何防曬成分(納米氧化鋅、甲氧基肉桂酸辛酯、松果菊苷）；（2)防曬霜1 :只加入納米氧化 鋅、甲氧基肉桂酸辛酯，不加松果菊苷；（3)防曬霜2 :加入納米氧化鋅、甲氧基肉桂酸辛酯、 松果菊苷。涂抹劑量為0. 5mg/cm2。
[0036] SOD試劑盒(南京建成AOO1-1)，CAT試劑盒(南京建成A007)，GSH-Px試劑盒(南 京建成A005)，MDA試劑盒(南京建成A003-1)。
[0037] FLYDWC50-IIC低壓低氧動(dòng)物實(shí)驗(yàn)艙（貴州風(fēng)雷航空軍械有限責(zé)任公司）；BSA124S 電子分析天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；QC5130電動(dòng)理發(fā)器(荷蘭皇家飛利浦電 子公司）；ST-513紫外線測量儀(先馳光電股份有限公司）;PL-S 9W/01/2P窄譜中波NB-UVB 燈，光譜范圍UVB (311nm)(荷蘭皇家飛利浦電子公司）；CKX41SF電子顯微鏡（日本奧林巴 斯株式會(huì)社)。
[0038] 2. 3實(shí)驗(yàn)方法： 小鼠腹腔注射3%的戊巴比妥鈉進(jìn)行麻醉，麻醉后用電動(dòng)理發(fā)器剃除背部2X5 cm2的 長毛，再用棉簽蘸取10%的硫化鈉溶液涂于小鼠背部去除細(xì)小毛發(fā)。隨機(jī)將所有小鼠分為 5組：正常組；UVB照射組；基質(zhì)+ UVB組；防曬霜I + UVB組；防曬霜2 + UVB組。每組10 只。
[0039] 進(jìn)行紫外照射前30分鐘將空白基質(zhì)或加藥防曬霜涂于小鼠背部脫毛處，再將小 鼠放入低壓艙，密閉艙門，以5m/s的速度減壓，上升至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的5000m海拔高度，維持該 高度并對(duì)小鼠進(jìn)行紫外照射，每次照射強(qiáng)度為〇. 36mJ/cm2,每次照射10分鐘，隔天照射一 次，共照射10次，累積照射強(qiáng)度為1956mJ/cm 2。每天觀察紫外燈照射后小鼠背部皮膚的變 化。末次照射24h后，戊巴比妥鈉鈉注射處死小鼠，取背部皮膚檢測。
[0040] 用特制器具取背部直徑為5mm皮膚，稱重，檢查皮膚水腫情況。剩余皮膚一部 分-80°C凍存，一部分用體積分?jǐn)?shù)為10%福爾馬林固定，脫水，石蠟包埋，切片，HE染色，顯微 鏡下觀察，拍照。
[0041] _80°C凍存的皮膚組織，按照試劑盒說明書的方法測定SOD、CAT、GSH-Px活性和 MDA含量。
[0042] 2. 4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 以SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，數(shù)據(jù)均采用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差（X 土 s)表示，兩組間比較采用?檢驗(yàn)、多組間比較采用單因素方差分析，認(rèn)為^〈 0.05為差異 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0043] 2. 5實(shí)驗(yàn)結(jié)果 2. 5. 1松果菊苷對(duì)小鼠皮膚水腫的影響 圖3表明，UVB組小鼠皮膚的重量明顯高于正常組，說明在高原低壓低氧環(huán)境下UVB可 導(dǎo)致小鼠背部皮膚的水腫，而兩種防曬霜都可在一定程度上抑制小鼠皮膚的水腫，且防曬 霜2對(duì)水腫的抑制作用強(qiáng)于防曬霜1，說明松果菊苷對(duì)UVB所致小鼠皮膚水腫具有一定的改 善作用，且優(yōu)于單純的傳統(tǒng)防曬成分納米氧化鋅和甲氧基肉桂酸辛酯。
[0044] 2. 5. 2松果菊苷對(duì)小鼠皮膚組織形態(tài)的影響 從圖4和圖5中我們可以看出，正常組小鼠背部皮膚光滑，細(xì)膩，無任何損傷，表皮各層 紋理清晰；UVB組小鼠背部皮膚損傷，變紅，發(fā)生潰爛，表皮增厚，角化過度，組織結(jié)構(gòu)松散； 基質(zhì)+UVB組小鼠背部的皮膚也變紅潰爛，表皮與角質(zhì)層增厚，出現(xiàn)與UVB組相似的癥狀；而 防曬霜1+UVB組小鼠的皮膚相對(duì)于UVB照射組損傷程度得到一定程度上的改善，皮膚變紅 潰爛的面積相應(yīng)減少，表皮和角質(zhì)層增厚現(xiàn)象減少；防曬霜2+UVB組的小鼠皮膚損傷的改 善程度相對(duì)于防曬霜1+UVB組的小鼠更為明顯。這說明，本發(fā)明中所添加的天然產(chǎn)物松果 菊苷具有一定的抵抗UVB的能力，能減弱在模擬高原低壓低氧環(huán)境下由UVB造成的皮膚損 傷，并且這種防護(hù)作用強(qiáng)于傳統(tǒng)的防曬霜成分納米氧化鋅和甲氧基肉桂酸辛酯。
[0045] 2. 5. 3松果菊苷對(duì)小鼠皮膚組織中SOD、CAT、GSH-Px活性和MDA含量的影響 從圖6中我們可以看出，與正常組比較，UVB組和基質(zhì)+UVB組中膚組織勻漿中的S0D、 CAT和GSH-Px的活力均顯著降低（K0. 01)，而MDA含量顯著升高（K0. 01)。松果菊苷+UVB 組的SOD、CAT和GSH-Px的活力與UVB組比較，均顯著升高（K0. 01)，而MDA含量顯著降 低（K0. 01)。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明松果菊苷具有一定的抗UVB能力，能夠降低由UVB造成的 HaCaT細(xì)胞的損傷，而含天然產(chǎn)物松果菊苷的防曬霜對(duì)皮膚具有良好的生物學(xué)作用，能夠改 善模擬高原地區(qū)高強(qiáng)度UVB照射導(dǎo)致的皮膚損傷，同時(shí)提高SOD、CAT和GSH-Px的活力，降 低MDA的含量，降低由UVB誘導(dǎo)氧化損傷，提示松果菊苷可以作為防曬活性成分應(yīng)用到化妝 品中。
[0046] 實(shí)施例4實(shí)施例1制備得到的高原防曬霜對(duì)進(jìn)入高原人群皮膚防護(hù)效果的初步 觀察 1.對(duì)象與方法 I. 1對(duì)象2012-2014年7-8月西安中旅、青旅、天馬、春秋旅行社組織的進(jìn)藏旅游團(tuán) 人員，共計(jì)108人，其中男性76人，女性32人，年齡17-46歲，通過征集自愿者方式獲得對(duì) 含松果菊苷的高原防曬霜試用，在藏區(qū)滯留時(shí)間均超過7d，無皮膚損傷。
[0047] 1. 2 方法 1. 2. 1分組及用藥方法 各旅行社導(dǎo)游按高原防曬霜編號(hào)隨機(jī)發(fā)放到試驗(yàn)人群，并做好使用登記記錄。所有 無皮膚損傷人員隨機(jī)分為預(yù)防組和對(duì)照組，預(yù)防組均在入藏后使用含松果菊苷的高原防曬 霜，對(duì)照組均使用乳膏基質(zhì)，統(tǒng)一要求每天涂擦暴露部位皮膚2次，7d為1個(gè)療程。
[0048] 1. 2. 2評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 1個(gè)療程后觀察效果，預(yù)防效果按各類皮膚損傷發(fā)生率評(píng)判，按紫外線輻射導(dǎo)致的皮膚 損傷(曬黑、曬傷、多行性日光瘆、皮膚光老化）發(fā)生率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
[0049] 1.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用組間的X 2檢驗(yàn)，認(rèn)為產(chǎn)〈0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0050] 1.3 結(jié)果 經(jīng)返回平原地區(qū)后，由皮膚科醫(yī)生對(duì)受試人員進(jìn)行檢測，按照皮膚損傷程度來進(jìn)行判 斷，結(jié)果見下表。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高原防曬霜，由以下重量百分比的組分制備得到， 油相： 硬脂酸 10~15% 單硬脂酸甘油酯 5~10% 凡士林 4~5% 納米氧化鋅 3~5% 甲氧基肉桂酸辛酯 3~5% 水相： 三乙醇胺 5~7% 甘油 5~10% 氮酮 1~2% 松果菊苷 5~10% 尼泊金乙酯 0. 1~0. 2% 維生素C 0. 4-0. 6% 香料 0? 1~0. 3% 去離子水 余量。
2. 權(quán)利要求1所述高原防曬霜的制備方法，其特征在于包括以下步驟： (1) 將油相組分硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、凡士林、納米氧化鋅、甲氧基肉桂酸辛酯及水 相組分三乙醇胺、甘油、氮酮、松果菊苷、尼泊金乙酯、維生素C、香料、部分去離子水分別加 熱至80~85°C，直至融化； (2) 趁熱將油相組分加至水相組分中，加入剩余去離子水，攪拌均勻，冷卻膏體至40°C， 攪勻脫氣； (3) 繼續(xù)攪拌至完全乳化形成膏體即得含松果菊苷的高原防曬霜。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述高原防曬霜的制備方法，其特征在于：步驟（1)中，將油相和水 相分別加熱至80°C。
4. 權(quán)利要求1所述防曬霜在制備治療或預(yù)防高原紫外線所致的皮膚損傷中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種含天然產(chǎn)物松果菊苷的高原防曬霜，其制備方法為：將油相成分（硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、凡士林、氧化納米鋅、甲氧基肉桂酸辛酯）與水相成分（三乙醇胺、甘油、氮酮、松果菊苷、尼泊金乙酯、維生素C、去離子水）分別加熱至80℃，將熔融的油相加入水相中，高速攪拌，冷卻膏體至40℃，攪勻脫氣，繼續(xù)緩慢攪拌至完全乳化形成膏體，冷凝即得含松果菊苷的高原防曬霜。本發(fā)明高原防曬霜對(duì)治療或預(yù)防高原高強(qiáng)度紫外線所致的皮膚損傷有良好的保護(hù)效果。
【IPC分類】A61K8-37, A61K8-60, A61K8-27, A61K8-67, A61Q17-04
【公開號(hào)】CN104840372
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510049576
【發(fā)明人】王劍波, 張迪
【申請(qǐng)人】中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
【公開日】2015年8月19日
【申請(qǐng)日】2015年2月1日