相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
本技術(shù):
要求于2014年11月11日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)no.62/078,144的權(quán)益,其內(nèi)容通過引用并入本文。
本發(fā)明大體上涉及測(cè)試載玻片。更具體地,本發(fā)明涉及一種用于顯微鏡的測(cè)試載玻片,該顯微鏡配備有水浸或生理學(xué)物鏡。
背景技術(shù):
在光學(xué)顯微鏡中,水浸或生理學(xué)物鏡是專門設(shè)計(jì)的物鏡鏡片,用于以最高分辨率對(duì)水樣介質(zhì)中的樣品成像。這通過將物鏡鏡片浸入含有樣品的水樣介質(zhì)中來實(shí)現(xiàn)。由于大多數(shù)活體標(biāo)本在水中存活,所以生理學(xué)物鏡可以使活體樣品在其自然狀態(tài)下成像。由于物鏡設(shè)計(jì)成與水的折射率匹配,所以球面像差被最小化并且分辨率被最大化。
采用樣品載玻片評(píng)估顯微鏡的成像能力,該顯微鏡配備有物鏡,該物鏡設(shè)計(jì)用于水或與水具有相似折射率的介質(zhì)。這種顯微鏡的分辨率和成像能力通過熒光珠的成像來評(píng)估,該熒光珠的尺寸與衍射限制分辨率極限的尺寸相同或小于衍射限制分辨率極限的尺寸,對(duì)于多光子顯微鏡通常為200nm,對(duì)于共聚焦顯微鏡為50-100nm。水性浸漬(生理學(xué))物鏡必須浸入水或具有與水相似的折射率的替代介質(zhì)以使其分辨率最大化。遺憾的是,用這樣的物鏡測(cè)試顯微鏡的分辨能力是困難的,因?yàn)橛捎诓祭蔬\(yùn)動(dòng),大約50-200nm的珠子在水中自由移動(dòng)。因此,需要一些方法在成像期間將珠子保持在適當(dāng)?shù)牡胤?,同時(shí)保持與水相同的折射率。將熒光珠簡(jiǎn)單地粘附到玻璃載玻片上并浸入水中并不起作用,因?yàn)樗?玻璃邊界處的光干擾分辨率的測(cè)量。
目前,用于水浸物鏡光學(xué)測(cè)試的主導(dǎo)方法是對(duì)懸浮在瓊脂、瓊脂糖或聚丙烯胺中的熒光珠成像。所有這些方法都存在問題。瓊脂和瓊脂糖存在兩個(gè)難點(diǎn)。首先,瓊脂和瓊脂糖都是易碎的。瓊脂和瓊脂糖是熱敏性的,并且在從激光源發(fā)射的高強(qiáng)度光作用下分解。瓊脂和瓊脂糖隨著時(shí)間而老化并被微生物降解。瓊脂和瓊脂糖還高度依賴于精確的生產(chǎn)方法,生產(chǎn)中很小的變化都會(huì)引入光學(xué)像差。此外,瓊脂/水混合物的折射率顯著高于水的折射率。另一種替代方案,由聚丙烯酰胺制成的水凝膠,也是不合需要的,因?yàn)槠涫怯卸镜模⑶沂菑椥缘?,在壓力下?huì)移動(dòng)。因此,需要一測(cè)試載玻片,其使用的材料比現(xiàn)有方法的材料更堅(jiān)韌、更容易制備并且更可再生。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例提供了一種載玻片,其包括:腔室;以及在腔室中的熒光珠、溶劑和粘合劑的混合物。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施例提供了一種生產(chǎn)載玻片的方法,該方法包括:提供一位于載玻片中的腔室;將熒光珠混入溶劑中;將熒光珠-溶劑混合物引入粘合劑中;將熒光珠-溶劑-粘合劑混合物放入腔室中;和將粘合劑固化。
附圖說明
圖1示出了根據(jù)一實(shí)施例的測(cè)試載玻片。
圖2示出了根據(jù)一實(shí)施例生產(chǎn)測(cè)試載玻片的步驟。
具體實(shí)施方式
根據(jù)本發(fā)明的原理的說明性實(shí)施例的描述旨在結(jié)合附圖來閱讀,附圖被認(rèn)為是整個(gè)書面說明的一部分。在本發(fā)明公開的實(shí)施例的描述中,對(duì)于方向或取向的任何引用僅僅是為了方便說明,并不意圖以任何方式限制本發(fā)明的范圍。相關(guān)術(shù)語(yǔ)如“下”、“上”、“水平”、“垂直”、“在……上”、“在……下”、“向上”、“向下”、“頂部”和“底部”及其衍生詞語(yǔ)(例如“水平地”、“向下地”、“向上地”等)應(yīng)當(dāng)解釋為指的是如所描述的或如所討論的圖中所示的取向。這些相關(guān)術(shù)語(yǔ)僅用于方便說明,并且不要求在特定方向上構(gòu)建或操作設(shè)備,除非明確指出。諸如“附接”、“附著”、連接”、“耦合”、“相互連接”和類似的術(shù)語(yǔ)是指其中結(jié)構(gòu)通過中間結(jié)構(gòu)直接或間接地彼此固定或附接的關(guān)系,以及兩者是可移動(dòng)的或剛性連接或關(guān)聯(lián),除非另有明確說明。此外,通過參考示例性實(shí)施例來說明本發(fā)明的特征和優(yōu)點(diǎn)。因此,本發(fā)明明確地不應(yīng)限于這樣的示例性實(shí)施例,示例性實(shí)施例示出了單獨(dú)存在或以特征的其他組合存在的特征的一些可能的非限制性組合;本發(fā)明的范圍由所附的權(quán)利要求限定。
本公開描述了如目前預(yù)期的最佳方式或?qū)嵤┍景l(fā)明的方式。本說明書不旨在理解為限制性,而是通過參考附圖提供了僅出于說明目的而提出的本發(fā)明的示例,以向本領(lǐng)域普通技術(shù)人員說明本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和結(jié)構(gòu)。在附圖的各種視圖中,相同的附圖標(biāo)記表示相同或相似的部件。
根據(jù)實(shí)施例,圖1示出了包含腔室110的樣品載玻片100,腔室110包含一固體,所述固體的折射率與水的折射率相似。將熒光珠浸漬在這種固體中,其均勻分散在整個(gè)材料中。
生產(chǎn)測(cè)試載玻片的實(shí)施例如圖2所示。在210中,提供一包含腔室的樣品載玻片。在220中,將熒光納米粒子置于干燥的地方,并重新懸浮在丙酮或相似的疏水性溶劑中,例如hfe-71000(3m)或hfe-7300。這些熒光納米粒子含有非極性表面基團(tuán),使得它們耐非極性或有機(jī)溶劑并溶解在非極性或有機(jī)溶劑中。一個(gè)這樣的有用的納米粒子的示例是填充有量子點(diǎn)并被非極性表面基團(tuán)覆蓋的珠子。在230中,將珠子渦旋并超聲以確保所有珠子聚集體解離。在240中,將乙酸丁酯/珠子混合物引入光學(xué)粘合劑和密封劑中,例如my-133(電-光組合物公司(electro-opticalcomponents))。在一個(gè)實(shí)施例中,該粘合劑含有90%的在氟利昂替代溶劑中的聚合物。在250中,然后將珠子-溶劑-粘合劑混合物適當(dāng)?shù)刂糜跇悠份d玻片中。在260中,然后通過與氧氣隔離并暴露于波長(zhǎng)340-380nm的光中將粘合劑固化。
雖然針對(duì)若干描述的實(shí)施例利用某些特征對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳盡描述,但是這并不意味著本發(fā)明應(yīng)該限制于任何這類特征或?qū)嵤├蛉魏尉唧w實(shí)施例,而是本發(fā)明應(yīng)當(dāng)通過參考所附權(quán)利要求來解釋,以便根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)提供對(duì)這種權(quán)利要求最廣泛的可能的解釋,并因此有效地涵蓋本發(fā)明的預(yù)定范圍。此外,前面描述了根據(jù)發(fā)明人預(yù)見到的本發(fā)明的實(shí)現(xiàn)方式,盡管現(xiàn)在沒有預(yù)見到本發(fā)明的非實(shí)質(zhì)性修改,但仍可表示其等同方式。