專利名稱：具有氯苯降解能力的皮式羅爾斯頓菌h2及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株可高效降解氯苯及其衍生物的氯苯降解菌一皮式羅爾斯頓菌 H2及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
氯苯是一種易揮發(fā)的單環(huán)鹵代芳香類化合物，廣泛用于染料、塑料、香料、醫(yī)藥、農(nóng) 藥、有機(jī)合成的中間體；用于制造苯酚、硝基氯苯、苯胺以及殺蟲劑DDT;還用于制取溶劑 和橡膠助劑、油漆、快干墨水及干洗劑等，是環(huán)境中分布較廣、難生物降解的一類有毒有機(jī) 化合物。氯苯類化合物具有生物積累性和生物毒性，對(duì)人體具有致癌作用，被美國(guó)環(huán)保局 (EPA)列入優(yōu)先控制污染物名單。生物降解技術(shù)具有反應(yīng)條件溫和、運(yùn)行費(fèi)用低和無(wú)二次污 染等特點(diǎn)，是降解該類物質(zhì)最有效的方法之一。采用生物技術(shù)降解氯苯關(guān)鍵之一便是獲得具有高效降解氯苯能力的優(yōu)良菌株。 目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已對(duì)氯苯類化合物的生物降解進(jìn)行了大量的研究，但由于氯苯易揮發(fā) 和難于生物降解，迄今為止，已分離到氯苯降解菌種類還比較有限，主要包括假單胞菌 (Pseudomonas)、氣單胞菌(Aeromonas)鏈球菌屬(Streptococcus)、考克氏菌(Kocuria)、 紅球菌(Rhodococcus)、芽孢桿菌(Bacillus)、節(jié)桿菌(Arthrobacter)、寡食單胞菌 (Stenotrophomonas)等。此外，已分離到的菌株降解效率也有待于進(jìn)一步提高。經(jīng)檢索有關(guān)專利文獻(xiàn)，尚未見本發(fā)明中在好氧條件下應(yīng)用羅爾斯頓菌(Ralstonia Pickettii)降解氯苯的報(bào)道。該降解菌的發(fā)現(xiàn)對(duì)氯苯生物凈化的工程實(shí)踐具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一株高效、快速降解氯苯類化合物的菌株及其應(yīng)用。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是一株氯苯降解菌——皮式羅爾斯頓菌(Ralstonia pickettii strain)H2，保藏于 中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，地址湖北省武漢市珞珈山武漢大學(xué)，430072，保藏日期2009年 11 月 4 日，保藏號(hào)為 CCTCC No =M 209250。所述皮式羅爾斯頓菌H2生物學(xué)特征如下菌落呈淡乳白色，圓形，邊緣整齊，光滑 濕潤(rùn)，直徑為0. 5 Imm ；電鏡觀察，大小為(0. 4 0. 6) μ mX (0. 9 1. 3) μ m，無(wú)鞭毛，無(wú) 芽孢；電子顯微鏡下菌體形態(tài)為短桿菌，革蘭氏染色陰性，氧化酶陽(yáng)性。所述皮式羅爾斯頓菌H2的16S rDNA序列如下(Genebank的登錄號(hào)為GQ906999)CATGCAAGTCGAACGGCAGCATGATCTAGCTTGCTAGATTGATGGCGAGTGGCGAACGGGTG
AGTAATACATCGGAACGTGCCCTGTAGTGGGGGATAACTAGTCGAAAGATTAGCTAATACCGCATACGACCTGAGGGTGAAAGTGGGGGACCGCAAGGCCTCATGCTATAGGAGCGGCCGATGTCTGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGGCGACGATCAGTAGCTGGTCTGAGAGGACGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATTTTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGCCTT
4
CGGGTTGTAAAGCACTTTTGTCCGGAAAGAAATGGCTCTGGTTAATACCTGGGGTCGATGACGGTACCGGAAGAATAAGGACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTCCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGTGCGCAGGCGGTTGTGCAAGACCGATGTGAAATCCCCGAGCTTAACTTGGGAATTGCATTGGTGACTGCACGGCTAGAGTGTGTCAGAGGGGGGTAGAATTCCACGTGTAGCAGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAATACCGATGGCGAAGGCAGCCCCCTGGGATAACACTGACGCTCATGCACGAGAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCCTAAACGATGTCAACTAGTTGTTGGGGATTCATTTCCTTAGTAACGTAGCTAACGCGTGAAGTTGACCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGACCCGCACAAGCGGTGGATGATGTGGATTAATTCGATGCAACGCGAAAAACCTTACCTACCCTTGACATGCCACTAACGAAGCAGAGATGCATTAGGTGCTCGAAAGAGAAAGTGGACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCTCTAGTTGCTACGAAAGGGCACTCTAGAGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTATGGGTAGGGCTTCACACGTCATACAATGGTGCATACAGAGGGTTGCCAAGCCGCGAGGTGGAGCTAATCCCAGAAAATGCATCGTAGTCCGGATCGTAGTCTGCAACTCGACTACGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGTCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGCTTTACCAGAAGTAGTTAGCCTAACCGCAAGGAGGGCGATTACCACGGTAGGGTTCATGACTGGGGtGAAGTCGT。本發(fā)明還涉及所述的皮式羅爾斯頓菌H2在微生物降解氯苯類化合物或其衍生物 中的應(yīng)用，所述氯苯類化合物或其衍生物為下列之一氯苯、二氯苯及苯、苯酚、氯苯酚。優(yōu)選的，所述降解在20 38°C、pH 5 9下進(jìn)行。更為優(yōu)選的，所述降解在30°C、 PH 7下進(jìn)行。所述降解優(yōu)選在酵母浸膏存在下進(jìn)行。本發(fā)明菌株在純培養(yǎng)條件下，能將低于100mg/L的氯苯在20小時(shí)內(nèi)完全降解，對(duì) 氯苯的最高降解濃度可達(dá)220mg/L，添加酵母浸膏(添加量為20 150mg/L)對(duì)降解具有明 顯的促進(jìn)作用，對(duì)100mg/L的氯苯添加酵母浸膏(20 150mg/L)，降解速率可從4. 8mg/L/h 提高至6. 7mg/L/h。該菌株降解污染物具有一定的廣譜性，除可降解氯苯外，還可降解二氯 苯、苯、苯酚、氯苯酚等芳香族化合物。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在提供了一株高效、快速降解氯苯類化合物的菌株 該菌株降解污染物具有一定的廣譜性，該菌株對(duì)氯苯具有更高效的降解能力，對(duì)降解氯代 芳香族族化合物及其衍生物具有一定的廣譜性，在工業(yè)廢氣和廢水的生物凈化中具有很好 的應(yīng)用前景。


圖 1 為 Ralstonia pickettii strainH2 的透射電鏡照片；圖2為不同溫度下菌Ralstoniapickettii strainH2生長(zhǎng)和對(duì)氯苯的降解曲線；圖3為不同pH下菌Ralstonia pickettii strainH2生長(zhǎng)和對(duì)氯苯的降解曲線；圖4、圖5為菌Ralstonia pickettii strainH2對(duì)不同初始濃度的氯苯的降解和 生長(zhǎng)曲線；圖6為菌Ralstoniapickettii strainH2在添加酵母浸膏條件下氯苯降解和生長(zhǎng)曲線；圖7為菌Ralstoniapickettii strainH2在添加酵母浸膏條件下對(duì)氯苯降解速率 的影響。圖8為菌Ralstoniapickettii strainH2對(duì)二氯苯、苯、苯酚、氯苯酚降解率。 具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步描述，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅限于 此實(shí)施例1 :Ralstonia pickettii strainH2的分離、純化及其鑒定1. Ralstonia pickettii strainH2 的分離及純化Ralstoniapickettii strainH2是采集某凈化氯苯廢氣的生物滴濾床填料表面的 生物膜，經(jīng)分離純化得到的一株革蘭氏陰性菌。具體步驟如下從生物滴濾床中取兩顆填料，用30mL無(wú)菌水將生物膜洗于搖瓶中，置于搖床 160rpm，3(TC振蕩1小時(shí)。然后利用氯苯降解菌篩選培養(yǎng)基進(jìn)行菌株篩選。氯苯降解菌 篩選培養(yǎng)基成分=KH2PO4,0. 5g ；Na2HPO4. 12Η20，0. 5g ； (NH4) 2S04，2g ；Mg SO4 · 6H20，0. Ig ； CaCl2,0. Olg ；MnSO4 · H20,0. 13mg ；ZnCl2,0. 23mg ；CuSO4 · H20,0. 03mg ；CoCl2 · 6H20,0. 42mg ； Na2MoO4 · 2Η20，0· 15mg ；AlCl3 · 6Η20，0· 05mg ；瓊脂，15g ；蒸溜水，IOOOmL ；pH 7. O 7. 5。氯 苯另外添加200mg/L。按照菌株分離純化的常規(guī)方法，在恒溫培養(yǎng)箱30°C培養(yǎng)3 5天， 挑取平板上長(zhǎng)出的單菌落，得到多株純菌。將篩選到的多株氯苯降解菌在含有氯苯為唯一碳源的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基中考察菌株 對(duì)氯苯的去除效果，通過同空白實(shí)驗(yàn)的對(duì)照，結(jié)果得到了一株高效降解氯苯的菌株H2。所 用的培養(yǎng)基成分為=KH2PO4,0. 5g ；Na2HPO4. 12H20，0. 5g ； (NH4)2S04, 2g ；Mg SO4 · 7Η20，0· Ig ； CaCl2,0. Olg, MnSO4 · H20,0. 13mg ；ZnCl2,0. 23mg ；CuSO4 · H20,0. 03mg ；CoCl2 · 6H20,0. 42mg ； Na2MoO4 ·2Η20，0. 15mg ；AlCl3 · 6Η20，0· 05mg ；蒸溜水補(bǔ)足至 IOOOmL ；pH 7. O 7. 5。氯苯另 外添加，0. 2g/L。2. Ralstonia pickettii strainH2 的 16S rDNA 鑒定通過16S rRNA序列分析和Biolog微生物鑒定系統(tǒng)鑒定，確定H2菌為Ralstonia pickettii strain。具體步驟如下采用3S柱離心式環(huán)境樣品DNA回收試劑盒(V2. 2，上海申能博彩生物科技有限公 司)提取Ralstonia pickettii strainH2的DNA，4°C保存。然后作為PCR反應(yīng)的模板，設(shè) 計(jì)引物，擴(kuò)增Ralstonia pickettii strainH2的全序列DNA，上下游引物序列分別如下BSF8/20 5' -AGAGT TTGAT CCTGG CTCAG-3'BSR1541/20 5' -AAGGA GGTGA TCCAG CCGCA-3'PCR反應(yīng)程序設(shè)定為先94°C預(yù)變性4min ；然后94°C變性lmin，59°C退火lmin， 72°C延伸1. 5min，循環(huán)35個(gè)周期；然后72°C延伸IOmin ；最后4°C保持lOmin。將PCR產(chǎn)物 進(jìn)行測(cè)序(上海英濰捷基)，測(cè)序結(jié)果見序列表。將H2的16S rDNA序列上傳到Genbank，獲得Genbank的登錄號(hào)GQ906999，同時(shí)同 Genbank中的基因序列進(jìn)行同源性比較，發(fā)現(xiàn)其屬于Ralstonia屬，然后通過系統(tǒng)發(fā)育樹的 建立，H2可能為Ralstonia pickettii。為了進(jìn)一步確定鑒定結(jié)果，通過Biolog鑒定系統(tǒng)的分析，最終確定H2為Ralstonia pickettii。實(shí)施例2 =Ralstonia pickettii H2對(duì)氯苯生物降解性能檢測(cè)1.不同溫度下菌Ralstonia pickettii H2對(duì)氯苯的生物降解特性在不同溫度下實(shí)施Ralstonia pickettii H2對(duì)氯苯的降解實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其在25 38°C具有較高的降解苯系化合物的能力，從實(shí)際應(yīng)用角度看，30°C為最佳溫度，此時(shí)去除率 最高，具體實(shí)施步驟如下分別取 150mL 無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基(KH2PO4,0. 5g ；Na2HPO4. 12Η20，0. 5g ； (NH4) 2S04，2g ； Mg SO4 · 7H20,0. Ig ；CaCl2,0. Olg, MnSO4 · H20,0. 13mg ；ZnCl2,0. 23mg ；CuSO4 · H20,0. 03mg ； CoCl2 · 6Η20，0· 42mg ；Na2MoO4 · 2Η20，0· 15mg ；AlCl3 · 6Η20，0· 05mg ；蒸溜水補(bǔ)足至 IOOOmL) 分裝至14個(gè)500mL的厭氧瓶中，滅菌。分成兩組，每組7瓶，其中一組每瓶加入新鮮培養(yǎng) 的H2的菌懸液，OD600為0. 15，接種量為2mL/150mL，以氯苯為唯一碳源，氯苯的初始濃度為 100mg/L。分別置于 15°C、20°C、25°C、30°C、35°C、38°C、40°C 的搖床中 160rpm 培養(yǎng)；另外 7 瓶同樣的未接菌的培養(yǎng)基分別置于對(duì)應(yīng)的溫度同時(shí)培養(yǎng)，作為空白對(duì)照。培養(yǎng)36h后，取樣 氣相檢測(cè)氯苯的濃度，同時(shí)測(cè)定菌株的菌密度，繪制氯苯的去除率曲線圖及H2的生長(zhǎng)曲線 圖。結(jié)果如圖3所示，表明在溫度為15°C時(shí)，菌株對(duì)苯系化合物的去除率較低。隨著溫 度的逐漸提高，菌株對(duì)苯系化合物的去除率也隨之提高；在溫度為20 38°C時(shí)為該菌株較 為適宜生長(zhǎng)的溫度，菌株的生長(zhǎng)和對(duì)氯苯的去除率都達(dá)到了較高的值 ’溫度30°C和35°C時(shí) 達(dá)到了最大值，36h對(duì)氯苯的去除率高達(dá)97. 5%。隨著溫度的進(jìn)一步提高，菌株的生長(zhǎng)和降 解能力又受到抑制。2.不同pH下菌Ralstoniapickettii H2對(duì)氯苯的降解特性在不同pH下實(shí)施Ralstonia pickettii H2對(duì)氯苯的降解實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明其最佳 的生長(zhǎng)降解PH值為7，具體實(shí)施方案如下在7個(gè)500mL的厭氧瓶中加入150mL等量的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，氯苯作為唯一碳源，初 始濃度為100mg/L，分別調(diào)節(jié)pH至4、5、6、7、8、9、10 ；同時(shí)準(zhǔn)備7瓶相同的培養(yǎng)基作為空白 對(duì)照。均接種2mL 0D600為0. 15的新鮮培養(yǎng)的H2菌懸液，在30°C，160rpm下培養(yǎng)。分別 在Oh，36h取樣，檢測(cè)培養(yǎng)基中的氯苯濃度變化和菌株的菌密度，繪制氯苯去除率曲線圖及 H2的生長(zhǎng)曲線圖。結(jié)果如圖4所示，在pH為4、5、9、10時(shí)，H2對(duì)氯苯去除效率較差。在？!1為4、10 的培養(yǎng)液中，溶液較澄清，同空白溶液一樣，表明菌株生長(zhǎng)十分不好。在pH為5 9的條件 下，細(xì)菌都能以氯苯為唯一碳源生長(zhǎng)，只是生長(zhǎng)和降解速率有所不同，在PH為7時(shí)，菌株H2 的生長(zhǎng)和降解速率最快，36h對(duì)氯苯的去除率高達(dá)100%。3.菌Ralstoniapickettii H2對(duì)不同初始濃度的氯苯的降解情況在不同氯苯初始濃度下，實(shí)施H2對(duì)氯苯的降解，結(jié)果發(fā)現(xiàn)H2對(duì)氯苯的耐受濃度為 250mg/L。具體實(shí)施方案如下在500mL的厭氧瓶中加入150mL的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，氯苯作為唯一碳源。氯苯的初 始濃度為 10、25、50、80、100、150、200、220、250mg/L。分別接種等量 2mL OD600 為 0. 15 的菌 懸液，30°C，160rpm培養(yǎng)，間隔一段時(shí)間取樣，繪制H2對(duì)氯苯的降解曲線圖以及H2的生長(zhǎng)曲 線圖。
從圖5可以看出在氯苯濃度低于250mg/L時(shí)，H2可快速地降解氯苯，細(xì)菌生長(zhǎng)良 好，而在250mg/L時(shí)，菌株生長(zhǎng)和降解受到明顯抑制。4.菌Ralstoniapickettii strain H2在添加酵母浸膏(YE)條件下氯苯降解情況添加不同濃度的酵母浸膏(北京雙旋微生物培養(yǎng)基制品廠)，實(shí)施對(duì)氯苯的降解， 結(jié)果發(fā)現(xiàn)酵母浸膏的添加對(duì)H2降解氯苯有明顯的促進(jìn)作用。具體實(shí)施方案如下在500mL的厭氧瓶中加入150mL的無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基，氯苯的初始濃度為100mg/L， 分別添加10、20、50、100、150mg/L的YE，分別接種等量2mL OD600為0. 15的菌懸液，30°C， 160rpm培養(yǎng)，間隔一段時(shí)間取樣，繪制H2對(duì)氯苯的降解曲線圖及H2的生長(zhǎng)曲線圖。從圖6可看出添加YE后，10mg/L的YE對(duì)H2降解氯苯?jīng)]有促進(jìn)作用，20、50、100、 150mg/L的YE都對(duì)H2降解氯苯有明顯的促進(jìn)作用，并且YE的濃度越高，促進(jìn)作用越明顯。從圖7可看出添加不同濃度YE后，H2對(duì)氯苯的降解速率有了明顯的提高，并且YE 的濃度越高，降解效率提高的越顯著。實(shí)施例3 =Ralstonia pickettii H2對(duì)苯、二氯苯、苯酚、氯苯酚的生物降解性能檢 測(cè)分別取150mL無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基分裝至8個(gè)500mL的厭氧瓶中，滅菌。分成2組，每 組4瓶，其中一組每瓶加入新鮮培養(yǎng)的H2的菌懸液，OD600為0. 15，接種量為2mL/150mL，分 別以初始濃度50mg/L的苯/ 二氯苯/苯酚/氯苯酚為唯一碳源。分別置于30°C的搖床中 160rpm培養(yǎng)；另外4瓶同樣的未接菌的培養(yǎng)基分別置于對(duì)應(yīng)的溫度同時(shí)培養(yǎng)，作為空白對(duì) 照。培養(yǎng)36h后，取樣分別氣相色譜檢測(cè)苯/ 二氯苯，液相色譜檢測(cè)苯酚/氯苯酚的濃度， 結(jié)果如圖8顯示，36h菌H2對(duì)二氯苯、苯、苯酚、氯苯酚的去除率分別為93%、72%、67%、 52%。
8
權(quán)利要求
一株氯苯降解菌——皮式羅爾斯頓菌(Ralstonia pickettii strain)H2，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，地址湖北省武漢市珞珈山武漢大學(xué)，430072，保藏日期2009年11月4日，保藏號(hào)為CCTCC NoM209250。
2.如權(quán)利要求1所述的皮式羅爾斯頓菌H2，其特征在于所述皮式羅爾斯頓菌H2生物 學(xué)特征如下菌落呈淡乳白色，圓形，邊緣整齊，光滑濕潤(rùn)，直徑為0. 5 Imm ；電鏡觀察，大 小為(0.4 0.6) μ mX (0.9 1.3) μ m，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢；電子顯微鏡下菌體形態(tài)為短桿 菌，革蘭氏染色陰性，氧化酶陽(yáng)性。
3.如權(quán)利要求1所述的皮式羅爾斯頓菌H2，其特征在于所述皮式羅爾斯頓菌H2的16S rDNA序列如下CATGCAAGTCGAACGGCAGCATGATCTAGCTTGCTAGATTGATGGCGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATACATCGGAACGTGCCCTGTAGTGGGGGATAACTAGTCGAAAGATTAGCTAATACCGCATACGACCTGAGGGTGAAAGTGGGGGACCGCAAGGCCTCATGCTATAGGAGCGGCCGATGTCTGATTAGCTAGTTGGTGAGGTAAAGGCTCACCAAGGCGACGATCAGTAGCTGGTCTGAGAGGACGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATTTTGGACAATGGGCGAAAGCCTGATCCAGCAATGCCGCGTGTGTGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGCACTTTTGTCCGGAAAGAAATGGCTCTGGTTAATACCTGGGGTCGATGACGGTACCGGAAGAATAAGGACCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGTCCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGTGCGCAGGCGGTTGTGCAAGACCGATGTGAAATCCCCGAGCTTAACTTGGGAATTGCATTGGTGACTGCACGGCTAGAGTGTGTCAGAGGGGGGTAGAATTCCACGTGTAGCAGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAATACCGATGGCGAAGGCAGCCCCCTGGGATAACACTGACGCTCATGCACGAGAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCCTAAACGATGTCAACTAGTTGTTGGGGATTCATTTCCTTAGTAACGTAGCTAACGCGTGAAGTTGACCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGATTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGACCCGCACAAGCGGTGGATGATGTGGATTAATTCGATGCAACGCGAAAAACCTTACCTACCCTTGACATGCCACTAACGAAGCAGAGATGCATTAGGTGCTCGAAAGAGAAAGTGGACACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCTCTAGTTGCTACGAAAGGGCACTCTAGAGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCCTTATGGGTAGGGCTTCACACGTCATACAATGGTGCATACAGAGGGTTGCCAAGCCGCGAGGTGGAGCTAATCCCAGAAAATGCATCGTAGTCCGGATCGTAGTCTGCAACTCGACTACGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGTCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGCTTTACCAGAAGTA GTTAGCCTAACCGCAAGGAGGGCGATTACCACGGTAGGGTTCATG ACTGGGGtGAAGTCGT。
4.如權(quán)利要求1所述的皮式羅爾斯頓菌H2在微生物降解氯苯類化合物或其衍生物中 的應(yīng)用，所述氯苯類化合物或其衍生物為下列之一氯苯、二氯苯、苯、苯酚、氯苯酚。
5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述降解在20 38°C、pH5 9下進(jìn)行。
6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于所述降解在30°C、pH7下進(jìn)行。
7.如權(quán)利要求4 6之一所述的應(yīng)用，其特征在于所述降解在酵母浸膏存在下進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明提供了一株可高效降解氯苯及其衍生物的氯苯降解菌——皮式羅爾斯頓菌H2及其應(yīng)用。所述皮式羅爾斯頓菌(Ralstoniapickettii strain)H2，保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，地址湖北省武漢市珞珈山武漢大學(xué)，430072，保藏日期2009年11月4日，保藏號(hào)為CCTCC NoM 209250。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在提供了一株高效、快速降解氯苯類化合物的菌株該菌株降解污染物具有一定的廣譜性，該菌株對(duì)氯苯具有更高效的降解能力，對(duì)降解氯代芳香族族化合物及其衍生物具有一定的廣譜性，在工業(yè)廢氣和廢水的生物凈化中具有很好的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A62D101/22GK101880642SQ20101018133
公開日2010年11月10日 申請(qǐng)日期2010年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月25日
發(fā)明者冷守琴, 張麗麗, 朱潤(rùn)曄, 王家德, 蔣軼鋒, 陳建孟 申請(qǐng)人:浙江工業(yè)大學(xué)