水飽和正丁醇10 mL，超聲（功率250 W， 頻率40 kHz)處理30 min，吸取上清液加3倍氨試液，搖勻，放置分層，取上清液蒸干，殘?jiān)?加 I mL甲醇溶解，作供試品溶液。
[0077] 對照品溶液的制備： 取人參皂苷Rgi、Re、!^對照品，精密稱定，加甲醇溶解制成0.2 mg/mL對照品溶液。
[0078] 色譜條件： 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，按表3-1進(jìn)行梯 度洗脫；檢測波長為203 nm。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 參茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，該參茸補(bǔ)腦膠囊由如下重量份數(shù)的原料藥制成：人 參95~110份、制遠(yuǎn)志250~270份、石菖蒲385~410份、茯苓250~270份、鹿茸24~ 28份、肉蓯蓉385~410份、石決明500~550份、葛根500~550份、麻黃50~55份； 其質(zhì)量檢測方法包括如下各項(xiàng)： 性狀：本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕色至棕褐色顆粒物和粉末，味微苦； 鑒別：包括人參、鹿茸、制遠(yuǎn)志和麻黃的薄層色譜鑒別； 檢查：應(yīng)符合《中國藥典》2010年版一部附錄I L膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定； 含量測定：包括人參含量測定和葛根含量測定。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的參茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：人參薄層色譜 鑒別方法是：取本品內(nèi)容物3~6 g，加三氯甲烷30~50 mL，加熱回流0. 5~2小時(shí)，棄去三氯 甲燒液，藥澄揮干溶劑，加水濕潤，再加水飽和正丁醇5~15mL，超聲處理20~40 min，吸取上 清液加2~4倍氨試液，搖勻，放置分層，取上清液蒸干，殘?jiān)覫mL甲醇溶解作供試品溶液； 取人參對照藥材I g，同法制成對照藥材溶液；另取人參皂苷Rbl對照品、Rgl對照品、Re 對照品、Rf對照品，加甲醇制成I mL含2 mg的混合溶液；照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述三 種溶液各1~3 y L，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水按 10~20:30~50:18~26:5~15的比例8~15 °C以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干， 顯色，噴以5~15%的硫酸乙醇在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，分別在日光和紫外光燈下檢 視。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的參茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：鹿茸薄層色譜 鑒別方法是：取本品內(nèi)容物3~8 g，置具塞錐形瓶中，加60~80%乙醇40~60 mL，超聲處理 10~20 min，濾過，取濾液作為供試品溶液；取鹿茸對照藥材0. 4 g，同法制成對照藥材溶液； 另取甘氨酸對照品，加60~80%乙醇制成I mL含2 mg的溶液作為對照品溶液；照薄層色譜 法實(shí)驗(yàn)，吸取上述對照品溶液、供試品溶液各1~3 y L、對照藥材溶液5~15 y L，分別點(diǎn)于同 一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水按2~4:0. 5~1. 5:0. 5~1. 5比例為展開劑，展開， 取出，晾干，顯色，噴以茚三酮丙酮溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的參茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：制遠(yuǎn)志薄層色 譜鑒別方法是：取本品內(nèi)容物2 g，置具塞錐形瓶中，加入60~80%甲醇40~60 mL，超聲處理 0. 5~2 h ;搖勻，濾過；將濾液置圓底燒瓶中，水浴加熱蒸干；殘?jiān)?~20%的氫氧化鈉溶液 40~60 mL加熱回流1~3 h，放冷，用鹽酸調(diào)pH值為3~6. 5,用水飽和正丁醇振搖提取2~3次， 每次40~60 mL，合并正丁醇液，回收溶劑至干，殘?jiān)? mL甲醇溶解，作供試品溶液；取細(xì) 葉遠(yuǎn)志皂苷對照品，加甲醇制成I mL含I mg的對照品溶液；照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取上述 對照品溶液、供試品溶液各3~6 y L，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水 按5~7:2~4:0. 2~0. 8比例為展開劑，展開，取出，晾干，顯色，噴以5~20%硫酸乙醇溶液，在 100~110 °C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的參茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：麻黃薄層色譜 鑒別方法是：取本品內(nèi)容物2~6 g，加濃氨試液數(shù)滴，再加三氯甲烷10~30 mL，加熱回流 〇.5~2 h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状? mL充分振搖，濾過，取濾液作為供試品溶液；取鹽酸 麻黃堿對照品，加甲醇制成I mL含I mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法實(shí)驗(yàn)，吸取 上述對照品溶液、供試品溶液各2~6 y L，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲 醇-濃氨試液按20~50:3~6:0. 3~0. 6比例顯色為展開劑，展開，取出，晾干，顯色，噴以茚三 酮試液，在l〇5°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：人參含量測定方 法是：取本品內(nèi)容物2~6 g，精密稱定，置索氏提取器中，加三氯甲烷20~60 mL加熱回流 0. 5~2小時(shí)，棄去三氯甲烷液，藥渣揮干溶劑，加水適量濕潤，再加水飽和正丁醇5~15 mL， 超聲處理20~40 min，吸取上清液加1~4倍氨試液，搖勻，放置分層，取上清液蒸干，殘?jiān)? 0.5~1. 5 mL甲醇溶解，作供試品溶液；取人參皂苷Rgl、Re、Rbl對照品，精密稱定，加甲醇 溶解制成〇. l~〇. 3 mg/mL對照品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5~20 ML， 注入液相色譜儀，測定。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：人參含量測定的 色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度 洗脫；檢測波長為203 nm。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：人參含量測定的 供試品溶液還可采用以下方法配制：取本品內(nèi)容物2~6 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別 精密加甲醇20~60 mL加熱回流0. 5~2小時(shí)和超聲處理0. 5~2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用溶 劑補(bǔ)足減少的重量，搖勻，用〇. 45 y m微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液測定。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于：葛根含量測定方 法是： (1)取本品內(nèi)容物約0. 05~0. 15 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入20~40%乙醇 40~60 mL，稱定重量，超聲振動(dòng)10~50分鐘，放冷，再稱定重量，用20~40%乙醇補(bǔ)足減少的重 量，搖勻，用0. 45 y m微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液； (2 )精密稱定葛根素對照品置5~20mL量瓶中，加20~40%乙醇超聲溶解并至刻度，搖勻， 精密吸取1~3 mL，置100 mL量瓶中，加入20~40%乙醇并稀釋刻度，搖勾，制成每ImL含葛 根素32. 02 y g的對照品溶液； (3) 取缺葛根的陰性樣品，按步驟（1)供試品溶液的制備處理方法制備，即得缺葛根的 陰性空白對照溶液； (4) 選用甲醇-0. 2%冰醋酸溶液按15~30:60~80的比例為流動(dòng)相；采用250 nm為檢測 波長；采用20~40%乙醇溶劑作為提取樣品的溶劑；以超聲20~40min提取方法作為供試品 的提取方法。
【專利摘要】本發(fā)明公開了參茸補(bǔ)腦膠囊的質(zhì)量檢測方法，該參茸補(bǔ)腦膠囊由如下重量份數(shù)的原料藥制成：人參106.4份、制遠(yuǎn)志266份、石菖蒲399份、茯苓266份、鹿茸26.6份、肉蓯蓉399份、石決明532份、葛根532份、麻黃53.2份；其質(zhì)量檢測方法包括如下各項(xiàng)：性狀：本品為硬膠囊，內(nèi)容物為棕色至棕褐色顆粒物和粉末，味微苦；鑒別：包括人參、鹿茸、制遠(yuǎn)志和麻黃的薄層色譜鑒別；檢查：應(yīng)符合《中國藥典》2010年版一部附錄ⅠL膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定；含量測定：包括人參含量測定和葛根含量測定。以該方法為標(biāo)準(zhǔn)檢測參茸補(bǔ)腦膠囊，可以很好的保證制劑的穩(wěn)定性，從而保證其療效。
【IPC分類】A61K35-618, A61K9-48, G01N30-90, A61P25-28, A61K36-888, G01N30-02, A61K35-32
【公開號(hào)】CN104873686
【申請?zhí)枴緾N201510298437
【發(fā)明人】韓云霞, 宋信莉, 楊元鳳, 夏于芬, 曾真, 簡祖琴, 劉廷江
【申請人】貴陽中醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院
【公開日】2015年9月2日
【申請日】2015年6月3日