專利名稱：塞曲司特衍生物及其制備方法與抗哮喘活性的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及不同類型的NO供體以及具有PAF受體拮抗活性和LTs抑制活性的基團(tuán)通過酰亞胺鍵、酯鍵或酰胺鍵分別與抗哮喘藥TXA2受體拮抗劑塞曲司特(Seratrodast，簡稱SD)相偶聯(lián)的化合物，其制備方法以及在制備抗哮喘藥方面的應(yīng)用。
技術(shù)背景哮喘是一種常見的呼吸道疾病。近年來的研究表明，炎性介質(zhì)引發(fā)炎性細(xì)胞對氣道的浸潤是哮喘產(chǎn)生的重要原因。哮喘治療藥物已由原來的吸入性甾體激素配伍β2-受體激動劑，逐步擴(kuò)展到應(yīng)用一些新型炎性介質(zhì)抑制劑，如5-脂氧酶(5-LO)抑制劑、白三烯(LTs)受體拮抗劑、血栓素A2(TXA2)受體拮抗劑和血小板激活因子(PAF)受體拮抗劑等。
從目前炎性介質(zhì)抑制劑研究的結(jié)果來看，單一的抑制劑其治療效果還不是十分理想。鑒于哮喘的發(fā)病機(jī)制涉及到多種炎性介質(zhì)，需要研究能抑制兩種或多種炎性介質(zhì)即多靶點作用的藥物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是如何應(yīng)用藥物設(shè)計的基本理論，設(shè)計并合成一系列能抑制兩種或多種炎性介質(zhì)即多靶點作用的塞曲司特衍生物，并對其進(jìn)行抗哮喘活性篩選，以便獲得抗哮喘活性比現(xiàn)有藥物更好的新型抗哮喘藥物，用于哮喘疾病的治療。本發(fā)明的目的還在于提供一種新型抗哮喘藥物的可工業(yè)化生產(chǎn)的制備方法。
為解決上述問題本發(fā)明提供如下技術(shù)方案。由下述通式(I)表示的塞曲司特偶聯(lián)衍生物 通式(I)包括I-1、I-2、I-3；I-1為抗哮喘藥塞曲司特的酰亞胺類化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R2代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、2-氰基苯基、3-氰基苯基、4-氰基苯基；I-2為塞曲司特的酯類化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2，5-二甲基氧苯基、2，6-二甲基氧苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺?；?1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亞甲基或鄰-、間-、對-亞甲基苯氧甲基；I-3為塞曲司特的酰胺類化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基、5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺?；?、4-乙酰氨基苯磺?；?、苯磺?；?、2-甲基苯磺?；?、3-甲基苯磺?；?、4-甲基苯磺?；?、4-氟苯磺?；?、4-氯苯磺?；?-溴苯磺酰基、4-碘苯磺酰基；I-3CX代表NR6，其中R6代表氫、1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷烴、環(huán)戊基、環(huán)己基、芐基；R1代表羥基。
前述塞曲司特偶聯(lián)衍生物，選自I-1為抗哮喘藥塞曲司特的酰亞胺類化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R2代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、2-氰基苯基；I-2為塞曲司特的酯類化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺?；?1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亞甲基或鄰-、間-、對-亞甲基苯氧甲基；I-3為塞曲司特的酰胺類化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺酰基、4-乙酰氨基苯磺酰基、苯磺?；?、2-甲基苯磺?；?、3-甲基苯磺?；?-甲基苯磺酰基、4-氟苯磺?；?-氯苯磺?；?、4-溴苯磺?；籌-3CX代表NR6，其中R6代表氫、1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷烴、環(huán)戊基、環(huán)己基、芐基；R1代表羥基。
所述塞曲司特偶聯(lián)衍生物中，療效較好的有(±)-N-[3-(4-氯苯基)-1，2，3，4-噁三唑-5-基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰亞胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-甲基苯基-N′-羥基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸(N-2，4-二氟苯基-N′-羥基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-甲酯；(±)-N-[2-正丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊環(huán)-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-[2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊環(huán)-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-(4-甲基苯磺酰基)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚異羥肟酸。
通式I-1化合物的制備方法是塞曲司特先與草酰氯作用，然后在碳酸氫鈉存在下與通式(I-1a)反應(yīng)，通式(I-1a)中R2同通式I-1。 具體反應(yīng)步驟為 SD1的結(jié)構(gòu)下同通式I-2化合物的制備方法是塞曲司特與N-羥基胍化合物(I-2a)或含羥基的呋咱氮氧化合物(I-2b)在二環(huán)己基碳二亞胺和N，N-二甲氨基吡啶存在下縮合，其中R3和R4 同通式I-2。
具體反應(yīng)步驟為 通式I-3A化合物的制備方法是塞曲司特先與草酰氯作用，然后在三乙胺存在下與通式(I-3a)反應(yīng)，其中R5同通式I-3A；A、B相同或不相同，各自獨立地表示O或S。 具體反應(yīng)步驟為 通式I-3B化合物的制備方法是塞曲司特先與草酰氯作用，然后在三乙胺存在下與通式(I-3b)反應(yīng)，其中R1同通式I-3B。
NH2R1I-3b具體反應(yīng)步驟為 通式I-3C化合物的制備方法是塞曲司特先與對硝基苯酚作用，然后在碳酸氫鈉存在下與鹽酸羥胺(I-3c)反應(yīng)，其中R1和R6同通式I-3C。
NHR1R6·HCl I-3c具體反應(yīng)步驟為 藥物組合物，其中含有治療有效量的前述塞曲司特偶聯(lián)衍生物以及常規(guī)藥用載體。
前述塞曲司特偶聯(lián)衍生物在制備抗哮喘藥物中的應(yīng)用。
一氧化氮(NO)具有舒張支氣管和誘導(dǎo)炎性細(xì)胞凋亡的作用。申請人將NO供體與炎性介質(zhì)抑制劑相偶聯(lián)，偶聯(lián)物在體內(nèi)釋放原藥(或活性物)和NO，獲得了較原藥療效更強(qiáng)的抗哮喘藥物化合物。
通式化合物的藥理試驗1.通式化合物中I-1、I-2的藥理試驗如下實驗方法見徐叔云，卞如濂，陳修主編，《藥理實驗方法學(xué)》第三版，北京人民衛(wèi)生出版社，2002版，1380-1381SD由常州華生制藥有限公司提供，規(guī)格為藥用，下同。
所有藥物均用0.5％羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液配成1.42×10-3mol/L懸液(與SD等摩爾濃度)。SD的給藥劑量為1.25mg/kg。
將豚鼠逐個放入玻璃鐘罩內(nèi)，用引喘噴霧裝置噴入2％氯化乙酰膽堿和0.1％磷酸組織胺等體積混合液，觀察豚鼠的引喘潛伏期(作為給藥前引喘潛伏期)，150s內(nèi)出現(xiàn)哮喘的豚鼠為合格的敏感動物。將篩選合格的豚鼠隨機(jī)分成11組，每組8只，分別為陽性藥對照、陰性對照、以及9個受試藥組。灌胃給藥后1小時，同上法測定各組動物給藥后的引喘潛伏期(觀察時間為150s，不跌倒者引喘潛伏期以150s計算)。潛伏期越長，抗哮喘活性越強(qiáng)。將各組數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗，比較組間差異的顯著性。
表1 受試藥對乙酰膽堿-組胺所致豚鼠哮喘的影響(n＝8，x±S)組別 劑量 引喘潛伏期引喘潛伏期(mg/kg)(s，給藥前) (s，給藥后)CMC-Na -- 41.75±5.8 48.12±14.2SD 1.25 54.88±19.565.00±8.8I-1A12.5 45.88±17.866.38±36.1I-1A22.5 49.00±11.6100.38±43.7**I-1A32.5 50.88±19.490.63±33.6*I-2A11.77 51.50±11.195.38±31.0**#I-2A21.84 46.50±11.984.50±28.8**I-2A31.85 50.62±10.097.00±33.4**#
I-2B11.8453.12±15.6114.75±30.1**##I-2B22.2449.38±12.166.75±21.3I-2B32.2447.50±17.273.75±17.3**P＜0.05，**P＜0.01，與CMC-Na組比較；#P＜0.05，##P＜0.01，與陽性藥SD組比較由表1可見，受試藥中I-1A2、I-1A3、I-2A1、I-2A2、I-2A3、I-2B1和I-2B3組給藥前后的引喘潛伏期有顯著性差異，與CMC-Na對照組相比引喘潛伏期亦有顯著性差異(P＜0.05，P＜0.01)，其中I-2A1、I-2A3、I-2B1的抗哮喘活性顯著強(qiáng)于陽性對照藥SD(P＜0.05，P＜0.01)。
2.通式化合物中I-3的藥理試驗如下實驗方法見徐叔云，卞如濂，陳修主編，《藥理實驗方法學(xué)》第三版，北京 人民衛(wèi)生出版社，2002版，1410-1411SD由常州華生制藥有限公司提供，規(guī)格為藥用，下同。
所有藥物均用0.5％羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶液配成1.42×10-3mol/L懸液(與SD等摩爾濃度)。SD的給藥劑量為1.25mg/kg。
取體重150～200g豚鼠，每只豚鼠腹腔注射1mL5％卵蛋白生理鹽水溶液，并在注射后第3天及第5天重復(fù)同樣步驟再次致敏。
分別灌胃給予受試的已致敏豚鼠CMC-Na、陽性藥SD以及受試藥物。1小時后，將致敏豚鼠置于4L的密閉鐘罩，恒壓噴入5％蛋清生理鹽水溶液30秒。然后取出觀察反應(yīng)級數(shù)1級僅呼吸困難，2級呼吸困難和咳嗽，3級劇烈哮喘乃至跌倒。以動物出現(xiàn)3級反應(yīng)的時間作為引喘潛伏時間。將各組數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗，比較組間差異的顯著性。
由表2可見，在給予受試藥的豚鼠中，I-3A5、I-3A6、I-3A8組的引喘潛伏時間與CMC-Na對照組有顯著差異(P＜0.05)，I-3A1、I-3A2、I-3A7、I-3B4、I-3C1組的引喘潛伏時間與CMC-Na對照組有極顯著差異(P＜0.01)，其中IIIB4組的引喘潛伏時間與SD對照組有顯著差異(P＜0.05)，I-3A1、I-3A2組的引喘潛伏時間與SD對照組有極顯著差異(P＜0.01)，表明這些化合物具有明顯地對抗卵蛋白所致的豚鼠過敏性支氣管痙攣的作用。
表2 受試藥對卵蛋白所致豚鼠過敏性支氣管痙攣的影響(n＝8.x±S)組別 給藥劑量(mg/kg)引喘潛伏時間(s)CMC-Na -- 153.125±60.13SD 1.25 211.375±53.90I-3A12.69 290.375±27.22**##I-3A22.69 288.125±31.42**##I-3A32.67 237.875±83.30I-3A42.67 203.000±39.24I-3A52.70 239.625±71.80*I-3A62.70 230.125±62.40*I-3A72.77 252.375±68.18**I-3A82.77 239.125±71.90*I-3B11.90 206.250±91.44I-3B31.75 224.125±95.78I-3B41.80 269.750±39.17**#I-3C11.30 255.750±69.38**I-3C31.60 194.250±90.22I-3C41.60 176.500±91.76I-3C51.50 182.500±61.55I-3C61.45 202.250±70.51*P＜0.05，**P＜0.01與CMC-Na組比較；#P＜0.05，##P＜0.01與陽性藥SD組比較3.NO體外釋放研究實驗方法可參見Gasco AM，Boschi D，Stilo AD，et al.Characterization of furoxan-carbonitiles as a new class ofvasodilators[J].Arzneim-Forsch/Drug Res.1998，48(1)212-218；Sorba G，Medana C，F(xiàn)ruttero R，et al.Water soluble furocan der-ivatives as NO prodrugs[J].JMed Chem，1997，40(4)463-469。
選擇化合物I-1A2、I-2A1、I-2A2、I-2A3、I-2B1、I-2B3作為受試藥物。
Griess試劑的配制氨苯磺胺4g，N-萘乙烯二胺鹽酸鹽0.2g，85％磷酸10ml，用蒸餾水稀釋至100ml。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備配置0.01、0.03、0.05、0.07、0.09、0.2、0.4μg/ml的亞硝酸鹽氮系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，各取10ml與2.5mlGriess試劑充分混勻，室溫放置10min后，于540nm波長處測定其吸收值。根據(jù)所得數(shù)據(jù)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖1)，線性回歸方程y＝3.067×10-3+2.390x；相關(guān)系數(shù)r＝0.9999
受試藥物NO釋放量的測定所有受試藥物先溶于二甲亞砜中(0.01mol/l)，再用磷酸緩沖液(pH7.4)稀釋。緩沖液中含有過量的半胱氨酸(5mmol/l)，受試藥物終濃度為10-4mol/l。將溶液置于37℃環(huán)境下孵化，于不同時間點取反應(yīng)液2ml與500μlGriess試劑混合，室溫放置10分鐘，在540nm處測吸收值。NO的釋放量以其相當(dāng)于氧化產(chǎn)物——亞硝酸鹽(NO2-)的量μg/ml表示(圖2)。由圖2可見，受試物I-2A1、I-2A3、I-2B1、I-2B3在短時間內(nèi)NO釋放量達(dá)到最高值，并在隨后時間內(nèi)一直維持在較高水平。其中以化合物IIB1的釋放量最高。受試物I-1A2、I-2A2在體外環(huán)境中NO釋放量維持在較低水平。


圖1 NO體外釋放試驗標(biāo)準(zhǔn)曲線2 NO-體外釋放圖具體實施方式
以下為本發(fā)明化合物的實施例，這些實施例并不意味著對本發(fā)明的限制。
本發(fā)明塞曲司特偶聯(lián)衍生物的制備方法均是利用已知化合物塞曲司特進(jìn)行酰亞胺、酯化或酰胺化反應(yīng)制得，如無特別說明，這類偶聯(lián)反應(yīng)是有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)反應(yīng)，所涉及反應(yīng)試劑亦為常規(guī)化學(xué)試劑。
IR(KBr，cm-1)1702(酰胺)，1642(C＝O)；ESI-MS527[M+H]+，549[M+Na]+；1HNMR(500MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.14～1.71(m，6H，3×CH2)，1.95(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.05(s，3H，CH3)，2.10～2.25(m，2H，C6-CH2)，2.44(s，3H，ArCH3)，2.49(s，3H，ArCH3)，2.50～2.53(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.27～4.31(q，1H，CH)，7.14～7.27(m，7H，ArH)；7.69～7.70(d，1H，J＝8.2Hz，ArH)實施例2(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-甲基苯基-N′-羥基胍)酯(I-2A1)將SD(0.1g，0.28mmol)，對甲基苯基-N-羥基胍(0.05g，0.31mmol)，DMAP數(shù)粒和二氯甲烷5ml加入10ml茄形瓶中，攪拌溶解后，分批加入DCC(0.069g，0.34mmol)，室溫攪拌過夜，有白色沉淀生成。過濾，柱層析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶冰醋酸＝4∶1∶0.01(v∶v∶v)]，得淡黃色粉末狀固體0.085g，收率60.5％，mp 106℃～108℃。
IR(KBr，cm-1)3376(NH)，1731(酯)，1642(C＝O)；ESI-MS502[M+H]+，524[M+Na]+1HNMR(300MHz，d-DMSO)，δ(ppm)1.24～1.68(m，6H，3×CH2)，1.87(s，3H，CH3)，1.91(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.10～2.18(m，2H，C6-CH2)，2.19(s，3H，CH3)，2.30～2.35(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.27～4.31(q，1H，CH)，6.98～7.00(d，2H，J＝9.1Hz，ArH)，7.14～7.26(m，7H，ArH)；Anal.C30H35N3O4·H2OFound(％)N7.81 C69.53 H7.40Calcd(％)N8.08 C 69.34 H7.17實施例3(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-氯苯基-N′-羥基胍)酯(I-2A2)參照I-2A1的制備方法由對氯苯基-N-羥基胍制得。柱層析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶冰醋酸＝4∶1∶0.01(v∶v∶v)]，得淡黃色粉末狀固體，收率56.8％，mp 44℃～46℃。
IR(KBr，cm-1)3310(NH)，1731(酯)，1643(C＝O)；ESI-MS522[M+H]+，544[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CD3COCD3)，δ(ppm)1.24～1.68(m，6H，3×CH2)，2.00(s，3H，CH3)，2.02(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.10～2.18(m，2H，C6-CH2)，2.34～2.39(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.34～4.35(q，1H，CH)，5.48(s，2H，NH2)，7.14～7.25(m，5H，ArH)；7.30～7.32(m，2H，ArH)，7.49～7.52(m，2H，ArH)；Anal.C29H32ClN3O4·0.4H2O Found(％)N7.46 C66.12 H6.67Calcd(％)N7.94 C66.19 H6.25
IR(KBr，cm-1)3377(NH)，1740(酯)，1644(C＝O)；ESI-MS524[M+H]+，546[M+Na]+；
1HNMR(300MHz，CD3COCD3)，δ(ppm)1.24～1.68(m，6H，3×CH2)，1.94(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.04(s，3H，CH3)，2.10～2.28(m，2H，C6-CH2)，2.37～2.42(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.34～4.35(q，1H，CH)，6.93～7.36(m，7H，ArH)；8.28～8.36(m，1H，ArH)；Anal.C29H32ClN3O4Found(％)N8.04 C66.34 H6.27Calcd(％)N8.02 C66.53 H5.97
IR(KBr，cm-1)1747(酯)，1643(C＝O)，1603(C＝C)；ESI-MS551[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.14～1.60(m，6H，3×CH2)，1.88(s，3H，CH3)，1.91(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.02～2.12(m，2H，C6-CH2)，2.21～2.26(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.18～4.23(q，1H，CH)，5.06(s，2H，OCH2)，7.08～7.20(m，5H，ArH)；7.42～7.63(m，5H，ArH)；Anal.C31H32N2O6Found(％)N5.15 C70.38 H6.33Calcd(％)N5.30 C70.44 H6.10
IR(KBr，cm-1)1736(酯)，1642(C＝O)，1603(C＝C)；ESI-MS657[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.20～1.69(m，6H，3×CH2)，1.94(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.08～2.22(m，2H，C6-CH2)，2.32～2.37(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，4.25～4.30(q，1H，CH)，5.06(s，2H，OCH2)，5.08(s，2H，OCH2)，6.91～7.01(m，3H，ArH)；7.11～7.31(m，6H，ArH)；7.47～7.57(m，3H，ArH)，7.81～7.85(m，2H，ArH)Anal.C38H38N2O7Found(％)N4.51 C71.59 H6.21Calcd(％)N4.41 C71.91 H6.03實施例7(±)-N-[2-正丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊環(huán)-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺(I-3A1)25ml兩頸瓶中加入(cis)-2-丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊環(huán)-2-]苯胺(0.34mmol)，5mlCH2Cl2，三乙胺0.2ml，攪拌溶解，氮氣保護(hù)下，滴加SD-COCl(0.34mmol)的5ml無水CH2Cl2溶液，室溫攪拌2小時后停止反應(yīng)，有機(jī)層依次用水10ml和飽和食鹽水10ml洗滌除去三乙胺鹽酸鹽，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液濃縮，柱層析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶氯仿＝4∶1∶1(v∶v∶v)]，得淡黃色泡沫狀固體]64.2mg，收率63.8％(cis/trans 0.95∶1)，mp 48℃～50℃。
IR(KBr，cm-1)3466(NH)，1690(酰胺)，1641(C＝O)，1128；ESI-MS756[M+H]+，778[M+Na]+；1HNMR(500MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.04(t，3H，J＝3.5Hz，CH3)，1.25～1.80(m，8H，4×CH2)，1.96(s，3H，CH3)，1.99(s，3H，CH3)，2.05(s，3H，CH3)，2.07～2.23(m，2H，C6-CH2)，2.32～2.37(m，2H，C2-CH2)，3.82～4.00(m，15H，4×OCH3，OCH2，C5-CH)，4.10～4.35(m，2H，CH，C5-CH)，5.10～5.18(m，1H，C4-CH)，5.92/6.11(cis/trans，s，1H，C2-CH)，6.59～7.27(m，9H，ArH)，8.56(s，1H，NH)；Anal.C44H53NO10Found(％)N 1.77 C 69.45 H 6.92Calcd(％)N 1.85 C 69.91 H 7.07
IR(KBr，cm-1)3413(NH)，1693(酰胺)，1642(C＝O)，1127；ESI-MS756[M+H]+，778[M+Na]+；1HNMR(500MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.04(t，3H，J＝3.5 Hz，CH3)，1.25～1.80(m，8H，4×CH2)，1.96(s，3H，CH3)，1.99(s，3H，CH3)，2.05(s，3H，CH3)，2.07～2.23(m，2H，C6-CH2)，2.32～2.37(m，2H，C2-CH2)，3.82～4.00(m，15H，4×OCH3，OCH2，C5-CH)，4.3～4.34(m，2H，CH，C5-CH)，5.12(m，1H，C4-CH)，5.93/6.11(cis/trans，s，1H，C2-CH)，6.60～7.27(m，9H，ArH)，9.88(s，1H，NH)；Anal.C44H53NO10Found(％)N 1.82 C 69.43 H 6.95Calcd(％)N 1.85 C 69.91 H 7.07實施例9(±)-N-[2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊環(huán)-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺(I-3A7)參照I-3A1的制備方法由(trans/cis)-2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊環(huán)-2-]苯胺制得，柱層析[石油醚(60℃～90℃)∶丙酮∶氯仿＝4∶1∶1(v∶v∶v)]，得淡黃色泡沫狀固體，收率45.0％(cis/rans 0.64∶1)，mp 56℃～58℃。
IR(KBr，cm-1)3414(NH)，1692(酰胺)，1641(C＝O)，1127；ESI-MS808[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.22～1.66(m，6H，3×CH2)1.93(s，3H，CH3)，1.96(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.06～2.22(m，2H，C6-CH2)，2.27～2.35(m，2H，C2-CH2)，3.39～3.65(m，2H，C5-CH2)，3.80～4.00(m，12H，4×OCH3)，4.23～4.28(q，1H，CH)，4.62～4.64(d，2H，J＝6.3Hz，OCH2)，4.79～5.08(m，1H，C4-CH)，5.21～5.37(m，2H，＝CH2)，5.69/5.79(cis/trans，s，1H，C2-CH)，6.74(s，2H，ArH)，7.12～7.31(m，7H，ArH)；Anal.C44H51NO8S2Found(％)N 1.71 C 67.03 H 6.53Calcd(％)N 1.78 C 67.24 H 6.54
IR(KBr，cm-1)3459(NH)，1724(酰胺)，1642(C＝O)，1343(SO2)，1171(SO2)；ESI-MS508[M+H]+，530[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.16～1.56(m，6H，3×CH2)，1.95(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.02(s，3H，CH3)，2.05～2.17(m，2H，C6-CH2)，2.20～2.24(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，2.42(s，3H，CH3)，4.23～4.26(q，1H，CH)，7.14～7.27(m，5H，ArH)，7.30～7.33(d，2H，J＝8.1Hz，ArH)，7.90～7.93(d，2H，J＝8.1Hz，ArH)，8.93(s，1H，NH)；Anal.C28H33NO5S·0.5H2O Found(％)N 2.42 C 67.33 H 6.73Calcd(％)N 2.71 C 67.42 H 6.63
IR(KBr，cm-1)3223(OH)，1642(C＝O)；ESI-MS392[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.16～1.62(m，6H，3×CH2)，1.95(s，3H，CH3)，1.98(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.05～2.17(m，2H，C6-CH2)，2.20～2.24(t，2H，J＝7.5 Hz，C2-CH2)，4.25～4.30(q，1H，CH)，7.14～7.27(m，5H，ArH)；Anal.C22H27NO4Found(％)N 3.60 C 71.82 H 7.56Calcd(％)N 3.79 C 71.52 H 7.36
IR(KBr，cm-1)3377(OH)，1741(酰胺)，1642(C＝O)；ESI-MS406[M+Na]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.16～1.64(m，6H，3×CH2)，1.93(s，3H，CH3)，1.97(s，3H，CH3)，2.03(s，3H，CH3)，2.05～2.17(m，2H，C6-CH2)，2.31～2.36(t，2H，J＝7.5Hz，C2-CH2)，2.78(s，3H，CH3)，4.24～4.29(q，1H，CH)，7.14～7.25(m，5H，ArH)；Anal.C23H29NO4Found(％)N 3.75 C 71.83 H 7.66Calcd(％)N 3.65 C 72.04 H 7.6權(quán)利要求
1.由下述通式(I)表示的塞曲司特偶聯(lián)衍生物 通式(I)包括I-1、I-2、I-3；I-1為塞曲司特的酰亞胺類化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R2代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、3-硝基苯基、4-硝基苯基、2-氰基苯基、3-氰基苯基、4-氰基苯基；I-2為塞曲司特的酯類化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，5-二甲基苯基、2，6-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基、2，5-二甲基氧苯基、2，6-二甲基氧苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亞甲基或鄰-、間-、對-亞甲基苯氧甲基；I-3為塞曲司特的酰胺類化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基、5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺酰基、4-乙酰氨基苯磺酰基、苯磺酰基、2-甲基苯磺?；?-甲基苯磺?；?-甲基苯磺?；?-氟苯磺?；?、4-氯苯磺?；?、4-溴苯磺?；?、4-碘苯磺?；?；I-3CX代表NR6，其中R6代表氫、1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷烴、環(huán)戊基、環(huán)己基、芐基；R1代表羥基。
2.權(quán)利要求1的塞曲司特偶聯(lián)衍生物，選自I-1為塞曲司特的酰亞胺類化合物X代表-N＝；R1代表3-R2-1，2，3，4-噁三唑-5-，其中R6代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、2，3-二甲基苯基、2，3-二氯苯基、3，4-二氯苯基、2，4-二氟苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2-硝基苯基、2-氰基苯基；I-2為塞曲司特的酯類化合物，包括I-2A、I-2BI-2AX代表O；R1代表-N′-胍-N-R3，其中R3代表2-甲基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、2，4-二氟苯基、2，4-二氯苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，4-二甲基苯基、2，4-二甲氧基苯基；I-2BX代表O；R1代表4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-、4-苯磺酰基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-R4-，R4代表亞甲基或鄰-、間-、對-亞甲基苯氧甲基；I-3為塞曲司特的酰胺類化合物，包括I-3A、I-3B、I-3CI-3AX代表NH；R1代表5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧(硫)戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基或5-[5-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-氧硫戊環(huán)-2-基]-2-R5-3-甲氧基苯基，其中R5代表1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷氧基、烯丙氧基；I-3BX代表NH；R1代表3-硝基苯磺?；?、4-乙酰氨基苯磺?；⒈交酋；?、2-甲基苯磺?；?-甲基苯磺?；?、4-甲基苯磺酰基、4-氟苯磺酰基、4-氯苯磺?；?、4-溴苯磺酰基；I-3CX代表NR6，其中R6代表氫、1-4個碳的飽和直鏈或支鏈烷烴、環(huán)戊基、環(huán)己基、芐基；R1代表羥基。
3.權(quán)利要求2的塞曲司特偶聯(lián)衍生物，選自(±)-N-[3-(4-氯苯基)-1，2，3，4-噁三唑-5-基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰亞胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸(N-4-甲基苯基-N′-羥基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸(N-2，4-二氟苯基-N′-羥基胍)酯；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酸4-苯基-1，2，5-噁二唑-2-氧化物-3-甲酯；(±)-N-[2-正丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二氧戊環(huán)-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-[2-烯丙氧基-3-甲氧基-5-[4-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1，3-二硫戊環(huán)-2-基]苯基]-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-N-(4-甲基苯磺酰基)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚酰胺；(±)-7-(2，4，5-三甲基-3，6-二氧代-1，4-環(huán)己二烯-1-基)苯庚異羥肟酸。
4.權(quán)利要求1的通式I-1化合物的制備方法，其特征在于塞曲司特先與草酰氯作用，然后在碳酸氫鈉存在下與通式(I-1a)反應(yīng)，通式(I-1a)中R2同通式I-1。
5.權(quán)利要求1的通式I-2化合物的制備方法，其特征在于塞曲司特與N-羥基胍化合物(I-2a)或含羥基的呋咱氮氧化合物(I-2b)在二環(huán)己基碳二亞胺和N，N-二甲氨基吡啶存 在下縮合，其中R3和R4同通式I-2。
6.權(quán)利要求1的通式I-3A化合物的制備方法，其特征在于塞曲司特先與草酰氯作用，然后在三乙胺存在下與通式(I-3a)反應(yīng)，其中R5同通式I-3A；A、B相同或不相同，各自獨立地表示O或S。
7.權(quán)利要求1的通式I-3B化合物的制備方法，其特征在于塞曲司特先與草酰氯作用，然后在三乙胺存在下與通式(I-3b)反應(yīng)，其中R1同通式I-3B。NH2R1I-3b
8.權(quán)利要求1的通式I-3C化合物的制備方法，其特征在于塞曲司特先與對硝基苯酚作用，然后在碳酸氫鈉存在下與鹽酸羥胺(I-3c)反應(yīng)，其中R1和R6同通式I-3C。NHR1R6·HCl I-3c
9.藥物組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1的塞曲司特偶聯(lián)衍生物以及常規(guī)藥用載體。
10.權(quán)利要求1～3之一塞曲司特偶聯(lián)衍生物在制備抗哮喘藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了抗哮喘藥塞曲司特(Seratrodast，SD)偶聯(lián)衍生物的通式I，其包括SD的的一氧化氮供體型酰亞胺類化合物(I－1)，一氧化氮供體型酯類化合物(I－2)和酰胺類化合物(I－3)；經(jīng)豚鼠哮喘模型篩選，上述化合物顯示和SD相當(dāng)或增強(qiáng)的抗哮喘活性。
文檔編號C07D273/00GK1480455SQ03132060
公開日2004年3月10日 申請日期2003年7月18日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月18日
發(fā)明者張奕華, 張治國, 季暉, 邱蘇贛 申請人:中國藥科大學(xué)