一種五子衍宗加味中藥組方藥物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種中藥組合，更具體的說(shuō)設(shè)及一種針對(duì)男性不育的五子衍宗加味中 藥組方藥物及其應(yīng)用。 技術(shù)背景
[0002] 人類精液質(zhì)量在過(guò)去50年中降低40% W上，已引起很大關(guān)注，許多國(guó)家報(bào)告了本 國(guó)精液質(zhì)量下降的數(shù)據(jù)，我國(guó)也存在同樣的問(wèn)題，其中低齡化的傾向更加明顯。人類精液質(zhì) 量的下降，導(dǎo)致男性生育力下降，關(guān)系到出生人口素質(zhì)和種族繁衍質(zhì)量。中醫(yī)中藥對(duì)改善精 液質(zhì)量、提高男性生育能力方面具有特殊優(yōu)勢(shì)，整理和挖掘我國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)藥寶庫(kù)的特有資 源，將對(duì)提高我國(guó)男性生殖健康水平做出應(yīng)有的貢獻(xiàn)。
[0003] 中醫(yī)對(duì)生殖理論的認(rèn)識(shí)與臨床實(shí)踐，在中醫(yī)腎的研究中得W體現(xiàn)：腎在中醫(yī)臟象 理論中占有重要地位，其功能廣泛，作用特殊，有主宰生命之概念，故歷代中醫(yī)藥家稱："腎 為先天之本，生命之根"。腎與人體生長(zhǎng)、發(fā)育、衰老有密切關(guān)系。中醫(yī)認(rèn)為生殖的根本在于 "腎"，W腎氣、天癸、男精女血作為物質(zhì)基礎(chǔ)。腎精充足，腎氣旺盛，生殖功能正常；腎精不 足，腎氣虧虛，生殖功能異常。因此，挖掘傳統(tǒng)中醫(yī)藥寶庫(kù)，是我國(guó)生殖與健康研究特有的優(yōu) 勢(shì)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種五子衍宗加味中藥組方藥物，所述組方中的活 性成分由構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞子、山英 肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的提取物組成。
[0005] 所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞子、山 英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比1-10:1-10:1-10:1-10:1-10: 1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:1-10:I-IOo
[0006] 所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞子、山 英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比5: 5:5: 5:5: 5:3:8:8:8:8:8: 8:5:5:2〇
[0007] 采用藥材5倍重量W上的70%乙醇回流提取化，回收提取液，濃縮，得到五子衍宗 加味中藥組方藥物浸膏，浸膏可W制成片劑、膠囊劑、丸劑及沖劑。
[000引上述組合藥物所述的五子衍宗加味中藥組方藥物在制備治療少精子癥藥物中的 應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明的有益技術(shù)效果是:本發(fā)明提供的組方具有溫陽(yáng)、促進(jìn)性欲和性功能、提高 精力生成能力具有直接作用;對(duì)于少精子癥等病癥具有良好的活性。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 實(shí)施例1五子衍宗加味中藥組方藥物的活性考察1
[0011] 實(shí)驗(yàn)樣品的制備
[0012] 根據(jù)所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞 子、山英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比5:5:5:5:5:5:3:8:8:8: 8:8:8:5:5:2:1的重量比稱取藥材，用5倍重量水回流提取化，回收提取液，濃縮浸膏，得到 基本方A組。
[0013] 根據(jù)所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞 子、山英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比5:5:5:5:5:5:3:8:8:8: 8:8:8:5:5:2:1
[0014] 的重量比稱取藥材，用5倍重量70%乙醇回流提取化，回收提取液，濃縮浸膏，得到 基本方A-I組。
[0015] 根據(jù)所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞 子、山英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比5:5:5:5:5:5:3:8:8:8: 8:8:8:5:5:2:1的重量比稱取藥材，用5倍重量30%乙醇回流提取化，回收提取液，濃縮浸 膏，得到基本方A-2組。
[0016] 根據(jù)所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞 子、山英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比5:5:5:5:5:5:3:8:8:8: 8:8:8:5:5:2:1的重量比稱取藥材，用5倍重量95%乙醇回流提取化，回收提取液，濃縮浸 膏，得到基本方A-3組。
[0017] 藥物組合的活性考察
[0018] 選擇無(wú)特定病原菌(SPF級(jí)，S級(jí)動(dòng)物)成年15周齡NIH雄性小鼠。第1批試驗(yàn)50只小 鼠，正常對(duì)照組10只，自由進(jìn)食常規(guī)飼養(yǎng)；白消安造模動(dòng)物60只，按照白消安誘導(dǎo)無(wú)精子癥 模型常規(guī)方法造模：白消安（sigma產(chǎn)品）溶解于DMSO中配制成2%藥液。40mg/kg腹腔內(nèi)單次 注射給藥造模后動(dòng)物整體表現(xiàn)符合中醫(yī)腎陽(yáng)虛證的外觀體征，表現(xiàn)為食量減少、體重不增 加或減輕、騰邸乏力、活動(dòng)明顯減少、萎靡、反應(yīng)遲純、耳廓蒼白、瞇眼、眼險(xiǎn)周圍浮腫、皮毛 卷曲、豎毛皺綃、皮毛無(wú)光澤、多尿等癥狀。40d后，存活動(dòng)物43只（死亡率25%)分為自然恢 復(fù)7只、五子衍宗6只、基本方A組6只、實(shí)驗(yàn)A-I組6只、實(shí)驗(yàn)A-2組6只和實(shí)驗(yàn)A-3組6只。
[0019] 五子衍宗為《中國(guó)藥典》2010版第一部所述的五子衍宗片，按照人臨床10倍劑量換 算，五子衍宗、基本方A組、實(shí)驗(yàn)A-I組、實(shí)驗(yàn)A-2組和實(shí)驗(yàn)A-3組的小鼠每日灌胃給藥量相當(dāng) 于(生藥)2.8g/kg。連續(xù)給藥78d(小鼠2個(gè)生精周期）。
[0020] 動(dòng)物斷脊處死取材，附睪于含2ml培養(yǎng)液小皿中剪碎，36.5°C解育使精子充分游離 泳動(dòng)30min，取精子游離懸液滴于載玻片上，鏡檢精子活動(dòng)性指標(biāo)，觀察200個(gè)精子分析精子 活動(dòng)率和a.b、c、d級(jí)精子百分率。睪丸于Bouin中固定，常規(guī)石蠟包埋，5切片，肥染色，鏡檢。 根據(jù)動(dòng)物組織形態(tài)學(xué)表現(xiàn)、精子泳動(dòng)試驗(yàn)和精子數(shù)目分析，對(duì)中藥的作用效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。
[0021] 給藥后，各組給藥動(dòng)物，其腎陽(yáng)虛癥狀明顯改善，動(dòng)物整體表現(xiàn)接近正常，精神旺 盛，皮毛光澤柔順。
[0022] W單側(cè)睪丸和附睪組織重量表示(2側(cè)重量相加除W2)，造模后自然恢復(fù)動(dòng)物睪丸 明顯萎縮變小，各給藥組動(dòng)物睪丸明顯增大。具體見(jiàn)表1所示。
[0023] 表1各組動(dòng)物生殖器官重量（±s)
[0024]
[0025] 注：與正常對(duì)照組比較沖<0.05，*沖<0.0 l，與自然恢復(fù)組比較胖<0.05，#胖<0.0 l。
[00%]由表1的數(shù)據(jù)可知；睪丸組織重量在自然恢復(fù)組只有正常對(duì)照組的約50% (P< 0.0 l )，五子衍宗、基本方A組、實(shí)驗(yàn)A-I組、實(shí)驗(yàn)A-2組和實(shí)驗(yàn)A-3組與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差 異(P<0.05)，但是，實(shí)驗(yàn)A-I組已經(jīng)達(dá)到對(duì)照組的91%見(jiàn)表1。儲(chǔ)精囊和前列腺、會(huì)陰復(fù)合體 在各組問(wèn)均無(wú)差異(均P>〇. 05)。
[0027] 精子活動(dòng)率和數(shù)目見(jiàn)表2所示。
[002引表2各組動(dòng)物生殖器官重量（±s)
[0030] 注：與正常對(duì)照組比較沖<0.05，*沖<0.0 l，與自然恢復(fù)組比較胖<0.05，#胖<0.0 l。
[0031] 由表2可知，給藥各組在精子活動(dòng)率分別達(dá)到正常對(duì)照組的均達(dá)到70% W上;a+b 級(jí)精子分別達(dá)到正常對(duì)照組的60% W上；精子計(jì)數(shù)分別達(dá)到正常對(duì)照組的80% W上；相對(duì) 于自然恢復(fù)組，各給藥組的各項(xiàng)活性均超過(guò)了自然恢復(fù)組的3倍，尤其是實(shí)驗(yàn)A-I組其活性 在各給藥組中最優(yōu)。
[0032] 實(shí)施例2五子衍宗加味中藥組方藥物的活性考察2
[0033] 實(shí)驗(yàn)樣品的制備
[0034] 根據(jù)所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞 子、山英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比10:10:10:10:10:2:2: 2:2:2:2:2:2:2:2:7:8的重量比稱取藥材，用5倍重量70%乙醇回流提取化，回收提取液，濃 縮浸膏，得到基本方B-I組。
[0035] 根據(jù)所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞 子、山英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比10:10:10:10:10:2:2: 2:2:2:2:2:2:2:2:7:8的重量比稱取藥材，用5倍重量30%乙醇回流提取化，回收提取液，濃 縮浸膏，得到基本方B-2組。
[0036] 根據(jù)所述構(gòu)杞子、覆盆子、五味子、車前子、寃絲子、淫羊蕾、蛇床子、桑權(quán)子、女貞 子、山英肉、己戟天、熟地、黃精、肉豆違、山藥、紅參和甘草的重量比10:10:10:10:10:2:2: 2:2:2:2:2:2:2:2:7:8的重量比稱取藥材，用5倍重量95%乙醇回流提取化，回收提取液，濃 縮浸膏，得到基本方B-3組。
[0037] 藥物組合的活性考察
[0038] 選擇無(wú)特定病原菌(SPF級(jí)，S級(jí)動(dòng)物)成年15周齡NIH雄性小鼠。第1批試驗(yàn)50只小 鼠，正常對(duì)照組10只，自由進(jìn)食常規(guī)飼養(yǎng)；白消安造模動(dòng)物60只，按照白消安誘導(dǎo)無(wú)精子癥 模型常規(guī)方法造模：白消安（sigma產(chǎn)品）溶解于DMSO中配制成2%藥液。40mg/kg腹腔內(nèi)單次 注射給藥造模后動(dòng)物整體表現(xiàn)符合中醫(yī)腎陽(yáng)虛證的外觀體征，表現(xiàn)為食量減少、體重不增 加或減輕、騰邸乏力、活動(dòng)明顯減少、萎靡、反應(yīng)遲純、耳廓蒼白、瞇眼、眼險(xiǎn)周圍浮腫、皮毛 卷曲、豎毛皺綃、皮毛無(wú)光澤、多尿等癥狀。40d后，存活動(dòng)物45只（死亡率25%)分為自然恢 復(fù)7只、五子衍宗7只、實(shí)驗(yàn)B-I組6只、實(shí)驗(yàn)B-2組6只和實(shí)驗(yàn)B-3組6只。
[0039] 五子衍宗為《中國(guó)藥典》2010版第一部所述的五子衍宗片，按照人臨床10倍劑量換 算，五子衍宗、基本方B組、實(shí)驗(yàn)B-I組、實(shí)驗(yàn)B-2組和實(shí)驗(yàn)B-3組的小鼠每日灌胃給藥量相當(dāng) 于(生藥)2.8g/kg。連續(xù)給藥78d(小鼠2個(gè)生精周期）。
[0040] 采用與實(shí)施例1相同的方法對(duì)上述制備的藥物的作用效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。
[0041] 給藥后，各組給藥動(dòng)物，其腎陽(yáng)虛癥狀明顯改善，動(dòng)物整體表現(xiàn)接近正常，精神旺 盛，皮毛光澤柔順。
[0042] W單側(cè)睪丸和附睪組織重量表示(2側(cè)重量相加除W2)，造模后自然恢復(fù)動(dòng)物睪丸 明顯萎縮變小，各給藥組動(dòng)物睪丸明顯增大。具體見(jiàn)表3所示。
[0043] 表3各組動(dòng)物生殖器官重量（±s)
[0045] 注：與正常對(duì)照組比較沖<0.05，*沖<0.0 l，與自然恢復(fù)組比較胖<0.05，#胖<0.0 l。
[0046] 由表3的數(shù)據(jù)可知；睪丸組織重量在自然恢復(fù)組只有正常對(duì)照組的約50% (P< 0.01)，五子衍宗、實(shí)驗(yàn)B-I組、實(shí)驗(yàn)B-2組和實(shí)驗(yàn)B-3組與對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P< 0.05)，但是，實(shí)驗(yàn)B-I組已經(jīng)達(dá)到對(duì)照組的90%見(jiàn)表3。儲(chǔ)精囊和前列腺、會(huì)陰復(fù)合體在各組 問(wèn)均無(wú)差異(均P>〇.〇5)。
[0047] 精子活動(dòng)率和數(shù)目見(jiàn)表4所示。
[004引表4各組動(dòng)物生殖器官重量（±s)
[(K)加]注：與正常對(duì)照組比較沖<0.05，*沖<0.0 l，與自然恢復(fù)組比較胖<0.05，#胖<0.0 l。
[0化1 ]由表4可知，給藥各組在精子活動(dòng)率分別達(dá)到正常對(duì)照組的均達(dá)到70 % W上;a+b 級(jí)精子分別達(dá)到正常對(duì)照組的60% W上；精子計(jì)數(shù)分別達(dá)到正常對(duì)照組的80