包含陰離子性高分子的抗癌藥吸附能力得到提高的生物降解性微珠及其的制備方法
【專利說明】包含陰離子性高分子的抗癌藥吸附能力得到提高的生物降 解性微珠及其的制備方法 【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及抗癌藥吸附能力得到提高的生物降解性微珠及其制備方法以及利用 其的癌癥的治療方法。 【【背景技術】】
[0002] 最近，隨著影像技術發(fā)展，可查找隱藏于體內(nèi)的癌癥發(fā)生的準確的位置，并利用放 射線照射、內(nèi)窺鏡手術等多種方法來去除癌。但是，即使準確地發(fā)現(xiàn)癌癥發(fā)生的位置，也因 癌擴散到整個器官，或與其他器官貼在一起的情況等多種理由而具有不能以手術方式去除 癌癥的情況。在肝癌、胰腺癌等的情況下，即使被發(fā)現(xiàn)，大部分也不能以手術方式根治。
[0003] 當前，作為在肝腫瘤的治療中施行最多的手術的化療栓塞（TACE，Transaterial Chemoembolization)是查找向肝腫瘤供給營養(yǎng)的動脈，并將抗癌藥給藥之后，堵塞血管的 治療法。肝組織可通過繞出小腸及大腸等的門靜脈（portal vein)和從大動脈直接出來的 肝動脈接收氧和營養(yǎng)，而正常的肝組織主要從門靜脈接收血液，腫瘤組織主要從肝動脈接 收血液。因此，若將抗癌藥給藥到向腫瘤供給營養(yǎng)的肝動脈，并堵塞血管，則可在防止正常 的肝組織受損的情況下，選擇性地僅使腫瘤壞死。這種治療法沒有根據(jù)癌癥的進展程度的 限制，從而適用范圍廣，且治療對象的限制少等優(yōu)點多，因而該治療法是當前對肝癌治療率 的提高做出最大的貢獻的方法。在化療栓塞中，先向位于腹股溝的大腿動脈插入導管來接 近于肝動脈之后，注射血管造影劑來得到腫瘤的位置、大小及血液供給方面等治療所需的 信息，若制定治療方針，則向?qū)Ч懿迦氪侄燃s為1mm左右的管，來查找作為靶的動脈，從而 進行手術。
[0004] 當前，代表性地，在臨床上最普遍使用利用碘油（Lipiodol)的肝栓塞法，利用上 述肝栓塞法的專利技術相關報告也相當多。因碘油作為組成成分含有大量的碘，從而具有 可實現(xiàn)電子計算機斷層掃描（CT)影像的優(yōu)點，進而提供手術的便利性。但是，存在如下缺 點：為了裝載阿霉素（Doxorubicin)，需要在手術之前以振蕩的方式混合溶解有藥物的注 射液和油相的阿霉素。并且，據(jù)臨床報告，在手術之后溶解于水相的阿霉素無法累積于肝癌 部位，并迅速逃脫到全身的血液中，從而不僅無法得到充分的抗癌效果，而且患者的副作用 也相當。
[0005] 在美國專利7442385號中記述如下方法：在對聚乙稀醇（PVA，poly vinyl alcohol)進行交聯(lián)來制備微小的顆粒后，借助電引力來使作為抗癌藥的阿霉素吸附于珠 的表面，從而傳遞到肝癌部位，進而同時實現(xiàn)持續(xù)的抗癌藥的放出和栓塞效果。為此，在聚 乙烯醇的交聯(lián)過程中，可使作為陰離子性單體的2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙烷-磺酸 (AMPS，2-acrylamid〇-2-methyl-1-propane_sulfonic acid)與交聯(lián)末端以共價鍵方式形 成來改性聚合物，從而吸附阿霉素之類的陽離子性藥物。但是，利用聚乙烯醇的肝栓塞存在 如下問題：由于交聯(lián)的聚乙烯醇未在體內(nèi)分解，因而在肝腫瘤壞死后，聚乙烯醇珠有可能在 體內(nèi)以不特定的方式擴散從而引起炎癥，或更擔憂的是，沿著血管向其他器官擴散從而引 起腦血栓等。因此，需要能夠同時實現(xiàn)作為可改善這種問題的抗癌載體的功能和血管栓塞 功能的藥物載體。
[0006] 本說明書全文中，參照了多篇論文及專利文獻，并表示了其引用。所引用的論文及 專利文獻的公開內(nèi)容全部插入于本說明書作為參照，從而更加明確說明本發(fā)明所屬的技術 領域的水平及本發(fā)明的內(nèi)容。 【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0007] 【要解決的問題】
[0008] 本發(fā)明人為了開發(fā)如下微珠的制備方法而研宄努力，解決以往的癌局部治療用微 珠所具有的、未在生物體內(nèi)分解的問題，可將更多的量的抗癌藥吸附于微珠，且制備工序簡 單，從而具有經(jīng)濟性。并且，本發(fā)明人為了更堅固地制備包含陰離子性高分子的微珠而研宄 努力。最終，制備由白蛋白和具有硫酸鹽基的生物相容性陰離子性高分子酰胺結(jié)合而成的 結(jié)合物，并對將其乳化而制備的微小的氣泡進行交聯(lián)來制備交聯(lián)結(jié)合有白蛋白的微珠，從 而完成了本發(fā)明。
[0009] 因此，本發(fā)明的目的在于，提供抗癌藥吸附能力得到提高的生物降解性微珠。
[0010] 本發(fā)明的再一目的在于，提供抗癌藥吸附能力得到提高的生物降解性微珠的制備 方法。
[0011] 本發(fā)明的另一目的在于，提供將上述生物降解性微珠進行給藥來治療癌癥的方 法。
[0012] 本發(fā)明的其他目的及優(yōu)點可通過以下發(fā)明的詳細說明、發(fā)明要求保護范圍及附圖 會更加明確。
[0013] 【解決問題的手段】
[0014] 根據(jù)本發(fā)明的一實施方式，本發(fā)明提供抗癌藥吸附能力得到提高的生物降解性微 珠，其特征在于，包含由白蛋白和陰離子性高分子酰胺結(jié)合而成的白蛋白-陰離子性高分 子結(jié)合物（conjugate)，上述陰離子性高分子具有生物相容性，并具有硫酸鹽基、胺基或羧 基，上述白蛋白通過交聯(lián)結(jié)合而形成。
[0015] 本發(fā)明人為了開發(fā)如下微珠的制備方法而研宄努力，解決以往的癌局部治療用微 珠所具有的、未在生物體內(nèi)分解的問題，可將更多的量的抗癌藥吸附于微珠，且制備工序簡 單，從而具有經(jīng)濟性。并且，本發(fā)明人為了更堅固地制備包含陰離子性高分子的微珠而研宄 努力。最終，制備由白蛋白和具有硫酸鹽基的生物相容性陰離子性高分子酰胺結(jié)合而成的 結(jié)合物，并對將其乳化而制備的微小的氣泡進行交聯(lián)來制備交聯(lián)結(jié)合有白蛋白的微珠。
[0016] 根據(jù)本發(fā)明的一實例，上述生物降解性微珠還包含借助與上述陰離子性高分子的 靜電引力來吸附于生物降解性微珠的表面的抗癌藥。
[0017] 在一特定例中，上述抗癌藥為蒽環(huán)（Anthracycline)類抗癌藥。上述蒽環(huán) 類抗癌藥例如有阿霉素、柔紅霉素（Daunorubicin)、表阿霉素（Epirubicin)、伊達 比星（Idarubicin)、吉西他濱（Gemcitabine)、米托蒽醌（Mitoxantrone)、吡柔比星 (Pirarubicin)及戊柔比星（Valrubicin)等。
[0018] 在另一特定例中，上述抗癌藥為伊立替康（Irinotecan)。
[0019] 根據(jù)本發(fā)明的一實例，本發(fā)明的微珠為用于治療實體癌的化療栓塞用珠。
[0020] 在一特定例中，本發(fā)明的微珠為肝癌化療栓塞（肝動脈栓塞）用珠。除了 肝癌治療之外，作為可適用的實體癌，可列舉通過直腸動脈治療直腸細胞癌的方法 (K.Tsuchiya, Urology. Apr ；55 (4):495-500(2000))〇
[0021 ] 本發(fā)明的微珠作為組成成分包含白蛋白及與上述白蛋白酰胺結(jié)合的生物相容性 陰離子性高分子。上述白蛋白與陰離子性高分子的羧基或胺基進行酰胺結(jié)合，并交聯(lián)結(jié)合 而呈微珠的形態(tài)，并起到維持的載體作用。上述陰離子性高分子與白蛋白的胺基或羧基進 行酰胺結(jié)合，并起到使抗癌藥吸附于珠的表面的作用。上述白蛋白及陰離子性高分子均作 為生物相容性高分子物質(zhì)，可在體內(nèi)分解，因而可解決以往利用聚乙烯醇的珠所具有的、因 未在體內(nèi)分解而產(chǎn)生的問題，例如，可解決因聚乙烯醇不特定地擴散從而引起炎癥，或沿著 血管向其他器官擴散從而引起腦血栓等的問題。
[0022] 在本說明書中所使用的術語"生物降解性"是指當露出于生理溶液 (physiological solution)時可分解的性質(zhì)，例如意味著在包括人類的哺乳動物的生物體 內(nèi)可借助體液或微生物等來分解的性質(zhì)。
[0023] 根據(jù)本發(fā)明的一實例，上述白蛋白作為廣泛分布于生物細胞或體液中的蛋白質(zhì)， 包含動物白蛋白及植物白蛋白。
[0024] 在一特定例中，上述動物白蛋白包含卵白蛋白、血清白蛋白、乳白蛋白及肌漿蛋 白，上述植物白蛋白包含麥清蛋白（大麥種子）、豆清蛋白（豌豆）及蓖麻蛋白（蓖麻種 子）。上述白蛋白還包含白蛋白的變異體。
[0025] 根據(jù)本發(fā)明的一實例，上述生物相容性陰離子性高分子包含糖胺聚糖 (glycosaminoglycan)類高分子。
[0026] 在一特定例中，上述糖胺類高分子選自由硫酸軟骨素 （chondroitin sulfate)、硫 酸皮膚素 （dermatan sulfate)、硫酸乙酰肝素 （heparan sulfate)、肝素（heparin)、硫酸角 質(zhì)素 （keratan sulfate)及透明質(zhì)酸（hyaluronan)組成的組中。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明的一實例，上述白蛋白的交聯(lián)利用熱交聯(lián)來進行。
[0028] 根據(jù)本發(fā)明的另一實例，上述白蛋白的交聯(lián)利用醛類交聯(lián)劑來進行。在一特定例 中，上述醛類交聯(lián)劑選自由戊二醛、甲醛（formaldehyde)、二醛淀粉（dialdehyde starch)、 丁二酸酸（succinic acid aldehyde)、丙稀酸（acrylaldehyde)、乙二酸（oxalaldehyde)、 2-甲基丙稀醛（2-methyl acrylaldehyde)及2-氧代丙醛（2-oxopropanal)組成的