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顯微鏡及區(qū)域確定方法

文檔序號(hào):2793029閱讀:215來(lái)源:國(guó)知局
專利名稱:顯微鏡及區(qū)域確定方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及具有用于確定圖像數(shù)據(jù)內(nèi)的處理區(qū)域的圖像處理單元的顯微鏡,以及用于確定圖像數(shù)據(jù)內(nèi)的處理區(qū)域的區(qū)域確定方法。
背景技術(shù)
隨著因特網(wǎng)的出現(xiàn),誕生了遠(yuǎn)程病理學(xué),使處于遠(yuǎn)地的醫(yī)生通過(guò)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行病理診斷。通過(guò)遠(yuǎn)程病理學(xué),處于遠(yuǎn)地的病理學(xué)家可對(duì)身體組織的顯微圖像進(jìn)行處理,從而進(jìn)行醫(yī)學(xué)診斷。近來(lái),已采用寬帶電信和大容量存儲(chǔ)器來(lái)獲取載玻片上的完整組織的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)。另外,采用數(shù)字病理學(xué)對(duì)病理信息進(jìn)行管理和分析,從而有望提高病理實(shí)踐的質(zhì)量和效率。例如,數(shù)字病理學(xué)獲得的、作為載玻片的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)的虛擬切片不僅可作為病理學(xué)家之間交換的信息,還可作為教材。另外,在數(shù)字病理學(xué)中,虛擬切片可由虛擬切片設(shè)備自動(dòng)生成,從而可提高工作效率。例如,如圖M所示,虛擬切片設(shè)備對(duì)整個(gè)載玻片16進(jìn)行照明,載玻片16上安置有活體樣本,背光15布置在與攝像器件13相對(duì)的一側(cè)。隨后,攝像器件13通過(guò)成像透鏡12 拍攝整個(gè)載玻片16的圖像,從而獲得數(shù)字圖像(虛擬切片)。載玻片16內(nèi)布置了寫(xiě)有載玻片16上的活體樣本名稱等信息的標(biāo)簽16a、覆蓋活體樣本的蓋玻片16b等。生成的整個(gè)載玻片16的數(shù)字圖像儲(chǔ)存在硬盤(pán)驅(qū)動(dòng)器內(nèi)或可移動(dòng)介質(zhì)內(nèi)。使用者可使用個(gè)人計(jì)算機(jī)11等對(duì)儲(chǔ)存的圖像進(jìn)行觀測(cè)。由于將活體樣本作為數(shù)字圖像而管理,易于在大量活體樣本之間搜索期望的活體樣本,并易于觀測(cè)期望的活體樣本。另外,即使處于遠(yuǎn)地,也可觀測(cè)活體樣本(例如,參閱未審查的日本專利申請(qǐng)公開(kāi)第11-133311號(hào))。生成虛擬切片時(shí),首先,虛擬切片設(shè)備拍攝縮略圖像(稍微放大的圖像),以確定要獲取高倍放大圖像(高倍放大的圖像)的攝像區(qū)域。攝像區(qū)域可采用公認(rèn)的自動(dòng)區(qū)域檢測(cè)算法進(jìn)行檢測(cè)。例如,如圖25所示,將縮略圖像中包括活體樣本(下文稱為“樣本”)的區(qū)域部分確定為攝像區(qū)域22。隨后,虛擬切片設(shè)備獲取確定的攝像區(qū)域的高倍放大圖像。

發(fā)明內(nèi)容
但是,相關(guān)技術(shù)的虛擬切片設(shè)備存在這樣的問(wèn)題蓋玻片16b的邊緣被誤識(shí)別為樣本21,如圖沈所示,在縮略圖像的周圍不包括樣本21的區(qū)域23被誤識(shí)別為攝像區(qū)域。 由于也獲取了除樣本21之外的圖像,增加了切片的掃描時(shí)間,需要使用大容量存儲(chǔ)器存儲(chǔ)虛擬切片。因此,優(yōu)選地,僅精確識(shí)別安置有樣本21的切片區(qū)域。期望提供一種能夠從縮略圖像精確識(shí)別將要獲取高倍放大圖像的區(qū)域的新的或改進(jìn)的顯微鏡以及區(qū)域確定方法。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式,提供了一種顯微鏡,包括對(duì)標(biāo)本進(jìn)行照明的暗視場(chǎng)照明裝置和明視場(chǎng)照明裝置,在標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;攝像單元,通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,并通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;以及放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,用于根據(jù)攝像單元獲取的暗視場(chǎng)像和明視場(chǎng)像來(lái)檢測(cè)標(biāo)本中蓋玻片的邊緣,并將檢測(cè)出的蓋玻片邊緣的內(nèi)部區(qū)域確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。在該實(shí)施方式中,放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元可計(jì)算顯現(xiàn)暗視場(chǎng)像的蓋玻片的邊緣位置,并將明視場(chǎng)像中的與從暗視場(chǎng)像計(jì)算的邊緣位置相對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為放大部分圖像獲取區(qū)域。另外,放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元可計(jì)算顯現(xiàn)暗視場(chǎng)像的蓋玻片的邊緣位置,對(duì)明視場(chǎng)像中的與根據(jù)暗視場(chǎng)像計(jì)算的邊緣位置對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將區(qū)域確定結(jié)果確定為放大部分圖像獲取區(qū)域。在該實(shí)施方式中,根據(jù)本發(fā)明該實(shí)施方式的顯微鏡可進(jìn)一步包括標(biāo)簽圖像獲取單元,從暗視場(chǎng)像獲取附著在載玻片上的指示樣本信息的標(biāo)簽的標(biāo)簽圖像;以及,縮略圖像輸出單元,用于以對(duì)應(yīng)的方式輸出明視場(chǎng)像的樣本獲取區(qū)域中的圖像和標(biāo)簽圖像。另外,根據(jù)本發(fā)明該實(shí)施方式的顯微鏡可進(jìn)一步包括噪聲消除單元,根據(jù)暗視場(chǎng)像和明視場(chǎng)像之間的差分信息來(lái)消除放大部分圖像獲取區(qū)域中的噪聲。在該實(shí)施方式中,可使用LED照明裝置或激光器作為暗視場(chǎng)照明裝置。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式,提供了一種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,在標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的該標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;根據(jù)暗視場(chǎng)像檢測(cè)標(biāo)本中蓋玻片的邊緣;以及,在明視場(chǎng)像中,將檢測(cè)出的蓋玻片邊緣的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式,提供了一種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,在標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的該標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;根據(jù)暗視場(chǎng)像檢測(cè)標(biāo)本中蓋玻片的邊緣;以及,對(duì)于明視場(chǎng)像,對(duì)檢測(cè)出的蓋玻片邊緣的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將區(qū)域確定結(jié)果確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面,提供了一種顯微鏡,包括對(duì)標(biāo)本進(jìn)行照明的暗視場(chǎng)照明裝置和明視場(chǎng)照明裝置,在標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;攝像單元,通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,并通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;以及放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,根據(jù)攝像單元獲取的暗視場(chǎng)像和明視場(chǎng)像,檢測(cè)標(biāo)本的蓋玻片的噪聲分量,從明視場(chǎng)像中消除檢測(cè)出的噪聲分量,并將結(jié)果確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。在該實(shí)施方式中,噪聲分量例如可為蓋玻片的邊緣、封固劑、附著的異物等。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面,提供了一種顯微鏡,包括對(duì)標(biāo)本進(jìn)行照明的暗視場(chǎng)照明裝置和明視場(chǎng)照明裝置,在標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;攝像單元,用于通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,并通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;以及放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,根據(jù)攝像單元獲取的暗視場(chǎng)像和明視場(chǎng)像,檢測(cè)標(biāo)本中蓋玻片的封固劑滲出區(qū)域,并將檢測(cè)出的封固劑滲出區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。在該實(shí)施方式中,放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元可計(jì)算顯現(xiàn)暗視場(chǎng)像的封固劑滲出區(qū)域的位置,并將明視場(chǎng)像中的與從暗視場(chǎng)像計(jì)算的封固劑滲出區(qū)域的位置對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為放大部分圖像獲取區(qū)域。另外,放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元可計(jì)算顯現(xiàn)暗視場(chǎng)像的封固劑滲出區(qū)域的位置,對(duì)明視場(chǎng)像中的與根據(jù)暗視場(chǎng)像計(jì)算的封固劑滲出區(qū)域的位置對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將區(qū)域確定結(jié)果確定為放大部分圖像獲取區(qū)域。在該實(shí)施方式中,根據(jù)本發(fā)明的顯微鏡可進(jìn)一步包括標(biāo)簽圖像獲取單元,從暗視場(chǎng)像獲取附著在載玻片上的指示樣本信息的標(biāo)簽的標(biāo)簽圖像;以及,縮略圖像輸出單元,以對(duì)應(yīng)的方式輸出明視場(chǎng)像的樣本獲取區(qū)域中的圖像和標(biāo)簽圖像。另外,根據(jù)本發(fā)明的顯微鏡可進(jìn)一步包括噪聲消除單元,用于根據(jù)暗視場(chǎng)像和明視場(chǎng)像之間的差分信息來(lái)消除放大部分圖像獲取區(qū)域中的噪聲。在該實(shí)施方式中,可使用LED照明裝置或激光器作為暗視場(chǎng)照明裝置。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式,提供了一種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,在標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的該標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;根據(jù)暗視場(chǎng)像檢測(cè)標(biāo)本中的封固劑滲出區(qū)域;以及,在明視場(chǎng)像中,將檢測(cè)出的封固劑滲出區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式,提供了一種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,在標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的該標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;根據(jù)暗視場(chǎng)像檢測(cè)標(biāo)本中的封固劑滲出區(qū)域;以及,在明視場(chǎng)像中,對(duì)檢測(cè)出的封固劑滲出區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將區(qū)域確定結(jié)果確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。如上所述,根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式,可提供能夠從縮略圖像精確識(shí)別將要獲取高倍放大圖像的區(qū)域的顯微鏡以及區(qū)域確定方法。


圖1為根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方式的顯微鏡的配置示意圖。圖2為根據(jù)本發(fā)明該實(shí)施方式的載物臺(tái)的配置示意圖。圖3為安置有標(biāo)本的載物臺(tái)的示意圖。圖4為總控制器的功能和配置的功能框圖。圖5為根據(jù)本發(fā)明該實(shí)施方式的顯微鏡的虛擬切片生成過(guò)程的流程圖。圖6為根據(jù)本發(fā)明該實(shí)施方式的顯微鏡對(duì)蓋玻片的邊緣進(jìn)行檢測(cè)的概覽圖。圖7為縮略圖像拍攝單元獲取的暗視場(chǎng)像的示例示意圖。圖8為使用LED環(huán)狀照明裝置作為暗視場(chǎng)照明裝置的情況下的縮略圖像拍攝單元的配置示意圖。圖9為使用LED條形照明裝置作為暗視場(chǎng)照明裝置的情況下的縮略圖像拍攝單元的配置示意圖。圖10為在蓋玻片的邊緣散射的光的示意圖。圖11為根據(jù)本發(fā)明該實(shí)施方式的縮略圖像生成過(guò)程的流程圖。圖12為能夠測(cè)量縮略圖像拍攝單元內(nèi)載玻片傾角的測(cè)量?jī)x器的配置的一個(gè)示例的示意圖。
圖13為能夠測(cè)量縮略圖像拍攝單元內(nèi)載玻片厚度的測(cè)量?jī)x器的配置的一個(gè)示例的示意圖。圖14為顯現(xiàn)載玻片上的異物的暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)的示例的示意圖。圖15為通過(guò)圖7所示的暗視場(chǎng)像而指定的放大部分圖像獲取區(qū)域的示例的示意圖。圖16為附著有劃線字符的標(biāo)本的示例的示意圖。圖17為能夠測(cè)量放大圖像拍攝單元內(nèi)載玻片傾角的測(cè)量?jī)x器的配置的一個(gè)示例的示意圖。圖18為能夠測(cè)量放大圖像拍攝單元內(nèi)載玻片厚度的測(cè)量?jī)x器的配置的一個(gè)示例的示意圖。圖19為成像透鏡切換和照明系統(tǒng)協(xié)作的示意圖。圖20為能夠測(cè)量攝像器件傾角的測(cè)量?jī)x器的配置的一個(gè)示例的示意圖。圖21為能夠測(cè)量攝像器件位置的測(cè)量?jī)x器的配置的一個(gè)示例的示意圖。圖22為能夠測(cè)量攝像器件傾角和位置的測(cè)量?jī)x器的配置的一個(gè)示例的示意圖。圖23為總控制器的硬件配置示例的框圖。圖M為相關(guān)技術(shù)中虛擬切片設(shè)備的簡(jiǎn)略配置示意圖。圖25為采用自動(dòng)區(qū)域檢測(cè)算法對(duì)區(qū)域進(jìn)行檢測(cè)的狀態(tài)示意圖,區(qū)域中的高倍放大圖像從縮略圖像中自動(dòng)獲取。圖沈?yàn)榭s略圖像中的蓋玻片邊緣被錯(cuò)誤地識(shí)別為獲取高倍放大圖像的區(qū)域的狀態(tài)示意圖。
具體實(shí)施例方式下文將結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明示例性實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。另外,在說(shuō)明書(shū)和附圖中,基本具有相同功能和配置的元件以相同參考標(biāo)號(hào)表示,并省略其描述。另外,將按以下順序進(jìn)行說(shuō)明。1.顯微鏡的配置2.虛擬切片生成過(guò)程3.硬件配置示例<1.顯微鏡的配置>首先,將根據(jù)圖1對(duì)根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方式的顯微鏡100的配置進(jìn)行說(shuō)明。圖 1為根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方式的顯微鏡100的配置示意圖。[整體配置]如圖1的示例所示,根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100包括縮略圖像拍攝單元110, 用于拍攝布置有活體樣本的整個(gè)標(biāo)本(pr印arat)PRT的圖像(在下文中,該圖像稱為縮略圖像);以及放大圖像拍攝單元120,用于拍攝通過(guò)以預(yù)定放大率放大活體樣本而形成的圖像(在下文中,該圖像稱為放大圖像)。通過(guò)使用預(yù)定固定方法在載玻片160上固定活體樣本來(lái)獲得標(biāo)本PRT,活體樣本包括結(jié)締組織(例如,血液、上皮組織、具有上述兩種組織的組織等)的組織切片(slide) 或涂抹細(xì)胞。如果需要,對(duì)組織切片或涂抹細(xì)胞進(jìn)行各種染色處理。染色包括以HE(蘇木素與伊紅)染色、吉姆薩染色、巴氏染色等為代表的一般染色,以及諸如FISH(熒光原位雜交)或酶抗體法的熒光染色。另外,標(biāo)本PRT上可附著標(biāo)簽(圖3中由參考標(biāo)號(hào)162表示),標(biāo)簽上寫(xiě)有指定對(duì)應(yīng)活體樣本的附加信息(例如,采集樣本的人員姓名、采樣日期、染色類型等)。另外,標(biāo)本 PRT的配置包括安置有活體樣本的載玻片160、覆蓋活體樣本的蓋玻片161、標(biāo)簽162等。根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100中安裝有載物臺(tái)130,前述標(biāo)本PRT被安置在載物臺(tái) 130上。如圖2所示,載物臺(tái)130設(shè)有略小于標(biāo)本PRT的開(kāi)口部131。用于緊固標(biāo)本PRT的側(cè)表面的凸起13 至132c布置在載物臺(tái)130的開(kāi)口部131周圍。凸起13 對(duì)與開(kāi)口部 131相對(duì)應(yīng)的布置在載物臺(tái)130上的標(biāo)本PRT的一個(gè)短邊進(jìn)行支撐,凸起132b和132c對(duì)標(biāo)本PRT的一個(gè)長(zhǎng)邊進(jìn)行支撐。另外,可繞作為旋轉(zhuǎn)中心的點(diǎn)133a旋轉(zhuǎn)的向開(kāi)口部側(cè)施壓的壓制部133布置在與凸起13 至132c支撐的兩個(gè)側(cè)邊所形成的角相對(duì)的角處。因此,如圖3所示,標(biāo)本PRT可由凸起13 至132c和壓制部133緊固在載物臺(tái)130上。在安置有標(biāo)本PRT的載物臺(tái)130的安置平面上附著有標(biāo)記13 至134d,標(biāo)記13 至134d用于在攝像器件113和IM拍攝的圖像中識(shí)別載物臺(tái)130的位置。如圖2所示,標(biāo)記13 至134d例如可被配置為“0”和“ Δ,,以不同的位置關(guān)系布置。載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135為用于在各個(gè)方向上移動(dòng)載物臺(tái)130的機(jī)構(gòu)。通過(guò)載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135,載物臺(tái)130可在與載物臺(tái)平面平行的方向(X軸-Y軸方向)以及與載物臺(tái)垂直的方向(Ζ軸方向)上自由移動(dòng)。[縮略圖像拍攝單元]如圖1所示,縮略圖像拍攝單元110主要包括光源111、物鏡112和攝像器件113。光源111布置在與載物臺(tái)130的標(biāo)本安置平面相對(duì)的平面?zhèn)?。光?11可切換地發(fā)射對(duì)經(jīng)受一般染色的活體樣本進(jìn)行照射的光(下文稱為明視場(chǎng)照明光或簡(jiǎn)稱為照明光) 和對(duì)經(jīng)受特殊染色的活體樣本進(jìn)行照射的光(下文稱為暗視場(chǎng)照明光)。另外,光源111可配置為僅能發(fā)射明視場(chǎng)照明光和暗視場(chǎng)照明光的其中之一。這種情況下,布置兩種光源,包括照射明視場(chǎng)照明光的光源和照射暗視場(chǎng)照明光的光源,作為光源111。另外,照射暗視場(chǎng)照明光的光源可布置在與載物臺(tái)130的標(biāo)本安置平面相同的平面?zhèn)壬?。具有預(yù)定放大率的物鏡112布置在載物臺(tái)130的標(biāo)本安置平面的一側(cè)上,標(biāo)本安置平面的處于縮略圖像拍攝單元110的基準(zhǔn)位置處的法線作為其光軸SRA。透射過(guò)布置在載物臺(tái)130上的標(biāo)本PRT的透射光由物鏡112聚集,并且在布置在物鏡112的后側(cè)(換句話說(shuō),照明光的前進(jìn)方向上)的攝像器件113上成像。包括被安置在載物臺(tái)130的標(biāo)本安置平面上的標(biāo)本PRT的所有部分的攝像范圍中的光(換句話說(shuō),透射過(guò)整個(gè)標(biāo)本PRT的透射光)使圖像形成在攝像器件113上。攝像器件113上所形成的圖像成為縮略圖像,該縮略圖像為拍攝標(biāo)本PRT的所有部分而獲得的顯微圖像。[放大圖像拍攝單元]如圖1所示,放大圖像拍攝單元120主要包括光源121、聚光透鏡122、物鏡123和攝像器件124。另外,放大圖像拍攝單元120可進(jìn)一步包括視場(chǎng)光闌(未示出)。光源121照射明視場(chǎng)照明光,并布置在與載物臺(tái)130的標(biāo)本安置平面相對(duì)的表面的一側(cè)。另外,照射暗視場(chǎng)照明光的光源(未示出)布置在與光源121的位置不同的位置(例如,標(biāo)本安置平面一側(cè))。聚焦透鏡122為對(duì)光源121照射的明視場(chǎng)照明光和暗視場(chǎng)照明光源照射的暗視場(chǎng)照明光進(jìn)行聚集并將照明光引導(dǎo)至載物臺(tái)130上的標(biāo)本PRT的透鏡。聚焦透鏡122布置在光源121和載物臺(tái)130之間,標(biāo)本安置平面的處于放大圖像拍攝單元120的基準(zhǔn)位置處的法線作為其光軸ERA。具有預(yù)定放大率的物鏡123布置在載物臺(tái)130的標(biāo)本安置平面一側(cè),標(biāo)本安置平面的處于放大圖像拍攝單元120的基準(zhǔn)位置處的法線作為其光軸ERA。在放大圖像拍攝單元120中,對(duì)物鏡123進(jìn)行適當(dāng)切換,從而可以以各種放大率放大活體樣本并拍攝其圖像。 透射過(guò)布置在載物臺(tái)130上的標(biāo)本PRT的透射光由物鏡123聚集,并在布置在物鏡123的后側(cè)(換句話說(shuō),照明光的前進(jìn)方向上)的攝像器件1 上成像。載物臺(tái)130的標(biāo)本安置平面中的具有預(yù)定水平寬度和垂直寬度的攝像范圍內(nèi)的圖像根據(jù)攝像器件1 的像素尺寸和物鏡123的放大率形成于攝像器件IM上。另外,由于活體樣本的一部分由物鏡123進(jìn)行了放大,因此前述攝像范圍小于縮略圖像拍攝單元110 的攝像器件113的攝像范圍。此處,如圖1所示,縮略圖像拍攝單元110和放大圖像拍攝單元120被布置為使得光軸SRA和光軸ERA(即,其基準(zhǔn)位置處的法線)在Y軸方向上彼此間隔距離D。距離D被設(shè)定為使支撐放大圖像拍攝單元120的物鏡123的鏡筒(未示出)不進(jìn)入攝像器件113的攝像范圍的小距離,實(shí)現(xiàn)了小型化。在上述說(shuō)明中,布置在縮略圖像拍攝單元110和放大圖像拍攝單元120中的攝像器件可為一維攝像器件或二維攝像器件。[控制器]如圖1所示,用于控制顯微鏡的各個(gè)部件的控制器連接至根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100。更具體地,用于控制設(shè)于顯微鏡100上的各個(gè)光源(包括光源111和光源121)的照明控制器141連接至根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100,用于控制載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135的載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142連接至載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135。另外,縮略圖像拍攝控制器143連接至用于拍攝縮略圖像的攝像器件113,放大圖像拍攝控制器144連接至用于拍攝活體樣本的放大圖像的攝像器件124。這些控制器經(jīng)由各種數(shù)據(jù)通信線路連接至執(zhí)行控制的部件。另外,在根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100中,單獨(dú)設(shè)置對(duì)整個(gè)顯微鏡進(jìn)行控制的控制器(下文稱為總控制器150),該控制器通過(guò)各種數(shù)據(jù)通信線路與前述各個(gè)控制器連接??刂破魍ㄟ^(guò)使用CPU(中央處理單元)、R0M(只讀存儲(chǔ)器)、RAM(隨機(jī)存取存儲(chǔ)器)、存儲(chǔ)單元、通信單元、計(jì)算電路等來(lái)實(shí)現(xiàn)。下文將對(duì)控制器的功能進(jìn)行簡(jiǎn)要說(shuō)明。照明控制器141是用于對(duì)根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100內(nèi)包括的各個(gè)光源進(jìn)行控制的處理單元。如果總控制器150輸出表示活體樣本照明方法的信息,照明控制器141根據(jù)所獲取的表示照明方法的信息對(duì)相應(yīng)的光源進(jìn)行照明控制。例如,考慮照明控制器141對(duì)設(shè)置在縮略圖像拍攝單元110中的光源111進(jìn)行控制的情況。這種情況下,照明控制器141根據(jù)表示照明方法的信息確定執(zhí)行以下哪種模式 獲取明視場(chǎng)像的模式(下文稱為明視場(chǎng)模式)和獲取暗視場(chǎng)像(下文稱為暗視場(chǎng)像)的模式。隨后,照明控制器141根據(jù)各模式對(duì)光源111設(shè)定參數(shù),使光源111照射適用于各模式的照明光。因此,光源111照射的照明光通過(guò)載物臺(tái)130的開(kāi)口部照射在活體樣本的所有部分上。另外,照明控制器141設(shè)定的參數(shù)例如包括照明光的強(qiáng)度、光源類型的選擇等。另外,考慮照明控制器141對(duì)布置在放大圖像拍攝單元120中的光源121進(jìn)行控制的情況。這種情況下,照明控制器141根據(jù)表示照明方法的信息確定執(zhí)行明視場(chǎng)模式還是暗視場(chǎng)模式。隨后,照明控制器141根據(jù)各模式對(duì)光源121設(shè)定參數(shù),使光源121照射適用于各模式的照明光。因此,光源121照射的照明光通過(guò)載物臺(tái)130的開(kāi)口部照射在活體樣本的所有部分上。另外,照明控制器141設(shè)定的參數(shù)例如包括照明光的強(qiáng)度、光源類型的選擇等。另外,優(yōu)選地,明視場(chǎng)模式下的照明光為可見(jiàn)光。另外,優(yōu)選地,暗視場(chǎng)模式下的照明光是具有能夠激發(fā)用作特定染色劑的熒光標(biāo)記的波長(zhǎng)的光。另外,在暗視場(chǎng)模式下,熒光標(biāo)記的背景部分被切除(cut out)。載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142是用于對(duì)驅(qū)動(dòng)設(shè)置在根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100中的載物臺(tái)的載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135進(jìn)行控制的處理單元。如果總控制器150輸出表示活體樣本攝像方法的信息,載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142根據(jù)所獲取的表示攝像方法的信息對(duì)載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135進(jìn)行控制。例如,考慮根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100拍攝縮略圖像的情況。如果總控制器150 輸出表示將對(duì)活體樣本的縮略圖像進(jìn)行拍攝的信息,載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142在載物臺(tái)平面方向(X-Y軸方向)移動(dòng)載物臺(tái)130,使標(biāo)本PRT的所有部分都包括在攝像器件113的攝像范圍內(nèi)。另外,載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142在Z軸方向移動(dòng)載物臺(tái)130,使標(biāo)本PRT的所有部分與物鏡112的焦點(diǎn)重合。另外,考慮根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100拍攝放大圖像的情況。如果總控制器150 輸出表示將對(duì)活體樣本的放大圖像進(jìn)行拍攝的信息,載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142對(duì)載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135的驅(qū)動(dòng)進(jìn)行控制,以在載物臺(tái)平面方向移動(dòng)載物臺(tái)130,使活體樣本被置于從光源 111與物鏡112之間的位置到聚焦透鏡122與物鏡123之間的位置的范圍內(nèi)。另外,載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142在載物臺(tái)平面方向(X-Y軸方向)移動(dòng)載物臺(tái)130,使活體樣本的預(yù)定部分位于由攝像器件1 進(jìn)行攝像的攝像范圍內(nèi)。另外,載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142對(duì)載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135的驅(qū)動(dòng)進(jìn)行控制,以在與載物臺(tái)平面垂直的方向(Z軸方向,組織切片的深度方向)上移動(dòng)載物臺(tái)130,使活體樣本的位于預(yù)定攝像范圍內(nèi)的部分與物鏡123的焦點(diǎn)重合??s略圖像拍攝控制器143為用于對(duì)設(shè)置在縮略圖像拍攝單元110中的攝像器件 113進(jìn)行控制的處理單元??s略圖像拍攝控制器143根據(jù)明視場(chǎng)模式或暗視場(chǎng)模式為攝像器件113設(shè)定參數(shù)。另外,如果縮略圖像拍攝控制器143獲取到攝像器件113輸出的、與攝像器件113的成像平面上形成的圖像對(duì)應(yīng)的輸出信號(hào),則縮略圖像拍攝控制器143將所獲取的輸出信號(hào)設(shè)定為與縮略圖像相對(duì)應(yīng)的輸出信號(hào)。如果縮略圖像拍攝控制器143獲取到與縮略圖像相對(duì)應(yīng)的輸出信號(hào),則縮略圖像拍攝控制器143將與所獲取的信號(hào)相對(duì)應(yīng)的數(shù)據(jù)輸出給總控制器150。另外,由縮略圖像拍攝控制器143設(shè)定的參數(shù)例如包括曝光開(kāi)始時(shí)間、曝光結(jié)束時(shí)間等。放大圖像拍攝控制器144為用于對(duì)設(shè)置在放大圖像拍攝單元120中的攝像器件 124進(jìn)行控制的處理單元。放大圖像拍攝控制器144根據(jù)明視場(chǎng)模式或暗視場(chǎng)模式為攝像器件1 設(shè)定參數(shù)。另外,如果放大圖像拍攝控制器144獲取到攝像器件IM輸出的、與攝像器件IM的成像平面上形成的圖像相對(duì)應(yīng)的輸出信號(hào),則放大圖像拍攝控制器144將所獲取的輸出信號(hào)設(shè)定為與放大圖像相對(duì)應(yīng)的輸出信號(hào)。如果放大圖像拍攝控制器144獲取到與放大圖像相對(duì)應(yīng)的輸出信號(hào),則放大圖像拍攝控制器144將與所獲取信號(hào)相對(duì)應(yīng)的數(shù)據(jù)輸出給總控制器150。另外,由放大圖像拍攝控制器144設(shè)定的參數(shù)例如包括曝光開(kāi)始時(shí)間、曝光結(jié)束時(shí)間等??偪刂破?50為用于對(duì)包括前述各個(gè)控制器的顯微鏡進(jìn)行總控制的處理單元。如圖4所示,總控制器150包括位置控制器151、圖像處理單元152、縮略圖像獲取單元153和放大圖像獲取單元154。位置控制器151進(jìn)行位置控制處理,以將載物臺(tái)130移動(dòng)到被設(shè)定為目標(biāo)的位置 (下文稱為“目標(biāo)位置”)。如圖4所示,位置控制器151被配置為包括目標(biāo)位置確定單元 151a、載物臺(tái)圖像獲取單元151b和載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c。在要獲取縮略圖像的情況下,目標(biāo)位置確定單元151a確定載物臺(tái)130的目標(biāo)位置,在該目標(biāo)位置處,標(biāo)本PRT的所有部分都包括在攝像器件113的攝像范圍SPR內(nèi)。載物臺(tái)圖像獲取單元151b使照明控制器141驅(qū)動(dòng)光源111以及對(duì)標(biāo)記13 至 134d進(jìn)行照明的光源,并使縮略圖像拍攝控制器143通過(guò)攝像器件113以預(yù)定時(shí)間間隔獲取整個(gè)攝像范圍SPR的載物臺(tái)圖像。載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c計(jì)算載物臺(tái)圖像獲取單元151b所獲取的載物臺(tái)圖像的像素相對(duì)于預(yù)先存儲(chǔ)在HDD內(nèi)的標(biāo)記13 至134d的形狀數(shù)據(jù)的相關(guān)值。例如,載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c計(jì)算穿過(guò)相關(guān)值為最大值的像素以及該像素之前和之后的像素的二次曲線,并檢測(cè)出該二次曲線最大值的位置作為載物臺(tái)圖像內(nèi)標(biāo)記13 至134d的位置。例如, 載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c從HDD讀取載物臺(tái)圖像內(nèi)標(biāo)記13 至134d的位置與實(shí)際載物臺(tái)130內(nèi)標(biāo)記13 至134d的位置的對(duì)應(yīng)表。從而,載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c檢測(cè)出實(shí)際載物臺(tái)130內(nèi)的與對(duì)應(yīng)表中的載物臺(tái)圖像內(nèi)標(biāo)記13 至134d的位置相對(duì)應(yīng)的位置。位置控制器151對(duì)目標(biāo)位置確定單元151a所確定的目標(biāo)位置與載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c檢測(cè)出的載物臺(tái)130的位置之間的差進(jìn)行計(jì)算,并將差輸出至載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器 142。載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142根據(jù)位置控制器151提供的差將載物臺(tái)130通過(guò)載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)135移動(dòng)到目標(biāo)位置。這樣,每當(dāng)位置控制器151獲取攝像器件113所拍攝的載物臺(tái)圖像時(shí),位置控制器151檢測(cè)載物臺(tái)圖像中顯示的標(biāo)記13 至134d,從該結(jié)果檢測(cè)載物臺(tái) 130的位置,計(jì)算載物臺(tái)130的位置與目標(biāo)位置之間的差,并將載物臺(tái)130移動(dòng)到目標(biāo)位置。圖像處理單元152根據(jù)攝像器件113所拍攝的并且從縮略圖像拍攝控制器143輸入的圖像來(lái)確定要獲取放大圖像的放大部分圖像獲取區(qū)域,并生成縮略圖像153。在攝像器件113所拍攝的圖像中,除了活體樣本外,還可能顯示覆蓋樣本的蓋玻片的邊緣以及切片上的異物等。因此,在該實(shí)施方式中,圖像處理單元152從攝像器件113所拍攝的圖像中去除呈現(xiàn)了除活體樣本之外的物體的區(qū)域,并將呈現(xiàn)活體樣本的區(qū)域作為放大部分圖像獲取區(qū)域輸出給縮略圖像獲取單元153。換句話說(shuō),圖像處理單元152用作放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,用于從圖像檢測(cè)蓋玻片的邊緣,并確定放大部分圖像獲取區(qū)域。另外,圖像處理單元152還用作標(biāo)簽圖像獲取單元,用于獲取附著在載玻片160上的標(biāo)簽161的圖像,并用作噪聲消除單元,用于消除諸如載玻片160上的異物的噪聲。例如,縮略圖像獲取單元153通過(guò)使用CPU、ROM、RAM、通信單元等來(lái)實(shí)現(xiàn)。在對(duì)顯微鏡100進(jìn)行預(yù)定的使用者操作的情況、在載物臺(tái)130上安置標(biāo)本PRT的情況等情況下,縮略圖像獲取單元153對(duì)縮略圖像拍攝控制器143進(jìn)行縮略圖像拍攝以及各種設(shè)定條件的請(qǐng)求。另外,縮略圖像獲取單元153從圖像處理單元152獲取從縮略圖像拍攝控制器143 輸出至圖像處理單元152以進(jìn)行處理的與縮略圖像相對(duì)應(yīng)的數(shù)據(jù)(下文稱為縮略圖像數(shù)據(jù))??s略圖像獲取單元153可將所獲取的縮略圖像數(shù)據(jù)存儲(chǔ)在存儲(chǔ)單元(未示出)中。 另外,縮略圖像獲取單元153可將所獲取的縮略圖像數(shù)據(jù)通過(guò)通信單元(未示出)輸出至設(shè)置在外部站點(diǎn)的圖像數(shù)據(jù)存儲(chǔ)服務(wù)器等。換句話說(shuō),縮略圖像獲取單元153還可起縮略圖像輸出單元的作用。放大圖像獲取單元IM例如通過(guò)使用CPU、ROM、RAM、通信單元等來(lái)實(shí)現(xiàn)。在對(duì)顯微鏡100進(jìn)行預(yù)定的使用者操作的情況、在對(duì)標(biāo)本PRT的縮略圖像的拍攝結(jié)束的情況等情況下,放大圖像獲取單元1 對(duì)放大圖像拍攝控制器144進(jìn)行放大圖像拍攝以及各種設(shè)定條件的請(qǐng)求。另外,放大圖像獲取單元IM獲取放大圖像拍攝控制器144輸出的與放大圖像相對(duì)應(yīng)的數(shù)據(jù)(下文稱為放大圖像數(shù)據(jù))。放大圖像獲取單元1 可將所獲取的放大圖像數(shù)據(jù)存儲(chǔ)在存儲(chǔ)單元(未示出)中。另外,放大圖像獲取單元IM可將所獲取的放大圖像數(shù)據(jù)通過(guò)通信單元(未示出)輸出至設(shè)置在外部站點(diǎn)的圖像數(shù)據(jù)存儲(chǔ)服務(wù)器等。上文對(duì)根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100的概略配置進(jìn)行了說(shuō)明。在根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100中,在根據(jù)縮略圖像獲取單元153所獲取的縮略圖像數(shù)據(jù)通過(guò)圖像處理單元 152來(lái)確定要獲取放大圖像的放大部分圖像獲取區(qū)域時(shí),從放大部分圖像獲取區(qū)域中去除呈現(xiàn)了除活體樣本之外的物體的區(qū)域。因此,可僅獲取必然呈現(xiàn)活體樣本的區(qū)域的放大圖像,從而可減少獲取放大圖像所需的時(shí)間,或減少存儲(chǔ)虛擬切片的存儲(chǔ)單元的容量。下文將結(jié)合圖5對(duì)顯微鏡100的虛擬切片生成過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。<2.虛擬切片生成過(guò)程〉圖5為顯微鏡100的虛擬切片生成過(guò)程的流程圖。如圖5所示,首先,總控制器 150進(jìn)行位置控制處理,將標(biāo)本PRT移動(dòng)至縮略圖像拍攝單元110,以獲取縮略圖像(S100)。 在位置控制處理中,首先,位置控制器151的目標(biāo)位置確定單元151a將攝像器件113的攝像范圍內(nèi)的包括整個(gè)標(biāo)本PRT的位置確定為目標(biāo)位置。隨后,載物臺(tái)圖像獲取單元151b獲取整個(gè)攝像范圍內(nèi)的載物臺(tái)圖像,并將載物臺(tái)圖像輸出給載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c,其中, 載物臺(tái)圖像通過(guò)縮略圖像拍攝控制器143由攝像器件113以預(yù)定時(shí)間間隔拍攝。載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c檢測(cè)載物臺(tái)圖像獲取單元151b輸入的載物臺(tái)圖像中的標(biāo)記13 至134d的位置。接著,載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c計(jì)算目標(biāo)位置與載物臺(tái)130 之間的差,并將該差輸出至載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142,從而可根據(jù)該差、通過(guò)載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu) 135來(lái)移動(dòng)載物臺(tái)130。在步驟SlOO中,如果標(biāo)本PRT被移動(dòng)到縮略圖像拍攝單元110,則縮略圖像拍攝單元110獲取縮略圖像(SllO)。在根據(jù)該實(shí)施方式的縮略圖像的獲取過(guò)程中,圖像處理單元152檢測(cè)攝像器件113所拍攝和獲取的圖像中的蓋玻片的邊緣,并將圖像的被去除了邊緣呈現(xiàn)區(qū)域的區(qū)域確定為放大部分圖像獲取區(qū)域。隨后,縮略圖像獲取單元153將放大部分圖像獲取區(qū)域與描述樣本上的信息的標(biāo)簽的對(duì)應(yīng)數(shù)據(jù)設(shè)定為縮略圖像。
將結(jié)合圖6至圖11對(duì)縮略圖像獲取過(guò)程進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。如上,縮略圖像拍攝單元 110包括作為光源111的明視場(chǎng)照明裝置和暗視場(chǎng)照明裝置。如圖6所示,通過(guò)使用各照明裝置拍攝圖像而獲得的信息存在不同。在采用明視場(chǎng)照明裝置的情況下,光從標(biāo)本PRT的下部(相對(duì)于標(biāo)本PRT,攝像器件113的相對(duì)側(cè))照射到標(biāo)本PRT上。因此,對(duì)于透光的部分,可獲取設(shè)置在標(biāo)本PRT上的物體(例如,活體樣本314、蓋玻片、異物等)的形狀。但是, 由于不透光的部分(例如,標(biāo)簽212)呈現(xiàn)暗色,標(biāo)簽212的書(shū)面內(nèi)容可能無(wú)法在視覺(jué)上識(shí)別。另一方面,在采用暗視場(chǎng)照明裝置的情況下,從上側(cè)照射標(biāo)本PRT。此時(shí),可從攝像器件113所拍攝的圖像中獲取標(biāo)本PRT中存在光散射的部分的信息。由于光散射例如出現(xiàn)在蓋玻片的邊緣等,例如,如圖6的左下側(cè)所示,用于覆蓋切片上的活體樣本而安置的蓋玻片的邊緣2M在暗視場(chǎng)像220中呈現(xiàn)白色。另外,如圖7所示,在封固劑滲出(ooze)的情況下,封固劑滲出區(qū)域呈現(xiàn)白色。另外,由于從標(biāo)本PRT的上側(cè)進(jìn)行照明,還可獲取標(biāo)簽 222的書(shū)面內(nèi)容。如圖8所示,例如,可使用LED環(huán)狀照明裝置114作為暗視場(chǎng)照明裝置。LED環(huán)狀照明裝置114設(shè)置在標(biāo)本PRT與攝像器件113之間,以從標(biāo)本PRT的上側(cè)將光照射在標(biāo)本 PRT上?;蛘撸墒褂靡粋€(gè)LED條形照明裝置或多個(gè)LED條形照明裝置作為暗視場(chǎng)照明裝置。例如,如圖9所示,四個(gè)LED條形照明裝置116a至116d沿標(biāo)本PRT的外圍布置在標(biāo)本 PRT與攝像器件113之間,以從標(biāo)本PRT的上側(cè)將光照射在標(biāo)本PRT上。因此,光照射在標(biāo)本PRT的上表面?zhèn)?,從而可識(shí)別蓋玻片的邊緣或標(biāo)簽的書(shū)面內(nèi)容。此處,光具有短波長(zhǎng)的光易于散射(換句話說(shuō),具有高散射率)、長(zhǎng)波長(zhǎng)的光不易散射(換句話說(shuō),具有低散射率)的特性。散射率隨波長(zhǎng)的不同而不同的散射稱為瑞利散射。在瑞利散射中,散射率與波長(zhǎng)的四次方成反比。如圖10所示,當(dāng)暗視場(chǎng)照明裝置的光入射到蓋玻片的邊緣部分上時(shí),入射光在邊緣部分散射。光的散射越多,可更好地將散射率的變化差作為光影差(light shade difference)進(jìn)行攝像。因此,可清楚檢測(cè)邊緣部分。以這種方式,由于對(duì)表面狀態(tài)或邊緣部分狀態(tài)的檢測(cè)程度隨著散射率的差而改變,因此優(yōu)選通過(guò)使用具有高散射率的短波長(zhǎng)光來(lái)進(jìn)行暗視場(chǎng)照明(例如,藍(lán)色、紫色、白色等)。另外, 雖然對(duì)采用LED照明裝置作為暗視場(chǎng)照明裝置的示例進(jìn)行了說(shuō)明,但本發(fā)明的實(shí)施方式并不限于該示例。例如,可采用激光器作為暗視場(chǎng)照明裝置。根據(jù)該實(shí)施方式的圖像處理單元152通過(guò)使用縮略圖像拍攝單元110所獲取的明視場(chǎng)像210和暗視場(chǎng)像220來(lái)生成縮略圖像??s略圖像生成過(guò)程如圖11所示。如圖11所示,在縮略圖像生成過(guò)程中,首先,暗視場(chǎng)照明裝置獲取暗視場(chǎng)像 (Slll)。如果安置在載物臺(tái)130上的標(biāo)本PRT通過(guò)載物臺(tái)驅(qū)動(dòng)控制器142被移動(dòng)到縮略圖像獲取單元110的攝像部分,則總控制器150指示照明控制器141開(kāi)啟暗視場(chǎng)照明裝置。如果暗視場(chǎng)照明裝置開(kāi)啟,則攝像器件113獲取暗視場(chǎng)像。隨后,照明控制器141關(guān)閉暗視場(chǎng)照明裝置。縮略圖像拍攝控制器143將從攝像器件113輸出的暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)輸出至總控制器150的圖像處理單元152。此處,在獲取暗視場(chǎng)像時(shí),在切片傾斜或切片的厚度不規(guī)則的情況下,難以調(diào)焦, 從而在更換用于生成虛擬切片的切片時(shí),必須進(jìn)行調(diào)焦。因此,根據(jù)該實(shí)施方式的縮略圖像拍攝單元110可包括測(cè)量切片傾角或厚度的測(cè)量?jī)x器。
例如,考慮通過(guò)測(cè)量?jī)x器來(lái)測(cè)量切片的傾角的情況。如圖12所示,在縮略圖像拍攝單元110中,在攝像器件113和其上安置有蓋玻片161的載玻片160之間設(shè)置兩個(gè)成像透鏡116a和116b。另外,在縮略圖像拍攝單元110的成像透鏡116a和116b之間設(shè)置鏡 114。另外,縮略圖像拍攝單元110包括光源(例如,激光二極管)119和透鏡118,光源119 從與成像透鏡116a和116b的光軸基本垂直的方向?qū)⒐庹丈湓阽R114上,透鏡118將光源 119發(fā)出的光轉(zhuǎn)換為平行光。如圖12所示,為了測(cè)量載玻片160的傾角,攝像器件113在成像透鏡116a從連接攝像器件113和載玻片160的直線暫時(shí)退出的狀態(tài)下拍攝載玻片160。如果對(duì)通過(guò)攝像而獲取的圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行監(jiān)測(cè),則在載玻片160傾斜的情況下,可理解,載玻片160中的成像透鏡116b的光點(diǎn)位置從基準(zhǔn)位置(d = f θ )產(chǎn)生偏移。因此,可計(jì)算切片的傾角,并且,例如通過(guò)在消除傾角的方向上傾斜載物臺(tái)130來(lái)校正載玻片160的傾斜,從而可獲取高對(duì)比度觀測(cè)圖像。另外,例如,在測(cè)量?jī)x器測(cè)量載玻片160和蓋玻片161的總厚度的情況下,如圖13 所示,例如,當(dāng)成像透鏡116a在軸向方向上移動(dòng)以使光點(diǎn)直徑最小化時(shí),測(cè)量?jī)x器測(cè)量成像透鏡116a的位置。由于當(dāng)焦點(diǎn)與蓋玻片161的表面重合時(shí)光點(diǎn)直徑最小化,因此對(duì)光點(diǎn)直徑最小化時(shí)成像透鏡116a的位置進(jìn)行測(cè)量,并計(jì)算與相關(guān)位置相對(duì)應(yīng)的載玻片160和蓋玻片161的總厚度。成像透鏡116a的位置與總厚度之間的關(guān)系預(yù)先存儲(chǔ)在存儲(chǔ)單元(未示出)中,從而參照存儲(chǔ)單元,測(cè)量?jī)x器可根據(jù)測(cè)出的成像透鏡116a的位置來(lái)獲取載玻片 160和蓋玻片161的總厚度。由于采用測(cè)量?jī)x器測(cè)量載玻片160的傾角或厚度,因此總控制器150可計(jì)算載玻片160與基準(zhǔn)位置的差并進(jìn)行校正,在基準(zhǔn)位置上,可獲取高對(duì)比度圖像。如圖11所示,圖像處理單元152在從縮略圖像拍攝控制器143輸入的暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中檢測(cè)蓋玻片的邊緣(S112)。在步驟Slll中,如果標(biāo)本PRT由暗視場(chǎng)照明裝置進(jìn)行照明,則光在蓋玻片的邊緣被散射。出于此原因,在暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中,蓋玻片的邊緣被視為光。 圖像處理單元152檢測(cè)暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中呈現(xiàn)為光的部分作為蓋玻片的邊緣。另外,圖像處理單元152可從暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中獲取附著在標(biāo)本PRT上的標(biāo)簽的書(shū)面內(nèi)容(標(biāo)簽信息)(S113)。由于在暗視場(chǎng)照明裝置中觀測(cè)到散射光,歸因于相對(duì)于標(biāo)簽從上部照射的光的散射,因此標(biāo)簽信息呈現(xiàn)在暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中。因此,圖像處理單元152從暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中獲取標(biāo)簽信息。如果從暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中獲取蓋玻片的邊緣和標(biāo)簽信息,則隨后可由明視場(chǎng)照明裝置獲取明視場(chǎng)像(S114)。首先,總控制器150指示照明控制器141開(kāi)啟明視場(chǎng)照明裝置。 如果明視場(chǎng)照明裝置開(kāi)啟,則攝像器件113獲取明視場(chǎng)像。隨后,照明控制器141關(guān)閉明視場(chǎng)照明裝置。縮略圖像拍攝控制器143將從攝像器件113輸出的明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)輸出至總控制器150的圖像處理單元152。例如,如圖6的左上部所示,可從明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中識(shí)別出諸如活體樣本214或蓋玻片216的邊緣等的存在于載玻片上的物體。在識(shí)別出的物體中,其圖像要被作為放大圖像獲取的物體僅為活體樣本214。諸如蓋玻片216的邊緣的其他物體是噪聲,并非要獲取放大圖像且作為虛擬切片存儲(chǔ)的物體。因此,圖像處理單元152通過(guò)使用明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)和暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)來(lái)進(jìn)行確定將要被獲取放大圖像的放大部分圖像獲取區(qū)域的處理(S115)。
更具體地,圖像處理單元152根據(jù)從暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中檢測(cè)出的蓋玻片的邊緣位置來(lái)計(jì)算明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中蓋玻片的邊緣位置。隨后,圖像處理單元152通過(guò)使用明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中蓋玻片的邊緣位置處的內(nèi)部區(qū)域執(zhí)行區(qū)域確定,以確定放大部分圖像獲取區(qū)域。另外, 在沒(méi)有正確執(zhí)行區(qū)域確定,或?qū)⒁獪y(cè)量蓋玻片的整個(gè)內(nèi)部表面的情況下,可采用確定明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中蓋玻片的邊緣位置處的整個(gè)內(nèi)部區(qū)域作為放大部分圖像獲取區(qū)域的方法。隨后,圖像處理單元152生成縮略圖像(S116)。圖像處理單元152以對(duì)應(yīng)的方式將明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中的放大部分圖像獲取區(qū)域內(nèi)的圖像(即,包括活體樣本214的圖像)和暗視場(chǎng)像中的標(biāo)簽222的圖像設(shè)為縮略圖像。所生成的縮略圖像可存儲(chǔ)于存儲(chǔ)單元(未示出)中。這樣,在步驟SllO中,在載物臺(tái)130移動(dòng)到目標(biāo)位置的狀態(tài)下,總控制器150通過(guò)縮略圖像拍攝控制器144和攝像器件113獲取縮略圖像,隨后處理進(jìn)行到下一步驟S120。另外,在暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中,不僅可檢測(cè)蓋玻片161的邊緣,還可檢測(cè)載玻片160上的異物。圖14示出縮略圖像拍攝單元110獲取的暗視場(chǎng)像的示例。如圖14所示,暗視場(chǎng)像220中呈現(xiàn)出標(biāo)簽222、蓋玻片的邊緣2M和異物225。由于異物225不是活體樣本而是噪聲,因此優(yōu)選地,可消除異物的信息,以生成縮略圖像。因此,在根據(jù)該實(shí)施方式的圖像處理單元152中,利用明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)和暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)之間的差消除在明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中與活體樣本一起出現(xiàn)的異物,從而可更清楚地顯現(xiàn)縮略圖像的活體樣本。另外,圖像處理單元152 可設(shè)有對(duì)異物的數(shù)量進(jìn)行計(jì)數(shù)的功能。因此,可進(jìn)行以下處理在異物的數(shù)量經(jīng)檢測(cè)等于或大于預(yù)定閾值的情況下,發(fā)出警報(bào),并提示再次進(jìn)行攝像。另外,除了蓋玻片161的邊緣2M外,還可能在暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中檢測(cè)到從蓋玻片 161滲出的封固劑。圖7示出縮略圖像拍攝單元100獲取的暗視場(chǎng)像的示例。如圖7所示, 暗視場(chǎng)像220中顯現(xiàn)出標(biāo)簽222、蓋玻片161的邊緣2M和封固劑227。在蓋玻片161相對(duì)偏離載玻片160的情況下,或封固劑227的量較大的情況下,封固劑227可能會(huì)滲出。在這種情況下,具體地,在蓋玻片161偏離的情況下,如圖15所示,可將蓋玻片161的邊緣2M 以及封固劑滲出區(qū)域所包圍的封閉區(qū)域228的內(nèi)部區(qū)域確定為放大部分圖像獲取區(qū)域。另外,除了蓋玻片161的邊緣2 外,還可能在暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中檢測(cè)到蓋玻片161 和載玻片160的劃痕。劃痕不是活體樣本,而是噪聲,因此優(yōu)選地,在縮略圖像的生成過(guò)程中消除劃痕的信息。因此,在根據(jù)該實(shí)施方式的圖像處理單元152中,利用明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)和暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)之間的差消除在明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)中與活體樣本一起出現(xiàn)的劃痕,從而可更清楚地顯現(xiàn)縮略圖像的活體樣本。另外,在檢測(cè)出的劃痕為有意設(shè)置的情況下,例如,在存在劃線字符229的情況下,如圖16所示,該信息可被積極地使用。在某些情況下,由于將劃線字符2 作為標(biāo)簽222的信息的代替物,從而可在縮略圖像生成過(guò)程中獲取劃線字符2 作為標(biāo)簽信息。返回圖5,在步驟SllO中,如果獲取了縮略圖像,則根據(jù)縮略圖像將劃分區(qū)域分配給活體樣本(S120)。總控制器150根據(jù)縮略圖像來(lái)檢測(cè)載物臺(tái)130中活體樣本的位置,以將劃分區(qū)域分配給活體樣本。劃分區(qū)域?yàn)閿z像器件1 獲取放大部分圖像的攝像單位區(qū)域。隨后,為了獲取放大部分圖像,總控制器150執(zhí)行將標(biāo)本PRT移動(dòng)至放大圖像拍攝單元120的位置控制處理(S130)。在步驟S130的位置控制處理中,首先,位置控制器151 的目標(biāo)位置確定單元151a根據(jù)縮略圖像將分配給活體樣本的劃分區(qū)域的位置確定為目標(biāo)位置。隨后,載物臺(tái)圖像獲取單元151b獲取劃分區(qū)域的放大部分圖像,并將放大部分圖像輸出至載物臺(tái)位置檢測(cè)單元151c(S140),其中,放大部分圖像由攝像器件IM通過(guò)放大圖像拍攝控制器144以預(yù)定時(shí)間間隔拍攝。此處,在獲取放大部分圖像時(shí),在切片傾斜或切片的厚度不規(guī)則的情況下,難以調(diào)焦,因此,在更換用于生成虛擬切片的切片時(shí)必須進(jìn)行調(diào)焦。因此,與縮略圖像拍攝單元110 相似,根據(jù)該實(shí)施方式的放大圖像拍攝單元120還可包括測(cè)量切片傾角或厚度的測(cè)量?jī)x
ο例如,考慮通過(guò)測(cè)量?jī)x器測(cè)量切片的傾角的情況。如圖17所示,在放大圖像拍攝單元120中,在攝像器件IM和安置有蓋玻片161的載玻片160之間設(shè)置物鏡123和成像透鏡126。另外,放大圖像拍攝單元120的物鏡123和成像透鏡1 之間設(shè)置有鏡125c。另外,放大圖像拍攝單元120包括光源(例如,激光二極管)125a和透鏡12 ,光源12 從與物鏡123和成像透鏡126的光軸基本垂直的方向?qū)⒐庹丈湓阽R125c上,透鏡12 將光源 12 發(fā)出的光轉(zhuǎn)換為平行光。與圖12相似,如圖17所示,為了測(cè)量載玻片160的傾角,攝像器件IM在物鏡123 從連接攝像器件IM和載玻片160的直線暫時(shí)退出的狀態(tài)下拍攝載玻片160的圖像。如果對(duì)通過(guò)攝像而獲取的圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行監(jiān)測(cè),則在載玻片160傾斜的情況下,可理解,載玻片 160內(nèi)成像透鏡1 的光點(diǎn)位置從基準(zhǔn)位置(d = f θ )產(chǎn)生偏移。因此,可計(jì)算載玻片160 的傾角,并且,例如通過(guò)在消除傾角的方向傾斜載物臺(tái)130,可對(duì)載玻片160的傾斜進(jìn)行校正,從而可獲取高對(duì)比度觀測(cè)圖像。另外,例如,在通過(guò)測(cè)量?jī)x器測(cè)量載玻片160和蓋玻片161的總厚度的情況下,如圖18所示,例如,測(cè)量?jī)x器在軸向方向上移動(dòng)物鏡123,并在光點(diǎn)直徑最小時(shí)測(cè)量物鏡123 的位置。由于當(dāng)焦點(diǎn)與蓋玻片161的表面重合時(shí)光點(diǎn)直徑最小,因此測(cè)量光點(diǎn)直徑最小時(shí)物鏡123的位置,并計(jì)算與相關(guān)位置相對(duì)應(yīng)的載玻片160和蓋玻片161的總厚度。由于物鏡123的位置與總厚度之間的關(guān)系預(yù)先存儲(chǔ)在存儲(chǔ)單元(未示出)中,因此測(cè)量?jī)x器可參照存儲(chǔ)單元根據(jù)物鏡123的測(cè)量位置來(lái)獲取載玻片160和蓋玻片161的總厚度。由于通過(guò)測(cè)量?jī)x器測(cè)量載玻片160的傾角或厚度,因此總控制器150可計(jì)算載玻片160的位置與基準(zhǔn)位置的差并進(jìn)行校正,在基準(zhǔn)位置上,可獲取高對(duì)比度圖像。返回圖5,如果獲取了一個(gè)劃分區(qū)域的放大部分圖像,則總控制器150確定是否已獲取放大部分圖像獲取區(qū)域內(nèi)的所有劃分區(qū)域的放大部分圖像(S150)。隨后,在尚未獲取所有放大部分圖像的情況下,從步驟S130開(kāi)始重復(fù)處理。另一方面,在步驟S150中確定所有劃分區(qū)域的放大部分圖像都已獲取的情況下,關(guān)于這些放大部分圖像進(jìn)行成像,以生成放大圖像(S160),處理結(jié)束。[成像透鏡的切換和照明系統(tǒng)的協(xié)作]此處,在放大圖像拍攝單元120獲取放大圖像時(shí),存在這樣的問(wèn)題光源的能量在照明光學(xué)系統(tǒng)的視場(chǎng)光闌中丟失。如圖19所示,光源121發(fā)出的光由聚光透鏡121a轉(zhuǎn)換為平行光,穿過(guò)視場(chǎng)光闌U8a,穿過(guò)場(chǎng)鏡127和聚光透鏡122,并照射在載玻片160上。隨后,攝像器件1 檢測(cè)穿過(guò)載玻片160、穿過(guò)物鏡123的光,并通過(guò)成像透鏡126a在攝像器件124的攝像面IM上成像,以生成圖像數(shù)據(jù)。一般來(lái)說(shuō),放大圖像拍攝單元120通過(guò)切換物鏡來(lái)改變所獲取的放大圖像的放大率。但是,根據(jù)該實(shí)施方式的放大圖像拍攝控制器144識(shí)別成像透鏡的切換,并通過(guò)改變照明光學(xué)系統(tǒng)的視場(chǎng)光闌和聚光透鏡的焦距而改變視場(chǎng)光闌的光闌尺寸。因此,可不通過(guò)視場(chǎng)光闌的光量被最小化,從而可有效地利用光源121的能量。另外,優(yōu)選地,視場(chǎng)光闌的孔徑形狀是與攝像器件的尺寸和縱橫比相對(duì)應(yīng)的矩形。
更具體地,根據(jù)使用者的命令,成像透鏡126a例如可切換為成像透鏡126b,從而可改變所獲取的放大圖像的放大率。在這種情況下,放大圖像拍攝控制器144將照明光學(xué)系統(tǒng)的視場(chǎng)光闌128a改變?yōu)榕c切換之后的成像透鏡126b相對(duì)應(yīng)的視場(chǎng)光闌128b。另外, 放大圖像拍攝控制器144根據(jù)切換之后的成像透鏡126b和視場(chǎng)光闌128b在透鏡的軸向方向上移動(dòng)聚光透鏡121a,以改變光源121的聚光透鏡121a的焦距,從而將光轉(zhuǎn)換為與視場(chǎng)光闌128b的直徑相對(duì)應(yīng)的平行光。成像透鏡、視場(chǎng)光闌以及聚光透鏡的焦距的組合被預(yù)先設(shè)定,并存儲(chǔ)在存儲(chǔ)單元 (未示出)中。如果成像透鏡被切換,則放大圖像拍攝控制器144參照存儲(chǔ)單元來(lái)獲取與切換之后的成像透鏡相對(duì)應(yīng)的視場(chǎng)光闌和聚光透鏡121a的焦距,并執(zhí)行視場(chǎng)光闌的切換以及聚光透鏡121a的移動(dòng)。必須減少曝光時(shí)間,以獲得高吞吐量。因此,需要使用能有效利用光源121的能量的系統(tǒng)。根據(jù)該實(shí)施方式,根據(jù)成像透鏡來(lái)改變視場(chǎng)光闌和聚光透鏡的位置,從而在不使用放大率的情況下使光源121的能量得以有效利用。因此,可以以高吞吐量進(jìn)行攝像。上文對(duì)根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡中的虛擬切片生成過(guò)程進(jìn)行了說(shuō)明。根據(jù)該實(shí)施方式,在確定將要被獲取放大圖像的放大部分圖像獲取區(qū)域時(shí),通過(guò)使用明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)和暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)從放大部分圖像獲取區(qū)域中去除除活體樣本之外的物體,從而限制將要被獲取放大部分圖像的區(qū)域。因此,由于可減少?zèng)]有出現(xiàn)活體樣本的放大部分圖像的獲取量,放大部分圖像獲取處理的負(fù)荷減少,從而可有效進(jìn)行放大圖像的獲取。[攝像器件傾角和位置的測(cè)量]在上述描述中,盡管對(duì)顯微鏡100所包括的用于測(cè)量載玻片160的傾角或厚度的測(cè)量?jī)x器進(jìn)行了說(shuō)明,但類似地,攝像器件的傾角或位置也可以通過(guò)測(cè)量?jī)x器進(jìn)行測(cè)量。下文將結(jié)合圖20至圖22對(duì)通過(guò)測(cè)量?jī)x器測(cè)量攝像器件的傾角或位置的方法進(jìn)行說(shuō)明。另外, 圖20為攝像器件的傾角測(cè)量示意圖。圖21為攝像器件的位置測(cè)量示意圖。圖22為同時(shí)測(cè)量攝像器件的傾角和位置的示意圖。在圖20至圖22中,盡管對(duì)放大圖像拍攝單元120 的攝像器件124的傾角或位置測(cè)量進(jìn)行了說(shuō)明,但對(duì)于縮略圖像拍攝單元110的攝像器件 113,攝像器件113的傾角或位置也可通過(guò)相同方法測(cè)量。首先,考慮對(duì)攝像器件124的傾角進(jìn)行測(cè)量。如圖20所示,在放大圖像拍攝單元 120的攝像器件124和安置有蓋玻片161的載玻片160之間設(shè)置物鏡123和成像透鏡126。 另外,放大圖像拍攝單元120的物鏡123和成像透鏡126之間設(shè)置有鏡125c。另外,光源 (例如,激光二極管)125a和將光源125a發(fā)出的光轉(zhuǎn)換為平行光的透鏡125b設(shè)置在放大圖像拍攝單元120中。由透鏡125b轉(zhuǎn)換為平行光的光通過(guò)分光鏡125d而從與物鏡123和成像透鏡126的光軸基本垂直的方向照射在鏡125c上。另外,攝像器件129和將光聚焦在攝像器件129上的成像透鏡125e設(shè)置在鏡125c的關(guān)于分光鏡125d的相對(duì)側(cè)上。如圖20所示,為了測(cè)量攝像器件124的傾角,攝像器件129在成像透鏡126從連接攝像器件124和載玻片160的直線暫時(shí)退出的狀態(tài)下拍攝攝像器件124的圖像。如果對(duì)通過(guò)攝像而獲取的圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行監(jiān)測(cè),則在攝像器件124傾斜的情況下,可理解,攝像器件 124內(nèi)成像透鏡125e的光點(diǎn)位置從基準(zhǔn)位置(d = f θ )產(chǎn)生偏移。因此,計(jì)算攝像器件124 的傾角,并且例如,通過(guò)在消除傾角的方向上傾斜攝像器件124,可對(duì)傾斜進(jìn)行校正,從而可獲取高對(duì)比度觀測(cè)圖像。另外,例如,在通過(guò)測(cè)量?jī)x器測(cè)量攝像器件124的軸向位置的情況下,如圖21所示,測(cè)量?jī)x器例如在軸向上移動(dòng)成像透鏡126或攝像器件124。隨后,由于焦點(diǎn)與攝像器件 124的表面重 合時(shí)光點(diǎn)直徑最小,因此可對(duì)光點(diǎn)直徑最小時(shí)攝像器件124的位置進(jìn)行測(cè)量。 將成像透鏡126或攝像器件124移動(dòng)到光點(diǎn)直徑最小化的位置,使總控制器150可計(jì)算攝像器件124的位置與基準(zhǔn)位置的差并進(jìn)行校正,在基準(zhǔn)位置上,可獲取高對(duì)比度圖像。另外,如圖22所示,可同時(shí)測(cè)量攝像器件124的傾角和位置。這種情況下,如圖22 所示,成像透鏡126c和126d以及分光鏡126e和126f設(shè)置在攝像器件124與鏡125c之間的光路上。從光源125a通過(guò)鏡125c引導(dǎo)的光的一部分由分光鏡126f引導(dǎo)至成像透鏡 126d,使攝像器件124上形成圖像。另外,光的其他部分由分光鏡126f引導(dǎo)至分光鏡126e, 并進(jìn)一步由分光鏡126e引導(dǎo)至成像透鏡126c,使攝像器件124上形成圖像。在具有該配置的放大圖像拍攝單元120內(nèi),例如,在成像透鏡126c和126d的其中之一(例如,成像透鏡126c)退出光路時(shí),攝像器件124在軸向上移動(dòng)。可從所獲取的圖像數(shù)據(jù)中識(shí)別光點(diǎn)直徑相對(duì)于基準(zhǔn)位置的偏移以及光點(diǎn)直徑的尺寸。因此,由于可同時(shí)測(cè)量攝像器件124的傾角或位置,從而可高效地執(zhí)行該項(xiàng)作業(yè)。<3.硬件配置示例〉根據(jù)該實(shí)施方式的顯微鏡100的總控制器150所執(zhí)行的處理可由硬件或軟件執(zhí)行。在這種情況下,如圖23所示,總控制器150可被配置為計(jì)算機(jī)。下文將結(jié)合圖23對(duì)根據(jù)該實(shí)施方式的總控制器150的硬件配置的一個(gè)示例進(jìn)行說(shuō)明。如上,根據(jù)該實(shí)施方式的總控制器150可由諸如計(jì)算機(jī)的處理單元來(lái)實(shí)現(xiàn)。如圖 3所示,總控制器150包括CPU(中央處理器)101、R0M(只讀存儲(chǔ)器)102、RAM(隨機(jī)存取存儲(chǔ)器)103和主機(jī)總線104a。另外,總控制器150包括橋104、外部總線104b、接口 105、輸入單元106、輸出單元107、存儲(chǔ)單元(HDD) 108、驅(qū)動(dòng)器109、連接端口 111和通信單元113。CPU 101起計(jì)算處理單元和控制單元的作用,以根據(jù)各種程序來(lái)控制總控制器 150的整體操作。另外,CPU 101可為微處理器。ROM 102存儲(chǔ)CPU 101使用的程序、計(jì)算參數(shù)等。RAM 103臨時(shí)存儲(chǔ)CPU 101運(yùn)行過(guò)程中使用的程序、運(yùn)行過(guò)程中適當(dāng)改變的參數(shù)等。 這些部件由配置有CPU總線等的主機(jī)總線104a互相連接。主機(jī)總線104a通過(guò)橋104與諸如PCI (外圍部件互連接口 )總線的外部總線104b 連接。另外,主機(jī)總線104a、橋104和外部總線104b不一定互相單獨(dú)配置,這些功能可嵌入一個(gè)總線中。輸入單元106被配置為包括使用者用于輸入信息的輸入裝置(例如,鼠標(biāo)、鍵盤(pán)、 觸板、按鈕、麥克風(fēng)、開(kāi)關(guān)、控制桿)以及根據(jù)使用者的輸入生成輸入信號(hào)并將輸入信號(hào)輸出給CPU 101的輸入控制電路等。輸出單元107例如包括諸如液晶顯示(IXD)裝置、 OLED(有機(jī)發(fā)光二極管)裝置、燈的顯示單元,以及諸如揚(yáng)聲器的音頻輸出裝置。存儲(chǔ)單元108為總控制器150的存儲(chǔ)單元的一個(gè)示例,用于存儲(chǔ)數(shù)據(jù)。存儲(chǔ)單元 108可包括存儲(chǔ)介質(zhì)、用于在存儲(chǔ)介質(zhì)上記錄數(shù)據(jù)的記錄單元、用于讀取存儲(chǔ)介質(zhì)上的數(shù)據(jù)的讀取單元、用于清除存儲(chǔ)介質(zhì)中記錄的數(shù)據(jù)的清除單元等。存儲(chǔ)單元108例如被配置為 HDD(磁盤(pán)驅(qū)動(dòng)器)。存儲(chǔ)單元108驅(qū)動(dòng)硬盤(pán)以存儲(chǔ)CPU 101所執(zhí)行的程序或各種數(shù)據(jù)。 驅(qū)動(dòng)器109為存儲(chǔ)介質(zhì)的讀寫(xiě)器,且被嵌入總控制器150或者外在地附接至總控制器150。驅(qū)動(dòng)器109讀取安裝的可移動(dòng)記錄介質(zhì)(諸如磁盤(pán)、光盤(pán)、磁光盤(pán)或半導(dǎo)體存儲(chǔ)器)內(nèi)記錄的信息,并將信息輸出給RAM 103。連接端口 111為連接到外部設(shè)備的接口,是能夠例如通過(guò)USB(通用串行總線)等傳輸數(shù)據(jù)的外部設(shè)備連接端口。另外,通信單元113為配置有通信裝置的通信接口,通信裝置例如用于連接到通信網(wǎng)絡(luò)10等。另外,通信單元113可為適于無(wú)線LAN(局域網(wǎng))的通信單元、適于無(wú)線USB的通信單元、或進(jìn)行有線通信的有線通信單元。例如,在前述實(shí)施方式中,當(dāng)要生成縮略圖像時(shí),盡管在獲取暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)之后獲取明視場(chǎng)像數(shù)據(jù),但本發(fā)明并不限于該示例。例如,可在獲取明視場(chǎng)像數(shù)據(jù)之后獲取暗視場(chǎng)像數(shù)據(jù)。本發(fā)明包含的主題與2010年7月2日在日本專利局提交的日本在先專利申請(qǐng)JP 2010-152367中公開(kāi)的主題相關(guān),其全部?jī)?nèi)容結(jié)合入本文作為參考。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解,只要處于所附權(quán)利要求的范圍或其等同物的范圍內(nèi),可根據(jù)設(shè)計(jì)要求或其他因素進(jìn)行各種修改、組合、子組合和改變。
權(quán)利要求
1.一種顯微鏡,包括對(duì)標(biāo)本進(jìn)行照明的暗視場(chǎng)照明裝置和明視場(chǎng)照明裝置,在所述標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;攝像單元,通過(guò)拍攝所述暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本來(lái)獲取暗視場(chǎng)像,并通過(guò)拍攝所述明視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取明視場(chǎng)像;以及放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,用于根據(jù)所述攝像單元所獲取的所述暗視場(chǎng)像和所述明視場(chǎng)像來(lái)檢測(cè)所述標(biāo)本中所述蓋玻片的邊緣,并將檢測(cè)出的所述蓋玻片的邊緣的內(nèi)部區(qū)域確定為所述樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯微鏡,其中,所述放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元計(jì)算顯現(xiàn)所述暗視場(chǎng)像的所述蓋玻片的邊緣的位置,并將所述明視場(chǎng)像中的與從所述暗視場(chǎng)像計(jì)算的所述邊緣的位置相對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為所述放大部分圖像獲取區(qū)域。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯微鏡,其中,所述放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元計(jì)算顯現(xiàn)所述暗視場(chǎng)像的所述蓋玻片的邊緣的位置,并對(duì)所述明視場(chǎng)像中的與從所述暗視場(chǎng)像計(jì)算的所述邊緣的位置相對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將所述區(qū)域確定的結(jié)果確定為所述放大部分圖像獲取區(qū)域。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的顯微鏡,進(jìn)一步包括標(biāo)簽圖像獲取單元,從所述暗視場(chǎng)像獲取附著在所述載玻片上的指示樣本信息的標(biāo)簽的標(biāo)簽圖像;以及縮略圖像輸出單元,以對(duì)應(yīng)的方式輸出所述明視場(chǎng)像的樣本獲取區(qū)域中的圖像和所述標(biāo)簽圖像。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯微鏡,進(jìn)一步包括噪聲消除單元,所述噪聲消除單元根據(jù)所述暗視場(chǎng)像和所述明視場(chǎng)像之間的差分信息來(lái)消除所述放大部分圖像獲取區(qū)域中的噪聲。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯微鏡,其中,所述暗視場(chǎng)照明裝置為L(zhǎng)ED照明裝置。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的顯微鏡,其中,所述暗視場(chǎng)照明裝置為激光器。
8.一種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝由暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本來(lái)獲取暗視場(chǎng)像,在所述標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝由明視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取明視場(chǎng)像; 根據(jù)所述暗視場(chǎng)像檢測(cè)所述標(biāo)本中的所述蓋玻片的邊緣;以及在所述明視場(chǎng)像中,將檢測(cè)出的所述蓋玻片的邊緣的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為所述樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
9.一種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝由暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本來(lái)獲取暗視場(chǎng)像,在所述標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝由明視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取明視場(chǎng)像; 根據(jù)所述暗視場(chǎng)像檢測(cè)所述標(biāo)本中的所述蓋玻片的邊緣;以及對(duì)于所述明視場(chǎng)像,對(duì)檢測(cè)出的所述蓋玻片的邊緣的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將區(qū)域確定結(jié)果確定為所述樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
10.一種顯微鏡,包括對(duì)標(biāo)本進(jìn)行照明的暗視場(chǎng)照明裝置和明視場(chǎng)照明裝置,在所述標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;攝像單元,通過(guò)拍攝由所述暗視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取暗視場(chǎng)像,并通過(guò)拍攝由所述明視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取明視場(chǎng)像;以及放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,根據(jù)所述攝像單元所獲取的所述暗視場(chǎng)像和所述明視場(chǎng)像,檢測(cè)所述標(biāo)本的所述蓋玻片的噪聲分量,從所述明視場(chǎng)像中消除檢測(cè)出的所述噪聲分量,并將結(jié)果確定為所述樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的顯微鏡,其中,所述噪聲分量為所述蓋玻片的邊緣。
12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的顯微鏡,其中,所述噪聲分量為所述封固劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的顯微鏡,其中,所述噪聲分量為附著的異物。
14.一種顯微鏡,包括對(duì)標(biāo)本進(jìn)行照明的暗視場(chǎng)照明裝置和明視場(chǎng)照明裝置,在所述標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;攝像單元,通過(guò)拍攝由所述暗視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取暗視場(chǎng)像,并通過(guò)拍攝由所述明視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取明視場(chǎng)像;以及放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,根據(jù)所述攝像單元所獲取的所述暗視場(chǎng)像和所述明視場(chǎng)像,檢測(cè)所述標(biāo)本中所述蓋玻片的封固劑滲出區(qū)域,并將檢測(cè)出的所述封固劑滲出區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域確定為所述樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的顯微鏡,其中,所述放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元計(jì)算顯現(xiàn)所述暗視場(chǎng)像的所述封固劑滲出區(qū)域的位置,并將所述明視場(chǎng)像中的與從所述暗視場(chǎng)像計(jì)算的所述封固劑滲出區(qū)域的位置相對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為所述放大部分圖像獲取區(qū)域。
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的顯微鏡,其中,所述放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元計(jì)算顯現(xiàn)所述暗視場(chǎng)像的所述封固劑滲出區(qū)域的位置,對(duì)所述明視場(chǎng)像中的與從所述暗視場(chǎng)像計(jì)算的所述封固劑滲出區(qū)域的位置相對(duì)應(yīng)的位置處的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將所述區(qū)域確定的結(jié)果確定為所述放大部分圖像獲取區(qū)域。
17.根據(jù)權(quán)利要求14的顯微鏡,進(jìn)一步包括標(biāo)簽圖像獲取單元,從所述暗視場(chǎng)像獲取附著在所述載玻片上的指示樣本信息的標(biāo)簽的標(biāo)簽圖像;以及縮略圖像輸出單元,以對(duì)應(yīng)的方式輸出所述明視場(chǎng)像的樣本獲取區(qū)域中的圖像和所述標(biāo)簽圖像。
18.根據(jù)權(quán)利要求14所述的顯微鏡,進(jìn)一步包括噪聲消除單元,所述噪聲消除單元根據(jù)所述暗視場(chǎng)像和所述明視場(chǎng)像之間的差分信息來(lái)消除所述放大部分圖像獲取區(qū)域中的噪聲。
19.根據(jù)權(quán)利要求14所述的顯微鏡,其中,所述暗視場(chǎng)照明裝置為L(zhǎng)ED照明裝置。
20.根據(jù)權(quán)利要求14所述的顯微鏡,其中,所述暗視場(chǎng)照明裝置為激光器。
21.—種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝由暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本來(lái)獲取暗視場(chǎng)像,在所述標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝由明視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取明視場(chǎng)像; 根據(jù)所述暗視場(chǎng)像檢測(cè)所述標(biāo)本中的封固劑滲出區(qū)域;以及在所述明視場(chǎng)像中,將檢測(cè)出的所述封固劑滲出區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域的整個(gè)表面確定為所述樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
22.—種區(qū)域確定方法,包括通過(guò)拍攝由暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本來(lái)獲取暗視場(chǎng)像,在所述標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;通過(guò)拍攝由明視場(chǎng)照明裝置照明的所述標(biāo)本來(lái)獲取明視場(chǎng)像; 根據(jù)所述暗視場(chǎng)像檢測(cè)所述標(biāo)本中的封固劑滲出區(qū)域;以及在所述明視場(chǎng)像中,對(duì)檢測(cè)出的所述封固劑滲出區(qū)域的內(nèi)部區(qū)域進(jìn)行區(qū)域確定,并將所述區(qū)域確定的結(jié)果確定為所述樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種顯微鏡及區(qū)域確定方法,該顯微鏡包括對(duì)標(biāo)本進(jìn)行照明的暗視場(chǎng)照明裝置和明視場(chǎng)照明裝置,在該標(biāo)本中,安置在載玻片上的樣本由蓋玻片和封固劑覆蓋;攝像單元,通過(guò)拍攝暗視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取暗視場(chǎng)像,并通過(guò)拍攝明視場(chǎng)照明裝置照明的標(biāo)本的圖像而獲取明視場(chǎng)像;以及放大部分圖像獲取區(qū)域確定單元,根據(jù)攝像單元所獲取的暗視場(chǎng)像和明視場(chǎng)像檢測(cè)標(biāo)本中蓋玻片的邊緣,并將檢測(cè)出的蓋玻片的邊緣的內(nèi)部區(qū)域確定為樣本的放大部分圖像獲取區(qū)域。
文檔編號(hào)G02B21/36GK102313982SQ201110174640
公開(kāi)日2012年1月11日 申請(qǐng)日期2011年6月24日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月2日
發(fā)明者山腰隆道, 松延剛 申請(qǐng)人:索尼公司
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