具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及功能化納米硒的快速制備，更具體地說，涉及一種具有抗腫瘤活性的 虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 硒是人體必需的十五種微量元素之一，在體內(nèi)發(fā)揮抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、提高 機體免疫力、保護修復細胞、拮抗降低有害重金屬等重要的生物活性。硒與多達40多疾病的 發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)聯(lián)，其中包括:艾滋病(AIDS)、肝癌、克山病、大骨節(jié)病、心腦血管等 疾病。低硒或缺硒人群通過適量補硒能夠提高機體免疫能力，維護心、肝、肺、胃等重要器官 的正常功能，預防腫瘤、肝病、心腦血管疾病的發(fā)生。全球約有40多個國家處于缺硒地區(qū)，我 國多個省份處于缺硒或低硒地帶，這些地區(qū)是腫瘤、肝病、心血管疾病等發(fā)病率高的地區(qū)， 需要進行補硒。然而作為營養(yǎng)補充劑或癌癥預防劑，硒的有益劑量和毒性劑量范圍卻是極 其狹窄，容易造成硒中毒，嚴重限制了硒在疾病防治，尤其是癌癥防治方面的潛力。硒的毒 性依賴于其化學形式，目前研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)無機硒化合物的毒性強于有機硒化合物，硒代半 胱氨酸的毒性與亞硒酸鈉相似，亞硒酸鈉的毒性強于納米硒。納米硒具有生物利用度高、生 物活性強和毒性低的優(yōu)點。
[0003] 納米單質(zhì)硒的制備方法通常采用還原法，利用硒的含氧酸鹽或氧化物通過各種還 原劑獲得單質(zhì)硒，同時使用修飾劑或者調(diào)控劑對形貌進行修飾調(diào)控，獲得理想粒徑和形貌 的產(chǎn)物。
[0004] 然而，現(xiàn)有的各種納米單質(zhì)硒制備方法目的均是通過各種不同的調(diào)控劑或修飾劑 對形貌進行調(diào)控或者修飾，得到理想粒徑和形貌的產(chǎn)物，而這些修飾劑不是具有強生物活 性的生物分子，不能通過修飾劑或者調(diào)控劑有效的提高納米單質(zhì)硒的生物活性，尤其是抗 腫瘤活性，即所得產(chǎn)物并不是功能化納米單質(zhì)硒。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于，針對現(xiàn)有納米單質(zhì)硒的制備方法不能通過修飾劑 或者調(diào)控劑有效的提高納米單質(zhì)硒的生物活性的缺陷，提供一種具有抗腫瘤活性的虎奶菇 多糖功能化納米硒水溶膠及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:構(gòu)造一種具有抗腫瘤活性的虎奶菇 多糖功能化納米硒水溶膠，含有以下濃度范圍的物質(zhì)：
[0007] 虎奶菇多糖，濃度范圍為IOmg · L-1~1000 mg · L-S
[0008] 維生素 C，濃度范圍為0.02mmol · L-1 ~20mmol · L-1;
[0009] 納米硒，濃度范圍為0.005mmol · L-1 ~5mmol · L_1〇
[0010] 本發(fā)明還提供了一種如上所述的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水 溶膠的制備方法，包括以下步驟：
[0011] SI)常溫常壓下，往虎奶菇多糖水溶液中加入維生素 C溶液，混合均勻；
[0012] S2)在步驟SI)得到的溶液中滴加二氧化硒溶液或亞硒酸鹽溶液，在滴加時混勻；
[0013] S3)對步驟S2)得到的溶液加水定容，待產(chǎn)物中所出現(xiàn)的紅色不再加深，即得到由 虎奶燕多糖功能化的納米硒水溶膠。
[0014] 在本發(fā)明優(yōu)選實施例所述的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠 的制備方法中，使用的所述虎奶菇多糖水溶液濃度為30mg · I/1~3000mg · I/1，維生素 C溶 液的濃度為〇.2mmol · L-1~200mmol · L-S二氧化硒或亞硒酸鈉溶液的濃度為0.05mmol · L -1~50mmol · L-、
[0015] 在本發(fā)明優(yōu)選實施例所述的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠 的制備方法中，所述維生素 C為還原型維生素 C。
[0016] 在本發(fā)明優(yōu)選實施例所述的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠 的制備方法中，所述亞硒酸鹽為亞硒酸鈉。
[0017] 在本發(fā)明優(yōu)選實施例所述的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠 的制備方法中，所述虎奶菇多糖為水溶性虎奶多糖、化學修飾的熱堿溶性虎奶多糖或其組 合。
[0018] 本發(fā)明還提供了一種如上所述的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水 溶膠的應用，所述虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠中的虎奶菇多糖功能化納米硒用于制備 抗腫瘤藥物。
[0019] 本發(fā)明還提供了一種如上所述的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水 溶膠的保存方法，其特征在于，所述虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠在2~10°C下以溶膠形 態(tài)保存。
[0020] 實施本發(fā)明的具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒水溶膠及其制備方法、 應用和保存方法，具有以下有益效果：
[0021] (1)本發(fā)明以具有抗氧化、抗腫瘤、抗病毒、抗衰老、提高免疫力等生物活性的食藥 用虎奶菇多糖作為納米硒功能化分子，虎奶菇多糖分子的抗腫瘤活性與納米硒的生理功效 相互促進，發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤活性，為臨床上癌癥的聯(lián)合化療提供一種很好的優(yōu)選方案；
[0022] (2)本發(fā)明使用的虎奶菇多糖在結(jié)構(gòu)上具有特殊性，是由多個單糖分子通過糖苷 鍵連接而成的高分子聚合體，具有多羥基結(jié)構(gòu)，具有良好的親水性，同時具有疏水鏈段，對 納米硒表面進行修飾，起到很好的調(diào)控納米硒粒徑和穩(wěn)定納米硒的效果，同時也提高納米 硒的水溶性，增強了硒與癌細胞的親和力，提高腫瘤細胞對納米硒的攝取量，達到減少用藥 劑量、提高療效、減少毒副作用治療效果；
[0023] (3)本發(fā)明制備納米硒反應體系中只以維生素 C為還原劑，虎奶菇多糖為納米硒功 能化調(diào)控分子，不添加其他任何模板劑，避免了在實際應用中可能產(chǎn)生的不良效果；
[0024] (4)本發(fā)明所得產(chǎn)物具有抗腫瘤活性的虎奶菇多糖功能化納米硒溶膠中納米硒的 濃度可以根據(jù)應用上的需要進行調(diào)整，也可以應適當改變虎奶菇多糖和還原劑維生素 C的 濃度，操作簡單，簡便快捷。
【附圖說明】
[0025]下面將結(jié)合附圖及實施例對本發(fā)明作進一步說明，附圖中：
[0026]圖1是水溶性虎奶菇多糖濃度為100.Omg · I/1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4.Ommol · IZ1水溶膠中虎奶菇多糖功能化納米硒的激光散射圖；
[0027]圖2是水溶性虎奶菇多糖濃度為300.Omg · Γ1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4.Ommol · IZ1水溶膠中虎奶菇多糖功能化納米硒的激光散射圖；
[0028]圖3是水溶性虎奶菇多糖濃度為100.Omg · Γ1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4.Ommol · IZ1水溶膠中虎奶菇多糖功能化納米硒的TEM圖；
[0029]圖4是水溶性虎奶菇多糖濃度為300.Omg · IZ1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4.Ommol · IZ1水溶膠中虎奶菇多糖功能化納米硒的SEM圖；
[0030] 圖5是水溶性虎奶菇多糖濃度為300.Omg · Γ1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4.Ommol · I/1水溶膠中虎奶燕多糖功能化納米硒的EDX元素分析圖；
[0031] 圖6是水溶性虎奶菇多糖濃度為300.Omg · IZ1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4. Ommo 1 · I/1水溶膠中納米硒的XRD圖；
[0032]圖7是水溶性虎奶菇多糖濃度為300.Omg · Γ1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4.Ommol · IZ1水溶膠中虎奶菇多糖功能化納米硒的FT-IR圖；
[0033]圖8是水溶性虎奶菇多糖濃度為300.Omg · IZ1，硒濃度為I.Ommol · I/1，維生素 C為 4.Ommol · I/1水溶膠中虎奶燕多糖功能化納米硒的Zeta電位圖；
[0034] 圖9是水溶性虎奶菇多糖濃度為0、25、50、10011^.1/1，硒濃度為1.0111111〇1.1/ 1，維 生素 C為4.Ommol · IZ1水溶膠中虎奶菇多糖功能化納米硒穩(wěn)定性跟蹤圖；
[0035] 圖10是水溶性虎奶菇多糖濃度為100、200、300、400、500、60011^.1/1，硒濃度為 I.Ommol ·廠1，維生素 C為4.Ommol ·廠1水溶膠中虎奶燕多糖功能化納米硒穩(wěn)定性跟蹤圖；
[0036]圖11是MTT法檢測虎奶菇多糖功能化納米硒抑制人乳腺癌細胞MCF-7株系細胞生 長的細胞存活率圖；
[003