專利名稱：：水穩(wěn)定的l－抗壞血酸衍生物及其制法和含它的增白美容組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種具有改進的水穩(wěn)定性的L-抗壞血酸衍生物和用于制備其的方法，并涉及一種包含其作為活性成分的皮膚增白美容組合物。L-抗壞血酸具有強抗氧活性，促進膠原的生物合成和成纖維細胞的增生。它在抑制黑色素的形成上是特別有效的，并由此可用在以防止異常的色素沉積如雀斑為目的的局部施用中。然而抗壞血酸在含水載體中容易因氧化而分解，引起其在長期儲存過程中的活性降低。在這種情況下，已進行了最新研究以提供一種在含水載體中穩(wěn)定的新衍生物。所提的衍生物的形態(tài)是通過L-抗壞血酸的2-、3-、5-或6-位羥基與磷酸或硫酸或脂肪酸如硬脂酸和棕櫚酸的酯化而得到的酯。這些衍生物的酯鍵可輕易地被一種水解酶解離，以釋放出L-抗壞血酸，并由此產(chǎn)生了L-抗壞血酸的有效生理作用。例如，有一種抗壞血酸2-磷酸鎂(抗壞血酸2位上的磷酸鎂)。該化合物由于磷酸基的引入可輕易地透皮滲透把L-抗壞血酸傳輸至真皮層，其自身在含水載體中也是非常穩(wěn)定的，不會因氧化而有任何變色。因此該化合物已被推薦為一種用于皮膚增白美容組合物的活性成分(JP1-283208A，JP3-227907A)。然而盡管抗壞血酸2-磷酸鎂在其自身的穩(wěn)定性上有所改進，但是它存在有自己形成不溶的晶體或與其它成分如陰離子聚合物和表面活性劑在含水載體中沉淀的缺點。這種沉淀被認為是由于在水中的低溶解度造成的。最近，抗壞血酸2-O-α-葡萄糖苷已被提出作為沒有以上問題或缺點的新材料。該衍生物是通過發(fā)酵生產(chǎn)的。然而直到現(xiàn)在，其抑制黑色素形成的透皮滲透或作用還是不確定的。此外因為它是通過發(fā)酵提供的，所以它是非常昂貴的。因此本發(fā)明人已進行了深入的研究，以提供一種其自身在含水載體中非常穩(wěn)定且不會在含水載體中引起任何沉淀的新衍生物。他們經(jīng)過努力發(fā)現(xiàn)了鍵接到L-抗壞血酸2-羥基上的磷酸基。作為該磷酸基，他們考慮3-胺基丙烷磷酸，它在水中具有良好溶解度，以用于任何種類的美容組合物，只要組合物含有一些水。那即是說，他們通過磷酸酯鍵將3-胺基丙烷磷酸引入到L-抗壞血酸2-羥基上，以產(chǎn)生2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸基酯。特別是，3-胺基丙烷磷酸自身是能夠提高皮膚的水分保持能力、對變質(zhì)的復(fù)原能力以及堅固性的活性美容材料，因此能有效地延緩皮膚衰老。此外，它不會引起對皮膚的刺激且為穩(wěn)定的，以便容易配制成美容產(chǎn)品，還能夠促進細胞生長和表皮膠原的生物合成?；谶@些效果和作用，包含3-胺基丙烷磷酸的美容組合物已在美國專利5,723,645中被提出。本發(fā)明人證實2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸基酯自身是非常穩(wěn)定的，沒有任何因氧化而造成的變色及活性的降低，而且不會引起在含水載體中的任何沉淀。由于該衍生物可輕易地通過磷酸基而透皮滲透，而且一旦被吸收可以很容易地被一種水解酶分解，以釋放出抗壞血酸和3-胺基丙烷磷酸?？梢灶A(yù)知包含該衍生物的美容組合物能夠提供抗壞血酸和3-胺基丙烷磷酸兩者在皮膚上的有效生理作用?；诖似谕?，本發(fā)明得以完成。因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種由以下通式(I)所表示的新的L-抗壞血酸衍生物，其自身是非常穩(wěn)定的，且不會引起在含水載體中的任何沉淀。進而本發(fā)明的另一個目的是提供一種制備所述L-抗壞血酸衍生物(I)的方法，并提供一種含有所述L-抗壞血酸衍生物(I)作為活性成分的皮膚增白美容組合物，它能夠抑制黑色素的形成，并因此產(chǎn)生了皮膚增白效果，還能夠防止皮膚起皺，并因此有效地延緩皮膚衰老。由本發(fā)明提供的L-抗壞血酸衍生物是由以下通式(I)所表示的2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯。L-抗壞血酸衍生物(I)(該化合物以下將稱作“AsA-APPA”，它是抗壞血酸-胺基丙烷磷酸二酯的簡寫)是一種其中3-胺基丙烷磷酸是通過磷酸酯鍵結(jié)合到抗壞血酸的2-羥基上的化合物。該化合物在含水載體中非常穩(wěn)定，沒有任何因氧化而造成的變色及活性的降低，而且在水中具有良好的溶解度，不會引起任何沉淀。進而它可輕易地通過磷酸基而透皮滲透，而且一旦被吸收，該化合物可以很容易地被一種水解酶解離，以釋放出抗壞血酸和3-胺基丙烷磷酸。因此，該化合物能夠提供由抗壞血酸抑制黑色素形成的活性以及由3-胺基丙烷磷酸延緩皮膚衰老的活性。按照本發(fā)明，用于制備由式(I)所表示的AsA-APPA的方法包括美國專利5,723,645中所披露的用于制備3-胺基丙烷磷酸(3-APPA)的方法。所披露的3-APPA的制備方法是簡單的且經(jīng)濟的，因為它采用了兩步法以及廉價的磷酰氯，因此可有利于工業(yè)化生產(chǎn)。詳細地說，用于制備本發(fā)明L-抗壞血酸衍生物(I)的方法包括以下步驟(1)在大約0～5℃的溫度下，在有機堿的存在下將3-胺基-1-丙醇與磷酰氯以1∶1～1.3的當(dāng)量比于有機溶劑中反應(yīng)大約1～2個小時，以生成由以下通式(II)所表示的2-氯四氫-2H-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷P-氧化物；(2)在有機堿的存在下，將步驟(1)中所述的化合物(II)與5，6-羥基保護的L-抗壞血酸于有機溶劑中反應(yīng)，生成由以下通式(III)所表示的L-抗壞血酸衍生物；(3)在大約5～100℃的溫度下，通過向其中加入蒸餾水使所述步驟(2)中的L-抗壞血酸衍生物(III)水解大約3小時，以生成2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯；(4)用極性有機溶劑將所述步驟(3)中的產(chǎn)品進行重結(jié)晶；和(5)可選擇性地用一種強堿或堿將所述步驟(4)中的產(chǎn)品進行中和，以生成鹽。該方法可通過以下反應(yīng)來表示&lt;反應(yīng)式&gt;在步驟(1)中，3-胺基1-丙醇與磷酰氯之間的反應(yīng)優(yōu)選地以1∶1～1.3的當(dāng)量比進行的。當(dāng)這種比率低于1∶1時，就不能得到目標(biāo)產(chǎn)品。而當(dāng)該比率高于1∶1.3時，可得到目標(biāo)產(chǎn)品和過多的副產(chǎn)品。在該步驟中，生成3-胺基-1-丙醇與磷酰氯的1∶1中間體絡(luò)合物的產(chǎn)率為95％或更多，而生成作為副產(chǎn)品的3-胺基-1-丙醇與磷酰氯的2∶1絡(luò)合物的產(chǎn)率為1～2％或更少。然而副產(chǎn)品可通過色層分離法或用甲苯重結(jié)晶來去除。特別是，磷酰氯的三個氯原子中的兩個被3-胺基-1-丙醇中官能羥基和胺基基團取代，然后環(huán)化成2-氯四氫-2H-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷P-氧化物。而第三個氯原子在5℃或更低的溫度下是不活潑的，因此不被取代。原因是2-氯四氧-2H-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷P-氧化物中的氯原子在惰性的無水溶劑中是穩(wěn)定的，且不容易被3-胺基-1-丙醇取代。因此步驟(1)中的反應(yīng)優(yōu)選地在5℃或更低的溫度下進行，以防止3-胺基-1-丙醇與磷酰氯的2∶1副產(chǎn)品的生成。在這種情況下，磷酰氯的第三個氯原子不需要用例如酯基或胺基來保護，該步驟能夠以簡單且容易的方式進行。而由于在低于0℃的溫度下反應(yīng)物的溶解度可能降低，且反應(yīng)可能緩慢地和困難地進行，未反應(yīng)的原料數(shù)量可能增加，導(dǎo)致了產(chǎn)率的降低。因此步驟(1)中的反應(yīng)優(yōu)選地在0～5℃的溫度下進行。在該步驟中采用的有機堿可包括(但不限于此)吡啶和三乙胺。在它們中間，三乙胺是優(yōu)選采用的。進而，在該步驟中采用的有機溶劑可包括(但不限于此)二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、氯仿、乙醚和其它的惰性溶劑。在它們中間，二氯甲烷是優(yōu)選采用的。在步驟(2)中，L-抗壞血酸的5，6-羥基可用保護基團如苯亞甲基、苯亞乙基、亞異丙基來保護。在它們中間，可優(yōu)選采用亞異丙基作為保護基團。在步驟(2)中采用的有機堿可包括(但不限于此)吡啶和三乙胺。在它們中間，三乙胺是優(yōu)選采用的。進而，在步驟(2)中采用的有機溶劑可包括(但不限于此)二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、氯仿、乙醚和其它的惰性溶劑。在它們中間，氯仿是優(yōu)選采用的。在步驟(2)中生成的化合物(III)在水溶液中是一種強酸(例如在1％的水溶液中pH值為2)。因此抗壞血酸部分的5，6-羥基和氧氮磷雜環(huán)己烷環(huán)部分的P-N鍵能夠輕易地通過加入蒸餾水而不用加入酸性催化劑，然后通過在5～100℃，優(yōu)選在大約50℃的溫度下攪拌大約3小時就可水解。產(chǎn)品可用極性有機溶劑通過重結(jié)晶來純化。極性溶劑可包括(但不限于此)甲醇、乙醇、異丙醇、丙酮、四氫呋喃、乙腈或二噁烷。進而，產(chǎn)品AsA-APPA可優(yōu)選地以一種通過強堿或堿的中和作用得到的鹽的形式來使用，因為產(chǎn)品自身是酸性的。在該步驟(5)中所采用的中和劑可包括(但不限于此)強堿或金屬氧化物如碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氧化鈣、氧化鎂；堿性氨基酸如賴氨酸、精氨酸、組氨酸；氨或酰胺如三乙醇胺；陽離子聚合物如聚季鎓-4、-6、-7、-10、-11和-16；以及陽離子表面活性劑如月桂基二甲基芐基氯化銨和硬脂基二甲基芐基氯化銨。進而，本發(fā)明提供包含由上述方法生產(chǎn)的2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯或其鹽作為活性成分的皮膚增白美容組合物，它能夠抑制黑色素的形成并因此產(chǎn)生了皮膚增白效果，還能夠防止皮膚起皺并因此有效地延緩皮膚衰老。該組合物可包含0.005-10％重量的，優(yōu)選為0.01-3％重量的2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯或其鹽，這可根據(jù)組合物的配方或最終用途來選擇。進而用該組合物可配成(但不局限于此)皮膚軟化劑、收斂劑、營養(yǎng)花露水、營養(yǎng)霜、按摩霜、香精、眼霜、眼香精、清潔霜、清潔泡沫、清潔水、團塊、粉末、體洗液、體霜、體油或體香精。本發(fā)明將通過以下實施例得到更詳盡的描述。然而這些實施例僅為說明的目的而提供，因此不應(yīng)被看作對在所附上的權(quán)利要求中所表述的本發(fā)明范圍的限定。&lt;制備實施例1&gt;2-氯四氫-2H-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷P-氧化物的制備將34.1ml(0.36mol)的磷酰氯溶解在400ml的二氯甲烷中。然后將所得的溶液在冰浴中冷卻至0～5℃。在另一反應(yīng)器中，用200ml的二氯甲烷將28ml(0.36mol)的3-胺基-1-丙醇和102ml(0.73mol)的三乙胺稀釋，然后慢慢加到以上溶液中2小時。加入之后，將所得的混合物過濾以去除三乙基氯化銨。濾液用100ml的蒸餾水洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥，在減壓下過濾和濃縮。向其中加入甲苯以產(chǎn)生晶體。然后將產(chǎn)品在減壓下干燥以得到53g的白色粉末狀標(biāo)題產(chǎn)品，這可由IR和NMR來證實。熔點79～82℃IR(CHCl3，cm-1)3254，1477，1274，1092，1036，9961H-NMR(CDCl3)δ(ppm)＝1.7(m，1H)，1.1(m，1H)，3.3(m，2H)，4.4(m，2H)，4.9(br，1H)13C-NMR(CDCl3)δ(ppm)＝25.78，25.85，42.05，42.11，71.69，71.81&lt;制備實施例2&gt;2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯的制備將10g(0.046mol)的其5，6-羥基基團被亞異丙基保護的L-抗壞血酸溶解在100ml的氯仿中，然后在5℃的冰浴中向其中加入12.9ml(0.093mol)的三乙胺。在相同的溫度下，將8.6g(0.055mol)的在制備實施例1中生成的2-氯四氫-2H-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷P-氧化物溶解在20ml的氯仿中并將其慢慢加入以上溶液中。加入之后，在室溫下將混合物攪拌一夜。有機層用磷酸水溶液洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥，并用活性炭脫色。在減壓下將溶液過濾和濃縮。加入30ml的蒸餾水，并在50℃的恒溫器中攪拌3個小時。然后將產(chǎn)品在減壓下干燥以得到6g的白色粉末狀標(biāo)題產(chǎn)品，這可由IR和NMR來證實。熔點176～180℃IR(KBr，cm-1)3407，3322，3101，2914，1747，1673，1664，1533，1364，1218，10721H-NMR(D2O)δ(ppm)＝1.9(m，2H)，3.05(t，2H)，3.62(m，2H)，3.98(m，3H)，4.90(s，1H)13C-NMR(D2O)δ(ppm)＝26.76，22.86，32.35，57.30，59.77，59.84，64.15，71.55，71.72，109.79，109.88，156.58，156.63，167.32，167.38&lt;制備實施例3～7&gt;2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸鹽的制備在每個實施例中，將1g的在制備實施例2中生成的AsA-APPA溶解在30ml的蒸餾水中，然后在制備實施例3中加入5％的碳酸鈉水溶液，在制備實施例4中加入5％的碳酸鉀水溶液，在制備實施例5中加入氫氧化鈣，在制備實施例6中加入氧化鎂，在制備實施例7中加入5％的三乙醇胺水溶液，使得溶液的pH值為7。將所得的溶液凍干以得到各自白色固體狀的鹽。&lt;實驗性實施例1&gt;AsA-APPA的穩(wěn)定性將L-抗壞血酸和在制備實施例2中生成的AsA-APPA分別溶解在pH值為7的緩沖溶液中，以達到50μM的濃度，然后保持在50℃的恒溫器中。在恒定時間間隔內(nèi)，測量AsA-APPA在259nm上和L-抗壞血酸在266nm上的UV吸光度，根據(jù)殘留比率(％)來評估測試樣品的穩(wěn)定性。結(jié)果在表1中顯示。&lt;表1&gt;如以上表1中所示，L-抗壞血酸在大約1小時之內(nèi)就分解，而本發(fā)明的AsA-APPA在中性水溶液中是非常穩(wěn)定的。&lt;試驗性實施例2&gt;AsA-APPA在含水載體中的穩(wěn)定性將制備實施例3和實施例6中的化合物和L-抗壞血酸2-磷酸鎂各3g溶解在100ml的蒸餾水中，然后保持在50℃的恒溫器中達30分鐘。隨時間變化觀察沉淀和變色。結(jié)果在表2中顯示。&lt;表2&gt;經(jīng)過天數(shù)1357911131530制備實施例3沉淀---------變色---------制備實施例6沉淀---------變色---------比較實施例1沉淀-+++++++++++++++++變色--------+(說明)評估體系沉淀變色-無沉淀無色或淡黃色+輕微沉淀很少變色++一些沉淀嚴(yán)重變色+++嚴(yán)重沉淀特別嚴(yán)重變色</table></tables>如以上表2中所示，本發(fā)明化合物隨著時間的變化，在含水載體中不會引起沉淀和變色。&lt;試驗性實施例3&gt;成纖維細胞的增生用1型膠原酶處理從新表皮組織中得到的皮膚以去除表皮層。將所得的成纖維細胞在Dulbecco’sModifiedEagle’sMedia(DMEM)中培養(yǎng)。成纖維細胞的量可通過MTT方法來測定。結(jié)果是制備實施例2中的化合物即使在低至10mM的濃度下也顯示出成纖維細胞的有效增生。&lt;試驗性實施例4&gt;AsA-APPA對活體的安全性因為美容材料是應(yīng)用在皮膚上的，所以它們對活體的安全性是非常重要的。在本發(fā)明中，AsA-APPA對皮膚的毒性和刺激是通過以下實驗來檢測的。結(jié)果證明AsA-APPA對活體是安全的。(4-1)急性口服毒性試驗用生理鹽水將100ml/kg的制備實施例2中的AsA-APPA稀釋以得到50％的測試樣品。該測試樣品通過口服供給十只(五只雄的和五只雌的)重20～33g的ICR老鼠(AsA-APPA的供給量5g/kg重量)。作為對比，將10ml/kg的生理鹽水通過口服供給十只(五只雄的和五只雌的)重20～33g的ICR老鼠(AsA-APPA的供給量0g/kg重量)。當(dāng)天，連續(xù)6小時中每個小時都觀察總的狀況。然后從第二天至第14天，每天都觀察總的狀況(臨床癥狀)，毒性癥狀，死亡以及諸如此類。而且，在第1，3，7和14天測量重量的變化。任何在觀察期內(nèi)死亡的老鼠被立即進行尸體解剖，而活著的老鼠則在觀察期后進行尸體解剖。用肉眼觀察內(nèi)部器官，而且一旦發(fā)現(xiàn)異常癥狀就進行病理組織試驗。結(jié)果，沒有死亡的老鼠而且與對比組相比沒有觀察到在體重變化上的顯著差異。同時尸體解剖記錄說明沒有觀察到異常癥狀。按照Litchfield-Wilcoxon’s方法，在急性口服中AsA-APPA的LD50(致死量)是5g/kg。(4-2)急性皮膚毒性試驗用生理鹽水將4ml/kg的制備實施例2中的AsA-APPA稀釋以得到50％的測試樣品。該測試樣品被透皮供給十只(五只雄的和五只雌的)重20～33g的ICR老鼠(AsA-APPA的供給量2g/kg重量)。作為對比，將4ml/kg的生理鹽水透皮供給十只(五只雄的和五只雌的)重20～33g的ICR老鼠(AsA-APPA的供給量0g/kg重量)。在大約24小時之前，每只老鼠的背部都被剃毛，尺寸達1.5×1.5cm2。然后每個剃毛部位用1×1cm2的浸漬了測試和對比樣品之一的紗布包覆，并用一種非刺激性的膠帶固定達24小時。當(dāng)天，連續(xù)6小時中每個小時都觀察總的狀況。然后從第二天至第14天，每天都觀察總的狀況(臨床癥狀)，毒性癥狀，死亡以及諸如此類。進而在第1，3，7和14天測量體重的變化。任何在觀察期內(nèi)死亡的老鼠被立即進行尸體解剖，而活著的老鼠則在觀察期后進行尸體解剖。用肉眼觀察內(nèi)部器官而且一旦發(fā)現(xiàn)異常癥狀就進行病理組織試驗。結(jié)果，沒有死亡的老鼠而且與對比組相比沒有觀察到在體重變化上的顯著差異。同時尸體解剖記錄說明沒有觀察到異常癥狀。按照Litchfield-Wilcoxon’s方法，在急性皮膚暴露中AsA-APPA的LD50(致死量)是2g/kg。(4-3)原發(fā)性皮膚刺激試驗試驗是對十二只其背部在24小時之前已剃毛的新西蘭白雄兔進行的。用生理鹽水將0.1ml的制備實施例2中的AsA-APPA稀釋以得到50％的測試樣品。該測試樣品被應(yīng)用于右背的兩個部位(2.5cm×2.5cm)(每個部位上AsA-APPA的量0.5ml)。作為對比，用1.0ml的生理鹽水處理左背的兩個部位(2.5cm×2.5cm)。每個測試部位用紗布包覆，該紗布是用一種非刺激性的膠帶固定的。24小時之后，用生理鹽水清洗測試部位。結(jié)果，在除掉斑貼之后沒有觀察到皮膚異常如紅斑和水腫。而且歸因于紅斑的DraizePII(原發(fā)性刺激指數(shù))為0.13，表明AsA-APPA是非刺激的或非常低刺激的(如果有的話)。(4-4)眼刺激試驗試驗是用九只新西蘭白兔進行的。用生理鹽水將0.1ml的制備實施例2中的AsA-APPA稀釋以得到10％的測試樣品。將該測試樣品滴到每只兔的右眼，左眼作為對比。在20～30秒之后，它們中間只有三只兔是用無菌鹽水進行徹底沖洗的。在24小時之后，在角膜，虹膜和結(jié)膜上沒有觀察到對眼的刺激。在沖洗和不沖洗的情況下眼粘膜的刺激率(M.O.I)都為0.0。(4-5)皮膚過敏試驗試驗是按照Maggnusson和Kligman的方法(Guinea豬的最大化試驗)對六只(三只雄的和三只雌的)重300～360g的Guinea豬(HartleyAlbinoGuinea豬)進行的。為了確定在對輕度刺激所作的誘導(dǎo)試驗和對無刺激所作的激發(fā)試驗中使用的測試樣品的濃度，對每次試驗的三只Guinea豬，分別使用6.25％、12.5％和25.0％的測試樣品進行原發(fā)性刺激。對每只動物來說，背的左部和右部的每個部位(2.5cm×2.5cm)是用三種濃度的測試樣品(用量為0.5ml的AsA-APPA/每部位)進行處理的，然后用紗布包覆，該紗布用一種非刺激性的膠帶固定24小時。然后使用26-規(guī)格的1/2英寸長的針將0.1ml的25.0％AsA-APPA經(jīng)皮內(nèi)注射到兩只豬中的每一只(一只雄的和一只雌的)。7天之后，將相同的部位進行剃毛并用在凡士林濃度為10％的SLS進行預(yù)處理。然后用0.5ml的AsA-APPA/每部位的量處理每個測試部位，再用紗布包覆，該紗布用一種非刺激性的膠帶固定48小時。兩周之后，剃毛豬的左背用測試樣品進行處理，而右背則用生理鹽水進行處理。24小時之后，用生理鹽水清洗測試部位。作為對比，用生理鹽水代替測試樣品以相同的方法進行試驗。結(jié)果，在除掉斑貼之后的24、48和72小時內(nèi)沒有觀察到皮膚異常如紅斑和水腫。按照Kligman的標(biāo)準(zhǔn)，AsA-APPA是屬于1級的，這表明AsA-APPA對皮膚是非常安全的。(4-6)人的斑貼試驗試驗是按照CTFA指南(TheCosmetic，ToiletryandFragranceAssociationInc.Washington，D.C.，20023，1991)對三十位年齡在20～30歲之間的健康女性進行的。用70％的乙醇清洗被試驗者的背部并干燥，然后用包含20μl的加入了10％制備實施例2中的AsA-APPA的斑貼載體的翼式腔貼敷。翼式腔是使用一種微孔膠帶固定在測試部位上的。24小時之后，去除膠帶和腔，然后用標(biāo)記筆給測試部位作上標(biāo)記。在24小時或48小時之后，觀察測試部位的皮膚反應(yīng)，并根據(jù)ICDRG(IntematoinalContactDermatitisResearchGroup)的標(biāo)準(zhǔn)來評估皮膚刺激。結(jié)果，除了1％的紅斑，很難觀察到原發(fā)性刺激反應(yīng)，但是在48小時之后，所有的刺激都消退了。平均反應(yīng)為0.42。&lt;表3&gt;(4-7)重復(fù)傷人斑貼試驗試驗是按照CTFA指南(TheCosmetic，ToiletryandFragranceAssociationInc.Washington，D.C.，20023，1991)對二十位年齡在20～30歲之間的健康女性進行的。用70％的丙醇清洗被試驗者的背部并干燥，然后用包含20μl的加入了10％制備實施例2中的AsA-APPA的斑貼載體的翼式腔帖敷。三周內(nèi)(誘導(dǎo)期)每24小時重復(fù)貼敷。在大約二周之后，完成了激發(fā)傷害斑貼。在該步驟中，在誘導(dǎo)期間試驗的部位和新部位都用斑貼貼敷達48個小時。然后去除斑貼，在其之后的第24、48和72小時觀察測試部位的皮膚反應(yīng)。并按照ICDRG(InternatoinalContactDermatitisResearchGroup)的標(biāo)準(zhǔn)進行評估。結(jié)果，沒有觀察到重復(fù)刺激或過敏刺激。在誘導(dǎo)期間和激發(fā)期間內(nèi)的平均反應(yīng)分別為0.14和0。&lt;表4&gt;試驗(4-1)至(4-7)的結(jié)果列在表5中。&lt;表5&gt;通過以上實驗，可以證明AsA-APPA在皮膚上的局部應(yīng)用中是一種安全材料。&lt;實施例1和對比例1～5&gt;霜劑&lt;實施例2和對比例6～10&gt;皮膚軟化劑lt;實驗性實施例5&gt;對皮膚的安全性為了評估包含AsA-APPA的增白美容組合物作用于皮膚上的安全性，對實施例1～2和對比例1～10中的組合物進行了常規(guī)的斑貼試驗，并且按照以下的評分體系來估計皮膚刺激的程度。&lt;評估體系&gt;&lt;表6&gt;如表6中所示，包含AsA-APPA的組合物對皮膚是不刺激的。&lt;實驗性實施例6&gt;增白效果為了評估包含AsA-APPA的美容組合物的增白效果，對實施例1～2和對比例1～10中的組合物進行以下實驗。將具有四個孔直徑為1.5cm的斑貼用于十位健康志愿者的兩只胳膊的下部并在10cm的距離上用TL20W/12UV燈(Philips)和TL20W/09UV燈(Philips)所產(chǎn)生的UV線以1.5MED(最小有效劑量)進行刺激，一天一次共兩天。然后將被試驗者分成A和B兩組。實施例1和對比例1～5中制備的每種霜劑用于A組，而實施例2和對比例6～10中制備的每種皮膚軟化劑用于B組，一天兩次共6周。用肉眼觀察并評估皮膚增白效果無效，有效和明顯有效。結(jié)果在表7中顯示出來。&lt;表7&gt<p>如表7中所示，包含AsA-APPA(實施例1或2)的組合物的增白效果與包含L-抗壞血酸2-磷酸鎂(對比例4或9)的組合物的增白效果相似，而它比包含AsA(對比例2或7)的組合物的增白效果稍差一點。權(quán)利要求1.由以下通式(I)所表示的2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯或其鹽。2.根據(jù)權(quán)利要求1的2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯，其中所說的鹽選自堿金屬如鈉和鉀的鹽；堿土金屬如鈣和鎂的鹽；堿性氨基酸如賴氨酸、精氨酸、組氨酸的鹽；氨或酰胺如三乙醇胺的鹽；陽離子聚合物如聚季鎓-4、-6、-7、-10、-11和-16的鹽；以及陽離子表面活性劑如月桂基二甲基芐基氯化銨和硬脂基二甲基芐基氯化銨的鹽。3.一種制備權(quán)利要求1的所述2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯的方法，該方法包括以下步驟(1)在大約0～5℃的溫度下，在有機堿的存在下將3-胺基-1-丙醇與磷酰氯以1∶1～1.3的當(dāng)量比于有機溶劑中反應(yīng)大約1～2個小時以生成由以下通式(II)所表示的2-氯四氫-2H-1，3，2-氧氮磷雜環(huán)己烷P-氧化物；(2)在有機堿的存在下，將步驟(1)中的所述化合物(II)與5，6-羥基保護的L-抗壞血酸于有機溶劑中反應(yīng)生成由以下通式(III)所表示的L-抗壞血酸衍生物；(3)在大約5～100℃的溫度下，通過向其中加入蒸餾水，使所述步驟(2)中的L-抗壞血酸衍生物(III)水解大約3個小時，以生成2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯；(4)用一種極性有機溶劑將所述步驟(3)中的產(chǎn)品進行重結(jié)晶；和(5)可選擇性地用一種強堿或堿將所述步驟(4)中的產(chǎn)品進行中和以生成一種鹽。4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中步驟(1)中的所述有機堿為吡啶或三乙胺。5.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中步驟(1)中的所述有機溶劑選自二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、氯仿、乙醚和其它的惰性溶劑。6.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中用于保護L-抗壞血酸的5，6-羥基的保護基團選自苯亞甲基、苯亞乙基和亞異丙基。7.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中步驟(2)中的所述有機堿為吡啶或三乙胺。8.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中步驟(2)中的所述有機溶劑選自二氯甲烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙腈、氯仿、乙醚和其它的惰性溶劑。9.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中制備一種鹽。10.根據(jù)權(quán)利要求9的方法，其中用于步驟(5)中的中和劑選自強堿或金屬氧化物如碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸鉀、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂、氧化鈣、氧化鎂；堿性氨基酸如賴氨酸、精氨酸、組氨酸；氨或酰胺如三乙醇胺；陽離子聚合物如聚季鎓-4、-6、-7、-10、-11和-16；以及陽離子表面活性劑如月桂基二甲基芐基氯化銨和硬脂基二甲基芐基氯化銨。11.一種包含權(quán)利要求1中的所述2-(3-胺基內(nèi)烷磷酸)-L-抗壞血酸酯或其鹽的皮膚增白美容組合物。12.根據(jù)權(quán)利要求11的增白美容組合物，其中包含0.005～10％重量的所述2-(3-胺基丙烷磷酸)-L-抗壞血酸酯或其鹽。全文摘要本發(fā)明在此披露了一種由以下通式(Ⅰ)所表示的具有改進的水穩(wěn)定性的L－抗壞血酸衍生物和一種制備其的方法,以及一種包含其作為活性成分的皮膚增白美容組合物。文檔編號A61K8/00GK1201036SQ98101499公開日1998年12月9日申請日期1998年6月4日優(yōu)先權(quán)日1997年6月4日發(fā)明者洪琮彥,李玘和,曹浚喆,李長燮,李正老,天芝民,張東逸,李玉燮,李相麟申請人:株式會社太平洋