r>[0035] 下面結(jié)合具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步描述本發(fā)明，但實(shí)施例僅是范例性的，并不對(duì)本發(fā) 明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下 可以對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的 保護(hù)范圍內(nèi)。
[0036] 基于現(xiàn)有的研宄結(jié)果，本實(shí)施例采用穴區(qū)施用藥物后，穴位區(qū)微血管自律性舒縮 活動(dòng)振幅是否有顯著提高來(lái)判斷該藥物是否對(duì)穴位有激活作用，即是否能夠作為穴位激活 劑應(yīng)用。
[0037] 由于穴位區(qū)具有同步舒縮功能的微血管群占據(jù)的面積很小，而目前廣泛用于測(cè)定 微血管活動(dòng)規(guī)律的激光多普勒血流儀的探頭僅0. 25mm，故按傳統(tǒng)方法確定的穴位，探測(cè)到 微血管群同步舒縮活動(dòng)的概率很低。本實(shí)施例結(jié)合穴位低電阻特性，改用激光多普勒血流 灌注成像儀來(lái)測(cè)定穴位皮內(nèi)微血管舒縮活動(dòng)規(guī)律及同一經(jīng)脈不同穴位微血管自律性舒縮 運(yùn)動(dòng)情況。
[0038]實(shí)施例1補(bǔ)中益氣湯施用于膝關(guān)穴對(duì)涌泉穴微血管舒縮活動(dòng)的振幅的作用，以及 對(duì)肝臟的血流灌注量的影響
[0039] 1材料與方法
[0040] I. 1試驗(yàn)材料
[0041]I.I. 1試驗(yàn)動(dòng)物及分組
[0042] 按照給藥方式及藥物的不同，將40只180~200g的雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組： 穴位導(dǎo)藥組，分別導(dǎo)入補(bǔ)中益氣湯和生理鹽水；肌肉注射組，分別注射與對(duì)應(yīng)的穴位導(dǎo)藥組 相同劑量、濃度的補(bǔ)中益氣湯和生理鹽水。
[0043] 1.1. 2中藥、溶液配制
[0044] 補(bǔ)中益氣湯水煎液制備：按照藥典中的補(bǔ)中益氣湯處方分別稱取黃芪90g、人參 60g、白術(shù)60g、炙甘草45g、當(dāng)歸60g、陳皮60g、升麻30g、柴胡30g飲片，加飲用水煎煮三次， 第一次加10倍量飲用水，先大火煮沸再小火煎煮1小時(shí)，然后16層紗布過(guò)濾；藥渣再分別 加8倍量、6倍量飲用水進(jìn)行第二次、第三次煮沸、煎煮、過(guò)濾。合并三次濾液，布氏漏斗再抽 濾。將藥液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸發(fā)至20mL濃縮藥液后，于70°C鼓風(fēng)干燥箱中干燥至恒重，獲得 補(bǔ)中益氣湯浸膏。稱取補(bǔ)中益氣湯浸膏，溶于生理鹽水中，混勻，制成lg/mL的補(bǔ)中益氣湯 溶液。
[0045] 1. 2試驗(yàn)方法
[0046]I. 2. 1試驗(yàn)動(dòng)物的準(zhǔn)備
[0047] 大鼠待測(cè)穴位區(qū)提前至少一天除毛，除毛時(shí)避免損傷皮膚。試驗(yàn)前先誘導(dǎo)麻醉，肌 肉注射〇.ImL硫酸阿托品，然后按照20mg/mL、30mg/kg的劑量給大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉， 進(jìn)行全身麻醉，以備試驗(yàn)。
[0048] 1. 2. 2監(jiān)測(cè)對(duì)象的選擇
[0049] 選取大鼠足厥陰肝經(jīng)上的曲泉穴作為監(jiān)測(cè)穴位，同經(jīng)上的膝關(guān)穴作為導(dǎo)藥穴位， 曲泉穴周圍避開經(jīng)脈線、穴位、血管及皮膚破損處作為肌肉注射點(diǎn)。試驗(yàn)動(dòng)物完全麻醉后， 用75%酒精棉球清潔試驗(yàn)動(dòng)物曲泉穴、膝關(guān)穴及周圍皮膚，待酒精揮發(fā)后，對(duì)穴位進(jìn)行定位 并標(biāo)記。
[0050] 選定肝臟為另一監(jiān)測(cè)對(duì)象，構(gòu)建既能避開體表經(jīng)脈又能暴露肝臟的腹腔通路。在 腹部中線右側(cè)旁開〇. 5cm處，從胸骨劍突向下做一長(zhǎng)3cm的豎直切口，完全暴露肝臟，在肝 臟下墊好浸泡過(guò)生理鹽水的紗布?jí)K以保持濕潤(rùn)。
[0051] 利用激光多普勒血流灌注成像儀分別監(jiān)測(cè)右外葉肝小葉的血流灌注量及足厥陰 肝經(jīng)上曲泉穴的微血管自律性舒縮活動(dòng)頻率、振幅等參數(shù)。
[0052] 1. 2. 3穴位導(dǎo)藥組
[0053] 激光多普勒血流灌注成像系統(tǒng)預(yù)熱IOmin后，根據(jù)解剖學(xué)定位監(jiān)測(cè)膝關(guān)穴、曲泉 穴穴區(qū)微血管舒縮活動(dòng)，如出現(xiàn)頻率和振幅不規(guī)則圖譜，則適度調(diào)整監(jiān)測(cè)點(diǎn)，保證取穴的準(zhǔn) 確性，并記錄曲泉穴微血管舒縮活動(dòng)5min。
[0054] 之后用微量移液器吸取200yL的lg/mL補(bǔ)中益氣湯溶液注入導(dǎo)入電極襯墊上， 將離子導(dǎo)入儀的導(dǎo)藥電極固定于膝關(guān)穴，打開PF382電源，設(shè)定導(dǎo)藥時(shí)間2min，導(dǎo)藥電流 0. 2mA，導(dǎo)藥過(guò)程中持續(xù)監(jiān)測(cè)曲泉穴，導(dǎo)藥結(jié)束后繼續(xù)監(jiān)測(cè)曲泉穴lOmin。
[0055] 同上，在膝關(guān)穴導(dǎo)入200yL的0. 9%生理鹽水，記錄并保存穴位導(dǎo)藥完整過(guò)程中 的曲泉穴微血管舒縮活動(dòng)圖譜及肝臟的血流灌注量。
[0056] 1.2. 4肌肉注射組
[0057] 激光多普勒血流灌注成像系統(tǒng)預(yù)熱IOmin后，根據(jù)解剖學(xué)定位監(jiān)測(cè)曲泉穴區(qū)微血 管舒縮活動(dòng)，如出現(xiàn)頻率和振幅不規(guī)則圖譜，則適度調(diào)整監(jiān)測(cè)點(diǎn)，保證取穴的準(zhǔn)確性，并記 錄曲泉穴微血管舒縮活動(dòng)5min。
[0058] 用ImL-次性注射器吸取200yL的lg/mL補(bǔ)中益氣湯溶液，在曲泉穴周圍非經(jīng)非 穴的空白區(qū)域進(jìn)行肌肉注射，之后繼續(xù)監(jiān)測(cè)曲泉穴lOmin。
[0059] 同上，在曲泉穴周圍非經(jīng)非穴的空白區(qū)域肌肉注射200yL的0. 9 %生理鹽水，記 錄并保存肌肉注射過(guò)程中的曲泉穴微血管舒縮活動(dòng)圖譜及肝臟血流灌注量。
[0060] 1. 2. 5圖像處理及數(shù)據(jù)分析
[0061] 在穴位導(dǎo)藥組中，從每個(gè)試驗(yàn)動(dòng)物導(dǎo)藥前、中、后微血管舒縮活動(dòng)振幅圖像中分別 選取5段數(shù)據(jù)計(jì)算導(dǎo)藥前、中、后穴區(qū)振幅平均值及振幅變化幅度。同時(shí)，整個(gè)導(dǎo)藥過(guò)程中 保持對(duì)肝臟血流灌注量的監(jiān)測(cè)，統(tǒng)計(jì)導(dǎo)藥前、中、后肝臟血流灌注量的平均值。
[0062] 同理，肌肉注射組中，從每個(gè)試驗(yàn)動(dòng)物肌肉注射前、后微血管舒縮活動(dòng)振幅圖像中 分別選取5段數(shù)據(jù)計(jì)算導(dǎo)藥前、后穴區(qū)振幅平均值及振幅變化幅度，并統(tǒng)計(jì)肌注前后肝臟 血流灌注量的平均值。
[0063]導(dǎo)藥前（中、后）振幅=(PUmax-PUmin)/5
[0064] 振幅變化幅度=導(dǎo)藥后振幅平均值一導(dǎo)藥前振幅平均值。
[0065] 用prism統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用均值土標(biāo)準(zhǔn)差（(i±S)表示，組間比 較用t檢驗(yàn)，以P< 0. 05為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，P< 0. 01為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異極顯著。
[0066] 2 結(jié)果
[0067] 2. 1穴位導(dǎo)藥組
[0068] 表1結(jié)果顯示，與導(dǎo)藥前比較，分別在膝關(guān)穴導(dǎo)入補(bǔ)中益氣湯及生理鹽水后，同為 足厥陰肝經(jīng)上的曲泉穴區(qū)皮膚微血管舒縮振幅均有不同程度的變化，其中穴區(qū)導(dǎo)入補(bǔ)中益 氣湯與導(dǎo)入生理鹽水相比，極顯著地提高了穴區(qū)皮內(nèi)微血管舒縮活動(dòng)振幅（P< 〇. 01)(見 圖1)。由表2可見，與導(dǎo)藥前比較，在足厥陰肝經(jīng)上導(dǎo)入補(bǔ)中益氣湯后可極顯著提高肝臟血 流灌注量（P< 0.01)。（見圖2)
[0069] 表1穴位導(dǎo)藥過(guò)程曲泉穴微血管舒縮活動(dòng)振幅比較（n = 10)
[0070]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 補(bǔ)中益氣湯的新用途，其特征在于，所述補(bǔ)中益氣湯作為穴位激活劑應(yīng)用。
2. 如權(quán)利要求1所述的新用途，其特征在于，所述補(bǔ)中益氣湯通過(guò)提高穴區(qū)微血管自 律性舒縮活動(dòng)振幅激活穴位。
3. 如權(quán)利要求1所述的新用途，其特征在于，所述補(bǔ)中益氣湯可通過(guò)所施用穴位所屬 經(jīng)絡(luò)的傳導(dǎo)作用提高同一經(jīng)脈上其它穴位區(qū)微血管的自律性舒縮活動(dòng)振幅以激活同經(jīng)脈 穴位。
4. 如權(quán)利要求1-3任一所述的新用途，其特征在于，補(bǔ)中益氣湯在制備穴道激活藥物 方面的應(yīng)用。
5. 如權(quán)利要求1-3任一所述的補(bǔ)中益氣湯的新用途的用法，其特征在于，通過(guò)采用離 子導(dǎo)入儀施用補(bǔ)中益氣湯于相應(yīng)的穴位，提高同經(jīng)絡(luò)穴位的微血管自律性舒縮活動(dòng)的振 幅。
6. 如權(quán)利要求1-3任一所述的補(bǔ)中益氣湯的新用途的用法，其特征在于，通過(guò)采用貼 敷施用補(bǔ)中益氣湯于相應(yīng)的穴位，提高同經(jīng)絡(luò)穴位的微血管自律性舒縮活動(dòng)的振幅。
【專利摘要】本發(fā)明涉及補(bǔ)中益氣湯用作穴位激活劑的新用途。補(bǔ)中益氣湯通過(guò)提高經(jīng)穴區(qū)微血管的自律性舒縮運(yùn)動(dòng)振幅來(lái)激活穴位，增加經(jīng)絡(luò)行氣血的功能，從而扶正祛邪，治療疾病。與現(xiàn)有的針灸方式相比，本發(fā)明僅僅通過(guò)穴位導(dǎo)入或帖敷補(bǔ)中益氣湯，來(lái)發(fā)揮同針灸療效，不需要專業(yè)的人員和專用的工具，不需要針刺治療，即根據(jù)疾病癥候、性質(zhì)進(jìn)行配穴處方，在穴位施用補(bǔ)中益氣湯，通過(guò)提高穴位區(qū)微血管自律性舒縮活動(dòng)振幅，激活穴位，通過(guò)穴位所屬經(jīng)絡(luò)的傳導(dǎo)作用，調(diào)節(jié)氣血，從而平衡陰陽(yáng)、調(diào)和臟腑；同時(shí)顯著提高微血管內(nèi)皮細(xì)胞的敏感閾值，改善其結(jié)構(gòu)和功能，確保頡頏性物質(zhì)處于高位平衡狀態(tài)，修復(fù)微血管內(nèi)皮細(xì)胞的致病因子造成的頡頏性物質(zhì)間的失衡，從而治療疾病。
【IPC分類】A61P43-00, A61K36-752
【公開號(hào)】CN104771467
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510153474
【發(fā)明人】穆祥, 張濤, 董虹, 張倩
【申請(qǐng)人】北京農(nóng)學(xué)院
【公開日】2015年7月15日
【申請(qǐng)日】2015年4月2日