基)OC(O)NH-,芳基,芳烷 基,雜環(huán),雜環(huán)基烷基,囟代-芳基,囟代-芳烷基,卣代-雜環(huán),卣代-雜環(huán)基烷基,氰基-芳基,氰基-芳烷基,氰基-雜環(huán)和氰基-雜環(huán)基烷基。 象"Co-6烷基"這樣的表達(dá)中使用的術(shù)語"Q)"是指一個直接的共價 鍵。類似地,當(dāng)定義基團(tuán)中一定數(shù)目原子存在的整數(shù)等于零時,是指與
々、
之相鄰的原子通過一個鍵直接相連。例如,在結(jié)構(gòu) + 中,其中s
是等于0, l或2的整數(shù),當(dāng)s為0時,該結(jié)構(gòu)為 T 。
術(shù)語"C3-8環(huán)烷基"(或"C3-Cs環(huán)烷基")指總共具有3至8個碳原子的 烷烴環(huán)(即,環(huán)丙基,環(huán)丁基,環(huán)戊基,環(huán)己基,環(huán)庚基或環(huán)辛基)。術(shù) 語"Cw環(huán)烷基","C3-6環(huán)烷基","C5-7環(huán)烷基"等具有類似含義。
術(shù)語"不飽和的",當(dāng)參照環(huán)使用時,是指環(huán)具有最大數(shù)量的非累積 環(huán)雙鍵。術(shù)語"飽和的",當(dāng)參照環(huán)使用時,是指環(huán)部分地(至少一個環(huán) 雙鍵但少于最大數(shù)目的環(huán)雙鍵)或者完全(沒有環(huán)雙鍵)飽和。
術(shù)語"卣素"(或"卣代")指氟、氯、溴和碘(或者稱作氟(F)、氯(C1)、 溴(Br )和碘(I))。
術(shù)語"C^鹵代烷基"(或者可以稱作"d-C6鹵代烷基,,或"囟代d-Q 烷基")指有一個或多個卣代取代基的如上所定義的G至Q直鏈或支鏈
烷基。術(shù)語"CM卣代烷基"具有類似含義。術(shù)語"d-6氟代烷基"具有類
似含義,除了卣代取代基限為氟。合適的卣代烷基包括(CH2 )o-4 CF3系 列(即,三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、3,3,3-三氟-正國丙基等)。
除非另有說明,這里使用的術(shù)語"碳環(huán)"(及其變化形式,例如"碳環(huán)
的"或"碳環(huán)基")指(i)C3至C8單環(huán),飽和的或不飽和的環(huán),或(ii)C7至C12
飽和的或不飽和雙環(huán)環(huán)系。(ii)中的每個環(huán)獨(dú)立于其它環(huán)或者與其它環(huán)稠 合,并且每一個環(huán)是飽和的或不飽和的。碳環(huán)可以在任何碳原子上與分 子的其余部分連接,產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物。稠合的雙環(huán)碳環(huán)是一組碳環(huán); 即,術(shù)語"稠合雙環(huán)碳環(huán)"一般指C7至do雙環(huán)環(huán)系,其中每個環(huán)是飽 和的或不飽和的,并且環(huán)系中每個環(huán)共享兩個相鄰碳原子。其中一個環(huán) 是飽和的并且另一個也是飽和的稠合雙環(huán)碳環(huán)是飽和雙環(huán)環(huán)系。其中一 個環(huán)是苯而另 一個是飽和的稠合雙環(huán)碳環(huán)是不飽和雙環(huán)環(huán)系。其中一個 環(huán)是苯而另一個是不飽和的稠合雙環(huán)碳環(huán)是不飽和環(huán)系。飽和碳環(huán)也稱作環(huán)烷基環(huán),例如,環(huán)丙基、環(huán)丁基等。除非另有說明,碳環(huán)是沒有被 取代的或者被d-6烷基,Cw鏈烯基,d-6炔基,芳基,卣素,NH2或 OH取代。 一組稠合雙環(huán)碳環(huán)是其中一個環(huán)是苯環(huán)而另一個環(huán)是飽和的 或不飽和的那些雙環(huán)碳環(huán),通過任何碳原子連接以產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物。
這組化合物代表性例子包括下面的<formula>formula see original document page 16</formula>術(shù)語"芳基"指芳香單環(huán)和多碳環(huán)環(huán)系,其中多環(huán)環(huán)系中的各碳環(huán)通 過單鍵與彼此稠合或連接。合適的芳香基團(tuán)包括苯基、萘基和亞聯(lián)苯基。
術(shù)語"雜環(huán)"(及其變化形式,例如"雜環(huán)的"或"雜環(huán)基")廣義上指(i) 穩(wěn)定的4-至8-元,飽和或不飽和單環(huán),或(ii)穩(wěn)定的7-至12-元雙環(huán)環(huán)系, 其中(ii)中的每一個環(huán)是橋接的、稠和的或螺環(huán)的,且每一個環(huán)獨(dú)立地是 々包和的或不飽和的,并且單環(huán)或雙環(huán)環(huán)系包含一個或多個選自N、 O和 S的雜原子(例如,1-6個雜原子,或者1-4個雜原子)和平衡的碳原子(單 環(huán)一般包含至少 一個碳原子而環(huán)系 一般包含至少兩個碳原子);并且其中 一個或多個氮和硫雜原子任選地被氧化,并且一個或多個氮雜原子任選 地季銨化。雜環(huán)可以在任何雜原子或碳原子處連接,前提是連接導(dǎo)致穩(wěn) 定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生。當(dāng)雜環(huán)有取代基時,可理解的是,假如能得到穩(wěn)定的化 學(xué)結(jié)構(gòu),取代基可以與環(huán)中的任何原子連接,不管是雜原子或碳原子。
除非另外特別說明為僅"未被取代的"或僅"取代的",環(huán)烷基、芳基 和雜環(huán)基是未被取代的或取代的。如這里使用的,術(shù)語"取代的C3-C10環(huán) 烷基","取代的芳基"和"取代的雜環(huán)"意在包括除了與化合物的其他部分 連接點(diǎn)之外包含1-4個取代基的環(huán)基。優(yōu)選地,取代基選自但不限于下 面的基團(tuán),包括鹵素,C廣C20烷基,CF3 , NH2 , -NH(d-C6烷基), -N(d-C6烷基)2 , N02 ,氧代,CN, N3 , -OH, -0(C廣C6烷基),CrC10環(huán)烷基,C2-C6鏈烯基,C2 -C6炔基,(C。-C6烷基)-S(0)。.2 -,芳基-S(0)o-2-, (C0-C6烷基)S(0)。—2(C。-C6烷基)-,(C。-C6烷基)C(O)NH-, H2N-C(NH)-, -(Xd-Q烷基)CF3 , (C。-C6烷基)C(O)-, (C。-C6烷基)OC(O)-, (C0-C6 烷基)0(d-C6烷基)-,(QrC6烷基)C(O)w (Co-C6烷基)-,(C。-C6烷 基)OC(O)NH-,芳基,芳烷基,雜芳基,雜環(huán)基烷基,卣代-芳基,卣代 -芳烷基,卣代-雜環(huán),卣代-雜環(huán)基烷基,氰基-芳基,氰基-芳烷基,氰 基-雜環(huán)和氰基-雜環(huán)基烷基。飽和雜環(huán)形成一組雜環(huán);即,術(shù)語"飽和雜環(huán)"一般指如上定義的雜 環(huán),其中環(huán)系統(tǒng)(無論單-環(huán)或多-環(huán))是飽和的。術(shù)語"飽和雜環(huán)"指由碳原 子和一個或多個選自N 、 O和S的雜原子構(gòu)成的4-至8-元飽和單環(huán) 或穩(wěn)定的7-至12-元雙環(huán)環(huán)系。代表性例子包括哌啶基,哌。秦基,氮雜 環(huán)庚烷基(azepanyl),他咯烷基,吡哇烷基,咪喳烷基,嗜唑烷基, 異哺唑烷基,嗎啉基,辟u代嗎啉基,噻唑烷基,異p塞唑烷基,巧l咮基, 四氫喹啉基、苯并哺嗪基、四氬喹喔啉基、苯并二氧雜環(huán)己烯基、二氮 雜螺[4.4]壬基、哌漆酮(pipemzinone)和四氬p夫喃基(或四氬p夫喃基)。雜芳香化合物形成另一組雜環(huán);即,術(shù)語"雜芳香化合物"(或者"雜 芳基") 一般指如上定義的雜環(huán),其中整個環(huán)系統(tǒng)(單-環(huán)或多-環(huán))是芳香 環(huán)系。術(shù)語"雜芳香環(huán)"指由碳原子和一個或多個選自N、 O和S的雜原 子構(gòu)成的5-或6-元單環(huán)芳環(huán)或7-至12-元雙環(huán)。在取代的雜芳環(huán)含有至 少一個氮原子(例如,吡啶)的情況下,這些取代基可以是導(dǎo)致形成 N-氧化物的那些。雜芳香環(huán)的代表性例子包括吡咬基,吡咯基,吡溱基, 嘧啶基,噠嗪基,噻吩基(或苯硫基),噻唑基,呋喃基,咪唑基,吡唑 基,三唑基,四唑基,哺唑基,異喏唑基,嗜二唑基,噻唑基,異噻唑 基和噻二唑基。雙環(huán)雜環(huán)的代表性例子包括苯并三唑基,吲哚基,異吲哚基,吲唑 基,二氫吲哚基,異二氫吲哚基,喹喔啉基,喹唑啉基,肉啉基,苯并 二氫吡喃基,異苯并二氫吡喃基,四氫喹啉基,喹啉基,四氪異喹啉基, 異會啉基,吡啶酮(pyridinone), 2,3-二氫苯并呋喃基,2,3-二氫苯并-1,4國二p惡烯基(即,、一0。,咪唑并(2,l-b)(l,3)噻唑,(即,^^)和苯并-1,3-間二氧戊環(huán)基(即,a0〉)。在上下文中,0^0>也可稱作有與相鄰的兩個碳原子連接的亞曱基二氧取代基的苯基。除非有相反的表述,"飽和"環(huán)是部分或完全飽和的環(huán)。例如,"飽和單環(huán)c6碳環(huán)"指環(huán)己烷。除非有相反的表述,這里引述的所有的范圍都是包括性的。例如,描述為包含"l-4個雜原子"的雜環(huán)指可包含1, 2, 3或4個雜原子的雜環(huán)。當(dāng)描述本發(fā)明的化合物的任何構(gòu)成或任何結(jié)構(gòu)式中變量出現(xiàn)一次 以上時,其出現(xiàn)的每一次定義與其他每次出現(xiàn)的定義是獨(dú)立的。另外, 只有這樣的組合得到穩(wěn)定化合物時,取代基和/或變量的組合才是允許 的。術(shù)語"取代的"(例如,如"任選地被一個或多個取代基取代的芳基.." 中的)包括化學(xué)上允許的指定取代基的單取代和多取代達(dá)到單 一取代和 多重取代的程度(包括同 一個位置的多取代)。在本發(fā)明具有N-氧化物部分的化合物中,例如,吡咬基N-氧化物 部分,N-氧化物部分利用常規(guī)表示方式進(jìn)行結(jié)構(gòu)描述。例如,吡啶基 N-氧化物部分在結(jié)構(gòu)上表示為其具有相同的含義。對于包含具有重復(fù)關(guān)系的術(shù)語的變量定義,例如,(CRiRJ)r,其 中r是整數(shù)2, Ri是定義的變量,RJ是定義的變量,Ri的值在其存在的 各種情況下可以是不同的,而Rj的值在其出現(xiàn)的各種情況下也可以是 不同的。例如,如果R1和RJ獨(dú)立地選自曱基,乙基,丙基和丁基,則 (CR/RJ)2可以是<formula>formula see original document page 18</formula>藥學(xué)可接受鹽包括金屬(無機(jī))鹽和有機(jī)鹽;Remington's Pharmaceutical Sciences,第17版,第1418頁(1985)列出了這些鹽。如 本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的,根據(jù)物理和化學(xué)穩(wěn)定性、流動性、吸濕度和 溶解度來選擇合適的鹽型。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)清楚,藥學(xué)可接受鹽包 括但不限于有機(jī)酸鹽,例如鹽酸鹽,硫酸鹽,磷酸鹽,二磷酸鹽,氬溴 酸鹽和硝酸鹽,或有機(jī)酸鹽,例如蘋果酸鹽,馬來酸鹽,富馬酸鹽,酒 石酸鹽,琥珀酸鹽,檸檬酸鹽,醋酸鹽,乳酸鹽,甲磺酸鹽,對曱苯磺 酸鹽或棕櫚酸鹽,水楊酸鹽和硬脂酸鹽。類似地,藥學(xué)可接受陽離子包 括,但不限于鈉、鉀、鈣、鋁、鋰和銨(特別是帶有仲胺的銨鹽)。因為 上述原因,本發(fā)明優(yōu)選的鹽包括鉀鹽,鈉鹽,鉀鹽和銨鹽。包括在本發(fā) 明范圍內(nèi)的還有式I的化合物的晶體形式、水合物和溶劑合物。下面的方案和實施例中詳細(xì)描述了制備本發(fā)明化合物的方法。其他 合成方案對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。所述方案和實施例描述了 式I的化合物的制備且同樣不能認(rèn)為是對在附加的權(quán)利要求中提出的發(fā) 明的限制。下文中所述的實施例包括本發(fā)明的更進(jìn)一步的實施方式。方案1在該方案中變量R1、 RZ和RS如"式r中所定義。實施例11-「2-(3,5-二氯苯基〗吡啶-3-基1-2,2-二吡啶-3-基乙醇步驟A2-氯-3-吡咬曱醛(carboxaldehyde) ( 961mg, 6.79 mmol) 、 3,5-二 氯苯基硼酸(1.29g,6.79 mmol)和二氯[l,l,-雙(聯(lián)苯基膦)二茂鐵]4巴 (II) 二氯甲烷加合物(277 mg, 0.34 mmol)的THF ( 10mL)溶液用 Cs2C03水溶液處理(10mL 1M的溶液,lOmmol)并密封在20 mL的微 波反應(yīng)管中。將混合物在160。C下照射20分鐘,冷卻,用100 mL H20 稀釋,并用EtOAc(3x60mL)萃取。將有機(jī)萃取物合并,干燥(Na2S04), 減壓下濃縮,并通過快速色譜法(120g Si02, 0-20% EtOAc/己烷梯度洗脫) 以提供2-(3,5-二氯苯基)煙堿醛(nicotinaldehyde ) 。 ESI+ MS: 252.0 [M+H]+。步驟B3,3,-亞曱基二吡啶(340 mg, 1.99mmo1)的THF (20 mL)溶液在-78 GC下用二異丙基酰胺化鋰(2.65 mL 單-THF復(fù)合物的1.5 M環(huán)己烷溶 液,3.98 mmol)滴加處理。在-78 。C下攪拌30分鐘后,用注射器逐滴加 入2-(3,5-二氯苯基)煙堿醛(500 mg溶于6 mL THF的溶液,1.99 mmol)。 反應(yīng)混合物在-78 QC下攪拌1小時,經(jīng)5分鐘升溫至0 QC,然后加入 100mL H20淬滅?;旌衔镉肊tOAc (3 x 60 mL)萃取且將有機(jī)萃取物合 并,干燥(Na2S04),減壓下濃縮,并通過快速色譜法(40g Si02, 0-10% MeOH/CH2Cl2梯度洗脫)以提供外消旋l-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇。通過使用手性固定相的HPLC來進(jìn)行拆分 (ChiralPak AD, 5 cm x 50 cm, 20 p, 40-100% i-PrOH/己烷梯度洗脫,1 mL/L 二乙胺修正,80mL/min)從而提供標(biāo)題化合物。NMR (300 MHz CDC13): 5 8.53 (d4 /= 0.8,4.7 Hz 1H), 8.49 (d, J- 1.9 Hz> 1H), 8.46 (dd, / 1.4, 4.8取1H), 8.37 (dd,J- 1.8,4.3取1H), 8.06 (d,1.3取1H), 7.99 (dd /= 1.7, 8.1取1H), 7.63 ("1.6, 7.9 Hz 1H), 7.43 (dd /= 1.8,1.8 Hz 1H), 7.34 (W", 8.0取1H), 7.27 (叫1H), 7.08 (叫4H), 5.58 (d 8.2取1H), 4.15 (d,8.2取1H). HRMS [M+H] C23H17C12N30計錄 422.0822,測定值422.0835.外消旋l-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇的Kvl.5 HT-clamp ICso值和所確定的對映異構(gòu)體 外消旋-116nM(R) -1-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇-90 nM(S ) -1-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇-2920 nM
下面的化合物是依照方案1來制備的,其中方案中的中間體依照文 獻(xiàn)方法進(jìn)行改性。除非另外說明,下面所列的實施例2-6中的化合物的 結(jié)構(gòu)通過定義以下結(jié)構(gòu)的變量R1、 112和113代表
'HNMR (300 MHz> CDC13): S 8.54 (dd, J= 1.3,4.5私1H), 8.45 (d, J- 1.5 Hz 1H), 8.43 (d, /= 4.5 Hz 1H), 8.31 (d, /= 4.5取1H), 8.04 (d /= 1.5 Hz 1H), 7.96 " 8.0 Hz 1H), 7.71 (d,7.8 Hz 1H), 7.58 (m, 2H), 7.51 (m, 2H), 7.31 (dd,4.7,7.9 Hz, 1H), 7.23 (dd, J== 4.8, 7.8取1H), 7.03 (dt> J
=1.7, 8.2取1H), 6.99 (dd, ■/:= 4.5,7.8取1H), 5.61 (d, J= 7.7 Hz 1H), 4.12 (d, J- 7.7 Hz 1H). HRMS [M+H] C24H18F3N3CW*m422.1475,測定值422.1484.
外消旋2,2-二吡啶-3-基-1-{2-[3-(三氟甲基)苯基]他啶-3-基}乙醇的
Kvl.5 HT-clamp 1。5()值和所確定的對映異構(gòu)體
外消旋-266 nM
對映異構(gòu)體A-290 nM
實施例2
2,2-二吡啶-3-基-142-「3-(三氟甲基)苯基1吡啶-3-基}乙醇對映異構(gòu)體B-8218nM實施例3l-r2-(3,5-二氯苯基V比啶-3-基l-2-(2-氟代吡啶-3-基V2-吡啶-3-基乙醇異構(gòu)體1!HNMR (300 MHz^ CDCb): S 8.81 (m, 1H), 8.59 (叫2H), 8.15 (d,4.7 Hz 1H), 8.02 (dd, /= 8.3, 8.3 Hz, 1H), 7.90 (d, / 8.0 Hj、 1H), 7.63 (m, 1H), 7.56 (叫1H), 7.47 (叫1H), 7.34 (tH4.9, 7.8 Hz, 1H), 7.24 (m, 3H), 5.77 (d,4.7 Hz 1H), 4.44 (d 4.8 Hz 1H). HRMS [M+H] C23H16C12FN30 計瓶440.0727,測定值440.0745.異構(gòu)體2'H NMR (300 MH^ CDC13): 5 9.07 (m, 1H), 8.62 (m 1H), 8.58 (d, 《/一 4.4取1H), 8.11 (d'5.0 Hz, 1H), 8.09 (m, 1H), 8.038.4 Hz 1H), 7.70 (叫1H), 7.45 (dd,U, 1.8 Hz 1H), 7.41 (dd, /= 4.8, 8.1取1H), 7.33 (m, IH), 7.17 (d,J- 1.8取2H), 7.05 (ddd,/= 1.6, 4.9, 7.1 Hz, 1H), 5.71 (d,J= 8.6取1H), 4.60 (d, 8.3 Hs; 1H). HRMS [M+H] QbH16C12FN3CK"|"M440.0727,測定值440.0741.l-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2-(2-氟代吡啶-3-基)-2-吡啶-3-基乙醇 對映異構(gòu)體的混合物的Kvl.5 HT-clamp ICs()值和所確定的對映異構(gòu)體 4種異構(gòu)體的混合物85 nM 異構(gòu)體l,對映異構(gòu)體A: 96 nM 異構(gòu)體l,對映異構(gòu)體B:在10000 nM 72%抑制 異構(gòu)體2,對映異構(gòu)體A: 154 nM 異構(gòu)體2,對映異構(gòu)體B:在10000nM89。/。抑制實施例4142-〖2-氯苯基〗吡啶-3-基1-2,2-二吡啶-3-基乙醇分離為2:1的阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物,如通過不同的ROESY信號的 化學(xué)交換所示。'HNMR(600MH^ CDC13):主異構(gòu)體5 8.52 (m, 1H), 8.40(叫1H), 8.39 (m, 1H), 8.30 (m, 1H), 8.0 (s, 1H), 7.88 (4 7.9 Hz 1H), 7.65 (m, 1H), 7.47 (d, /" 8.2玩1H),.7.39 (t, 7.$ Hz, 1$, 7.35 (t / - 7.6取1H), 7.29 (叫1H), 7.21 (m, 1H), 7.10 (叫1H), 7.01 (dd,4.9, 7.6取1H), 6.89 (d, 7.6 取1H), 5.32 (d, J- 6.8 Hz 1H), 4.06 (d, /- 6.8 Hs^ 1H). 次異構(gòu)體8 8.52 (叫1H), 8.45 (s, 1H), 8.40 (m, 1H), 8 29 (m, 1H), 8.23 (s, IH), 7.66 (叫1H), 7.59 (d J= 8.2 1H), 7.52 (d> / = 7.9 I化1H), 7.39 (dd, J-7.6, 7.9 Hz 1H), 7.37 (nvlH), 7.28 (m,H), 7.23 (na, 1H), 7.14 (m, 2H), 7.09 (m, 1H), 5.36 (叫1H),4.10(邁,1H). HRMS [M+印C23HwClN30計賴388.1211,測定值388.1219.外消旋l-[2-(2-氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇的Kvl.5HT-clamp IC5o值和所確定的對映異構(gòu)體外消旋-422 nM對映異構(gòu)體A-171 nM對映異構(gòu)體B-25000 nM分離為2.6:1的阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物,如通過不同的ROESY信號的 化學(xué)交換所示。^NMR (600 MH^ CDC13):主異構(gòu)體8 8.56 (dd J 1.7,4.9 Hz, 1H), 8.48 & IH), 8.44 (m, IH), 8.38 (m, IH), 8.05 (dd, /= 1.6, 8.0取IH), 7.96 (m, IH), 7.63 (dt J= 1,7, 7.9 Hz IH), 7.40 (m, 2H), 7.35 (d4 /= 2.4, 8.5 1H), 7.25 (m, IH), 7.06 (dd, </- 4.8, 8.0 Hz IH), 7.01沐1.8,7.9 Hz IH), 6.56 (d, /= 2.4 IH), 5.28 (d, /= 8.2 Hz IH), 4.12 (d, /= 8.3取1H).次異構(gòu)體S 8.54 (dd, /= 1.7,4.9取IH), 8.44 〈m, IH), 8.43 (m, IH), 8.37 (叫IH), 8.32 (s, IH), 7.67 (dt J> 1.6,7.9 Hz IH), 7.52 (叫3H), 7.47 (d^ J 1.7, 7.9 I化IH), 7.27 (m, IH), 7.18 (叫IH), 7.13 (械J 4.6,7.8取 IH), 7.07 (叫IH), 5.33 (m, IH), 4.12 (叫1H). HRMS [M+H] C2jHl7Cl2N3CHi"#m422.0822,測定值 422.0835.外消旋l-[2-(2,5-二氯苯基)p比啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇的Kvl.5 HT-clamp ICso值和所確定的對映異構(gòu)體 外消旋-77nM 對映異構(gòu)體A-3197nM 對映異構(gòu)體B-75 nM分離為2:1的阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物,如通過不同的ROESY信號的 化學(xué)交換所示。實施例6l-「2-(2,3-二氯苯基)吡啶-3-基l-2,2-二吡啶-3-基乙醇JHNMR (600 MHzj CDC13):主異構(gòu)體S 8.53 (m, 1H), 8.39 (m, 1H), 8,33 (m, 1H), 8.32 (m, 1H), 8.02 (d, /= 1.8 Ha 1H), 7.卯(d, J= 8.0取1H), 7.66 (dt ■/= 1.7,7.8 Hz 1H), 7.54 (dd> 1.4, 8.0 Hz, 1H), 7.32 (叫1H), 7.28 (m IH), 7.23 (恥1H), 7.14 (dd, 1.6, 8.0 Hz 1H), 7.04 (dd,4.7, 7,9 Hz 1H), 6.69 (叫1H), 5.22 (d,7.1取1H), 4.08 (d,7.0 Hz, 1H).次異構(gòu)體S 8.53 (叫1H), 8.45 (m, 1H), 8.42 (m, 1H), 8.32 (m, 1H), 8.29 (m, 1H), 7.64 (dt, 1.6, 7.9取1H), 7.57 (m, 1H), 7.56 (m, l印,7.35 (叫1H), 7.32 (叫7.28 (m, IH), 7.23 (m, 1H), 7.17 (m, 1H), 7.11 (dd,4.9,7.9取1H), 5.3S (d, J- 4.2取1H), 4.10 (d, J"- 4.0 Hz> 1H). HRMS [M+H] CMHi7CljN3CK+*tt422.0822,測定值 422.0832.外消旋l-[2-(2,3-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇的Kvl.5 HT-clamp ICso值和所確定的對映異構(gòu)體 外消旋-110nM 對映異構(gòu)體A-5212nM 對映異構(gòu)體B-236 nM使用下述方法,評估了本發(fā)明的代表性化合物且發(fā)現(xiàn)它們在Kvl.5 測試中具有活性,從而證實并確認(rèn)了本發(fā)明的化合物作為Kvl.5抑制劑 和抗心律失常藥的用途。此類化合物具有正向速率依賴性,大幅度地阻 滯外向K+電流,或者優(yōu)先以快速的去極化或心律阻滯外向K+電流。如 下所述的電生理學(xué)研究可鑒定這類化合物。例如,在以1Hz和3Hz的頻 率輸出去極化訓(xùn)練時,如果在10秒的訓(xùn)練中,在3Hz下觀測到的阻滯 量大于在lHz的阻滯量,則阻滯具有"速率依賴性"。在隨著阻滯劑的使 用外向K+電流阻滯量增加的過程中,或在心肌細(xì)胞的反復(fù)去極化過程 中,Kvl.5阻滯劑還可能顯示應(yīng)用依賴性。隨著訓(xùn)練或一系列特定速率 或頻率的脈沖或去極化中的各次連續(xù)的去極化作用,出現(xiàn)很大程度的阻 滯應(yīng)用依賴性。例如,在頻率為1Hz, IO次去極化的訓(xùn)練中,如果該訓(xùn) 練中第IO次脈沖的阻滯量大于第l次脈沖的阻滯量,則阻滯具有"應(yīng)用 依賴性"。Kvl.5阻滯劑可同時具有應(yīng)用依賴性和速率依賴性。使用來自不同物種(包括但不限于人、大鼠、小鼠、狗、猴子、白 鼬、兔、豚鼠或山羊)的心肌細(xì)胞或其他組織,通過天然Ikur的電生理 學(xué)研究也可鑒定Kvl.5阻滯劑。在天然組織中,Kvl.5可作為同源寡聚 體或含其它Kv家族成員的異源寡聚體存在,或者可存在于與P亞基的 復(fù)合物中。本發(fā)明化合物可阻滯Kvl.5同源或異源寡聚體或者含卩亞基 的復(fù)合物中的Kvl.5。Kvl.5測定法高通量Kvl.5平面膜片箝(planar patch clamp)測試是系統(tǒng)性初篩。 它證實特異性作用Kvl.5鉀通道藥物的活性并提供所述藥物功效的功能 測量。Kiss等(Assay and Drug Dev. Tech. , 1 ( 1-2): 127-135, 2003 ) 和Schroeder等(J. of Biomol. Screen., 8(1); 50-64, 2003 )介紹了 這種用于Kvl.5以及其它電壓門控離子通道的儀器的應(yīng)用。將克隆自人心臟的穩(wěn)定表達(dá)人類Kvl.5鉀通道a亞基的中國倉鼠卵 巢細(xì)胞(CHO)在補(bǔ)充了 10%FBS、 100U/ml青霉素、100pg/ml鏈霉素、 lOOOpg/ml G-418硫酸鹽的Ham's F12培養(yǎng)基中生長至90-100%融合。將 細(xì)胞通過用Versene處理次代培養(yǎng),然后懸浮在磷酸鹽緩沖鹽水(PBS) 中并離心。將細(xì)胞沉淀(cell pellet)重新懸浮在PBS中并將得到的懸浮 液置于Ion Works HT設(shè)備的細(xì)胞Pier存器中。電生理學(xué)記錄采用胞內(nèi)溶液進(jìn)行,所述溶液含有(mM) : K-葡糖 酸鹽100、 KC140、 MgCl2 3.2、 EGTA 3、 N-2-羥基乙基嗛。秦-:^-2-乙磺 酸(HEPES) 5,調(diào)節(jié)pH至7.3。將兩性霉素(Sigma)制備為30mg/ml 母液,用內(nèi)部緩沖溶液稀釋至O.lmg/ml的最終工作濃度。外部溶液是 Dulbecco,s PBS (Invitrogen),并且包含(mM): CaCl2 0.90、 KC1 2.67、 K3P04 1.47、 MgCl2 0.50、 NaCl 138、 Na3P04 8.10,其pH為7.4。所有 化合物用DMSO制備為10 mM的母液。將化合物稀釋到外部緩沖液中, 隨后在實驗過程中從藥物板轉(zhuǎn)移到Patchplate(最終DMSO濃度<0.66% vol.)。在室溫下記錄Kvl.5離子電流。放大膜電流(RMS~10pA)并在 10kHz下取樣。在所有實驗中,在測試脈沖前通過施加160 ms超極化(10 mV)預(yù)脈沖200ms進(jìn)行漏減(leak subtraction),從而測量漏泄電導(dǎo)。 膜片箝刺激方案如下1. 在Patchplate孔中加載3.5^1外部緩沖液。2. 通過在每個孔上施加10 mV, 160ms的電位差,測定平面微量移 液管孔阻抗(Rp)(孔試驗)。3. 將細(xì)胞用移液管移入Patchplate中,在每個Patchplate孔底部形 成具有l(wèi)-2pm孔的高阻抗封接。進(jìn)行封接測試掃描以確定有多 少Patchplate孔具有形成了封接的細(xì)胞。4. 為了獲得進(jìn)入細(xì)胞的電通路,將含有兩性霉素的胞內(nèi)溶液在Patchplate底側(cè)循環(huán)4分鐘。
5. 在Patchplate的每個孔上進(jìn)行化合物加入前的測試脈沖。方案 將細(xì)胞在-80 mV的膜保持電位下電壓鉗制15秒。隨后施加5Hz 刺激訓(xùn)練(27x150 ms去極化至+40 mV )。膜電位階躍至+40 mV, 引起外向(正)離子電流。
6. 將化合物加至Patchplate的各個孔中。讓化合物孵育5分鐘。
7. 應(yīng)用化合物加入后的測試脈沖方案。方案細(xì)胞在-80 mV的膜 保持電位下電壓鉗制15秒。隨后施加5Hz刺激訓(xùn)練(27x150 ms 去極化至+40mV)。
離線進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。采用藥物加入前和藥物加入后之間的成對比較 來確定每個化合物的抑制效果。將在第27次去極化至+40 mV (5Hz訓(xùn) 練中)期間的峰值對照電流的抑制百分?jǐn)?shù)作為拮抗劑濃度的函數(shù)繪圖。 通過Hill方程對濃度反應(yīng)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,確定抑制50%電流所需的藥物 濃度(IC5o):控制%=100>< (1+ ([藥物]/IC50) p)人
對每個細(xì)胞得到4個算術(shù)度量值
1) 封接阻抗
2) 基線度量值(第 一次去極化至+40 mV前,在-70 mV下5至45 ms 間的平均電流)
3) 電流升高度量值(化合物加入前第1次去極化至+40mV期間的 平均電流振幅減去化合物加入前笫27次去極化至+40 mV期間 的平均電流振幅)
4) 峰值電流(在5Hz訓(xùn)練期間第27次去極化至+40 mV期間的最 大電伊d展幅)。
獲得化合物加入前和加入后過程中的所有度量值。如果出現(xiàn)以下結(jié) 果,則不對該細(xì)胞作進(jìn)一步的分析
1) 封接阻抗〈50MQ
2) 化合物加入前期間的基線度量值〉士100pA
3) 電流升高度量值〉-0.2nA
4) 讀數(shù)前的峰值電流〈400pA。
在以上所述的高通量Kv 1.5平面膜片箝測試中,上面所列的化合物 提供抑制作用。
27原子吸收光譜方案本測試鑒定特異性阻滯在CHO細(xì)胞中異種表達(dá)的人類Kvl.5K+通 道的藥物,采用火焰原子吸收光譜法(FAAS)測量Rb+外向通量。所應(yīng) 用的測量離子通道活性的FAAS修改自Terstappen等所著的Anal. Biochem., 272: 149-155, 1999。按照上述方法培養(yǎng)表達(dá)人類Kvl.5的CHO細(xì)胞,然后用胰島素 -EDTA收獲,并用培養(yǎng)基洗滌。1. 將細(xì)胞以40,000細(xì)胞/孔接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(試驗板),并 讓細(xì)胞在37。C下生長48小時。2. 除去培養(yǎng)基,并在37。C、 5。/。C02下加入200 plRb上樣緩沖液(Load Buffer) ( Aurora Biomed, Vancouver, BC)3小時。3. 細(xì)胞用200 pi Hank,S平衡鹽溶液(HBSS )洗滌5次,隨后加 入lOOpl含試馬t化合物或0.5% DMSO的HBSS。4. 10分鐘后,加入100 pl含140 mMKCl的HEPES緩沖的鹽水, 并將板在室溫、輕微振蕩下孵育5分鐘。5. 隨后立即將150pl上清液轉(zhuǎn)移到新的96孔板中,并吸出剩余的 上清液。6. 向試驗板中加入120|il Cell Lysis Buffer (Aurora Biomed, Vancouver, BC),在分析前振蕩10分鐘。7. 用ICR-8000自動AAS設(shè)備(Aurora Biomed, Vancouver, BC ) 測量在上清液(SUP)和溶胞產(chǎn)物(LYS)樣品中的Rb含量。通量。/f100。/。x(SUP/(LYS+SUP))。抑制%=100°/(^( 1畫(A國B)/(C-B)), 其中A是在試驗化合物存在下的通量百分?jǐn)?shù),B是在10mM的(6-甲氧 基_2_甲基小氧代_4-苯基-1, 2-二氫異喹啉-3-基)-N, N-二曱基曱銨氯化 物存在下的通量百分?jǐn)?shù),C是在0.25。/。DMSO存在下的通量百分?jǐn)?shù)。在以上所述的AAS測試中,上面所列化合物在25 ^M或更低濃度 下提供的抑制作用^25%。本發(fā)明化合物可以通過使活性成分化合物與溫血動物身體的作用 位點(diǎn)接觸的任何方式給予,用于治療或預(yù)防本發(fā)明所述的痛苦、病癥和 疾病。例如,可以通過口服、局部,包括透皮、眼部、含化、鼻內(nèi)、吸 入、陰道內(nèi)、直腸、池內(nèi)和胃腸外給藥。這里所用的術(shù)語"胃腸外給藥" 是指包括皮下、靜脈內(nèi)、肌肉、關(guān)節(jié)內(nèi)注射或輸注、胸骨內(nèi)和腹膜內(nèi)給藥的方式。該化合物可以通過任何常規(guī)的聯(lián)合各種藥物使用的方式,或者作為獨(dú)立的治療藥物或者以與治療藥物組合的形式給藥。它們可以;故單獨(dú)給 藥,但是通常結(jié)合根據(jù)所選給藥途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實踐選擇的藥用載體一 起給藥。對于本文公開的目的來講,溫血動物是具有體內(nèi)平衡機(jī)制的動物界 成員,包括哺乳動物和鳥類。給藥劑量取決于接收者的年齡、健康狀況和體重,疾病程度,同時 進(jìn)行的療法類型,如果有的話,治療的頻率以及所需效果的性質(zhì)。通常, 活性成分化合物的日劑量為每天約1-500 mg。 一般來說,每天分一次或 多次給藥10-100mg可有效獲得所需療效。這些劑量是治療和預(yù)防上述 痛苦、病癥和疾病,例如心臟心律失常,如心房纖維性顫動、心房樸動、 房性心律失常和室上性心動過速、血栓栓塞事件例如中風(fēng)和充血性心力 衰竭、自體免疫紊亂如免疫調(diào)節(jié)異常和心功能不全,特別是作為心臟舒 張減弱的結(jié)果的有效量。免疫調(diào)節(jié)異常在大范圍的多種自體免疫和慢性炎癥疾病中存在,包 括全身的紅斑狼瘡、慢性風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、I型和II型糖尿病、炎性腸道 疾病、膽汁性肝硬化、眼色素層炎、多發(fā)性硬化和其它紊亂如克羅恩氏 病、潰瘍性結(jié)腸炎、大皰性類天皰瘡、肉狀瘤病、牛皮癬、魚鱗褲、格 雷夫斯氏眼病和哮喘。本發(fā)明的化合物對治療和預(yù)防自體免疫紊亂如免 疫調(diào)節(jié)異常是有作用的。物中的用途,所述治療是通過Kv1.5抑制作用而完成或促進(jìn),如心臟心 律不齊或血栓栓塞事件。本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物在生產(chǎn)用于預(yù)防 哺乳動物癥狀的藥物中的用途,所述預(yù)防是通過Kv1.5抑制作用而完成 或促進(jìn),如心臟心律不齊或血栓栓塞事件?;钚猿煞挚梢怨腆w劑型如膠嚢劑、片劑、錠劑、糖錠劑、粒劑和散 劑,或液體劑型如酏劑、糖漿劑、乳劑、分散劑和懸浮劑口服給藥。活 性成分還可以以無菌液體劑型如分散劑、懸浮劑或溶液劑胃腸外給藥。 也可以使用其他劑型給予活性成分,如用于局部給藥的軟膏劑、乳膏劑、 滴劑、透皮貼劑或散劑,用于眼部給藥的眼用溶液劑或懸浮劑,即眼滴 劑,用于吸入或鼻內(nèi)給藥的氣霧劑或粉末組合物,或者用于直腸或陰道內(nèi)給藥的乳膏劑、軟膏劑、氣霧劑或栓劑。明膠膠嚢含有活性成分和粉末載體,例如乳糖、淀粉、纖維素衍生 物、硬脂酸鎂、硬脂酸及類似物。類似的稀釋劑可用于制備壓制片劑。 片劑和膠嚢劑都可制成持續(xù)釋放產(chǎn)品,以便在數(shù)小時內(nèi)連續(xù)釋放藥物。 壓制片劑可以是糖包衣或薄膜包衣的,以掩蓋任何不愉快的口味并避免 片劑接觸空氣,或者是腸包衣的,以便在胃腸道中選擇性崩解??诜后w劑型可包含著色劑和矯味劑,以提高患者的接受程度。 通常,水、合適的油、鹽水、右旋糖(葡萄糖)水溶液以及相關(guān)的 糖溶液和二元醇類如丙二醇或聚乙二醇是用于胃腸外溶液劑的合適載 體。胃腸外給藥的溶液劑優(yōu)選包含活性成分的水溶性鹽、合適的穩(wěn)定劑、 以及緩沖物質(zhì),如果必要的話。單獨(dú)的抗氧化劑如亞硫酸氫鈉、亞硫酸 鈉或抗壞血酸或者它們的組合是合適的穩(wěn)定劑。還可使用檸檬酸及其鹽和EDTA鈉。此外,胃腸外溶液可含有防腐劑,例如苯扎氯銨、甲對苯 或丙對苯和氯丁醇。本4頁^或的才示準(zhǔn)參考文獻(xiàn)A. Osol的Remington's Pharmaceutical Sciences中介紹了合適的藥學(xué)載體。對于吸入給藥,本發(fā)明化合物可方便地以氣霧劑形式由加壓容器或 噴霧器給予。本發(fā)明化合物還可作為配制的粉劑給予,粉末組合物可借 助于粉末吸入裝置吸入。優(yōu)選的吸入給藥系統(tǒng)是定量吸入(MDI)氣霧 劑,它可配制為式I化合物在合適的推進(jìn)劑(例如氟烴或烴)中的懸浮 劑或溶液劑。對于眼部給藥,眼用制劑可以用式I化合物在合適的眼用溶媒中的 適當(dāng)重量百分比的溶液或懸浮液配制,使得化合物與眼球表面的接觸保 持足夠長的時間,從而允許化合物滲入眼角膜和眼的內(nèi)部區(qū)域??捎糜诮o予本發(fā)明化合物的藥物劑型包括但不限于硬質(zhì)和軟質(zhì)明 膠膠嚢劑、片劑、胃腸外注射劑和口服懸浮劑。通過將100mg粉末活性成分、150mg乳糖、50mg纖維素和6mg 硬脂酸鎂填充到標(biāo)準(zhǔn)兩段式硬質(zhì)明膠膠嚢的每段中來制備大量單位膠 嚢劑。制備活性成分在可消化油例如大豆油、棉籽油或橄欖油中的混合 物,并通過容積式泵注射到明膠中,形成含100mg活性成分的軟質(zhì)明膠 膠嚢劑。將膠嚢劑洗滌并干燥。大量片劑通過常規(guī)方法制備,使得劑量單位為100 mg活性成分、 0.2mg膠體二氧化硅、5mg硬脂酸鎂、275 mg微晶纖維素、llmg淀粉 和98.8mg乳糖??梢?吏用合適的包衣,以改善適口性或延遲吸收。將1.5重量%的活性成分在10體積%丙二醇中攪拌,從而制備適合 注射給藥的胃腸外組合物。用水使溶液達(dá)到注射體積并滅菌。制備用于口服的水性懸浮劑,使得每5ml懸浮劑中含有100 mg微 細(xì)活性成分、100mg羧曱基纖維素鈉、5mg苯甲酸鈉、l.Og山梨糖醇 溶液U.S.P.和0.025 ml香草醛。通常,在分步給予或者聯(lián)合另一種治療藥物給予本發(fā)明化合物時, 可以使用相同的劑型。當(dāng)各種藥物以物理組合形式給予時,劑型和給藥 途徑應(yīng)當(dāng)根據(jù)組合藥物的相容性進(jìn)行選擇。因此,術(shù)語聯(lián)合給藥應(yīng)當(dāng)理 解為包括同時或順序給予兩種藥物,或者以兩種活性成分的固定劑量組 合物給予。本發(fā)明化合物可作為唯一的活性成分給予或者聯(lián)合第二種活性成 分給予,所述第二種活性成分包括其他具有Kv1.5阻滯活性的抗心律失 常藥物,例如奎尼丁、普羅帕酮、氨巴利特、胺碘酮、氟卡尼、索他洛 爾、溴芐銨、多非利特、阿莫蘭特、芐普地爾、氯非銨,具有Kvl.5阻 滯活性的其他化合物,例如克霉唑、酮康哇、布比卡因、紅霉素、維拉 帕米、硝苯地平、扎替雷定、雙p引咮基馬來酰亞胺或其它心血管藥物, 例如,但不限于ACE抑制劑如貝那普利、卡托普利、依那普利、福辛 普利、賴諾普利、莫昔普利、培哚普利特丁胺、喹那普利、雷米普利和 群多普利、血管緊張素II拮抗劑如坎地沙坦、依普羅沙坦、厄貝沙坦、 氯沙坦、奧美沙坦、替米沙坦和纈沙坦、強(qiáng)心苷如地高辛、L型鈣通道 阻滯劑、T型鉀通道阻滯劑、選擇性和非選擇性卩阻滯劑、免疫抑制化 合物、內(nèi)皮素拮抗劑、凝血酶抑制劑、阿司匹林、除阿司匹林以外的非 選擇性NSAID例如萘普生、華法林、Xa因子抑制劑、低分子量肝素、 未分餾肝素、氯吡格雷、噻氯匹定、1Ib/nia受體拮抗劑例如替羅非班、 5HT受體拮抗劑、整合素受體拮抗劑、血栓烷受體拮抗劑、TAFI抑制 劑和P2T受體拮抗劑。本發(fā)明化合物還可作為唯一的活性成分給予或與 起搏器或去纖顫器結(jié)合使用。
權(quán)利要求
1、一種如式I所示的化合物,id="icf0001" file="S2006800388932C00011.gif" wi="74" he="54" top= "54" left = "71" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="no"/>或藥學(xué)可接受鹽,或它的光學(xué)異構(gòu)體,其中R1、R2和R3獨(dú)立地選自1)氫,2)鹵素,3)NO2,4)CN,5)CR4=C(R4)2,6)C≡CR4,7)(CR52)nOR4,8)(CR52)nN(R4)2,9)(CR52)nC(O)R4,10)(CR52)nC(O)OR4,11)(CR852)nR4,12)(CR52)nS(O)mR4,13)(CR52)nS(O)mN(R4)2,14)OS(O)mR4,15)N(R4)C(O)R4,16)N(R4)S(O)mR4,17)(CR52)nN(R6)R4,18)(CR52)nN(R4)(CR52)nC(O)N(R4)2,19)(CR52)nN(R4)(CR52)nC(O)OR420)N(R4)(CR52)nR4,21)N(R4)(CR52)nN(R4)2,22)(CR52)nC(O)N(R4)2,23)(CR52)nC(O)NH(CR52)nR4,24)(CR52)nC(O)NHC(R4)2(CR52)nN(R4)2,25)C(O)NH(CR52)(CR53),26)S(O)mR5,和27)N(R4)(R5);R4,在其出現(xiàn)的每一情況中,獨(dú)立地選自1)氫,2)未被取代的或取代的C1-C6烷基,3)未被取代的或取代的C3-C10環(huán)烷基,4)未被取代的或取代的芳基,5)未被取代的或取代的雜環(huán)基,6)CF3,7)未被取代的或取代的C2-C6鏈烯基,和8)未被取代的或取代的C2-C6炔基,或在R4被連接至被R4雙取代的氮原子的情況下,每個R4獨(dú)立地選自C1-C6烷基,且氮原子與每個R4一起形成環(huán);R5,在其出現(xiàn)的每一情況中,獨(dú)立地選自1)氫,2)C1-C6烷基,3)鹵素,4)芳基,5)雜環(huán)基,6)C3-C10環(huán)烷基,7)OR4,和8)CH2OR4,所述烷基、芳基、雜環(huán)基和環(huán)烷基是未被取代的或被至少一個選自R6的取代基所取代;R6,在其出現(xiàn)的每一情況中,獨(dú)立地選自1)氫,2)未被取代的或取代的C1-C6烷基,3)鹵素,4)OR5,5)CF3,6)未被取代的或取代的芳基,7)未被取代的或取代的C3-C10環(huán)烷基,8)未被取代的或取代的雜環(huán)基,9)S(O)mN(R4)2,10)C(O)OR4,11)C(O)R4,12)CN,13)C(O)N(R4)2,14)N(R4)C(O)R4,15)N(R4)C(O)OR4,16)N(R4)C(O)N(R4)2,17)OC(O)N(R4)2,18)S(O)mR4,19)OS(O)mR4,20)NO2,21)N(R4)2;22)SC(O)R4,23)N(R4)S(O)mR4,和24)S(O)mR5;其中R4獨(dú)立地選自上面所定義的組;m獨(dú)立地選自0,1和2;和n獨(dú)立地選自0,1,2,3,4,5和6。
2、 如權(quán)利要求1所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,或其光學(xué)異 構(gòu)體,其中W選自氫和卣素。
3、 如權(quán)利要求2所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,或其光學(xué)異 構(gòu)體,其中W選自氫和F。
4、 如權(quán)利要求1所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,或其光學(xué)異 構(gòu)體,其中F^選自氫、鹵素和CF3。
5、 如權(quán)利要求4所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,或其光學(xué)異構(gòu)體,其中R2選自氫、C1和CF3。
6、 如權(quán)利要求1所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,或其光學(xué)異 構(gòu)體,其中W選自氪和卣素。
7、 如權(quán)利要求6所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,或其光學(xué)異 構(gòu)體,其中R3選自氬和C1。
8、 如權(quán)利要求1所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,選自 l-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇, 2,2-二吡啶-3-基-1-{2-[3-(三氟曱基)苯基]吡啶-3-基}乙醇,1-[2-(2-氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇, l-[2-(3,5-二氯苯基)p比啶-3-基]-2-(2-氟代吡啶-3-基)-2-吡啶-3-基乙醇, l-[2-(2,5-二氯苯基)p比啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇,和 l-[2-(2,3-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇。
9、 如權(quán)利要求8所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,其為 l-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇。
10、 如權(quán)利要求9所述的化合物,或其藥學(xué)可接受鹽,其為 (R)-l-[2-(3,5-二氯苯基)吡啶-3-基]-2,2-二吡啶-3-基乙醇。
11、 權(quán)利要求l的化合物的用途,用于生產(chǎn)用來治療哺乳動物癥狀 的藥物,所述治療是通過Kvl .5抑制作用而完成或促進(jìn)。
12、 權(quán)利要求1的化合物的用途,用于生產(chǎn)用來治療心臟心律不齊 或血栓栓塞事件的藥物。
13、 權(quán)利要求1的化合物的用途,用于生產(chǎn)用來預(yù)防哺乳動物癥狀 的藥物,所述治療是通過Kvl.5抑制作用而完成或促進(jìn)。
14、 權(quán)利要求1的化合物的用途,用于生產(chǎn)用來預(yù)防心臟心律不齊 或血栓栓塞事件的藥物。
15、 一種藥物制劑,其含有藥學(xué)可接受載體和權(quán)利要求1的化合 物或者其藥學(xué)可接受晶體形式或水合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有用作鉀離子通道抑制劑結(jié)構(gòu)的化合物,這類化合物用于治療心臟心律不齊等等。
文檔編號C07D213/30GK101291910SQ200680038893
公開日2008年10月22日 申請日期2006年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月21日
發(fā)明者M·B·諾爾特, M·T·比羅多, S·沃爾肯伯格 申請人:默克公司