本發(fā)明涉及一種有機菌肥，更具體的說涉及一種青蒿幼苗專用深綠木霉菌肥及應(yīng)用。技術(shù)背景有機菌肥是將一種或多種有益微生物植入有機物中制備而成的一種新型肥料，多效有機菌肥的有機物既是肥力的基礎(chǔ)，又是有益微生物的培養(yǎng)基質(zhì)。這種新型肥料兼具促生長、抗病、改善土質(zhì)、無農(nóng)殘等多重優(yōu)點，目前已在國內(nèi)外得到大量應(yīng)用，且取得了顯著效果。木霉(trichodermapers.exfr.)屬真菌屬于半知菌亞門、絲孢綱、絲孢目的黏菌種類，，土壤中較多，腐爛的木材中也常發(fā)現(xiàn)。其形態(tài)特征：菌絲透明有隔，分枝豐富，分枝上可再分枝，分枝頂端為小梗，瓶狀，束生、對生、互生或單生，由小梗生出分生孢子，多個分生孢子粘聚成球形的孢子頭。由于它能產(chǎn)纖維素酶、葡聚糖酶、木聚糖酶、幾丁質(zhì)酶和蛋白酶等酶類化合物，又能合成核黃素、抗生素、轉(zhuǎn)化甾族化合物，所以它是重要工業(yè)制劑的生產(chǎn)菌；此外，它與植物共生時能促進植物的生長發(fā)育，且能誘發(fā)植物自身免疫功能，對多種植物病原菌具有拮抗作用，所以它常作為植物病害的生物防治菌；木霉可以分解纖維素，從而促進植物對土壤養(yǎng)分的吸收，因此能夠促進植物生長；木霉還可以降解農(nóng)藥；少數(shù)木霉能引起食用菌的病害及果實、薯塊、蔬菜的腐爛。目前發(fā)現(xiàn)的木霉多種多樣，包括侵占木霉(t.aggressivum)、棘孢木霉(t.asperellum)、深綠木霉(t.atroviride)、黃綠木霉(t.aureoviride)、短密木霉(t.brevicompactum)、蠟素木霉(t.cerinum)、綠孢木霉(t.chlorosporum)、橘綠木霉(t.citrinoviride)、致密木霉(t.compactum)、猬木霉(t.erinaceum)、頂孢木霉(t.fertile)、鉤狀木霉(t.hamatum)、哈茨木霉(t.harzianum)、交織木霉(t.intricatum)康寧木霉(t.koningii)、擬康寧木霉(t.koningiopsis)、長枝木霉(t.longibranchiatum)、長毛木霉(t.longipile)、微孢木霉(t.minutisporum)、矩孢木霉(t.oblongisporum)、側(cè)耳木霉(t.pleuroticola)、多孢木霉(t.polysporum)、假康寧木霉(t.pseudokoningii)、軟毛木霉(t.pubescens)、李氏木霉(t.reeseii)、中國木霉(t.sinensis)、螺旋木霉(t.spirale)、粗壯木霉(t.strigosum)、絨毛木霉(t.tomentosum)、毛簇木霉(t.velutinum)、粘綠木霉(t.virens)、綠色木霉(t.viride)、云南木霉(t.yunnanense)等?？傊?，木霉是研發(fā)有機菌肥的優(yōu)質(zhì)菌種之一。以綠色木霉為主要成分的利江牌微生物肥(綠色木霉)，是利江實業(yè)公司研制的一種木霉微生物肥料。該菌肥對黃瓜、芹菜、油菜等都有顯著的增產(chǎn)作用，并且能夠促進早熟，改善作物品質(zhì)，還可抑制病蟲害的發(fā)生?？梢?，以綠色木霉為主要成分的木霉微生物肥料具有多種效果，而且符合當今農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)綠色環(huán)保無公害無農(nóng)殘及可持續(xù)發(fā)展的要求，具有廣闊的市場前景。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了一種青蒿幼苗專用深綠木霉菌肥，所述青蒿幼苗專用深綠木霉菌肥中深綠木霉菌孢子中，深綠木霉菌的特征核苷酸序列為t-a21特異序列。上述青蒿幼苗專用深綠木霉菌肥，其特征在于，所述深綠木霉菌肥制備包括以下步驟：1)細木屑:麥粒＝15-20:1，混勻，浸泡透心,擠干多余水分，裝罐頭瓶，高溫高壓滅菌；2)冷卻后接種深綠木霉試管種，25℃培養(yǎng)，每天光照/黑暗各12小時，誘導(dǎo)分生孢子；3)約5-7天分生孢子大量出現(xiàn)后，清水多次洗滌培養(yǎng)基，洗下分生孢子；4)制備孢子懸浮液，得到深綠木霉菌肥。上述青蒿幼苗專用深綠木霉菌肥，其特征在于：所述深綠木霉菌為從青蒿側(cè)枝中分離，并經(jīng)過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)得到。上述的一種青蒿幼苗專用深綠木霉菌肥在青蒿幼苗生長時施用。4-5月份，在青蒿幼苗長至15-20厘米左右時，在苗根際施用分生孢子懸浮液約3-5ml/株。本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：現(xiàn)有深綠木霉孢子培養(yǎng)培養(yǎng)基一般有純麥麩、麥麩+泥土、純麥粒、麥麩+稻殼等。純麥粒成本高，且我們的研究發(fā)現(xiàn)，純麥粒、純麥麩均不能產(chǎn)生分生孢子，可見其培養(yǎng)效果不穩(wěn)定。麩皮加泥土或稻殼，因深綠木霉對纖維素降解利用能力不強，因此麩皮稻殼養(yǎng)分不足，不能多次多批長出健壯孢子，利用效率低，相對成本較高。本發(fā)明采用細木屑與麥粒的組合，大量加入木屑可以降低培養(yǎng)基成本，麥粒中的淀粉可為木霉提供充足養(yǎng)分，保證可以長出多批健壯的分生孢子,提高了培養(yǎng)基利用效率。此外，生產(chǎn)上制作菌肥，麥粒粉碎后，麥粉可以為深綠木霉分生孢子在土壤中萌發(fā)生長提供充足的養(yǎng)分，利于木霉充分發(fā)揮其促生抗病作用。化肥造成土壤板結(jié)，污染水體，且會影響藥材的品質(zhì)；本發(fā)明提供的深綠木霉菌肥具有改善土質(zhì)的作用，可提高藥材品質(zhì)；化肥含重金屬，污染土壤和作物。微生物肥不含重金屬，且對重金屬污染的土壤有修復(fù)作用；化肥降低作物根際菌群多樣性，增加病害發(fā)生率。木霉菌肥具有較強抑制病原菌的作用，可降低作物病害發(fā)生率；菌肥和化肥復(fù)配可提高化肥的利用效率，而單施化肥造成養(yǎng)分的流失和固定，利用率越來越低；菌肥生產(chǎn)過程無污染，可利用廢物，耗能較低?；噬a(chǎn)過程污染嚴重，且高耗能耗資源。具體實施方式實施例1深綠木霉的分離及菌肥培養(yǎng)從青蒿側(cè)枝中分離深綠木霉菌菌株，經(jīng)過篩選獲得強壯的深綠霉菌菌株(測定菌株孢子生長速度快的菌株)，經(jīng)送寶生物工程(大連)有限公司(大連takara公司)測序證實為深綠木霉菌變異株，其特異序列見核苷酸序列表t-a21特異序列。利用上述深綠木霉菌株進行分生孢子誘導(dǎo)技術(shù)研究，設(shè)置以下9種培養(yǎng)方式，比較分生孢子發(fā)生效率，優(yōu)選最佳培養(yǎng)方式。具體如表1所示。表1深綠木霉產(chǎn)孢培養(yǎng)條件研究發(fā)現(xiàn)除1、2兩種實驗室用基質(zhì)以外，以細木屑和麥粒混合的基質(zhì)，深綠木霉菌孢子表現(xiàn)出最好的生長特性。進一步考察細木屑和麥粒的組合，具體如表2所示。表2深綠木霉產(chǎn)孢培養(yǎng)條件優(yōu)化從表2可見，“2、3、4”號處理的孢子發(fā)生情況最好，且均能持續(xù)生產(chǎn)數(shù)茬孢子。但從減少麥粒用量，節(jié)約成本角度出發(fā)，以2,3號處理為佳。即可以將細木屑：麥粒＝15-20:1作為深綠木霉菌肥孢子培養(yǎng)的基質(zhì)。實施例2深綠木霉菌肥對青蒿幼苗的促生效果考察試驗1選擇地勢平坦，向陽的試驗地，3月在育苗格中培養(yǎng)青蒿苗，間苗后留苗1株/格。4月下旬，青蒿苗長至15-20厘米左右時，在苗根際施用實施例1制備的深綠木霉分生孢子懸浮液約5ml/株，部分青蒿苗在10-15天后施用第二次菌肥5ml/株。以施用氮磷鉀復(fù)合肥100mg/株一次和施用清水為對照。50-60株/處理。施肥約25-30天左右，統(tǒng)計苗的各項生長指標，比較不同處理的效果，結(jié)果如表3。表3深綠木霉分生孢子不同施用次數(shù)對青蒿幼苗生長的影響處理根粗(mm)莖粗(mm)根長(cm)株高(cm)地下鮮重(g)復(fù)合肥4.27±1.1a4.35±0.91a17.67±3.59a45.31±9.38a1.32±0.72a菌肥二次4.22±0.92a4.12±0.74a18.47±3.92a39.59±8.35b1.39±0.67a菌肥一次4.17±0.79a4.23±0.76a17.79±3.53a39.77±9.51b1.31±0.56a清水對照3.45±0.78b3.57±0.81b18.79±3.4a30.75±8.16c0.9±0.45b處理地上鮮重(g)地上干重(g)地下干重(g)總鮮重(g)總干重(g)復(fù)合肥10.63±5.42a1.3±0.73a0.21±0.14b11.95±6.08a1.51±0.86a菌肥二次8.7±4.3b1.14±0.59a0.23±0.13b10.09±4.9b1.37±0.71a菌肥一次9.12±4.59ab1.2±0.52a0.33±0.23a10.43±4.96ab1.53±0.69a清水對照5.19±2.96c0.72±0.42b0.13±0.09c6.1±3.38c0.85±0.51b從以上結(jié)果可見，相對于清水對照，施用深綠木霉分生孢子對青蒿幼苗生長有顯著促進作用，其大多數(shù)指標與復(fù)合肥處理沒有顯著差異。而施肥次數(shù)對促生長作用沒有顯著影響，這一特性也節(jié)約了人工和肥料成本。實施例3深綠木霉菌肥對青蒿幼苗的促生效果考察試驗2選擇地勢平坦，向陽的試驗地，3月在育苗格中培養(yǎng)青蒿苗，間苗后留苗1株/格。4月下旬，青蒿苗長至15-20±3厘米時，在苗根際施用實施例1制備的深綠木霉分生孢子懸浮液約5ml/株，在10-15天后施用第二次深綠木霉分生孢子懸浮液5ml/株。以施用氮磷鉀復(fù)合肥100mg/株一次和施用清水為對照。50-60株/處理。施肥約25-30天左右，統(tǒng)計苗的各項生長指標，比較不同處理的效果，結(jié)果如表4。表4施用深綠木霉分生孢子對青蒿幼苗生長的影響處理根粗(mm)莖粗(mm)株高(cm)根長(cm)地下鮮重(g)菌肥4.02±1.1a4.06±1.01a54.52±12.56a17.53±3.62a1.17±0.83a清水對照2.82±0.76b2.86±0.72b37.71±10.75c15.14±2.96b0.5±0.34b復(fù)合肥3.74±1.12a3.76±0.92a45.57±12.85b17.63±5.25a1.23±0.81a處理地上鮮重(g)地上干重(g)地下干重(g)總鮮重(g)總干重(g)菌肥11.2±7.31a1.32±0.93a0.25±0.18a12.37±8.11a1.57±1.1a清水對照4.78±2.97c0.61±0.41b0.13±0.08b5.28±3.29c0.74±0.48b復(fù)合肥8.43±5.34b1.13±0.73a0.27±0.18a9.67±6.12b1.4±0.91a從以上結(jié)果可以看出，施用菌肥相對于清水對照對青蒿幼苗有顯著的促生長作用，且其增產(chǎn)效果和施用復(fù)合肥基本沒有顯著差別，部分指標甚至超過復(fù)合肥處理。可見深綠木霉分生孢子可作為青蒿的苗肥，全部代替或部分代替化肥。sequencelisting<110>重慶市中藥研究院<120>一種青蒿幼苗專用深綠木霉菌肥及應(yīng)用<130>2017<160>1<170>patentinversion3.3<210>1<211>553<212>dna<213>t-a21特異序列<400>1cgagtttacaactcccaaacccaatgtgaaccataccaaactgttgcctcggcggggtca60cgccccgggtgcgtcgcagccccggaaccaggcgcccgccggagggaccaaccaaactct120ttctgtagtcccctcgcggacgttatttcttacagctctgagcaaaaattcaaaatgaat180caaaactttcaacaacggatctcttggttctggcatcgatgaagaacgcagcgaaatgcg240ataagtaatgtgaattgcagaattcagtgaatcatcgaatctttgaacgcacattgcgcc300cgccagtattctggcgggcatgcctgtccgagcgtcatttcaaccctcgaacccctccgg360gggtccggcgttggggatcgggaacccctaagacgggatcccggccccgaaatacagtgg420cggtctcgccgcagcctctcatgcgcagtagtttgcacaactcgcaccgggagcgcggcg480cgtccacgtccgtaaaacacccaacttctgaaatgttgacctcggatcaggtaggaatac540ccgctgaacttaa553當前第1頁12