專利名稱：新的乳香酸鹽和選擇性富集的乳香酸以及它們的制備方法
新的乳香酸鹽和選擇性富集的乳香酸以及它們的制備方法 復(fù)合物，所述有機(jī)堿特別地但不唯一地為葡糖胺。本發(fā)明還包括從含有
乳香酸混合物的提取物中分別選擇性地富集3-0-乙?；?ll-酮基-p-乳香 酸和ll-酮基-P-乳香酸以下簡(jiǎn)稱為(AKBA)和(KBA)的改進(jìn)的方法。
背景技術(shù)：
炎癥是一種由刺激，損傷或感染所引發(fā)的急性保護(hù)性生物學(xué)過(guò)程， 其特征是發(fā)紅和發(fā)熱，腫脹，功能喪失和疼痛。除了上述的誘發(fā)條件以 外，炎癥也可以由于與年齡相關(guān)的因素而發(fā)生。在過(guò)去的幾十年間由于 對(duì)侵染性疾病的有效控制和更好的營(yíng)養(yǎng)食物的獲得， 一般人群的預(yù)期壽 命已經(jīng)顯著地增加。這種壽命的正相增加與環(huán)境條件的變化一起提高了 與年齡相關(guān)的慢性疾病例如關(guān)節(jié)炎、糖尿病、癌癥、心血管疾病等的發(fā) 病率。慢性炎癥狀況和癌癥已經(jīng)逐漸變成世界上許多國(guó)家和所有文明中 的人們關(guān)注的健康焦點(diǎn)。關(guān)節(jié)炎是現(xiàn)代最能使人衰弱的疾病之一。這兩 種疾病的患者和他們的家庭的生活質(zhì)量受到了嚴(yán)重的影響。非甾體抗炎 藥是最常使用的風(fēng)濕性疾病藥物。目前，由于經(jīng)過(guò)各種文明人群數(shù)十年 的使用而確定的天然非甾體抗炎藥的安全性和有效性，使得對(duì)天然非甾 體抗炎藥(NSAID)存在著巨大的需要。
已經(jīng)炎癥和致癌過(guò)程是由花生四烯酸代謝活性增加所引發(fā)的。在此 過(guò)程中，花生四烯酸分化為以兩個(gè)主要途徑代謝，環(huán)加氧酶(COX)和 脂氧合酶(LOX)途徑。COX途徑導(dǎo)致前列腺素和凝血惡烷的產(chǎn)生，而 LOX途徑產(chǎn)生白三烯(LTS)和羥二十碳四烯酸(HETE)。這些種類的 炎癥分子發(fā)揮著意義深遠(yuǎn)的生物學(xué)作用，其增加了人類癌癥的發(fā)展和程 度。
白三烯和5 (S) -HETE是炎癥、過(guò)敏和障礙過(guò)程的重要介質(zhì)。白 三烯增加了微血管的滲透性并且是有效的趨化性試劑。5-脂氧合酶的抑 制作用間接地減少了 TNF-a (—種在炎癥中扮演重要角色的細(xì)胞因子) 的表達(dá)。因此，5-脂氧合酶是識(shí)別抑制劑的目標(biāo)酶，其具有用來(lái)治療各 種炎癥和高敏類人群疾病，包括哮喘、關(guān)節(jié)炎、腸疾病例如潰瘍性結(jié)腸
炎，和循環(huán)障礙例如休克和局部缺血的潛力。
同樣地，前列腺素是細(xì)胞間的信使，其被以高濃度在慢性炎癥位置 產(chǎn)生并且能夠?qū)е卵苁鎻?，增加血管滲透性以及使疼痛受體敏感化。
前炎癥性前列腺素(PGE2)是由環(huán)加氧酶-2 (COX-2)的可誘導(dǎo)異構(gòu)形 式產(chǎn)生的。對(duì)胃腸和腎功能很重要的前列腺素是由構(gòu)造性表達(dá)的異構(gòu)形 式，環(huán)加氧酶-1 (COX-l)產(chǎn)生的。COX-l是保護(hù)性的保姆異構(gòu)形式， 其調(diào)節(jié)了粘液的粘膜細(xì)胞產(chǎn)生從而在存在于胃分泌物中的酸和胃蛋白 酶之間提供了障礙。因此，非選擇性的COX抑制劑會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的副作 用。所以全世界的科學(xué)家投入主要精力去開(kāi)發(fā)抑制5-脂氧合酶和環(huán)加氧 酶-2酶的非甾體抗炎藥。由于COX-2和5-LOX二者通常在任何種類的 炎癥狀況中都會(huì)得到表達(dá)，所以現(xiàn)在研究的焦點(diǎn)已經(jīng)集中到獲得所謂的 雙效抗炎藥上來(lái)了，即能夠抑制COX-2和5-LOX酶二者的抗炎藥。不 幸的是，發(fā)現(xiàn)一種能夠真正減輕炎性疾病癥狀的新雙效天然NSAID的 幾率非常低。因此，研究人員想到使用混合藥物， 一種具有COX-2抑 制活性而另 一種具有5-LOX抑制活性，的想法作為第二選擇。
風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是 一 種影響關(guān)節(jié)潤(rùn)滑機(jī)制和緩沖的慢性炎癥性狀 況。作為這種自身免疫性疾病的結(jié)果，骨的表面被破壞，這導(dǎo)致僵硬、 腫脹、疲勞和彎曲疼痛。骨關(guān)節(jié)炎是關(guān)節(jié)炎的普通形式，其主要是由于 軟骨glycoammoglycons的逐漸退化所產(chǎn)生的。這種損傷經(jīng)常伴有修復(fù)和 修理關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)能力的降低，所述關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)包括軟骨。軟骨的平滑表面變 硬并且變粗糙產(chǎn)生摩擦。結(jié)果導(dǎo)致關(guān)節(jié)變形、疼痛和僵硬。研究表明超 過(guò)四千萬(wàn)的美國(guó)人患有骨關(guān)節(jié)炎，包括80%的年齡超過(guò)50歲的人。骨 關(guān)節(jié)炎治療的主要焦點(diǎn)因此應(yīng)當(dāng)包括下述藥劑，所述藥劑不僅能刺激軟 骨細(xì)胞和適當(dāng)關(guān)節(jié)功能再生所需生物學(xué)物質(zhì)的產(chǎn)生還能減少炎癥疼 痛。
因此，本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種顯示抗關(guān)節(jié)炎特性但沒(méi)有有害 副作用的鹽或離子對(duì)復(fù)合物作為營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑。 乳香酸
被稱為印度乳香的乳香樹(shù)類樹(shù)膠脂已經(jīng)在傳統(tǒng)的印度草醫(yī)藥中被 用作抗炎劑。古代印度草醫(yī)藥文獻(xiàn)描述了其治療用途。由印度CSIR實(shí) 驗(yàn)室進(jìn)行的臨床跟蹤試驗(yàn)已經(jīng)清楚地顯示在88%的患者中到達(dá)優(yōu)良水 平,而;殳有不良畐'H乍用(Singh, G.B., Status report, anti-inflammatory drugsfrom plant sources, 1982 )。在患有膝蓋骨關(guān)節(jié)炎的患者上進(jìn)行的隨機(jī)、 雙盲、安慰劑對(duì)照的臨床試驗(yàn)顯示了統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的疼痛改善、消腫和膝 蓋彎曲增加等(Kimmatkar, Phytomedicine, 2003, 10, 3-7)。 Boswellia serrata提取物對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎患者所顯示的治療效果可以與柳氮磺吡啶 和美沙拉秦的效果相比(Gupta， I.，等人的，Eur. J. Med, Res.， 1998， 3， 511-14和Gerhardt, H.，等人的，Gastroenterol.， 2001， 39, 11-17)。 抗炎作用的來(lái)源已經(jīng)被歸因于乳香酸(Safayhi， H.,等若，Planta Medica, 1997, 63， 487-493和J. Pharmacol. Exp. Ther.， 1992, 261, 1143-46， 以上兩種期刊均由美國(guó)出版)， 一組從乳香樹(shù)脂中分離出的三萜烯酸 (Pardhy， R. S.等人，Indian J. Chem.， 1978, 16B, 176-178)。這些化 合物通過(guò)抑制5-脂氧合酶(5-LOX)而發(fā)揮抗炎活性。最近乳香酸還由 于它們的抗增殖作用而變得更加重要。乳香酸能夠在體外抑制幾種白血 病細(xì)胞抹，并且能夠抑制黑素瘤的生長(zhǎng)和引起細(xì)胞凋亡(Hostanska， K. 等人，Anticancer Res.， 2002, 22 ( 5 )， 2853-62 )。發(fā)現(xiàn)乙酰乳香酸是唯 ——類人類拓樸異構(gòu)酶I和II的雙效抑制劑(Syrovets， T.等人，Mol. Pharmacol, 2000， 58( 1 )，71-81 )。Sharma等人在美國(guó)出版的Phytotheraphy Research, 1996， 10, 107-112中已經(jīng)報(bào)告了乳香酸的免疫調(diào)節(jié)活性。對(duì) 乳香酸結(jié)構(gòu)要求的詳細(xì)研究表明所有的六元酸，3-0-乙?；?11-酮基-卩-乳香酸，以下稱為AKBA,顯示最顯著的5-LOX抑制活性(Sailer, E. R. 等人，British J. Pharmacology, 1996, 117, 615-618)。 AKBA是通過(guò)獨(dú) 特機(jī)制而起作用的，其中它與5-LOX以4丐-依賴并且可逆的方式結(jié)合并 且起到非氧化還原型、非竟?fàn)幮砸种苿┑淖饔?Sailer， E. R.等人,Eur. J. Biochem., 1998， 256, 364-368 )。據(jù)報(bào)道，AKBA或包含它的植物提 取物或組合物可以作為軟化皺紋和/或放松皮膚的試劑而有效地進(jìn)行局 部施用(Alain, M.等人，美國(guó)專利申請(qǐng)，20040166178，日期2004年8 月26日)。因此AKBA由于其對(duì)治療慢性炎癥障礙的潛在效果已經(jīng)成為
了集中研究的目標(biāo)。 葡糖胺
葡糖胺是一種在關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)中被大量發(fā)現(xiàn)的天然物質(zhì)。關(guān)節(jié)中葡糖胺 的主要功能是產(chǎn)生維持和修理關(guān)節(jié)組織所需的軟骨組分。葡糖胺刺激了 關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)組分例如膠原和纖維性物質(zhì)蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，所述纖維性物質(zhì)蛋 白質(zhì)將關(guān)節(jié)保持在一起并有助于軟骨基質(zhì)的形成。膠原是被稱作關(guān)節(jié)軟骨的減震墊的主要成分。它也是產(chǎn)生滑液所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。隨著年齡 的增長(zhǎng)一些人可能會(huì)喪失產(chǎn)生葡糖胺的能力，因此抑制了骨關(guān)節(jié)患者在
磨損和撕裂過(guò)程中所石皮壞的軟骨的生長(zhǎng)(Towheed， T， E.， Arthritis and Rheumatism, 2003， 49, 601-604)。當(dāng)口服葡糖胺硫酸鹽形式的營(yíng)養(yǎng)增 補(bǔ)劑時(shí)，其顯示對(duì)關(guān)節(jié)破壞具有保護(hù)作用并且選擇性地被關(guān)節(jié)組織利用 以促進(jìn)關(guān)節(jié)功能的健康，同時(shí)顯示出了對(duì)骨關(guān)節(jié)炎的潛在的治療效果 (Perry, G. H.等人，Ann. Rheum. Dis., 1972， 31， 440-448)。
幾個(gè)用葡糖胺硫酸鹽進(jìn)行的雙盲研究顯示在減輕骨關(guān)節(jié)炎癥狀方 面其與非甾體抗炎藥的治療效果相當(dāng)，甚至顯示出超過(guò)后者的治療效果
(Vaz， A. L., Curr. Med, Res， Opin.， 1982, 8, 145-149; D'Ambrosia， E. D.等人，Pharmatherapeutica, 1982, 2, 504-508和Tapadinhas, M.J. 等人，Pharmatherapeutica, 1982, 3， 157-168 )。 NSAIDs僅提供了對(duì)癥 狀的緩解，而葡糖胺能解決骨關(guān)節(jié)炎疾病的根本原因。它通過(guò)向多個(gè)關(guān) 節(jié)組件例如glucosaminoglycons提供構(gòu)建模塊以修復(fù)由骨關(guān)節(jié)炎所引起 的損傷，從而向身體提供自己處理所述疾病的天然能力。該研究中使用 了葡糖胺鹽酸鹽。
發(fā)明公開(kāi)
Boswellia serrata樹(shù)膠脂的有機(jī)溶劑提取物含有總共六種乳香酸和 兩種甘遂酸(tirucallic acid )。這些酸示于

圖1中，分別由Bl、 B2、 B3、 B4、 B5、 B6、 Tl、 T2和T3代表。研究已經(jīng)表明AKBA在所有乳香酸 中是最有效的抗炎劑。提取物中AKBA的濃度，所述AKBA如圖1中 B2所示，僅為在1-10%范圍內(nèi)的量，但是最常見(jiàn)的，其在2-3%的范圍 內(nèi)。 一般的乳香酸以及特別是AKBA的潛在的有效性能夠成為對(duì)這些化 合物在所有可能的方面進(jìn)行進(jìn)一步開(kāi)發(fā)的巨大動(dòng)機(jī)。
<formula>formula see original document page 10</formula> 11-酮基-(3-乳香酸(Bl )
<formula>formula see original document page 10</formula> 3陽(yáng)0-乙?；?ll-酮基-P-乳香酸(AKBA, B2)
<formula>formula see original document page 11</formula>
本發(fā)明的目的在于使用一種新的改善的方法從天然乳香樹(shù)提取物
中對(duì)活性物質(zhì)，KBA和AKBA進(jìn)行選擇性富集以達(dá)到治療有效范圍例 如30%到100%,然后將富集的化合物轉(zhuǎn)變?yōu)辂}或離子對(duì)復(fù)合物，所述 鹽或離子對(duì)復(fù)合物的溶解性增大了并且用作抗炎營(yíng)養(yǎng)增補(bǔ)劑的治療效 果也得到了改善的。可以通過(guò)利用乳香酸的酸官能團(tuán)和氨基有機(jī)化合 物，尤其是葡糖胺的胺官能團(tuán)獲得鹽或離子對(duì)組合物。
從天然乳香樹(shù)提取物中富集AKBA已經(jīng)描述于國(guó)際專利申請(qǐng)(PCT # WO 03/07463,日期2003年9月12日)以及美國(guó)專利(申請(qǐng)# 20030199581， />開(kāi)日2003年10月23日和申請(qǐng)# 20040073060, />開(kāi)日 2004年4月15日)中。這些專利中所描述的方法包括多步工序并且需 要冗長(zhǎng)的檢驗(yàn)和色譜純化。本發(fā)明是一種改進(jìn)的方法，其中乙?；襟E 和烯丙基氧化步驟在一鍋內(nèi)進(jìn)行。該方法不需要如專利和期刊文獻(xiàn)中所 報(bào)道的方法那樣需要在乙?；筮M(jìn)行高強(qiáng)度勞動(dòng)檢驗(yàn)，也不需要在實(shí)施 氧化步驟之前進(jìn)行費(fèi)時(shí)的產(chǎn)物干燥。本方法還有效地利用乙?；襟E中 未反應(yīng)的吡咬和乙酸酐形成了高活性的氧化體系，例如CrCV吡i定和 Cr(V乙酸酐。本發(fā)明有效地減少了乙?；脱趸襟E的總反應(yīng)時(shí)間。新 的方法通過(guò)不需要色譜的酸/堿處理除去了 KBA/AKBA富集(30-40%) 產(chǎn)品中可能存在的鉻雜質(zhì)。
富集到30-40%的ll-酮基-P-乳香酸(KBA)的級(jí)份可通過(guò)將天然混 合物進(jìn)行石成處理，接著過(guò)濾并酸化母液，然后通過(guò)過(guò)濾分離白色固體并 干燥而獲得。接著將其進(jìn)行再乙?；@得30-40MAKBA富集級(jí)份。富 集到更高百分比(40-100% )的KBA和AKBA級(jí)份可以通過(guò)對(duì)水解混合 物和再乙?；旌衔锓謩e進(jìn)行色譜分離而獲得。
含有5-100% AKBA的乳香酸離子鹽或離子對(duì)復(fù)合物可以通過(guò)使 用適當(dāng)增加的乳香化合物和適當(dāng)?shù)陌坊衔锊⒉捎脤?shí)施例中所給出的 代表性工序而獲得。
本發(fā)明涉及具有如下通式的乳香酸和酮乳香酸以及乙酰基酮乳香 酸與葡糖胺的新的鹽或離子對(duì)復(fù)合物。其中R!和R2是H或一起形成酮基； R3是H或?；?br> X是由NHR4R5R6代表的雜環(huán)堿或有機(jī)堿
其中R4、 R5和R6是H或者取代或未取代的低級(jí)或高級(jí)烷基或芳基 或環(huán)烷基。
其中，有機(jī)堿是葡糖胺(2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖)、煙酰胺(3-吡 啶曱酰胺)、吡多醇(5-羥基-6-甲基-3,4-吡啶二曱醇)，咖啡因(3,7-二 氫-l,3,7-三曱基-lH-。票呤-2,6-二酮)，肌氨酸(N-(氨基亞氨基曱基)-N-曱基甘氨酸)、尿嚢素(2,5-二氧代-4-咪唑烷基)脲)、可可堿(3,7-二氫-3,7-二甲基-lH-嘌呤-2,6-二酮)、茶堿(3,7-二氫-l,3-二曱基-lH-嘌 呤-2,6-二酮)、美沙拉秦(5-氨基-2-羥基苯曱酸)、恩芬那酸(2-[(2-苯 乙基)氨基]苯甲酸)、恩芬那酯(2-[[3-(三氟甲基)苯基]氨基]苯曱酸 2-(羥基乙氧基乙基)酯)、氟芬那酸(2-[[3-(三氟曱基)苯基]氨基] 苯曱酸、曱氯滅酸(2-[ (2,6-二氯-3-曱基苯基)氨基]苯曱酸)、曱滅酸 (2-[ (2,3-二曱基苯基)-氨基]苯甲酸)，尼氟酸(2-[[3-(三氟甲基)苯 基]-氨基]-3-吡啶曱酸)、他尼氟酯(2-[[3畫(huà)(三氟甲基)苯基]氨基]-3-吡 啶曱酸1,3-二氫-3-氧代-1-異苯并呋喃基酯)、特羅芬那酯(2-[ ( 2,6-二氯 -3-曱基苯基)-氨基]苯曱酸乙氧基曱基酯)、托滅酸(2-[ (3-氯-2-曱基 苯基)-氨基]苯曱酸)、S-腺苷曱硫氨酸((3S ) -5'-[ ( 3-氨基-3-羰基丙基) 甲基锍基]-5'-脫氧腺苷內(nèi)鹽)、3-氨基-4-羥丁酸、阿米曲林(1-[2- (3-曱基丁氧基)-2-苯乙基]吡咯烷)、芐達(dá)明(N,N-二甲基-3-[["(苯基曱 基)-lH-吲唑-3-基]氧基]-l-丙胺)、聯(lián)苯千唑(^2-吡啶基-[1,1，-聯(lián)苯]-4-乙酰胺)、雙苯唑醇(2,2，-[ ( 4,5-二苯基-2-夢(mèng)惡唑基)亞氨基]-二乙醇)、 依莫法宗(4-乙氧基-2-甲基-5- (4-嗎啉基)-3 (2H)-噠嗪酮)、非普拉 宗((±) -oc-[[ (2-羥基-l,l-二甲基乙基)-氨基]曱基]苯曱醇)、瑞尼托林 (4- (9H-藥-9-亞基曱基)苯曱亞胺酰胺)、哌立酮(a- (5-苯基-3-異嗜 唑基)-l-哌啶乙醇)。
我們公開(kāi)了 一種簡(jiǎn)單的方法，通過(guò)該方法可以制備乳香酸與雜原子 堿(也成為"有機(jī)堿")的鹽或離子對(duì)復(fù)合物，以用于將它們包含在膳 食或藥物組合物中從而提供減少炎癥以及其它健康益處。這些鹽或離子 對(duì)復(fù)合物是通過(guò)有機(jī)酸(RCOOH)與有機(jī)堿(NR4R5R6)之間的簡(jiǎn)單酸 石威反應(yīng)而制得的，如反應(yīng)式l所示。
RCOOH + NR4R5R6 — RCOO— 11114115116 --------反應(yīng)式1
(a) 通過(guò)使乳香酸或酮乳香酸或乙?；橄闼崤c有機(jī)石威反應(yīng)。
(b) 通過(guò)原位生成有機(jī)游離堿并使其與乳香酸或酮乳香酸或乙酰 基酮乳香酸反應(yīng)。
在第一種方法中，將化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的反應(yīng)物混合以獲得所期望的鹽 或離子對(duì)復(fù)合物。優(yōu)選地，反應(yīng)通過(guò)向乳香酸的含水曱醇溶液中緩慢加 入有機(jī)游離堿，特別是葡糖胺游離堿而引發(fā)。乳香酸(48%通過(guò)HPLC 測(cè)定)可以通過(guò)已知的提取方法從乳香樹(shù)種(Boswellia serrata)樹(shù)膠脂 中獲得。葡糖胺游離堿可以通過(guò)離子交換樹(shù)脂處理由葡糖胺鹽酸鹽中釋 放。富集的11-酮乳香酸或3-0-乙?；?ll-酮乳香酸(30%-100%)是通 過(guò)使用本文所描述的改進(jìn)方法從乳香樹(shù)種(Boswelha serrata)樹(shù)膠脂中 獲得的。
通過(guò)該方法制備的鹽或離子對(duì)復(fù)合物可以含有10 - 70%的乳香 酸，5-40%的葡糖胺。
根據(jù)制備本發(fā)明化合物的第二種方法，使化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的乳香酸、 氫氧化鉀和有機(jī)堿的鹽，特別是葡糖胺鹽酸鹽在含水曱醇介質(zhì)中反應(yīng)。
本發(fā)明的進(jìn)一步的方面是一種藥物制劑，其包含在藥物可接受載體 (例如，水或非水載體)中的上述化合物。
本發(fā)明的更進(jìn)一步的方面是炎癥性疾病的治療方法，其包括向有此 需要的人或動(dòng)物對(duì)象給藥以治療有效量(例如，對(duì)治療、減慢其發(fā)展等 有效的量)的上述化合物。
實(shí)施例1到6中給出了與從天然乳香樹(shù)提取物中富集AKBA和制備
其鹽或離子對(duì)復(fù)合物相關(guān)的優(yōu)選實(shí)施方案。
雖然以下實(shí)施例描述了本發(fā)明的具體實(shí)施方案，但對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人 員來(lái)說(shuō)顯而易見(jiàn)的等價(jià)物和改進(jìn)包括在所附權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。
實(shí)施例1:
1 l-酮基-P-乳香酸和3-0-乙?；?1 l-酮基-(3-乳香酸的分離 la).乳香樹(shù)提取物向AKBA富集組分的一鍋轉(zhuǎn)化 在室溫下，向乳香樹(shù)種(Boswellia serrata)提取物(85%， 10 kg) 的吡啶(5.4 L)溶液中加入乙酸酐(4.2 L),其中所述提取物的吡啶溶 液是裝在100L裝有水冷回流冷凝器的全玻璃反應(yīng)器中的，在60-65。C在 攪拌下加熱反應(yīng)物。3小時(shí)之后，將混合物冷卻到環(huán)境溫度，用乙酸(24 L)和乙酸酐(24 L)稀釋。冷卻所含物質(zhì)，并在保持溫度低于4(TC的 情況下用三氧化鉻(6.4 kg)緩慢處理。加入之后再進(jìn)行持續(xù)攪拌2 h, 然后將混合物傾入冰水中并將所含物質(zhì)徹底混合。過(guò)濾出固體，用水洗 滌并在真空烘箱中干燥從而獲得殘余物(14 kg)。粗產(chǎn)品的HPLC分析 顯示乳香酸B1、 B4和B6完全轉(zhuǎn)化為B2 ( AKBA)。
lb) . 30-40%的3-0-乙?；?ll-酮基-3-乳香酸的分離將上述粗反 應(yīng)混合物(5 kg )加入到4N的鹽酸(45 L )中并在60°C下加熱4 h。將 反應(yīng)混合物冷卻到環(huán)境溫度并過(guò)濾。沉淀物用4N的鹽酸洗滌，接著用 水洗滌并在真空烘箱中千燥從而獲得富集到30-40% (2.8 kg )的AKBA。 lc) . 3-0-乙?；?ll-酮基-(3-乳香酸的分離將上述富集的化合物 (500 g)用使用5%到30%乙酸乙酯/己烷混合物的二氧化硅柱色譜進(jìn)行 分離。通過(guò)TLC監(jiān)測(cè)級(jí)份，將含有AKBA ( 30%-60% )的那些級(jí)份混合 并在己烷和乙酸乙酯混合物中進(jìn)行重結(jié)晶從而獲得濃度達(dá)到85%AKBA 的級(jí)份。在相同的溶劑體系中重復(fù)重結(jié)晶產(chǎn)生達(dá)到100%富集的AKBA。 ld) . 11-酮基-|3-乳香酸的分離或者,將粗混合物溶于甲醇中并進(jìn) 行堿處理(8N的KOH)。通過(guò)過(guò)濾分離出沉淀物并將其丟棄。使母液酸 化，過(guò)濾白色沉淀物，水洗，減壓干燥，從而獲得30-40%的酮乳香酸 (KBA)。將所獲得的11-酮基-(3-乳香酸混合物(200 g)吸附在250 g的 硅膠上并在500 g二氧化硅上進(jìn)行柱色譜分離。所述柱用己烷、10%乙 酸乙酯/己烷、20%乙酸乙酯/己烷和30%乙酸乙酯/己烷混合物進(jìn)行洗 脫。通過(guò)TLC監(jiān)測(cè)級(jí)份，將含有11-酮基-|3-乳香酸的級(jí)份混合并蒸發(fā)，
將殘余物在乙酸乙酯/己烷混合物中進(jìn)行重結(jié)晶從而獲得純ll-酮基-卩-乳
香酸(45g,純度95-100%)。
le).對(duì)實(shí)施例la提到方法的進(jìn)一步改變，其中取消了乙酸酐的加 入。改為將經(jīng)過(guò)乙酰化的混合物用20 L乙酸稀釋，并用Cr03 (6.4 kg) 在IOOL的乙酸中進(jìn)行處理。24小時(shí)后用過(guò)量的水中止反應(yīng)混合物，并 用如實(shí)施例la中所述的方法進(jìn)行處理。
實(shí)施例2:
乳香酸葡糖胺鹽向乳香酸(2g, 48%的乳香酸)的95%含水甲醇 (50 mL)溶液中加入葡糖胺游離堿溶液(8.6 mL, 0.4 g)并在室溫下 攪拌1小時(shí)。然后減壓蒸發(fā)溶劑并干燥，得到乳香酸葡糖胺鹽或乳香酸 離子對(duì)復(fù)合物的灰色粉末(2.3 g), pH6.3，可溶于90%的含水曱醇中。
這樣獲得的乳香酸葡糖胺鹽或乳香酸離子對(duì)復(fù)合物的分析特性 是，Bl, 4.75%, B2, 2.10%, B3, 5.44%， B4, 14.91%, B5， 2.18%, B6， 8.66%;總共38.04%;葡糖胺(作為游離堿)是8.52%。
實(shí)施例3
乳香酸葡糖胺鹽(KC1):向乳香酸(5g, 48。/。的乳香酸)的甲醇(125 mL)溶液中加入葡糖胺鹽酸鹽(2g)的水溶液(8mL)并在室溫下攪 拌15min。然后在10min內(nèi)緩慢加入氫氧化鉀(0.52g, 20%的水溶液， 2.6 mL)，將溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑并千燥，得到乳香 酸葡糖胺鹽或乳香酸離子對(duì)復(fù)合物的灰色粉末(7.5g), pH6.8,可溶于 90%的含水曱醇中。
這樣獲得的乳香酸葡糖胺鹽或離子對(duì)復(fù)合物的分析特性是，B1, 4.04%, B2, 1.860/0, B3, 4.65%, B4, 12.73%, B5, 1.760/o， B6, 7.340/0; 總共32.38%;葡糖胺(作為游離堿)是12.44%。
實(shí)施例4:
乳香酸葡糖胺鹽(KC1):向乳香酸(5g, 48%的乳香酸)的曱醇(125 mL)溶液中加入葡糖胺鹽酸鹽(4 g)的水溶液(11 mL)并在室溫下攪 拌15min。然后在10min內(nèi)緩慢加入氫氧化鉀(0.52g， 20%的水溶液， 2.6 mL)，將溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑并干燥，得到乳香
酸葡糖胺鹽或離子對(duì)復(fù)合物的灰色粉末(9.6g), pH6.6,可溶于90%的 含水甲醇中。
這樣獲得的乳香酸葡糖胺鹽或離子對(duì)復(fù)合物的分析特性是Bl， 3.14%, B2, 1.37%, B3， 3.36%, B4， 9.75%， B5， 0.93%， B6， 4.76%;; 總共23.31%;葡糖胺(作為游離堿)是27.16%。
實(shí)施例5:
乙?；橄闼崞咸前符}(KC1):向乙?；橄闼?5g, 30%的 AKBA)的曱醇(100mL)溶液中加入葡糖胺鹽酸鹽(0石3g)的水溶液 (3 mL)并在室溫下攪拌15 min。然后在10 min內(nèi)緩慢加入氫氧化鉀 (0.164g， 20%的水溶液，0.82 mL),將溶液在室溫下攪拌1 h。減壓蒸 發(fā)溶劑并千燥，得到乙?；橄闼崞咸前符}或離子對(duì)復(fù)合物的灰色粉 末(4.8g)， pH6.7,可溶于90%的水曱醇中。
這樣荻得的乙酰基酮乳香酸葡糖胺鹽或離子對(duì)復(fù)合物的分析特性 是，AKBA為27.68%;葡糖胺(作為游離堿)為5.42%。
實(shí)施例6:
乙?；橄闼崞咸前符}(KC1):向乙?；橄闼?5g, 30%的 AKBA)的曱醇(100 mL)溶液中加入葡糖胺鹽酸鹽(5 g)的水溶液(l5 mL)并在室溫下攪拌15min。然后在10mm內(nèi)緩慢加入氫氧化鉀(0.2 g, 20%的水溶液，1.0 mL),將溶液在室溫下攪拌1小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶 劑并干燥，得到乙?；橄闼崞咸前符}或離子對(duì)復(fù)合物的灰色粉末 (9.3g), pH5.6,可溶于90。/o的水曱醇中。
這樣獲得的乙?；橄闼崞咸前符}或離子對(duì)復(fù)合物的分析特性 是，AKBA為15.30%;葡糖胺(作為游離堿)為39.44%。
權(quán)利要求
1.一種乳香酸或富集酮乳香酸或富集乙?；橄闼崤c有機(jī)胺的天然混合物的鹽或離子對(duì)復(fù)合物，其具有如下通式I的結(jié)構(gòu)，其中R1和R2是H或者一起形成酮基基團(tuán)；R3是H或?；鶊F(tuán)；X是雜環(huán)堿或由NHR4R5R6代表的有機(jī)堿其中R4、R5和R6是H或者取代或未取代的低級(jí)或高級(jí)烷基或芳基或環(huán)烷基，所述有機(jī)堿是葡糖胺(2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖)、煙酰胺(3-吡啶甲酰胺)、吡多醇(5-羥基-6-甲基-3，4-吡啶二甲醇)、咖啡因(3，7-二氫-1，3，7-三甲基-1H-嘌呤-2，6-二酮)、肌氨酸(N-(氨基亞氨基甲基)-N-甲基甘氨酸)、尿囊素(2，5-二氧代-4-咪唑烷基)脲)、可可堿(3，7-二氫-3，7-二甲基-1H-嘌呤-2，6-二酮)、茶堿(3，7-二氫-1，3-二甲基-1H-嘌呤-2，6-二酮)、美沙拉秦(5-氨基-2-羥基苯甲酸)、恩芬那酸(2-[(2-苯乙基)氨基]笨甲酸)、恩芬那酯(2-[[3-(三氟甲基)苯基]氨基]苯甲酸2-(羥基乙氧基乙基)酯)、氟芬那酸(2-[[3-(三氟甲基)苯基]氨基]苯甲酸、甲氯滅酸(2-[(2，6-二氯-3-甲基苯基)氨基]苯甲酸)、甲滅酸(2-[(2，3-二甲基苯基)-氨基]苯甲酸)、尼氟酸(2-[[3-(三氟甲基)苯基]-氨基]-3-吡啶甲酸)、他尼氟酯(2-[[3-(三氟甲基)苯基]氨基]-3-吡啶甲酸1，3-二氫-3-氧代-1-異苯并呋喃基酯)、特羅芬那酯(2-[(2，6-二氯-3-甲基苯基)-氨基]苯甲酸乙氧基甲基酯)、托滅酸(2-[(3-氯-2-甲基苯基)-氨基]苯甲酸)、S-腺苷甲硫氨酸((3S)-5’-[(3-氨基-3-羰基丙基)甲基锍基]-5’-脫氧腺苷內(nèi)鹽)、3-氨基-4-羥丁酸、阿米曲林(1-[2-(3-甲基丁氧基)-2-苯乙基]吡咯烷)、芐達(dá)明(N，N-二甲基-3-[[1-(苯基甲基)-1H-吲唑-3-基]氧基]-1-丙胺)、聯(lián)苯芐唑(N-2-吡啶基-[1，1’-聯(lián)苯]-4-乙酰胺)、雙苯唑醇(2，2’-[(4，5-二苯基-2-唑基)亞氨基]-二乙醇)、依莫法宗(4-乙氧基-2-甲基-5-(4-嗎啉基)-3(2H)-噠嗪酮)、非普拉宗((±)-α-[[(2-羥基-1，1-二甲基乙基)-氨基]甲基]苯甲醇)、瑞尼托林(4-(9H-芴-9-亞基甲基)苯甲亞胺酰胺)、哌立酮(α-(5-苯基-3-異唑基)-1-哌啶乙醇)。
2. 如權(quán)利要求1所述的鹽或離子對(duì)復(fù)合物，其是天然乳香酸的葡 糖胺鹽或者葡糖胺與乳香酸的離子對(duì)復(fù)合物，其中Ri和R2是H或者一 起形成O， R3是H或COCH3，并且X是葡糖胺。
3. 如權(quán)利要求1所述的鹽或離子對(duì)復(fù)合物，其是乙?；橄闼?的葡糖胺鹽或者葡糖胺與乙?；橄闼岬碾x子對(duì)復(fù)合物，其中Ri和 R2—起形成0， R3是COCH3，并且X是葡糖胺，其中在制備鹽或離子 對(duì)復(fù)合物之前乙酰基酮乳香酸組分的純度在2%到100%的范圍內(nèi)。
4. 如權(quán)利要求1所述的鹽或離子對(duì)復(fù)合物，其是酮乳香酸的葡糖 胺鹽或者葡糖胺與酮乳香酸的離子對(duì)復(fù)合物，其中R!和R2—起形成0， R3是H,并且X是葡糖胺，其中在制備鹽或離子對(duì)復(fù)合物之前酮乳香酸 組分的純度在2%到100%的范圍內(nèi)。
5. 如權(quán)利要求1所述的乳香酸鹽或離子對(duì)復(fù)合物，其中所述的鹽 或離子對(duì)復(fù)合物任選地含有變化濃度的甘遂酸的鹽或離子對(duì)組合物。
6. 如權(quán)利要求1所述的乳香酸鹽或離子對(duì)復(fù)合物，其中所述的甘 遂酸是3-氧代-甘遂酸、3-鞋基-甘遂酸和3-乙酰氧基甘遂酸，其占鹽組 合物總量的0-20%。
7. —種通式I的含有乳香酸和葡糖胺的鹽或離子對(duì)復(fù)合物的制備方 法，所述方法包括向乳香酸的含水甲醇溶液中緩地加入葡糖胺游離堿的 步驟。
8. 如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述鹽或離子對(duì)復(fù)合物組合物 是從反應(yīng)混合物中通過(guò)減壓除去溶劑而回收的。
9. 一種通式I的含有乳香酸和葡糖胺的鹽或離子對(duì)復(fù)合物的制備方 法，所述方法包括原位生成葡糖胺游離堿并使其與乳香酸反應(yīng)的步驟。
10. 如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的原位生成游離堿是通過(guò) 加入堿例如氫氧化鉀、氫氧化鈉等而完成的，并且是在醇或含水醇的存 在下進(jìn)行的。
11. 如權(quán)利要求9所述的方法，其中所述的鹽或離子對(duì)復(fù)合物是通 過(guò)減壓蒸發(fā)溶劑獲得的。
12. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有乳香酸與葡糖胺的天然混合物的鹽 或離子對(duì)復(fù)合物組合物，其組成大約是乳香酸5-60%和葡糖胺5-70%。
13. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳香酸和葡糖胺的鹽組合物，其含有乳 香酸5-60%、葡糖胺5-70%、鉀2-5%和氯化物2-5%。
14. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乙?；橄闼岷推咸前返柠}組合物， 其含有5-95%的AKBA、 5-95%的葡糖胺、2-25%的鉀和2-25%的氯化物。
15. —種從含有乳香酸混合物的提取物中制備25-100%的3-0乙酰 基-ll-酮基-(3-乳香酸的方法，所述乳香酸是從乳香樹(shù)種植物的樹(shù)膠脂中 獲得的，所述3-0乙?；?l-酮基-P-乳香酸是用于制備如權(quán)利要求3和 14中所述的鹽，所述方法包括如下步驟乙?；衼?lái)自所述提取物的 級(jí)份的乳香酸，接著在同一反應(yīng)容器中氧化所述乙酰化產(chǎn)物，不進(jìn)行間 歇的后處理，然后通過(guò)酸處理和/或色譜分離而獲得富含25-100%的3-O-乙?；?(3-乳香酸的級(jí)份。
16. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的11-酮基-(3-乳香酸和葡糖胺的鹽組合物， 其包含約5-95%的KBA、 5-95%的葡糖胺、2-25%的鉀和2-25%的氯化 物。
17. —種從乳香樹(shù)種植物的樹(shù)膠脂中制備25-100%的11-酮基-|3-乳 香酸的方法，所述11-酮基-(3-乳香酸是用于制備如權(quán)利要求4和16中所 述的鹽或離子對(duì)復(fù)合物組合物，所述方法包括如下步驟乙酰化含有來(lái) 自所述提取物的級(jí)份的乳香酸，接著在同 一 反應(yīng)容器中氧化所述乙酰化產(chǎn)物，不進(jìn)行間歇的后處理，然后通過(guò)對(duì)過(guò)乙酰化和氧化的產(chǎn)物進(jìn)行堿 處理和/或色譜分離而獲得富含25-100%的11-酮基-(3-乳香酸的級(jí)份。
18. 如權(quán)利要求15和17所述的方法，其中，所述乙?；襟E是通 過(guò)用乙酸酐/吡t定或乙酰氯/p比口定或單獨(dú)用乙酸酐處理所述4是取物而進(jìn)4亍 的。
19. 如權(quán)利要求15和17所述的方法，其中，所述氧化步驟是通過(guò) 用乙酸乙酸酐/三氧化鉻或乙酸/三氧化鉻處理乙?；磻?yīng)混合物而進(jìn)行的。
20. 如權(quán)利要求15、 17、 18和19所述的方法，其中乙?；脱趸蟮姆磻?yīng)產(chǎn)物是通過(guò)傾入冰水內(nèi)接著過(guò)濾固體，水洗并干燥而獲得的。
21. 如權(quán)利要求15所述的方法，其中將所述產(chǎn)物用4N的HC1在高 溫下進(jìn)行處理，過(guò)濾所得的混合物，用4N的HC1和水洗滌并干燥，從 而獲4尋25-40%的AKBA。
22. 如權(quán)利要求21所述的方法，其中對(duì)酸處理后的所述產(chǎn)物進(jìn)行 二氧化硅柱色譜分離以獲得AKBA富集級(jí)份，所述二氧化硅柱色譜單獨(dú) 或組合使用了有機(jī)溶劑例如丙酮、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、己烷和 曱醇，所述級(jí)份在適當(dāng)?shù)娜軇┲兄亟Y(jié)晶后產(chǎn)生40-100%的AKBA。
23. 如權(quán)利要求17所述的方法，其中在適當(dāng)?shù)娜軇┲袑?duì)所述產(chǎn)物 進(jìn)行堿(8N的KOH)處理，接著過(guò)濾并酸化母液，過(guò)濾固體并干燥， 而獲纟尋25-40%的KBA。
24. 如權(quán)利要求23所述的方法，其中對(duì)堿處理后的所述產(chǎn)物進(jìn)行 二氧化硅柱色譜分離以獲得KBA富集級(jí)份，所述二氧化硅柱色譜分離 單獨(dú)或組合使用了有機(jī)溶劑例如丙酮、氯仿、二氯曱烷、乙酸乙酯、己 烷和曱醇，所述級(jí)份在適當(dāng)?shù)娜軇┲兄亟Y(jié)晶后產(chǎn)生40-100%的KBA。
25. 如權(quán)利要求22和24所述的方法，其中重結(jié)晶的溶劑是單獨(dú)或 組合的丙酮、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯、己烷和甲醇。
26. 如權(quán)利要求15和17所述的方法，其中將所述的在25-100%范 圍內(nèi)富集的KBA使用吡啶/乙酸酐或單獨(dú)使用乙酸酐進(jìn)行乙?；垣@得 在25-100%范圍內(nèi)富集的AKBA。
27. 基本上如本文所描述的含有乳香酸或酮乳香酸或乙?；橄?酸與有機(jī)堿的鹽或離子對(duì)復(fù)合物。
28. 如權(quán)利要求1所述的式I所代表的乳香酸或酮乳香酸或乙?；?酮乳香酸與葡糖胺或其它有機(jī)胺的鹽或離子對(duì)復(fù)合物的用途，其作為抗 炎劑、鎮(zhèn)痛藥、用于化學(xué)預(yù)防癌癥并作為抗癌劑顯示出有效的5-脂氧合 酶活性。
29. 如權(quán)利要求1所述的式I所代表的乳香酸或酮乳香酸或乙?；?酮乳香酸與有機(jī)胺的鹽在化妝品應(yīng)用方面和在治療炎癥性疾病的藥物 組合物方面的用途。
30. —種治療炎癥性疾病的方法，所述方法包括向有此需要的人給 藥以如權(quán)利要求1所述的式I的鹽或離子對(duì)組合物。
31. —種藥物制劑，其在藥學(xué)上可接受的載體中包含如權(quán)利要求1所述的化合物。
32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的藥物制劑，其中所述的載體是水或非 水載體。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的鹽或離子對(duì)復(fù)合物，其是通過(guò)由乳香酸或選擇性富集的3-O-乙?；?11-酮基-β-乳香酸(AKBA)或11-酮基-β-乳香酸(KBA)化合物與有機(jī)胺，更特別地是與葡糖胺反應(yīng)而獲得的，其中乳香酸或選擇性富集的3-O-乙?；?11-酮基-β-乳香酸(AKBA)或11-酮基-β-乳香酸(KBA)化合物是通過(guò)新改進(jìn)的方法獲得的。這些鹽或離子對(duì)復(fù)合物可以有效地用在營(yíng)養(yǎng)保健品和食品添加劑中以用作抗炎劑、關(guān)節(jié)鎮(zhèn)痛治療劑、癌癥預(yù)防劑或癌癥治療劑。還可以將這些鹽或離子對(duì)復(fù)合物用在體外部分或器官的化妝品或藥物組合物中以治療炎性疾病或癌癥。
文檔編號(hào)C07C61/00GK101171221SQ200580049714
公開(kāi)日2008年4月30日 申請(qǐng)日期2005年3月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月7日
發(fā)明者拉馬·拉祖·戈卡拉祖, 文卡塔·蘇巴拉祖·戈圖穆卡拉, 文卡特斯瓦魯·索梅帕里, 特里默圖魯·戈拉科蒂, 甘加·拉祖·戈卡拉祖 申請(qǐng)人:甘加·拉祖·戈卡拉祖;拉馬·拉祖·戈卡拉祖;文卡塔·蘇巴拉祖·戈圖穆卡拉;特里默圖魯·戈拉科蒂;文卡特斯瓦魯·索梅帕里