大鯢組織提取物的復(fù)方組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種組織提取物及其應(yīng)用，具體涉及一種大鯢組織提取物的復(fù)方組合 物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 大鯢（，俗稱娃娃魚，為兩棲動物中體形最大的一種，是我國 特有的珍稀物產(chǎn)，屬于國家二級保護(hù)兩棲野生動物，主要分布于長江中上游、珠江中上游及 漢水上游的溪流中。隨著大鯢人工養(yǎng)殖技術(shù)的發(fā)展和推廣，其人工養(yǎng)殖在我國已經(jīng)實現(xiàn)產(chǎn) 業(yè)化，國家有關(guān)部門已批準(zhǔn)人工養(yǎng)殖子二代大鯢可用于開發(fā)利用，大鯢成為農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化和 特色農(nóng)業(yè)重點(diǎn)開發(fā)品種。
[0003] 大鯢是一種傳統(tǒng)名貴藥用動物，具有極高的營養(yǎng)價值、醫(yī)藥保健價值。其肌肉、內(nèi) 臟、骨骼、表皮及其分泌物均可入藥，在歷代方石中多有記載。如《本草綱目》中有"鱗目、 四部、大鯢……以癡疾"?！侗静萁?jīng)集注》、《本草拾遺》等藥典中也有"治癡疾、治牛、治斑疾" 的描述，表明了大鯢入藥在提高智力、美容、益膚方面有顯著功能。中醫(yī)認(rèn)為，大鯢性甘平味 淡，有補(bǔ)氣、養(yǎng)血、益智、滋補(bǔ)、強(qiáng)壯之功效，主治神經(jīng)衰弱、貧血、痢疾、瘧疾等，用于病后、產(chǎn) 后身體虛弱，腎虛陰虧，肺癆咯血，久痢脫肛等?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，經(jīng)常食用大鯢可聰明益智延 緩衰老提高造血和免疫功能，對防止心腦血管系統(tǒng)疾病，惡性貧血和惡性腫瘤有很好的效 果。但關(guān)于其提取物及復(fù)方促進(jìn)細(xì)胞生長及抗氧化方面研究較少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種大鯢組織提取物的復(fù)方組合物及其應(yīng)用，利用大鯢組織 提取物單一、復(fù)方或配伍中藥促進(jìn)細(xì)胞生長及抗氧化。
[0005] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是： 大鯢組織提取物的復(fù)方組合物，其特征在于： 包含以下質(zhì)量份數(shù)的組分： 人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物〇. 3-130份； 川芎揮發(fā)油0.01-20份； 黃芪提取物〇. 01-30份； 當(dāng)歸提取物0.01-30份。
[0006] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物選自大鯢皮膚水解膠原蛋白、大鯢油、大鯢皮膚分 泌黏液提取物中的至少一種，添加份數(shù)依次為0. 1-50份、0. 1-30份、0. 1-50份。
[0007] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物為人工養(yǎng)殖大鯢子二代及以下的大鯢組織提取物。
[0008] 所述大鯢皮膚水解膠原蛋白由大鯢皮膚經(jīng)酶水解而得； 所述大鯢油由大鯢尾脂提取而得； 所述大鯢皮膚分泌黏液提取物由大鯢分泌黏液經(jīng)酶水解而得； 所述川芎揮發(fā)油由中藥川芎經(jīng)水蒸氣蒸餾法制得； 所述黃芪提取物由中藥黃芪經(jīng)水提醇沉法提取，噴霧干燥，得提取物粉末； 所述當(dāng)歸提取物由中藥當(dāng)歸采用水提法提取，噴霧干燥，得提取物粉末 大鯢組織提取物的復(fù)方組合物作為促進(jìn)皮膚細(xì)胞生長及抗氧化美容用品的應(yīng)用。
[0009] 本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)： 本發(fā)明通過大量實驗研究，證明大鯢組織提取物單一、復(fù)方或配伍中藥黃芪、川芎、當(dāng) 歸提取物，可有效促進(jìn)皮膚細(xì)胞生長，并且具有抗氧化功效。本發(fā)明不僅提供了天然促進(jìn)皮 膚細(xì)胞生長及抗氧化的物質(zhì)及組合，還豐富了人工養(yǎng)殖大鯢的副產(chǎn)品種類，具有良好的市 場前景。
【具體實施方式】
[0010] 下面結(jié)合【具體實施方式】對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說明。
[0011] 本發(fā)明涉及的大鯢組織提取物的復(fù)方組合物，包含以下質(zhì)量份數(shù)的組分： 人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物〇. 3-130份； 川芎揮發(fā)油0.01-20份； 黃芪提取物〇. 01-30份； 當(dāng)歸提取物0.01-30份。
[0012] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物選自大鯢皮膚水解膠原蛋白、大鯢油、大鯢皮膚分 泌黏液提取物中的至少一種，添加份數(shù)依次為0. 1-50份、0. 1-30份、0. 1-50份。
[0013] 所述人工養(yǎng)殖大鯢組織提取物為人工養(yǎng)殖大鯢子二代及以下的大鯢組織提取物。 [0014] 所述大鯢皮膚水解膠原蛋白由大鯢皮膚經(jīng)酶水解而得； 所述大鯢油由大鯢尾脂提取而得； 所述大鯢皮膚分泌黏液提取物由大鯢分泌黏液經(jīng)酶水解而得； 所述川芎揮發(fā)油由中藥川芎經(jīng)水蒸氣蒸餾法制得； 所述黃芪提取物由中藥黃芪經(jīng)水提醇沉法提取，噴霧干燥，得提取物粉末； 所述當(dāng)歸提取物由中藥當(dāng)歸采用水提法提取，噴霧干燥，得提取物粉末。
[0015] 上述大鯢組織提取物的復(fù)方組合物可添加于美容用品中，包括化妝品、保養(yǎng)品等， 能促進(jìn)皮膚細(xì)胞生長，起到抗氧化作用。
[0016] 凡在上述組分質(zhì)量分?jǐn)?shù)的配比范圍內(nèi)的取值，均可作為本發(fā)明限定的復(fù)方組合 物，以下為復(fù)方組合物的部分配比實施例：
1.體外促皮膚細(xì)胞增殖及抗氧化活力測試 1. 1實驗材料 人永生化表皮HaCat細(xì)胞，生長于含10%胎牛血清，100 U/ml青霉素、100 μg/ml鏈霉 素的RPMI-1640培養(yǎng)液中，置于含5% C02,37 °C培養(yǎng)箱里培養(yǎng)。
[0017] 1.2藥物與試劑 大鯢皮膚分泌黏液提取物即大鯢黏液水解蛋白（由大鯢皮膚分泌黏液采用胃蛋白酶水 解而得)。大鯢油（由大鯢尾脂采用索氏提取法回流提取所得，為淡黃色至黃色油狀液體)。 大鯢皮膚水解膠原蛋白（由大鯢皮采用胃蛋白酶水解而得)。川芎揮發(fā)油（中藥川芎采用水 蒸氣蒸餾法制得)，黃芪提取物（中藥黃芪采用水提醇沉法提取，噴霧干燥，得提取物粉末)， 當(dāng)歸提取物（中藥當(dāng)歸采用水提法提取，噴霧干燥，得提取物粉末)。
[0018] 1.3受試物劑量及組別 設(shè)置空白組，大鯢黏液水解蛋白組、大鯢油組、大鯢皮膚水解膠原蛋白組、大鯢組織提 取物的復(fù)方組合物組(簡稱復(fù)方組)。
[0019] 復(fù)方組為上述實施例9-10,分別為復(fù)方組1和2。
[0020] 所有受試物均按照1%濃度作用于細(xì)胞。
[0021] 1.4實驗方法 1. 4. 1細(xì)胞增殖實驗 取對數(shù)生長期HaCat細(xì)胞配制成5 X 104個/ml細(xì)胞懸液，每孔100 μ 1接種于96孔板 中培養(yǎng)過夜，待細(xì)胞充分貼壁，除去原培養(yǎng)液，加入指定濃度受試物，每孔至100 μ 1。37°C 培養(yǎng)24小時和48小時，結(jié)束后每孔加入5 mg/ml的MTT 10 μ 1繼續(xù)孵育2小時后棄去 上清液，每孔加入DMS0 150 μ 1，微量振蕩器振蕩10分鐘以充分溶解結(jié)晶物。利用酶標(biāo)儀 在492 nm波長下測定各孔吸光值（Α值)，按以下公式計算藥物對細(xì)胞體外存活率（Cell viability)影響。
[0022] Cell viability(°/〇) = [A492