形成,可溶于酸性水溶液,無毒,無刺激性, 具有良好的生物相容性和生物可降解性。一般認(rèn)為,殼聚糖促吸收機(jī)制是,其分子上攜帶的 正電荷與細(xì)胞膜產(chǎn)生靜電作用,使生物膜結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而導(dǎo)致跨膜通道的 開放。本發(fā)明提供的改性殼聚糖為A辛基殼聚糖。
[0045] 所述乂辛基殼聚糖的制備方法具體為:稱取殼聚糖100g,溶于2L濃度為2%的醋 酸與2L甲醇的混合溶劑中,室溫下攪拌12h,徹底溶脹分散均勻,氮?dú)獬?5min,加入辛 醛200ml,反應(yīng)12h體系變黏稠后加入6L乙醇,繼續(xù)室溫下攪拌48h,用lmol/L氫氧化鉀調(diào) 節(jié)反應(yīng)液至中性,后采用50g硼氫化鉀配置弱堿性水溶液60ml,用滴液漏斗滴加到反應(yīng)瓶 中,繼續(xù)室溫?cái)嚢?4h,最后反應(yīng)液用lmol/L鹽酸調(diào)節(jié)至中性,產(chǎn)物抽濾,并用水、甲醇、丙 酮分別洗滌3次,收集產(chǎn)物于30°C真空徹底干燥,最后稱量產(chǎn)物,得到,辛基殼聚糖。
[0046] 本發(fā)明還提供上述安神香水的制備方法,其包括: 第一步,將海藻酸鈉加入到部分蒸餾水中,加熱到65°C,邊保溫邊攪拌,直至海藻酸鈉 完全溶解在水中,每5g海藻酸鈉使用的蒸餾水的量為100ml; 第二步,將上述中草藥成分混合,通過提取裝置將中草藥精油進(jìn)行提取和純化,收集精 油; 第三步,將第二步制備的精油以及中草藥促吸收劑溶解在上述乙醇溶解中,攪拌至完 全溶解; 第四步,將第一步制備的海藻酸鈉水溶液,第三步制備的乙醇溶液、丙三醇、羥丙基甲 基纖維素和吡咯烷酮羧酸鈉加入余量的蒸餾水中,攪拌均勻,靜置37小時(shí)后,放入密封容 器中,陳化6周后,即可。
[0047] 所述第二步進(jìn)一步包括, 第2. 1步,桂花和夜香花分別粉碎成粗粉,混合在一起,采用二氧化碳超臨界萃取,萃 取壓力33~35MPa,萃取溫度40~43°C,萃取時(shí)間110~130min,收集第一精油; 第2. 2步,銀杏葉、天麻、云香草分別粉碎成粗粉,混合在一起,采用二氧化碳超臨界萃 取,萃取壓力22~25MPa,萃取溫度28~32°C,萃取時(shí)間160-180min,收集第二精油; 第2. 3步,沉香、豆瓣香、黃連、丹參粉碎成粗粉,采用二氧化碳超臨界萃取,萃取壓力 26~30MPa,萃取溫度45~48°C,萃取時(shí)間180~200min,收集第三精油; 第2. 4步,將余下組分分別粉碎成粗粉,混合在一起,采用二氧化碳超臨界萃取,萃取 壓力24~27MPa,萃取溫度51~54°C,萃取時(shí)間200~220min,收集第四精油; 第2. 5步,將上述精油混合在一起,備用。
[0048] 以下采用實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施方式,借此對本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段 來解決技術(shù)問題,并達(dá)成技術(shù)效果的實(shí)現(xiàn)過程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。
[0049] 實(shí)施例1中藥精油 將桂花60g和夜香花40g分別粉碎成粗粉,混合在一起,采用二氧化碳超臨界萃取,萃 取壓力35MPa,萃取溫度43°C,萃取時(shí)間130min,收集第一精油,將銀杏葉20g、天麻15g、云 香草20g分別粉碎成粗粉,混合在一起,采用二氧化碳超臨界萃取,萃取壓力25MPa,萃取溫 度32°C,萃取時(shí)間180min,收集第二精油,將沉香25g、豆瓣香10g、黃連30g、丹參30g粉碎 成粗粉,采用二氧化碳超臨界萃取,萃取壓力30MPa,萃取溫度48°C,萃取時(shí)間200min,收 集第三精油,將五味子20g、梔子15g、陳皮20g、肉蓯蓉30g、升麻15g、虎杖25g、首烏藤30 重量份、薄荷20重量份分別粉碎成粗粉,混合在一起,采用二氧化碳超臨界萃取,萃取壓力 27MPa,萃取溫度54°C,萃取時(shí)間220min,收集第四精油,將上述精油混合在一起,備用。
[0050] 毒理學(xué)檢測 (一) 大鼠急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn) 1、 受試物:實(shí)施例1制備的中藥精油,稱取受試物50g加蒸餾水調(diào)制成品50%糊狀物 備用。 2、 實(shí)驗(yàn)動物:SD大白鼠20只,雌雄各半,體重180-220g。 3、 動物室環(huán)境:溫度22-25°C,相對濕度:45-55%。
[0051] 4、試驗(yàn)方法:試驗(yàn)前24小時(shí),于動物背部脊柱兩側(cè)去毛,去毛范圍約為體表面積 10%。按5000mg/kg.bw的劑量(涂敷量1. 0g/100g.bw),對試鼠去毛部位進(jìn)行涂敷并固定, 24小時(shí)后,溫水除去殘留受試物,連續(xù)觀察7天。 5、試驗(yàn)結(jié)果:觀察期內(nèi)未見試鼠全身異常變化,也未見死亡,涂受試物局部未見紅腫、 潰爛、炎癥、壞死等反應(yīng)。因此,對雌、雄大白鼠經(jīng)皮LD5。均大于5000mg/kg.bw。
[0052] 6、評價(jià):根據(jù)DB61-267-1998《保健用品安全性毒理學(xué)評價(jià)程序和試驗(yàn)方法》中急 性經(jīng)皮毒性分級標(biāo)準(zhǔn),該中藥精油對大鼠急性經(jīng)皮毒性屬實(shí)際無毒級。 (二) 多次皮膚刺激試驗(yàn) 1、 受試物:實(shí)施例1制備的中藥精油,稱取受試物精油l〇g加蒸餾水調(diào)制成50%糊狀 物備用。 2、 實(shí)驗(yàn)動物:日本大耳白家兔4只,雌雄各半,體重2. 5-3. 0kg。 3、 動物室環(huán)境:溫度22-25°C,相對濕度:45-55%。
[0053]4、試驗(yàn)方法:試驗(yàn)前24小時(shí),于每只兔背部脊柱兩側(cè)剪毛備皮,去毛范圍各 3X6cm2。各取受試物0. 5g/只,經(jīng)調(diào)制后涂在每兔一側(cè)皮膚上,每天涂抹一次,對側(cè)均作溶 劑對照。連續(xù)涂抹14天。每天涂前剪毛,不得損傷皮膚,保證受試物與皮膚充分接觸。每 天觀察皮膚反應(yīng)及打分。試驗(yàn)結(jié)束。取涂抹部位皮膚進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。 5、試驗(yàn)結(jié)果:多次皮膚刺激最高刺激指數(shù)及病理組織積分均為0,按照DB61267-1998 《保健用品安全性毒理學(xué)評價(jià)程序和試驗(yàn)方法》中皮膚刺激強(qiáng)度分級標(biāo)準(zhǔn),該中藥精油多次 皮膚刺激強(qiáng)度屬無刺激性。 (二)皮膚過敏試驗(yàn) 1、 受試物:實(shí)施例1制備的中藥精油,稱取受試物精油l〇g加蒸餾水調(diào)制成50%糊狀 物備用。
[0054] 陽性對照物:2,4-二硝基氯代苯(DNCB),北京市興津化工廠出品。 2、 實(shí)驗(yàn)動物:豚鼠30只,雌雄各半,體重250-300g。 3、 動物室環(huán)境:溫度22-25°C,相對濕度:45-55%。
[0055] 4、試驗(yàn)方法:將試驗(yàn)豚鼠隨機(jī)分成三組,每組10只,雌雄各半,分別為受試物組、 陰性對照組和陽性對照組。
[0056] 致敏接觸:給受試物前24小時(shí)將豚鼠背部脊柱左側(cè)毛去掉,去毛范圍約3X3cm。 取受試物0. 2g/只,經(jīng)調(diào)制后均勻涂敷在動物背部左側(cè)脫毛區(qū),持續(xù)6小時(shí)。第7天和第14 天,用同樣的方法重復(fù)一次,陽性對照組涂1%DNCB,陰性對照組不作處理。 激發(fā)接觸:于未次給受試物后14天,將受試物0. 2g/只,經(jīng)調(diào)制后均勻涂敷于豚鼠背 部右側(cè)脫毛區(qū),6小時(shí)后去掉受試物,即刻觀察過敏反應(yīng)情況,然后于1、24、48、72小時(shí)再 次觀察。陽性對照組涂0.1 %DNCB,陰性對照組不作處理。觀察方法同受試組。結(jié)果按照 DB61-267-1998《保健用品安全性毒理學(xué)評價(jià)程序和試驗(yàn)方法》中有關(guān)皮膚致敏評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn) 行評價(jià)。 5、 試驗(yàn)結(jié)果:受試組無致敏性陰性對照無致敏性陽性對照極度致敏性 6、 評價(jià):根據(jù)DB61-267-1998《保健用品安全性毒理學(xué)評價(jià)程序和試驗(yàn)方法》中有關(guān)皮 膚致敏標(biāo)準(zhǔn),該中藥精油屬無致敏性。試驗(yàn)證明:受試物組致敏率為0。 實(shí)施例2 乂辛基殼聚糖 稱取殼聚糖l〇〇g,溶于2L濃度為2%的醋酸與2L甲醇的混合溶劑中