專利名稱：甲狀旁腺素的類似物的制作方法
相關(guān)申請的交叉參考本申請J 1997年1月7日提交的待審定美國申請08/779,768的相應(yīng)申請。
背景技術(shù)：
甲狀旁腺素(“PTH”)是由甲狀旁腺產(chǎn)生的多肽，激素的成熟循環(huán)形式由84個氨基酸殘基組成，通過其N末端的肽片段(如氨基酸殘基1至34)可重新產(chǎn)生PTH的生物學(xué)作用。甲狀旁腺素相關(guān)蛋白(“PTHrP”)是N末端與PTH有同源性的139至173個氨基酸的蛋白質(zhì)。PTHrP與PTH共享很多生物學(xué)作用，包括與共用的PTH/PTHrP受體結(jié)合，Tregear等，內(nèi)分泌學(xué)，931349(1983)。已鑒定出很多不同來源的PTH肽，所述來源如人，牛，大鼠，雞，Nissenson等，受體，3193(1993)。
PTH已顯示出可改善骨的質(zhì)和量，Dempster等，內(nèi)分泌評述，14690(1993)和Riggs，美國醫(yī)學(xué)雜志，91(增刊5B)37S(1991)。在同時接受或不接受抗吸收療法的骨質(zhì)疏松男女患者中觀察到周期性服用PTH的合成代謝作用，Slovik等，骨礦物學(xué)研究雜志，1377(1986)；Reeve等，英國醫(yī)學(xué)雜志，301314(1990)；和Hesch，R-D等，Calcif Tissue Int’l，44176(1989)。
發(fā)明簡述一方面，本發(fā)明的特征在于具有下式的肽或其藥物可接受的鹽
A16-A17-A18-A19-Arg-A21-A22-A23-A24-Arg-Lys-A27-A28-A29-A30-A31-A32-A33-A34-R3，其中A1是Ser，Ala，或Dap；A3是Ser，Thr，或Aib；A5是Leu，Nle，Ile，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe或p-X-Phe，其中X是OH，鹵素，或CH3；A7是Leu，Nle，Ile，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe，或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A8是Met，Nva，Leu，Val，Ile，Cha，Acc，或Nle；A11是Leu，Nle，Ile，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A12是Gly，Acc，或Aib；A15是Leu，Nle，Ile，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe，或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A16是Ser，Asn，Ala，或Aib；A17是Ser，Thr，或Aib；A18是Met，Nva，Leu，Val，Ile，Nle，Acc，Cha，或Aib；A19是Glu或Aib；A21是Val，Acc，Cha，或Met；A22是Acc或Glu；A23是Trp，Acc，或Cha；A24是Leu，Acc，或Cha；A27是Lys，Aib，Leu，hArg，Gln，Acc，或Cha；A28是Leu，Acc，或Cha；A29是Glu，Acc，或Aib；A30是Asp或Lys；A31是Val，Leu，Nle，Acc，Cha，或缺失；A32是His或缺失；A33是Asn或缺失；A34是Phe，Tyr，Amp，Aib，或缺失；
R1和R2分別獨立地為H，C1-12烷基，C2-12鏈烯基，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；或R1和R2中的一個和僅有一個是COE1，其中E1是C1-12烷基，C2-12鏈烯基，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；和R3是OH，NH2，C1-12烷氧基，或NH-Y-CH2-Z，其中Y是C1-12烴部分，Z是H，OH，CO2H或CONH2；條件是A5，A7，A8，A11，A12，A15，A18，A21，A22，A23，A24，A27，A28，A29，和A31中的至少一個是Acc。
下列是由上式覆蓋的本發(fā)明肽或其藥物可接受的鹽的例子[Ahc7，11]hPTH(1-34)NH2；[Ahc7，11，Nle8，18，Tyr34]hPTH(1-34)NH2；[Ahc11]hPTH(1-34)NH2；[Ahc7，11，15]hPTH(1-34)NH2；[Ahc7]hPTH(1-34)NH2；[Ahc23]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24]hPTH(1-34)NH2；[Nle8，18，Ahc27]hPTH(1-34)NH2；[Ahc28]hPTH(1-34)NH2；[Ahc31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，28，31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，28，31，Lys30]hPTH(1-34)NH2；[Ahc28，31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc15]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27，Aib29，Lys30]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27，Aib29，Lys30，Leu31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc5]hPTH(1-34)NH2；[Ahc12]hPTH(1-34)NH2；[Ahc27]hPTH(1-34)NH2；[Ahc29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc18]hPTH(1-34)NH2；[Ahc8]hPTH(1-34)NH2；[Ahc18，27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc18，24，27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ach]22hPTH(1-34)NH2；或[Ahc22，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc22，Leu27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，Leu27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；
另一方面，本發(fā)明的特征在于具有下式的肽或其藥物可接受的鹽
A16-A17-A18-A19-Arg-Arg-A22-A23-A24-A25-A26-A27-A28-A29-A30-A31-A32-A33-A34-R3其中A1是ALa，Ser，或Dap；A3是Ser或Aib；A5是His，Ile，Acc，或Cha；A7是Leu，Cha，Nle，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe，或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A8是Leu，Met，Acc，或Cha；A10是Asp或Asn；A11是Lys，Leu，Cha，Acc，Phe，或β-Nal；A12是Gly，Acc，或Aib；A14是Ser或His；A15是Ile，Acc，或Cha；A16是Gln或Aib；A17是Asp或Aib；A18是Leu，Aib，Acc，或Cha；A19是Arg或Aib；A22是Phe，Glu，Aib，Acc，或Cha；A23是Phe，Leu，Lys，Acc，或Cha；A24是Leu，Lys，Acc，或Cha；A25是His，Lys，Aib，Acc，或Glu；A26是His，Aib，Acc，或Lys；A27是Leu，Lys，Acc，或Cha；A28是Ile，Leu，Lys，Acc，或Cha；A29是Ala，Glu，Acc，或Aib；A30是Glu，Leu，Nle，Cha，Aib，Acc，或Lys；A31是Ile，Leu，Cha，Lys，Acc，或缺失；A32是His或缺失；A33是Thr或缺失；A34是Ala或缺失；
R1和R2分別獨立地為H，C1-12鏈烷烴基(alkanyl)，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；或R1和R2中的一個和僅有一個是COE1，其中E1是C1-12烷基，C2-12烷基，C2-12鏈烯基，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；和R3是OH，NH2，C1-12烷氧基，或NH-Y-CH2-Z，其中Y是C1-12烴部分，Z是H，OH，CO2H或CONH2；條件是A5，A7，A8，A11，A12，A15，A18，A22，A23，A24，A25，A26，A27，A28，A29，A30，或A31中的至少一個是Acc。
下列是由上式覆蓋的本發(fā)明肽或其藥物可接受的鹽的例子[Glu22，25，Leu23，28，Lys26，30，Aib29，Ahc31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Ahc23，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，31，Lys26，Ahc30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Ahc24，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，29，Leu23，28，31，Aib25，Lys26，30，Ahc27]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Aib25，29，Lys26，30，Ahc27]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，31，Lys26，30，Ahc28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Ahc23，Glu25，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，27，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Ahc24，27，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，27，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc18，24，27，Glu22，Cha23，Lys25，26，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Ahc24，Lyc25，26，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Ahc27，Aib29，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Ser1，Ile5，Cha7，11，Met8，Asn10，His14，Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ser1，Ile5，Met8，Asn10，Leu11，23，28，31，His14，Cha15，Glu22，25，Lys26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Ahc23，Glu25，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Ahc23，Aib25，29，Lys26，30，Leu28， 31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，30，Ahc29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Ahc24，Glu25， Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Ahc24，27，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Ahc24， 27，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，27，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Aib25，29，Lys26，30， Ahc27]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，27，Leu23，28，31，，Aib25，29，Lys26，30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，27，Lys25，26，30，Aib29]hPTHrP 1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Ahc24， 27，Lys25，26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Ahc24，27，Lys25，26，30，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Ahc24，27，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Ahc24，27，Lys25，26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，27，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Ahc24，27，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha22，Ahc24，27，Lys25，26，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Ahc24，27，Lys25，26，Leu28，Aib29]hPTHrP 1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Lys25，26，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Lys25，26，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Lys25，26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Lys25，26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Ahc24，Lys25，26，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Aib29，Ahc30]hPTHrP(1-34)NH2；[Aib22，29，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Ahc23，Glu25，29，Lys26，30，Leu28，31]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Ahc24，Glu25，29，Lys26，30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Glu25，29，Lys26，30，Ahc27]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，31，Glu25，29，Lys26，30，Ahc28]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Glu25，29，Lys26，Ahc30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，Glu25，29，Lys26，30，Ahc31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，29，Ahc23，Aib25，Lys26，30，Leu28，31]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Leu23，28，31，Aib25，Lys26，30，Glu29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，29，Leu23，28，31，Ahc24，Aib25，Lys26，30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，29，Leu23，31，Aib25，Lys26，30，Ahc28]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，29，Leu23，28，Aib25，Lys26，30，Ahc31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，29，Leu23，28，31，Aib25，Lys26，Ahc30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，31，Lys26，Ahc27，Aib30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，31，Ahc24，Lys26，Aib30]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Leu23，28，31，Glu25，29，Lys26，Aib30]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Leu23，28，Glu25，29，Lys26，30，31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，Lys26，31，Ahc30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，Lys26，30，31，Ahc27]hPTHrP(1-34) NH2；[Ahc22，Cha23，Glu25，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Cha23，Lys25，26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Cha23，Lys25，26，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Leu23，28，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Leu23，28，Arg25，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，Leu23，28，31，Lys25，26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，Leu23，28，31，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，Leu23，28，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，Leu23，28，Arg25，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，Lys25，26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Ahc24，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，Arg25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，Arg25，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Ahc24，Arg25，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Ahc23，Aib25，29，Lys26，30，Leu28，31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Ahc23，Aib25，29，Lys26，Leu28]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Ahc23，31，Aib25，29，Lys26，Leu28]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Aib25，29，Lys26，30，Ahc31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Aib25，29，Lys26，Ahc31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，Ahc24，31，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；or[Glu22，Leu23，28，Ahc24，31，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，Aib25，29，Lys26，30]hPTHrP(1-34)NH2；
本發(fā)明的特征還在于具有下式的肽或其藥物可接受的鹽[Cha22，23，Glu25，Lys26，30，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，23，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Aib29，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，30，31，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，30，31，Lys26]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，31，Lys26，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Ser1，Ile5，Met8，Asn10，Leu11，23，28，31，His14，Cha15，Glu22，25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，Leu28，31，Aib29，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，23，Glu25，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Glu25，29，Lys26，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha7，11，15]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha7，8，115]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Aib25，29，Lys26，30，Leu28，31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Aib25，29，Lys26，Leu28]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Aib25，29，Lys26]hPTHrP(1-34)NH2；[Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[G1u22，25，Cha23，Lys26，Leu28，31，Aib29，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，30，Aib29，Leu31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Aib29，30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Aib26，29，Lys30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[G1u22，25，Cha23，Lys26，30，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；or[Leu27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；
除了N末端氨基酸外，本文中所有氨基酸縮寫(如Ala或A1)代表-NH-CH(R)-CO-結(jié)構(gòu)，其中R是氨基酸側(cè)鏈(如Alaa的CH3)。至于N末端氨基酸，縮寫表示＝N-CH(R)-CO-結(jié)構(gòu)，其中R是氨基酸側(cè)鏈。β-Nal，Nle，Dap，Cha，Nva，Amp，Pal，Ahc和Aib分別是下列氨基酸的縮寫β-(2-萘基)丙氨酸，正亮氨酸，α，β-二氨基丙酸，環(huán)己基丙氨酸，正纈氨酸，4-氨基-苯基丙氨酸，β-(3-吡啶基(pyridinyl))丙氨酸，1-氨基-1-環(huán)-己烷羧酸和α-氨基異丁酸。Acc指的是選自下列的氨基酸；1-氨基-1-環(huán)-丙烷羧酸；1-氨基-1-環(huán)-丁烷羧酸；1-氨基-1-環(huán)-戊烷羧酸；1-氨基-1-環(huán)-己烷羧酸；1-氨基-1-環(huán)-庚烷羧酸；1-氨基-1-環(huán)-辛烷羧酸；和1-氨基-1-環(huán)-壬烷羧酸。在上述式中，羥基烷基，羥基苯基烷基和羥基萘基烷基可含有1-4個羥基取代基。COE1也代表-C＝O·E1，-C＝O·E1的例子包括但不限于乙?；捅交；?。
在本文中，本發(fā)明的肽也可由其它式表示，如[Ahc7，11]hPTH(1-34)NH2，方括號中為得自天然序列的取代氨基酸(如Ahc7取代hPTH中的Leu7，Ahc11取代hPTH中的Leu11)?？s寫hPTH表示人PTH，hPTHrP表示人PTHrP，rPTH表示大鼠PTH，bPTH表示牛PTH。括弧中的數(shù)字表示肽中存在的氨基酸數(shù)目(如hPTH(1-34)指的是人PTH肽序列的氨基酸1至34)。hPTH(1-34)，hPTHrP(1-34)，bPTH(1-34)和rPTH(1-34)列于Nissenson等，受體，3193(1993)。PTH(1-34)NH2中的“NH2”表示肽的C端為酰胺化的。另一方面，PTH(1-34)具有游離的酸性C末端。
本發(fā)明的各個肽能刺激受試者(即如人患者的哺乳動物)骨的生長，因此，當(dāng)單獨使用或與抗吸收療法，如二膦酸酯和降鈣素同時使用時，可治療骨質(zhì)疏松和骨折。
可以藥物可接受的鹽的形式提供本發(fā)明的肽。所述鹽的例子包括但不限于用有機(jī)酸(如乙酸，乳酸，馬來酸，檸檬酸，蘋果酸，抗壞血酸，琥珀酸，苯甲酸，甲磺酸，甲苯磺酸或撲酸)，無機(jī)酸(如鹽酸，硫酸或磷酸)和聚合酸(如鞣酸，羧甲基纖維素，聚乳酸，聚乙醇酸或聚乳酸-乙醇酸共聚物)。
治療有效量的本發(fā)明的肽和藥物可接受的載體物質(zhì)(如使治療化合物形成膠態(tài)分子團(tuán)的碳酸鎂，乳糖或磷脂)合在一起形成了治療組合物(如丸劑，片劑，膠囊或液體)以(通過口服，靜脈內(nèi)，經(jīng)皮，肺內(nèi)，陰道內(nèi)，皮下，鼻內(nèi)，離子電滲或經(jīng)氣管)施用于受試者?？诜┯玫耐鑴?，片劑或膠囊可被保護(hù)性物質(zhì)包被，所述物質(zhì)可保護(hù)活性組合物使其與胃中的胃酸或腸酶隔開一段時間，所述時間足以使活性組合物不經(jīng)消化地進(jìn)入小腸。治療組合物也可以是供皮下或肌內(nèi)使用的生物降解型或非生物降解型緩釋制劑形式。例見美國專利3,773,919和4,767,628和PCT申請WO94/15587。使用可植入的或外部泵(如INFUSAIDTM泵)也可做到連續(xù)給藥?？芍芷谛缘?，如每天注射一次，或以低劑量，如緩釋制劑連續(xù)地進(jìn)行給藥。
用于治療上述疾病或障礙的本發(fā)明肽的劑量隨給藥的方式，受試者的年齡和體重，需治療的受試者的身體狀況的不同而變化，最終由主治醫(yī)師或獸醫(yī)決定該劑量。
本發(fā)明范圍內(nèi)還包括由上述通式覆蓋的肽，所述肽可用于治療與骨生長缺陷等相關(guān)的疾病或障礙，如骨質(zhì)疏松或骨折。
鑒于詳細(xì)描述和權(quán)利要求書，本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點將是顯而易見的。
發(fā)明詳述基于本文的描述，可最大程度地利用了本發(fā)明。下列具體的實施例只是為了闡明，而不是在任何程度上以任何方式限制其余的公開內(nèi)容。另外，本文所提及的所有出版物都通過參考文獻(xiàn)并入本發(fā)明。
結(jié)構(gòu)據(jù)報道PTH(1-34)和PTHrP(1-34)具有兩個兩親性α螺旋區(qū)域，例見Barden等，生物化學(xué)，327126(1992)。第一個α螺旋在氨基酸殘基4至13之間形成，而第二個α螺旋在氨基酸殘基21至29之間形成。本發(fā)明的一些肽含有PTH(1-34)和PTHrP(1-34)這兩個區(qū)域內(nèi)或附近的一個或多個殘基的Acc取代，如第一個α螺旋內(nèi)的Ahc7和Ahc11或第二個α螺旋內(nèi)的Ahc27和Ahc28。
合成通過標(biāo)準(zhǔn)的固相合成法可制備本發(fā)明的肽，例見Stewart，J.M.等，固相合成(Pierce Chemical公司，第2版。1984)。下文描述的是如何制備[Glu22，25，Leu23，28，Lys26，30，Aib29，Ahc31]hPTH(1-34)NH2。本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)類似的方法制備本發(fā)明的其它肽。
按下述合成1-[N-叔丁氧基羰基-氨基]-1-環(huán)己烷-羧酸(Boc-Ahc-OH)將19.1g(0.133mol)1-氨基-1-環(huán)己烷羧酸(Acros Organics，F(xiàn)isher Scientific，Pittsburgh，PA)溶解于200ml二惡烷和100ml水中，在其中加入67mg2NNaOH。在冰水浴中冷卻溶液，在此溶液中加入32.0g(0.147mol)二-叔丁基-碳酸氫鹽，室溫下攪拌反應(yīng)混合物過夜，然后減壓除去二惡烷，在剩下的水溶液中加入200ml乙酸乙酯，在冰水浴中冷卻混合物。加入4NHCl將水層的pH調(diào)節(jié)為3左右，分離有機(jī)層，用乙酸乙酯提取水層(1×100ml)?；旌蟽蓚€有機(jī)層并用水洗滌(2×150ml)，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮至干。將殘留物在乙酸乙酯/己烷中重結(jié)晶，得到9.2g純產(chǎn)物，產(chǎn)率為29％。本領(lǐng)域技術(shù)人員通過類似的方法可制備其它被保護(hù)的Acc氨基酸。
在Applied Biosystems(Foster Citv，CA)430A型肽合成儀上合成肽，所述合成儀經(jīng)修飾可加速Boc-化學(xué)固相肽合成，例見Schmoize等，國際肽蛋白質(zhì)研究雜志，90180(1992)。使用具有0.93mmol/g取代物的4-甲基二苯甲基胺(MBHA)樹脂(Peninsula，Belmont，CA)，使用具有下列側(cè)鏈保護(hù)的Boc氨基酸(Bachem，CA，Torrance，CA；Nova Biochem.，LaJolla，CA)Boc-Ala-OH，Boc-Arg(Tos)-OH，Boc-Asp(OcHex)-OH，Boc-Glu(OcHex)-OH，Boc-His(DNP)-OH，Boc-Val-OH，Boc-Leu-OH，Boc-Gly-OH，Boc-Gln-OH，Boc-Ile-OH，Boc-Lys(2ClZ)-OH，Boc-Ahc-OH，Boc-Thr(Bzl)-OH，Boc-Ser(Bzl)-OH；和Boc-Aib-OH。以0.14mmol的規(guī)模進(jìn)行合成。通過用100％TFA處理2×1分鐘以除去Boc基團(tuán)，用溶于4ml DMF中的HBTU(2.0mmol)和DIEA(1.0ml)預(yù)活化Boc氨基酸(2.5mmol)，無需先中和肽-樹脂TFA鹽即可進(jìn)行偶聯(lián)。除了Boc-Aib-OH及其追隨殘基Boc-Leu-OH，和Boc-Ahc-OH及其追隨殘基Boc-Lys(2Clz)-OH外，偶聯(lián)時間為5分鐘，其中這4個殘基的偶聯(lián)時間為2小時。
肽鏈裝配結(jié)束時，用DMF中的20％巰基乙醇/10％DIEA溶液處理樹脂2×30分鐘以除去His側(cè)鏈上的DNP基團(tuán)。然后通過用100％TFA處理2×2分鐘以除去N末端的Boc基團(tuán)。用DMF和DCM洗滌部分脫保護(hù)的肽-樹脂，并減壓干燥。通過于0℃，10ml含有1ml苯甲醚和二硫蘇糖醇(24mg)的HF中將肽-樹脂攪拌75分鐘進(jìn)行最終的裂解。通入氮氣以除去HF，用乙酯(6×10ml)洗滌殘留物并用4N HOAc(6×10ml)提取。
在使用反相VydacTMC18柱(Nest Group，Southborough，MA)的反相制備性高壓液相層析(HPLC)中純化含水提取物中的肽混合物。以10ml/min的流速(溶液A＝0.1％TFA水溶液；溶液B＝含0.1％TFA的乙腈)，用線性梯度(10％至45％的溶液B，130分鐘)洗脫柱。收集級分并在分析性的HPLC上檢查?；旌虾屑儺a(chǎn)物的級分并冷凍至干，得到85mg白色固體，基于分析性HPLC的分析，純度＞99％。電噴射質(zhì)譜儀分析給出分子量為3972.4(與計算出的分子量3972.7相符)。
按與上文[Glu22，25，Leu23，28，Lys26，30，Aib29，Ahc31]hPTHrP(1-34)NH2合成相同的方式合成和純化[Gha22，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2。被保護(hù)的氨基酸Boc-Cha-OH購自Bachem，CA。終產(chǎn)物的純度＞99％，電噴射質(zhì)譜儀分析給出分子量為3997.2(計算出的分子量為3996.8)。
上文所用縮寫的全稱如下Boc為叔丁基羰基，HF為氟化氫，F(xiàn)m為甲?；?，Xan為占噸基，Bzl為芐基，Tos為甲苯磺酰基，DNP為2，4-二硝基苯基，DMF為二甲基甲酰胺，DCM為二氯甲烷，HBTU為2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸，DIFA為二異丙基乙胺，HOAc為乙酸，TFA為三氟乙酸，2ClZ為2-氯芐氧基羰基，OcHex為O-環(huán)己基。
通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法，上述通式中的取代基R1和R2可與N末端氨基酸的游離胺結(jié)合，例如使用還原烷基化可結(jié)合烷基基團(tuán)，如C1-12烷基。使用還原烷基化也可結(jié)合羥基烷基基團(tuán)，如C1-12羥基烷基，其中游離的羥基基團(tuán)被叔丁基酯保護(hù)。通過在二氯甲烷中將完全樹脂與3摩爾當(dāng)量的游離酸和二異丙基碳二亞胺混合1小時，經(jīng)過上述洗滌程序中的步驟(a)至(f)循環(huán)所得樹脂，以將游離的酸，如E1COOH與N末端氨基酸游離的胺偶聯(lián)，從而結(jié)合如COE1的酰基基團(tuán)。如果游離的酸含有游離的羥基基團(tuán)，如p-羥基苯基丙酸，則用額外的3摩爾當(dāng)量的HOBT進(jìn)行偶聯(lián)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可以類似的方式制備本發(fā)明的其它肽。
功能測定A.與PTH受體結(jié)合檢測本發(fā)明的肽與SaOS-2(人骨癌細(xì)胞)上存在的PTH受體結(jié)合的能力。于37℃，含5％二氧化碳的潮濕氣氛中，用添加有10％胎牛血清(FBS)和2mM谷氨酰胺的RPMI 1640培養(yǎng)基(Sigma，St.Louis，MO)維持SaOS-2細(xì)胞(美國典型培養(yǎng)物保藏中心，Rockville，MD；ATCC#HTB 85)，每隔3或4天換一次培養(yǎng)基，每周通過胰蛋白酶消化傳代培養(yǎng)細(xì)胞。
將SaOS-2細(xì)胞培養(yǎng)4天直至細(xì)胞長至鋪滿，用含5％FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基替代培養(yǎng)基，室溫下，在10-11至10-4M多種濃度的本發(fā)明的競爭性肽存在時，與10×104cpm單-125I-[Nle8，18，Tyr34(3-125I)]bPTH(1-34)NH2一起保溫2小時。用冰冷的PBS將細(xì)胞洗滌4次，用0.1M氫氧化鈉裂解細(xì)胞，在閃爍計數(shù)器中計數(shù)與細(xì)胞結(jié)合的放射性。按Goldman，M.E等，內(nèi)分泌學(xué)，1231468(1988)所述進(jìn)行單-125I-[Nle8，18，Tyr34(3-125I)]bPTH(1-34)NH2的合成。
用本發(fā)明的多個肽進(jìn)行結(jié)合試驗，計算各個肽的kd值(對單-125I-[Nle8，18，Tyr34(3-125I)]bPTH(1-34)NH2結(jié)合的50％最大抑制作用)。
如表I所示，所有被檢測的肽對SaOS-2細(xì)胞上的PTH受體都具有高結(jié)合親和性。
B.刺激腺苷酸環(huán)化酶活性測定本發(fā)明的肽誘導(dǎo)SaOS-2細(xì)胞中的生物學(xué)反應(yīng)的能力。具體地說，通過按Rodan等，J.Clin.Invest.721511(1983)和Goldman等，內(nèi)分泌學(xué)，1231468(1988)所述測定cAMP(腺苷3’，5’-一磷酸)合成的水平以確定腺苷酸環(huán)化酶的任何刺激。于37℃，在新鮮培養(yǎng)基中將24孔培養(yǎng)板中鋪滿的SAOS-2細(xì)胞與0.5u Ci[3H]腺苷(26.9Ci/mmol，New England Nuclear，Boston，MA)一起保溫2小時，用Hank’s平衡鹽溶液(Gibco，Gaithersburg，MD)洗滌2次。用含1mMIBMX[異丁基甲基-黃嘌呤，Sigma，St.Louis，MO]的新鮮培養(yǎng)基處理細(xì)胞15分鐘，在培養(yǎng)基中加入本發(fā)明的肽保溫5分鐘，加入1.2M三氯醋酸(TCA)(Sigma，St.Louis，MO)以終止反應(yīng)，接著用4N KOH中和樣品。通過兩柱層析法(Salmon等，1974，分析生物化學(xué)，58，541)分離cAMP，用閃爍計數(shù)器(液體閃爍計數(shù)器2200CA，PACKARD，Downers Grove，IL)計數(shù)放射性。
計算被檢測肽各自的EC50值(腺苷酸環(huán)化酶的50％最大刺激)，結(jié)果示于表I。發(fā)現(xiàn)所有被檢測的肽都是腺苷酸環(huán)化酶活性強(qiáng)有力的刺激物，所述活性是表示成骨細(xì)胞增殖(如骨生長)的最接近的信號。
表
其它實施方案應(yīng)理解盡管結(jié)合詳細(xì)的說明書描述了本發(fā)明，但前述說明書只是為了闡明而不是限制由所附權(quán)利要求書之范圍限定的本發(fā)明的范圍。其它方面，優(yōu)點和修飾包含在權(quán)利要求書中。
權(quán)利要求
1.具有下式的肽及其藥物可接受的鹽
A16-A17-A18-A19-Arg-A21-A22-A23-A24-Arg-Lys-A27-A28-A29-A30-A31-A32-A33-A34-R3，其中A1是Ser，A1a， 或Dap；A3是Ser，Thr， 或Aib；A5是Leu，Nle，Nle，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe或 p-X-Phe，其中X是OH，鹵素，或CH3；A7是Leu，Nle，Ile，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe，或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A8是Met，Nva，Leu，Val，Ile，Cha，Acc，或Nle；A11是Leu，Nle，Ile，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A12是Gly，Acc，或Aib；A15是Leu，Nle，Ile，Cha，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe，或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A16是Ser，Asn，Ala，或Aib；A17是Ser，Thr，或Aib；A18是Met，Nva，Leu，Val，Ile，Nle，Acc，Cha，或Aib；A19是Glu或Aib；A21是Val，Acc，Cha，或Met；A22是Acc或Glu；A23是Trp，Acc，或Cha；A24是Leu，Acc，或Cha；A27是Lys，Aib，Leu，hArg，Gln，Acc，或Cha；A28是Leu，Acc，或Cha；A29是Glu，Acc，或Aib；A30是Asp或Lys；A31是Val，Leu，Nle，Acc，cha 或缺失；A32是His或缺失；A33是Asn或缺失；A34是phe，Tyr，Amp，Aib，或缺失；Rl和R2分別獨立地為H，C1-12烷基，C2-12鏈烯基，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；或Rl和R2中的一個和僅有一個是COE1，其中E1是C1-12烷基，C2-12鏈烯基，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；和R3是OH，NH2，C1-12烷氧基，或NH-Y-CH2-Z，其中Y是C1 -12烴部分，Z是H，OH，CO2H或CONH2；條件是A5，A7，A8，A11，A12，A15，A18，A21，A22，A23，A24，A27，A28，A29，和A31中的至少一個是Acc。
2.權(quán)利要求1的肽或其藥物可接受的鹽，其中A3是Ser；A5是Ile或Acc；A7是Leu，Acc，或cha；A8是Acc，Met，Nva，Leu，Val，Ile，或Nle；A11是Leu，Acc，或cha；A12是Acc或Gly；A15是Leu，Acc，或cha；A16是Asn或Aib；A17是Ser；A18是Acc，Met，或Nle；A21是Val或Acc；A27是Lyg，hArg，Acc，或cha；A29是Glu或Aib；A31是Val，Leu，Nle，Acc，或cha；A32是His；A33是Asn；A34是Phe，Tyr，Amp，或Aib。
3.權(quán)利要求2的肽或其藥物可接受的鹽，其中A5是Ile或Ahc；A7是Leu，Ahc，或Cha；A8是Ahc，Met，或Nle；A11是Leu，Ahc，或Cha；A12是Ahc或Gly；A15是Leu，Ahc，或Cha；A18是Met或Ahc；A21是Val或Ahc；A22是Glu或Ahc；A23是Trp，Ahc，或Cha；A24是Leu，Ahc，或Cha；A27是Lys，hArg，Ahc，或Cha；A28是Leu，Ahc，或Cha；A29是Glu，Ahc，或Aib；A31是Val，Leu，Nle，Ahc，或Cha；R1是H；R2是H；和R3是NH2；
4.權(quán)利要求3的肽，其中A7，A11，A15，A23，A24，A27，A28或A31中的至少一個是Cha。
5.權(quán)利要求3的肽，其中A16，A17，A19，A29或A34中的至少一個是Aib。
6.權(quán)利要求1的肽或其藥物可接受的鹽，其中所述肽為[Ahc7，11]hPTH(1-34)NH2；[Ahc7，11，Nle8，18，Tyr34]hPTH(1-34)NH2；[Ahc11]hPTH(1-34)NH2；[Ahc7，11，15]hPTH(1-34)NH2；[Ahc7]hPTH(1-34)NH2；[Ahc23]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24]hPTH(1-34)NH2；[Nle8，18，Ahc27]hPTH(1-34)NH2；[Ahc28]hPTH(1-34)NH2；[Ahc31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，28，31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，28，31，，Lys30]hPTH(1-34)NH2；[Ahc28，31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc15]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27，Aib29，Lys30]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27，Aib29，Lys30，Leu31]hPTH(1-34)NH2；[Ahc5]hPTH(1-34)NH2；[Ahc12]hPTH(1-34)NH2；[Ahc27]hPTH(1-34)NH2；[Ahc29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc18]hPTH(1-34)NH2；[Ahc8]hPTH(1-34)NH2；[Ahc18，27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；或[Ahc18，24，27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc22，Leu27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc24，Leu27，Aib29]hPTH(1-34)NH2；[Ahc22]hPTH(1-34)NH2；[Ahc22，Aib29]hPTH(1-34)NH2。
7.具有下式的肽及其藥物可接受的鹽
A16-A17-A18-A19-Arg-Arg-A22-A23-A24-A25-A26-A27-A28-A29-A30-A31A32-A33-A34-R3其中A1是Ala，Ser，或Dap；A3是Ser或Aib；A5是His，Ile，Acc，或 Cha；A7是Leu，Cha，Nle，β-Nal，Trp，Pal，Acc，Phe，或p-X-Phe其中X是OH，鹵素，或CH3；A8是Leu，Met，Acc，或Cha；A10是Asp或Asn；A11是Lys，Leu，Cha，Acc，Phe，或β-Nal；A12是Gly，Acc，或Aib；A14是Ser或His；A15是Ile，Acc，或Cha；A16是Gln或Aib；A17是Asp或Aib；A18是Leu，Aib，Acc，或Cha；A19是Arg或Aib；A22是Phe，Glu，Aib，Acc，或Cha；A23是Phe，Leu，Lys，Acc，或Cha；A24是Leu，Lys，Acc，或Cha；A25是His，Lys，Aib，Acc，或Glu；A26是His，Aib，Acc，或Lys；A27是Leu，Lys，Acc，或Cha；A28是Ile，Leu，Lys，Acc，或Cha；A29是Ala，Glu，Acc，或Aib；A30是Glu，Leu，Nle，Cha，Aib，Acc，或Lys；A31是Ile，Leu，Cha，Lys，Acc，或缺失；A32是His或 缺失；A33是Thr或缺失；A34是Ala或缺失；R1和R2分別獨立地為H，C1-12鏈烷烴基，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；或R1和R2中的一個和僅有一個是COE1，其中E1是C1-12烷基，C2-12烷基，C2-12鏈烯基，C7-20苯基烷基，C11-20萘基烷基，C1-12羥基烷基，C2-12羥基鏈烯基，C7-20羥基苯基烷基或C11-20羥基萘基烷基；和R3是OH，NH2，C1-12烷氧基，或NH-Y-CH2-Z，其中Y是C1-12烴部分，Z是H，OH，CO2H或CONH2；條件是A5，A7，A8，A11，A12，A15，A18，A22，A23，A24，A25，A26，A27，A28，A29，A30，或A31中的至少一個是Acc。
8.權(quán)利要求7的肽及其藥物可接受的鹽，其中A1是Ala；A3是Ser；A5是His或Acc；A7是Leu或Acc；A8是Leu或Acc；A10是Asp；A11是Lys或Acc；A12是Gly或Acc；A14是Ser；A15是Ile或Acc；A16是Gln；A17是Asp；A18是Leu或Acc；和A19是Arg。
9.權(quán)利要求8的肽及其藥物可接受的鹽，其中A22是Glu，Aib，Acc，或Cha；A23是Leu，Acc，或Cha；A24是Leu，Acc，或Cha；A25是Aib，Lys，或Glu；A26是Aib或Lys；A27是Leu，Acc，或Cha；A28是Ile，Leu，Acc，或Cha；A31是Leu，Ile，Cha，或Acc；A32是His；A33是Thr；和A34是Ala。
10.權(quán)利要求9的化合物及其藥物可接受的鹽，其中A5是His或Ahc；A7是Leu或Ahc；A8是Leu或Ahc；A11是Lys或Ahc；A12是Gly或Ahc；A15是Ile或Ahc；和A18是Leu或Ahc。
11.權(quán)利要求10的肽及其藥物可接受的鹽，其中A22是Glu，Aib，Ahc，或Cha；A23是Leu，Ahc，或Cha；A24是Leu，Ahc，或Cha；A27是Leu，Ahc，或Cha；A28是Ile，Leu，Ahc，或Cha；A29是Ala，Ahc，Aib，或Glu；A30是Cha，Aib，Leu，Nle，Glu，Ahc，或Lys；或A31是Leu，Ile，Cha，或Ahc。
12.權(quán)利要求11的肽，其中A22，A23，A24，A27，A28或A31中的至少一個是Cha。
13.權(quán)利要求11的肽，其中A22，A25，A26，A29或A30中的至少一個是Aib。
14.權(quán)利要求7的肽或其藥物可接受的鹽，其中所述肽為[Glu22，25，Leu23，28，Lys26，30，Aib29，Ahc31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Ahc23，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，27，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，31，Lys26，Ahc30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Ahc27，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Ahc24，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，29，Leu23，28，31，Aib25，Lys26，30，Ahc27]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Aib25，29，Lys26，30，Ahc27]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，31，Lys26，30，Ahc28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Ahc23，Glu25，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc22，24，27，Leu23，28，31，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Ahc24，27，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，31，Ahc24，27，Lys25，26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Ahc18，24，27，Glu22，Cha23，Lys25，26，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Ahc24，Lys25，26，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2。
15.具有下式的肽或其藥物可接受的鹽[Cha22，23，Glu25，Lys26，30，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，23，Glu25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Aib29，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，30，31，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，30，31，Lys26]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，29，Leu23，28，31，Lys26，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Ser1，Ile5，Met8，Asn10，Leu11， 23，28，31，His14，Cha15，Glu22，25，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，Leu28，32，Aib29，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，23，Glu25，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha22，Leu23，28，31，Glu25，29，Lys26，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha7，11，15]hPTHrP(1-34)NH2；[Cha7，8，15]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Aib25，29，Lys26，30，Leu28，31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Cha23，Aib25，29，Lys26，Leu28]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，Leu23，28，Aib25，29，Lys26]hPTHrP(1-34)NH2；[Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，Leu28，31，Aib29，Nle30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，30，Aib29，Leu31]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Aib29，30，]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Leu23，28，31，Lys26，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Lau23，28，31，Aib26，29，Lys30]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，30，Leu28，31，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，30，Aib29]hPTHrP(1-34)NH2；[Glu22，25，Cha23，Lys26，30，Leu28，Aib29]hPTHrP(1-，34)NH2；or[Leu27，Aib29]hPTH(1-34)NH2。
全文摘要
甲狀旁腺素(PTH)或甲狀旁腺素相關(guān)蛋白(PTHrP)之片斷的肽變體,其中至少一個氨基酸殘基被Acc取代。
文檔編號A61P5/18GK1254347SQ9718191
公開日2000年5月24日 申請日期1997年12月8日 優(yōu)先權(quán)日1997年1月7日
發(fā)明者董正欣 申請人:生物測量公司