本發(fā)明涉及生物技術領域，更具體涉及一種利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀的方法，

背景技術：

納米銀是粒徑處于1～100nm之間的金屬銀單質，對大腸桿菌、淋球菌、沙眼衣原體等數(shù)十種致病微生物都有強烈的抑制和殺滅作用，而且不會產(chǎn)生耐藥性，在抗菌材料的應用中具有重要的價值(詳細見參考文獻1：Naik R R,Stringer S J,Agarwal G,Jones S E,Stone M O.Nat.Mater.,2002,1:169-172)。

目前納米銀的制備方法主要是物理法和化學合成法，物理方法一般涉及高溫、高壓、高能耗，化學方法一般涉及有毒的化學試劑，造成環(huán)境污染，不符合綠色化學的原則。最近發(fā)展的生物合成法條件溫和、操作簡單、且不會造成環(huán)境污染和毒性，是未來主要發(fā)展方向。植物材料大量存在于自然界中，處理困難，影響生態(tài)環(huán)境，通過植物材料合成納米銀是一種潛在的選擇(詳細見參考文獻2：Arunachalam R,Dhanasingh S,Kalimuthu B,Uthirappan M,Rose C,Mandal A B.Colloid Surface.B,2012 94:226-230)。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)廣西杜荊葉可以介導納米銀的合成，合成速度快，操作簡單，具有重要的應用前景。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是在于提供了一種利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀的方法，納米銀合成速度快，方法易行，操作方便，且納米銀溶液可保持高度穩(wěn)定性。

為了實現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用以下技術措施：

一種利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀的方法，其步驟是：

1)將廣西杜荊葉片烘干破碎成粉末(20～40目)，加水浸提，浸提液(浸提液就是粉末加水混合攪拌之后的液體)離心過濾得到的上清液即為廣西杜荊葉片抽提物；

2)將步驟1)得到的廣西杜荊葉片抽提物與硝酸銀(化學式為AgNO3)溶液混合制備反應混合液，在白光照射(100000lx)條件下反應60～80min，溫度為室溫20-25度，得到納米銀顆粒。

所述的步驟2)中，反應混合液中廣西杜荊葉片抽提物濃度為0.6～3.0mg/mL。

所述的步驟2)中，反應混合液中硝酸銀(化學式為AgNO3)濃度為1.0～1.8mM。

所述的步驟2)中，反應時間控制在60～80min。

本發(fā)明所提供的利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀的方法，具有較強的創(chuàng)新性和實用性，其優(yōu)點如下：

(1)首次利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀顆粒，合成的納米銀粒徑分布在14～30nm，納米銀溶液可保持的高度分散穩(wěn)定性。

(2)納米銀合成速度快，可在60min內完成反應，操作簡單，是一種高效、易行的合成方法。

附圖說明

圖1為一種不同廣西杜荊葉片抽提物濃度下合成納米銀的紫外可見吸收光譜；

圖2為一種不同AgNO₃濃度下合成納米銀的紫外可見吸收光譜；

圖3為一種廣西杜荊葉片抽提物合成納米銀的紫外可見吸收光譜過程變化；

圖4為一種廣西杜荊葉片抽提物合成納米銀的粒徑分布統(tǒng)計。

附圖1說明反應混合液中廣西杜荊葉片抽提物濃度為0.6～3.0mg/mL時，可合成納米銀；圖2說明反應混合液中硝酸銀濃度為1.0～1.8mM時可合成納米銀；圖3說明反應時間控制在60min時，即可完成反應，反應速度快，方法高效；圖4說明所合成的納米銀粒徑分布在14～30nm，粒徑小，有利于納米銀溶液的分散穩(wěn)定性。

具體實施方式

以下通過實施例對本發(fā)明進行詳細說明，但所有實施例并不對本發(fā)明構成任何限制。

實施例1：通過廣西杜荊葉片抽提物合成納米銀顆粒

一種利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀的方法，其步驟是：

a、制備抽提物：

將廣西杜荊葉片烘干粉粹成粉末(20目)，取1g廣西杜荊葉片粉末，加入100ml蒸餾水，200rpm浸提10min，獲得一種浸提液，浸提液經(jīng)10000rpm離心20min，過濾后得到的上清液即為廣西杜荊葉片抽提物，用作納米銀合成基質。

b、納米銀合成：

混合廣西杜荊葉片抽提物與硝酸銀溶液制備反應混合液，廣西杜荊葉片抽提物濃度為1.2、1.8、2.4、3.0mg/mL中，硝酸銀濃度為1mM，在白光照射(100000lx)條件下反應60min，得到納米銀顆粒。

c、納米銀的表征：

如附圖1所示，在1.2、1.8、2.4、3.0mg/mL的廣西杜荊葉片抽提物濃度下，產(chǎn)生強烈的可見光吸收，證明納米銀的合成。觀察發(fā)現(xiàn)所合成的納米銀在室溫(20－25℃，以下相同)下保存兩個月以上不發(fā)生明顯的團聚現(xiàn)象，說明納米銀溶液可保持高度穩(wěn)定性，有利于其儲藏應用。

實施例2：通過廣西杜荊葉片抽提物合成納米銀顆粒

一種利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀的方法，其步驟是：

a、制備抽提物：

將廣西杜荊葉片烘干粉粹成粉末(40目)，取1g廣西杜荊葉片粉末，加入100ml蒸餾水，200rpm浸提10min，獲得一種浸提液，浸提液經(jīng)10000rpm離心20min，過濾后得到的上清液即為廣西杜荊葉片抽提物，用作納米銀合成基質。

b、納米銀合成：

混合廣西杜荊葉片抽提物與AgNO₃溶液制備反應混合液，廣西杜荊葉片抽提物濃度為1.8mg/mL中，硝酸銀濃度為1mM、1.2mM、1.4mM、1.6mM、1.8mM，在白光照射(100000lx)條件下反應60min，得到納米銀顆粒。

c、納米銀的表征：

如附圖2所示，在1mM、1.2mM、1.4mM、1.6mM、1.8mM的硝酸銀濃度下，產(chǎn)生強烈的可見光吸收，證明納米銀的合成。觀察發(fā)現(xiàn)所合成的納米銀在室溫下保存兩個月以上不發(fā)生明顯的團聚現(xiàn)象，說明納米銀溶液可保持高度穩(wěn)定性，有利于其儲藏應用。

實施例3：通過廣西杜荊葉片抽提物合成納米銀顆粒

一種利用廣西杜荊葉片抽提物生物合成納米銀的方法，其步驟是：

a、制備抽提物：

將廣西杜荊葉片烘干粉粹成粉末(20目)，取1g廣西杜荊葉片粉末，加入100ml蒸餾水，200rpm浸提10min，獲得一種浸提液，浸提液經(jīng)10000rpm離心20min，過濾后得到的上清液即為廣西杜荊葉片抽提物，用作納米銀合成基質。

b、納米銀合成：

混合廣西杜荊葉片抽提物與AgNO₃溶液制備反應混合液，廣西杜荊葉片抽提物濃度為1.8mg/mL中，硝酸銀濃度為1.6mM，在白光照射(100000lx)條件下反應60min，得到納米銀顆粒。

c、納米銀的表征：

每隔10min測定所合成納米銀的紫外可見吸收光譜，附圖3顯示，隨著反應時間的增加，納米銀的量合成增加，反應至60min時基本完成。經(jīng)透射電子顯微鏡觀察，統(tǒng)計粒徑，粒徑分布如附圖4所示，納米銀粒徑分布在14～30nm之間，平均粒徑為21.35nm。