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微分子胎活素復(fù)合物及其制取法和在化妝品中的應(yīng)用的制作方法

文檔序號:837603閱讀:519來源:國知局
專利名稱:微分子胎活素復(fù)合物及其制取法和在化妝品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種生物活性物質(zhì)及其制取法和在化妝品中的應(yīng)用,特別是涉及微分子胎活素復(fù)合物及其制取法和在化妝品中的應(yīng)用。
近十多年,國內(nèi)外許多學(xué)者從人胎盤中提取的一種非蛋白類小分子生物活性物質(zhì),具有很強的免疫活性,并被命名為胎盤免疫調(diào)節(jié)因子(PF)。近年的研究發(fā)現(xiàn),PF具有顯著雙向免疫調(diào)節(jié)、抗病毒、抗腫瘤及抗衰老作用,被臨床用于治療各種病毒感染性疾病(特別是反復(fù)感染)如病毒性肝炎、脊髓灰質(zhì)炎、皰疹病毒性皮膚病、惡性腫瘤、自身免疫性疾病及其免疫功能低下性疾病等,取得了顯著療效。
近年,我國著名生物技術(shù)專家吳祖澤教授發(fā)現(xiàn),從人胚胎組織中提取的小分子生物活性物質(zhì)具有顯著的抗癌作用和免疫調(diào)節(jié)作用,并命名為低分子抑瘤物[見吳祖澤,人胎肝細胞分泌的低分子抑瘤物對白血病細胞的抑制作用,中國應(yīng)用生理學(xué)雜志1993;(1)20-24]。中國專利93115199亦提出人早期胚胎因子具有很強的殺癌力和免疫增強作用。但他們的研究僅限于醫(yī)療及制藥方面。
本發(fā)明人用類似于PF的檢查方法發(fā)現(xiàn)人胚胎和胎盤的提取物中具有高效非蛋白類小分子生物活性物質(zhì),并將其命名為微分子胎活素(Micro-molecular Embryo Active Factor),即MEAF,胎肝MEAF和胎盤MEAF中含有非常豐富的肽類、核苷酸、各種細胞生長因子及多種維生素等,但免疫調(diào)節(jié)因子相對較少。迄今為止,尚未見有關(guān)微分子胎活素復(fù)合物及類似復(fù)合物的報道。
用常規(guī)方法制取微分子胎活素的步驟如下一、選擇健康足月的產(chǎn)兒胎盤和胎肝和從人胚胎中取出的心臟、胸腺、脾臟及腎臟作原料,要求新鮮干凈,30℃以下室溫放置不超過8小時。二、產(chǎn)婦檢查,肝功能正常,HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體檢查均應(yīng)為陰性。三、用蒸餾水沖洗胎盤,剪去筋膜,稱重、剪碎,加入等量的無菌蒸餾水、用高速組織搗碎機搗碎、勻漿。四、將勻漿低溫離心后裝入透析袋進行透析(透析液為生理鹽水或無菌蒸餾水)。該方法的不足在于獲取的產(chǎn)量偏低且低溫離心需較昂貴的設(shè)備并增加了污染的機會。
在化妝品領(lǐng)域中,傳統(tǒng)護膚化妝品多為化學(xué)合成品,常含有各種化學(xué)物質(zhì)如漂白劑氫醌、汞、鋁及其它重金屬、香料、激素、維生素等,長期使用具有明顯的細胞毒性,令皮膚提早老化;或含有大分子活性物質(zhì)(蛋白質(zhì))、動植物油脂、凡士林等,不易被皮膚表皮細胞吸收,影響細胞的呼吸與生長,甚至引起各種化妝品皮膚病(如接觸性皮炎、過敏性皮炎等)。因此,現(xiàn)代生物高技術(shù)使新型化妝品原料替代一些副作用大而且有害的合成化妝品成為一種必然。生物技術(shù)化妝品的誕生,越來越受到消費者的青睞,大有取代傳統(tǒng)化妝品和化學(xué)化妝品的趨勢,成為第三代化妝品。然而這些含有生物活性物質(zhì)(如EGF、IL-2、AHA、透明質(zhì)酸、皮膚生長素、酵素、中草藥提取物及其它動植物提取物等)的生物技術(shù)化妝品幾乎都要采用傳統(tǒng)化學(xué)性基質(zhì)成分制成膏霜類制品,常常室溫保存。經(jīng)生物學(xué)專家研究發(fā)現(xiàn),絕大部分生物活性物質(zhì)(生物技術(shù)產(chǎn)品)在化妝品的膏霜基質(zhì)中活性減弱或完全喪失活性;非低溫狀態(tài)下(低溫狀態(tài)指2-8℃),許多生物活性物質(zhì)的生物活性明顯減弱甚至完全喪失,而真正起作用的可能只是膏霜的基質(zhì)(保濕、潤滑)。部分生物技術(shù)化妝品中含異體(或異種)蛋白質(zhì)類生物高分子如膠原蛋白、彈性蛋白、金屬硫蛋白(MT)、IL-2、水解蛋白酶類等,這些高分子物質(zhì)很難經(jīng)皮膚吸收,很難發(fā)揮生物活性作用;或含有一些刺激性很強的小分子生物活性物質(zhì),如果酸(AHA)、曲酸、透明質(zhì)酸等,雖具有很好的近期美容效果,但遠期效果尚未可知。含有胎盤提取物的化妝品雖有上市,但由于均采用傳統(tǒng)化學(xué)性基質(zhì)成分制成膏霜類制品,因此美容效果受到限制。
本發(fā)明的目的之一是提供一種高純度、高效生物活性及使用高度安全的微分子胎活素復(fù)合物;目的之二是提供一種經(jīng)濟、高效并易于操作的制取該微分子胎活素復(fù)合物的制取方法;目的之三是提供將微分子胎活素復(fù)合物用于化妝品的應(yīng)用用途。
本發(fā)明的目的通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物主要由胎盤微分子胎活素和胚肝微分子胎活素與混合組織微分子胎活素復(fù)合而成,其主要成分的含量為(體積%)胎盤微分子胎活素 3-60胎肝微分子胎活素 95-5混合組織微分子胎活素 2-35上述主要成分的分子量均小于6000道爾頓,所述混合組織微分子胎活素是由從人胚胎中取出的心臟、胸腺、脾臟及腎臟的混合組織中提取而成。
本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物通過如下方法制取;一、選取合格人胎盤、胎肝和從人胚胎取出的心臟、胸腺、脾臟及腎臟作原料,即選擇健康足月產(chǎn)兒胎盤,要求新鮮干凈,30℃以下室溫放置不超過8小時。選擇計劃生育水囊引產(chǎn)的健康胎兒,胎齡為4-8個月。二、產(chǎn)婦肝功檢查、HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體檢查,即產(chǎn)婦檢查肝功能正常,其余抗體檢查均應(yīng)為陰性。三、將胎盤和胎肝及從人胚胎中取出的心臟、胸腺、脾臟及腎臟清洗、稱重、剪碎、搗碎、勻漿,本發(fā)明的方法特征在于勻漿后直接將勻漿分別裝入裝有透析液的透析袋中進行透析而分別得到胎盤、胎肝和混合組織微分子胎活素,然后將上述三種微分子胎活素按下述比例(體積%)混合胎盤微分子胎活素3-60,胎肝微分子胎活素95-5,混合組織微分子胎活素2-35,即得到微分子胎活素復(fù)合物。
與常規(guī)方法不同的是,本發(fā)明所用透析液為0.5%的鹽水。
經(jīng)透析所得微分子胎活素復(fù)合物成品封裝于特制的無菌玻璃瓶內(nèi)。
本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物可用作美容化妝品。
本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物的主要成分為小分子肽類及核苷酸,并含有16種氨基酸(其中8種為人體必需氨基酸)、核糖、脫氧核糖及DNA、RNA、有機酸、無機微量元素、小分子細胞生長因子和多種維生素。其主要性質(zhì)和試驗結(jié)果如下(1)肽類含量1.0-15/ml;(2)核苷酸260nm有吸收峰(OD260/OD280);(3)分子量小于6000道爾頓;(4)PE值6.5-7.0;(5)微生物檢查(細菌培養(yǎng))陰性;(6)蛋白質(zhì)試驗陰性;(7)HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體檢查陰性;(8)動物毒性試驗小鼠腹腔注射MEAF0.5-1.5ml,觀察1-2周,小鼠仍健康,體重增加、局部無濃腫、結(jié)痂;(9)刺激試驗將MEAF滴入動物眼結(jié)膜,無紅腫、無充血現(xiàn)象;(10)過敏試驗陰性;(11)燈檢澄清、透明、無混濁沉淀及其它異物。
本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物的生物活性可保持1年以上,較耐熱,不含蛋白質(zhì),無過敏、無刺激、無毒副作用。
本發(fā)明在醫(yī)學(xué)美容方面的應(yīng)用主要體現(xiàn)在以下三個方面一、改善局部血液循環(huán)、恢復(fù)皮膚彈性。這是醫(yī)學(xué)美容中最重要的作用之一。本發(fā)明人的應(yīng)用試驗表明,MEAF不僅能提高機體的細胞免疫功能,而且還具有營養(yǎng)局部血管和神經(jīng),改善局部血液循環(huán)、軟化皮膚的作用。因MEAF中不含大分子的激素、酶和其它蛋白質(zhì),很容易經(jīng)皮膚和粘膜吸收,能迅速改善皮膚粘膜局部血液循環(huán),恢復(fù)皮膚彈性,不會引起皮膚過敏。二、營養(yǎng)皮膚、消除細皺紋MEAF中含有豐富的小分子生物活性物質(zhì),很容易被皮膚吸收,對皮膚有很強的營養(yǎng)作用,同時許多小分子物質(zhì)能改善局部血液循環(huán),刺激表皮細胞分化增生,膠原合成,促進皮膚新陳代謝,因此具有很好的抗皺、養(yǎng)顏作用。三、美白、潤膚、抗衰老本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物中含有許多美容抗衰老因子如多種天然保濕因子、小分子細胞生長因子、維生素及微量小分子酶和激素,同時還有豐富的免疫調(diào)節(jié)因子,這些小分子生物活性物質(zhì)具有較強生物催化作用,能明顯地改善皮膚組織的脂色素代謝、滋潤皮膚、增強皮膚的免疫功能,有紫外光防御作用及創(chuàng)傷的治療作用,局部皮膚的應(yīng)用,能使皮膚增白、柔嫩、紅潤、細滑,增加皮膚的彈性,消除皮膚的細小皺紋,堅持使用,能延緩衰老、永葆青春。
本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物由于是按一定的比例將胎盤MEAF、胎肝MEAF和混合組織MEAF復(fù)合而成,因此兼容了各成分的精華,具有更為有效的美容抗衰老作用。
本發(fā)明的制取方法既減少了低溫離心所需的昂貴設(shè)備、減少了污染的機會,又能增加產(chǎn)量。同時本發(fā)明所用透析液為0.5%的鹽水,既避免了生理鹽水中氯化鈉含量過高影響美容效果的缺點,又克服了純蒸餾水因滲透壓過低影響透析效果的不足。
本發(fā)明從制取方法到產(chǎn)品包裝及貯存均采用了先進的生物制品技術(shù),確保了產(chǎn)品的高純度(純天然性)、高效生物活性及使用的高度安全性。
下面給出
具體實施例方式一、本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物。
本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物主要由胎盤微分子胎活素、胎肝微分子胎活素及混合組織微分子胎活素復(fù)合而成,其最佳含量為(體積%)胎盤微分子胎活素 30胎肝微分子胎活素 50混合組織微分子胎活素 20,上述主要成分的分子量均小于6000道爾頓。所述混合組織胎活素是由從人胚胎中取出的心臟、胸腺、脾臟及腎臟的混合組織中提取而成。除上述主要成分外,復(fù)合物中加入微量防腐劑尼泊金甲酯0.04%(體積)。二、本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物的制取法。
(一)、胎盤MEAF的制取(1)、原料選擇健康足月的產(chǎn)兒胎盤,要求新鮮干凈,30℃以下室溫放置不超過8小時。(2)、產(chǎn)婦檢查、HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體檢查產(chǎn)婦檢查肝功能應(yīng)正??贵w檢查均應(yīng)為陰性。再留取胎盤血1ml,進一步檢查HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體,以防產(chǎn)婦漏檢。(3)、用蒸餾水沖洗胎盤,剪去筋膜,再用蒸餾水清洗3-4次,然后稱重、剪碎,加入等量的無菌蒸餾水、用高速組織搗碎機搗碎、勻漿,(4)、將組織勻漿分裝于無菌三角燒瓶內(nèi),每瓶不超過1000ml封口傾鈄置于冰柜內(nèi)過液凍結(jié),然后融化。反復(fù)凍結(jié)、融化2-3次。(5)將透析袋剪成1.5米長(可灌裝1kg原料),用清水浸泡、加洗滌劑輕柔灌洗,用自來水沖洗干凈后再用無菌蒸餾水清洗,常規(guī)高壓30分鐘消毒滅菌。(6)、將融化的組織勻漿直接灌裝于透析袋內(nèi)(約1kg),結(jié)扎兩端后用生理鹽水沖洗外壁,盛放在無菌燒杯內(nèi),加入0.5%鹽水400ml/kg,封口后置于4℃冰箱透析72小時。(7)、收集透析液,用試紙測PH值并調(diào)節(jié)至6.5-7.0,正壓超濾除菌,加入濃度為0.04%的尼泊金甲脂,用500ml的無菌三角燒瓶分裝,封口后置于4℃冰箱保存。
(二)、胎肝及混合組織MEAF的制取(1)、原料選擇計劃生育水囊引產(chǎn)的健康胎兒,胎齡為4-8個月,30℃以下低溫放置不超過8小時。(2)、產(chǎn)婦檢查,肝功能應(yīng)正常,HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體檢查均應(yīng)為陰性。(3)、用蒸餾水沖洗胚胎,洗凈體表的血跡,常規(guī)體表消毒后,經(jīng)胸腹切口取出肝臟、心臟、胸腺、脾臟及腎臟,留取胎血1ml進一步檢查HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體,以防產(chǎn)婦漏檢。(4)、分別將上述胚胎組織剪成碎片后放進250ml的燒瓶(其中肝臟放在一個瓶內(nèi),心臟、胸腺、脾臟及腎臟放在另一個瓶內(nèi)),然后放入低溫冰箱保存(-30℃以下)。(5)、解凍后,分別稱重,加入等量的0.5%的鹽水、用高速組織搗碎機搗碎、勻漿,每次一分鐘(間隔5分鐘用冰水冷浴),共四次。以下步驟同胎盤MEAF制取步驟的(4)-(7)。胎肝組織提取物為胎肝MEAF,心臟、胸腺、脾臟及腎臟組織混合提取物為混合組織MEAF。
三、本發(fā)明的微分子胎活素復(fù)合物的用途。
本發(fā)明可用作美容化妝品,具有十分明顯的美容抗衰老作用。
臨床初步應(yīng)用情況選擇自愿者51例進行試驗,男性15例,女性36例,年齡為23-46歲,平均29歲。用法用洗面奶清洗臉部皮膚后,直接用MEAF復(fù)合物(針劑型)涂擦面部皮膚,早晚各一次,每次0.5-1.0ml,30天為1個療程。以自身未用MEAF復(fù)合物前作為對照組。結(jié)果為經(jīng)試用1-2個療程后,粗糙、黑的皮膚變光滑、白嫩、細皺紋消失48例(94.1%),皮膚變紅潤柔軟47例(92.2%),面部有雀斑或黃褐斑5例, 顏色均明顯變淡。無一例出現(xiàn)任何毒副作用(包括接觸性皮炎或過敏性皮炎等)。結(jié)果表明,該生物活性物質(zhì)因含有豐富的多肽、核苷酸、氨基酸、核糖核酸、有機酸和無機微量元素等對人皮膚具有明顯的營養(yǎng)作用,同時能促進皮膚組織的代謝、顯著改善并增強面部皮膚的微循環(huán)和皮脂腺的功能,具有肯定的美容與抗衰老作用。
權(quán)利要求
1.一種微分子胎活素復(fù)合物,包括胎肝微分子胎活素和胚胎微分子胎活素,其特征在于它主要由上述兩種胎活素與混合組織微分子胎活素復(fù)合而成,其主要成分的含量為(體積%)胎盤微分子胎活素 3-60胎肝微分子胎活素 95-5混合組織微分子胎活素 2-35,上述主要成分的分子量小于6000道爾頓,所述混合組織微分子胎活素是由從人胚胎中取出的心臟、胸腺、脾臟及腎臟的混合組織中提取而成。
2.一種微分子胎活素復(fù)合物的制取法,包括(一)、選擇合格人胎盤和人胎肝及從人胚胎中取出的心臟、胸腺 脾臟及腎臟作原料,(二)、產(chǎn)婦肝功檢查,HBsAg、HCAb、梅毒抗體及HIV抗體檢查,(三)、分別將胎盤和胚胎清洗、稱重、剪碎、搗碎、勻漿,其特征在于勻漿后直接將勻漿分別裝入裝有透析液的透析袋中進行透析而分別得到胎盤、胎肝、和混合組織微分子胎活素,將上述三種微分子胎活素按下述比例(體積%)混合胎盤微分子胎活素3-60,胎肝微分子胎活素95-5,混合組織微分子胎活素2-35。
3.一種微分子胎活素復(fù)合物,其特征在于將其用作美容化妝品。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微分子胎活素復(fù)合物的制取法,其特征在于所述透析液為0.5%的鹽水。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的微分子胎活素復(fù)合物的制取法,其特征在于經(jīng)透析所得成品封裝于無菌玻璃瓶內(nèi)。
全文摘要
一種微分子胎活素復(fù)合物及其制取法和在化妝品中的應(yīng)用。該復(fù)合物主要由胎盤微分子胎活素、胎肝微分子胎活素與混合組織微分子胎活素復(fù)合而成。其制取法的特征是在勻漿后直接裝入裝有透析液的透析袋中透析而得。該復(fù)合物可用作美容化妝品。本發(fā)明從制取方法到產(chǎn)品及包裝和貯存均采用了先進的生物制品技術(shù),確保了產(chǎn)品的高純度、高效生物活性及使用的高度安全性。
文檔編號A61K35/48GK1181242SQ9611145
公開日1998年5月13日 申請日期1996年11月26日 優(yōu)先權(quán)日1996年11月26日
發(fā)明者吳成志 申請人:吳成志
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