專利名稱:一種慶大霉素Cla的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及藥品原料的制備方法,具體地說是屬于慶大霉素C1a的提取精制方法。
慶大霉素是由絳紅小單孢菌(Micromonospora purpurea NRRL 2953)產(chǎn)生的一族多組分的氨基糖甙類抗生素。《中華人民共和國(guó)藥典》2000年版規(guī)定慶大霉素C組分包括C1、C1a、C2a、C2,其中慶大霉素C1a可作為合成抗菌藥物依替米星的前體藥物。慶大霉素C1a最常采用的制備方法是從小諾霉素的發(fā)酵液中分離得到。該方法通常包括有發(fā)酵、過濾、脫色濃縮、樹脂吸附、洗脫、解吸、濃縮、噴霧干燥工序,即將所得的小諾霉素發(fā)酵液經(jīng)過濾得到濾液,濾液再經(jīng)脫色濃縮,所得小諾霉素濃縮液用大孔樹脂吸附,用三種不同比例的乙醇-氨水進(jìn)行洗脫、解析,解析液經(jīng)濃縮、噴霧干燥得慶大霉素C1a。
這種方法存在許多不足之處,例如,生產(chǎn)工藝周期長(zhǎng)(480小時(shí)/批);生產(chǎn)工藝復(fù)雜,樹脂吸附后需用混合溶劑經(jīng)過三次洗脫、解析才能得到慶大霉素C1a;混合洗脫劑和解析劑中的乙醇采用蒸餾塔回收,設(shè)備復(fù)雜,需耗費(fèi)大量蒸汽;所用大孔樹脂吸附量小;產(chǎn)品含量低(一般為85%-90%);原材料消耗大,生產(chǎn)成本高。
本發(fā)明的目的在于提供一種制備慶大霉素C1a的新方法,該方法生產(chǎn)效率高、成本低、產(chǎn)品質(zhì)量好。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的本發(fā)明的制備方法包括以下步驟a、將慶大霉素發(fā)酵液過濾、脫色、濃縮;b、將慶大霉素濃縮液加水稀釋,調(diào)PH值到6.0-7.5,經(jīng)弱酸性陽離子交換樹脂吸附后,水洗;c、將吸附后的飽和樹脂用0.2-0.9M銨鹽溶液洗脫,銨鹽溶液PH值為7.0-9.5,洗脫液納濾回收;d、用1.5-3.5M氨水對(duì)洗脫后的飽和樹脂進(jìn)行解析;e、對(duì)解析液進(jìn)行濃縮、脫色、噴霧干燥。
其具體方法為將慶大霉素發(fā)酵液過濾、脫色、濃縮制備成慶大霉素濃縮液,其過濾、脫色、濃縮的具體方法與現(xiàn)有技術(shù)中制備慶大霉素時(shí)的過濾、脫色、濃縮方法相同;慶大霉素濃縮液用水稀釋,以既可保證上樣速度不至于過慢,又避免了因濃度過高在上樣過程中有結(jié)晶析出,造成樹脂吸附不均。稀釋后的慶大霉素液,調(diào)pH值到6.0-7.5;慶大霉素稀釋液經(jīng)弱酸性陽離子樹脂吸附后,用水洗,除去部分雜質(zhì)。弱酸性陽離子樹脂可選用HD-2弱酸性陽離子交換樹脂(上海華東理工大學(xué)華震科技貿(mào)易有限公司),也可選用D151、D152、110等弱酸性陽離子交換樹脂(南開大學(xué)化工廠)。但最好選用HD-2弱酸性陽離子交換樹脂。
樹脂吸附的流速可依據(jù)慶大霉素稀釋液的濃度大小來控制,當(dāng)慶大霉素稀釋液濃度高時(shí),選用低流速,反之,選用高流速。這樣既可使樹脂充分吸附慶大霉素單位,又可提高慶大霉素C1a的品質(zhì)。當(dāng)慶大霉素稀釋液的濃度在3-5.5萬單位/毫升時(shí),樹脂吸附的流速可控制在1/80/分-1/150/分。
將吸附后的飽和樹脂用0.2-0.9M銨鹽溶液洗脫。銨鹽溶液PH值為7.0-9.5,當(dāng)銨鹽溶液PH值過低時(shí),可用氨水調(diào)整,當(dāng)銨鹽溶液PH值過高時(shí),可用稀鹽酸調(diào)整。銨鹽濃度優(yōu)選范圍為0.4M-0.7M。銨鹽溶液可選用氯化銨溶液(為市售產(chǎn)品),也可選用硫酸銨(為市售產(chǎn)品)溶液。但最好選用氯化銨。洗脫液采用納濾處理,納濾處理得到的濃縮液可用于提取慶大霉素,納濾處理得到的透過液可直接套用下批洗脫工序。
對(duì)洗脫后的飽和樹脂用1.5-3.5M氨水進(jìn)行解析;氨水優(yōu)選濃度為2.0-3.0M。解析液經(jīng)過濃縮、脫色、噴霧干燥,制成半成品,再經(jīng)檢驗(yàn)、包裝即為慶大霉素C1a成品。該步驟中的脫色、濃縮、噴霧干燥方法與現(xiàn)有技術(shù)中制備慶大霉素時(shí)的方法相同,如解析液可用薄膜濃縮至25萬單位/毫升以上,所得濃縮液用活性炭脫色(按0.5公斤/百億單位加入活性炭),脫色液噴霧干燥,得慶大霉素C1a。
該方法是按照慶大霉素各組分與樹脂的吸附力不同,先用銨鹽洗脫劑將部分雜質(zhì)及C1、C2a、C2和約50%的C1a組分洗脫下來,樹脂上剩余的C1a組分,用與C1a竟合力較強(qiáng)的氨水將慶大霉素C1a組分解析下來。
本發(fā)明方法的重要?jiǎng)?chuàng)新之處在于采用慶大霉素發(fā)酵液為原料,并將脫色后的慶大霉素濃縮液在進(jìn)行樹脂吸附、洗脫和解析時(shí),所采用的樹脂為弱酸性陽離子交換樹脂,提高了樹脂吸附選擇性;本發(fā)明方法中采用單一銨鹽進(jìn)行洗脫,單一氨水進(jìn)行解析使洗脫解析經(jīng)過一道工序即可完成,大大縮短了提取時(shí)間,并使洗脫劑、解析劑的回收更簡(jiǎn)單、更容易,同時(shí)節(jié)省了大量回收用蒸汽。同時(shí)采用納濾回收洗脫液,又可大大降低原材料成本。
本發(fā)明方法可有效提高慶大霉素C1a的品質(zhì),其產(chǎn)品含量可達(dá)90%以上。其工作效率比現(xiàn)有技術(shù)提高了4倍,降低了原材料及能源的消耗;其方法中的洗脫液經(jīng)過納濾處理后可循環(huán)套用,又大大降低了生產(chǎn)制造成本。
實(shí)施例1慶大霉素發(fā)酵液過濾、脫色、濃縮(即過濾后制得濾液,濾液用732強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂(南開大學(xué)化工廠)吸附,用水洗2-3倍體積,然后用稀鹽酸洗10-15倍體積,最后用純水洗至中性,洗掉一些蛋白類雜質(zhì)。按照慶大霉素類似物與慶大霉素竟和力的不同,先用稀氨水解析掉慶大霉素類似物,再用氨水將慶大霉素全部解析下來,解析液經(jīng)過711強(qiáng)堿性陰離子交換樹脂(南開大學(xué)化工廠)脫色,脫色液經(jīng)薄膜濃縮得,該濃縮液中慶大霉素的總單位為26-30萬單位/毫升)。用純水將濃縮液稀釋成3-5.5萬單位/毫升,調(diào)pH6.0-7.5,稀釋液以1/80/分-1/150/分的吸附流速通過HD-2弱酸性陽離子交換樹脂柱,用純水洗2-3倍體積后,用0.5M的氯化銨進(jìn)行洗脫(先用氨水調(diào)氯化銨溶液pH值為7.5),洗脫流速為1/80/分-1/150/分,洗40-50倍樹脂體積,用硅膠TLC檢測(cè)至樹脂柱上只吸附有慶大霉素C1a,再用1.5M的氨水解析慶大霉素C1a,所得解析液用薄膜濃縮至27萬單位/毫升,向濃縮液中按0.5公斤/百億單位加入活性炭脫色,壓濾,得到脫色液于75℃-80℃噴霧干燥,得慶大霉素C1a(含量為96.4%)。將氯化銨洗脫液進(jìn)行納濾,透過液氯化銨與下批洗脫劑合并使用,濃縮液轉(zhuǎn)入慶大霉素提取工序用于提取慶大霉素。
實(shí)施例2慶大霉素發(fā)酵液過濾、脫色、濃縮(具體方法同實(shí)施例1)。制備成的慶大霉素濃縮液的總單位為30萬單位/毫升,用純水將濃縮液稀釋成5.5萬單位/毫升,調(diào)pH6.0-7.5,稀釋液以1/150/分的吸附流速通過D152弱酸性陽離子交換樹脂柱,用純化水洗3倍體積后,用0.70M的硫酸銨洗脫(先用氨水調(diào)硫酸銨溶液pH值為9.5),洗脫流速為1/150/分,洗40-50倍樹脂體積,用硅膠TLC檢測(cè)至樹脂柱上只吸附有慶大霉素C1a,再用2M的氨水解析慶大霉素C1a,所得解析液用薄膜濃縮至26萬單位/毫升,向濃縮液中按0.5公斤/百億單位加入活性炭脫色,壓濾,得到脫色液于75℃-80℃噴霧干燥,得慶大霉素C1a(含量95%)。將硫酸銨洗脫液進(jìn)行納濾,透過液硫酸銨與下批洗脫劑合并使用,濃縮液轉(zhuǎn)入慶大霉素提取工序用于提取慶大霉素。
實(shí)施例3慶大霉素發(fā)酵液過濾、脫色、濃縮(具體方法同實(shí)施例1)。制備成的慶大霉素濃縮液的總單位為30萬/毫升單位,用純化水將濃縮液稀釋成4.5萬單位/毫升,用氨水調(diào)pH6.0-7.5,稀釋液以1/100/分的吸附流速通過110弱酸性陽離子交換樹脂柱,用純水洗2.5倍體積后,換0.6M的硫酸銨洗脫(先用氨水調(diào)硫酸銨溶液pH值為8.5),洗脫流速為1/100/分,洗40-50倍樹脂體積,用硅膠TLC檢測(cè)至樹脂柱上只吸附有慶大霉素C1a,再用3M的氨水解析慶大霉素C1a,所得解析液用薄膜濃縮至28萬單位/毫升以上,向濃縮液中按0.5公斤/百億單位加入活性炭脫色,壓濾,得到脫色液于75℃噴霧干燥,得慶大霉素C1a(含量92%)。將硫酸銨洗脫液進(jìn)行納濾,透過液硫酸銨與下批洗脫劑合并使用,濃縮液轉(zhuǎn)入慶大霉素提取工序用于提取慶大霉素。
權(quán)利要求
1.一種慶大霉素C1a的制備方法,其特征在于它包括以下步驟a、將慶大霉素發(fā)酵液過濾、脫色、濃縮;b、將慶大霉素濃縮液加水稀釋,調(diào)PH值到6.0-7.5,經(jīng)弱酸性陽離子交換,樹脂吸附后,水洗;c、將吸附后的飽和樹脂用0.2-0.9M銨鹽溶液洗脫,銨鹽溶液PH值為7.0-9.5,洗脫液納濾回收;d、用1.5-3.5M氨水對(duì)洗脫后的飽和樹脂進(jìn)行解析;e、對(duì)解析液進(jìn)行脫色、濃縮、噴霧干燥。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的慶大霉素C1a的制備方法,其特征在于所說的弱酸性陽離子交換樹脂為HD-2弱酸性陽離子交換樹脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的慶大霉素C1a的制備方法,其特征在于所說的銨鹽為氯化銨。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的慶大霉素C1a的制備方法,其特征在于所說的銨鹽濃度為0.4M-0.7M。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的慶大霉素C1a的制備方法,其特征在于所說的氨水濃度為2.0-3.0M。
全文摘要
本發(fā)明公開一種慶大霉素C1a的制備方法,它包括以下步驟a、將慶大霉素發(fā)酵液過濾、脫色、濃縮;b、將慶大霉素濃縮液加水稀釋,調(diào)pH值到6.0-7.5,經(jīng)弱酸性陽離子交換樹脂吸附后,水洗;c、將吸附后的飽和樹脂用0.2-0.9M銨鹽溶液洗脫,洗脫液納濾回收;d、用1.5-3.5M氨水對(duì)洗脫后的飽和樹脂進(jìn)行解析;e、對(duì)解析液進(jìn)行濃縮、脫色、噴霧干燥。本發(fā)明可有效提高慶大霉素C1a的品質(zhì),降低了原材料及能源的消耗。
文檔編號(hào)C07H1/00GK1511839SQ0215902
公開日2004年7月14日 申請(qǐng)日期2002年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月27日
發(fā)明者周佩艷, 孫海遠(yuǎn), 段修禮, 成青山, 宋義林, 魯敬肖 申請(qǐng)人:華北制藥集團(tuán)有限責(zé)任公司