瑪瑙螺在制備治療急性肺損傷藥物中的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明公開(kāi)了瑪瑙螺在制備治療急性肺損傷藥物中的用途,本發(fā)明還提供了對(duì)急 性肺損傷具有保護(hù)功能的瑪瑙螺水提物凍干粉的制備方法,屬于醫(yī)學(xué)制藥技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)如今,隨著空氣質(zhì)量的日趨下降和生活環(huán)境的復(fù)雜多變,肺損傷是臨床常見(jiàn)肺 病之一。急性肺損傷是指由心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性加重的 呼吸困難、難治性低氧血癥和肺水腫,嚴(yán)重時(shí)稱為急性呼吸窘迫綜合征。致病因素包括嚴(yán)重 感染敗血癥、創(chuàng)傷、中毒、大量輸血、體外循環(huán)和彌漫性血管內(nèi)凝血等,其中以嚴(yán)重感染最為 常見(jiàn)。重癥時(shí)可出現(xiàn)神志模糊、煩躁、嗜睡、昏迷等重癥時(shí)可出現(xiàn)神志模糊、煩躁、嗜睡、昏迷 等重癥時(shí)可出現(xiàn)神志模糊、煩躁、嗜睡、昏迷等我國(guó)近年來(lái)臨床急性肺損傷的患病率日趨增 加,因此重視肺炎的防治具有重要意義。隨著人們生活水平的提高,選擇安全而有效的保健 食品正在逐漸走進(jìn)人們的視野。
[0003] 白玉蝸牛,也稱褐云瑪瑙螺,瑪瑙螺軟體動(dòng)物。褐云瑪瑙螺,為我國(guó)最大的一種陸 生貝類,殼高130mm,寬54mm。殼質(zhì)稍厚,有光澤,呈長(zhǎng)卵圓形。生活于田野農(nóng)作物上,森林 樹(shù)和陰濕的環(huán)境中,對(duì)光刺激敏感,喜陰濕環(huán)境生長(zhǎng),喜鉆入疏松土中,多清晨和黃昏時(shí)出 來(lái)活動(dòng),行動(dòng)緩慢,嗅覺(jué)敏銳。白玉蝸牛全身是寶,綜合利用價(jià)值高,需求量大,深度加工大 有可為。白玉蝸牛全身是寶,綜合利用價(jià)值高,需求量大,深度加工大有可為。白玉蝸牛肉 質(zhì)肥嫩、營(yíng)養(yǎng)豐富,是一種高蛋白(含有20種氨基酸)、低脂肪、膽固醇趨向于零的高級(jí)營(yíng)養(yǎng) 品,而多糖則是瑪瑙螺體內(nèi)重要的活性物質(zhì)。經(jīng)常食用可增加營(yíng)養(yǎng)、增強(qiáng)耐力、提高身體素 質(zhì),可使皮膚保持細(xì)嫩健美,延緩衰老,益壽延年。經(jīng)檢索未見(jiàn)瑪瑙螺在急性肺損傷具有醫(yī) 療作用的文獻(xiàn)報(bào)道。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明提供一種瑪瑙螺水提物在制備治療急性肺損傷藥物中的用途,用于對(duì)急性 肺損傷具有治療保健功能。
[0005] 本發(fā)明所述的對(duì)急性肺損傷具有保護(hù)功能的瑪瑙螺水提物凍干粉,是由如下方法 制備得到的: 將瑪瑙螺肉粉碎后加15~30倍的去離子水,在80°C-100°C下提取兩次,合并提取液, 減壓濃縮至300mL-500mL,按體積比:1:3-1:5加入95%的乙醇,室溫放置過(guò)夜;3000r/ min-4000r/min離心lOmin,收集沉淀,并以-30~_50°C凍干60~80小時(shí),得到瑪瑙螺水 提物凍干粉。
[0006] 經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明(詳見(jiàn)實(shí)施例),本發(fā)明瑪瑙螺水提物具有保護(hù)急性肺損傷的功 能,因而可以在作為保健食品方面得到應(yīng)用。其主要的功效學(xué)作用如下:經(jīng)用昆明小鼠為研 宄對(duì)象,利用J19N2-SIV感染致急性肺損傷模型,服用本發(fā)明的瑪瑙螺水提物凍干粉處理15 天后,觀察肺臟病理特征趨于好轉(zhuǎn)、炎癥因子TNF-a、IL-I0、IL-6以及抗炎細(xì)胞因子等因 子IL-IO的水平發(fā)生顯著變化。
[0007] 本發(fā)明的積極效果在于:提供利了瑪瑙螺新的保健醫(yī)用用途;制成的瑪瑙螺水提 物凍干粉安全、無(wú)副作用,具有顯著保健功效,可長(zhǎng)期服用,具有很好的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景。
【附圖說(shuō)明】
[0008] 圖1為本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟TNF-a蛋白含量的影響; 圖2為本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟IL-I0蛋白含量的影響; 圖3本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟IL-6蛋白含量的影響; 圖4為本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟NF-KB蛋白含量的影響; 圖5為本發(fā)明對(duì)急性肺損傷小鼠肝臟抗炎性因子IL-10表達(dá)的影響。
[0009] 具體實(shí)施例方式 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步描述,但本發(fā)明不受具體實(shí)施例限制。
[0010] 實(shí)施例1 將2kg瑪瑙螺肉粉碎,用去離子水40kg在80°C提取兩次,合并提取液,減壓濃縮至 300mL,加入95%的乙醇(體積比:1:5),室溫放置過(guò)夜;離心(3000r/min)lOmin,收集沉淀, 并以-50°C凍干72小時(shí),得到瑪瑙螺水提物凍干粉。
[0011] 實(shí)施例2 將2kg瑪瑙螺肉粉碎,用去離子水60kg在KKTC下提取兩次,合并提取液,減壓濃縮至 500mL,加入95%的乙醇(體積比:1:3),室溫放置過(guò)夜;離心(4000r/min)lOmin,收集沉淀, 并以-50°C凍干80小時(shí),得到瑪瑙螺水提物凍干粉。
[0012] 實(shí)施例3 將2kg瑪瑙螺肉粉碎,用去離子水50kg在90°C下提取兩次,合并提取液,減壓濃縮至 450mL,加入95%的乙醇(體積比:1:4),室溫放置過(guò)夜;離心(4000r/min)lOmin,收集沉淀, 并以-50°C凍干80小時(shí),得到瑪瑙螺水提物凍干粉。
[0013] 通過(guò)以下試驗(yàn)例用于說(shuō)明本發(fā)明的瑪瑙螺水提物凍干粉對(duì)急性肺損傷的保護(hù)作 用的影響: 1動(dòng)物分組及飼養(yǎng) 120只昆明小鼠(體重18~22g,飼養(yǎng)溫度22±2°C,相對(duì)濕度40~70%)隨機(jī)平分為H9N2-SIV感染組(感染組),H9N2-SIV+實(shí)施例1~實(shí)施例3制備的瑪瑙螺水提物凍干粉(治 療組)及空白對(duì)照組。建模方法為:滴鼻接種用滅菌生理鹽水10倍稀釋的H9N2-SIV病毒 液(0.ImL/只),灌胃給藥,實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3水提物凍干粉劑量組分別按200、 600、1200mg/kg生藥量灌胃給藥,灌胃體積為0. 2mL,空白對(duì)照組給予0. 2mL的生理鹽水;除 空白對(duì)照組,其余組均建模1次,隨后劑量組給藥一次,之后劑量組再持續(xù)給藥14日(每日 1次)。
[0014] 2檢測(cè)結(jié)果 2. 1本發(fā)明對(duì)急性肝損傷小鼠臨床表現(xiàn)的影響 空白對(duì)照組小鼠精神狀態(tài)較佳、被毛光澤、活動(dòng)靈活、呼吸及進(jìn)食正常,試驗(yàn)期間體重 增長(zhǎng),穩(wěn)定增長(zhǎng)趨勢(shì)平緩。感染組小鼠精神狀態(tài)差、背毛粗糙無(wú)光澤,行為遲鈍、活動(dòng)和飲食 減少、呼吸急促,小鼠感染病毒后伴隨發(fā)病和耐過(guò)過(guò)程,體質(zhì)量出現(xiàn)先降后升的趨。
[0015] 劑量組小鼠體征表現(xiàn)比感染組減輕,比對(duì)照組加重,即介于感染組和對(duì)照組之間, 精神狀態(tài)稍差、活動(dòng)稍減少、呼吸稍急促,體質(zhì)量呈先降后升趨勢(shì),與感染組相比較,體質(zhì)量 下降趨勢(shì)較緩,而上升趨勢(shì)較快,感染組從第2d末開(kāi)始出現(xiàn)死亡,而劑量組在第4d才開(kāi)始 出現(xiàn)死亡,死亡率較感染組明顯降低。
[0016] 2. 2本發(fā)明對(duì)急性肺損傷小鼠肺系數(shù)和肺濕質(zhì)量與肺干質(zhì)量比值(W/D)變化 表1小鼠肺系數(shù)的變化
通過(guò)表1可知:與空白組相比,感染組小鼠肺系數(shù)明顯升高,劑量組小鼠的肺系數(shù)變化 較小;并且實(shí)施例1~實(shí)施例3小鼠的肺系數(shù)已接近空白組小鼠。表1結(jié)果表明:本發(fā)明參 與了H9N2-SIV感染小鼠引起的急性肺損傷,并起到保護(hù)作用。
[0017] 2. 3本發(fā)明對(duì)急性肺損傷小鼠肝臟炎性因子表達(dá)的影響 2. 3.1本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟TNF-a蛋白含量的影響 通過(guò)圖1可以得出,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,模型組有顯著性差異(#:與空白組相比P〈〇. 05 ;:與空白組相比P〈〇. 01)。各劑量組與模型組相比,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)施例組有顯著性差 異:與模型組相比P〈〇.05 :與模型組相比p〈0. 01)。圖1結(jié)果表明:腫瘤壞死因子-a (TNF-a)作為參與急性肺損傷的重要炎癥因子。本發(fā)明對(duì)H9N2-SIV引起的小鼠肺勻漿中TNF- a蛋白含量增加具有顯著的抑制作用,減少損傷作用。
[0018] 2. 3. 2本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟IL-I0蛋白含量的影響 通過(guò)圖2可以得出,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,模型組有顯著性差異(#:與空白組相比p〈0. 05 ;:與空白組相比p〈〇. 01)。各劑量組與模型組相比,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)施例組有顯著性差 異(**:與模型組相比p〈〇. 01)。圖2結(jié)果表明:白介素-10 (IL-10)作為參與急性肺損 傷的重要炎癥因子。本發(fā)明對(duì)H9N2-SIV引起的小鼠肺勻漿中IL-I0蛋白含量增加具有顯 著的拮抗作用,說(shuō)明本發(fā)明參與肺損傷的修復(fù)過(guò)程。
[0019] 2. 3. 3本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟IL-6蛋白含量的影響 通過(guò)圖3可以得出,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,模型組有顯著性差異(#:與空白組相比p〈0. 05 ;:與空白組相比p〈〇. 01)。各劑量組與模型組相比,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)施例組有顯著性差 異:與模型組相比P〈〇. 05 :與模型組相比p〈0. 01)。圖3結(jié)果表明:白介素-6(IL-6) 是參與急性肺損傷的重要炎癥因子。本發(fā)明可顯著降低J19N2-SIV引起的小鼠肺勻漿中IL-6蛋白含量的增加,抑制炎癥的發(fā)生。
[0020] 2. 3. 4本發(fā)明對(duì)酒精引起的小鼠肝臟NF-KB蛋白含量的影響 通過(guò)圖4可以得出,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,模型組有顯著性差異:與空白組相比p〈0. 05 ;)。 各劑量組與模型組相比,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)施例組有顯著性差異(*:與模型組相比 p〈0. 05)。圖4結(jié)果表明:核因子-KB(NF-kB)是參與急性肺損傷的重要炎癥因子。本發(fā) 明可顯著降低H9N2-SIV引起的小鼠肺勻漿中NF-kB蛋白含量的增加,抑制細(xì)胞凋亡的發(fā) 生。
[0021] 2. 4本發(fā)明對(duì)急性肺損傷小鼠肝臟抗炎性因子IL-10表達(dá)的影響 通過(guò)圖5可以得出,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,模型組有顯著性差異(#:與空白組相比p〈0. 05 ;與空白組相比P〈〇. 01)。各劑量組與模型組相比,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)施例組有顯著性 差異:與模型組相比P〈〇. 05 :與模型組相比p〈0. 01)。圖5結(jié)果表明:白介素-10 (IL-10)是參與急性肺損傷的重要抗炎癥因子,可抑制炎癥的發(fā)生。本發(fā)明可顯著增加H9N2-SIV引起的小鼠肺勻漿中IL-10蛋白含量的降低,起到保護(hù)肺組織的作用。
[0022] 綜合上述,本發(fā)明連續(xù)建模、灌胃15天后,對(duì)H9N2-SIV引起的小鼠的急性肺組織 系數(shù)、炎癥因子的變化具有明顯的保護(hù)作用,具有很大的市場(chǎng)潛力。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 瑪瑙螺在制備治療急性肺損傷藥物中的用途。2. -種對(duì)急性肺損傷具有保護(hù)功能的瑪瑙螺水提物凍干粉,其特征在于:瑪瑙螺 肉粉碎后加15~30倍的去離子水,在80°C-100°C下提取兩次,合并提取液,減壓濃縮至 3001^-5001^,按體積比:1:3-1:5加入95%的乙醇,室溫放置過(guò)夜 ;(3000~4000)17^11離 心lOmin,收集沉淀,并以-30~-50°C凍干60~80小時(shí),得到瑪瑙螺水提物凍干粉。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了瑪瑙螺在制備治療急性肺損傷藥物中的用途,本發(fā)明還提供了對(duì)急性肺損傷具有保護(hù)功能的瑪瑙螺水提物凍干粉的制備方法,經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明,本發(fā)明瑪瑙螺水提物具有保護(hù)急性肺損傷的功能,因而可以在作為保健食品方面得到應(yīng)用。其主要的功效學(xué)作用如下:經(jīng)用昆明小鼠為研究對(duì)象,利用H9N2-SIV感染致急性肺損傷模型,服用本發(fā)明的瑪瑙螺水提物凍干粉處理15天后,觀察肺臟病理特征趨于好轉(zhuǎn)、炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6以及抗炎細(xì)胞因子等因子IL-10的水平發(fā)生顯著變化。
【IPC分類】A61P11/00, A61K9/19, A61K35/618
【公開(kāi)號(hào)】CN104887712
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510306267
【發(fā)明人】楊東生, 王立英, 滕利榮, 張瑤, 付晶, 江連海, 劉燕隔
【申請(qǐng)人】吉林大學(xué)珠海學(xué)院
【公開(kāi)日】2015年9月9日
【申請(qǐng)日】2015年6月8日