專利名稱：促進(jìn)器官化組織的再生的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在人或動(dòng)物活體內(nèi)某一器官化組織結(jié)構(gòu)中促進(jìn)損傷區(qū)域內(nèi)器官化組織的再生，例如神經(jīng)(脊神經(jīng)與顱神經(jīng))、腱、韌帶、骨骼肌、骨、關(guān)節(jié)囊、軟骨及腱膜。
值得指出的是，此處所提及的“再生”及其衍生物并不意味著要完成器官化組織結(jié)構(gòu)中損傷區(qū)域的修復(fù)必須在受損區(qū)域形成與原器官化組織完全相同的替代器官化組織，而僅意味著在受損區(qū)域形成一替代器官化組織即可修復(fù)損傷區(qū)域。
在受到橫斷、擠壓或其他外科手段的作用或損傷后，由于結(jié)構(gòu)及功能的不完全恢復(fù)，器官化組織結(jié)構(gòu)中損傷區(qū)域的修復(fù)將受到阻礙。在先前神經(jīng)修復(fù)與再生的例子中一些植入結(jié)構(gòu)已闡述了上述問題。
例如，迄今為止有提出使用導(dǎo)絲進(jìn)行橫斷神經(jīng)的修復(fù)(Alexanderet al:Proc.Soc.Exp.Biol.Med.68:380-383(1948)；Stopford:柳葉刀，10 1296-1297,(1920))。這包括典型的使用縫線沿橫斷神經(jīng)近、遠(yuǎn)端之間的裂隙將神經(jīng)縫合的方法。并且該導(dǎo)線尚可用層粘連蛋白、膠原及纖連蛋白等物質(zhì)包被。然而，導(dǎo)線的使用僅取得了有限的成功。
在橫斷神經(jīng)的近端與遠(yuǎn)端之間使用一末端開放管以橋接兩端從而促進(jìn)其間神經(jīng)組織修復(fù)的方法亦有記錄(Gluck:Arch.Klin.Chir.25:606-616,(1880)；Forssman:Ziegler′s Beitrage zur Pathol.Anatomie 27:407(1900))。該神經(jīng)導(dǎo)引管的應(yīng)用使得再生軸突的數(shù)量和/或大小有所增加而再生神經(jīng)組織橋接受損區(qū)域所需的時(shí)間卻縮短了。在神經(jīng)導(dǎo)引管腔中加入膠原凝膠基質(zhì)可以進(jìn)一步促進(jìn)橫斷神經(jīng)近、遠(yuǎn)端之間神經(jīng)組織的再生率(T.Satou et al:Acta pathologicaJaponica 36,199-208,1986和Acta pathologica Japonica 38(12),1489-1502,1988)。
加拿大專利第1328710(Aebischer等)號(hào)進(jìn)一步提出制造一種外表面無(wú)孔而內(nèi)表面有孔的神經(jīng)導(dǎo)引管以便向其中加入神經(jīng)生長(zhǎng)誘導(dǎo)活性因子并使其緩慢釋放于受損區(qū)域。同樣地，國(guó)際專利申請(qǐng)公開第WO 92/13579號(hào)(Fidia S.P.A)也發(fā)現(xiàn)了一種生物可降解及吸收的導(dǎo)管可被用于神經(jīng)組織的修復(fù)及再生，該導(dǎo)管管腔壁的界面上涂有生長(zhǎng)因子從而可增強(qiáng)神經(jīng)的再生、生長(zhǎng)與修復(fù)。
亦有人提出在神經(jīng)導(dǎo)引的管腔內(nèi)加入機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)。例如，國(guó)際地利申請(qǐng)公開第WO 88/06871號(hào)(Astra Meditec)提出在末端開放管的管腔內(nèi)提供多條軸向延伸的導(dǎo)引隧道以便在橫斷神經(jīng)的遠(yuǎn)、近端之間形成管道結(jié)構(gòu)。該導(dǎo)引隧道僅限于在纖維之間和/或沿纖維在管腔內(nèi)軸向延伸。人們還設(shè)想使用激光在一根圓柱體內(nèi)(沿軸向)打出多條孔道從而形成一根含有多條獨(dú)立管腔的神經(jīng)導(dǎo)引管。
然而，利用成管以修復(fù)受損神經(jīng)的方法具有造成廣泛炎癥及/或神經(jīng)受壓等不利因素，這使得該領(lǐng)域的一些專家認(rèn)為，只有在更恰當(dāng)密閉的條件下應(yīng)用成管技術(shù)才能成功地橋接受損神經(jīng)部位(Sunderland《外周神經(jīng)損傷及其修復(fù)》，p.605(1978)與《神經(jīng)損傷及其修復(fù)》，Churchill Livingstone,p.431 ff(1991))。
導(dǎo)引管還被建議用于其他身體結(jié)構(gòu)的再生。例如，國(guó)際專利申請(qǐng)公開第WO 88/06872號(hào)(Astra Meditec)提出一種植入結(jié)構(gòu)以促進(jìn)腱、韌帶以及交叉韌帶的再生，它包括一根末端開口的管道，可將撕裂的肌腱、韌帶或交叉韌帶的游離端插入其中，同時(shí)管道由多條組織導(dǎo)引隧道沿軸向方向延伸。管腔內(nèi)的導(dǎo)引隧道實(shí)為沿管腔軸向算得的導(dǎo)絲或(分隔)結(jié)構(gòu)之間所余的空隙。
然而，至此所提出的結(jié)構(gòu)尚無(wú)一考慮到在損傷組織結(jié)構(gòu)表面必然會(huì)形成由纖維蛋白及包括血小板在內(nèi)的各種細(xì)胞所組成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)(以下稱之為“纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)”)。
另一方面，申請(qǐng)人已意識(shí)到在器官化組織的修復(fù)與再生過(guò)程中纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所起的重要作用。象再生的組織結(jié)構(gòu)這樣的外生細(xì)胞需要為其粘附與遷涉尋找一物理支持。在創(chuàng)傷區(qū)域組織的再生中，這一機(jī)械支持結(jié)構(gòu)是由成型生長(zhǎng)階段創(chuàng)傷區(qū)域中血凝塊所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)來(lái)提供和決定的。如此的結(jié)果是，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)對(duì)受損區(qū)域內(nèi)長(zhǎng)入的肉芽組織細(xì)胞以及具有愈合結(jié)構(gòu)特征的特殊細(xì)胞的生長(zhǎng)方向會(huì)施加決定性影響。也就是說(shuō)，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)為創(chuàng)傷區(qū)域內(nèi)具有愈合結(jié)構(gòu)特征的細(xì)胞的生長(zhǎng)方向及分布構(gòu)建了一塊模板。
例如，在一根損傷的神經(jīng)中，軸突及起支持作用的雪旺氏細(xì)胞沿神經(jīng)裂隙或受壓區(qū)域進(jìn)行再生的路徑在很大程度上與復(fù)合纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的分布及組成相關(guān)。與此相似，肌腱、韌帶、腱膜、骨骼肌、軟骨、骨以及其他器官化組織結(jié)構(gòu)在損傷后(的再生中)也都依賴于血凝塊中纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所構(gòu)建的模式。
要知道在某一器官化組織結(jié)構(gòu)的創(chuàng)傷區(qū)域中所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)含有分支眾多的纖維蛋白絲、帶，從而具有一個(gè)高度復(fù)雜全不規(guī)則的三維結(jié)構(gòu)。相應(yīng)地，在神經(jīng)組織修復(fù)中，纖維蛋白絲分支交錯(cuò)并相互纏繞，雪旺氏細(xì)胞及軸突則沿纖維蛋白絲向前生長(zhǎng)。伴隨神經(jīng)再生的結(jié)締組織細(xì)胞亦有同樣的生長(zhǎng)模式，也就是說(shuō)，它們的生長(zhǎng)過(guò)程大體上從屬于填充于橫斷神經(jīng)末端之間或受擠壓神經(jīng)區(qū)域的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的模式。在擠壓傷或外科手段損傷所致的橫斷結(jié)構(gòu)中這種依從性同樣十分顯著。
在神經(jīng)組織的再生中這種依從性的結(jié)果是其高度再生的努力遭到嚴(yán)重?fù)p害，因?yàn)榇罅啃律妮S突沿著極其異常的路徑廣泛分支而無(wú)法沿正確路徑生長(zhǎng)，從而使新生軸突無(wú)法抵達(dá)預(yù)期的靶組織并重建功能連接。在這種看似愈合實(shí)則無(wú)法重獲靶組織神經(jīng)支配的神經(jīng)中，上述高度分支、錯(cuò)誤排列并且隨意走向的軸突生長(zhǎng)的結(jié)果是導(dǎo)致了神經(jīng)瘤的形成。由于部分神經(jīng)細(xì)胞最終將會(huì)開始迷失，因此這種生長(zhǎng)將過(guò)早地結(jié)束。
纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的存在分布與組成對(duì)修復(fù)過(guò)程中再生組織的新生結(jié)構(gòu)起到?jīng)Q定性的關(guān)鍵作用，從而也是受損組織重獲功能的關(guān)鍵因素。
因此，本發(fā)明旨在通過(guò)提供可調(diào)控組織再生生長(zhǎng)方向的方法來(lái)達(dá)到增強(qiáng)人體或動(dòng)物體機(jī)體組織結(jié)構(gòu)中損傷部位愈合的目的。
根據(jù)發(fā)明的另一方面，此處提供了一種在人或動(dòng)物活體的機(jī)體組織結(jié)構(gòu)中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域的表面沿一預(yù)定方向向損傷區(qū)域內(nèi)再生的體系，其中包括一個(gè)植入人或動(dòng)物體內(nèi)以套住損傷區(qū)域的套裝結(jié)構(gòu)，置于套裝損傷區(qū)域內(nèi)以引導(dǎo)組織沿預(yù)定方向再生的機(jī)械導(dǎo)引裝置，以及向套裝損傷區(qū)域表面所加入的一種纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑。典型情況下，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑將被系統(tǒng)性或局部地加入套裝損傷區(qū)域內(nèi)。
“纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑”中的“抑制”應(yīng)被理解為既可抑制損傷區(qū)域纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的形成，又可對(duì)損傷區(qū)域已形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)進(jìn)行降解。
根據(jù)發(fā)明的第二方面，此處提供了一種在人或動(dòng)物活體的身體中促進(jìn)器官化組織自損傷區(qū)域的表面沿一預(yù)定方向向損傷區(qū)域內(nèi)再生的方法，其中包括用一套裝結(jié)構(gòu)套住損傷區(qū)域、在套裝損傷區(qū)域內(nèi)提供機(jī)械導(dǎo)引裝置以引導(dǎo)組織沿預(yù)定方向再生以及向套裝損傷區(qū)域內(nèi)加入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑的一系列步驟。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中、纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種凝血酶抑制劑。該凝血酶抑制劑可能為一種低分子量基于肽的凝血酶抑制劑。所謂的“低分子量基于肽的凝血酶抑制劑”在本領(lǐng)域技校人員中是指那些含有一至四個(gè)肽鍵和/或分子量小于1000的凝血酶抑制劑，包括那些Claesson在《凝血與纖維蛋白》(1994)5,411的綜述中所描述的以及美國(guó)專利第4346078號(hào)、國(guó)際專利申請(qǐng)公開第WO 93/11152、WO 95/23609、WO 95/35309、WO 96/25426、WO 94/29336、WO 93/18060和WO 95/01168號(hào)、歐洲專利申請(qǐng)公開第648780、468231、559046、641779、185390、526877、542525、195212、362002、364344、530167、293881、686642、669317和601459號(hào)所揭示的。
優(yōu)選的低分子量基于肽的凝血酶抑制劑包括那些被稱為“gatrans”的總體，例如melagatran(HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab-H見國(guó)際專利申請(qǐng)公開第WO 94/29336號(hào)及其刪節(jié)本目錄)和inogtran(HOOC-CH2-(R)Cha-Rc-Nag-H見國(guó)際專利申請(qǐng)公開第WO 93/11152號(hào)及其縮略表)。
凝血酶抑制劑也可以是一種二硫酸化的(bisulphated)多糖或寡糖，如硫酸軟骨素、硫酸皮膚素、硫酸葡聚糖(dextron)、硫酸角質(zhì)素、硫酸肝素或肝素。另外，凝血酶抑制劑可以是水蛭素。水蛭素的生物合成類似物。水蛭素的一個(gè)片段如含有水蛭素或蛋白NAPc2已知序列中至少最末8個(gè)-末端氨基酸的片段。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種纖溶劑。該纖溶劑可以是組織纖溶酶原激活劑(tPA)，如重組的人組織纖溶酶原激活劑(hrtPA)(如Actilyse)，以及鏈激酶或尿激酶。
在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種因子X抑制劑、胰蛋白酶抑制劑或蛋白酶抑制劑，亦即其他一些可影響凝血酶原-凝血酶系統(tǒng)活性(該系統(tǒng)可激發(fā)纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成)的化合物。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被包埋于套裝結(jié)構(gòu)面對(duì)損傷區(qū)域的內(nèi)表面中。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被制成溶液并用泵將其加入套裝受損區(qū)域。該泵可以是一種能被進(jìn)一步植入人或動(dòng)物體皮下的滲透性微型泵。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被混合于一種基質(zhì)材料中以便向套裝受損區(qū)域中配置運(yùn)送。例如，其質(zhì)材料可由含有多糖的物質(zhì)形成，如脫乙酰殼多糖、hyaluronan(如透明質(zhì)酸)、瓊脂凝膠、水凝膠(如甲基纖維素凝膠)、Matrigel、Biomatrix Ⅰ、水、鹽水、磷酸鹽緩沖液、磷脂或蛋白質(zhì)(如膠原)。
根據(jù)本發(fā)明的第三方面，此處提供了一種在人或動(dòng)物體的機(jī)體中促進(jìn)器官化組織自損傷區(qū)域的表面沿一預(yù)定方向向損傷區(qū)域內(nèi)再生的設(shè)備，其中包括一個(gè)當(dāng)該設(shè)備植入人或動(dòng)物體內(nèi)時(shí)用以套住損傷區(qū)域的外部套裝結(jié)構(gòu)，以及一個(gè)當(dāng)該設(shè)備植入時(shí)被置于套裝損傷區(qū)域內(nèi)部，含有一條或多條使組織沿預(yù)定方向再生的隧道的內(nèi)部凝膠狀結(jié)構(gòu)。依據(jù)本發(fā)明，上述可植入設(shè)備可以與纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑聯(lián)合使用，當(dāng)然這并非嚴(yán)格必須。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，套裝結(jié)構(gòu)可以是覆蓋機(jī)體組織結(jié)構(gòu)受壓損傷區(qū)域或類似區(qū)域的一種膜片。
根據(jù)本發(fā)明第一和第二方面的另一實(shí)施方案中，套裝結(jié)構(gòu)是一根一端開放并抵達(dá)損傷表面的管狀物，其管腔中放置有機(jī)械導(dǎo)引裝置并沿預(yù)定方向延伸。如利用泵將纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑注入管腔局部，那么可使用連續(xù)的外管部分以阻止肉芽組織向管與泵之間的損傷區(qū)域長(zhǎng)入，并使用由多數(shù)縱向分隔的管狀部分組成的內(nèi)管以使試劑由泵釋入管腔后沿軸向分布，由此可達(dá)到試劑的一致分布。
根據(jù)本發(fā)明第三方面的另一實(shí)施方案，套裝結(jié)構(gòu)是一根一端開放并抵達(dá)損傷表面的管狀物，其管腔由每條導(dǎo)引隧道均沿預(yù)定方向延伸。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)第一及第二方面，損傷區(qū)域的受損表面是第一受損表面，管狀物的開放末端是第一開放末端，該管尚具有第二開放末端以抵達(dá)損傷區(qū)域的第二受損表面，其管腔內(nèi)的機(jī)械導(dǎo)引裝置在第一與第二開放末端之間沿預(yù)定方向延伸。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)第三方面，損傷區(qū)域的受損表面是第一受損表面，管狀物的開放末端是第一開放末端，該管尚具有第二開放末端以抵達(dá)損傷區(qū)域以第二受損表面，其管腔內(nèi)的各條導(dǎo)引隧道在第一與第二開放末端之間沿預(yù)定方向延伸。
在上述例子中本發(fā)明可被用于促進(jìn)被切割或橫斷的器官化組織結(jié)構(gòu)如神經(jīng)、腱、骨骼肌或韌帶的游離端裂隙間的組織再生，管狀物的開放末端分別抵達(dá)被切割或橫斷的游離末端。
套裝結(jié)構(gòu)優(yōu)選生物相容性材料，可能是可生物降解或非生物降解的。然而可生物降解者是優(yōu)選的。
套裝結(jié)構(gòu)可以由包含多糖(如脫乙酰殼多糖、肝素、肝素類似物或hyaluronan如透明質(zhì)酸)的物質(zhì)組成。
套裝結(jié)構(gòu)也可由含有膠原或其蛋白復(fù)合物的物質(zhì)組成。
另外，套裝結(jié)構(gòu)可由含有聚合物或共聚物(如聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乙醇酸(polyglycolic acid)，選擇性滲透的聚四乙烯(polytetraethylene)、聚葡糖醛酸或聚-N-乙酰葡糖胺或共聚物如聚羥基丁酸及羥基戊酸之共聚物的物質(zhì)組成。
組成套裝結(jié)構(gòu)的非生物降解物質(zhì)可有(聚)硅氧烷及乙酰乙酸己烯酯。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)第一與第二方面，機(jī)械導(dǎo)引裝置是由面對(duì)損傷區(qū)域的套裝結(jié)構(gòu)內(nèi)表面所支持或提供的。在該實(shí)施方案中機(jī)械導(dǎo)引裝置與套裝結(jié)構(gòu)可被作為一個(gè)可植入體而整體形成。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)第一與第二方面，機(jī)械導(dǎo)引裝置在套裝損傷區(qū)域中以導(dǎo)引隧道的形式存在。
為達(dá)上述要求的方法之一是在植入套裝結(jié)構(gòu)時(shí)使用一具有橫向螺旋的橫斷面的管狀結(jié)構(gòu)，該橫斷面可由卷起平面膜等方法形成。由螺旋纏繞部分所形成的沿縱向延伸的空間即形成導(dǎo)引隧道。
另一種方法是采用含有一條或多條導(dǎo)引隧道的凝膠結(jié)構(gòu)的形式作為機(jī)械導(dǎo)引裝置，該凝膠結(jié)構(gòu)被置于套裝受損區(qū)域中以便導(dǎo)引隧道沿預(yù)定方向延伸。
在要促進(jìn)神經(jīng)組織再生生長(zhǎng)的發(fā)明中，每一導(dǎo)引隧道的橫截面積在50μm～1mm并優(yōu)選橫截面積為150～500μm者以便使神經(jīng)功能單位穿過(guò)隧道生長(zhǎng)，即神經(jīng)束。對(duì)其他機(jī)體組織結(jié)構(gòu)而言，每條導(dǎo)引隧道的橫截面積可根據(jù)經(jīng)其間生長(zhǎng)的相應(yīng)功能單位(的粗細(xì))來(lái)選擇。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，凝膠結(jié)構(gòu)由瓊脂、水凝膠如甲基纖維素凝膠、白蛋白或其他可制在民凝膠的蛋白質(zhì)、多糖如脫乙酰殼多糖或hyaluronan如透明質(zhì)酸、可制成凝膠的磷酯、Matrigel或BiomatrixⅠ制成的。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，根據(jù)其第一與第二方面、機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條在套裝損傷區(qū)域中沿預(yù)定方向延伸的導(dǎo)線或纖維。該機(jī)械導(dǎo)引裝置可以是單線、多線或是編織/非編織(woven)纖維。
每一導(dǎo)線或纖維優(yōu)選由生物相容性材料同時(shí)可生物降解的材料制成。但每一導(dǎo)線或纖維亦可由非生物降解材料制成。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)第一與第二方面，每一導(dǎo)線或纖維由下列材料制面多糖如脫乙酰殼多糖、肝素、肝素類似物或hyaluronan如透明質(zhì)酸。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，根據(jù)第一與第二方面，每一導(dǎo)線或纖維可由含有聚合物或共聚物的材料制成，例如，每一導(dǎo)線或纖維可由乳乳糖、聚羥基丁酸、聚乙醇酸，選擇性滲透的聚四乙烯、聚-N-乙酰葡糖胺、或共聚物如聚羥基丁酸與羥基戊酸的共聚物制成。
在本發(fā)明的另一實(shí)施方案中，根據(jù)其第一與第二方面，每一導(dǎo)線或纖維由膠原或其他蛋白復(fù)合物制成。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)第一與第二方面，機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條由vicryl、腸線、聚酰胺、幾丁質(zhì)或尼龍制成的縫合線。
如要使用非生物降解的導(dǎo)線時(shí)則(聚)硅氧烷將較為適宜。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，生長(zhǎng)因子或生長(zhǎng)因子混合物有可能被加入套裝損傷區(qū)域中。例如，生長(zhǎng)因子可被包埋于套裝結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面。
生長(zhǎng)因子可包括胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ、胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ、血小板來(lái)源的生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、表此生長(zhǎng)因子(EGF)或膠質(zhì)(細(xì)胞)生長(zhǎng)因子。生長(zhǎng)因子還可能包括可表達(dá)生長(zhǎng)因子的雪旺氏細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或炎癥細(xì)胞或遺傳變異細(xì)胞。
根據(jù)發(fā)明的第四方面，此處提供了依據(jù)發(fā)明第一方面，或在人或動(dòng)物體器官化組織結(jié)構(gòu)的損傷區(qū)域中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿預(yù)定方向再生的一套體系的使用。
根據(jù)發(fā)明的第五方面，此處提供了依據(jù)發(fā)明第三方面，在人或動(dòng)物體器官化組織結(jié)構(gòu)的損傷區(qū)域中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿預(yù)定方向再生的一種植入性設(shè)備的使用。
可利用本發(fā)明促進(jìn)受損區(qū)域組織再生的器官化組織結(jié)構(gòu)如神經(jīng)、腱、韌帶、關(guān)節(jié)囊、軟骨、骨、腱膜及骨骼肌。
由此，本發(fā)明提供了抑制或控制損傷組織中纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成(的方法)，同時(shí)提出了機(jī)械導(dǎo)引裝置以使那些自損傷區(qū)域表面出現(xiàn)的細(xì)胞沿機(jī)械導(dǎo)引裝置所提供的路徑生長(zhǎng)。這一發(fā)明的優(yōu)越性在于，由于提供了細(xì)胞生長(zhǎng)的粘合途徑，則細(xì)胞生長(zhǎng)不再顯示任意分支的或不規(guī)則的路徑。因此，這就有可能成功地使器官特異性細(xì)胞如周圍神經(jīng)的雪旺氏細(xì)胞或肌腱的腱細(xì)胞在所形成的器官化組織結(jié)構(gòu)中以最少的分支及最小限度的不規(guī)則性來(lái)橋接外傷所造成的缺損。
為闡明本發(fā)明，這里描述了由Gothenburg大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)授權(quán)的O 293/93、O 69/95、O 70/95(文件)所批準(zhǔn)、對(duì)成年大鼠所施行的實(shí)驗(yàn)，并附以圖例

圖1為一側(cè)面剖面圖、顯示一根被橫斷的成年大鼠的坐骨神經(jīng)的近端與遠(yuǎn)端分別被縫合于導(dǎo)引管腔相對(duì)的兩端，其間導(dǎo)線沿圖示方向延伸，并顯示在缺乏纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑的情況下管腔近、遠(yuǎn)兩端間所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
圖2顯示依圖1所示導(dǎo)管與導(dǎo)線整體裝置的側(cè)面剖面圖，一根被橫斷的成年大鼠的坐骨神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端如圖所示被縫合于近腔的相對(duì)兩端，并顯示在加入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑后所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
圖3顯示依圖1所示導(dǎo)管的側(cè)面剖面圖，如圖所示僅有橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端被縫合于管腔中，并顯示在缺乏纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑的情況下所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
圖4顯示依圖1所示導(dǎo)管的側(cè)面剖面圖，如圖所示僅有橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端被縫合于管腔中，并顯示在加入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑后所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
圖5顯示依圖1所示導(dǎo)管與導(dǎo)線整體裝置的側(cè)面剖面圖，如圖所示僅有橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端被縫合于管腔中，并顯示在缺乏纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑的情況下所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
圖6顯示依圖1所示導(dǎo)管與導(dǎo)線整體裝置的側(cè)面剖面圖，如圖所示僅有橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端被縫合于管腔中，并顯示在加入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑的情況下所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
圖7為一導(dǎo)管的側(cè)面剖面圖，顯示該導(dǎo)管包括一連續(xù)的外層管部分及一由縱向分隔區(qū)域所構(gòu)成的內(nèi)層管部分，如圖所示，上述導(dǎo)管管腔的一端與橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端互相縫合，并且該管腔中有導(dǎo)線延伸，同時(shí)顯示了經(jīng)一植入的滲透性微型泵局部注入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑后所形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。
圖8顯示一導(dǎo)管的側(cè)面剖面圖，一根被橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近、遠(yuǎn)端被縫合于該導(dǎo)管相對(duì)的兩個(gè)開放末端中，并且其管腔內(nèi)被縱向延伸的導(dǎo)引隧道所提供的凝膠所填充。
根據(jù)圖1與圖2，此處顯示一根被橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端1與遠(yuǎn)端3被插入一根(聚)硅氧烷導(dǎo)管5的相對(duì)的開放末端，并被固定于縫合口7處。
導(dǎo)管5通過(guò)將受損神經(jīng)經(jīng)結(jié)構(gòu)由周圍組織(通常是含有血管的結(jié)締組織)中隔離出來(lái)以阻止或抑制肉芽組織向損傷區(qū)域及表面長(zhǎng)入。這將便于調(diào)控在受損坐骨神經(jīng)的斷端間所進(jìn)行的組織再生的修復(fù)與模式形成。顯而易見地，導(dǎo)管5可進(jìn)一步充當(dāng)那些參與損傷區(qū)域纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成的化合物的釋放體系，同時(shí)亦可充當(dāng)生長(zhǎng)刺激劑的緩慢釋放體系。
圖1與圖2顯示受損神經(jīng)在導(dǎo)管5中僅延伸了一段很短的距離，而近、遠(yuǎn)端1、3均可被導(dǎo)管5覆蓋更長(zhǎng)的距離。這一距離可一直延伸到當(dāng)神經(jīng)束在其遠(yuǎn)端長(zhǎng)出一分支從而阻止進(jìn)一步安裝套裝結(jié)構(gòu)時(shí)。
一根由眼科縫合材料所制的導(dǎo)線11在導(dǎo)管5的管腔中，受損坐骨神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端1、3間延伸。當(dāng)然，亦可代之以一組導(dǎo)線。當(dāng)行外科手術(shù)插入導(dǎo)線11時(shí)，導(dǎo)線的一段突出于導(dǎo)管5之外。這一節(jié)段將在外科修復(fù)過(guò)程完成后被切除。
圖1中受損的坐骨神經(jīng)被置于鹽水中再生，該鹽水是由手術(shù)時(shí)向?qū)Ч?中導(dǎo)入的。幾天后的結(jié)果是，在坐骨神經(jīng)近、遠(yuǎn)兩端1、3間的裂隙之間沿導(dǎo)線11形成了由分支的神經(jīng)絲所構(gòu)成的龐大而復(fù)雜的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。并由此繼續(xù)神經(jīng)組織的再生。
如同圖1的裝置，圖2裝置中的導(dǎo)管5亦可在手術(shù)時(shí)充入鹽水。但同時(shí)還通過(guò)一植入的微型泵(圖中未顯示)向損傷區(qū)域皮下系統(tǒng)性注入melagatran如圖示，在橫斷的神經(jīng)末端之間的裂隙間以導(dǎo)線11為中心形成了一個(gè)較細(xì)小的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)14。更為重要的是，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)14顯示了一個(gè)沿導(dǎo)線11方向由纖維蛋白、血小板及碎片所聚集而成的粘合結(jié)構(gòu)，由此繼續(xù)神經(jīng)組織的再生。
圖3、圖4顯示了一根與圖1、2所示的導(dǎo)管5相一致的(聚)硅氧烷導(dǎo)管105。然而在此裝置中，僅有被橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端101被置于管105中并固定于縫合口107處。管腔中無(wú)導(dǎo)線延伸。因此導(dǎo)管的開放末端之一102端仍保持開放。同前，于手術(shù)中向管105的管腔中導(dǎo)入鹽水。
圖3裝置中未提供進(jìn)一步的治療。僅有一個(gè)由纖維蛋白、血小板及其他血細(xì)胞形成的小凝塊115覆蓋于近端外，而管內(nèi)其他部分無(wú)纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成。因此無(wú)大量的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成以支持其后的神經(jīng)組織再生。
相反，在圖4裝置中尚通過(guò)一植入的微型泵向損傷區(qū)域皮下系統(tǒng)性地注入melagatran。僅有一個(gè)由纖維蛋白與細(xì)胞形成的小凝塊116覆蓋于神經(jīng)近端。管內(nèi)其他部位無(wú)纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成。因此無(wú)大量的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)形成以支持其后的神經(jīng)組織再生。
根據(jù)圖5、6，此處顯示了一根與圖1、2所示導(dǎo)管5相一致的(聚)硅氧烷導(dǎo)管205。與圖3、4相似，被橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)以近端210被置于管205中并固定于縫合口207處，手術(shù)時(shí)向管腔內(nèi)注入鹽水。然而與圖3、4所不同的是，一根由眼科縫線所制成的導(dǎo)線211自近端201向管腔內(nèi)延伸。
圖5所示情況中未引入進(jìn)一步的治療，則在導(dǎo)管203中沿導(dǎo)線211由不規(guī)則生長(zhǎng)的纖維蛋白絲、血小板及其他血細(xì)胞形成細(xì)小的復(fù)合凝塊217，并由此繼續(xù)神經(jīng)組織的再生。
另一方面，在圖6所示實(shí)施方案中，經(jīng)一植入的微型泵向損傷部位的皮下系統(tǒng)性注入melagatran。在導(dǎo)管的中央沿導(dǎo)線211由相互粘著聚集的纖維蛋白、血小板、纖維蛋白碎片與細(xì)胞形成一個(gè)小的凝塊218，并由此繼續(xù)神經(jīng)組織的再生。
圖7顯示一根末端開放的導(dǎo)管305，包括一個(gè)連續(xù)的外層管部分306與一個(gè)由眾多縱向間隔區(qū)域310組成的內(nèi)層管部分308。如圖所示，一根被橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近端301被插入上述導(dǎo)管中并固定于縫合口307。一根由眼科縫線制成的導(dǎo)線311自近端向管腔內(nèi)延伸。
于手術(shù)時(shí)向管內(nèi)注入鹽水，隨后經(jīng)一植入的滲透性微型泵312向套裝受損區(qū)域局部注入melagatran。縱向分隔區(qū)域310則有助于將melagatran遍布管腔。在管腔的中央相互粘著的纖維蛋白、血小板、纖維蛋白碎片與細(xì)胞沿導(dǎo)線311聚集而形成較細(xì)小的粘著凝塊319，并由此繼續(xù)神經(jīng)組織的再生。
圖7所示導(dǎo)管的結(jié)構(gòu)可被改變?yōu)槊恳环指舻挠煽v向區(qū)域均同時(shí)提供有一條或多條導(dǎo)線。這一導(dǎo)管與導(dǎo)線的集合裝置實(shí)質(zhì)上則由類似結(jié)構(gòu)的更小的獨(dú)立集合裝置組成。由于縱向區(qū)域可分別對(duì)每一根神經(jīng)來(lái)進(jìn)行導(dǎo)引，因此這將便于將再生的神經(jīng)束相互隔離。
現(xiàn)在看圖8，此處顯示一根被橫斷的成年大鼠坐骨神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端401、403被分別插入一根末端開放的導(dǎo)管405相對(duì)的兩端，并被固定于縫合口407處。此例中導(dǎo)管405的管腔中充滿瓊脂凝膠402，并且經(jīng)其內(nèi)部有多條軸向?qū)б淼?04延伸。盡管無(wú)需說(shuō)明該凝膠結(jié)構(gòu)并不嚴(yán)格要求與神經(jīng)末端表面毗鄰，為清晰起見圖示凝膠結(jié)構(gòu)402仍與橫斷神經(jīng)結(jié)構(gòu)的末端表面隔有一段距離。這一裝置的結(jié)果是在導(dǎo)引隧道內(nèi)形成粘著的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，長(zhǎng)的纖維蛋白絲或索沿軸向與導(dǎo)引隧道聯(lián)結(jié)并由此繼續(xù)神經(jīng)組織的再生。
與上述附加圖例所描述的相同的體系在經(jīng)過(guò)對(duì)形狀及大小的修改后，亦可被試用年大鼠的肌腱、韌帶、腹部腱膜與骨骼肌，可取得相應(yīng)的結(jié)果。
在上述附圖所述裝置中之所以使用(聚)硅氧烷導(dǎo)管以及用眼科縫線作為導(dǎo)線僅僅因?yàn)樗鼈冞m用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
導(dǎo)管可由生物相容性、可重生物吸收或非生物重吸收的材料制成，該材料對(duì)水溶液中的可溶性物質(zhì)可為滲透性或非滲透性。然而使用可生物重吸收或可生物降解的材料為優(yōu)選?？赡苡糜跇?gòu)建導(dǎo)管的材料包括-但并不限于-膠原復(fù)合物、肝素及肝素類似物、聚氨基葡糖及有關(guān)的多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、聚羥基丁酸，選擇性滲透的聚四乙烯、聚-N-乙酰葡糖胺，或可直接加入生長(zhǎng)因子的聚合物(如乙酰乙酸乙烯酯)。
至于導(dǎo)絲纖維，可由與導(dǎo)管所用材料相似或相同的生物相容性材料制成。其他可應(yīng)用的材料包括目前適用的縫線材料，如vicryl、腸線、尼龍、幾丁質(zhì)，以及其他可充當(dāng)神經(jīng)軸突等再生組織索生成的相容性基質(zhì)的材料。
下面將進(jìn)一步但較為簡(jiǎn)要地以成年大鼠為例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行闡述，實(shí)驗(yàn)在前文已鑒明并且相互參照的倫理許可下進(jìn)行，使用的是根據(jù)前文附圖所述的裝置。實(shí)施例1成年大鼠的坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于大腿中段并被切斷。隨后其近、遠(yuǎn)兩端被插入附圖1所示的(聚)硅氧烷導(dǎo)管中，兩端之間留有10mm的裂隙并充入磷酸鹽緩沖液(PBS)。(聚)硅氧炕管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)束膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
2-4周后檢測(cè)裂隙間形成的再生組織，以免疫組化方法顯示軸實(shí)與雪旺氏細(xì)胞的分布與生長(zhǎng)方向。軸突相當(dāng)稀少并顯示廣泛的生長(zhǎng)路徑異常，經(jīng)常排成環(huán)狀。雪旺氏細(xì)胞以明顯的不規(guī)則格式排列于再生組織的中央部分。成纖維細(xì)胞形成一種閉合的神經(jīng)束膜樣的結(jié)構(gòu)。裂隙部位布滿大量巨噬細(xì)胞并散在紅細(xì)胞。
由于缺乏橋接神經(jīng)末端之間裂隙的機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)如覆蓋于導(dǎo)線外的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，神經(jīng)的再生因而受阻。
由此形成缺陷修復(fù)的神經(jīng)。實(shí)施例2成年大鼠的坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于大腿中段并被切斷。隨后其近、遠(yuǎn)兩端被插入(聚)硅氧烷導(dǎo)管中，兩端之間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)束膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
在上文圖1所示的裝置中，裂隙中充滿磷酸鹽緩沖液(PBS)，管腔中置有單根中央導(dǎo)線(10-0單線尼龍)以連接神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端。
2-4周后檢測(cè)裂隙間形成的再生組織，以免疫組化方法顯示軸實(shí)與雪旺氏細(xì)胞的分布與生長(zhǎng)方向。軸突數(shù)量較例1似有輕度增加，但仍顯示廣泛的生長(zhǎng)路徑異常，且仍經(jīng)常排列成環(huán)狀。雪旺氏細(xì)胞以明顯的不規(guī)則格式排列于再生組織的中央部分。成纖維細(xì)胞形成一種閉合的神經(jīng)束膜樣的結(jié)構(gòu)。裂隙部位布滿大量巨噬細(xì)胞并散在紅細(xì)胞。
由于神經(jīng)組織的再生沿修復(fù)過(guò)程早期所形成的復(fù)雜纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所輔設(shè)的路徑進(jìn)行，因此形成了缺陷修復(fù)的神經(jīng)。實(shí)施例3成年大鼠的坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于大腿中段并被切斷。隨后其近、遠(yuǎn)兩端被插入內(nèi)徑1.5mm的(聚)硅氧烷導(dǎo)管中均達(dá)2mm，兩端之間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)囊膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
如上文圖2所示實(shí)驗(yàn)，單根中央導(dǎo)線(10-0單線尼龍)被置于管腔中以連接神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端，向裂隙中充入PBS，并在滲透性微型泵的輔助下通過(guò)腹膜向裂隙內(nèi)系統(tǒng)性注入Melagatran(Alza 2001，容量=220μL；泵液速度=1μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑Melagatran的溶液，Astra Hassle AB,MolndalSweden)，該泵已植入腹膜腔達(dá)1周且泵的出口游離于腹膜腔中。
2-4周后檢測(cè)裂隙間形成的再生組織，以免疫組化方法顯示軸實(shí)與雪旺氏細(xì)胞的分布與生長(zhǎng)方向。軸突數(shù)量至少與實(shí)施例1、實(shí)施例2相同，并顯示生長(zhǎng)路徑極少異常，其排列平行于中央導(dǎo)線，即顯示調(diào)試一致性。雪旺氏細(xì)胞多數(shù)平行于中央導(dǎo)線排列，幾乎沒有細(xì)胞偏離方向，故亦顯示高度一致性。罕見雪旺氏細(xì)胞的不規(guī)則組織格式。成纖維細(xì)胞形成一種閉合的神經(jīng)束膜樣的結(jié)構(gòu)。另有一明顯的特征是再生組織外無(wú)巨噬細(xì)胞與血細(xì)胞。
由于神經(jīng)組織的再生沿修復(fù)過(guò)程早期所形成的連續(xù)粘著的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所鋪設(shè)的路徑進(jìn)行，因此在10mm的裂隙間形成了良好再生。實(shí)施例4成年大鼠的坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于大腿中段并被切斷。隨后其近、遠(yuǎn)兩端被插入(聚)硅氧烷導(dǎo)管中均達(dá)2mm，兩端之間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)囊膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
如實(shí)施例3所示，單根中央導(dǎo)線(10-0單線尼龍)被置于管腔中以連接神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端，向裂隙中充入PBS并注入melagatran。但在本實(shí)施例中，通過(guò)植入動(dòng)物背部皮下的一個(gè)滲透性微型泵的管道(Alza2001，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto，CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑Melagatran的溶液，Astra HassleAB,Molndal Sweden)，以圖7所示的方式在至少8天內(nèi)向裂隙局部注入melagatran溶液。
2-4周后檢測(cè)裂隙間形成的再生組織，以免疫組化方法顯示軸實(shí)與雪旺氏細(xì)胞的分布與生長(zhǎng)方向。軸突數(shù)量至少與實(shí)施例1至實(shí)施例3相同，并顯示生長(zhǎng)路徑極少異常，其排列平行于中央導(dǎo)線，即顯示高度一致性。雪旺氏細(xì)胞多數(shù)平行于中央導(dǎo)線排列，幾乎沒有細(xì)胞偏離方向，沒有雪旺氏細(xì)胞的不規(guī)則組織格式。成纖維細(xì)胞形成一個(gè)閉合的神經(jīng)束膜樣的結(jié)構(gòu)。再生組織外無(wú)巨噬細(xì)胞與血細(xì)胞。
由此在10mm裂隙間再次形成了連續(xù)軸突的良好再生。實(shí)施例5與上文圖3所示裝置相同，成年大鼠的坐骨神經(jīng)被橫斷，其近端插入充滿PBS的(聚)硅氧烷導(dǎo)管。
2-4周后神經(jīng)近端無(wú)再生組織形成。神經(jīng)近端附近可見巨噬細(xì)胞與血細(xì)胞。
由于缺乏延自神經(jīng)近端的機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)如覆蓋于導(dǎo)線上的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，神經(jīng)再生因而受阻。實(shí)施例6與上文圖4所描述的實(shí)驗(yàn)相同，成年大鼠的坐骨神經(jīng)被橫斷，其近端被插入充滿PBS的(聚)硅氧烷導(dǎo)管中，并在一植入的的滲透性微型泵的輔助下向管中系統(tǒng)性注入melagatran。
但與實(shí)施例5相同，2-4周后神經(jīng)近端無(wú)再生組織形成。神經(jīng)近端可見巨噬細(xì)胞與血細(xì)胞。
由于缺乏延自神經(jīng)近端的機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)如覆蓋于導(dǎo)線上的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，神經(jīng)再生因而受阻。實(shí)施例7坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于成年大鼠大腿中段并被橫斷。隨后緊接著將神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端插入如圖1至6所示并預(yù)先充滿緩沖鹽水的(聚)硅氧烷管中均達(dá)2mm。神經(jīng)末端之間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)束膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。一個(gè)滲透性微型泵(Alza 2002，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑Melagatran的溶液，Astra Hassle AB,Molndal Sweden)被植于動(dòng)物背部皮下，泵的出口通過(guò)一管道與包繞有橫切神經(jīng)的(聚)硅氧烷管的中段相連接，并依圖7所示向裂隙內(nèi)局部注入Melagatran。
2-4周后檢測(cè)神經(jīng)、導(dǎo)管及裂隙，以輔以神經(jīng)絲抗體(N0142與N5389,Sigma)及神經(jīng)膠質(zhì)蛋白S-100抗體(S2644,Sigma；Z0311,Dakopatts)的免疫組化方法顯示軸突。與雪旺氏細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性。無(wú)再生組織橋接該裂隙。無(wú)軸突及雪旺氏細(xì)胞穿過(guò)裂隙生長(zhǎng)，裂隙間液體內(nèi)可見散在無(wú)定形的蛋白鏈與細(xì)胞。
由于缺乏橋接神經(jīng)末端之間裂隙的機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)如覆蓋于導(dǎo)線外的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，神經(jīng)再生因而受阻。實(shí)施例8坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于成年大鼠大腿中段并被橫斷。隨后緊接著將神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端插入如圖1至6所示并預(yù)先充滿緩沖鹽水的(聚)硅氧烷管中均達(dá)2mm。但(聚)硅氧烷管中央沒有導(dǎo)線如縫線。神經(jīng)末端間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)束膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。一個(gè)滲透性微型泵(Alza2002，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑Melagatran的溶液，Astra HassleAB,Molndal Sweden)被植于腹膜腔內(nèi)，其出口開放并通過(guò)腹膜腔與血循環(huán)系統(tǒng)性注入Melagatran。
2-4周后檢測(cè)神經(jīng)、導(dǎo)管及裂隙，以輔以神經(jīng)絲抗體(N0142與N5389,Sigma)及神經(jīng)膠質(zhì)蛋白S-100抗體(S2644,Sigma；Z0311,Dakopatts)的免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性。無(wú)再生組織橋接該裂隙。無(wú)軸突及雪旺氏細(xì)胞穿過(guò)裂隙生長(zhǎng)，裂隙間液體內(nèi)可見散在無(wú)定形的蛋白鏈與細(xì)胞。
由于缺乏橋接神經(jīng)末端之間裂隙的機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)如覆蓋有纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的導(dǎo)線，神經(jīng)再生因而受阻。實(shí)施例9成年大鼠的坐骨神經(jīng)被橫斷，其近端插入一(聚)硅氧烷導(dǎo)管內(nèi)達(dá)2mm。與上文圖5所描述實(shí)驗(yàn)相同，經(jīng)坐骨神經(jīng)的近端縫入單根中央導(dǎo)線(10-0單線尼龍)并延伸入管腔，在一個(gè)植入的滲透性微型泵的幫助下向管腔內(nèi)注入PBS。橫斷的坐骨神經(jīng)的遠(yuǎn)端被置于大腿肌肉間以使其不參與(聚)硅氧烷管內(nèi)的生長(zhǎng)。
2-4周后檢測(cè)裂隙中的再生情況，以免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布及生長(zhǎng)方向。軸突粘著于中央導(dǎo)線上且多數(shù)顯示與其平行。然而，軸突的生長(zhǎng)路徑的顯示廣泛異常，通常形成環(huán)狀。雪旺氏細(xì)胞在很大程度上平行于中央導(dǎo)線排列但亦有很多細(xì)胞偏離該方向。成纖維細(xì)胞形成一個(gè)閉合的神經(jīng)束膜結(jié)構(gòu)。再生組織外存在大量巨噬細(xì)胞與血細(xì)胞。
由于神經(jīng)組織的再生沿修復(fù)過(guò)程早期所形成的復(fù)雜纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所鋪設(shè)的路徑進(jìn)行，因此形成了缺陷修復(fù)的神經(jīng)。實(shí)施例10成年大鼠的坐骨神經(jīng)被橫斷，其近端插入一(聚)硅氧烷導(dǎo)管內(nèi)達(dá)2mm。與上文圖6所描述實(shí)驗(yàn)相同，經(jīng)坐骨神經(jīng)的近端縫入單根中央導(dǎo)線(10-0單線尼龍)并延伸入管腔，腔內(nèi)充滿PBS。隨后在一植入的滲透性微型泵的幫助下系統(tǒng)性注入Melagatran。橫斷的坐骨神經(jīng)的遠(yuǎn)端被置于大腿肌肉間以使其不參與(聚)硅氧烷管內(nèi)的生長(zhǎng)。
2-4周后檢測(cè)裂隙中的再生情況，以免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布及生長(zhǎng)方向。軸突平行于中央導(dǎo)線排列，幾無(wú)偏離方向者。不存在軸突生長(zhǎng)路徑異常，亦罕見環(huán)狀形成。雪旺氏細(xì)胞在很大程度上平行于中央導(dǎo)線排列。成纖維細(xì)胞形成一個(gè)閉合的神經(jīng)束膜結(jié)構(gòu)。再生組織外罕見巨噬細(xì)胞與血細(xì)胞。
由于神經(jīng)組織的再生沿修復(fù)過(guò)程早期所形成的連續(xù)粘著的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所鋪設(shè)的路徑進(jìn)行，因此形成了連續(xù)軸突的良好再生。實(shí)施例11成年大鼠的坐骨神經(jīng)被橫斷，其近端插入一根采用圖7所示導(dǎo)管形式的(聚)硅氧烷導(dǎo)管。與上文圖7所描述實(shí)驗(yàn)相同，經(jīng)坐骨神經(jīng)的近端縫入單根中央導(dǎo)線(10-0單線尼龍)并延伸入管腔，管腔內(nèi)充滿PBS，隨后在一植入的滲透性微型泵的幫助下局部注入melagatran。橫斷的坐骨神經(jīng)的遠(yuǎn)端被置于大腿肌肉間并遠(yuǎn)離(聚)硅氧烷管，因此將不參與再生。
2-4周后檢測(cè)裂隙中的再生情況，以免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布及生長(zhǎng)方向。軸突平行于中央導(dǎo)線排列，除緊靠神經(jīng)近端處外極少有偏離方向者。除少數(shù)位于神經(jīng)近端的軸突外不存在軸突生長(zhǎng)路徑異常，亦罕見環(huán)狀形成。雪旺氏細(xì)胞大都平行于中央導(dǎo)線排列。成纖維細(xì)胞形成一個(gè)閉合的神經(jīng)束膜樣結(jié)構(gòu)。再生組織外罕見巨噬細(xì)胞與血細(xì)胞。
由于神經(jīng)組織的再生沿修復(fù)過(guò)程早期所形成的連續(xù)粘著的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)所鋪設(shè)的路徑進(jìn)行，因此形成了連續(xù)軸突的良好再生。實(shí)施例12本實(shí)施例所采用的裝置除了是在微型泵的幫助下局部注入鏈激酶(Hoeschl)外，其他與實(shí)施例11相同。
我們獲得了類似于實(shí)施例11的結(jié)果。但需每周期第二天換一次滲透性微型泵以保證在8天的周期內(nèi)有足夠的鏈激酶活性。實(shí)施例13本實(shí)施例所采用的裝置除了是在微型泵的幫助下局部注入重組的人組織纖溶酶原激活的Actilyse(Boehringer Lngalheim)以外，其他與實(shí)施例11相同。
同樣獲得了與上述實(shí)施例11相似的結(jié)果。實(shí)施例14本實(shí)施例所采用的裝置除了是在微型泵的幫助下局部注入尿激酶外，其他與實(shí)施例11相同。
我們獲得了與上述實(shí)施例11相似的結(jié)果。實(shí)施例15坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于成年大鼠大腿中段并被橫斷。與實(shí)施例3相同，將神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端插入一根預(yù)先充滿緩沖鹽水的(聚)硅氧烷管中達(dá)2mm，管內(nèi)中央穿過(guò)一根導(dǎo)線如縫線。神經(jīng)末端間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入神經(jīng)的神經(jīng)束膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
然而在本實(shí)施例中，一個(gè)滲透性微型泵(Alza 2002，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑水蛭素的溶液，(Sigma))被植于動(dòng)物背部皮下，泵的出口通過(guò)一管道與包繞有橫斷神經(jīng)的(聚)硅氧烷管的中段相接，并依圖7所示的方式向裂隙局部注入水蛭素。
2-4周后檢測(cè)裂隙中的再生情況，以免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向與一致性。大量軸突顯示高度一致性，僅少數(shù)生長(zhǎng)路徑異常，極少見排列成環(huán)狀。再生組織中央部分可見雪旺氏細(xì)胞，亦顯示高度一致性。成纖維細(xì)胞形成一個(gè)閉合的神經(jīng)束膜樣結(jié)構(gòu)。裂隙區(qū)域極少見巨噬細(xì)胞。
由此在10mm的裂隙形成了連續(xù)軸突的良好再生。實(shí)施例16坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于成年大鼠大腿中段并被橫斷。與實(shí)施例7相同，將神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端插入一根預(yù)先充滿緩沖鹽水的(聚)硅氧烷管達(dá)2mm，但無(wú)導(dǎo)線如縫線置于(聚)硅氧烷管的中央。神經(jīng)末端間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入神經(jīng)的神經(jīng)束膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
與實(shí)施例7不同的是，一個(gè)滲透性微型泵(Alza 2002，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑水蛭素的溶液，(Sigma))被植于動(dòng)物背部皮下，泵的出口通過(guò)一管道與包繞有橫斷神經(jīng)的(聚)硅氧烷管的中段相連接，并依圖7所示向裂隙局部注液。
2-4周后檢測(cè)神經(jīng)、導(dǎo)管及裂隙，以神經(jīng)絲抗體(N0142與N5389,Sigma)與神經(jīng)膠質(zhì)蛋白S-100抗體(S2644,Sigma；Z0311,Dakopatts)輔助的免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性。無(wú)再生組織橋接于裂隙間。無(wú)軸突或雪旺氏細(xì)胞穿越裂隙。裂隙間液體內(nèi)可見散在的無(wú)定形蛋白鏈與細(xì)胞。
由于缺乏導(dǎo)引結(jié)構(gòu)如覆蓋有纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的導(dǎo)線，神經(jīng)再生因而受阻。實(shí)施例17坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于成年大鼠大腿中段并被橫斷。與實(shí)施例16相同，將神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端插入一根預(yù)先充滿緩沖鹽水的(聚)硅氧烷管達(dá)2mm，但無(wú)導(dǎo)線如縫線置于(聚)硅氧烷管的中央。神經(jīng)末端間留有10mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與插入神經(jīng)的神經(jīng)束膜用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
與實(shí)施例16不同的是，一個(gè)滲透性微型泵(Alza 2002，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑水蛭素的溶液，(Sigma))被植于腹膜腔內(nèi)，泵的出口開放并通過(guò)腹膜腔及血循環(huán)系統(tǒng)性注入水蛭素。
2-4周后檢測(cè)神經(jīng)、導(dǎo)管及裂隙，以神經(jīng)絲抗體(N0142與N5389,Sigma)與神經(jīng)膠質(zhì)蛋白S-100抗體(S2644,Sigma；Z0311,Dakopatts)輔助的免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性。無(wú)再生組織橋接于裂隙間。無(wú)軸突或雪旺氏細(xì)胞穿越裂隙。裂隙間的液體內(nèi)可見散在無(wú)定形的蛋白鏈與細(xì)胞。
由于缺乏機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)如覆蓋有纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的導(dǎo)線，神經(jīng)再生因而受阻。實(shí)施例18在本實(shí)施例中將成年大鼠的跟腱橫斷，并將其近、遠(yuǎn)兩端插入一根采用圖1至6所示形式的(聚)硅氧烷管內(nèi)達(dá)1mm。一根中央導(dǎo)線(10-0單線尼龍)經(jīng)管腔內(nèi)延伸以連接跟腱近、遠(yuǎn)兩斷端。隨后在一個(gè)滲透性微型泵的幫助下系統(tǒng)性注入PBS或melagatran。
3周后發(fā)現(xiàn)在用melagatran治療的管內(nèi)比用PBS治療的管內(nèi)出現(xiàn)了更多平行分布的成纖維細(xì)胞以及規(guī)則一致程度更高的膠原纖維。實(shí)施例19成年大鼠的跟腱被單側(cè)暴露且其一部分被橫斷。與實(shí)施例3相同，被橫斷及隔離開的腱的近、遠(yuǎn)兩端被插入一根預(yù)先充滿緩沖鹽水的(聚)硅氧烷管內(nèi)達(dá)2mm，管中央穿過(guò)一根導(dǎo)線如縫線。腱兩端間留有4-6mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與腱旁組織用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。一個(gè)滲透性微型泵(Alza 2002，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑Melagatran的溶液，Astra Hassle)被植于動(dòng)物背部皮下，泵的出口通過(guò)一管道與包繞有橫斷跟腱的(聚)硅氧烷導(dǎo)管中部相連接，如圖7所示向裂隙內(nèi)局部注入Mealgatran。
2-4周后檢測(cè)(聚)硅氧烷管內(nèi)有關(guān)膠原纖維與細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性的再生情況。裂隙內(nèi)充滿顯示高度一致性的膠原纖維。罕見不規(guī)則組成的膠原結(jié)構(gòu)。常見成纖維細(xì)胞與血管壁細(xì)胞而少見巨噬細(xì)胞與炎癥細(xì)胞?？梢婋炫越M織樣結(jié)構(gòu)。
由此形成了腱的良好再生。實(shí)施例20成年大鼠的跟腱被單側(cè)暴露且其一部分被橫斷。與實(shí)施例7相同，被橫斷及隔離開的腱的近、遠(yuǎn)兩端被插入一根預(yù)先充滿緩沖鹽水的(聚)硅氧烷管內(nèi)達(dá)2mm，但(聚)硅氧烷管中央未插入導(dǎo)線如縫線。腱兩端間留有4-6mm的裂隙。(聚)硅氧烷管與腱旁組織間用9-0“無(wú)創(chuàng)性”眼科縫線縫合(Ethicon)。
一個(gè)滲透性微型泵(Alza 2002，容量=220μL；泵液速度=0.5μL/h；Alza Corp.；Palo Alto,CA,USA；預(yù)充有凝血酶抑制劑Melagatran的溶液，(Astra Hassle))被植于動(dòng)物背部皮下，泵的出口通過(guò)一管道與包繞有橫斷跟腱的(聚)硅氧烷導(dǎo)管中部相連接，并向裂隙內(nèi)局部注入Mealgatran。
2-4周后檢測(cè)(聚)硅氧烷管內(nèi)有關(guān)膠原纖維與細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性的再生情況。大小與方向高度變化的不規(guī)則組織的膠原絲將裂隙不完全充填。缺乏良好的一致性。不規(guī)則組成的膠原結(jié)構(gòu)占主要地位。常見成纖維細(xì)胞與血管壁細(xì)胞而少見巨噬細(xì)胞與炎癥細(xì)胞。
由此形成了缺陷修復(fù)的跟腱。實(shí)施例21坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于成年大鼠的大腿中段并被橫斷。神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端分別插入一根如圖1至6所示形式為10mm長(zhǎng)(內(nèi)徑1.8mm)的(聚)硅氧烷管內(nèi)達(dá)2mm，管腔內(nèi)兩神經(jīng)末端間留有6mm的裂隙并預(yù)先充入均質(zhì)的1％瓊脂凝膠。(聚)硅氧烷管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)外膜間用10-0“無(wú)創(chuàng)性”單線Ethilone縫線結(jié)合(Ethicon)。
2-4周后檢測(cè)神經(jīng)、導(dǎo)管及裂隙，以神經(jīng)絲抗體(N0142與N5389,Sigma)與神經(jīng)膠質(zhì)蛋白S-100抗體(S 2644,Sigma；Z0311,Dakopatts)輔助的免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性。
填充于兩神經(jīng)末端間缺乏隧道的裂隙與凝膠內(nèi)的組織由細(xì)胞與纖維絲環(huán)狀排列的高度不規(guī)則的結(jié)締組織構(gòu)成。雪旺氏細(xì)胞不規(guī)則地聚集。無(wú)明顯的軸突(微絲或)微束存在。軸突顯示廣泛的生長(zhǎng)路徑異常并形成部分神經(jīng)瘤樣結(jié)構(gòu)。不規(guī)則組織的軸突并可見于(聚)硅氧烷管內(nèi)表面與瓊脂凝膠之間。
4周后在4只動(dòng)物中，于15mm的距離中發(fā)現(xiàn)1只實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性，其他3只為陰性。
由于缺乏機(jī)械導(dǎo)引結(jié)構(gòu)，神經(jīng)再生因而受阻。實(shí)施例22坐骨神經(jīng)被單側(cè)暴露于成年大鼠的大腿中段并被橫斷。神經(jīng)的近、遠(yuǎn)兩端分別插入一根10mm長(zhǎng)(內(nèi)徑1.8mm)的(聚)硅氧烷管內(nèi)達(dá)2mm，管腔內(nèi)兩神經(jīng)末端間留有6mm的裂隙并預(yù)先充入1％的瓊脂凝膠。管中具有3或5條經(jīng)膠凝過(guò)程中暫時(shí)插入絲線所形成的標(biāo)稱直徑為0.4mm的縱行隧道，例如象圖8所示。(聚)硅氧烷管與插入的神經(jīng)末端的神經(jīng)外膜間用10-0“無(wú)創(chuàng)性”單線Ethilone縫線結(jié)合(Ethicon)。
2-4周后檢測(cè)神經(jīng)、導(dǎo)管及裂隙，以神經(jīng)絲抗體(N0142與N5389,Sigma)與神經(jīng)膠質(zhì)蛋白S-100抗體(S 2644,Sigma；Z0311,Dakopatts)輔助的免疫組化方法顯示軸突與雪旺氏細(xì)胞的分布、生長(zhǎng)方向及一致性。
隨時(shí)間推延，在神經(jīng)末端與凝膠及凝膠與外圍的(聚)硅氧烷管之間的界面處被以規(guī)則方式重建與重構(gòu)的組織所充填。1周后顯微鏡觀察顯示纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)正向每一隧道的近端及遠(yuǎn)端開口處聚集。
掃描電子顯微鏡證實(shí)了富含血小板、沿隧道延伸并向隧道開口處聚集的粘著連續(xù)、軸向集給的纖維蛋白-細(xì)胞-網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的存在。在兩周而最明顯地是在4周后，可于神經(jīng)末端與凝膠間的中界處以及由肉芽組織和其血管定界的隧道中發(fā)現(xiàn)軸突與雪旺氏細(xì)胞。細(xì)胞順纖維蛋白鏈與血小板構(gòu)建的路徑進(jìn)入裂隙帶。僅在凝膠隧道內(nèi)及瓊脂與外圍(聚)硅氧烷管之間的界面發(fā)現(xiàn)極少的炎癥細(xì)胞反應(yīng)。
沿中介隧道自神經(jīng)近端向遠(yuǎn)端延伸以橋接導(dǎo)管裂隙的神經(jīng)組織被排列成微束狀，主要由覆以薄層神經(jīng)束膜的軸突及雪旺氏細(xì)胞組成。軸突與雪旺氏細(xì)胞沿隧道被排列成明顯的條束狀以橋接兩神經(jīng)末端。另外，在裂隙區(qū)域相當(dāng)一致性的細(xì)胞束中也可發(fā)現(xiàn)不規(guī)則定向的雪旺氏細(xì)胞。每條隧道內(nèi)的軸突數(shù)量按2到4周、至少為3周的順序增長(zhǎng)。包繞微束的神經(jīng)周結(jié)締組織較充有PBS的導(dǎo)管中的所觀察到的再生組織(如實(shí)施例1所示)為少。
尚可見軸突沿凝膠與導(dǎo)管間的界面生長(zhǎng)。這些軸突絕大多數(shù)定向不規(guī)則，缺乏在凝膠隧道中軸突的那種高度一致性。
軸突在5條隧道體系中即便在進(jìn)入遠(yuǎn)端神經(jīng)時(shí)仍顯示良好的一致性。
4周后在比當(dāng)初向管腔內(nèi)兩神經(jīng)末端間的裂隙中加入均質(zhì)瓊脂凝膠更遠(yuǎn)的距離內(nèi)實(shí)驗(yàn)呈陽(yáng)性結(jié)果，并且5條隧道體系所獲陽(yáng)性結(jié)果的距離較3條隧道體系更長(zhǎng)。不僅如此，與實(shí)施例21所示的均質(zhì)凝膠裝置及實(shí)施例1所示裝置相比，幾近兩倍數(shù)量的軸突以兩倍左右的速度生長(zhǎng)延伸。
由此形成了沿裂隙的良好再生。
在套裝的膜部腱與大腿骨骼肌的再生實(shí)驗(yàn)中同樣獲得了與上述應(yīng)用melagatran及鏈激酶的實(shí)驗(yàn)相似的結(jié)果，亦即與皮下注入PBS相比，在治療中使用melagatran及鏈激酶將在再生組織中獲得更好的結(jié)構(gòu)秩序。進(jìn)言之，與之相應(yīng)的采用inogatran、肝素、重組的人組織纖溶酶原激活劑Actilyse及尿激素酶的實(shí)驗(yàn)在機(jī)體組織結(jié)構(gòu)損傷區(qū)域的修復(fù)與再生中均取得了類似的進(jìn)展。
因此可見，套裝結(jié)構(gòu)(如舉例中的導(dǎo)管)與機(jī)械導(dǎo)引裝置(如舉例中的中央導(dǎo)線)在組織中的應(yīng)用，加之輔以纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑(纖溶劑和/或凝血酶抑制劑)，較之迄今所知體系而言在損傷結(jié)構(gòu)的再生中取得了一大進(jìn)展。在被套裝結(jié)構(gòu)套住的損傷區(qū)域內(nèi)引入含有導(dǎo)引隧道的凝膠則帶來(lái)又一進(jìn)展。
根據(jù)本發(fā)明，可被用作纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑的載體基質(zhì)的材料包括任何可將該抑制劑插入或?qū)胩籽b受損區(qū)域的材料或體系，如任何可懸浮、溶解或釋放該制劑的生長(zhǎng)相容性物質(zhì)。如此的載體基質(zhì)可包括(但不限于)膠原、甲基纖維素凝膠、聚氨基葡糖及其他多糖、纖維蛋白或其他蛋白質(zhì)、細(xì)胞外基質(zhì)材料如MatrigelTM(CollaborativeResearch,Inc.,Waltham,MA,USA),BiomatrixTM(BiomedicalTechnologies,Inc.,Stoughton,MA)或其他有關(guān)材料。該載體亦可包括鹽水、水或如上例所述的緩沖鹽溶液，這些液體應(yīng)可經(jīng)由一連續(xù)排放體系如一個(gè)滲透性微型泵或與設(shè)備相連的外部進(jìn)入的導(dǎo)管注入套裝受損區(qū)域。纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑也應(yīng)可被包埋于套裝結(jié)構(gòu)中。
本發(fā)明同時(shí)可用于將生長(zhǎng)刺激劑置入或注入套裝受損區(qū)域。這些試劑包括可直接或間接刺激生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)性的、趨化性的、促有絲分裂的或類似物質(zhì)的合成物或混合物。最優(yōu)選包括胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ、胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ、血小板衍生的生長(zhǎng)因子、白介素、細(xì)胞因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α、表皮生長(zhǎng)因子、腦衍生的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、EGF與膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子。治療劑還可包括可被注入套裝受損區(qū)域的細(xì)胞整體或部分。這包括雪旺氏細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、炎癥細(xì)胞或遺傳變異細(xì)胞或其混合物。
例如，生長(zhǎng)刺激劑可被加入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑所在的載體基質(zhì)或其自身的載體中，如可釋放生長(zhǎng)刺激劑的遺傳變異或未變異細(xì)胞可被作為向套裝受損結(jié)構(gòu)注入生長(zhǎng)刺激劑的釋放體系。生長(zhǎng)刺激劑還可被包埋于套裝結(jié)構(gòu)中以緩慢釋放。
權(quán)利要求
1．一種在人或動(dòng)物活體內(nèi)某一器官化組織結(jié)構(gòu)中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿一預(yù)定方向向其內(nèi)部再生的體系，包括一個(gè)被植入人或動(dòng)物活體內(nèi)以套住損傷區(qū)域的套狀結(jié)構(gòu)，在應(yīng)用中被置于套狀受損區(qū)域以便沿預(yù)定方式延伸的為組織再生所提供的機(jī)械導(dǎo)引裝置，以及一種可施用于套裝受損區(qū)域受損表面的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑。
2．權(quán)利要求1的體系，其特征在于，纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包含凝血酶抑制劑。
3．權(quán)利要求1的體系，其特征在于，凝血酶抑制劑是以低分子量肽為基礎(chǔ)的凝血酶抑制劑。
4．權(quán)利要求3的體系，其特征在于，凝血酶抑制劑為gatran。
5．權(quán)利要求4的體系，其特征在于，凝血酶抑制劑是melagatran或ino gatran。
6．權(quán)利要求2的體系，其特征是凝血酶抑制劑為一種二硫酸化多糖或寡糖如硫酸軟骨素、硫酸葡聚糖、硫酸角質(zhì)素、硫酸皮膚素、硫酸肝素或肝素。
7．權(quán)利要求2的體系，其特征是凝血酶抑制劑為一種水蛭素、水蛭素的生物合成類似物、水蛭素的一個(gè)片段如含有水蛭素或蛋白NAPc2已知序列中至少最未8個(gè)C-末端氨基酸的片段。
8．權(quán)利要求1的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種纖溶劑。
9．權(quán)利要求8的體系，其特征是纖溶劑為血纖溶酶原激活劑(tPA)、鏈激酶或尿激酶。
10．權(quán)利要求8的體系，其特征是纖溶劑為一種重組的人血纖溶酶原激活劑(hrtPA)如Actilyse。
11．權(quán)利要求1的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種因子X抑制劑。
12．權(quán)利要求1的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種胰蛋白酶抑制劑。
13．權(quán)利要求1的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種蛋白酶抑制劑。
14．權(quán)利要求1至13的任一項(xiàng)的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被固定于面對(duì)損傷區(qū)域的套裝結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面。
15．權(quán)利要求1至13的任一項(xiàng)的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑以溶液形式存在，并且該體系進(jìn)一步包括一個(gè)泵以便將纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑注入套裝的損傷區(qū)域。
16．權(quán)利要求15的體系，其特征是該泵為一種滲透性微型泵。
17．權(quán)利要求15或16的體系，其特征是該泵被植入人或動(dòng)物活體的皮下。
18．權(quán)利要求1至13的任一項(xiàng)的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被混合于一種基質(zhì)材料中以便向套裝受損區(qū)域中放置或運(yùn)送。
19．權(quán)利要求18的體系，其特征是該基質(zhì)材料由含有多糖的物質(zhì)形成，如幾丁質(zhì)、hyaluronan如透明質(zhì)酸、瓊脂凝膠、水凝膠如甲基纖維素凝膠、Matrigel、Biomatrix Ⅰ、水、鹽水、磷酸鹽緩沖液、脂或蛋白質(zhì)如膠原。
20．權(quán)利要求1的體系，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被用于系統(tǒng)性地或局部地向套裝損傷區(qū)域內(nèi)施用。
21．上述任一權(quán)利要求的體系，其特征是套裝結(jié)構(gòu)為覆蓋器官性組織結(jié)構(gòu)的受壓損傷區(qū)域或類似區(qū)域的膜片。
22．權(quán)利要求1至20任一項(xiàng)的體系，其特征是套裝結(jié)構(gòu)為一根一端開放抵達(dá)損傷表面的管狀物，其管腔中放置有機(jī)械導(dǎo)引裝置并沿預(yù)定方向延伸。
23．權(quán)利要求22的體系，其特征是該管狀物包括一連續(xù)的外層管部分以及一個(gè)由多個(gè)縱向分隔區(qū)域組成的內(nèi)層管部分。
24．權(quán)利要求22或23的體系，其特征是上述損傷區(qū)域的受損表面為第一受損表面，而該管狀物的開放端為第一開放端，該管狀物并有一第二開放端抵達(dá)損傷區(qū)域的第二受損表面，采用機(jī)械導(dǎo)引裝置在管腔的第一與第二開放端之間沿預(yù)定方向延伸。
25．權(quán)利要求24的體系，其特征是該體系被用于促進(jìn)被切割或橫斷的器官化組織結(jié)構(gòu)如神經(jīng)、腱、骨骼肌或韌帶的游離端裂隙的組織再生并且管狀物的開放末端分別抵達(dá)被切割或橫斷的游離末端。
26．上述任一權(quán)利要求的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)采用可生物相容性材料。
27．上述任一權(quán)利要求的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)采用可生物降解的材料。
28．權(quán)利要求1至26任一項(xiàng)的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)采用非生物降解性材料。
29．權(quán)利要求1至25任一項(xiàng)的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)由多糖構(gòu)成。
30．權(quán)利要求29的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)由包括脫乙酰殼多糖、肝素、肝素類似物或hyaluronan如透明質(zhì)酸的材料構(gòu)成。
31．權(quán)利要求1至25任一項(xiàng)的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)由包括膠原或其他蛋白復(fù)合物的材料構(gòu)成。
32．權(quán)利要求1至25任一項(xiàng)的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)由包括聚合物或共聚物的材料構(gòu)成。
33．權(quán)利要求32的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)由下列物質(zhì)構(gòu)成，包括聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乙醇酸，選擇性滲透聚四乙烯、聚葡糖醛酸或聚-N-乙酰葡糖胺或其共聚物。
34．權(quán)利要求32的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)由包括聚羥基丁酸及羥基戊酸的共聚物的材料構(gòu)成。
35．權(quán)利要求28的體系，其特征是該套裝結(jié)構(gòu)由(聚)硅氧烷或乙酰乙酸己烯酯構(gòu)成。
36．上述任一權(quán)利要求的體系，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置由面對(duì)損傷區(qū)域的套裝結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面所支持或提供。
37．權(quán)利要求36的體系，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置與套裝結(jié)構(gòu)被作為一個(gè)可植入體整體形成。
38．上述任一權(quán)利要求的體系，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置在套裝損傷區(qū)域中以導(dǎo)引隧道形式存在。
39．權(quán)利要求38的體系，從屬于權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)權(quán)利要求，其特征是在植入套裝結(jié)構(gòu)時(shí)使用一具有橫向螺旋的橫斷面的管狀結(jié)構(gòu)，可收卷起平面膜等方法形成，而由螺旋纏繞部分所形成的沿縱向延伸的空間即形成導(dǎo)引隧道。
40．權(quán)利要求38的體系，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置采用含有一條或多條導(dǎo)引隧道的凝膠結(jié)構(gòu)的形式，該凝膠結(jié)構(gòu)被置于套裝受損區(qū)域中以便導(dǎo)引隧道沿預(yù)定方向延伸。
41．權(quán)利要求38、39或40的體系，其特征是該體系用于促進(jìn)神經(jīng)組織的再生生長(zhǎng)，而每一導(dǎo)引隧道的橫截面大小為50μm～1mm。
42．權(quán)利要求42的體系，其特征是導(dǎo)引隧道或每一導(dǎo)引隧道的橫截面大小為150～500μm。
43．權(quán)利要求40的體系，其特征是凝膠結(jié)構(gòu)由下列物質(zhì)構(gòu)成瓊脂、水凝膠如甲基纖維素凝膠、白蛋白或其他可制成凝膠的蛋白質(zhì)、多糖如脫乙酰殼多糖或hyaluronan如透明質(zhì)酸、可制成凝膠的磷脂、Matrigel、Biomatrix Ⅰ。
44．權(quán)利要求1至37任一項(xiàng)的體系，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條在套裝損傷區(qū)域中沿預(yù)定方向延伸的導(dǎo)線或纖維。
45．權(quán)利要求44的體系，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條單線、多線或紡織/無(wú)紡纖維。
46．權(quán)利要求44或45的體系，其特征是所述導(dǎo)絲或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由生物相容性材料制成。
47．權(quán)利要求44、45或46的體系，其特征是所述導(dǎo)絲或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由可生物降解的材料制成。
48．權(quán)利要求44、45或46的體系，其特征是所述導(dǎo)絲或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由非生物降解的材料制成。
49．權(quán)利要求44或45的體系，其特征是每條所述導(dǎo)絲或纖維或?qū)Ь€或纖維由含有多糖的材料制成。
50．權(quán)利要求49的體系，其特征是所述導(dǎo)絲或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由包括脫乙酰殼多糖、肝素、肝素類似物或hyaluronan如透明質(zhì)酸的材料制成。
51．權(quán)利要求44或45的體系，其特征是所述導(dǎo)絲或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由包括聚合物或共聚物的材料制成。
52．權(quán)利要求51的體系，其特征是所述導(dǎo)絲或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乙醇酸，選擇性滲透的聚四乙烯、聚-N-乙酰葡糖胺，或共聚物如聚羥基丁酸與羥基戊酸的共聚物制成。
53．權(quán)利要求44或45的體系，其特征是所述導(dǎo)絲或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由膠原或其他蛋白復(fù)合物制成。
54．權(quán)利要求44的體系，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條縫線。
55．權(quán)利要求54的體系，其特征是所述縫線或每條縫線由vicryl、腸線、聚酰胺、脫乙酰殼多糖或尼龍制成。
56．權(quán)利要求48的體系，其特征是所述縫線或每條導(dǎo)線或纖維由(聚)硅氧烷制成。
57．上述任一權(quán)利要求的體系，其特征是該體系進(jìn)一步包括一種施用于套裝損傷區(qū)域的生長(zhǎng)因子或生長(zhǎng)因子混合物。
58．權(quán)利要求57的體系，其特征是該生長(zhǎng)因子被固定于套裝結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面。
59．權(quán)利要求57或58的體系，其特征是該生長(zhǎng)因子包括胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ、胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ、血小板來(lái)源的生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、EGF或膠質(zhì)(細(xì)胞)生長(zhǎng)因子。
60．權(quán)利要求59的體系，其特征是該生長(zhǎng)因子包括可表達(dá)生長(zhǎng)因子的雪旺氏細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或炎癥細(xì)胞或遺傳變異細(xì)胞。
61．權(quán)利要求1的體系，其特征是該體系用于促進(jìn)神經(jīng)、腱、韌帶、關(guān)節(jié)囊、軟骨、骨、腱膜或骨骼肌內(nèi)損傷區(qū)域中組織的再生生長(zhǎng)。
62．一種在人或動(dòng)物活體內(nèi)器官化組織結(jié)構(gòu)中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿一預(yù)定方向向其內(nèi)部再生的設(shè)備，包括一個(gè)當(dāng)該設(shè)備被植入人或動(dòng)物活體內(nèi)時(shí)可套住損傷區(qū)域的外部套裝結(jié)構(gòu)，以及一個(gè)為組織再生提供有一條或多條導(dǎo)引隧道的內(nèi)部凝膠結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)在植入上述設(shè)備時(shí)被置于套裝損傷區(qū)域內(nèi)以便導(dǎo)引隧道沿預(yù)定方向延伸。
63．權(quán)利要求62的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)為覆蓋器官化組織結(jié)構(gòu)的受壓損傷區(qū)域或類似區(qū)域的膜片。
64．權(quán)利要求62的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)為一根一端開放并抵達(dá)損傷表面的管狀物，其管腔中所述導(dǎo)引隧道或每條導(dǎo)引隧道沿預(yù)定方向延伸。
65．權(quán)利要求64的設(shè)備，其特征是上述損傷區(qū)域的受損表面為第一受損表面，而該管狀物的開放端為第一開放端，該管狀物并有一第二開放端抵達(dá)損傷區(qū)域的第二受損表面，每一導(dǎo)引隧道在管腔的第一與第二開放端之間沿預(yù)定方向延伸。
66．權(quán)利要求65的設(shè)備，其特征是該設(shè)備被用于促進(jìn)被切割或橫斷的機(jī)體組織結(jié)構(gòu)如神經(jīng)、腱、骨骼肌或韌帶的游離裂隙間的組織再生，管狀物的開放末端分別抵達(dá)被切割或橫斷的游離末端。
67．權(quán)利要求62至66的任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)采用生物相容性材料。
68．權(quán)利要求62至67的任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)采用可生物降解的材料。
69．權(quán)利要求62至67的任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)采用非生物降解性材料。
70．權(quán)利要求62至66任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包含多糖的材料構(gòu)成。
71．權(quán)利要求70的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括脫乙酰殼多糖、肝素、肝素類似物或hyaluronan如透明質(zhì)酸的材料制成。
72．權(quán)利要求62至66任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括膠原或其他蛋白復(fù)合物的材料構(gòu)成。
73．權(quán)利要求62至66任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括聚合物或共聚物的材料構(gòu)成。
74．權(quán)利要求73的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由下列材料構(gòu)成，包括聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乙醇酸，選擇性滲透的聚四乙烯、聚葡糖醛酸或聚-N-乙酰葡糖胺或其共聚物。
75．權(quán)利要求73的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括聚羥基丁酸及羥基戊酸的共聚物的材料構(gòu)成。
76．權(quán)利要求69的設(shè)備，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由(聚)硅氧烷或乙酰乙酸乙烯酯構(gòu)成。
77．權(quán)利要求62至76的任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是該設(shè)備被用于促進(jìn)神經(jīng)組織的再生生長(zhǎng)，而所述導(dǎo)引隧道或每一導(dǎo)引隧道的橫截面為50μm～1mm。
78．權(quán)利要求77的設(shè)備，其特征是所述導(dǎo)引隧道或每一條導(dǎo)引隧道的橫截面大小為150～500μm。
79．權(quán)利要求62至78的任一項(xiàng)的設(shè)備，其特征是凝膠結(jié)構(gòu)由瓊脂、水凝膠如甲基纖維素凝膠、白蛋白或其他可制成凝膠的蛋白質(zhì)、多糖如脫乙酰殼多糖或hyaluronan如透明質(zhì)酸、可制成凝膠的磷脂、Matrigel、Biomatrix Ⅰ構(gòu)成。
80．權(quán)利要求1至61任一項(xiàng)的體系的應(yīng)用，用于在人或動(dòng)物活體器官化組織結(jié)構(gòu)的損傷區(qū)域中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿預(yù)定方向再生生長(zhǎng)。
81．權(quán)利要求62至79任一項(xiàng)的可植入設(shè)備的應(yīng)用，用于在人或動(dòng)物活體器官化組織結(jié)構(gòu)的損傷區(qū)域中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿預(yù)定方向再生。
82．一種在人或動(dòng)物器官化組織結(jié)構(gòu)的損傷區(qū)域中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿預(yù)定方向再生的方法，包括以下步驟用一套裝結(jié)構(gòu)套住損傷區(qū)域，在套裝受損區(qū)域內(nèi)提供組織再生的機(jī)械導(dǎo)引裝置并使機(jī)械導(dǎo)引裝置沿預(yù)定方向延伸，向套裝受損區(qū)域內(nèi)注入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑。
83．權(quán)利要求82的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種凝血酶抑制劑。
84．權(quán)利要求83的方法，其特征是該凝血酶抑制劑為一低分子量基于肽的凝血酶抑制劑。
85．權(quán)利要求84的方法，其特征是該凝血酶抑制劑為一種gatran。
86．權(quán)利要求85的方法，其特征是該凝血酶抑制劑為melagatran或inogatran。
87．權(quán)利要求83的方法，其特征是該凝血酶抑制劑為一種二硫酸化的多糖或寡糖如硫酸軟骨素、硫酸葡聚糖、硫酸皮膚素、硫酸角質(zhì)素、硫酸肝素或肝素。
98．權(quán)利要求83的方法，其特征是該凝血酶抑制劑為一種水蛭素、水蛭素的生物合成類似物、水蛭素的一個(gè)片段如含有水蛭素或蛋白NAPc2已知序列中至少最未8個(gè)C-末端氨基酸的片段。
89．權(quán)利要求82的方法，其特征是該纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種纖溶劑。
90．權(quán)利要求89的方法，其特征是該纖溶劑為血纖溶酶原激活劑(tPA)，鏈激酶或尿激酶。
91．權(quán)利要求89的方法，其特征是該纖溶劑為一種重組的人血纖溶酶原激活劑(hrtPA)如Actilyse。
92．權(quán)利要求82的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種因子X抑制劑。
93．權(quán)利要求82的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生長(zhǎng)抑制劑包括一種胰蛋白酶抑制劑。
94．權(quán)利要求82的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑包括一種蛋白酶抑制劑。
95．權(quán)利要求82至94任一項(xiàng)的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被固定于面對(duì)損傷區(qū)域的套裝結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面。
96．權(quán)利要求82至94任一項(xiàng)的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑以溶液形式存在，而該方法進(jìn)一步包括提供泵以向套裝受損區(qū)域施用纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑的步驟。
97．權(quán)利要求96的方法，其特征是該泵為一滲透性微型泵。
98．權(quán)利要求96或97的方法，其特征是該泵被皮下植入人或動(dòng)物活體。
99．權(quán)利要求82至94的任一項(xiàng)的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被混合于一種基質(zhì)材料中以便向套裝受損區(qū)域中放置或運(yùn)送。
100．權(quán)利要求99的方法，其特征是該基質(zhì)材料由含有下述材料組成的，包括多糖如脫乙酰殼多糖或hyaluronan如透明質(zhì)酸、瓊脂凝膠、水凝膠如甲基纖維素凝膠、Matrigel、Biomatrix Ⅰ、水、鹽水、磷酸鹽緩沖液、脂或蛋白質(zhì)如膠原。
101．權(quán)利要求82的方法，其特征是纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑被用于系統(tǒng)性或局部地向套裝損傷區(qū)域內(nèi)施用。
102．權(quán)利要求82至101任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)為覆蓋器官化組織結(jié)構(gòu)受壓損傷區(qū)域或類似區(qū)域的膜片。
103．權(quán)利要求82至101任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)為一根一端開放并抵達(dá)損傷表面的管狀物，其管腔中放置有機(jī)械導(dǎo)引裝置并沿預(yù)定方法延伸。
104．權(quán)利要求103的方法，其特征是該管狀物包括一連續(xù)的外層管部分以及一個(gè)由多數(shù)縱向部隔區(qū)域組成的內(nèi)層管部分。
105．權(quán)利要求103或104的方法，其特征是上述損傷區(qū)域的受損表面為第一受損表面，而該管狀物的開放端為第一開放端，該管狀物并有一第二開放端抵達(dá)損傷區(qū)域的第二受損表面，其中機(jī)械導(dǎo)引裝置在管腔的第一與第二開放端之間沿預(yù)定方向延伸。
106．權(quán)利要求105的方法，其特征是該方法被用于促進(jìn)被切割或橫斷的器官化組織結(jié)構(gòu)如神經(jīng)、腱、骨骼肌或韌帶的游離端裂隙間的組織再生，管狀物的開放末端分別抵達(dá)被切割或橫斷的游離末端。
107．權(quán)利要求82至106任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)采用生物相容性材料。
108．權(quán)利要求82至107任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)采用可生物降解的材料。
109．權(quán)利要求82至107任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)采用非生物降解性材料。
110．權(quán)利要求82至106任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由含有多糖的材料構(gòu)成。
111．權(quán)利要求110的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括脫乙酰殼多糖、肝素、肝素類似物或hyaluronan如透明質(zhì)酸的材料構(gòu)成。
112．權(quán)利要求82至106任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括膠原或其他蛋白復(fù)合物的材料構(gòu)成。
113．權(quán)利要求82至106任一項(xiàng)的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括聚合物或共聚物的材料構(gòu)成。
114．權(quán)利要求113的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乙醇酸，選擇性滲透的聚四乙烯、聚葡糖醛酸或聚-N-乙酰葡糖胺或其共聚物的材料構(gòu)成。
115．權(quán)利要求113的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由包括聚羥基丁酸及羥基戊酸的共聚物的材料構(gòu)成。
116．權(quán)利要求109的方法，其特征是套裝結(jié)構(gòu)由(聚)硅氧烷或乙酰乙酸乙烯酯構(gòu)成。
117．權(quán)利要求82至116的方法，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置由面對(duì)損傷區(qū)域的套裝結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面所支持或提供。
118．權(quán)利要求117的方法，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置與套裝結(jié)構(gòu)被整體形成。
119．權(quán)利要求82至118任一項(xiàng)的方法，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置在套裝損傷區(qū)域中以導(dǎo)引隧道形式存在。
120．權(quán)利要求119的方法，從屬于權(quán)利要求82至101中任一項(xiàng)權(quán)利要求，其特征是套裝結(jié)構(gòu)為一具有橫向螺旋的橫斷面的管狀結(jié)構(gòu)，該橫斷面可由卷起平面膜等方法形成，而由螺旋纏繞部分所形成的沿縱向延伸的空間即形成導(dǎo)引隧道。
121．權(quán)利要求119的方法，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置采用含有一條或多條導(dǎo)引隧道的凝膠結(jié)構(gòu)的形式，并被置于套裝受損區(qū)域中以便導(dǎo)引隧道沿預(yù)定方向延伸。
122．權(quán)利要求119、120或121的方法，其特征是該方法用于促進(jìn)神經(jīng)組織的再生生長(zhǎng)，而每一導(dǎo)引隧道的橫截面大小為50μm～1mm。
123．權(quán)利要求122的方法，其特征是每一導(dǎo)引隧道的橫截面大小為150～500μm。
124．權(quán)利要求121的方法，其特征是凝膠結(jié)構(gòu)由瓊脂、水凝膠如甲基纖維素凝膠、白蛋白或其他可制成凝膠的蛋白質(zhì)、多糖如脫乙酰殼多糖或hyaluronan如透明質(zhì)酸、可制成凝膠的脂、Matrigel、BiomatrixⅠ構(gòu)成。
125．權(quán)利要求82至118的方法，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條在套裝損傷區(qū)域中沿預(yù)定方向延伸的導(dǎo)線或纖維。
126．權(quán)利要求125的方法，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條單線、多線或紡織/無(wú)紡纖維。
127．權(quán)利要求125或126的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維采用生物相容性材料。
128．權(quán)利要求125、126或127的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由可生物降解的材料制成。
129．權(quán)利要求125、126或127的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由非生物降解性材料制成。
130．權(quán)利要求125或126的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由多糖制成。
131．權(quán)利要求130的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由脫乙酰殼多糖、肝素、肝素類似物或hyaluronan如透明質(zhì)酸的材料構(gòu)成。
132．權(quán)利要求125或126的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由聚合物或共聚物制成。
133．權(quán)利要求132的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由聚乳酸、聚羥基丁酸、聚乙醇酸，選擇性滲透的聚四乙烯、聚-N-乙酰葡糖胺或其共聚物例如聚羥基丁酸與羥基戊酸的共聚物制成。
134．權(quán)利要求125或126的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由膠原或其他蛋白復(fù)合物制成。
135．權(quán)利要求125或126的方法，其特征是機(jī)械導(dǎo)引裝置包括一條或多條縫線。
136．權(quán)利要求135的方法，其特征是每條縫線由vicryl、腸線、聚酰胺、幾丁質(zhì)或尼龍制成。
137．權(quán)利要求129的方法，其特征是所述導(dǎo)線或纖維或每條導(dǎo)線或纖維由包括(聚)硅氧烷的材料制成。
138．權(quán)利要求82至137的任一方法，其特征是該方法還包括進(jìn)一步向套裝損傷區(qū)域施用生長(zhǎng)因子的步驟。
139．權(quán)利要求138的方法，其特征是該生長(zhǎng)因子被固定于套裝結(jié)構(gòu)的內(nèi)表面。
140．權(quán)利要求138或139的方法，其特征是該生長(zhǎng)因子包括胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅰ、胰島素樣生長(zhǎng)因子Ⅱ、血小板衍生的生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、EGF或膠質(zhì)(細(xì)胞)生長(zhǎng)因子。
141．權(quán)利要求138或139的方法，其特征是該生長(zhǎng)因子包括可表達(dá)生長(zhǎng)因子的雪旺氏細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或炎癥細(xì)胞或遺傳變異細(xì)胞。
142．權(quán)利要求82的方法，其特征是該方法用于促進(jìn)神經(jīng)、腱、韌帶、關(guān)節(jié)囊、軟骨、骨、腱膜或骨骼肌內(nèi)損傷區(qū)域中組織的再生生長(zhǎng)。
全文摘要
(本發(fā)明介紹了)在人或動(dòng)物活體內(nèi)某一器官化組織結(jié)構(gòu)中促進(jìn)組織自損傷區(qū)域表面沿一預(yù)定方向向其內(nèi)部再生的體系、方法及設(shè)備。用一套裝結(jié)構(gòu)(5)將損傷區(qū)域套住以阻止肉芽組織長(zhǎng)入其中,同時(shí)在套內(nèi)的損傷區(qū)域中置入機(jī)械導(dǎo)引裝置(11)以引導(dǎo)組織沿預(yù)定方向再生。一方面向套中損傷區(qū)域的表面加入纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)生成抑制劑。另一方面機(jī)械導(dǎo)引裝置采用含有一條或多條導(dǎo)引隧道的凝膠結(jié)構(gòu)的方式以便引導(dǎo)再生組織沿預(yù)定方向生長(zhǎng)。
文檔編號(hào)A61P25/00GK1219965SQ9719505
公開日1999年6月16日 申請(qǐng)日期1997年4月1日 優(yōu)先權(quán)日1996年3月29日
發(fā)明者漢斯－阿恩·漢森 申請(qǐng)人:漢斯－阿恩·漢森