專利名稱：：α－視黃酸受體拮抗劑抑制粘蛋白分泌的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及視黃酸受體拮抗劑、特別是視黃酸受體α(RARα)選擇性拮抗劑在抑制粘蛋白產(chǎn)生、控制和預(yù)防與粘蛋白分泌過多有關(guān)的疾病中的用途，這類疾病例如慢性阻塞性肺部疾病或哮喘。類視黃酸(retinoid)是一類結(jié)構(gòu)上與維生素A有關(guān)的化合物，包含天然的和合成的化合物。臨床上已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一系列類視黃酸可用于皮膚病和腫瘤病的治療。視黃酸及其類似物(9-順式RA、全反式3-4二脫氫RA、4-氧代RA和視黃醇)是多向調(diào)節(jié)性化合物，可調(diào)節(jié)多種炎性、免疫和結(jié)構(gòu)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。它們是肺內(nèi)上皮細(xì)胞增殖、分化和形態(tài)形成的重要的調(diào)節(jié)劑。類視黃酸通過一系列核受體發(fā)揮它們的生物學(xué)作用，這些核受體是屬于甾類／甲狀腺素類受體總科的配體誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子。類視黃酸受體分為兩類視黃酸受體(RAR)和類視黃酸X受體(RXR)，各自由三種不同的亞型(α、β和γ)組成。RAR基因族的每種亞型編碼數(shù)量不等的由兩種主要的RNA轉(zhuǎn)錄物的差別剪接產(chǎn)生的同種型。全反式視黃酸(ATRA或RA)是RAR的生理激素，它以大約相等的親和性與所有三種RAR亞型結(jié)合。RXR受體不與全反式視黃酸結(jié)合，而與視黃酸的9-順式異構(gòu)體結(jié)合。具有類視黃酸受體拮抗活性的類視黃酸(類視黃酸拮抗劑)有效地對抗具有類視黃酸受體激動活性的類視黃酸(類視黃酸激動劑)的很多特性，例如細(xì)胞增殖的抑制、細(xì)胞分化的誘導(dǎo)和血管生成的抑制，見Bollag等《國際癌雜志》70470-472(1997)，還有效抑制類視黃酸激動劑的毒性作用，見Standeven等《毒理學(xué)與應(yīng)用藥理學(xué)》138169-175(1996)。該文獻(xiàn)中已經(jīng)報道了若干類RAR拮抗劑，包括RARα選擇性拮抗劑，如M．Teng等《醫(yī)藥化學(xué)雜志》402445-2451(1997)；C．Apfel等《美國國家科學(xué)院院報》897129-7133(1992)；L．Eyrolles等《醫(yī)藥化學(xué)雜志》371508-1517(1994)；H．Kagechika等《生物化學(xué)與生物藥學(xué)研究通訊》231243-248(1997)；和PCT公報WO96／30009。粘蛋白是一類由包括呼吸道、胃腸道和女性生殖道在內(nèi)的上皮細(xì)胞分泌的糖蛋白。粘蛋白負(fù)責(zé)維持粘液的粘彈特性，至少八種粘蛋白基因是已知的，見D．J．Thornton等《生物化學(xué)雜志》2729561-9566(1997)。很多氣道疾病、例如慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺部疾病、支氣管擴(kuò)張(bronchietactis)、哮喘、囊性纖維化和細(xì)菌感染，都是以粘蛋白過度生產(chǎn)為特征的，見E．Prescott等《歐洲呼吸雜志》81333-1338(1995)；K．C．Kim等《歐洲呼吸雜志》101438(1997)；D．Steiger等《美國呼吸細(xì)胞分子生物學(xué)雜志》12307-314(1995)。特別是對氣道分泌的分析已經(jīng)認(rèn)定，MUC5AC和MUC5B是呼吸粘液凝膠的主要粘蛋白成分。由粘蛋白分泌過多導(dǎo)致的粘膜纖毛(mucociliary)損傷引起氣道粘液堵塞，后者促進(jìn)了慢性感染、氣道阻塞和有些情況下的死亡。例如，慢性阻塞性肺部疾病(COPD)是一種以緩慢的進(jìn)行性和不可逆性氣流限制為特征的病癥，是發(fā)達(dá)國家的主要死亡原因。呼吸退化主要由因氣道壁增厚引起的腔直徑減小和因杯狀細(xì)胞增生與分泌過多導(dǎo)致的粘液增多組成。歷史上，粘液分泌過多的治療有兩種途徑提高廓清率的物理方法和粘液溶解劑。這兩種方法都沒有對患者產(chǎn)生顯著的有益效果或者減少粘液阻塞。因此，需要有這樣的方法，能夠減少粘蛋白的產(chǎn)生從而治療與粘蛋白分泌過多有關(guān)的病癥。關(guān)于類視黃酸對粘蛋白表達(dá)的作用，報道是互相沖突的。某些研究人員報道維生素A(視黃醇)負(fù)調(diào)節(jié)氣管支氣管上皮細(xì)胞中MUC2基因的表達(dá)，見G．An等《美國呼吸細(xì)胞分子生物學(xué)雜志》10546-551(1994)，而其他人報道，充滿了類視黃酸的正常人氣管支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)物比排除了類視黃酸的細(xì)胞會產(chǎn)生更大數(shù)量級的MUC2與MUC5ACmRNA的表達(dá)，見K．Guzman等《美國生理學(xué)雜志》271(《肺細(xì)胞分子生理學(xué)》15)L1023-L1028(1996)。視黃酸已經(jīng)顯示出其對正常人氣管支氣管上皮細(xì)胞的粘膜纖毛分化來說是必要的。在沒有視黃酸的存在下，上皮變?yōu)轺[狀，粘蛋白分泌減少，見Gray等《美國呼吸細(xì)胞分子生物學(xué)雜志》14104-112(1996)。然而，視黃酸介導(dǎo)其對氣管上皮細(xì)胞作用的機(jī)理是未知的，見T．G．Christensen等《美國呼吸細(xì)胞分子生物學(xué)雜志》9287-294(1993)。一方面，本發(fā)明提供了RAR拮抗劑在抑制哺乳動物粘蛋白產(chǎn)生中的用途。優(yōu)選地，RAR拮抗劑是一種RARα選擇性拮抗劑，其中全身給藥是優(yōu)選的釋放方式。另一方面，本發(fā)明提供了RAR拮抗劑在抑制人上皮細(xì)胞粘蛋白基因表達(dá)中的用途，使該細(xì)胞與RAR拮抗劑、優(yōu)選為一種RARα選擇性拮抗劑接觸。圖1(a)顯示ATRA(視黃酸，記作RA)和RARα選擇性激動劑、即化合物X，誘導(dǎo)人氣道上皮細(xì)胞中MUC2與MUC5AC的基因表達(dá)。圖1(b)顯示ATRA或RARα選擇性激動劑、即化合物X，誘導(dǎo)粘蛋白從原發(fā)性人支氣管上皮中的分泌增加。圖2顯示RARα、β與γ選擇性激動劑對原發(fā)人支氣管上皮中的粘蛋白基因表達(dá)的作用。圖3顯示RARα選擇性拮抗劑對ATRA或RARα選擇性激動劑誘導(dǎo)的粘蛋白基因表達(dá)的抑制作用。圖4(a)顯示ATRA對LPS誘導(dǎo)的大鼠杯狀細(xì)胞增生的增強(qiáng)作用。圖4(b)顯示ATRA對LPS誘導(dǎo)的大鼠粘蛋白分泌過多的增強(qiáng)作用。圖5顯示RARα選擇性拮抗劑對LPS誘導(dǎo)的粘蛋白基因表達(dá)的抑制作用。本文所用的術(shù)語“(Cp-q)烷基”指具有p至q個碳原子的直鏈或支鏈全飽和烴基；例如，“C1-4烷基”指具有一至四個碳原子的直鏈或支鏈全飽和烴基，如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基或叔丁基。“(Cp-q)氟代烷基”是如上所定義的烷基，其中連接在碳主鏈上的一個或多個氫原子已被一個或多個氟原子取代。除非另有指定，術(shù)語“烷基”指C1-4烷基。本文所用的術(shù)語“(C3-6)環(huán)烷基”指三至六個環(huán)碳原子的全飽和環(huán)狀烴基，例如環(huán)丙基、環(huán)戊基等；術(shù)語“(C3-6)環(huán)氟代烷基”是如上所定義的環(huán)烷基，其中連接在碳主鏈上的一個或多個氫原子已被一個或多個氟原子取代。本文所用的術(shù)語“鏈烯基”指含有至少一個碳-碳雙鍵(C=C)的二至六個碳原子的烴鏈，鏈中一個或多個碳原子可以是甲基化的，可表示為(C2-6)鏈烯基。代表性實(shí)例包括1-丙烯基、2-戊烯基等。也包括含有二烯或三烯的烴鏈，例如1，3-丁二烯基、1，3，5-己三烯基、1，5-二甲基-1，3，5-己三烯基等。鏈烯基中的各個碳-碳雙鍵可以獨(dú)立地具有(E)或(Z)構(gòu)型。本文所用的術(shù)語“炔基”指含有至少一個碳-碳叁鍵的二至六個碳原子的烴鏈，鏈中一個或多個碳原子可以是甲基化的，可以表示為(C2-6)炔基。代表性實(shí)例包括乙炔基、2-丙炔基等。也包括除碳-碳叁鍵以外還含有碳-碳雙鍵的烴鏈，例如2-戊烯-4-炔基。這些碳-碳雙鍵可以獨(dú)立地具有(E)或(Z)構(gòu)型。本文所用的術(shù)語“低級烷氧基”指基團(tuán)-OR，其中R是(C1-4)烷基。本文所用的術(shù)語“(C7-10)烷氧基”指基團(tuán)OR，其中R是(C7-10)烷基。本文所用的術(shù)語“芳基”指6至10個環(huán)原子的一價單環(huán)或二環(huán)芳族烴基，可選地獨(dú)立地被一個、兩個或三個取代基取代，取代基選自烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、鹵、硝基、氰基、可選被取代的苯基、-OR(其中R是氫、烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、可選被取代的苯基)、-COOR(其中R是氫或烷基)。術(shù)語芳基更具體地包括但不限于苯基、1-萘基、2-萘基和它們的衍生物。“可選被取代的苯基”指可選地獨(dú)立地被一個、兩個或三個取代基取代的苯基，取代基選自烷基、鹵代烷基、鹵、硝基、氰基、-OR(其中R是氫或烷基)、-NRR’(其中R和R’彼此獨(dú)立地是氫或烷基)、-COOR(其中R是氫或烷基)或-CONR’R”(其中R’和R”獨(dú)立地選自氫或烷基)。本文所用的術(shù)語“雜芳基”指5至10個環(huán)原子的一價單環(huán)或二環(huán)芳族基團(tuán)，含有一個、兩個或三個選自N、O或S的環(huán)雜原子，其余環(huán)原子為C。該芳族原子團(tuán)可選地獨(dú)立地被一個、兩個或三個取代基取代，取代基選自烷基、鹵代烷基、環(huán)烷基、鹵、硝基、氰基、可選被取代的苯基、-COR(其中R是烷基、鹵代烷基或環(huán)烷基)、-NRR’(其中R和R’彼此獨(dú)立地是氫或烷基)、-OR(其中R是氫、烷基、鹵代烷基或可選被取代的苯基)、-COOR(其中R是氫或烷基)、-CONR’R”(其中R’和R”獨(dú)立地選自氫或烷基)。術(shù)語雜芳基更具體地包括但不限于吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、吡咯基、噻吩基、苯硫-2-基、呋喃基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、異喹啉基、苯并吡喃基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、苯并咪唑基和它們的衍生物。本文所用的術(shù)語“類視黃酸”是能夠與任意α、β或γRAR或RXR受體結(jié)合的任何化合物，優(yōu)選地具有10000nm或以下的IC50。本文所用的術(shù)語類視黃酸對視黃酸受體的“EC50”，指在考慮相對于ATRA在相同條件下對特定視黃酸受體的反式激活作用的情況下，類視黃酸對相同受體的反式激活作用，其中兩種類視黃酸的濃度相等(1000nM或10000nM，取決于所試驗(yàn)的最高濃度)。數(shù)值以百分率表示。本文所用的術(shù)語“反式激活作用”指類視黃酸激活基因轉(zhuǎn)錄的能力，其中基因轉(zhuǎn)錄是由配體與所試驗(yàn)的特定視黃酸受體、即RARα、RARβ或RARγ的結(jié)合所引發(fā)的。利用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法可以測定化合物反式激活視黃酸受體的能力。這樣的方法實(shí)例參見Bernard等《生物化學(xué)與生物物理學(xué)研究通訊》186977-983(1992)和C．Apfel等《美國國家科學(xué)院院報》897129-7133(1992)。本文所用的術(shù)語類視黃酸對視黃酸受體的“IC50”指類視黃酸的濃度，在該濃度下，ATRA與特定受體的結(jié)合被抑制了50％。結(jié)合是通過類視黃酸與標(biāo)記ATRA的競爭作用加以測量的。本文所用的術(shù)語“RAR拮抗劑”指這樣一種化合物，它能夠與任意RAR受體結(jié)合，并阻滯RAR激動劑、特別是ATRA的全部或部分反式激活作用。本文所用的術(shù)語“RARα選擇性拮抗劑”指這樣一種化合物，它能夠選擇性地與RARα受體結(jié)合，并減少類視黃酸激動劑、特別是ATRA的RARα激活作用。RARα選擇性拮抗劑將與RARα受體結(jié)合，結(jié)合所需濃度顯著低于RARβ或RARγ受體。選擇性是通過比較類視黃酸對RARα、β和γ受體的IC50加以測定的。通常，對RARα受體的選擇性相對于其他兩種RAR受體之一或全部而言，將為至少約2∶1、優(yōu)選至少約10∶1、更優(yōu)選至少約100∶1、最優(yōu)選至少約1000∶1。類視黃酸對RARα受體的IC50相對于其對其他受體的IC50越低，選擇性越高。拮抗作用是以類視黃酸對RARα受體的EC50為基礎(chǔ)的。通常，類視黃酸拮抗劑對RARα受體的EC50小于約50，優(yōu)選為小于約30，更優(yōu)選為小于約20，最優(yōu)選為小于約10。一般來說，RARα選擇性拮抗劑的EC50在2至50的范圍內(nèi)。“前藥”指當(dāng)該前藥對哺乳動物給藥后，體內(nèi)釋放根據(jù)式(Ⅰ)的活性母體藥物的任何化合物。式(Ⅰ)化合物的前藥是通過以這樣一種方式修飾存在于式(Ⅰ)化合物中的官能團(tuán)加以制備的，使修飾可以被體內(nèi)裂解，從而釋放母體化合物。前藥包括類視黃酸拮抗劑，其中該拮抗劑中的一個羥基或羧基與任何可以體內(nèi)裂解從而再生游離羥基或羧基的基團(tuán)結(jié)合。前藥的實(shí)例包括但不限于拮抗劑中羥基或羧基的酯(例如乙酸酯、甲酸酯、甲基與乙基酯和苯甲酸酯衍生物)、氨基甲酸酯(例如N，N-二甲氨基羰基)和醚等。這樣的化合物是本領(lǐng)域技術(shù)人員按常規(guī)方法，通過酯化、酰基化或醚化母體分子中的羥基或羧基制備的?！爸委熡行Я俊敝富衔镌跒橹委熁蝾A(yù)防疾病而對哺乳動物給藥后，它的量足以對疾病達(dá)到這種治療或預(yù)防作用。“治療有效量”將因化合物、疾病及其嚴(yán)重性和所治療哺乳動物的年齡、體重等而異。本發(fā)明涉及這樣一種發(fā)現(xiàn)，RAR拮抗劑、特別是RARα選擇性拮抗劑能有效抑制粘蛋白分泌。本發(fā)明人已經(jīng)觀察到，全反式視黃酸(ATRA)反式激活人的上皮細(xì)胞中粘蛋白基因的表達(dá)，具體為MUC2和MUC5AC的表達(dá)。進(jìn)一步的研究令人驚奇地顯示，視黃酸的這種作用具體是通過RARα受體介導(dǎo)的。鑒于RARα選擇性類視黃酸激動劑誘導(dǎo)人上皮細(xì)胞中MUC2和MUC5AC的表達(dá)，而RARβ和RARγ選擇性激動劑即使在高劑量化合物下也都沒有這種作用。因此，經(jīng)由RARα的激活作用對粘蛋白表達(dá)來說是必要和充分的。這種類視黃酸誘導(dǎo)的粘蛋白基因表達(dá)作用被RARα選擇性拮抗劑所抑制，特別是被(p-[(E)-2-[3’，4’-二氫-4,4’-二甲基-7’-(庚氧基)-2’H-1-苯并噻喃-6’-基]丙烯基]苯甲酸1’1’-二氧化物(化合物Ia)，和((全-E)-7-[7’-(庚氧基)-3’，4’-二氫-4，4’-二甲基-2’H-1-苯并噻喃-6’-基]-3-甲基-2，4，6-辛三烯酸1，1’-二氧化物(化合物Ib)所抑制。如實(shí)施例的詳細(xì)描述，RARα選擇性拮抗劑也抑制LPS誘導(dǎo)的粘蛋白表達(dá)，以及抑制大鼠氣道炎癥模型粘蛋白分泌過多。在形態(tài)學(xué)水平上，RARα選擇性拮抗劑也顯示出減少上皮細(xì)胞分化為杯狀細(xì)胞的作用，從而減少杯狀細(xì)胞誘導(dǎo)的增生。因此，本發(fā)明的一方面是RAR拮抗劑、優(yōu)選是RARα選擇性拮抗劑通過對哺乳動物給藥而抑制哺乳動物粘蛋白的產(chǎn)生。RAR拮抗劑對哺乳動物的毒性小于RAR激動劑。如本文所述選擇用于減少粘蛋白分泌的RAR拮抗劑一般有一部分描述在美國專利5512683與5391766；PCT專利公報WO96／30009、WO97／24116與WO97／11061；S．Kaneko等《醫(yī)藥化學(xué)研究》1220-225(1991)；L．Eyrolles等《醫(yī)藥化學(xué)研究》2361-367(1991)；L．Eyrolles等《醫(yī)藥化學(xué)雜志》371508-1517(1994)；H．Kagechika等《生物化學(xué)與生物物理學(xué)研究通訊》231243-248(1997)；C．Apfel等《美國國家科學(xué)院院報》897129-7133(1992)；K．Eckhardt等《毒理學(xué)快報》70299-308(1994)；M．Teng等《醫(yī)藥化學(xué)雜志》402445-2451(1997)。不過，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識到，本發(fā)明涵蓋全部RAR拮抗劑和RARα選擇性拮抗劑的用途，并不限于上述或本領(lǐng)域已知的拮抗劑。一般來說，所有具有RAR拮抗活性或RARα選擇性拮抗活性的化合物都可用于本發(fā)明的方法。本發(fā)明特別優(yōu)選的一個方面是RARα選擇性拮抗劑抑制粘蛋白分泌的用途。RARα選擇性拮抗劑是這樣的化合物，它們選擇性地與RARα受體結(jié)合，并減少類視黃酸激動劑、即如前文所定義的ATRA的RARα反式激活作用?；衔锏腞ARα拮抗選擇性可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)配體結(jié)合測定法加以測定，例如描述在C．Apfel等《美國國家科學(xué)院院報》897129-7133(1992)；M．Teng等《醫(yī)藥化學(xué)雜志》402445-2451(1997)；PCT公報WO96／30009。一方面，用于本發(fā)明的RAR拮抗劑具有式Ⅰ結(jié)構(gòu)其中X是S、SO或SO2；R1是C7-10烷基或C7-10烷氧基；R2是羧基芳基、低級烷氧羰基芳基、羧基鏈烯基、低級烷氧羰基鏈烯基、羧基炔基、低級烷氧羰基炔基、羧基芳基鏈烯基、低級烷氧羰基芳基鏈烯基、羧基芳基炔基或低級烷氧羰基芳基炔基；R3a和R3b獨(dú)立地是氫或C1-4烷基；n是1至3的整數(shù)，含1和3。優(yōu)選的化合物是，其中R2是或其中R4是羧基或低級烷氧羰基。屬于式Ⅰ化合物類的RAR拮抗劑的代表性選擇及其反式激活EC50和RAR與RARα、β及γ受體的結(jié)合常數(shù)(IC50)如下表Ⅰ所示。表ⅠEC50是相對于ATRA測定的，兩種化合物的濃度均為10000nM。數(shù)值以相對于ATRA的反式激活百分率表示。屬于式Ⅰ化合物類的特別優(yōu)選的化合物包括式Ia和式Ib的RARα選擇性拮抗劑和另一方面，可以用于本發(fā)明的RAR拮抗劑具有式Ⅱ和Ⅲ結(jié)構(gòu)或其中X是芳基或雜芳基，二者都可選地獨(dú)立地被烷基或鹵取代；L是C(=G)NH或NH(C=G)，其中G是氧或硫；Y是亞苯基、亞萘基或亞雜芳基，都可選地被烷基或鹵取代；B是羧基或低級烷氧羰基；Z是烷基、鹵、NO2或OH；和U是氧或硫。屬于式Ⅱ和Ⅲ化合物類的優(yōu)選化合物包括式Ⅱa和Ⅲa的RARα選擇性拮抗劑其中Y1和Y2獨(dú)立地是氫或鹵(優(yōu)選為氟)。特別優(yōu)選的式Ⅲa化合物中，Y1是氟、Y2是氫，和Y1是氟、Y2是氟。可以用于本發(fā)明的有關(guān)RAR拮抗劑是式Ⅳ化合物。另一方面，可以用于本發(fā)明的RAR拮抗劑是式Ⅴ化合物其中B是稠合的5、6或7元碳環(huán)，可選為烷基或鹵取代的；X是NR4、O、S或CHR4(其中R4是H或烷基)；A是亞苯基或吡啶二基；R1是H或烷基；R2和R3獨(dú)立地是H或烷基，或者R2和R3共同形成一個苯基、萘基、四氫萘基或環(huán)烷基環(huán)。屬于式Ⅴ化合物類的優(yōu)選化合物包括式Va和Vb的RARα選擇性拮抗劑另一方面，可以用于本發(fā)明的RAR拮抗劑具有式Ⅵ結(jié)構(gòu)其中A是稠合的5、6或7元碳環(huán)，可選為烷基取代的；R是C3-10烷基、環(huán)烷基、芳基或芳烷基。屬于式Ⅵ化合物類的優(yōu)選化合物包括式Ⅵa的RARα選擇性拮抗劑，其中R是苯基或芐基?？梢杂糜诒景l(fā)明的非選擇性RAR拮抗劑是式Ⅶa化合物?；衔镆话阃ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法加以制備。它們可以通過上文引用的參考文獻(xiàn)所述方法加以制備，全部引用在此作為參考文獻(xiàn)。實(shí)用性和給藥方法本文所公開的RAR拮抗劑、特別是RARα選擇性拮抗劑可用于抑制與肺部炎癥有關(guān)的粘蛋白過度表達(dá)，抑制與全身性上皮細(xì)胞炎癥有關(guān)的粘液分泌過多。本文所公開的方法本身可用于治療的疾病，例如哮喘、肺氣腫、慢性阻塞性肺部疾病、支氣管炎、支氣管擴(kuò)張、囊性纖維化、術(shù)后肺萎縮等。按照本發(fā)明，RAR拮抗劑或RARα選擇性拮抗劑減少粘蛋白分泌過多所需的具體劑量將取決于癥狀的嚴(yán)重性、給藥途徑和相關(guān)因素，這將由在場的醫(yī)師來決定。通常，劑量將在約0．2與20mg／kg體重每天的范圍內(nèi)，優(yōu)選為約0．5至約15mg／kg體重每天，最優(yōu)選為約1至2．5mg／kg。對一名50kg患者來說，活性成分的每日劑量為約25至750mg，優(yōu)選為約50至約125mg。該劑量可以根據(jù)需要，在常規(guī)的藥物組合物中通過單次給藥、多次用藥或控釋方式加以釋放，以達(dá)到最有效的結(jié)果。給藥將遵照醫(yī)囑繼續(xù)下去，根據(jù)疾病嚴(yán)重性的不同，可以在幾周至幾個月的范圍內(nèi)。通常，進(jìn)行給藥的是RAR拮抗劑在藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑中的藥學(xué)上可接受的成分(例如鹽)或前藥。在本發(fā)明的上下文中，藥學(xué)上可接受的鹽包括類視黃酸拮抗劑的本領(lǐng)域已知的任何化學(xué)上適合的鹽，均適用于對患者給藥。本領(lǐng)域已知常規(guī)的鹽的實(shí)例包括堿金屬鹽、例如鈉和鉀鹽，堿土金屬鹽、例如鈣和鎂鹽，銨和烷基銨鹽。特別優(yōu)選的RAR拮抗劑的前藥組合物包括可水解的酯衍生物，例如芳族和芐基酯，或低級烷基酯，例如乙基、叔丁基、環(huán)戊基酯等。代表性藥物傳送制度包括口服、腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)和靜脈內(nèi))、直腸、頰(包括舌下)、透皮、肺和鼻內(nèi)。一種肺部給藥的方法是RAR拮抗劑水溶液的氣霧化作用。氣霧化組合物可以包括包在反膠團(tuán)或脂質(zhì)體中的化合物。典型的肺部與呼吸傳送系統(tǒng)描述在美國專利5，607，915、5，238，683、5，292，499與5，364，615和WO97／39745中。肺部傳送等局部釋放通常使用比全身傳送低5-10倍的劑量。優(yōu)選的氣霧化制劑的制備如WO97／39745所述，在一種烷基胺的存在下，將類視黃酸拮抗劑增溶在一種氯氟碳溶劑中。典型的氯氟碳包括HCFC-123、HCFC-134A或HCFC-227。優(yōu)選的烷基胺包括具有C2-8烷基的仲、叔和季烷基胺，例如三辛胺、精胺、四甲基溴化銨等。利用計量吸入器，氣霧化制劑可以有利地直接釋放給呼吸道的上皮細(xì)胞。其他可以用于傳送類視黃酸拮抗劑、用于粘蛋白分泌的治療的制劑使用一種干粉載體，如美國專利5，376，386所述，在微粒化粉碎機(jī)內(nèi)使類視黃酸包在載體表面上。本發(fā)明的RAR拮抗劑的用途也包括RAR拮抗劑的全身給藥，同時或隨后與另外一種活性成分組合，后者成分用于提高氣道粘液的粘膜纖毛廓清率或者降低粘液的粘度。用于提高粘膜纖毛廓清率的代表性活性成分例如包括鈉通道阻滯劑(如阿米洛利)或羊毛硫抗生素(如耐久霉素、乳鏈菌肽或枯草菌素)。用于降低粘液粘度的代表性活性成分包括N-乙酰半胱氨酸、高半胱氨酸和磷脂。RAR拮抗劑通常將以與藥學(xué)上可接受的無毒載體混合而成的藥物組合物給藥。如上所述，這樣的組合物可以制成腸胃外(皮下、肌內(nèi)或靜脈內(nèi))給藥，特別是液體溶液或懸浮液的形式；口服或頰給藥，特別是片劑或膠囊的形式；鼻內(nèi)給藥，特別是藥粉、滴鼻劑或氣霧劑的形式；直腸或透皮給藥?？梢允褂萌魏纬Ｒ?guī)的載體物質(zhì)。載體物質(zhì)可以是任何有機(jī)或無機(jī)的載體物質(zhì)，例如水、明膠、阿拉伯膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石、聚亞烷基二醇、石油凝膠等。用于腸胃外給藥的液體制劑可以含有無菌水或鹽水、丙二醇等亞烷基二醇、聚乙二醇等聚亞烷基二醇、植物來源的油、氫化萘等作為賦形劑?？梢允褂胮H范圍為約4至約6的弱酸緩沖劑。適合的緩沖劑包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽和檸檬酸鹽，濃度范圍為約5mM至約50mM。對口服給藥來說，制劑可通過加入膽汁鹽或?；鈮A得以加強(qiáng)。用于鼻給藥的制劑可以是固體，并且可以含有賦形劑，例如乳糖或葡聚糖，或者可以是含水或油性溶液，以滴鼻劑或計量噴霧劑的形式使用。具體鼻制劑包括適合于常規(guī)干粉吸入器(DPI)的干粉、適合于霧化的液體溶液或懸浮液和適合用在計量吸入器(MDI)中的推進(jìn)制劑。對頰給藥來說，典型的賦形劑包括蔗糖、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、預(yù)膠凝淀粉等。當(dāng)配制成鼻給藥時，通過鼻粘膜的吸收可以通過表面活性酸得到加強(qiáng)，例如甘氨膽酸、膽酸、?；悄懰帷thocholicacid、去氧膽酸、鵝去氧膽酸、脫氫膽酸、甘氨脫氧膽酸、環(huán)糊精等，用量在約0．2與15重量百分比之間的范圍內(nèi)，優(yōu)選在約0．5與4重量百分比之間，最優(yōu)選為約2重量百分比?？诜o藥的固體劑型包括片劑、硬與軟膠囊、丸劑、扁囊劑、藥粉、顆粒劑等。每粒片劑、丸劑或扁囊劑可以含有約0．5至約20mg的RAR拮抗劑，優(yōu)選為約2至約10mg。優(yōu)選的固體口服劑型包括片劑、雙層硬殼膠囊和軟彈性明膠(SEG)膠囊。SEG膠囊是特別令人感興趣的，因?yàn)樗鼈兲峁┝嗣黠@不同于其他兩種劑型的優(yōu)點(diǎn)(參見Seager，H“Softgelatincapsulesasolutiontomanytabletingproblems”；PharmaceuticalTechnology，9，(1985)。使用SEG膠囊的一些優(yōu)點(diǎn)是a)SEG膠囊中的劑量-含量一致性得以優(yōu)化，因?yàn)樗幬锸侨芙饣蚍稚⒃诳梢跃_灌裝膠囊的液體中的；b)配制成SEG膠囊的藥物顯示良好的生物利用度，因?yàn)樗幬锸侨芙?、增溶或分散在水混溶性或油性液體中的，因此當(dāng)在體內(nèi)釋放時，溶液溶解或者乳化，產(chǎn)生大表面積的藥物分散系；和c)對長期貯藏過程中的氧化作用敏感的藥物降解得以防止，因?yàn)橛懈稍锏耐鈿?。本發(fā)明化合物經(jīng)過長時間階段、例如一周至一年傳送給患者可以通過將含有足可用于所需釋放期間的活性成分的控釋系統(tǒng)單次給藥得以實(shí)現(xiàn)。為此可以使用各種控釋系統(tǒng)，例如單個型或藥庫型微膠囊、藥庫植入物、滲透泵、小囊、微團(tuán)、脂質(zhì)體、透皮貼、離子電滲裝置，或者是可注射的劑型?；钚猿煞轴尫潘璨课坏亩ㄎ皇且恍┛蒯屟b置的附加特征，已證明可對某些病癥的治療有益。下面是使用如本文所述的RAR拮抗劑的代表性藥物制劑，用于抑制粘蛋白的分泌。片劑將下列成分充分混合，壓制成帶標(biāo)記的片。膠囊劑將下列成分充分混合，裝入硬殼膠囊中。懸浮制劑將下列成分混合，形成用于口服給藥的混懸液。注射劑將下列成分混合，得到注射劑。鼻用制劑將下列成分混合，得到用于鼻給藥的混懸液。成分含量RAR拮抗劑20mg／ml檸檬酸0．2mg／ml乙酸鈉2．6mg／ml苯扎氯銨0．2mg／ml山梨醇35mg／ml?；悄懰徕c或甘氨膽酸鈉10mg／ml給出下列制備和實(shí)施例，使本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠更清楚地理解和實(shí)施本發(fā)明。它們不應(yīng)被認(rèn)為限制了本發(fā)明的范圍，而僅僅是舉例說明性和代表性的。在下列實(shí)施例中使用下列RAR激動劑。化合物XRARα選擇性激動劑4-(5，6，7，8-四氫-5，5，8，8-四甲基-6-萘基甲酰胺基)苯甲酸化合物YRARβ選擇性激動劑化合物CD437RARγ選擇性激動劑(6-[3-(1-金剛烷基)-4-羥基苯基]-2-萘甲酸)；參見Martin，BBernardon，J．MCavey，M．TBernard，BCarlavan，ICharpentier，BPilgrim，W．RShroot，B．和Reichert，U．(1992)《皮膚藥理學(xué)》5(1)57-65；Charpentier，BBernardon，J．MEustache，JMillois，CMartin，BMichel，S．和Shroot，B．(1995)《醫(yī)藥化學(xué)》38(26)4993-5006。SRI11217RXR激動劑(4-[1-(5，6，7，8-四氫-5，5，8，8-四甲基-2-萘基)-2-甲基丙烯基]苯甲酸)；參見Fanjul，ADawson，M．IHobbs，P．DJong，LCameron，J．FHarlev，EGraupner，GLu，X．P．和Pfahl，M．(1994)《自然》372(6501)107-11。SRI11302抗-AP-1類視黃酸((E)-3-甲基-9-(2，6，6-三甲基環(huán)己烯基)-7-(4-甲基苯基)-2，4，6，8-四烯壬酸)；參見Fanjul，ADawson，M．IHobbs，P．DJong，LCameron，J．FHarlev，EGraupner，GLu，X．P．和Pfahl，M．(1994)《自然》372(6501)107-11；Mills，K．JVollberg，T．MNervi，CGrippo，J．FDawson，M．I．和Jetten，A．M．(1996)《細(xì)胞生長與分化》7(3)327-337?；衔颶RARα選擇性拮抗劑(p-[(E)-2-[3’，4’-二氫-4，4’-二甲基-7’-(庚氧基)-2’H-1-苯并噻喃-6’-基]丙烯基]苯甲酸1’，1’-二氧化物)(化合物Ia)實(shí)施例1穩(wěn)態(tài)粘蛋白基因的RAR反式激活作用如Gray等《美國呼吸生物學(xué)雜志》14104-112(1996)所述，進(jìn)行正常原發(fā)人支氣管上皮細(xì)胞(NHBE)中粘蛋白基因的反式激活作用。在沒有全反式視黃酸(ATRA)的存在下，將原發(fā)人氣道上皮細(xì)胞在所定義的培養(yǎng)基中的多孔Transwell膜(Corning／Costar)上培養(yǎng)7天。七天后，向基礎(chǔ)培養(yǎng)室內(nèi)加入新鮮培養(yǎng)基±ATRA或選擇性類視黃酸，產(chǎn)生一個空氣-液體界面(ALI)。ATRA和／或選擇性類視黃酸的使用濃度為1×10-7M。所用的選擇性類視黃酸是化合物X(RARα選擇性激動劑)、RXR激動劑(SRI11217)和抗-AP1類視黃酸(SRI11302)。另外培養(yǎng)七天后，收獲培養(yǎng)基，利用前述(Gray等)特定的ELISA法分析所分泌的粘蛋白基因產(chǎn)物。細(xì)胞層用胍鎓類緩沖劑(TRIZOL／Sigma)溶解，進(jìn)行RNA萃取和分析。按照標(biāo)準(zhǔn)RT-PCR，利用適當(dāng)?shù)倪x擇性引物和模擬對進(jìn)行MUC2和MUC5ACRNA的擴(kuò)增(Guzman等《美國生理學(xué)雜志》271(《肺細(xì)胞分子生理學(xué)》15)L1023-L1028(1996)，在溴化乙錠染色的瓊脂糖凝膠中檢測PCR產(chǎn)物。數(shù)據(jù)代表樣本重復(fù)三次，收集起來進(jìn)行RNA分析。結(jié)果如圖1(a)所示。ATRA和RARα選擇性激動劑(化合物X)都誘發(fā)MUC2和MUC5AC基因誘導(dǎo)作用。RXR選擇性激動劑SRI11217對兩種基因誘導(dǎo)都沒有影響。對應(yīng)的粘蛋白分泌數(shù)據(jù)如表1(b)所示，ELISA數(shù)據(jù)代表單獨(dú)重復(fù)三次的樣本結(jié)果。數(shù)據(jù)以平均±sem表示。粘蛋白分泌數(shù)據(jù)與基因誘導(dǎo)結(jié)果是一致的。實(shí)施例2利用RAR選擇性類視黃酸進(jìn)行穩(wěn)態(tài)粘蛋白基因的依賴于濃度的誘導(dǎo)按如上所述進(jìn)行NHBE中粘蛋白基因的反式激活作用，但是在第7天到14天，向培養(yǎng)基中補(bǔ)充RARα、RARβ或RARγ選擇性類視黃酸。該RARα、RARβ或RARγ選擇性類視黃酸分別是化合物X、Y和CD-437?；衔锏臐舛确秶鸀?×1O-9M至1×10-6M。如圖2所示，RARα選擇性激動劑是MUC2和MUC5AC基因激活的最有效的誘導(dǎo)劑，其反式激活活性為1×10-9M證明了這一點(diǎn)。RARβ或RARγ選擇性激動劑對MUC2和MUC5AC的誘導(dǎo)作用即使在最高劑量(1×10-6M)下也是最小的。實(shí)施例3RA誘導(dǎo)的粘蛋白基因表達(dá)被RARα選擇性拮抗劑所抑制按如上所述進(jìn)行NHBE中粘蛋白基因的反式激活作用。在第7天到14天，細(xì)胞用1×10-6MRARα拮抗劑、即化合物Z，單獨(dú)或與1×10-7MATRA或RARα選擇性激動劑、即化合物X，組合培養(yǎng)。如上所述用RT-PCR和ELISA法測定對粘蛋白基因反式激活和表達(dá)的影響。RARα選擇性拮抗劑、即化合物Z，對MUC2或MUC5AC基因表達(dá)沒有影響。ATRA和RARα選擇性激動劑、即化合物X，是MUC2或MUC5AC的有效誘導(dǎo)劑。不過，這種影響完全被與化合物Z協(xié)同治療所抑制。在RNA轉(zhuǎn)錄(圖3a)和粘蛋白分泌(圖3b)水平下都觀察到了該抑制作用。實(shí)施例4ATRA增強(qiáng)LPS誘導(dǎo)的大鼠杯狀細(xì)胞增生和粘液分泌過多評價全反式視黃酸(ATRA)對內(nèi)毒素／脂多糖(LPS)誘導(dǎo)大鼠肺部炎癥模型的粘液分泌過多的影響(Steiger等《美國呼吸細(xì)胞分子生物學(xué)雜志》12307-314(1995))。將動物分為大約六個處理組。重復(fù)滴注LPS(LPS來源于銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeriginos)；SigmaChemical)三天，誘導(dǎo)雄性LongEvans大鼠的肺部炎癥，劑量為400μg／kg／劑／天。將ATRA溶于DMSO(20mg／ml)，貯藏在-20℃下，每天現(xiàn)制備新鮮的儲備溶液，將其稀釋在PBS中，最終濃度為2mg／ml。用ATRA處理(2mg／kgip)的動物每天通過腹膜內(nèi)注射給藥一次，開始于第一次LPS激發(fā)之前24小時。研究中包括兩個對照組，一組用賦形劑(DMSO／PBS)處理接著被LPS激發(fā)，另一組單用ATRA處理。在最后LPS激發(fā)后24小時通過在深度麻醉下放血，處死動物。肺用磷酸鹽緩沖鹽水灌洗(2×5ml)，以洗出粘膜層。灌洗液(BAL)以500xg離心10分鐘，將不含細(xì)胞的上清液冷凍，在-20℃下保存到用阿爾新藍(lán)／PAS斑點(diǎn)印跡測定法分析所分泌的粘蛋白，以測定中性和酸性粘蛋白的相對貢獻(xiàn)。利用Ⅰ型(阿爾新藍(lán)／酸性粘蛋白)和Ⅱ型(PAS+／中性粘蛋白)牛腸粘蛋白(Sigma)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。每份樣本測定三次，數(shù)據(jù)以μg／ml總粘蛋白表示(圖4b)。灌洗后，通過恒速(1ml／min)的氣管內(nèi)滴注，將肺用10％中性緩沖的福爾馬林灌注(5ml)。切除左葉，浸入固定液24小時，然后進(jìn)行處理。利用標(biāo)準(zhǔn)方法制備5μm石蠟切片。切片用阿爾新藍(lán)(pH2．5)和高碘酸／席夫試劑染色，以檢測肺組織內(nèi)的粘液物質(zhì)。通過計數(shù)所有直徑≥2mm的氣道和測定含有阿爾新藍(lán)／PAS陽性細(xì)胞的氣道百分率，進(jìn)行杯狀細(xì)胞增生的形態(tài)測定分析(圖4a)。實(shí)施例5ATRA和RARα選擇性拮抗劑對LPS誘導(dǎo)的粘蛋白基因體外表達(dá)的影響利用連續(xù)人肺上皮細(xì)胞系NIH-292建立體外測定法，以篩選類視黃酸類化合物對LPS誘導(dǎo)的粘蛋白基因表達(dá)的影響。將NIH-292細(xì)胞在標(biāo)準(zhǔn)T-75組織培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，所用DMEM／F12培養(yǎng)基含有10％胎牛血清(FBS)。一旦匯合，培養(yǎng)基改為所定義的培養(yǎng)基Optimem(Sigma)，其中補(bǔ)充有1％FBS，24小時后用10μg／mlLPS(銅綠假單胞菌，SigmaChemical)激發(fā)。在LPS激發(fā)前24小時加入RAR選擇性拮抗劑、即化合物Z。ATRA和特異性類視黃酸制備成DMSO儲備溶液。LPS激發(fā)后6或24小時，用胍鎓類緩沖劑(TRIZOL／Sigma)收獲細(xì)胞，進(jìn)行RNA萃取和分析。利用自動熒光檢測法進(jìn)行β-肌動蛋白、MUC1、MUC2和MUC5AC特異性RNA的擴(kuò)增，用于實(shí)時RT-PCR(TAQMAN，AppliedBiosystems／PerkinElmer)的定量。利用對照質(zhì)粒繪制各相關(guān)粘蛋白RNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線。對一式兩份樣本進(jìn)行三次分析。結(jié)果如圖5所示，以pg／ml表示，結(jié)果顯示RARα選擇性拮抗劑抑制了LPS誘導(dǎo)的粘蛋白基因表達(dá)。為了清楚和理解起見，前述發(fā)明已經(jīng)通過舉例說明和實(shí)施例的方式加以詳細(xì)描述。對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說顯而易見的是，在所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)可以進(jìn)行改變和修飾。因此，不言而喻的是，上述說明是闡述性的而不是限制性的。本發(fā)明的范圍因此應(yīng)當(dāng)參照所附權(quán)利要求書加以確定，同時這些權(quán)利要求的保護(hù)范圍也包括全部等價物。本申請中引用的專利、專利申請和公報全部引用在此作為參考文獻(xiàn)，這與各專利、專利申請和公報單獨(dú)引用的作用是一樣的。權(quán)利要求1．RAR拮抗劑、其前藥或藥學(xué)上可接受的鹽在藥物制備中的用途，該藥物用于抑制粘蛋白的產(chǎn)生。2．RAR拮抗劑、其前藥或藥學(xué)上可接受的鹽在藥物制備中的用途，該藥物用于控制或預(yù)防哺乳動物中與粘蛋白分泌過多有關(guān)的疾病，例如慢性阻塞性肺部疾病或哮喘。3．RAR拮抗劑、其前藥或藥學(xué)上可接受的鹽在藥物制備中的用途，該藥物用于抑制人上皮細(xì)胞中的粘蛋白基因表達(dá)。4．根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的RAR拮抗劑的用途，其中該RAR拮抗劑是一種RARα選擇性拮抗劑。5．根據(jù)權(quán)利要求4的RAR拮抗劑的用途，其中該RARα選擇性拮抗劑對RARα受體的選擇性相對于RARβ和RARγ受體而言，至少約為2∶1。6．根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的RAR拮抗劑在藥物制備中的用途，該藥物用于抑制粘蛋白的產(chǎn)生，該拮抗劑選自式Ⅰ化合物其中X是S、SO或SO2；R1是C7-10烷基或C7-10烷氧基；R2是羧基芳基、低級烷氧羰基芳基、羧基鏈烯基、低級烷氧羰基鏈烯基、羧基炔基、低級烷氧羰基炔基、羧基芳基鏈烯基、低級烷氧羰基芳基鏈烯基、羧基芳基炔基或低級烷氧羰基芳基炔基；R3a和R3b獨(dú)立地是氫或C1-4烷基；n是1至3的整數(shù)，含1和3。7．根據(jù)權(quán)利要求6的RAR拮抗劑的用途，該拮抗劑中X是SO2；n是2。8．根據(jù)權(quán)利要求6的RAR拮抗劑的用途，該拮抗劑中R1是庚氧基，R2是下式殘基或其中R4是羧基。9．根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的RAR拮抗劑的用途，其中該RAR拮抗劑選自式Ⅱ和式Ⅲ化合物或其中X是芳基或雜芳基；L是C(=G)NH或NH(C=G)，其中G是氧或硫；Y是芳基或亞雜芳基；B是羧基或低級烷氧羰基；Z是烷基、鹵、NO2或OH；U是氧或硫。10．根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的RAR拮抗劑的用途，其中該RAR拮抗劑選自式Ⅳ和式Ⅴ化合物其中B是稠合的5、6或7元碳環(huán)；X是NR4、O、S或CHR4，其中R4是H或烷基；A是亞苯基或吡啶二基；R1是H或烷基；R2和R3獨(dú)立地是H或烷基，或者R2和R3共同形成一個苯基、萘基、四氫萘基或環(huán)烷基環(huán)。11．根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的RAR拮抗劑的用途，該拮抗劑是(p-[(E)-2-[3’，4’-二氫-4，4’-二甲基-7’-(庚氧基)-2’H-1-苯并噻喃-6’-基]丙烯基]苯甲酸1’1’-二氧化物。12．根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的RAR拮抗劑的用途，該拮抗劑是((全-E)-7-[7’-(庚氧基)-3’，4’-二氫-4，4’-二甲基-2’H-1-苯并噻喃-6’-基]-3-甲基-2，4，6-辛三烯酸1，1’-二氧化物。13．含有一種或多種RAR拮抗劑和藥學(xué)上的惰性賦形劑的藥物，用于疾病的治療，該疾病代表與粘蛋白分泌過多有關(guān)的治療適應(yīng)征，例如慢性阻塞性肺部疾病或哮喘。14．含有一種或多種RAR拮抗劑的藥物，用于抑制人上皮細(xì)胞中的粘蛋白基因表達(dá)。15．含有一種或多種如權(quán)利要求6所定義的式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上的惰性賦形劑的藥物，用于疾病的治療，該疾病代表與粘蛋白分泌過多有關(guān)的治療適應(yīng)征，例如慢性阻塞性肺部疾病或哮喘。16．含有一種或多種如權(quán)利要求8所定義的式Ⅱ和／或Ⅲ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上的惰性賦形劑的藥物，用于疾病的治療，該疾病代表與粘蛋白分泌過多有關(guān)的治療適應(yīng)征，例如慢性阻塞性肺部疾病或哮喘。17．含有一種或多種如權(quán)利要求10所定義的式Ⅳ和／或Ⅴ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上的惰性賦形劑的藥物，用于疾病的治療，該疾病代表與粘蛋白分泌過多有關(guān)的治療適應(yīng)征，例如慢性阻塞性肺部疾病或哮喘。18．抑制哺乳動物粘蛋白產(chǎn)生的方法，包括將RAR拮抗劑、其前藥或藥學(xué)上可接受的鹽對該哺乳動物給藥。19．治療哺乳動物與粘蛋白分泌過多有關(guān)的疾病的方法，包括將RAR拮抗劑、其前藥或藥學(xué)上可接受的鹽對該哺乳動物給藥。20．抑制人上皮細(xì)胞中的粘蛋白基因表達(dá)的方法，是使該細(xì)胞與RAR拮抗劑、其前藥或藥學(xué)上可接受的鹽接觸。21．如說明書所述的本發(fā)明。全文摘要本發(fā)明涉及RAR拮抗劑在抑制哺乳動物粘蛋白產(chǎn)生中的用途。優(yōu)選地,該RAR拮抗劑是一種RARα選擇性拮抗劑。另一方面,本發(fā)明涉及通過使人上皮細(xì)胞與RAR拮抗劑接觸而抑制該細(xì)胞中的粘蛋白基因表達(dá),該RAR拮抗劑優(yōu)選為一種RARα選擇性拮抗劑。文檔編號A61K31/00GK1292690SQ99803811公開日2001年4月25日申請日期1999年3月1日優(yōu)先權(quán)日1998年3月9日發(fā)明者葆拉·N·貝洛尼申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司