專利名稱：一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油的方法，尤其涉及到一種以南極磷蝦中的磷脂酰膽堿為原料經(jīng)酶法催化制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，并將其復(fù)配得到高品質(zhì)南極磷蝦油的方法。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有技術(shù)中，有關(guān)磷脂酰絲氨酸的制備方法有多種，其中以提取法和酶轉(zhuǎn)化法為主。提取法是從動(dòng)物磷脂中提取磷脂酰絲氨酸，主要以動(dòng)物的大腦為原料。專利CN1583766A 就是以動(dòng)物腦為原料提取磷脂酰絲氨酸。但由于瘋牛病等原因，其產(chǎn)品安全性遭到懷疑， 現(xiàn)已被淘汰。近年來(lái)用大豆卵磷脂為原料酶法制備磷脂酰絲氨酸已經(jīng)被廣泛使用，例如專利CN101230365A，但是這個(gè)專利形成的產(chǎn)品中并不含有多不飽和雙鍵長(zhǎng)鏈脂肪?；牧字＝z氨酸。專利CN101818179A是以兩步酶法從普通的卵磷脂合成含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，普通卵磷脂中的磷脂不含Omega-3多不飽和脂肪?；?，其第一步酶催化反應(yīng)是采用磷脂酶Al、A2或脂肪酶催化含多不飽和雙鍵的脂肪酸與卵磷脂中的磷脂酰膽堿生成含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿，繼而采用磷脂酶D催化絲氨酸與含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A的反應(yīng)，最終生成含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，該發(fā)明的不足之處在于原料卵磷脂和多不飽和脂肪酸均為復(fù)雜的混合物，其中的磷脂酰膽堿和多不飽和脂肪酸的有效含量均不高，在未經(jīng)高度濃縮的情況下，這兩種原料中的有效含量一般不超過(guò)50 %，而在磷脂酶A2或特定于SN2位的脂肪酶的催化下生成目標(biāo)產(chǎn)物 SN2位為含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿的概率很低，從而導(dǎo)致了最終生成的產(chǎn)物中含有的多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的濃度更低，這不利于最終產(chǎn)品的品質(zhì)， 如果要提高產(chǎn)品中多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的有效成份濃度，會(huì)嚴(yán)重增加生產(chǎn)成本。專利CN100402656C是以提取自魚(yú)肝中的磷脂為原料，專利CN101157946A以提取自魷魚(yú)中的磷脂為原料，采用磷脂酶D酶法催化魚(yú)肝中的磷脂酰膽堿或魷魚(yú)中的磷脂酰膽堿與L-絲氨酸反應(yīng)制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，其中魚(yú)肝磷脂和魷魚(yú)磷脂中的富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A，是制備含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的優(yōu)良原料，但這兩種原料來(lái)源有限，不利于規(guī)?；a(chǎn)。本發(fā)明人經(jīng)多年研究探索，發(fā)現(xiàn)南極磷蝦中或南極磷蝦油中的磷脂類化合物含有極為豐富的二十碳五烯酸 EPA和二十二碳六烯酸DHA，是Omega-3多不飽和脂肪酸的豐富來(lái)源，這些Omega-3多不飽和脂肪酸主要是結(jié)合在磷脂化合物分子的Sn2位，形成Sn2位為富含多不飽和脂肪?；牧字渲懈缓嗖伙柡椭觉；牧字Ｄ憠A約占南極磷蝦油總磷脂含量的30-40%，而南極磷蝦總磷脂中的磷脂酰絲氨酸的含量卻很低，約只占磷脂含量的到3%左右。因此將南極磷蝦中的富含多不飽和脂肪?；牧字Ｄ憠A轉(zhuǎn)化為富含多不飽和脂肪?；牧字＝z氨酸是一項(xiàng)非常有意義的課題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)不足之處而提供一種將現(xiàn)有南極磷蝦中的磷脂酰膽堿轉(zhuǎn)化為磷脂酰絲氨酸的制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油方法。本發(fā)明的目的還提供一種從現(xiàn)有南極磷蝦油制備富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿的方法。本發(fā)明的目的還提供一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的方法。本發(fā)明的目的通過(guò)以下措施來(lái)實(shí)現(xiàn)—種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油方法， 其特殊之處在于，制備經(jīng)過(guò)下列步驟步驟一，對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃取得到磷脂酰膽堿和含有維生素A、維生素 E和蝦青素的油脂；步驟二，配制酶催化反應(yīng)體系，所述反應(yīng)體系為水相反應(yīng)體系；步驟三，將步驟二的反應(yīng)體系加入到反應(yīng)器中，在氮?dú)猸h(huán)境中、溫度為35 55攝氏度，投入磷脂梅D后持續(xù)機(jī)械攪拌，攪拌時(shí)間1 15小時(shí)；步驟四，將步驟三所得反應(yīng)液重復(fù)萃取2 3次，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸；步驟五，將步驟四所得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸與步驟一獲得的含維生素A、維生素E和蝦青素的油脂混合得高品質(zhì)南極磷蝦油，完成制備。步驟一所述萃取為現(xiàn)有南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器中混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、0 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0. 5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A。步驟一所述取得的磷脂酰膽堿是為富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A族， 該磷脂酰膽堿族含有十幾個(gè)磷脂酰膽堿分子系列，其中每一個(gè)分子系列的化學(xué)結(jié)構(gòu)有以下相同和不同⑴在甘油基的3位即Sn-3上都連接一個(gè)膽堿；(2)在甘油基的1位Sn-I和 2位Sn-2上各自連接一個(gè)脂肪?；?，而在2位Sn-2上通常連接一個(gè)含多不飽和雙鍵的長(zhǎng)鏈脂肪酰基，所述的富含多不飽和雙鍵脂肪?；浜x為Sn-2位連接的脂肪?；杏懈哂?5%以上的脂肪酰基含有2個(gè)以上的不飽和雙鍵，或其含義為Sn-2位連接的脂肪酰基中有高于3%以上的脂肪?；蠴mega-3不飽和雙鍵；(3)含有的不飽和雙鍵脂肪?；?8 至22個(gè)碳原子，而雙鍵的數(shù)目通常為三至六個(gè)，所述不飽和雙鍵脂肪酰基屬Omega-3不飽和脂肪酸家族系指二十二碳六稀酸脂肪?；投嘉逑∷嶂觉；?。步驟二所述水相反應(yīng)體系為富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿、L-絲氨酸、鈣鹽和緩沖溶液配制成的水溶液反應(yīng)體系，所述水溶液反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下磷脂酰膽堿在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為100，L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2個(gè)摩爾/升，水溶液的pH值在5. 0 8. 5內(nèi)。本發(fā)明的另一個(gè)目的一種從現(xiàn)有南極磷蝦油制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A的方法，制備步驟為對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃??；所述溶劑可在下列物品中任選食品安全級(jí)的正庚烷或正己烷、食用乙醇或丙酮、或者是它們的混合物；所述萃取為現(xiàn)有南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器中混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、0 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0. 5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A。本發(fā)明的第三個(gè)目的一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的方法，制備經(jīng)過(guò)下列步驟步驟一，對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃取或直接由市場(chǎng)購(gòu)得磷脂酰膽堿；所述萃取按下列步驟萃取溶劑可在下列物品中任選食品安全級(jí)的正庚烷或正己烷、食用乙醇或丙酮、或者是它們的混合物；所述萃取為現(xiàn)有南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器中混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、0 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0. 5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿；步驟二，配制酶催化反應(yīng)體系，包括水相反應(yīng)體系或水相與有機(jī)溶劑相組成的兩相反應(yīng)體系；步驟三，將步驟二得水溶液反應(yīng)體系加入到反應(yīng)器中，在氮?dú)猸h(huán)境中、溫度為 35 55攝氏度，投入磷脂梅D后持續(xù)機(jī)械攪拌，繼持時(shí)間1 15小時(shí)后，將所得反應(yīng)液重復(fù)萃取2 3次，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，完成制備。所述水相反應(yīng)體系由現(xiàn)有南極磷蝦油制備的富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A配制酶催化反應(yīng)體系，其由富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿、L-絲氨酸、鈣鹽和緩沖溶液配制成的水溶液反應(yīng)體系，所述水溶液反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下 磷脂酰膽堿在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為100，L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2個(gè)摩爾/升，水溶液的pH值在5. 0 8. 5內(nèi)。所述水相與有機(jī)溶劑相組成的兩相反應(yīng)體系為步驟一中市購(gòu)的磷脂酰膽堿配制酶催化反應(yīng)體系，其為先把富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A溶入C5-C9烷烴有機(jī)溶劑，后再加入到含有L-絲氨酸、鈣鹽、短鏈烴醇或短鏈烴酮和緩沖溶液配制成的水溶液中，從而形成水相和有機(jī)溶劑兩相混合的反應(yīng)體系，所述水溶液和有機(jī)溶劑兩相混合反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下磷脂酰膽堿在每升混合反應(yīng)液中加入的重量百分比為 100，L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2摩爾/升，C5-C9烷烴有機(jī)溶劑在混合反應(yīng)液中占有的體積百分比為5% 95%，短鏈烴醇或短鏈烴酮在總混合反應(yīng)液中占有體積百分比為 80%，水溶液和有機(jī)溶劑兩相混合反應(yīng)體系的pH值在5. 0 8. 5 內(nèi)。所述C5-C8烷烴有機(jī)溶劑為從下列物品中任選戊烷、己烷、環(huán)己烷、庚烷、辛烷、 壬烷、癸烷或它們的同分異構(gòu)體中的任何一種溶劑或這些溶劑以任何比例混合形成的混合溶劑。所述短鏈烴醇或短鏈烴酮為從下列物品中任選乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、丙酮、丁酮或它們的同分異構(gòu)體中的任何一種溶劑或這些溶劑以任何比例混合形成的混合溶劑。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)1)本發(fā)明的第一個(gè)優(yōu)勢(shì)是利用來(lái)源于南極磷蝦油的富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A或南極磷蝦油本身為反應(yīng)物，利用磷脂酶D生物轉(zhuǎn)化方法制備得到富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸。產(chǎn)品原料易得，反應(yīng)簡(jiǎn)單實(shí)用。2)本發(fā)明的第二個(gè)優(yōu)勢(shì)，是將多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸與南極磷蝦油或提取磷脂酰膽堿后的南極磷蝦油混合，提高南極磷蝦油產(chǎn)品中多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的含量。最終得到的產(chǎn)品可用于高級(jí)營(yíng)養(yǎng)品和保健品，也可添加入食品、藥品或化妝品中使用。


圖1為南極磷蝦磷脂酰膽堿與轉(zhuǎn)化形成的磷脂酰絲氨酸分子結(jié)構(gòu)式的異同點(diǎn)。圖2為在磷脂酶D的催化下由磷脂酰膽堿生成磷脂酰絲氨酸的反應(yīng)示意圖。為更好地理解本發(fā)明的內(nèi)容，先就圖1作說(shuō)明圖中，Sn-1、Sn-2和Sn_3分別指南極磷蝦中的磷脂中甘油酯基團(tuán)的1位、2位和3位；Rl和R2為長(zhǎng)碳鏈脂肪?；琒n-I位的-Rl常見(jiàn)的有-C15H31、-C17H35、-C17H33,若其為-C15H31,則說(shuō)明Rl來(lái)自十六碳酸或棕櫚酸，-C15H31與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)十六碳脂肪?；?，表示在Sn-I位是一個(gè)十六碳酸與甘油的Sn-I位醇形成的酯；若其為-C17H35，則說(shuō)明Rl來(lái)自十八碳酸或硬脂酸，-C17H35 與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)十八碳脂肪?；?，表示在Sn-I位是一個(gè)十八碳酸與甘油的 Sn-I位醇形成的酯；若其為-C17H33,則說(shuō)明Rl來(lái)自十八碳酸或油酸，-C17H33與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)十八碳脂肪?；硎驹赟n-I位是一個(gè)十八碳酸與甘油的Sn-I位醇形成的酯。Sn-2 位的-R2 常見(jiàn)的有-C17H31^ -C19H29, _C19H31、_C21H31、-C17H33,若其為-C17H31,則說(shuō)明R2來(lái)自十八碳二稀酸或亞油酸，-C17H31與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)十八碳二稀脂肪?；?，表示在Sn-2位是一個(gè)十八碳二稀酸與甘油的Sn-2位醇形成的酯；若其為-C19H29，則說(shuō)明R2來(lái)自二十碳五稀酸或EPA，-C19H29與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)二十碳五稀脂肪?；?表示在Sn-2位是一個(gè)二十碳五稀酸與甘油的Sn-2位醇形成的酯；若其為-C19H31,則說(shuō)明R2 來(lái)自二十碳四稀酸或花生四烯酸，-C19H31與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)二十碳四稀脂肪?；硎驹赟n-2位是一個(gè)二十碳四稀酸與甘油的Sn-2位醇形成的酯；若其為-C21H31，則說(shuō)明R2來(lái)自二十二碳六稀酸，-C21H31與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)二十二碳六稀脂肪?；?， 表示在Sn-2位是一個(gè)二十二碳六稀酸與甘油的Sn-2位醇形成的酯；若其為-C17H33,則說(shuō)明 R2來(lái)自十八碳稀酸或油酸，-C17H33與其相連的羰基基團(tuán)構(gòu)成一個(gè)十八碳稀脂肪?；?，表示在Sn-2位是一個(gè)十八碳稀酸與甘油的Sn-2位醇形成的酯。Sn_3位的-X為不同的連接基團(tuán)，若其為-CH2CH2N (CH3) 3，則表示該磷脂化合物為磷脂酰膽堿；若其為-CH2CH (NH2) C00H,則該磷脂化合物為磷脂酰絲氨酸。圖2給出了在磷脂酶D的催化下由磷脂酰膽堿生成磷脂酰絲氨酸的反應(yīng)示意圖。 在本發(fā)明公開(kāi)的反應(yīng)條件下，磷脂酶D可以催化磷脂酰膽堿生成磷脂酰絲氨酸，分子式的意義是指，一個(gè)分子的磷脂酰膽堿可以和一個(gè)分子的L-絲氨酸發(fā)生反應(yīng)，生成一個(gè)分子的磷脂酰絲氨酸同時(shí)生成一個(gè)分子的膽堿。
具體實(shí)施例方式一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油方法， 制備經(jīng)過(guò)下列步驟
步驟一，對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油采用溶劑萃取得磷脂酰膽堿和過(guò)濾液去溶劑后的油脂。所述溶劑可在下列物品中任選食品安全級(jí)的正庚烷或正己烷、食用乙醇或丙酮、或者是它們的混合物。所述萃取為南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、O 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0.5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得磷脂酰膽堿。所述取得的磷脂酰膽堿是富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂族，該磷脂酰膽堿族含有十幾個(gè)磷脂酰膽堿分子系列，其中每一個(gè)分子系列的化學(xué)結(jié)構(gòu)有以下相同和不同(1)在甘油基的3位即Sn-3上都連接一個(gè)膽堿；(2)在甘油基的1位Sn-I和2位Sn_2上各自連接一個(gè)脂肪?；?，而在2位Sn-2上通常連接一個(gè)含多不飽和雙鍵的長(zhǎng)鏈脂肪?；?，所述的富含多不飽和雙鍵脂肪酰基，其含義為Sn-2位連接的脂肪?；杏懈哂?%以上的脂肪酰基含有2個(gè)以上的不飽和雙鍵，或其含義為Sn-2位連接的脂肪?；杏懈哂?%以上的脂肪酰基含有 0mega-3不飽和雙鍵；(3)含有的不飽和雙鍵脂肪?；?8至22個(gè)碳原子，而雙鍵的數(shù)目通常為三至六個(gè)，所述不飽和雙鍵脂肪?；鶎貽mega-3不飽和脂肪酸家族系指二十二碳六稀酸脂肪?；投嘉逑∷嶂觉；?。步驟二，配制酶催化的反應(yīng)體系。所述反應(yīng)體系為水相反應(yīng)體系，其由現(xiàn)有的南極磷蝦油制取的富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A來(lái)配制，其由富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A、L-絲氨酸、鈣鹽和緩沖溶液配制成的水溶液反應(yīng)體系，所述水溶液反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下磷脂酰膽堿在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為100， L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2個(gè)摩爾/升，水溶液的pH值在 5. 0 8. 5 內(nèi)。本步驟中，L-絲氨酸商品化的生物產(chǎn)品；鈣鹽為可溶性鈣鹽，本實(shí)施例采用的是氯化鈣和硫酸鈣，在水中的濃度可為0. 1克每升至20克每升；緩沖液為常規(guī)水緩沖液， 例如磷酸鹽水緩沖液或醋酸鹽水緩沖液，一般為0至0. 2摩爾每升鹽濃度體系。步驟三，將步驟二的反應(yīng)體系加入到反應(yīng)器中，在氮?dú)猸h(huán)境中、溫度為35 55攝氏度，投入磷脂梅D后持續(xù)機(jī)械攪拌，攪拌轉(zhuǎn)速為IOOrpm，攪拌時(shí)間為2 15小時(shí)。本步驟中，磷脂酶D 是一種酶，是來(lái)源于鏈霉菌和/或植物的商品化酶制劑，如 Sigma-Aldrich 公司(St. Louis,M0, U. S. Α.)出售的磷脂酶 D (phospholipase D)，該酶也可純化自鏈霉菌的發(fā)酵液。步驟四，將步驟三所得反應(yīng)液重復(fù)萃取2 3次，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸。本步驟中萃取溶劑及萃取方法與步驟一中相同。步驟五，將步驟四所得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸與步驟一過(guò)濾液去溶劑后的油脂混合得高品質(zhì)南極磷蝦油，完成制備。按此方法制備的高品質(zhì)南極磷蝦油中的磷脂酰絲氨酸含量能高于40%。本發(fā)明的另一個(gè)目的一種從現(xiàn)有南極磷蝦油制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A的方法，制備步驟為對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃取；所述溶劑可在下列物品中任選食品安全級(jí)的正庚烷或正己烷、食用乙醇或丙酮、或者是它們的混合物；所述萃取為現(xiàn)有南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器中混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、0 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0. 5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A。
本發(fā)明的第三個(gè)目的一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的方法，制備經(jīng)過(guò)下列步驟步驟一，與從現(xiàn)有南極磷蝦油制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A的方法相同；步驟二，配制酶催化反應(yīng)體系，包括水相反應(yīng)體系或水相與有機(jī)溶劑相組成的兩相反應(yīng)體系；所述水相反應(yīng)體系為直接由由現(xiàn)有的南極磷蝦油制取的富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A來(lái)配制，該步驟與制備富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油方法的步驟二相同，所不同的是還可以采取如下措施所述水相與有機(jī)溶劑相混合而成的兩相反應(yīng)體系由市購(gòu)的磷脂酰膽堿配制，其先由磷脂酰膽堿溶入C5-C9 烷烴有機(jī)溶劑，后加入到含有L-絲氨酸、鈣鹽、短鏈烴醇或短鏈烴酮和緩沖溶液配制成的水溶液和有機(jī)溶劑兩相混合反應(yīng)體系，所述水溶液和有機(jī)溶劑兩相混合反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下磷脂酰膽堿在每升混合反應(yīng)液中加入的重量百分比為100，L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為 0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2摩爾/升，C5-C9烷烴有機(jī)溶劑在混合反應(yīng)液中占有的體積百分比為5% 95%，短鏈烴醇或短鏈烴酮在總混合反應(yīng)液中占有體積百分比為 80%，水溶液和有機(jī)溶劑兩相混合反應(yīng)體系的pH值在5. 0 8. 5內(nèi)。所述C5-C8烷烴有機(jī)溶劑為從下列物品中任選戊烷、己烷、環(huán)己烷、庚烷、辛烷、 壬烷、癸烷或它們的同分異構(gòu)體中的任何一種溶劑或這些溶劑以任何比例混合形成的混合溶劑。所述短鏈烴醇或短鏈烴酮為從下列物品中任選乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、丙酮、丁酮或它們的同分異構(gòu)體中的任何一種溶劑或這些溶劑以任何比例混合形成的混合溶劑。步驟三，將步驟二得反應(yīng)體系加入到反應(yīng)器中，在氮?dú)猸h(huán)境中、溫度為35 55攝氏度，投入磷脂梅D后持續(xù)機(jī)械攪拌，繼持時(shí)間1 15小時(shí)后，將所得反應(yīng)液重復(fù)萃取2 3次，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，完成制備。本發(fā)明采用下述分析條件多不飽和脂肪酸相對(duì)含量分析方法參考專利CN101818178A所述方法，具體的如下樣品經(jīng)適量氯仿溶解，然后經(jīng)6000rpm離心20min，將有機(jī)相層制備成20_100mg/ mL的樣品氯仿溶液，取有機(jī)相點(diǎn)于薄波層硅膠板上，然后經(jīng)展開(kāi)劑展開(kāi)，展開(kāi)劑為氯仿 水甲醇=63.5 3.5 25 (V V V)，經(jīng)2’，7’-二氯熒光素顯色，然后連同硅膠刮下磷脂酰絲氨酸所在位置的譜帶，甲酯化后經(jīng)氣相色譜儀(GC)分析，利用面積歸一法計(jì)算各種脂肪酸相對(duì)含量。色譜條件為儀器Agilent 6890氣相色譜儀檢測(cè)器氫火焰離子檢測(cè)器(FID)毛細(xì)管柱:FFAP30.OmX 2. 5mmX0. IOym進(jìn)樣口溫度220°C ；柱溫200°C ；檢測(cè)器溫度250°C ；進(jìn)樣量:1 μ L ；進(jìn)樣分流比20 1 ；氮?dú)饬魉?. 6mL/min樣品中磷脂酰膽堿，磷脂酰絲氨酸含量的分析方法如下磷脂酰膽堿和磷脂酰絲氨酸標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)買于Sigma-Aldrich公司(St. Louis, MO,U. S. A.)，其余試劑均為液相色譜純度級(jí)別。磷脂酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制取300mg磷脂酰膽堿標(biāo)準(zhǔn)品溶解于3mL氯仿溶劑中，制備出5mg/mL，10mg/mL, 20mg/mL, 40mg/mL, 80mg/mL, lOOmg/mL磷脂酰膽堿氯仿待測(cè)樣品，將該上述系列樣品經(jīng)高相液相色譜儀(HPLC)分析，繪制出磷脂酰膽堿質(zhì)量-積分面積標(biāo)準(zhǔn)曲線。待測(cè)樣品中磷脂酰膽堿含量測(cè)定待測(cè)樣品溶解于適量氯仿，然后與6000rpm下離心20min，將有機(jī)相層制備成 20-40mg/mL的樣品氯仿溶液，將該樣品經(jīng)高相液相色譜儀(HPLC)分析，根據(jù)待測(cè)樣品中磷脂酰膽堿峰積分面積，利用上述磷脂酰膽堿質(zhì)量-積分面積標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中磷脂酰膽堿的絕對(duì)含量。具體計(jì)算方法為PCPC質(zhì)量/樣品質(zhì)量X 100%磷脂酰絲氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制取300mg磷脂酰絲氨酸標(biāo)準(zhǔn)品溶解于3mL氯仿溶劑中，制備出5mg/mL，10mg/mL, 20mg/mL, 40mg/mL, 80mg/mL, lOOmg/mL磷脂酰絲氨酸氯仿待測(cè)樣品，將該上述系列樣品經(jīng)高相液相色譜儀(HPLC)分析，繪制出磷脂酰絲氨酸質(zhì)量-積分面積標(biāo)準(zhǔn)曲線。待測(cè)樣品中磷脂酰絲氨酸含量測(cè)定將待測(cè)樣品溶解于適量氯仿中，然后在6000rpm下離心20min，將有機(jī)相層制備成 20-40mg/mL的樣品氯仿溶液，將該樣品經(jīng)高相液相色譜儀(HPLC)分析，根據(jù)待測(cè)樣品中磷脂酰絲氨酸峰積分面積，利用上述磷脂酰絲氨酸質(zhì)量-積分面積標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算待測(cè)樣品中磷脂酰絲氨酸的絕對(duì)含量。具體計(jì)算方法為磷脂酰絲氨酸％=磷脂酰絲氨酸質(zhì)量/樣品質(zhì)量X 100%色譜條件為儀器Agilent 1200高效液相色譜儀；檢測(cè)器G1314B紫外檢測(cè)器；檢測(cè)波長(zhǎng)205nm ；分析柱Kromasil，KR100-5SIL，(250mmX4.6mm)；柱溫30°C ；流動(dòng)相乙腈甲醇85%磷酸=900 95 5(V V V)；流速1. OmL/min。以下對(duì)本發(fā)明在具體應(yīng)用中的最佳實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明，這些實(shí)施例并非對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行約束。實(shí)施例1 富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A的萃取。稱取20公斤南極磷蝦油，其含磷脂中EPA為19. 3%，DHA為11. 5%，PC含量為 36. 3 %，磷脂酰絲氨酸含量為1. 5%，40升丙酮，將上述兩種原料加入到100升反應(yīng)器中， 向反應(yīng)器中充入氮?dú)?，零攝氏度下，持續(xù)機(jī)械攪拌，SOrpm，反應(yīng)2至15小時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，過(guò)濾，將固體冷凍干燥得到富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿13公斤，其中EPA為 18. 3%，DHA為8. 1%，PC含量為47. 8%，磷脂酰絲氨酸含量為2.4%，另將過(guò)濾液在20攝氏度下減壓濃縮去除溶劑，得到7公斤紅棕色油脂。實(shí)施例2 富含有磷脂酰絲氨酸的精煉南極磷蝦油稱取10公斤南極磷蝦油，其含磷脂中EPA為19. 3%，DHA為11. 5%，PC含量為 36.3%,磷脂酰絲氨酸含量為1. 5%，4至6公斤L(fēng)-絲氨酸，0. 1至0. 8公斤氯化鈣，20升至 100升pH5. 5至pH8. 5范圍內(nèi)的水緩沖液，加入到150升反應(yīng)器中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，投入0. 1
10至1升磷脂酶D (約2萬(wàn)至50萬(wàn)單位)，于45-53攝氏度范圍內(nèi)，持續(xù)機(jī)械攪拌，IOOrpm,反應(yīng)2至15小時(shí)停止攪拌，結(jié)束反應(yīng)，加入丙酮10到50公斤，再加入10到50公斤正庚烷，持續(xù)機(jī)械攪拌，30rpm，0. 5小時(shí)后停止攪拌，靜置分層，取有機(jī)相，依照前述方法重復(fù)萃取2到 3次，集合有機(jī)萃取液，在20攝氏度下減壓濃縮，獲得9. 5公斤富含有磷脂酰絲氨酸的南極磷蝦油，磷脂中不飽和脂肪酸含量經(jīng)GC檢測(cè)為沈.7%，其中EPA為17. 2%，DHA為9.5%， 磷脂中PC含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為2. 7 %，磷脂酰絲氨酸含量為31. 8%。實(shí)施例3 富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸精品稱取10公斤實(shí)施例1制備得到的南極磷蝦磷脂酰膽堿，其中，磷脂中EPA為 18. 3 %，DHA為8. 1 %，PC含量為47. 8 %，磷脂酰絲氨酸含量為2. 4 %，12至20公斤L(fēng)-絲氨酸，0. 4-1. 5公斤氯化鈣，50升至120升ρΗ5· 5至ρΗ8· 5范圍內(nèi)的水緩沖液，加入到150升反應(yīng)器中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，投入0. 1至2升磷脂酶D 100萬(wàn)單位，于45-53攝氏度范圍內(nèi)，持續(xù)機(jī)械攪拌，IOOrpm,反應(yīng)2至15小時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，加入乙醇10到60公斤，正己烷10到60公斤，持續(xù)機(jī)械攪拌，30rpm，0. 5小時(shí)后停止攪拌，靜置分層，取有機(jī)相，依照前述方法重復(fù)進(jìn)行2到4次萃取，匯集有機(jī)萃取液，在20攝氏度下減壓濃縮，獲得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸粗品，再加入丙酮10到50公斤，持續(xù)機(jī)械攪拌，80rpm，0. 5小時(shí)后停止攪拌，過(guò)濾，將固體冷凍干燥得到8. 6公斤富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸精品， 其PC含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為5. 5%，磷脂酰絲氨酸含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為43. 9 %，磷脂中EPA經(jīng) GC 檢測(cè)為 17. 5%, DHA ^ 7.9%。實(shí)施例4 富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸將實(shí)施例1制備得到的磷脂酰膽堿3公斤，其中含磷脂中EPA為18. 3%，DHA為 8. 1%, PC含量為47. 8%，磷脂酰絲氨酸含量為2. 4%，4至10公斤L(fēng)-絲氨酸，0. 2至0. 8 公斤氯化鈣，20升至40升pH5. 5至pH8. 5范圍內(nèi)的水緩沖液，加入到100升反應(yīng)器中，向反應(yīng)器中充入氮?dú)猓度?. 1至1升磷脂酶D約2萬(wàn)至50萬(wàn)單位，于45-53攝氏度范圍內(nèi)， 持續(xù)機(jī)械攪拌，lOOrpm，反應(yīng)2至15小時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，加入丙酮5到25公斤，攪拌，再加入5 到25公斤正庚烷，持續(xù)機(jī)械攪拌，30rpm，0. 5小時(shí)后停止攪拌，靜置分層，取有機(jī)相，依照前述方法重復(fù)萃取2到3次，集合有機(jī)萃取液，在20攝氏度下減壓濃縮，獲得2. 8公斤油狀黃色富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，其PC含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為8. 5%，磷脂酰絲氨酸含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為36. 4%，磷脂中EPA經(jīng)GC檢測(cè)為17. 1 %，DHA為7. 3%。實(shí)施例5 富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸南極磷蝦油將實(shí)施例4制備得到的2. 8公斤磷脂酰絲氨酸和實(shí)施例1制備得到的7公斤紅棕色油脂，加入20升反應(yīng)器中，向反應(yīng)器中充入氮?dú)?，O到10攝氏度下，持續(xù)機(jī)械攪拌， IOOrpm,，反應(yīng)2至15小時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，得到富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸南極磷蝦油9. 8公斤，其PC含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為10. 5 %，磷脂酰絲氨酸含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為 10.8%，磷脂酰絲氨酸中的EPA經(jīng)GC檢測(cè)為17. 1%，DHA為7.3%。實(shí)施例6 富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸精煉南極磷蝦油稱取10公斤南極磷蝦油，其中含磷脂中EPA含量為19. 3%，DHA含量為11. 5%， PC含量為36. 3%，磷脂酰絲氨酸含量為1. 5% ；由實(shí)施例3制得5公斤磷脂酰絲氨酸，其中磷脂酰絲氨酸含量為43.9%，EPA含量為17.5%，DHA含量為7.9% ；加入20升反應(yīng)器中， 向反應(yīng)器中充入氮?dú)?，零攝氏度下，持續(xù)機(jī)械攪拌，IOOrpm,，反應(yīng)2至15小時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，得
11到富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸南極磷蝦油15公斤，磷脂酰絲氨酸含量經(jīng) HPLC檢測(cè)為18. 6%，磷脂中EPA經(jīng)GC檢測(cè)為17. 6%，DHA為7. 8%。實(shí)施例7 富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸精品稱取10公斤實(shí)施例1制備得到的南極磷蝦磷脂酰膽堿，其中EPA為18. 3%，DHA 為8. 1 %，PC含量為47. 8%，磷脂酰絲氨酸含量為2. 4%，溶入15至40升的正己烷，加入12 至20公斤L(fēng)-絲氨酸、0. 4-1. 5公斤氯化鈣，5至20升的丙酮或丙醇，50升至100升pH5. 5 至pH8. 5范圍內(nèi)的水緩沖液，加入到150升反應(yīng)器中，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，投入0. 1至2升磷脂酶D 100萬(wàn)單位，于45-53攝氏度范圍內(nèi)，持續(xù)機(jī)械攪拌，IOOrpm,反應(yīng)2至15小時(shí)，結(jié)束反應(yīng)，再加入正己烷0到50升，持續(xù)機(jī)械攪拌，30rpm，0. 5小時(shí)后停止攪拌，靜置分層，取有機(jī)相，依照前述方法重復(fù)進(jìn)行2到4次萃取，匯集有機(jī)萃取液，在20攝氏度下減壓濃縮，獲得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸粗品，再加入乙醇10到30升，持續(xù)機(jī)械攪拌， SOrpm, 0. 5小時(shí)后停止攪拌，過(guò)濾，將固體冷凍干燥得到8. 6公斤富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸精品，其PC含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為5. 5%，磷脂酰絲氨酸含量經(jīng)HPLC檢測(cè)為 43. 5%，磷脂中 EPA 經(jīng) GC 檢測(cè)為 17. 3%，DHA 為 7. 6%。在此說(shuō)明書中，本發(fā)明已參照其特定的實(shí)施例作了描述。但是，很顯然仍可以做出各種修改和變換而不背離本發(fā)明的精神和范圍，一個(gè)有本專業(yè)知識(shí)的普通技術(shù)人員，仍可以根據(jù)本專利所傳授的技術(shù)，在本發(fā)明的范圍內(nèi)產(chǎn)生其它的實(shí)施例，但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油的方法， 其特征在于步驟一，對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃取得到磷脂酰膽堿和含有維生素A、維生素E和蝦青素的油脂；步驟二，配制酶催化反應(yīng)體系，所述反應(yīng)體系為水相反應(yīng)體系；步驟三，將步驟二的反應(yīng)體系加入到反應(yīng)器中，在氮?dú)猸h(huán)境中、溫度為35 55攝氏度， 投入磷脂梅D后持續(xù)機(jī)械攪拌，攪拌時(shí)間1 15小時(shí)；步驟四，將步驟三所得反應(yīng)液重復(fù)萃取2 3次，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸；步驟五，將步驟四所得富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸與步驟一獲得的含維生素A、維生素E和蝦青素的油脂混合得高品質(zhì)南極磷蝦油，完成制備。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油的方法，其特征在于，步驟一所述萃取為現(xiàn)有南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器中混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、0 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0. 5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油的方法，其特征在于，步驟一所述取得的磷脂酰膽堿是為富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A族，該磷脂酰膽堿族含有十幾個(gè)磷脂酰膽堿分子系列，其中每一個(gè)分子系列的化學(xué)結(jié)構(gòu)有以下相同和不同(1)在甘油基的3位即Sn-3上都連接一個(gè)膽堿；(2) 在甘油基的1位Sn-I和2位Sn-2上各自連接一個(gè)脂肪?；?，而在2位Sn_2上通常連接一個(gè)含多不飽和雙鍵的長(zhǎng)鏈脂肪酰基，所述的富含多不飽和雙鍵脂肪?；浜x為Sn-2 位連接的脂肪?；杏懈哂?%以上的脂肪酰基含有2個(gè)以上的不飽和雙鍵，或其含義為 Sn-2位連接的脂肪酰基中有高于3%以上的脂肪?；蠴mega-3不飽和雙鍵；(3)含有的不飽和雙鍵脂肪?；?8至22個(gè)碳原子，而雙鍵的數(shù)目通常為三至六個(gè)，所述不飽和雙鍵脂肪?；鶎貽mega-3不飽和脂肪酸家族系指二十二碳六稀酸脂肪酰基和二十碳五稀酸脂肪?；?。
4.據(jù)權(quán)利要求1所述的制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油的方法，其特征在于，步驟二所述水相反應(yīng)體系為富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A、L-絲氨酸、鈣鹽和緩沖溶液配制成的水溶液反應(yīng)體系，所述水溶液反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下磷脂酰膽堿在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為100，L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為 0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2個(gè)摩爾/升，水溶液的pH值在5. 0 8. 5 內(nèi)。
5.一種從現(xiàn)有南極磷蝦油制備富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿的方法，其特征在于，對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃??；所述溶劑可在下列物品中任選食品安全級(jí)的正庚烷或正己烷、食用乙醇或丙酮、或者是它們的混合物；所述萃取為現(xiàn)有南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器中混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、0 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0. 5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰膽堿。
6.一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的方法，其特征在于，采取如下步驟步驟一，對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃取或直接由市場(chǎng)購(gòu)得磷脂酰膽堿；所述萃取按下列步驟萃取溶劑可在下列物品中任選食品安全級(jí)的正庚烷或正己烷、食用乙醇或丙酮、或者是它們的混合物；所述萃取為現(xiàn)有南極磷蝦油與溶劑在反應(yīng)器中混合后在氮?dú)猸h(huán)境中、0 30攝氏度下，經(jīng)機(jī)械攪拌，反應(yīng)0. 5 15小時(shí)，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A；步驟二，配制酶催化反應(yīng)體系，包括水相反應(yīng)體系或水相與有機(jī)溶劑相組成的兩相反應(yīng)體系；步驟三，將步驟二得水溶液反應(yīng)體系加入到反應(yīng)器中，在氮?dú)猸h(huán)境中、溫度為35 55 攝氏度，投入磷脂梅D后持續(xù)機(jī)械攪拌，繼持時(shí)間1 15小時(shí)后，將所得反應(yīng)液重復(fù)萃取 2 3次，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸，完成制備。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的方法，其特征在于，步驟二所述水相反應(yīng)體系由現(xiàn)有磷蝦油制備的富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A、L-絲氨酸、鈣鹽和緩沖溶液配制成的水溶液反應(yīng)體系，所述水溶液反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下磷脂酰膽堿在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為100，L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為 0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2個(gè)摩爾/升，水溶液的pH值在5. 0 8. 5 內(nèi)。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸的方法，其特征在于，步驟二所述水相與有機(jī)溶劑相組成的兩相反應(yīng)體系為步驟一中市購(gòu)的磷脂酰膽堿配制酶催化反應(yīng)體系，其為先把富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A溶入C5-C9烷烴有機(jī)溶劑，后再加入到含有L-絲氨酸、鈣鹽、短鏈烴醇或短鏈烴酮和緩沖溶液配制成的水溶液中，從而形成水相和有機(jī)溶劑兩相混合的反應(yīng)體系，所述水溶液和有機(jī)溶劑兩相混合反應(yīng)體系中各物質(zhì)的配比關(guān)系如下磷脂酰膽堿在每升混合反應(yīng)液中加入的重量百分比為100，L-絲氨酸在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為60 300，鈣鹽在每升反應(yīng)液中加入的重量百分比為0. 05 10，緩沖溶液中緩沖鹽的濃度則為0 2摩爾/升，C5-C9烷烴有機(jī)溶劑在混合反應(yīng)液中占有的體積百分比為5% 95%，短鏈烴醇或短鏈烴酮在總混合反應(yīng)液中占有體積百分比為 80%，水溶液和有機(jī)溶劑兩相混合反應(yīng)體系的pH值在 5. 0 8. 5 內(nèi)。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的方法，其特征在于，所述C5-C8烷烴有機(jī)溶劑為從下列物品中任選戊烷、己烷、環(huán)己烷、庚烷、辛烷、 壬烷、癸烷或它們的同分異構(gòu)體中的任何一種溶劑或這些溶劑以任何比例混合形成的混合溶劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的方法， 其特征在于，所述短鏈烴醇或短鏈烴酮為從下列物品中任選乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、丙酮、 丁酮或它們的同分異構(gòu)體中的任何一種溶劑或這些溶劑以任何比例混合形成的混合溶劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的高品質(zhì)南極磷蝦油的方法。包括以下步驟1)對(duì)現(xiàn)有南極磷蝦油進(jìn)行溶劑萃取得到磷脂酰膽堿和含有維生素A、維生素E和蝦青素的油脂；2)配制酶催化反應(yīng)體系，所述反應(yīng)體系為水相反應(yīng)體系；3)將反應(yīng)體系加入到反應(yīng)器中，投入磷脂梅D后持續(xù)機(jī)械攪拌；4)將所得反應(yīng)液重復(fù)萃取，過(guò)濾后將固體冷凍干燥得富含多不飽和雙鍵脂肪酰基的磷脂酰絲氨酸；5)將所得富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸與步驟1獲得的油脂混合得高品質(zhì)南極磷蝦油。本發(fā)明還提供從現(xiàn)有南極磷蝦油制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字Ｄ憠A的方法，以及制備富含多不飽和雙鍵脂肪?；牧字＝z氨酸的方法。
文檔編號(hào)C11B1/00GK102439125SQ201180002211
公開(kāi)日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月3日
發(fā)明者吳萍, 張永志, 梁水英, 沈連紅, 王秀蘭, 謝春定 申請(qǐng)人:上海贏貝生物技術(shù)有限公司