技術(shù)特征：

1.一種雙通道熒光光學(xué)顯微成像中基于圖像處理的自動對焦方法，其特征在于，包括下述步驟：

S1：獲得生物組織樣本當(dāng)前冠狀面輪廓，并通過當(dāng)前冠狀面輪廓獲得三個對焦窗口位置；

S2：通過控制三維精密移動控制平臺移動到所述對焦窗口位置來實現(xiàn)對三個對焦窗口進行掃描，并采集第i層生物組織樣本細(xì)胞構(gòu)筑通道的圖像；i的初值為1；

S3：判斷當(dāng)前層三個對焦窗口的圖像采集是否完成，若是，則i＝i+1，并進入步驟S4，若否，則返回至步驟S2；

S4：判斷采集層數(shù)i是否大于預(yù)設(shè)的閾值，若是，則進入步驟S5，若否，則返回至步驟S2；

S5：使用能量梯度算法對采集的生物組織樣本細(xì)胞構(gòu)筑通道的圖像進行處理，獲得每一幀圖像的對焦評價值；

S6：將三個對焦窗口不同層數(shù)的對焦評價值分別按照從大到小進行排序，獲得三個最大的對焦評價值所在的層數(shù)；

S7：判斷三個最大的對焦評價值所在的層數(shù)是否相同，若是，則進入步驟S8，若否，則結(jié)束自動對焦過程；

S8：根據(jù)最大的對焦評價值所在的層數(shù)、當(dāng)前冠狀面層數(shù)和Z軸掃描步進值，獲得焦面需要調(diào)節(jié)的大??；并根據(jù)得焦面需要調(diào)節(jié)的大小進行調(diào)焦。

2.如權(quán)利要求1所述的自動對焦方法，其特征在于，步驟S1中獲得生物組織樣本當(dāng)前冠狀面輪廓的步驟具體為：

S11：獲取當(dāng)前生物組織樣本細(xì)胞構(gòu)筑通道圖像；

S12：對所述生物組織樣本細(xì)胞構(gòu)筑通道圖像進行均值濾波處理多次后，獲得濾波圖像；

S13：將所述濾波圖像中每個像素點的灰度值按從小到大的順序進行排序，將前一半的灰度值取平均得到均值M，將均值M乘以倍數(shù)N得到冠狀面圖像的閾值T；倍數(shù)N為0.5～3；

S14：采用閾值T對所述濾波圖像進行二值化處理，獲得二值化圖像；

S15：對所述二值化圖像進行腐蝕處理獲得生物組織樣本當(dāng)前冠狀面輪廓。

3.如權(quán)利要求2所述的自動對焦方法，其特征在于，在步驟S12中，采用3*3的模版進行均值濾波處理，且均值濾波處理的次數(shù)為20；在步驟S15中，腐蝕處理具體為：以5*5的矩形模版進行10次腐蝕操作。

4.如權(quán)利要求1-3任一項所述的自動對焦方法，其特征在于，三個對焦窗口中第一個對焦窗口的位置為：(x2，y2)，第二個對焦窗口的位置為：(x2-0.3，y2)，第三個對焦窗口的位置為：(x2-0.6，y2)；其中，x2是第一個對焦窗口的位置的橫坐標(biāo)，y2是第一個對焦窗口的位置的縱坐標(biāo)。

5.如權(quán)利要求1-4任一項所述的自動對焦方法，其特征在于，步驟S4中，Z軸步進值的范圍是0.0001mm～0.001mm，預(yù)設(shè)的閾值K范圍是5～15。

6.如權(quán)利要求1-5任一項所述的自動對焦方法，其特征在于，步驟S5中，所述對焦評價值為其中，E為對焦評價值，x，y分別對應(yīng)圖像中像素點的坐標(biāo)，f(x,y)表示在圖像中(x,y)像素點的灰度值。

7.如權(quán)利要求1-5任一項所述的自動對焦方法，其特征在于，步驟S8中，焦面需要調(diào)節(jié)的大小等于當(dāng)前冠狀面層數(shù)與最大的對焦評價值所在的層數(shù)之差乘以Z軸掃描步進值。